内容正文:
一、选择题
1.在微生物学中,将允许特定种类的微生物生长,同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基称作( )
A.鉴别培养基 B.加富培养基
C.选择培养基 D.基础培养基
解析:选C。选择培养基可以允许特定种类的微生物生长,同时抑制或阻止其他种类的微生物生长,C符合题意。
2.下列关于稀释涂布平板法相关操作的叙述,错误的是( )
A.将涂布器末端浸在盛有体积分数为70%酒精的烧杯中消毒
B.涂布前取0.1 mL的菌液滴加到培养基表面
C.将蘸有少量酒精的涂布器在火焰上灼烧,待酒精燃尽即可进行涂布
D.用涂布器将菌液涂布在培养基表面时可转动培养皿使涂布均匀
解析:选C。将蘸有少量酒精的涂布器在火焰上灼烧,待酒精燃尽、涂布器冷却后再进行涂布,C错误。
3.(教材P20“概念检测”T2改编)用稀释涂布平板法来统计样品中的活菌数时,通过统计平板上的菌落数就能推测出样品中的活菌数。下列相关叙述正确的是( )
A.平板上的一个菌落就是一个细菌
B.样品中的每个活菌都能在平板上形成菌落
C.平板上的一个菌落一般来源于样品稀释液中的一个活菌
D.涂布了3个平板,统计的菌落数分别是21、212和256,取平均值163
解析:选C。菌落是指单个或少数细菌或真菌在固体培养基上大量繁殖时,形成的一个肉眼可见的,具有一定形态结构的子细胞群体,A错误;用稀释涂布平板法来统计样品中的活菌数时,需对样品进行梯度稀释,接种时也只取少部分样品稀释液接种,故只有样品中的部分活菌在平板上形成菌落,B错误;当样品的稀释度足够高时,培养基表面生长的一个单菌落,来源于样品稀释液中的一个活菌,通过统计平板上的菌落数,就能推测出样品中大约含有多少活菌,C正确;若3个平板的菌落数差异过大(如选项中21、212、256),说明存在操作错误(如涂布不均匀等),此类数据不可用于计算平均值,D错误。
4.下列关于分离与计数分解尿素的细菌和分解纤维素的微生物的叙述,错误的是( )
A.可根据菌落的形状、大小和颜色等形态特征对某些分解尿素和纤维素的微生物进行鉴定
B.刚果红染色法可直接筛选纤维素分解菌,菌落周围透明圈越大,则分解能力越弱
C.用以尿素为唯一氮源的培养基筛选分解尿素的细菌,再加入酚红指示剂进一步鉴定
D.每隔24 h统计一次菌落数目,选取菌落数目稳定时的记录作为结果
解析:选B。刚果红能与培养基中的纤维素形成红色复合物,当纤维素被纤维素分解菌分解后,刚果红—纤维素复合物就无法形成,培养基中会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈。故用刚果红染色法可直接筛选纤维素分解菌,菌落周围透明圈越大,其分解纤维素的能力越强,B错误。
5.(2025·广东茂名高二检测)下列关于选择培养基的叙述,错误的是( )
A.选择培养基可允许特定种类的微生物在其上生长
B.制备选择培养基时,应根据所选微生物的特点确定培养基的配方
C.筛选能分解尿素的细菌时,应以尿素作为唯一的氮源
D.与普通培养基相比,选择培养基上生长的微生物的数量一般较多
解析:选D。普通培养基可满足多数微生物的生长需求,而选择培养基上只能生长特定种类的微生物,因此与普通培养基相比,选择培养基上生长的微生物的数量一般较少,D错误。
6.(2025·河北石家庄高二期中)下列有关稀释涂布平板法计数和显微镜直接计数法计数的叙述,正确的是( )
A.为确保结果准确,对每个平板的菌落都要计数并取平均值
B.可以用血细胞计数板直接计数法检测大肠杆菌菌落的数量
C.两种方法均能在计数时观察到所研究微生物的形态特征
D.利用稀释涂布平板法对微生物计数所得的结果为活菌数
解析:选D。采用稀释涂布平板法时,为了保证结果准确,往往选取菌落数为30~300的平板进行计数,A错误;血细胞计数板直接计数微生物个体数,菌落数可通过肉眼直接计数,B错误;稀释涂布平板法观察到的是菌落的形态特征,而不是微生物的形态特征,显微镜直接计数法观察到的是微生物的形态特征,C错误;应用稀释涂布平板法对微生物进行计数,根据菌落数进行统计,死菌无法产生菌落,D正确。
7.(2025·江苏徐州高二期中)有些酵母可以利用工业废甲醇作为碳源进行培养,这样既可减少污染又可降低生产成本。研究人员拟从土壤样品中分离该类酵母,并进行大量培养。下图所示为操作流程:
有关叙述正确的是( )
A.在土壤取样、稀释土壤溶液等过程中,每一步都要在火焰旁操作
B.将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等进行消毒即可
C.步骤③中,将温度约80 ℃的培养基倒入培养皿混匀,冷凝后倒置培养
D.步骤④中,划线时应避免划破培养基表面,以免不能形成正常菌落
解析:选D。土壤取样的过程可以不用在火焰旁进行,A错误;用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等需进行灭菌处理,B错误;灭菌后,当感觉到锥形瓶的温度下降到刚刚不烫手时,就可以进行倒平板,一般温度在50 ℃左右,C错误;平板划线时,应避免划破培养基表面,以免不能形成正常的单个菌落,D正确。
8.下图是从土壤中分离能降解纤维素的微生物的实验过程流程图。下列有关叙述正确的是( )
A.该实验所用的牛肉膏蛋白胨培养基中一定要添加适量的纤维素
B.过程①不能提高所选微生物在培养物中的比例
C.纯化经过③培养后获得的单细胞菌落属于群落层次
D.④的操作是挑取单菌落进行菌种鉴定并及时在皿底做上标记
解析:选D。由于该实验需从土壤中分离能降解纤维素的微生物,故所用培养基应以纤维素为唯一碳源,A错误;过程①是用以纤维素为唯一碳源的培养基进行培养,可进一步提高能降解纤维素的微生物在培养物中的比例,B错误;纯化经过③培养后获得的单细胞菌落属于种群层次,C错误;④的操作是挑取单菌落进行菌种鉴定并及时在皿底做上标记,D正确。
9.(2025·广东湛江高二期中)瘤胃中的微生物多为厌氧菌,某实验小组欲从牛的瘤胃中分离出能分解尿素的微生物,下图表示筛选流程,甲、乙、丙均为培养基。下列说法错误的是( )
A.培养基上加石蜡的目的是隔绝外界的氧气
B.只有乙培养基上能形成肉眼可见的菌落
C.甲和丙培养基可以增大目的菌株的浓度
D.甲培养基是以尿素为唯一氮源的选择培养基
解析:选D。牛的瘤胃中的微生物多为厌氧菌,故培养基上加石蜡以隔绝外界氧气,创造无氧条件,A正确;只有乙培养基为固体培养基,故只有乙培养基上能形成肉眼可见的菌落,B正确;甲和丙培养基是液体培养基,可扩大培养菌种,增大目的菌株的浓度,C正确;乙培养基是以尿素为唯一氮源的选择培养基,D错误。
10.(2025·江苏苏州高二期中)研究人员筛选出4种能降解木质素的假单胞杆菌,培养结果如图1所示;选出高效菌株进一步探究木质素降解率和木质素添加量之间的关系,结果如图2所示。下列叙述正确的是( )
A.将一个未接种的平板与接种后的平板立即倒置,恒温培养
B.假单胞杆菌能吸收秸秆中的木质素,作为直接能源物质
C.可选择图1中的c菌落进一步探究其降解木质素的能力
D.木质素浓度过高可能会抑制细菌生长,导致降解率下降
解析:选D。未接种的平板主要用于对照,检测培养基是否被污染,接种后的平板需要等菌液被培养基吸收后再恒温培养,A错误;假单胞杆菌可降解木质素,但木质素不是其直接能源物质,细胞生命活动的直接能源物质是ATP,B错误;题图1中b菌落周围透明圈的直径明显大于其他菌落,说明b菌落中菌株在降解木质素方面可能更具优势,应选择b菌落进一步探究其降解木质素的能力,C错误;从题图2可以看出,随着木质素添加量的增加,木质素降解率先升高后降低,推测当木质素浓度过高时,可能会对细菌的生长环境产生不良影响,如渗透压改变、某些物质积累对细菌产生毒害等,从而抑制细菌生长,导致其降解木质素的能力下降,最终使降解率降低,D正确。
二、非选择题
11.(2025·河北衡水高二期中)亚硒酸钠对细菌生长有明显毒害作用。土壤中的一些富硒细菌可将亚硒酸钠还原为红色的单质硒,下图为土壤中富硒细菌的筛选和纯化过程。回答下列问题:
(1)操作X是将土壤样品接种到含________的培养基中,在②中培养瓶内__________(填“能”或“不能”)观察到富硒细菌菌落,原因是________________________________________________________________________。
(2)进行富硒细菌的梯度稀释时,可将5 mL菌液加入________mL无菌水中,如此重复操作________次,可得到图中所需各浓度的稀释液。
(3)③中使用的接种工具是__________,对其灭菌的具体操作是______________________________________________________________________________________。
(4)操作Y是__________________,以提高富硒细菌的纯度。目的菌落的特点是____________________________________。
解析:(1)为了进行土壤中富硒细菌的筛选和纯化,操作X是将土壤样品接种到含亚硒酸钠的培养基中,在②中培养瓶内不能观察到富硒细菌菌落,这是因为菌落只能在固体培养基中形成(或液体培养基中无法形成菌落)。(2)进行富硒细菌的梯度稀释时,可将5 mL菌液加入45 mL无菌水中,如此重复操作5次,可得到题图中所需各浓度的稀释液。(3)由题图分析可知,③中所用的接种方法是稀释涂布平板法,使用的接种工具是涂布器,对其灭菌的具体操作是先将涂布器浸在酒精中,再将其放在火焰上灼烧,待酒精燃尽、涂布器冷却后可进行涂布操作。(4)操作Y是挑选单菌落重复分离纯化,以提高富硒细菌的纯度。分析题意可知,土壤中的一些富硒细菌可将亚硒酸钠还原为红色的单质硒,所以目的菌落的特点是菌落的周围出现红色。
答案:(1)亚硒酸钠 不能 菌落只能在固体培养基中形成 (2)45 5 (3)涂布器 先将涂布器浸在酒精中,再将其放在火焰上灼烧 (4)挑选单菌落重复分离纯化 菌落的周围出现红色
12.(2025·广东部分学校高二期中)地球上的植物每年产生的纤维素超过70亿吨,其中40%~60%能被土壤中某些微生物分解利用,这是因为它们能够产生纤维素酶。对这些微生物的研究与应用,使人们能够利用秸秆等生产酒精,用纤维素酶处理服装面料等。已知刚果红是一种染料,它可以与像纤维素这样的多糖物质形成红色复合物,但并不与水解后的纤维二糖、葡萄糖等发生这种反应。当我们在含有纤维素的培养基中加入刚果红时,刚果红与纤维素形成红色复合物;
而当纤维素被纤维素分解菌分解后,复合物就无法形成,培养基中会出现以这些菌落为中心的透明圈(如图所示),测得的A1~A4四个菌落直径(d)及透明圈直径(D)大小如下表所示。回答下列问题:
分离株
菌落直径(d)
透明圈直径(D)
A1
5.24
20.69
A2
6.48
18.86
A3
6.66
17.39
A4
7.84
19.17
(1)采集土样时,可选择__________丰富的环境,如树林中多年落叶形成的腐殖土等。在含有纤维素的培养基中加入刚果红,其作用是
________________________________________________________________________。
现在要从土壤中分离纤维素分解菌,请写出简要的实验方案:
__________________________________________________。
(2)某同学利用稀释涂布平板法测定提取的牛瘤胃样品中纤维素分解菌的数量时,在同一稀释倍数下涂布了1个平板,统计的菌落数为56,请判断这位同学的实验结果是否有效,并说出理由:_____________________________________________________________
______________________________________________________。
(3)据图表可知,降解纤维素能力最强的菌株是__________(填表中序号),判断的理由是__________________________________________。
解析:(1)要筛选分解纤维素的分解菌,采集土样时,可选择纤维素丰富的环境,如树林中多年落叶形成的腐殖土等。在含有纤维素的培养基中加入刚果红,其作用是与纤维素形成红色复合物,通过是否产生透明圈筛选纤维素分解菌。要从土壤中分离纤维素分解菌,基本实验过程是采集的土壤加无菌水制备土壤悬液,充分振荡,并进行梯度稀释,将适宜稀释度的稀释液涂布到以纤维素为唯一碳源且含有刚果红的培养基中,一段时间后,周围出现透明圈的菌落即为纤维素分解菌。(2)采用稀释涂布平板法计数时,每个稀释度的菌液需要至少涂布3个平板,而该同学在同一稀释倍数下涂布了1个平板,会导致实验数据不严谨。(3)当纤维素被纤维素分解菌分解后,复合物就无法形成,培养基中会出现以这些菌落为中心的透明圈,因此透明圈直径与菌落直径的比值越大,菌株降解纤维素的能力越强,表中A1透明圈直径与菌落直径的比值最大。
答案:(1)纤维素 与纤维素形成红色复合物,通过是否产生透明圈筛选纤维素分解菌 采集的土壤加无菌水制备土壤悬液,充分振荡,并进行梯度稀释,将适宜稀释度的稀释液涂布到以纤维素为唯一碳源且含有刚果红的培养基中,一段时间后,周围出现透明圈的菌落即为纤维素分解菌 (2)无效,采用稀释涂布平板法计数时,每个稀释度的菌液需要至少涂布3个平板 (3) A1 A1透明圈直径与菌落直径的比值最大
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