内容正文:
一、选择题
1.关于培养基,下列说法错误的是( )
A.在配制培养乳酸杆菌的培养基时,需加入维生素
B.微生物的适应性强,配制培养基时可以不考虑pH
C.虽然各种培养基的具体配方不同,但一般都含有碳源、氮源、水和无机盐
D.大规模快速繁殖某种微生物可用液体培养基
解析:选B。培养基除需要含有碳源、氮源、水和无机盐等几种营养物质外,还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的需求,B错误。
2.下列有关无菌技术的说法,正确的是( )
A.无菌技术的关键是杀灭实验室中所有的微生物
B.培养微生物的试剂和器具都要进行湿热灭菌
C.经巴氏消毒法处理的食品因微生物未被彻底消灭,不能在常温下长期保存
D.无菌技术中,若处理对象为液体,则只能消毒,不能灭菌
解析:选C。无菌技术的关键在于防止杂菌污染,A错误;培养微生物的器具也可进行干热灭菌,B错误;无菌技术中,若处理对象为液体,可以用湿热灭菌法灭菌,D错误。
3.(2025·湖北黄冈十五校高二期中)微生物的培养和应用过程中,防止杂菌污染至关重要,而无菌技术是实现这一目标的关键手段。下列叙述错误的是( )
A.涂布器在使用前后都需要进行消毒处理
B.倒平板需要在超净工作台中的酒精灯火焰旁进行
C.传统发酵产品的制作往往不需要严格的灭菌
D.利用微生物寄生于多种细菌体内使细菌裂解,属于生物消毒
解析:选A。涂布器在使用前后均需要进行灼烧灭菌,A错误。
4.(2025·湖北省级示范高中高二期中)防止杂菌污染,获得纯净的微生物培养物是研究和应用微生物的前提。下列叙述正确的是( )
A.72~76 ℃消毒30 min,可杀死牛奶中的绝大多数微生物
B.加入培养基中的指示剂和染料不需要灭菌
C.将接种环直接在酒精灯火焰的充分燃烧层灼烧,可以迅速彻底地灭菌
D.高压蒸汽灭菌锅以沸水为介质,在温度121 ℃条件下维持15~30 min灭菌
解析:选C。72~76 ℃处理15 s可杀死牛奶中的绝大多数微生物,A错误;微生物培养的关键是无菌技术,加入培养基中的指示剂和染料也需要灭菌,B错误;将接种环直接在酒精灯火焰的充分燃烧层灼烧,可以迅速彻底地灭菌,C正确;高压蒸汽灭菌锅是以水蒸气为介质,在压力为100 kPa、温度为121 ℃的条件下,维持15~30 min来灭菌的,D错误。
5.(教材P14“概念检测”T1改编)微生物的纯培养既需要适宜的培养基,又要防止杂菌污染。下列相关叙述正确的是( )
A.培养基中的营养物质浓度越高,对微生物的生长越有利
B.微生物的纯培养过程中培养基的pH可能发生改变
C.划线操作时,因培养皿的皿盖不能完全打开,所以操作不需要在酒精灯火焰旁进行
D.微生物的纯培养物就是不含有代谢废物的微生物培养物
解析:选B。培养基中的营养物质浓度并不是越高越好,浓度过高会导致微生物细胞失水,A错误;微生物的培养过程中由于代谢物积累,培养基的pH可能发生改变,B正确;划线操作时,为了防止杂菌污染,培养皿的皿盖不能完全打开,操作时需要在酒精灯火焰旁进行,因为酒精灯火焰旁存在无菌区域,C错误;微生物的纯培养物是由单一个体繁殖所获得的微生物群体,D错误。
6.在培养基配制和微生物接种的过程中,需确保无杂菌污染,进行无菌操作。图中符合无菌操作要求的是( )
A.①②③④ B.①②③⑤
C.①③④⑤ D.②③④⑤
解析:选B。酒精灯火焰附近存在一个无菌区,为避免周围环境中的微生物污染,应将锥形瓶瓶口通过火焰,并在火焰旁将培养基倒入灭菌的培养皿中,要在酒精灯火焰附近接种,①⑤正确;盛菌种的试管管口需通过酒精灯火焰,以防止杂菌污染,②正确;进行平板划线时,接种环在接种前要在火焰上灼烧,待冷却后再进行接种,③正确;培养皿可用高压蒸汽灭菌法或干热灭菌法进行灭菌,不能直接放在火焰上灼烧,④错误。综上所述,B符合题意。
7.(2025·河北石家庄高二期中)下列关于实验室培养和纯化酵母菌过程中的部分操作叙述,错误的是( )
A.对培养皿进行编号或对菌种进行标注时,应使用记号笔在皿底标记
B.倒平板时,应将培养皿完全打开,迅速倒入培养基,然后立即盖上皿盖
C.纯化培养时,应将接种后的平板倒置放入适宜温度的培养箱内培养
D.使用后的培养基在丢弃前需进行灭菌处理,以免污染环境
解析:选B。由于是倒置培养,对培养皿进行编号或对菌种进行标注时,应使用记号笔在皿底标记,便于观察,A正确;倒平板时,需将培养皿打开一条稍大于瓶口的缝隙,不能完全打开培养皿,B错误;微生物纯化培养时,应将接种后的平板倒置放入适宜温度的培养箱内培养,C正确;为了避免污染环境,使用后的培养基在丢弃前需进行灭菌处理,D正确。
8.微生物培养过程中,要十分重视无菌操作,现代生物学实验中的许多方面也要进行无菌操作,防止杂菌污染。下列无菌操作错误的是( )
A.接种时培养皿只打开一条缝隙
B.菌种和培养基使用前均需灭菌处理
C.接种前、后都要通过火焰灼烧试管口
D.高压蒸汽灭菌既能杀死微生物的营养体,也能杀死芽孢等休眠体
解析:选B。接种时在火焰附近用拇指和食指将培养皿打开一条缝隙,迅速接种后盖上皿盖,防止杂菌污染,A正确;培养基在使用前需灭菌处理,但是菌种不能灭菌处理,否则菌种会死亡,B错误;接种前、后均要将试管口通过火焰,防止杂菌污染,C正确;高压蒸汽灭菌不仅能杀死微生物的营养体,也能杀死芽孢等休眠体,D正确。
9.某同学为了在实验室富集某种大豆根瘤菌,通过查阅资料,配制了含有如下表成分的培养基。下列有关叙述错误的是( )
成分
甘露醇
KH2PO4
MgSO4·7H2O
NaCl
CaSO4·2H2O
浓度(质量分数)
1%
0.02%
0.02%
0.02%
0.01%
A.该培养基不需要添加氮源,可以达到富集目的
B.该培养基还需要添加琼脂,便于将菌种接种到培养基上
C.灭菌后待培养基冷却至50 ℃左右时,需要在酒精灯火焰附近倒平板
D.平板上一个菌落就是一个大豆根瘤菌
解析:选D。根瘤菌为固氮菌,可利用空气中的氮气作为氮源,因此该培养基不需要额外添加氮源,A正确;琼脂通常可作为固体培养基的促凝剂,故该培养基还需要添加琼脂,便于将菌种接种到培养基上,B正确;灭菌后待培养基冷却至50 ℃左右时,在酒精灯火焰旁进行倒平板操作,防止空气中的杂菌污染,C正确;平板上一个菌落是由单个微生物细胞繁殖到一定程度形成的子细胞集团,D错误。
10.(2025·广东珠海五校高二联考)科研人员发现某个被真菌M污染的培养皿中出现了大部分细菌能正常生长,唯独真菌 M 附近没有细菌生长的现象。科研人员认为这可能是真菌M产生了抑制细菌生长的物质。 为验证该猜想,科研人员做了如下图所示的实验。下列有关分析正确的是( )
A.过程①使用了平板划线法接种真菌M, 该过程中接种环至少要灼烧4次
B.若甲、乙、丙组的滤纸片周围都出现了抑菌圈,则说明上述猜想正确
C.过程②应从平板a中菌落密集处挑取菌落置于培养基b中
D.真菌M 在培养基b 中培养时,培养基中应加入琼脂
解析:选B。每次划线前及最后一次划线结束后均需灼烧接种环,根据题图可知,过程①使用了平板划线法接种真菌M,共画线4次,所以该过程中接种环至少要灼烧5次,A错误;根据图示信息可知,甲、乙、丙组是不同种类的细菌,若甲、乙、丙组的滤纸片周围都出现了抑菌圈,则说明真菌M可能产生了抑制细菌生长的物质,B正确;过程②应取平板a 中的单菌落置于培养基b中,以扩大培养,获得更多的纯培养物,C错误;真菌M在培养基b中扩大培养,培养基b是液体培养基,不应加入琼脂,D错误。
二、非选择题
11.某同学配制含琼脂的牛肉膏蛋白胨培养基后,对培养基和培养皿进行高压蒸汽灭菌,当培养基温度下降到50 ℃时,在酒精灯火焰附近倒平板,待培养基冷却至室温,按下表所示处理:
组别
处理
A组
打开培养皿皿盖,距地面0.3 m处暴露15 min
B组
打开培养皿皿盖,距地面0.6 m处暴露15 min
C组
打开培养皿皿盖,距地面0.9 m处暴露15 min
D组
打开培养皿皿盖,距地面1.2 m处暴露15 min
E组
不打开培养皿皿盖
将处理完毕的培养皿置于适宜温度下培养2~3 d,观察每个培养皿中的菌落特征和数目。回答下列问题:
(1)上述实验的目的是_________________________________
____________________________,若E组的培养基表面有菌落生长,说明了_____________________________________。
(2)培养基中的蛋白胨为微生物提供的主要营养有________________________等。在酒精灯火焰附近进行相关操作是为了
__________________________________________________________。
(3)实验过程特别强调温度控制,请简要说明下列温控措施的目的:
①待培养基冷却至室温的目的是____________________(答2点)。
②将处理完毕的培养皿置于适宜温度下培养的目的是______________________________________。
(4)实验结束后,使用过的培养基应进行______________处理。
解析:(1)题述实验中,自变量为是否打开培养皿皿盖及打开皿盖的培养皿距地面的高度,实验目的是探究不同高度空气中微生物的种类和数量。若E组的培养基表面有菌落生长,说明了培养基灭菌不彻底(或受到杂菌污染)。(2)培养基中的蛋白胨为微生物生长提供的主要营养有碳源、氮源和维生素等。在酒精灯火焰附近进行相关操作是为了避免周围环境中微生物的污染。(3)①待培养基冷却至室温的目的是使培养基凝固,防止培养基温度过高杀死接种在其上的微生物。②将处理完毕的培养皿置于适宜温度下培养的目的是让细菌在适宜温度下生长、繁殖。(4)实验结束后,对使用过的培养基应进行灭菌处理。
答案:(1)探究不同高度空气中微生物的种类和数量 培养基灭菌不彻底(或受到杂菌污染) (2)碳源、氮源、维生素 避免周围环境中微生物的污染
(3)①使培养基凝固;防止培养基温度过高杀死接种在其上的微生物 ②让细菌在适宜温度下生长、繁殖 (4)灭菌
12.某生物兴趣小组的同学利用课上所学的知识调查流经学校的河水的水质状况,目标菌为大肠杆菌。回答下列问题:
(1)测定河水中大肠杆菌的含量时,首先要制备培养基,培养基必须含有的基本成分是_________________________________________。
(2)实验过程中,对培养基进行灭菌,常采用的方法是__________________;对玻璃器皿和金属用具可以采用干热灭菌法来灭菌,原因是___________________________________________________
________________________________________________________。
(3)为了尽快观察到细菌培养的实验结果,应将接种了河水样品的平板置于________________中培养,使菌落均匀生长、布满平板,培养的温度设定在37 ℃。在细菌培养过程中,需要放置接种________的培养基一起培养,其目的是_______________________________________。
(4)培养20小时后,观察平板上菌落的__________________________,若观察到不同的菌落,则说明河水样品中有________种细菌。一般来说,菌落总数越多,河水遭受细菌污染的程度越________。
解析:(1)大肠杆菌是异养型生物,其培养基中必须含有水、无机盐、碳源、氮源。(2)培养基常采用的灭菌方法是高压蒸汽灭菌法;玻璃器皿和金属用具耐高温,且要保持干燥,因此这些器具可以采用干热灭菌法来灭菌。(3)为了尽快观察到细菌培养的实验结果,应将接种了河水样品的平板置于恒温培养箱中培养;在细菌培养过程中,需要放置接种了无菌水或未接种的培养基一起培养,以检验培养基是否受到杂菌污染,进而确保该实验所得结果真实可靠。(4)不同微生物菌落的颜色、形状和大小等特点不同,菌落的类型越多,即微生物种类越多,菌落数目越多,说明污染程度越高。
答案:(1)氮源、碳源、水和无机盐 (2)高压蒸汽灭菌法 玻璃器皿和金属用具耐高温,且要保持干燥
(3)恒温培养箱 无菌水 检验培养基是否受到杂菌污染 (4)颜色、形状和大小 多 高
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