内容正文:
第1章 发酵工程
第3节 发酵工程及其应用
课堂导入
青霉素是世界上第一个应用于临床的抗生素。早期科学家只能从青霉菌中提取少量,价格贵如金。随着高产菌种的选育、发酵技术的发展等,青霉素步入了产业化生产的道路。
如今,一瓶规格160万单位青霉素注射剂的价格只要1元左右。
在工业上,青霉素是怎样生产的?
思考
通过发酵工程生产
发酵工程是指利用微生物的特定功能,通过现代工程技术,规模化生产对人类有用的产品,它涉及菌种的选育和培养、产物的分离和提纯等方面。
发酵工程的基本环节
Basic Steps of Fermentation Engineering
选育菌种
配置培养基
扩大培养
灭菌
接种
发酵罐内发酵
分离提纯产物
获得产品
一、发酵工程的基本环节
1. 选育菌种
(1)目的:
获得性状优良的菌种
(2)菌种来源
①自然界中筛选
②诱变育种
③基因工程育种
(常规菌)
(工程菌)
发酵工程中所用的菌种大多是 。
单一菌种
(3)实例:
①筛选产酸量高的黑曲霉用来生产柠檬酸
②使用基因工程改造的啤酒酵母,加速发酵、缩短生产周期
一、发酵工程的基本环节
2. 扩大培养
(1)原因:
工业发酵罐的体积一般为几十到几百立方米,接入的菌种总体积需要几立方米到几十立方米。
(2)目的:
增加菌种数量,缩短生产周期
(3)方法:
将培养到生长速度最快时期的菌体分开,再进行培养
一、发酵工程的基本环节
3. 配制培养基
(1)类型:
发酵工程一般使用液体培养基
(2)培养基应包括:
碳源、氮源、水、无机盐及特殊营养要求
(3)确定配方的方法:
要经过反复试验才能确定
用于扩大培养(少)和发酵罐内发酵(多)
一、发酵工程的基本环节
4. 灭菌
(1)原因:
①杂菌与菌种之间形成种间竞争关系使产量下降
②杂菌产生的代谢物抑制菌种的生长使产量下降
(2)对象:
培养基和发酵设备
(3)实例:
在青霉素生产过程中混入杂菌,这些杂菌会分泌青霉素酶,分解青霉素。
一、发酵工程的基本环节
5. 接种
培养的菌种和灭菌后的培养基加入发酵罐中
大型发酵罐有计算机控制系统,对以下信息进行监测和控制,使发酵全过程处于最佳状态:
温度
pH
溶解氧
罐压
通气量
搅拌
泡沫
营养
一、发酵工程的基本环节
6. 发酵罐内发酵
发酵工程的中心环节
(1)工作:
①随时检测培养液微生物数量、产物浓度等,以了解发酵进程
②及时添加必需的营养物质
③要严格控制温度、pH和溶解氧等发酵条件
(2)原因:
环境条件不仅会影响微生物的生长繁殖,而且影响微生物代谢物的形成
(3)实例:
谷氨酸的发酵生产:在中性和弱碱性条件下会积累谷氨酸;
在酸性条件下则容易形成谷氨酰胺和N-乙酰谷氨酰胺。
9
一、发酵工程的基本环节
6. 发酵罐内发酵
电动机
排气管
pH计
冷却水排出口
冷却夹层
搅拌叶轮
生物传感器装置
空气入口
放料管
阀门
冷却水进入口
温度传感器
和控制装置
取样管
培养物或营养物质的加入口
观察孔
发酵液
抽取样本进行检测
调节罐温
调节罐压
控制溶解氧含量
不断搅拌的目的:
①使微生物得到充足的O2
②使微生物与培养基充分接触,混合均匀;
③有助于充分散热;
④有利于固体物质在发酵液中保持悬浮状态。
一、发酵工程的基本环节
7. 分离、提纯产物
发酵产物不同分离方法也不同
发酵产品
发酵产品是菌体本身
发酵产品是代谢产物
根据其性质采用蒸馏、萃取、离子交换等方法进行分离、提纯
采用过滤、沉淀等方式进行分离、提纯
8. 获得产品
一、发酵工程的基本环节
思考1
微生物菌种资源丰富,选择发酵工程用的菌种时需要考虑哪些因素?
①原料方面:来源广,低成本、转化率高
②产物方面:目的产物多,副产物少
③菌体方面:繁殖快、代谢旺盛、菌种不易变异、退化
④设备方面:发酵条件容易控制
思考2
在进行发酵生产时,排出的气体和废弃培养液等能直接排放到外界环境中吗?
不能,发酵生产时,微生物及其代谢物中都可能含有危害环境的物质。
要进行二次清洁或灭菌处理后才能排放。
12
1、(多选)虾青素具有抗衰老、抗癌、预防炎症等功效,红法夫酵母菌是天然能产虾青素的酵母菌,研究发现其细胞生长的最适 pH 为 6.0,虾青素形成的最适 pH 为4.0。下列有关利用发酵工程工业化生产虾青素的叙述,正确的是( )
A. 选育并分离高产红法夫酵母菌是发酵工程的首要环节,常用固体培养基
B. 要想提高虾青素产量,需通过反复试验确定培养基中碳源、氮源、水和无机盐等的比例
C. 对酵母菌进行扩大培养时,需要使用液体培养基、隔绝空气并调pH为6.0
D. 发酵罐内发酵是生产虾青素的中心环节,需随时监测和控制温度、pH等
ABD
课堂小测
在食品工业上的应用
在医药工业上的应用
二、发酵工程的应用
①生产条件温和;
②原料来源丰富且价格低廉;
③产物专一;
④废弃物对环境的污染小和容易处理
在农牧业上的应用
在其他方面的应用
发酵工程的应用
发酵工程的特点
发酵工程
的应用
食品工业
生产传统的发酵产品
酱油的生产
酒类的生产
生产食品添加剂
生产酶制剂
医药工业
生产抗生素、氨基酸、激素和免疫调节剂等
生产疫苗
农牧业
生产微生物肥料
生产微生物农药
生产微生物饲料
其他方面
二、发酵工程的应用
1. 在食品工业上的应用
(1)生产传统的发酵产品:
例1
工业生产酱油
霉菌产生蛋白酶
淋洗
调制
大豆蛋白质
小分子肽和氨基酸
酱油
例2
工业生产酒类
酿酒酵母
28℃
过滤
消毒
谷物、水果
酒精 + CO2
各种酒
啤酒的工业化生产流程
二、发酵工程的应用
1
发芽
大麦种子发芽,释放淀粉酶。
糖化罐
大麦
水
啤酒的工业化生产流程
2
焙烤
加热杀死种子胚但不使淀粉酶失活。
3
碾磨
将干燥的麦芽碾磨成麦芽粉。
4
糖化
淀粉水解,形成糖浆。
防止种子继续生长,消耗有机物
主发酵
糖浆
啤酒花
冷却
瓶装
罐装
储存罐
二、发酵工程的应用
啤酒的工业化生产流程
5
蒸煮
产生风味组分,终止酶的进一步作用,并对糖浆灭菌。
6
发酵
酵母菌将糖转化为酒精和CO2
7
消毒
杀死啤酒中的大多数微生物,延长保存期。
8
终止
过滤、调节、分装啤酒进行出售。
过滤
主发酵
后发酵
大部分糖的分解、酵母菌的繁殖
和代谢物的生成
低温、密闭的环境下储存一段时间
一、发酵工程的基本环节
思考3
酵母菌酒精发酵过程中为什么要“先通气后密封”?
通气:使酵母菌进行有氧呼吸大量繁殖
密封:使酵母菌进行酒精发酵产生酒精
思考4
啤酒生产中,发酵是重要环节,发酵后期,如果密封不严,会使啤酒变酸,你知道这是发生了什么变化吗?
酒精在醋酸菌的作用下被氧化产生乙醛,最后变为醋酸
精酿
现在市面上流行一种“精酿”啤酒,它的制作工艺与普通啤酒有所不同,如一般不添加食品添加剂、不进行过滤和消毒处理等。“精酿”啤酒是小规模酿造产品,发酵时间长、产量低和价格高。
20
二、发酵工程的应用
1. 在食品工业上的应用
(2)生产各种各样的食品添加剂:
例3
工业生产柠檬酸
黑曲霉产生
淀粉酶
黑曲霉产生
柠檬酸合成酶
淀粉
葡萄糖
柠檬酸
例4
工业生产味精
谷氨酸棒状杆菌
有氧
处理
淀粉、糖蜜
谷氨酸
味精
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二、发酵工程的应用
1. 在食品工业上的应用
(2)生产各种各样的食品添加剂:
食品添加剂的作用:
①增加食品的营养;
②改善食品的口味、色泽和品质;
③延长食品的保存期
常用的几类食品添加剂
添加剂类型 举例
酸度调节剂 L-苹果酸、柠檬酸、乳酸
增味剂 5‘-肌苷酸二钠、谷氨酸钠
着色剂 β-胡萝卜素、红曲黄色素
增稠剂 黄原胶、β-环状糊精、结冷胶
防腐剂 乳酸链球菌素、溶菌酶
食品添加剂 ≠ 违法添加物
二、发酵工程的应用
1. 在食品工业上的应用
(3)生产酶制剂:
概念:
从生物体中提取的具有酶特性的一类化学物质
实例:
α-淀粉酶、β-淀粉酶、果胶酶、氨基肽酶和脂肪酶等
来源:
少数由动植物生产外,大多数通过发酵工程生产
应用:
用于食品的直接生产、改进生产工艺、简化生产过程、改善产品的品质和口味、延长食品储存期和提高产量等方面。
二、发酵工程的应用
2. 在医药工业上的应用
(1)发酵工程
生产的药物
①抗生素
②氨基酸
③激素
④免疫调节剂
青霉素(治疗脑膜炎、肺炎)
精氨酸(治疗高氨血症)
生长激素释放抑制激素(治疗肢端肥大症)
(2)基因工程、蛋白质工程与发酵工程相结合
动植物的基因
转入
微生物
发酵工程
直接改造微生物
药
物
病原体的抗原基因
转入
微生物
疫苗
二、发酵工程的应用
3. 在农牧业上的应用
(1)生产微生物肥料:
类型:
根瘤菌肥、固氮菌肥等
作用:
①增进土壤肥力,改良土壤结构,促进植株生长
②抑制土壤中病原微生物的生长,从而减少病害的发生
原理:
利用了微生物在代谢过程中产生的有机酸、生物活性物质等
二、发酵工程的应用
3. 在农牧业上的应用
(2)生产微生物农药:
原理:
利用微生物或其代谢物来防治病虫害
地位:
生物防治的重要手段
微生物或生产出的药物 防治对象
苏去金芽孢杆菌 80多种农林虫害
白僵菌 玉米螟、松毛虫等
一种放线菌生产的抗生素——井冈霉素 水稻枯纹病
二、发酵工程的应用
3. 在农牧业上的应用
(3)生产微生物饲料:
原理:
微生物含有丰富的蛋白质,且繁殖速度快
实例:
①以淀粉或纤维素的水解液、制糖工业的废液等为原料,通过发酵获得了大量的微生物菌体,即单细胞蛋白,用其制成的微生物饲料,使家畜、家禽增重快,产奶/产蛋量显著提高。
单细胞蛋白 ≠ 蛋白质
二、发酵工程的应用
3. 在农牧业上的应用
(3)生产微生物饲料:
原理:
微生物含有丰富的蛋白质,且繁殖速度快
实例:
②在青贮饲料中添加乳酸菌,可以提高饲料的品质,使饲料保鲜,动物食用后还能提高免疫力。
二、发酵工程的应用
4. 在其他方面的应用
(1)解决资源短缺与环境污染问题:
利用纤维废料发酵生产酒精、乙烯等能源物质已取得成功。
(2)将极端微生物应用于生产实践:
利用嗜热菌、嗜盐菌生产洗涤剂;嗜低温菌有助于提高热敏性产品的产量。
粮食
环境
能源
健康
2、由于发酵工程生产条件温和、原料来源丰富、价格低廉等,在食品工业、医药工业、农牧业等许多领域得到了广泛的应用,下列有关发酵工程在食品工业上应用的描述,正确的是( )
A. 日常生活中食用的酱油的制作以大麦为主要原料,利用产蛋白酶的霉菌的作用,将原料中的蛋白质分解成小分子的肽和氨基酸
B. 啤酒发酵的过程分为主发酵和后发酵两个阶段,其中,酵母菌的繁殖在主发酵阶段完成,大部分糖的分解和代谢物的生成在后发酵阶段完成个
C. 味精是谷氨酸棒状杆菌在无氧条件下发酵产生谷氨酸,谷氨酸再经过一系列处理而获得的
D. 由于酶制剂催化效率高、专一性强、作用条件温和,因此在使用时要考虑酶制剂的使用量、底物的种类以及适宜的温度和pH
D
课堂小测
3、下列对发酵工程及其应用的叙述,正确的是 ( )
①生产谷氨酸需将 pH调至中性偏碱;②发酵工程具有生产条件温和、原料来源丰富且价格低廉等特点;③发酵工程的产品主要包括微生物的代谢物、酶及菌体本身;④利用发酵工程生产的根瘤菌肥作为微生物农药可以促进植物生长;⑤啤酒的工业化生产过程中,酒精的产生积累主要在后发酵阶段完成;⑥单细胞蛋白是从微生物细胞中提取的蛋白质,可作为微生物饲料等
A.①②③ B.②③ C.②③④ D.②③⑤⑥
A
课堂小测
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