课时跟踪检测(2) 发酵工程与微生物接种和传代的无菌技术-【新课程学案】2025-2026学年高中生物选择性必修3 生物技术与工程配套练习word（苏教版）

课时跟踪检测(二)　发酵工程与微生物接种和传代的无菌技术 一、选择题 1.(2025·淮安期末)下列哪项不属于无菌技术 (　　) A.将培养皿、接种工具和培养基进行灭菌 B.实验操作应在酒精灯火焰附近进行 C.避免已经灭菌处理的材料用具与周围的物品相接触 D.操作者的衣着和双手用纯净水洗干净 2.下列有关使用高压蒸汽灭菌锅的操作,错误的是 (　　) A.加水时,水量达到标记线即可 B.加盖时,将排气软管插入内层灭菌桶的排气槽内 C.加热时,待冷空气完全排尽后关上排气阀 D.切断电源后,打开排气阀使压力表降到零后开盖　 3.下列有关无菌技术的说法,正确的是 (　　) A.无菌技术的关键是杀灭实验室中所有的微生物 B.培养微生物的试剂和器具都要进行湿热灭菌 C.经巴氏消毒法处理的食品因微生物未被彻底消灭,不能在常温下长期保存 D.无菌技术中,若处理对象为液体,则只能消毒,不能灭菌 4.微生物培养过程中,要十分重视无菌操作,现代生物学实验中的许多方面也要进行无菌操作,防止杂菌污染。请分析下列操作中错误的是 (　　) A.操作者双手常用酒精进行消毒 B.接种操作要在酒精灯火焰附近进行 C.大多数培养基要进行湿热灭菌 D.加入培养基中的指示剂和染料不需要灭菌 5.(2025·常州月考)微生物培养过程中消毒和灭菌环节非常重要,以下灭菌或消毒方法错误的是 (　　) 选项 A B C D 仪器或 试剂 固体培 养基 接种环(针) 菌种稀 释液 滴管 消毒或 灭菌方法 高压蒸汽 灭菌 火焰灼烧 紫外线 照射 酒精 消毒 6.下列关于微生物实验操作的叙述,不正确的是 (　　) A.培养微生物的试剂和器具不同,灭菌方法不一定相同 B.接种前后,接种环都要在酒精灯火焰上进行灼烧 C.接种后的培养皿要倒置,以防培养基污染 D.挑取菌种时,拔去试管塞后迅速将接种环伸入试管 7.空气中的微生物在重力等作用下会有一定程度沉降。某生物兴趣小组欲利用平板培养基测定教室内不同高度空气中微生物的分布情况。下列关于该实验的叙述,正确的是 (　　) A.该实验不需要用接种工具进行接种 B.实验组和对照组都要持续打开皿盖 C.将平板培养基放置在教室不同地点的不同高度 D.实验过程中需要开门开窗通风确保接种的效果 8.消毒和灭菌是微生物培养中常用的操作方法。下列说法正确的是 (　　) A.微生物接种技术的方法都相同,其核心就是要防止杂菌污染,保证培养物的纯度 B.在 100 ℃下煮沸 5~6 min 属于消毒方法,可杀死绝大多数微生物细胞 C.在灭菌后倒平板前,加入一定量的缓冲液以调节培养基的 pH D.使用高压蒸汽灭菌锅进行灭菌时,只有当压力表的压力降到一个标准大气压时,才能打开盖子 9.(2025·无锡月考)巴氏杀菌乳是以生牛(羊)乳为原料,经巴氏消毒等工序制得的液体产品,每毫升合格巴氏杀菌乳中细菌总数不得超过50 000个。某兴趣小组进行了新鲜牛奶合适的消毒温度的探究,相关叙述不合理的是 (　　) A.配制牛肉膏蛋白胨培养基并在121 ℃、103 kPa条件下高压蒸汽灭菌 B.将等量的新鲜牛奶分别置于不同温度的恒温水浴锅中处理一段时间 C.对处理后的牛奶通过平板培养基接种,并在合适温度下培养一段时间 D.统计培养基上全部菌落数,以菌落数最少组的处理温度作为最适消毒温度 10.获得纯净微生物培养物的关键是防止外来杂菌的入侵,下列选项不符合无菌操作的是 (　　) A.被用于微生物培养的器皿、接种工具等需要煮沸消毒 B.平板冷却凝固后需倒置,皿盖在下,皿底在上 C.接种环应灼烧并冷却后才可伸入并蘸取菌液 D.接种菌种的操作应在酒精灯火焰旁进行 11.[多选]金黄色葡萄球菌有很强的致病力,常引起骨髓炎等,还可能引起食物中毒,实验中下列做法正确的是 (　　) A.对接种环进行灼烧处理 B.带菌培养基必须经湿热灭菌后才能倒掉 C.带菌培养基必须经加热后才能倒掉 D.接种后双手必须经肥皂洗净,再用体积分数为70%的酒精棉球擦拭 12.[多选]下列关于斜面接种酵母菌操作的叙述有误的是 (　　) A.准备接种时,要一只手手执2支试管 B.挑取菌种前要对接种环环端进行灼烧灭菌 C.带菌种的接种环在培养基斜面上由上部向下轻轻划“Z”型折线 D.接种完成,试管口和试管塞都要通过酒精灯火焰2~3次再迅速塞紧试管 二、非选择题 13.某科研小组在进行某种需氧细菌培养过程中获得了两个突变株A和B,然后对突变株A和B进行了相关实验,实验结果如表所示,回答下列问题: 接种的 菌株 在普通培养基上的生长状况 实验处理及结果 A 不生长 添加营养物质甲,能生长 B 不生长 添加营养物质乙,能生长 A+B 能生长 不添加营养物质甲、乙,能生长 (1)微生物的实验室培养中,获得纯净培养物的关键是　　　　　　　　　　;在实验过程中,除了要对使用的材料进行灭菌外,还需要对接种室、接种箱或超净工作台进行灭菌,具体方法是　　　　　　　　　　　。  (2)实验发现,将突变株A、B分别接种在普通培养基上后置于适宜条件下培养一段时间,均没有菌落生长,而分别添加营养物质甲、乙时均生长,原因最可能是　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　。而将突变株A和B混合在一起同时接种于普通培养基中,在适宜条件下培养一段时间,有大量菌落生长,合理的解释是　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　。  在对细菌培养时通常需要倒置培养,目的是　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　  (答出一点即可)。 (3)该科研小组将突变株A接种在液体培养基中,通过振荡使菌株分布均匀,然后平分到两个培养瓶中,在其他相同且适宜的条件下分别静置和振荡培养,一段时间后观察统计细菌的种群密度,可发现　　　　培养瓶细菌种群密度更大,可能的原因是　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　 　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　(答出两点即可)。  14.(2025·扬州高二月考)对某品牌的一次性口罩和饮用水中的微生物进行检测,通过分析微生物的种类和数量来确定口罩和饮用水的合格性。准确取1 g(近似1 mL)样品,剪碎后加入到99 mL无菌水中充分混匀,过程如下图,回答下列问题。 (1)步骤④的培养基中除含有水、无机盐外还应有　　　　、　　　　等营养成分。培养基常用　　　　　 锅进行灭菌。在进行灭菌时,压力达到设定要求而锅内并没有达到相应温度,最可能的原因是　　　　　。  (2)步骤⑤常采用平板划线的方法进行接种,此过程中所用的接种工具是　　　　,操作时采用　　　　灭菌的方法。对于优良菌种,菌种的传代和保存至关重要,　　　　是菌种保存的重要条件。  课时跟踪检测(二) 1．选D　为保证不被杂菌污染，应将培养皿、接种工具和培养基等进行灭菌，A不符合题意；酒精灯火焰附近可以形成一个相对无菌区，为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在酒精灯火焰附近进行，B不符合题意；周围物品可能含有杂菌，为防止污染，实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围物品相接触，C不符合题意；对实验操作的空间，操作者的衣着和双手，需进行清洁和消毒，仅用纯净水洗干净不属于无菌技术，D符合题意。 2．选D　切断电源后，应该等压力表指针降至“0”点，待温度下降后，打开排气阀，旋开固定螺栓，开盖，D错误。 3．选C　无菌技术的关键是防止杂菌的污染，A错误；培养微生物的培养基一般用湿热灭菌法灭菌，微生物的接种工具，如接种针、接种环或其他金属用具一般要进行干热灭菌，B错误；无菌技术中，若处理对象为液体，可以用湿热灭菌法灭菌，D错误。 4．选D　操作者双手常用酒精进行消毒，A正确；为了避免杂菌污染，接种操作要在酒精灯火焰附近进行，B正确；大多数培养基要进行湿热灭菌，C正确；加入培养基中的指示剂和染料也需要灭菌，D错误。 5．选C　固体培养基应该用高压蒸汽灭菌法灭菌，A正确；接种环(针)应该采用火焰灼烧法灭菌，B正确；菌种稀释液不能用紫外线照射，会导致目的菌死亡，C错误；滴管可以用酒精消毒，D正确。 6．选D　接种室、接种箱等常用紫外线消毒法处理，接种环等常用火焰灼烧法处理，移液管、培养皿等常用干热灭菌法处理，培养基等常用高压蒸汽灭菌法处理，培养微生物的试剂和器具不同，灭菌方法不一定相同，A正确；为了防止杂菌污染，每次接种前后，接种环都要在酒精灯火焰上进行灼烧灭菌，B正确；接种后，培养皿需要倒置，以防皿盖上的水珠落入培养基造成污染，C正确；挑取菌种时，拔去试管塞后，要先将试管口通过酒精灯火焰2～3次，D错误。 7．选A　题述实验利用重力使微生物沉降而自然接种，不需要使用接种工具进行接种，A正确；实验组需要持续打开皿盖，对照组则不能打开皿盖，B错误；该实验需要将平板放置在教室相同地点的不同高度进行实验，C错误；实验过程中尽量减少开门开窗通风，以免无关变量对实验结果造成干扰，D错误。 8．选B　微生物接种技术的方法各不相同，但核心都是要防止杂菌污染，保证获得纯净的培养物，A错误；在100 ℃煮沸5～6 min属于煮沸消毒法，可杀死大部分微生物，B正确；为防止污染，应在灭菌前，加入一定量的缓冲液以调节培养基的pH，再灭菌，C错误；使用高压蒸汽灭菌锅进行灭菌时，只有当压力表的压力降到零，待温度下降后，才能打开排气阀，拧松螺栓，打开盖子，D错误。 9．选D　由于温度过高会影响蛋白质的结构，进而破坏牛奶中的营养成分，所以菌落数最少的组对应的温度不一定是最适的消毒温度，最适的消毒温度应保证每毫升合格巴氏杀菌乳中细菌总数不超过50 000个，同时还应保证牛奶的营养价值不被破坏，D错误。 10．选A　被用于微生物培养的玻璃器皿可用干热灭菌或高压蒸汽灭菌，接种工具等(金属制品)一般用火焰灼烧灭菌，A符合题意；等待平板冷却凝固后，将平板倒过来放置，使皿盖在下、皿底在上，既可以避免水分过快的蒸发，还可以防止冷凝的水珠落回培养基造成污染，B不符合题意；灼烧接种环后，必须等接种环冷却后，才可以伸入并蘸取菌液，否则会因高温杀死菌种，C不符合题意；接种菌种的操作应在酒精灯火焰旁进行，D不符合题意。 11．选ABD　带菌培养基必须经湿热灭菌后才能倒掉，简单的加热达不到灭菌效果，C错误。 12．选BC　准备接种时，要一只手手执2支试管，A正确；挑取菌种前接种环环端和可能伸入试管的部分都要进行灼烧灭菌，B错误；带菌种的接种环在培养基斜面上由底部向上轻轻划“Z”型折线，C错误；接种完成，试管口和试管塞都要通过酒精灯火焰2～3次再迅速塞紧试管，D正确。 13．解析：(1)微生物的实验室培养中，获得纯净培养物的关键是防止外来杂菌的污染。接种室、接种箱或超净工作台在使用前，可以用紫外线照射30 min，以进行灭菌。 (2)将突变株A、B分别接种在普通培养基上后置于适宜条件下培养一段时间，没有菌落生长，而在分别添加营养物质甲、乙时均有菌落生长，原因最可能是突变株A、B分别缺乏合成营养物质甲、乙所需要的酶，缺乏营养物质甲、乙而不能生长。而将突变株A和B混合在一起同时接种于普通培养基中，适宜条件下培养一段时间，培养基中有大量菌落生长，合理的解释是突变株A生长需要的营养物质甲可以由突变株B提供，突变株B生长需要的营养物质乙，突变株A可以提供。培养细菌时将培养基倒置可以防止形成的冷凝水滴落在培养基上造成污染；也可防止培养基的水分蒸发，影响微生物生长；同时可使营养物质集中到表面，有利于微生物生长。 (3)该细菌为需氧菌，振荡培养可以增加培养液中的氧含量，有利于细菌的繁殖；也可使细菌在培养液中分布均匀，与培养液充分接触，有利于营养物质的利用，因此振荡培养瓶细菌种群密度更大。 答案：(1)防止外来杂菌的污染　使用前进行紫外线照射　(2)突变株A缺乏合成物质甲所需要的酶，突变株B缺乏合成物质乙所需要的酶　突变株A生长需要的营养物质甲，突变株B可以提供，突变株B生长需要的营养物质乙，突变株A可以提供(合理即可)　防止形成的冷凝水滴落在培养基上造成污染；防止培养基的水分蒸发，影响微生物生长；使营养物质集中到表面，有利于微生物生长(答出一点即可)　(3)振荡　振荡增大了培养液中的氧含量，有利于细菌的繁殖；振荡可使细菌在培养液中分布均匀，与培养液充分接触，有利于营养物质的利用(答出两点即可) 14．解析：(1)由图可知，步骤④中培养基为固体培养基，故需在培养基中加入琼脂(凝固剂)，一般培养基含有碳源、氮源、水和无机盐等营养成分。对培养基的灭菌常用高压蒸汽灭菌法，该方法在高压蒸汽灭菌锅中进行。在灭菌开始时，应将锅内冷空气完全排除后再关闭排气阀，否则不能达到设定温度。 (2)接种环用于在平板培养基上划线接种，接种过程中采用火焰灼烧灭菌。频繁使用的菌种在4 ℃条件下保存，长期保存的菌种在 －20 ℃条件下保存，故温度是保存菌种的重要条件。 答案：(1)碳源　氮源　高压蒸汽灭菌　锅内冷空气未排完　(2)接种环　火焰灼烧　温度 1 / 4 学科网（北京）股份有限公司 $