特训14 细胞工程-【创新教程·微点特训】2026年考前复盘高考生物冲刺

选做题 15.C[接种时应将菌液滴加到平板上，然后用涂布器 将菌液均匀地涂布在平板上，A错误：培养基要分为 4个区域，除了放置含不同植物提取液的滤纸片，还 有不含任何提取液的滤纸片作为对照，B错误；根据 表格数据，大蒜提取液对三种细菌的抑菌圈直径均 显著大于对照组，而柠檬仅对枯草芽孢杆菌有效，薄 荷无效，说明大蒜抑菌效果最佳，C正确：实验后的 培养基可能含有致病菌，需高温灭菌而非仅消毒，消 毒无法彻底灭活芽孢等结构，D错误。] 16.A[由于牛瘤胃内是无氧环境，所以从牛瘤胃内的 液体中分离出的目的菌主要为厌氧菌，故培养箱内 应提供无氧环境、适宜的温度，A错误：该牛瘤胃内 的液体中纤维素分解菌约有(60+63+66)/3/0.2× 103=3.15×10?个/ml,B正确：与菌落乙相比，菌 落甲的透明圈直径与菌落的直径比值大，所以形成 菌落甲的纤维素分解菌分解纤维素的能力更强，即 应从菌落甲中进行挑选，C正确：各平板中，纤维素 是唯一的碳源，但平板中有凝固剂（琼脂），凝固剂含 碳，D正确。] 15.CD[“曲蘖必时”的同时需要不断搅拌，将酒曲与原 料混合均匀，有利于发酵过程的进行，A正确；“水泉 必香”说明水中的矿物质和微量元素会对酒的风味 产生影响，说明酿酒需要合适的水质，B正确；“陶器 必良”意味着盛装器精良不渗漏，这样是为了给酿酒 提供无氧环境，使酵母菌进行无氧呼吸产生酒精，C 错误：“火齐必得”是指控制适宜的温度保证酵母菌 发酵所需，是指必须把握好火候，是为了控制发酵过 程的环境条件，不是杀死陶器中的微生物，防止杂菌 污染，D错误。] 16,CD[高活性酵母菌不能直接以糯米中的淀粉为主 要碳源，淀粉需先被水解为葡萄糖等单糖后，酵母菌 才能利用，A错误：酵母菌的繁殖在发酵初期就开始 进行，并非在主发酵阶段完成：大部分糖的氧化分解 主要在主发酵阶段完成，B错误；甜米酒发酵过程会 产生二氧化碳，要适时地向外排气，发酵后期，由于 糖类等营养物质减少，酵母菌呼吸产生的气体速度 减少，需要延长排气时间间隔，C正确；黄皮果富含 维生素、有机酸及特殊香味，加入黄皮果可起到调节 风味的作用：压榨操作有利于酒液与固体（如酒糟 等)分离，D正确。] 17.解析：(1)分析题图可知，图中①→③的培养过程中 加入某品牌食用油作为唯一碳源，能够初步筛选出 能降解油烟的微生物，因此称为选择培养。 (2)利用稀释涂布平板法对微生物进行计数时应选 择菌落数在30~300的培养基进行计数，结合表格 数据可知，应选择稀释倍数为10的培养基进行计 数，稀释前每毫升菌液中含有油烟降解菌的数目 (168+172+170)÷3÷0.1×10=1.7×104(个)。 该方法只是统计活菌数目，并且当两个或多个细胞 连在一起时，观察到的只是一个菌落，因此这种计数 方法统计的结果往往会比显微镜直接计数的结果 偏小。 (3)在⑤的固体培养基中应加入该品牌食用油，其作 用是为微生物提供碳源和能源。培养基常用的灭菌 方法是湿热灭菌法。 答案：(1)选择培养初步筛选出能降解油烟的微生 物，并增大其浓度(2)101.7×104该方法只是 统计活菌数量，并且当两个或多个细胞连在一起时， 观察到的只是一个菌落(3)为微生物提供碳源和 能源湿热灭菌法 8 18.(1)梯度稀释菌液，在平板上获得单个菌落，便于计 数不能，平板划线法不能对菌落计数未接种的 牛肉膏蛋白胨培养基 (2)菌落的形状、大小、隆起程度、颜色等取样时间 不相同 (3)乙乙的结果中，有1个平板的计数结果与另外 2个相差悬殊，结果的重复性差 19.解析：(1)酿醋用的醋酸菌可以将乙醇转化为乙醛， 再将乙醛变为乙酸，酒精发酵是利用酵母菌将葡萄 糖转化为乙醇，故果醋酿制一般是在酒精发酵的基 础上再进行醋酸发酵。 (2)酒精发酵的微生物主要是酵母菌，酵母菌属于兼 性厌氧型微生物，既可以进行有氧呼吸也可以进行 无氧呼吸，醋酸菌是好氧细菌，只有当氧气充足时， 才能进行旺盛的生理活动，因此接种醋酸菌时需要 在有氧条件下进行，在酒精发酵液中接种酷酸菌继 续发酵，产生乙酸使发酵液的pH持续下降。 (3)由题图可知：果醋中的总多酚和总黄酮含量均比鲜 果多，且带皮果醋中的总多酚和总黄酮含量均比去皮果 醋多，说明带皮发酵可作为果醋发酵的新思路。从发酵 成本来看，猕猴桃成本较高，若去皮发酵，得到相同产量 的果醋需要购买更多的猕猴桃：若采用去皮发酵，在发 酵之前，还要使用人力或物力对猕猴桃进行去皮处理， 多一笔费用。因此，选择带皮发酵不仅品质高，成本 还低。 答案：(1)酿醋用的醋酸菌可以将乙醇转化为乙醛， 再将乙醛变为乙酸，酒精发酵是用酵母菌将葡萄糖 转化为乙醇(2)酵母菌兼性厌氧型有氧持 续下降(3)带皮①猕猴桃成本较高，若去皮发 酵，得到相同产量的果醋需要购买更多的猕猴桃： ②若采用去皮发酵，在发酵之前，还要使用人力或物 力对猕猴桃进行去皮处理，多一笔费用 特训14 1.D[经①去除植物细胞壁过程获得的a、b称为原生 质体，A错误；融合的细胞有三种（仅考虑细胞的两两 融合)：AAAA、BBBB、AABB,B错误：过程④和⑤分 别是脱分化和再分化，C错误：植物体细胞杂交获得 的植物d,因为有同源染色体所以可育，D正确。 2.C[克隆羊“小龙”的诞生体现了动物体细胞的细胞 核具有全能性，A正确：应将皮肤组织细胞核植入培 育到MⅡ期的去核卵母细胞中，原因是MⅡ期的卵母 细胞具有激发体细胞核全能性的物质，B正确：体外培 养胚胎时需加入动物血清，并培育到桑葚胚或囊胚时 期再进行移植，C错误；进行胚胎移植前，要对波尔山 羊用激素处理使其同期发情，D正确。] 3,A[常用显微操作法去除卵母细胞的细胞核实质是 去除纺锤体一染色体复合物，A错误：灭活的仙台病 毒可使细胞膜上的蛋白质和脂质分子重新排布，细胞 膜打开，细胞发生融合，B正确：研究人员将组蛋白去 甲基化酶Kd4d的mRNA注入了重构胚，同时用组 蛋白脱乙酰酶抑制剂TSA处理，即将组蛋白去甲基 化和增加乙酰化（二者均属于表观遗传），有利于重构 胚的分裂和发育，使其完成细胞分裂和发育进程，C 正确：由于来自同一个胚胎的后代具有相同的遗传物 质，因此为得到遗传背景相同的克隆猴，可将早期胚 胎分割后再进行胚胎移植，D正确。 4.D[①过程是用酶解法去除植物细胞壁，用到的酶是 纤维素酶和果胶酶，A、B表示原生质体，A错误；②过 程可以使用化学方法(PEG)或物理方法诱导原生质 体融合，但灭活的病毒是诱导动物细胞融合的方法之 一，B错误：③过程得到的杂种细胞含有两种细胞的遗 传物质，故有4十2=6个染色体组，C错误；决定植物 ④脱分化和⑤再分化的关键因素是植物激素的种类 和比例，特别是生长素和细胞分裂素的协同作用在组 织培养过程中非常重要，但加入的比例不同，D 正确。」 5.D[动物细胞培养和植物组织培养的能源物质不同， 动物细胞培养的能源物质是葡萄糖，植物组织培养的 能源物质是蔗糖，A错误：植物组织培养通常也要加 入一定量的抗生素，防止微生物生长，B错误：烟草的 叶片细胞是体细胞而不是生殖细胞，生殖细胞培养才 可以获得单倍体植株，C错误：动物细胞培养可用于 检测有毒物质毒性强弱，茎尖没有受到病毒侵染，培 养可用于植物脱毒，D正确。] 6.D[为防止细菌污染，培养4CL,千细胞时可向培养 液中加入适量的抗生素，A错误：4CI,干细胞不会与 其他胚胎细胞发生细胞融合，B错误：对嵌合囊胚或原 肠胚不能进行胚胎分割，以免不能均等分割各种细 胞，C错误：嵌合体猴中，由4CI,干细胞增殖分化形成 的组织可发出绿色荧光，由于这些细胞不一定发育成 原始生殖细胞，因此其遗传信息不一定能遗传给后 代，D正确。 7.C灵长类动物与人类基因相似度高，理论上可减少 免疫排斥，但实际应用中存在伦理问题、病原体风险 及来源限制，无法有效解决器官移植来源问题，不符 合题意，A错误：单倍体育种获得的纯合二倍体因基 因纯合，隐性突变无法直接表现，需进一步自交或测 交才能观察，并非体细胞诱变育种的理想材料，B错 误：核移植技术将母亲核DNA移植到去核的捐赠者 卵细胞中，子代线粒体DNA来自捐赠者，可避免母亲 线粒体遗传病传递，C正确：利用基本无病毒的茎尖 作为外植体可获得脱毒苗，但未改变遗传物质，无法 获得抗病毒新品种，抗病毒品种需通过基因工程或诱 变育种，D错误。 8.C[愈伤组织是经过脱分化形成的，分化程度低，A 错误；诱导愈伤组织的形成需要避光处理，诱导生根 生芽的过程都需要一定的光照处理，B错误：野生型在 不含IAA的RIM中生根数为59，表明细胞利用了自 身产生的IAA促进了愈伤组织分化生根，C正确；由 于生长素具有低浓度促进生长，高浓度抑制生长的特 ,点，若增加1组培养基中IAA的浓度，其生根的效果 不一定更好，D错误。] 9.C[过程①是获取离体的未开花的幼嫩枝条，先用体 积分数为70%的酒精消毒，无菌水冲洗2一3次后，再 用质量分数为5%左右的次氯酸钠溶液处理，再用无 菌水清洗2~3次，A错误；过程②形成的愈伤组织是 一种固定形态的薄壁组织团，是脱分化过程，该过程 发生的分裂方式主要是有丝分裂，不存在减数分裂， B错误；过程③是诱导生芽培养基，与诱导生根培养基 相比，前者中细胞分裂素所占的比例和用量更高， C正确；过程④培育形成的试管苗要移植到消过毒的 蛭石或珍珠岩等环境中，待其长壮后再移栽入土， D错误。 10.A[对转基因奶牛进行克隆，供核奶牛细胞来自雌 性奶牛，所以重组胚胎是雌性，不需要进行性别鉴 定，A错误：可采用电融合法使供体细胞和去核卵母 细胞融合，供体核进入卵母细胞形成重构胚，B正确： 在进行细胞培养时，取材的动物组织可以用机械法 或胰蛋白酶、胶原蛋白酶处理一段时间，将组织分散 成单个细胞，C正确；在胚胎移植过程中，供体牛的 早期胚胎被植入代孕牛体内，代孕牛通常不会对移 植的胚胎产生免疫排斥反应，D正确。] ·89 11.D在动物细胞培养过程中（过程①），细胞会不断 进行代谢，产生代谢废物，同时营养物质会被消耗。 定期更换培养液能够为细胞提供新鲜的营养物质， 还可以及时清除代谢废物，从而营造适宜细胞生长 和增殖的环境，保证供体细胞培养的顺利进行，A正 确：过程②是去除卵母细胞的细胞核，常用的方法有 显微操作去核法等。也有人采用梯度离心、紫外线 短时间照射和化学物质处理等方法，在没有穿透卵 母细胞透明带的情况下去核或使其中的DNA变性， B正确：在体细胞核移植中，过程③为胚胎培养和移 植环节。通常会将激活后的重构胚培养至桑葚胚或 囊胚阶段再进行移植，因为这两个阶段的胚胎在移 植后更容易着床和发育，能够提高胚胎移植的成功 率，C正确：丁牛是通过体细胞核移植技术获得的克 隆牛，其细胞核遗传物质来自甲牛（提供体细胞核）， 但细胞质遗传物质来自乙牛（提供去核卵母细胞，卵 母细胞细胞质中含有少量DNA)。同时，代孕丙牛 为胚胎发育提供了孕育环境，不过不影响丁牛的遗 传物质。所以丁牛的性状主要由甲牛的细胞核遗传 物质决定，但也会受到乙牛细胞质遗传物质的影响， 并非完全与乙牛、丙牛无关，D错误。] 12.D单克隆抗体的制备依据的原理是细胞膜的流动 性和细胞增殖，而非细胞全能性，因为该过程中细胞 没有发育成完整个体和分化出各种细胞，A错误：选 择培养基筛选出的杂交瘤细胞可能有多种类型，因 而这些杂交瘤细胞不都能分泌抗MCP的抗体，因 此，需要进行二次筛选，筛选出能产生抗MCP的抗 体的杂交瘤细胞，B错误：杂交瘤细胞通常在体外培 养液或小鼠腹腔内增殖，在小鼠脾脏中不能完成大 量增殖，C错误：P1(1一90bp)对应的蛋白能与抗体 结合，而P2(61一150bp)不能，说明抗体识别位，点位 于1~60bp编码的蛋白区域，D正确。] 13.C[抗CD318单克隆抗体具有特异性，能与CD318 蛋白特异性结合，因此可用于该蛋白的检测和定位， A正确；制备单克隆抗体前需用纯化的CD318作为 抗原多次免疫小鼠，以刺激小鼠产生相应的B淋巴 细胞，B正确：选择培养基仅能筛选出融合的杂交瘤 细胞（骨髓瘤细胞与B细胞的融合细胞），但无法直 接筛选出能分泌特定抗体的细胞，还需通过抗体检 测进一步筛选，C错误；动物细胞培养需在含5% CO2的环境中维持培养液pH,同时提供95%空气保 证细胞呼吸，D正确。] 14.D[在培养PS细胞过程中要保证无菌无毒环境， 以免影响细胞的增殖，并要定期更换培养液，以便清 除代谢废物，A正确：科研人员把四种转录因子基因 转入人体（供体）的体细胞中，诱导获得PS细胞 PS细胞中基因发生改变，且存在基因选择性表达， 所以细胞中的RNA会发生改变，B正确；iPS细胞可 以来源于病人自身的体细胞，经诱导获得的PS细胞 进行自体移植后可避免免疫排斥反应，C正确；因为 PS细胞是由供体自身的体细胞诱导而来，红绿色盲 等基因突变导致的致病基因也存在于供体的体细胞 中，所以供体的PS细胞通常不能用于治疗供体自身 红绿色盲等基因突变导致的病症，D错误。 选做题 15.A[iPS细胞是通过诱导体细胞重编程获得的多能 干细胞，图中所用的体细胞可以是成纤维细胞，也可 以是已分化的T细胞、B细胞等体细胞，这些体细胞 都可被诱导为PS细胞，A正确：PS细胞类似胚胎 千干细胞，具有强的细胞周期活性，但不具有组织特异 性，它可以分化为多种组织细胞，B错误：胚胎移植前 对图中的白鼠（代孕母鼠）注射激素是进行同期发情 处理，使其生理状态与供体一致，而超数排卵处理是 对供体鼠进行的，C错误；囊胚进一步扩大，会导致 透明带破裂，胚胎从其中仲展出来，这个过程叫孵 化，而不是滋养层破裂，D错误。] 16.C[精子在体外受精前需要进行获能处理，之后在 适宜的培养液（如获能液或受精液）中完成受精，A 正确：胚胎分割技术是胚胎工程中常用的方法，选择 发育良好的桑葚胚或囊胚进行分割，可以获得遗传 物质一致的同卵双胎或多胎，这是实现快速繁殖的 重要手段，B正确：在胚胎移植中，受体母牛的作用是 提供妊娠环境，其遗传性状对后代无影响（因为后代 遗传物质来自供体胚胎)，因此不需要性状优良，重 ,点是健康、繁殖力强，胚胎移植前需进行同期发情处 理，以确保受体母牛与供体胚胎的发育阶段同步，C 错误：受体母牛对移植的胚胎通常不会发生免疫排 斥，因此无需专门检测免疫排斥反应，D正确。 15.AD[胚胎移植前要对供体和受体使用激素进行同 期发情处理，以保证胚胎移植入相同的生理环境，一 般受体对移入子宫的外来胚胎不发生免疫排斥反 应，A错误：动物细胞培养时，提供C○2的作用是维 持培养液的正常DH,故体外培养受精卵时需要给予 一定量的CO2以维持培养液DH的相对稳定，B正 确：囊胚的扩大会导致透明带的破裂，胚胎从中伸展 出来，这一过程叫孵化，C正确：移植前通常采用 SRY一PCR法对滋养层细胞做DNA分析以鉴定胚 胎性别，然后按照需求移植所需性别的胚胎，D 错误。」 16.BC根据SIX1/SAIL1缺陷的早期胚胎发育成肾 脏缺陷胚胎可知，这两个基因是猪（不是人）肾脏发 育必需的基因，A错误：用物理或化学方法（如电刺 激、Ca+载体、乙醇、蛋白酶合成抑制剂等)激活重构 胚，使其完成细胞分裂和发育进程，B正确：注入人源 干细胞的作用是为了让注入的人源干细胞分化为人 源肾脏，C正确：桑葚胚期的细胞尚未分化出肾脏相 关细胞，无法通过此阶段细胞检测判断嵌合胚胎是 否会形成人源肾脏，D错误。 17.(1)细胞分化程度低，容易诱导形成愈伤组织脱分 化2,4-D (2)秋水仙素或低温醋酸洋红液（或甲紫溶液） (3)纤维素酶和果胶原生质体再分化 18.解析：(1)培养细胞时，需在培养基中加入适量的动 物血清，以补充合成培养基中缺乏的物质。向培养 液中通入适量的CO2,目的是维持培养液的pH。当 出现接触抑制时要用胰蛋白酶（或胶原蛋白酶）处 理，然后继续分瓶培养。 (2)在图中的①②两个酶切位，点，常常选用不同的限 制酶进行酶切，这样可以避免目的基因和载体酶切 后产生的黏性末端发生任意连接。在用PCR技术 对该基因扩增前，要设计2种引物，设计引物序列的 主要依据是乳糖分解酶基因两端的部分核苷酸序 列。与细胞内DNA的复制相比，PCR过程中需要的 酶是耐高温的DNA聚合酶(TaqDNA聚合酶)。 (3)过程Ⅲ证明了高度分化的动物细胞的细胞核具 有全能性。 答案：(1)动物血清维持培养液的pH胰蛋白酶 (或胶原蛋白酶)(2)不同2乳糖分解酶基因两 端的部分核苷酸序列耐高温的DNA聚合酶 (TagDNA聚合酶)(3)全能性 19.解析：(1)在动物细胞融合中，常用的方法有PEG融 合法、电融合法和灭活病毒诱导法等，所以图中步骤 ①细胞融合的方法为PEG融合法、电融合法和灭活 病毒诱导法。在培养杂交瘤细胞时，细胞会不断进 .90 行代谢，产生一些代谢产物，这些代谢产物如果积累 过多，会对细胞的生长产生抑制作用。同时，培养基 中的营养物质会被细胞不断消耗，定期更换培养基 可以清除代谢产物，补充营养物质，从而有利于杂交 瘤细胞的生长。 (2)从图中以及注可知，要生产能结合癌细胞(B细胞 淋巴瘤细胞，表面有CD20)和T细胞（表面有CD3) 的双特异性抗体，所以特定的抗原X为CD20。一种 抗原通常会刺激机体产生一种特异性的B淋巴细 胞，但如果小鼠体内存在多种与B细胞淋巴瘤相关 的抗原，就会刺激产生多种B淋巴细胞，所以从小鼠 体内能提取得到多种B淋巴细胞， (3)图中步骤②筛选得到的细胞是能分泌双特异性 抗体的杂交瘤细胞，杂交瘤细胞具有的特，点是既能 迅速大量增殖，又能分泌所需的双特异性抗体。从 图中可知，双特异性抗体的一端能与B细胞淋巴瘤 细胞表面的CD20结合，另一端能与T细胞表面的 CD3结合，这样就可以将T细胞和B细胞淋巴瘤细 胞特异性结合在一起，使T细胞能够识别并杀伤B 细胞淋巴瘤细胞，从而达到治疗的目的。 (4)CAR一T细胞疗法是采集患者自身的T细胞进 行基因改造后回输，这样的T细胞属于患者自身的 细胞，发生免疫排斥反应的概率低。而双特异性抗 体是在体外生产后输入患者体内，由于抗体对于患 者来说是外来物质，容易引发免疫排斥反应，这就是 双特异性抗体治疗相比CAR一T细胞疗法的明显 缺点。 答案：(1)PEG融合法、电融合法和灭活病毒诱导法 清除代谢产物，补充营养物质 (2)CD20小鼠体内存在多种与B细胞淋巴瘤相关 的抗原，刺激产生多种B淋巴细胞 (3)既能迅速大量增殖，又能分泌所需的双特异性抗 体双特异性抗体可将T细胞和B细胞淋巴瘤细胞 特异性结合，使T细胞能识别并杀伤B细胞淋巴瘤 细胞 (4)容易引发免疫排斥反应 特训15 1.B[质粒是一种独立于真核细胞（如酵母菌）的细胞 核或原核细胞（如细菌）拟核之外，并具有自我复制能 力的环状双链DNA分子，A错误：E.coli DNA连接 酶能将具有互补黏性末端的DNA片段连接起来，也 能连接具有平末端的DNA片段，只是连接效率较低， B正确；构建重组质粒时使用的启动子应能启动药用 蛋白基因在乳腺细胞中表达，C错误：基因表达载体 的构建是乳腺生物反应器制作的核心工作，D错误。] 2.D[根据题目信息中对葡萄糖异构酶(GI)的改造过 程及蛋白质工程的概念，可以确定该项生物工程技术 为蛋白质工程，A正确；蛋白质工程的设计从蛋白质 功能出发，由于基因控制蛋白质的合成，蛋白质工程真 正的操作是从改造基因着手，所以需要确定目的基因的 碱基序列后改造目的基因，B正确：该蛋白质工程针对目 的基因的改造，主要是改变相应碱基的种类（氨基酸种类 的替换)，该过程中必然要涉及碱基互补配对原则，C正 确：基因表达的过程需要经过转录、翻译等过程，该过程 需要多种酶及其他物质参与，还需要细胞提供能量，不能 在简单的营养液中完成，D错误。] 3.CL将质粒A或重组质粒导入细菌B,常用Ca2+处 理细胞，使之处于能够主动地从周围环境中吸收 DNA的状态，A正确；根据题意，细菌B不含有质粒 A及其上的基因，即没有抗氨苄青霉素基因和抗四环 素基因，质粒A含抗四环素基因和抗氨苄青霉素基 因，基因发生重组时抗四环素基因被破坏，保留抗氨生物 特训14 细 （时间：45分钟 一、选择题：本题共16小题，每小题3分，共48 分。其中15、16题根据本省题型选做。 1.以下为植物体细胞杂交技术流程图，其中甲 和乙分别表示两种二倍体植物细胞，所含有 的染色体组分别是AA和BB。据图分析正 确的是 甲0 z西卧 A.经①过程获得的a、b称为原生质层 B.c细胞只有AABB这一种类型 C.过程④和⑤分别是分化和再分化 D.获得的植物d因为有同源染色体所以可育 2.2024年1月河南首例克隆羊“小龙”在商丘诞 生。研究人员采集了大耳公羊“大龙”的皮肤 慕 组织，利用体细胞克隆技术获得克隆胚胎，并 将胚胎移植到普通的波尔山羊的子宫内 150天后，克隆羊“小龙”顺利诞生，这标志着 河南省家畜动物生物育种领域取得了新的突 破。下列有关说法错误的是 A.克隆羊“小龙”的诞生体现了动物体细胞的 细胞核具有全能性 B.应将皮肤组织细胞核植入培育到MⅡ期的 去核卵母细胞中 C.体外培养胚胎需加入动物血清，并培育到 阳 原肠胚再进行移植 D.进行胚胎移植前，要对波尔山羊用激素处 理使其同期发情 3.在体细胞克隆猴培育过程中，为调节相关基 因的表达，提高胚胎的发育率和妊娠率，研究 人员将组蛋白去甲基化酶Kdm4d的mRNA 注入了重构胚，同时用组蛋白脱乙酰酶抑制 剂(TSA)处理，具体流程如图所示。下列说 法错误的是 凶 Kdm4d的mRNA 胎袭取出体细胞用灭活的仙台病毒超暂处理 注入 母猴采集，卵母细胞去校去核卵母细胞 堆养，重构函 融合 母猴 ↑处理 TSA A.常用显微操作法去除由核膜包被的卵母细 胞的细胞核 B.灭活的仙台病毒可使细胞膜上的蛋白质和 脂质分子重新排布，利于融合 53 胞工程 满分：100分) C.组蛋白去甲基化和乙酰化的表观遗传修饰 都有利于重构胚的分裂和发育 D.为得到遗传背景相同的克隆猴，可将早期 胚胎均等分割后再进行胚胎移植 4.酸性土壤是pH小于7的土壤总称，包括红 壤、黄壤、砖红壤、赤红壤等。酸性土壤在世 界范围内分布广泛，在农业生产中占有重要 地位。如图表示利用耐酸植物甲(4V)和高产 植物乙(2N)培育高产耐酸杂种植物的过程， 图中序号表示过程或处理手段，字母表示细 胞、细胞结构或组织名称。下列叙述正确 的是 甲植物① A 细胞 >②C®杂种④D⑤杂种 乙植物① →植株 →B 细胞D 细胞 A.①过程用到的酶是纤维素酶，A、B表示原 生质层 B.②过程可以使用PEG或灭活的病毒诱导 C.③过程得到的杂种细胞含有3个染色体组 D.④⑤过程使用的培养基需加入生长素和细 胞分裂素，但加入的比例不同 5.关于动物细胞培养和植物组织培养的叙述， 正确的是 () A.动物细胞培养和植物组织培养所用培养基 成分不同，但能源物质相同，都是葡萄糖 B.植物组织培养无须添加抗生素，动物细胞 培养过程中必须添加抗生素 C.通过烟草叶片离体培养能产生新个体，可 获单倍体烟草植株 D.动物细胞培养可用于检测有毒物质，茎尖 培养可用于植物脱除病毒 6.我国科学家成 功构建了具有 高比例胚胎干 4CL干细胞 桑获胚 嵌合囊胚 细胞的活产嵌 合体猴。如图 所示，研究人 员将4CL体系 嵌合体猴 嵌合原肠胚 下培育的，可表达绿色荧光蛋白的供体猕猴 的胚胎干细胞（简称4CL干细胞）注射至与其 遗传信息不同的猕猴胚胎中，最终得到嵌合 体猴。下列叙述正确的是 ( A.为防止细菌污染，培养4CL干细胞时可向 培养液中加入适量的干扰素 B.4CL干细胞注入桑葚胚后会与其他胚胎细 胞发生融合进而形成嵌合体 C.对嵌合囊胚或原肠胚进行胚胎分割后移 植，可以产生更多的嵌合体猴 D.嵌合体猴部分细胞可发出绿色荧光，其遗 传信息不一定能遗传给后代 7.选择合适的材料、方法和技术会使生产或实 验取得更大的进展，下列相关叙述正确的是 ()》 A.选择和人基因相似度更高的灵长类动物， 解决人类器官移植的来源问题 B.单倍体育种获得的纯合二倍体是进行体细 胞诱变育种、研究遗传突变的理想材料 C.用核移植技术培育“三亲婴儿”，可避免母 亲的线粒体遗传病基因传递给后代 D.利用植物组织培养技术培育脱毒苗，可获 得抗病毒的新品种 8.研究人员以拟南芥愈伤组织为材料，探究 IAA诱导愈伤组织生根的作用，结果如下表。 下列相关说法正确的是 组别 培养基 植物类型 生根数（条） 1组 RIM 野生型 75 2组 RIM W8突变体 60 3组不含IAA的RIM 野生型 59 4组不含IAA的RIMW8突变体 17 注：RIM为诱导生根的培养基，配方中含有 IAA;W8为IAA合成基因 A.愈伤组织细胞排列疏松，高度液泡化，分化 程度高 B.诱导愈伤组织生根需要避光，诱导生芽需 要光照处理 C.野生型细胞自身产生的IAA促进了其在 不含IAA的RIM生根 D.若增加1组培养基中IAA的浓度，推测其 生根的效果会更好 9.兰花是多年生草本植物，与梅、竹、菊并称“四 君子”。如图为兰花的植物组织培养流程， ①~④表示相应过程。下列叙述正确的是 兰花植物体①组织块@愈伤组织 ④ 一试管苗®」 A.过程①是获取离体幼嫩枝条，用适宜浓度 的酒精和次氯酸钠的混合液消毒 B.过程②发生了细胞的脱分化、有丝分裂和 减数分裂 ·5 C.过程③诱导生芽培养基与诱导生根培养基 相比，前者中细胞分裂素所占的比例更高 D.过程④是将培育形成的试管苗直接移栽 人土 10.科学家通过转基因技术获得了含有人生长 激素基因的奶牛，利用其乳腺生产人生长激 素，为加速转基因奶牛的繁育，对此转基因 奶牛进行克隆，过程如图所示。下列有关叙 述错误的是 ) o ⊙ o⊙o⊙ 细胞培养 含有人生长 去核 →（○ 一 → 激素基因的 奶牛体细胞 ⊙ 重组细胞重组胚胎 犊牛 采集卵母细胞 A.重组胚胎移植到代孕母牛之前需进行性 别鉴定 B.可采用电融合法使供体细胞和去核卵母 细胞融合 C.细胞培养前，可采用酶解法将动物组织分 散成单个细胞 D.将重组胚胎移到雌性奶牛体内，通常不会 发生免疫排斥 11.利用体细胞核移植技术克隆优质奶牛的流 程如图。下列叙述错误的是 甲牛一→C88 射 ①供体细胞培养 金（童活并描参早期整移丝代两牛 乙牛→（ ○( 重构胚 生出后代丁牛 A.过程①定期更换培养液能保证营养供应 和清除代谢物 B.过程②可用紫外线短时间照射使卵母细 胞的DNA变性 C.过程③将激活后的重构胚培养至桑葚胚 或囊胚后移植 D.丁牛的遗传物质全部来自甲牛，其性状与 乙牛、丙牛无关 12.大口黑鲈是一种高产养殖鱼，如感染LMBV 病毒会大规模减产。科研人员制备识别 LMBV表面MCP蛋白的单克隆抗体，实现 了对LMBV的快速检测。再将MCP基因 剪切得到不同长度的片段，表达出相应蛋白 (P1~P4),以确定单克隆抗体识别MCP蛋 白的特定部位，结果如下表所示。下列叙述 正确的是 ( ) MCP基 1-90bp 61~150bp 121~210bp 181-303bp 因片段 MCP蛋 Pl p2 P3 P4 白片段 单克隆抗体 结合情况 十 注：bp为碱基对，“十”表示发生特异性结合， “一”表示未发生特异性结合 A.单克隆抗体的制备利用了细胞具有全能 性的原理 B.选择培养基筛选出的杂交瘤细胞，均能分 泌抗MCP的抗体 C.为大量增殖杂交瘤细胞，可将杂交瘤细胞 注射到小鼠脾脏内 D.推测MCP基因1~60bp的片段编码单 克隆抗体的识别位点 13.CD318是一种跨膜蛋白，该蛋白质在大多数 癌细胞中高度表达，下列有关抗CD318单克 隆抗体制备的说法中错误的是 A.抗CD318单克隆抗体可用于CD318的检 测、定位 B.制备抗CD318单克隆抗体前要纯化 CD318并多次免疫小鼠 C.经选择培养基即可筛选出能产生抗 CD318单克隆抗体的杂交瘤细胞 D.筛选的杂交瘤细胞应置于95%的空气和 5%的CO2环境中进行细胞培养 14.诱导多能干细胞(iPS细胞)是类似胚胎干细 胞的一类细胞。科研人员把四种转录因子 基因转入人体（供体）的体细胞中，诱导获得 PS细胞后再应用于供体本身。这一研究成 果为某些疾病的基础研究及其临床应用提 供了一种新的思路。下列叙述错误的是 ( A.培养PS细胞时要保证无菌无毒环境，并 定期更换培养液 B.体细胞经诱导成为PS细胞后细胞中的 RNA发生改变 C.经诱导获得的PS细胞移植回患者体内 一股不发生免疫排斥反应 D.供体的PS细胞通常可以用于治疗供体 自身红绿色盲等基因突变导致的病症 选做题 15.小鼠是生物实验室常用的模型生物，现有一 只胰岛素抵抗模型黑鼠，科学家通过诱导模 型鼠体细胞转化获得iPS细胞，并将其注射 到四倍体囊胚中，继而培育出克隆鼠X,实 验流程如图。下列说法正确的是 () 诱导因子 +忠m人+ 黑鼠（体细胞供体） 体细胞 PS细胞 1 一一生出 灰鼠（胚胎供体） 四倍体囊胚重组囊胚白鼠（代孕母鼠）克隆鼠义 A.图中所用的体细胞可以是成纤维细胞，也 可以是已分化的T细胞、B细胞 B.PS细胞与ES细胞一样具有细胞周期和 组织特异性 ·5 C.胚胎移植前需对图中的白鼠注射激素进 行同期发情和超数排卵处理 D.移植后的重组囊胚进一步扩大，滋养层破 裂，胚胎从其中伸展出来 16.华西牛是我国具有完全自主知识产权的专 门化肉牛新品种。科研人员在生产中采取 胚胎工程的手段实现了华西牛的快速繁育。 下列叙述错误的是 A.采集的华西牛精子需要进行获能处理后 在适当的培养液中完成受精 B.可以选择发育良好的囊胚进行分割，获得 同卵双胎或多胎 C,受体母牛需性状优良且有较强的繁殖力， 胚胎移植前需进行同期发情处理 D.移植胚胎前无需对代孕母牛进行免疫排 斥反应检测 ★15.（不定项）1959年，美籍华人张明觉首次实 现哺乳动物体外受精：从免子的子宫回收获 能的精子，在体外同卵子结合，然后根据“同 步化”的原理，将早期胚胎移植到另一只假孕 雌兔的子宫中，经过“借体怀胎”繁殖出世界 上第一只通过体外受精培育成功的仔兔。下 列叙述错误的是 ) A.为防止受体对移植的胚胎发生免疫排斥， 供体和受体要进行同期发情处理 B.体外培养受精卵时需要给予一定量的 CO2,以维持培养液pH的相对稳定 C.囊胚期透明带会破裂，胚胎从中伸展出来， 该过程叫孵化 D.移植前通常用分割针取内细胞团细胞做 DNA分析以鉴定胚胎性别 ★16.（不定项）猪的生理特征、器官大小以及胚 胎发育方面与人类具有很高的相似性，成为 “种植”人类器官的热门动物。如图为我国科 学家利用猪培育可用于移植的人源肾脏的相 关过程。下列叙述正确的有 ( ● 香) SX/缺略的猪胎 SIXI/SAI山1缺 代孕母猪 肾脏缺陷胚胎 儿成纤维细胞 路的早期胚胎 注人人激干细胞 猪的重构 猪的去棱卵母细胞 ● 6 代孕母猪 嵌合胚胎 A.推测SIX1/SALL1两种基因是人源肾脏 发育所必需的基因 B.可用Ca2+载体、乙醇等化学方法激活重 构胚 C.注入人源干细胞的作用是使人源干细胞分 化产生人的组织和器官 D.选取桑葚胚期细胞检测，可确定得到的嵌 合胚胎中是否有人源肾脏 二、非选择题：本题共3小题，共52分。 17.(18分)三七富含三七皂苷、三七多糖、三七 素、黄酮等有效成分，具有止血、活血化瘀 消肿定痛、滋补强壮、抗疲劳、耐缺氧、抗衰 老、降血脂、降血糖、提高机体免疫功能等众 多作用。为了获取上述有效成分，某制药公 司利用植物组织培养技术，从培养的愈伤组 织中提取这些有效成分。请回答下列问题。 (1)培养时，通常选择新生营养芽作为外植 体，这是因为 。外植体经诱导后形成愈伤组织的 过程称为 ,此过程需要使用的生长 调节剂是 (填“脱落酸”或“2,4一D”)。 (2)多倍体的愈伤组织细胞产生的有效成分 量常高于二倍体。为了获得更多的有效成 分，科研人员利用 处理二倍体愈伤组织细胞，使其细胞中的染 色体数目加倍。欲确定愈伤组织细胞中的 染色体数目，通常需制成装片，进行显微镜 观察，此过程中需要对染色体染色，常用的 染色剂是 (3)为获得多倍体的愈伤组织细胞，也可以 先用 酶去除细胞壁，获得 具有活力的 。 再用化学 诱导剂诱导细胞两两融合，形成的融合细胞 进一步培养形成愈伤组织。若要得到多倍 体植株，可在上述的基础上，再经 形成。 18.(18分)有些婴儿由于体内缺乏足够的乳糖 酶，无法消化牛奶中的乳糖，导致喝奶后产 生一些不良反应，如腹泻等。科研人员利用 体细胞克隆和转基因技术成功培育了含有 乳糖分解酶基因的奶牛一拉克斯牛，过程 如图所示。请据图回答问题。 7 →静 →oood、 怀孕45天的胚胎成纤 入转染 黑白花奶牛 维细胞 重组细胞 99 乳糖分解 酶基因 ⊙经 乳糖分解酶基因 采集卵母细胞 犊牛重组胚胎重组细胞2 (1)培育过程包含三次细胞培养。培养细胞 时，需在培养基中加入适量的 ,以 补充合成培养基中缺乏的物质。向培养液 中通入适量的CO2,目的是 当出现接触抑制时要用 处理，然后继续分瓶培养。 ·56 (2)要获得乳糖分解酶基因，必须用限制酶 切割。在图中的①②两个酶切位点，常常选 用 (填“不同”或“相同”)的限制酶 进行酶切，这样可以避免目的基因和载体酶 切后产生的黏性末端发生任意连接。在用 PCR技术对该基因扩增前，要设计 种引物，设计引物序列的主要依据是 。与细胞内DNA的复 制相比，PCR过程中需要的酶是 (3)过程Ⅲ证明了高度分化的动物细胞的细 胞核具有 19.(16分)B细胞淋巴瘤是一种恶性肿瘤，对该 肿瘤的治疗方案目前有双特异性抗体治疗、 E厨 CAR一T细胞疗法等。生产用于治疗B细 胞淋巴瘤的双特异性抗体过程及其作用机 制如图所示。 注射特定多种B淋巴 的抗原X 分滋 ① ②军胞融 合、筛选 分泌， 培养骨葡 、①侧筛选●( CD20/ CD3 粕细底 癌细脂T细胞 些 多种B球巴 注射T细胞表面 细胞 抗原CD3 注：CD20为癌细胞表面蛋白，CD3为T细胞 表面蛋白。 回答下列问题。 (1)图中步骤①细胞融合的方法为 在培养杂交瘤细胞时，需定期更换培养基， 烯 其目的是 (2)图中特定的抗原X为 。 从小 鼠体内提取得到多种B淋巴细胞的可能原 因是 (3)图中步骤②筛选得到的细胞具有的特点 是 ,请据图推测利用双特异性抗 体治疗B细胞淋巴瘤的原理是 (4)CAR一T细胞疗法是采集患者T细胞， 经基因改造后能表达出CAR受体，使其能 与B细胞淋巴瘤细胞特异性结合，将改造后 的CAR一T细胞扩增后回输到患者体内进 行治疗。与CAR一T细胞疗法相比，双特异 性抗体治疗的明显缺点是