专题9 小专题2 微生物的培养技术及应用-【备考最优解】2026版高考二轮专题复习·生物学(多选版教用课件)
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教辅
内容正文:
小专题2 微生物的培养技术及应用
保分点专攻 知识整合·融会贯通
01
2
D
高考引领
1.(2025·黑吉辽蒙选择考)科研人员通过稀释涂布平板法筛选出高耐受且降解金霉素(C22H23ClN2O8)能力强的菌株,旨在解决金霉素过量使用所导致的环境污染问题。下列叙述错误的是( )
A.以金霉素为唯一碳源可制备选择培养基
B.逐步提高培养基中金霉素的浓度有助于获得高耐受的菌株
C.配制选择培养基时,需确保pH满足实验要求
D.用接种环将菌液均匀地涂布在培养基表面
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解析:在以金霉素为唯一碳源的培养基中,只有能降解金霉素的微生物才能生存,因此以金霉素为唯一碳源可制备选择培养基,A正确;
在逐步提高金霉素浓度的培养基中能生存的菌株具有对金霉素的高耐受性,B正确;
配制选择培养基时,要确保培养基的pH等条件满足实验要求,C正确;
应用涂布器将菌液均匀地涂布在培养基表面,D错误。
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2.(2025·山东等级考)深海淤泥中含有某种能降解纤维素的细菌。探究不同压强下,该细菌在以纤维素或淀粉为唯一碳源的培养基上的生长情况。其他条件相同且适宜,实验处理及结果如表所示。下列说法正确的是( )
组别 压强 纤维素 淀粉 菌落
① 常压 - + -
② 常压 + - -
③ 高压 - + -
④ 高压 + - +
注: “+”表示有;“一”表示无。
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A.可用平板划线法对该菌计数
B.制备培养基的过程中,应先倒平板再进行高压蒸汽灭菌
C.由②④组可知,在以纤维素为唯一碳源的培养基上,该菌可在常压下生长
D.由③④组可知,高压下该菌不能在以淀粉为唯一碳源的培养基上生长
√
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解析:平板划线法可以分离微生物,获得单菌落,但不能进行计数,A错误;
制备培养基的过程中,应先进行高压蒸汽灭菌,再在酒精灯旁倒平板,B错误;
分析题表数据,比较②④组,两组均以纤维素为唯一碳源,②组常压条件下无菌落产生,④组高压条件下有菌落产生,说明在以纤维素为唯一碳源的培养基上,该菌可在高压下生长,C错误;
比较③④组,高压条件下,该菌在以淀粉为唯一碳源的培养基上不生长,而在以纤维素为唯一碳源的培养基上生长,D正确。
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3.(2025·陕晋宁青选择考)我国是世界上最大的柠檬酸生产国。利用黑曲霉通过深层通气液体发酵技术生产柠檬酸,流程如下图。下列叙述错误的是( )
A.淀粉水解糖为发酵提供碳源和能源
B. 扩大培养可提供足量的黑曲霉菌种
C.培养基、发酵罐和空气的灭菌方法相同
D.通气、搅拌有利于溶解氧增加和柠檬酸积累
C
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解析:淀粉水解糖属于糖类,能为发酵提供碳源和能源,A正确;
扩大培养可以增加黑曲霉的数量,提供足量菌种用于发酵,B正确;
培养基、发酵罐的常用灭菌方法是高压蒸汽灭菌法,而空气常用过滤除菌,C错误;
通气、搅拌可以增加溶解氧,同时使菌种与营养物质充分接触,有利于黑曲霉代谢,促进柠檬酸积累,D正确。
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知识整合
1.无菌技术常用方法
紫外线
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2.微生物的纯化技术
(1)制备马铃薯琼脂培养基
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(2)两种纯化微生物方法的比较
接种环
涂布器
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3.微生物分离与计数的两个实例
(1)土壤中分解尿素的细菌的分离与计数
选择
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(2)纤维素分解菌的分离
纤维素
红色复合物
透明圈
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关注两种对照组与一种重复组
(1)将一未接种的选择培养基与接种的选择培养基一起培养——用于确认培养基灭菌是否彻底(制备是否合格)。
(2)将一接种的普通培养基与接种的选择培养基一起培养——用于确认选择培养基是否起“筛选”作用。
(3)进行微生物计数时,每一稀释度下至少涂布三个平板,即设置重复组,目的是求平均值,提高计数准确度。
[易错提醒]
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[正误判断]
(1)(2023·山东T15)不含氮源的平板不能用于微生物培养。( )
(2)(2022·湖北T5)微生物、动物细胞培养基中需添加一定量的抗生素以防止污染。( )
(3)(2022·海南T12)培养细菌时,可选用牛肉膏蛋白胨固体培养基。( )
(4)(2022·江苏T3)某同学分离高产脲酶菌,可在选择培养基中添加尿素作为唯一氮源。( )
×
√
×
√
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(5)(2021·浙江6月T17)稀释涂布平板法和平板划线法均能得到单菌落,都可用于细胞计数。( )
(6)(2023·广东T10)研究者拟从堆肥中取样并筛选能高效降解羽毛、蹄角等废弃物中角蛋白的嗜热菌。根据堆肥温度变化曲线(如图)和选择培养基筛选原理来判断,最可能筛选到目标菌的条件组合是c点时取样、角蛋白氮源培养基。( )
×
√
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A
[强基训练]
1.(2025·辽宁高三开学考)研究表明,高浓度乙醇会使菌体表面蛋白迅速脱水凝固,从而影响乙醇继续渗入菌体发挥作用,降低杀菌效果。以下说法正确的是( )
A.涂布器在灼烧前通常要浸泡在一定浓度的乙醇中
B.植物组织培养时,不能使用乙醇对外植体消毒
C.适宜浓度的乙醇能杀死物体内外所有的微生物
D.无水乙醇的消毒效果优于其他浓度的乙醇
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解析:植物组织培养时,使用体积分数为70%的乙醇对外植体消毒,B错误;
灭菌才能杀死物体内外所有的微生物,乙醇只能起消毒作用,C错误;
根据题干信息可知,过高浓度的乙醇反而会导致消毒效果下降,D错误。
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2.(多选)中国科学院海洋研究所的研究员从近海采集了上千份塑料垃圾样本,经过大量筛选,发现了一个能在塑料表面具有明显定殖和降解能力的菌群。为分离纯化该菌种,下列做法正确的是( )
A.可用液体培养基对该菌种进行富集培养
B.可用以塑料为唯一碳源的固体培养基分离所需菌种
C.菌种涂布到培养基上后,应倒置培养皿进行恒温培养
D.平板上菌落的直径和颜色是鉴定菌种的主要依据
ABC
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解析:富集培养需要选用液体培养基,可以使菌体与营养物质充分接触,增加目标微生物的数量,A正确;
筛选降解塑料的菌种,需要配制以塑料为唯一碳源的固体培养基分离菌种,B正确;
将菌种涂布到培养基上后,待培养基冷却凝固,倒置培养皿可避免冷凝水污染菌落,C正确;
菌落的直径和颜色仅作为初步鉴定的依据,需结合其他方法进行准确鉴定,D错误。
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3.(2025·湖南多校高三联考)活性黑5是一种低毒性、难褪色的含氮染料。欲利用生物酶处理染料废水中的活性黑5,具体操作流程如下图所示。从染料废水堆积池的污泥中获得优势菌群,采用浓度梯度驯化法,进一步培养获得具备强分解活性黑5能力的假单胞杆菌,并进行基因表达分析。回答下列问题:
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(1)培养基Ⅰ和培养基Ⅱ均以_______________为唯一氮源,从用途上来看均属于__________培养基,该类培养基的特点是______________________________________________________________。
培养基Ⅱ是利用____________法将单个微生物分散在固体培养基上,之后经培养得到的单菌落一般是由单个微生物繁殖形成的_____________。
活性黑5
选择
允许特定种类的微生物生长,同时抑制或阻止其他种类的微生物生长
平板划线
纯培养物
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解析:培养基Ⅰ和培养基Ⅱ均以活性黑5为唯一氮源,均能筛选能利用活性黑5的微生物,故从用途上来看均属于选择培养基;选择培养基允许特定种类的微生物生长,同时抑制或阻止其他微生物生长。培养基Ⅱ是利用平板划线法将单个微生物分散在固体培养基上;一般由单个微生物繁殖形成的一团肉眼可见的纯培养物称为菌落。
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(2)假单胞杆菌中,BVU5蛋白分解活性黑5的场所最可能为____________(填“细胞质基质”“溶酶体”或“核糖体”);据题干信息推测,驯化后的假单胞杆菌增强了____________________________________过程。
解析:假单胞杆菌为原核生物,没有溶酶体,核糖体是合成蛋白质的场所,没有分解蛋白质的功能,细胞质基质中存在多种酶,最可能为BVU5蛋白分解活性黑5的场所。驯化后的假单胞杆菌增强了BVU5基因的转录和翻译过程,使BVU5蛋白的含量大大提高。
细胞质基质
BVU5基因的转录和翻译(或表达)
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(3)假单胞杆菌分解活性黑5能力的强弱可能与_______________________________________________________________________________(答出2点)因素有关。
解析:BVU5蛋白的含量、BVU5蛋白对活性黑5的分解速率、BVU5蛋白的空间结构都可能会影响假单胞杆菌分解活性黑5的能力。
BVU5蛋白的含量、BVU5蛋白对活性黑5的分解速率、BVU5蛋白的空间结构
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