内容正文:
微专题一
与酶相关的拓展实验
1.鉴定酶本质的两种常用方法
(1)试剂检测法
酶溶液
双缩
脲试剂
(2)酶解法
2.“梯度法”探究酶的最适温度
(1)设计思路
(2)设计方案
相应温度
保温
3.“梯度法”探究酶的最适pH
(1)设计思路
(2)设计方案
易错警示 ①在探究酶作用的最适温度时,酶溶液和反应物混合之前,要把两者先分别放在各自所需温度下保温一段时间,若选择淀粉和淀粉酶来探究酶的最适温度,检测的试剂宜选用碘—碘化钾溶液,不应该选用本尼迪特试剂。因为选用本尼迪特试剂需热水浴加热,而该实验中需严格控制温度。
②在酶的最适pH探究实验中,操作时必须先将酶置于不同pH条件下,然后再加入反应物。
1.某科研小组经研究得知,X酶存在于人的肝细胞中,能将糖原分解为还原糖。酶必须保持正常的结构才能发挥催化作用,请利用这一原理设计实验,探究X酶的化学本质究竟是蛋白质还是RNA。简要写出实验思路,并预期实验结果及结论(要求:实验包含可相互印证的甲、乙两个组)。
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答案 (1)实验思路:甲组:将X酶用蛋白酶处理,再与糖原溶液混合,在适宜条件下保持一段时间后,检测是否有还原糖的产生。乙组:将X酶用RNA酶处理,再与糖原溶液混合,在适宜条件下保持一段时间后,检测是否有还原糖的产生。
(2)预期结果及结论:①若甲组有还原糖生成,乙组没有还原糖生成,则说明X酶的化学本质是RNA;②若甲组没有还原糖生成,乙组有还原糖生成,则说明X酶的化学本质是蛋白质。
据题干信息可知,X酶的功能是能将糖原分解为还原糖,若X酶的化学本质是蛋白质,被蛋白酶处理后,则不能将糖原分解为还原糖;若X酶的化学本质是RNA,被RNA酶处理后,则不能将糖原分解为还原糖。题干中要求设计甲、乙两组实验,二者之间要能相互印证,因此联想相互对照。
2.为了探究某种淀粉酶的最适温度,某同学进行了如图所示的实验操作。实验步骤如下:
步骤①:取10支试管,均分为五组。每组两支试管中分别加入1 mL某种淀粉酶溶液和2 mL质量分数为5%的淀粉溶液。
步骤②:将每组淀粉酶溶液和淀粉溶液混合并摇匀。
步骤③:将装有混合溶液的五支试管(编号1、2、3、4、5)分别置于15 ℃、25 ℃、35 ℃、45 ℃、55 ℃水浴中。反应过程中每隔1分钟从各支试管中取出一滴反应液,滴在比色板上,加1滴碘—碘化钾溶液显色。
回答下列问题:
(1)实验原理:淀粉在淀粉酶的催化作用下分解成还原糖;淀粉酶的活性受温度影响;用碘—碘化钾溶液可检测淀粉,因为淀粉遇碘—碘化钾溶液变蓝,根据蓝色深浅来推断淀粉酶的活性。
(2)该实验的设计存在一个明显的错误,即步骤②前应________________
_______________________________________________________。
先将五组试管分
别在15 ℃、25 ℃、35 ℃、45 ℃、55 ℃的水浴中保温一段时间
该实验中在酶溶液和反应物混合之前,需要先把两者分别放在各自所需温度下保温一段时间。
(3)在本实验中,各组溶液的pH要保证____________,该实验能否选用本尼迪特试剂来检测实验结果?_______,理由是______________________
_____________________________________________________。
相同且适宜
不能
利用本尼迪特试剂检测时
需要热水浴加热,会改变各试管的温度,影响最终实验结果
本实验的自变量为温度,因变量为酶的活性变化,本实验通过淀粉遇碘—碘化钾溶液变蓝的深浅来推断其变化,而各组溶液的pH属于无关变量,要保证相同且适宜。利用本尼迪特试剂检测时需热水浴加热,会改变实验的自变量——温度,所以该实验不能选用本尼迪特试剂来检测实验结果。
(4)纠正实验步骤后,进行操作。一段时间后,当第3组试管中的反应物与碘—碘化钾溶液混合开始呈棕黄色时,各组实验现象如表所示(“+”表示蓝色程度)。
组别 1 2 3 4 5
处理温度/℃ 15 25 35 45 55
结果 ++ + 棕黄色 + ++
分析上述实验结果,可以得出该淀粉酶的最适温度在__________之间。某同学在进行本实验的过程中,发现反应时间过长。为缩短反应时间,请你提出合理的改进措施:_________________________________。
25~45 ℃
增加淀粉酶的量(或降低底物的浓度)
根据表中数据可知,第3组试管开始呈棕黄色,说明此试管中已经没有淀粉了,因此淀粉酶的最适温度介于25 ℃和45 ℃之间。
组别 1 2 3 4 5
处理温度/℃ 15 25 35 45 55
结果 ++ + 棕黄色 + ++
3.(2024·衢州高三期末)马铃薯块茎内富含过氧化氢酶,能催化过氧化氢水解。已知2H2O2 2H2O+O2,可以通过观察反应过程中的O2生成速率来判断过氧化氢酶的活性。某兴趣小组欲利用如图装置,探究pH对马铃薯块茎内过氧化氢酶活性的影响。请利用所给的材料用具,完善实验步骤,分析实验结果。回答下列问题:
材料用具:2%的过氧化氢溶液,缓冲液(pH 5.0、pH 6.0、
pH 7.0、pH 8.0),马铃薯,滤纸片,注射器,橡胶盖若
干,研钵,培养皿等(要求与说明:实验中所加溶液的
具体量不作要求)。
(一)完善实验步骤:
(1)制备马铃薯匀浆。将马铃薯洗净切成小块,放入研钵,加入少许______以利于充分研磨;研磨后用尼龙布过滤,得到酶提取液备用。
将马铃薯切成块,然后加SiO2充分研磨,过滤就可得到匀浆。
SiO2
(2)取__________的滤纸片若干放在盛有马铃薯匀浆的培养皿中浸泡1 min,然后用镊子夹起滤纸片,贴靠在培养皿壁上,流尽多余的匀浆。
实验设计时要遵循单一变量原则和对照原则,因此要取相同大小的滤纸片。
相同大小
(3)取4支注射器并编号后,分别加入等量的马铃薯匀浆浸泡过的滤纸片。
(4)每支注射器先分别吸入等量的________,然后再用针筒吸入___________溶液,用橡胶盖密封针嘴。每隔一段时间,记录相关实验数据。
实验设计时要遵循单一变量原则和对照原则,因此要分别吸入等量的缓冲液和等量的H2O2溶液。
缓冲液
等量的H2O2
(二)记录实验结果:
通过设计实验结果记录表来记录0.5 min和1 min时的实验结果。
(三)分析与讨论:
(5)本实验的自变量是________。
实验探究pH对过氧化氢酶活性的影响,实验的自变量为酸碱度,因变量是过氧化氢酶活性。
酸碱度
(6)某同学将其中1支注射器中收集到的数据绘制成如图曲线1,他想改变某一条件,让实验结果变成曲线2,则需改变的条件是____。
A.增加滤纸片数量
B.将温度提高到80 ℃
C.增加过氧化氢溶液的浓度
D.将注射器换成更大容积的
C
曲线2产生的气体量明显增多了,增加反应物的浓度可以提高产物的量,因此C正确。
(7)若实验中只有1支注射器,每次实验后,先用水充分冲洗反应小室,然后再用_____________冲洗一遍,原因是____________________________________。
所有实验都要保证实验用品不混淆,不应该有上一次反应后的残留物,为保证实验的准确性,先用水充分冲洗反应小室,然后用相应缓冲液再冲洗一遍。
相应缓冲液
保证缓冲液pH的准确度,避免实验误差
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