第4章 基因工程（拔高练）-【学霸黑白题】2025-2026学年高中生物选择性必修3 生物技术与工程（浙科版）

合，无需接触抗原就能产生抗体，C错误；与单克隆抗体相比，双抗增 加了一个特异性抗原结合位点，为抗体带来了更强的特异性和更好 的靶向性，提高了生物导弹的靶向作用，D正确。故选C 第四节对动物早期胚胎或配子进行处理 可获得目标个体 1.C解析：实验过程中，需要从雌性小鼠体内获得多枚卵母细胞，一般 可采取的方法是向多只雌性小鼠注射一定量的促性腺激素，从输卵 管冲出多枚卵母细胞，A正确：受精的标志是观察到卵细胞膜和透明 带的间隙中有两个极体，B正确；从题图中可以看出，L-1B对小鼠 的受精作用具有抑制作用，但并不是随浓度的升高，抑制作用越强， 如L-1B浓度为0.5ng·mL1时抑制作用比L-1B浓度为 0.05ng·mL-1时要弱，C错误；若要研究L对小鼠早期胚胎发有的 影响，则需要利用上述培养液，继续观察统计不同发育时期胚胎的发 育情况，D正确。故选C。 2.C解析：去核实质上是去除纺锤体-染色体复合物，从而确保为重组 细胞提供的只是质的部分，但显微操作法需要穿透卵母细胞透明带 A错误；将组蛋白去甲基化酶Kdm4d的mRNA注入了重构胚，使其 翻译成组蛋白去甲基化酶Kdm4d,降低组蛋白的甲基化水平；用组蛋 白脱乙酰酶抑制剂TSA处理重构胚，可以通过抑制组蛋白脱乙酰酶 的作用，提高组蛋白的乙酰化水平，B错误；胚胎移植前需要进行胚 胎质量检查，胚胎移植后需要对受体是否妊娠进行检查，因此胚胎移 植的过程中要经过两次检查，C正确：胚胎分割可以获得多个胚胎， 无法提高移植胚胎成活率，D错误。故选C。 3.B解析：应用1中获得的小牛为克隆牛，其细胞核遗传物质来源于 供体1，细胞质遗传物质来源于供体2，且性别取决于供体1的高产 奶牛，性别为雌性，A正确：应用2、3、4所用的受精卵不一定来源于 体外受精，也可以来自体内受精，B错误：对囊胚阶段的胚胎进行分 割时，需要将内细胞团进行均等分割，否则会影响分割后胚胎的恢复 和进一步发育，C正确：应用4中细胞为胚胎干细胞，进行定向诱导， 可分化形成各种组织和器官，用于器官移植研究，D正确。故选B。 第四章基因工程 第一节基因工程赋予生物新的遗传特性 课时1基因工程的基本工具 1,C解析：酶3切割后得到的是平末端，应该用T4DNA连接酶连接 A错误：质粒用酶3切割后得到平末端，目的基因用酶1切割后得到 的是黏性末端，二者不能连接，B错误：质粒和目的基因都用酶1和 酶2切割后得到黏性末端，用T4DNA连接酶连接后，还能保证目的 基因在质粒上的连接方向，此重组表达载体的构建方案最合理且高 效，C正确；若用酶2和酶4切割质粒和目的基因，会破坏质粒上的抗 生素抗性基因，连接形成的基因表达载体缺少标记基因，无法进行后 续的筛选，D错误。故选C。 2.(1)磷酸二酯键(2)ABC(3)661790(4)4(5)BamH I MspI和SmaI会破坏目的基因，MboI会将质粒上的两个标记基因 全破坏，BamH I在目的基因两端和质粒抗生素A抗性基因上有识别 序列，既能形成重组质粒，又因破坏2个标记基因中的一个利于筛选 解析：(1)限制性内切核酸酶切断的化学键的具体名称是磷酸二酯 键。(2)限制酶能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并 且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂，即 催化的是一种水解反应，A正确：限制性内切核酸酶的活性受温度 pH的影响，在最适宜的温度和pH条件下，酶的活性最高：温度和pH 偏高或偏低，酶的活性都会明显降低：在过酸、过碱或温度过高条件 下酶会变性失活，而在低温条件下酶的活性降低，但不会失活， B正确：一种限制性内切核酸酶只能识别双链DNA中某种特定的脱 氧核苷酸序列，并在特定的位点切割磷酸二酯键，说明酶具有专 性，C正确：限制性内切核酸酶识别序列越短，则该序列在DNA中出 现的概率就越大，D错误。故选ABC。(3)若用限制酶SmaI完全切 割图1所示DNA片段，产生长度为534+3=537bp,796-3-3= 790bp,658+3=661bp的三种产物。(4)由题图可知，目的基因D有 2个酶切位点，杂合子D可以切成3种不同长度的片段，突变后的只 拔高练参考答案 有1个酶切位点可以切成2种不同长度的片段，其中有1种和基因D 相同，故共产生4种不同长度的片段。(5)在构建重组质粒时，目的 基因D不能用限制酶MspI和SmaI切割，这两种限制酶切割的位点 在目的基因的中间，会破坏目的基因D;也不能用限制酶MboI,其切 割位点在质粒上有两个，如果用其切割质粒，会破坏标记基因，就没 办法进行重组质粒的检测，故应选用限制酶BamH I,原因为BamH I在目的基因两端和质粒抗生素A抗性基因上有识别序列，既能形 成重组质粒，又因破坏2个标记基因中的一个利于筛选。 四名师点睛 本题结合基因结构图和载体结构图，考查基因工程的技术和原 理，要求学生认真分析题图1和题图2，根据题图1中信息计算限 制酶SmaI切割产生的片段的种类及长度；根据题图1和题图2 中限制酶的切割位，点，明确构建基因表达载体只能用限制酶 BamH I,再运用所学的知识答题即可。 课时2基因工程的基本操作 1.B解析：分析题图可知，启动子在左侧，GFP基因整合Gala3基因的 右侧，启动子启动转录后，可以使GEP基因转录，Gata3基因的启动 子能控制GFP基因的表达，A错误；因启动子在左侧，转录的方向向 右，合成的mRNA从左向右为5'→3'，刚好是翻译的方向，所以翻译 时先合成Gata3蛋白，再合成GFP蛋白，B正确：整合GFP基因后，核 酸片段变长，2号个体只有大片段，所以是Gata3-GFP基因纯合子， 4号个体只有小片段，是野生型，C错误：用引物1和引物3进行PCR 扩增，扩增出的片段大小差异较小，无法较好的区分片段，D错误。 故选B。 2.B解析：目的基因表达产物不能影响受体细胞的生存和活性，因此 转人的L-PG基因表达产物不能影响酿酒酵母活性，A正确：PCR技 术是一项体外扩增基因的技术，依据碱基互补配对原则，可以用于筛 选含有L-PG基因的受体细胞，B正确；由图可知，通过同源重组实现 酵母菌的PD基因被替换为L-PG基因，C正确；标记基因amp可筛 选含有目的基因的受体细胞，但不能检测是否成功构建乳酸乙酯高 产菌株，D错误。故选B。 3.C解析：分析题图可知，表达载体中s办的启动子为启动子1，dgS的 启动子为启动子2，两者表达相互独立，A正确；获取目的基因的方法 有利用DNA杂交技术从链霉菌的基因文库中获取s和dgS,B正 确；分析题图可知，根据基因插入位置，在构建表达载体时所需的限 制酶是BamH I、SpeI、SacI,C错误；若受体白玫瑰细胞不变蓝，可 能办和dgS未成功导入或表达不成功，D正确。故选C。 4.(1)负反馈调节过量赖氨酸类似物(2)①基因数据库②融 合③核受体细胞激活④早期囊胚⑤转基因BEF DNA 酶PCR的模板构建的表达载体只含有乳腺特异性启动子，只能 在乳腺细胞中启动转录，而在牛耳细胞中不能表达 解析：(1)负反馈调节是指在一个系统中，系统工作的效果，反过来 又作为信息调节该系统的工作，并且使系统工作的效果减弱或受到 限制，有助于系统保持稳定。植物细胞合成的懒氨酸达到一定浓度 时，能抑制合成过程中两种关键酶的活性，导致赖氨酸含量维持在 定浓度水平，这种调节方式属于负反馈调节。如果想得到抗赖氨酸 类似物的细胞突变体，可在培养基中添加过量赖氨酸类似物。 (2)①从基因数据库获取目的基因编码序列，用化学合成法制备可 得到目的基因。②表达载体包裹到磷脂等构成的脂质体内，根据细 胞膜成分流动性，其与BEF膜发生融合。③去核的卵母细胞作为受 体细胞，其处于减数第二次分裂中期，因为卵母细胞中含有促使细胞 核表达全能性的物质和营养条件。电融合的作用除了促进细胞融 合，同时起到了激活重组细胞发育的作用。④胚胎发育到适宜阶段 可取出向受体移植。牛、羊一般要培养到桑葚胚或囊胚阶段，植人代 孕母牛子宫角，直至小牛出生。⑤阳性对照：按照当前实验方案一定 能得到正面预期结果的对照实验。阳性对照是已知的对测量结果有 影响的因素，目的是确定实验程序无误。阴性对照和阳性对照相反， 按照当前的实验方案一定不能得到正面预期结果的对照实验。排除 未知变量对实验产生的不利影响，本实验以非转基因牛耳组织细胞 黑白题35 作为阴性对照，为了检测到转基因牛耳组织细胞中存在目的基因。 应该以含有目的基因的牛耳组织细胞为阳性对照。为了除去DNA 污染，可以使用DNA酶使其水解。经逆转录形成cDNA,并以此为 PCR的模板进行扩增。目的基因在转基因牛乳汁中的脱落细胞内表 达，而不在牛耳组织细胞内表达，原因是构建的表达载体只含有乳腺 特异性启动子，只能在乳腺细胞中启动转录，而在牛耳细胞中不能 表达。 第二节基因工程及其延伸技术应用广泛 1.A解析：要想使蛋白酶热稳定性有所提高，就要改变蛋白质的结 构，此类问题一般是对蛋白质中的个别氨基酸进行替换。 2.B解析：白细胞介素属于免疫活性物质，但不是抗体，A错误：蛋白 质工程可以生产自然界中本不存在的蛋白质，据题可知，通过题中过 程可以产生新的蛋白质，所以属于蛋白质工程，B正确：蛋白质工程 通过对基因修饰或基因合成间接改造蛋白质的结构从而改变其稳定 性，C错误；基因表达蛋白质的过程遵循中心法则，D错误。故选B。 3.C解析：检测A,活性时应先将A1与底物分别置于高温环境，保温一 段时间再混合，如果先混合后保温不能保证酶与底物在最适温度条 件下进行反应，A错误；T4溶菌酶的改造属于蛋白质工程，酶大多数 是蛋白质，少数是RNA,蛋白质工程只能用于改造蛋白质，B错误；据 题意可知，科学家利用蛋白质工程技术，对编码T4溶菌酶的基因进 行改造，从而实现氨基酸替换和二硫键的形成，C正确；蛋白质工程 的基本途径：从预期蛋白质的功能出发→设计预期的蛋白质的结 构→推测应有的氨基酸序列+找到相对应的脱氧核苷酸序列，蛋白 质工程与中心法则(DNA+mRNA→蛋白质)的流动方向相反，D错 误。故选C。 4.B解析：镰刀形贫血症患者的红细胞形态会变成镰刀形，故可以用 光学显微镜观察，A正确；结合电泳结果可知，Ⅱ1基因型为BB Ⅱ，基因型为bb,Ⅱ3基因型为Bb,Ⅱ4基因型为BB,其中纯合的是 Ⅱ1、Ⅱ2和Ⅱ4，B错误；突变基因的序列为-ACGTGTT-,故转录 的mRNA的序列是-UGCACAA-,C正确：该病是由致病基因b引起 的，故把正常的血红蛋白基因导入患者的骨髓造血干细胞中，可以治 疗该病，D正确。故选B。 第五章生物技术的安全与伦理 第一节转基因产品的安全性引发社会的 广泛关注 1.B解析：转基因食物产品通常导入了外来基因，由于基因间的互作 等原因，安全检测是必需的，A错误：转基因玉米由于导入了抗虫基 因，故其在环境保护上的重要作用是减少了农药使用对环境造成的 污染，B正确：种植转基因植物有可能因基因扩散而影响野生植物的 遗传多样性，故应在种植时划分区域，注意其与非转基因植物的距离 等，C错误；保证转基因产品的安全应是趋利避害，不能因噎废食，故 不能通过减少农业转基因技术的研发来保证转基因产品的安全，D 错误。故选B 2.B解析：转基因技术应用的基本原理是基因重组，转基因作物是转 基因技术的一种产物，此外还有转基因动物、转基因药物等，A正确。 转基因生物的成功培育是转基因技术取得的丰硕成果。该技术具有 双刃剑效应，既可以造福人类，也可能给人类带来灾难，面对转基因 技术可能产生的负面影响，应理性看待，从多个方面，多个角度进行 防范，严格管理，有效控制，趋利避害，不能因噎废食，B错误。科学 家必须在现有知识与技术的基础上尽量考虑转基因作物可能存在的 风险并采取相应的防范措施，C正确。国家必须对转基因作物研究 制定相应的法律法规，并进行严格管理与有效控制，D正确。故 选B。 3.D解析：培育转基因不育株系的配子不育，可避免YCF1基因随花 粉扩散造成基因污染，A正确：由题图1可知，与野生型比，转基因植 株的干重更大，转基因植株对Cd污染具有更强的耐受能力，B正确 据题图2可知，叶片中的Cd含量是最高的，故对杨树的茎叶进行后 续处理对于修复Cd污染土壤最为方便有效，C正确：YCF1向液泡内 选择性必修三·ZK 转运镉离子是逆浓度梯度运输，故需要消耗细胞代谢释放的能量， D错误。故选D。 第二节我国禁止生殖性克隆人 1.C解析：设计试管婴儿在胚胎植入母体前进行遗传学诊断，以确定 这个胚胎是否符合要求，如取其某些细胞如脐带血，A不符合题意； 帮助不孕夫妇孕育胎儿并顺利出生，不论是男是女，是大多数人能够 接受的，它符合人类的伦理道德，B不符合题意：利用“设计试管婴 儿”技术设计畸形胎儿，以供展览，是违背伦理道德的，C符合题意； 用设计试管婴儿提供骨髓造血干细胞，救治病人是多数人能够接受 的，D不符合题意。故选C。 2.C解析：供体细胞注入去核卵母细胞后，还需通过电融合法等诱导 融合，使供体核进人卵母细胞，形成重构胚，A正确：治疗性克隆的 E$细胞来源于供体细胞，在核遗传上和供体细胞相同，B正确：治疗 遗传病的根本措施是基因治疗，C错误：治疗性克隆的目的是培养出 能够用于医学治疗的供体器官，以解决目前临床上存在的供体器官 不足和移植后免疫排斥的问题，D正确。故选C。 3.D解析：卵母细胞去核可通过显微操作实现，A正确：胚胎干细胞具 有不断增殖和分化的潜能，具有发育的全能性，因此胚胎干细胞可通 过不断增殖和分化形成脏器组织干细胞和神经组织干细胞等，B正 确；“治疗性克隆”是从病人体内取出细胞进行核移植，然后将形成的 脏器进行回移，与“异体器官移植”相比，其优点之一是尽可能的避免 了免疫排斥反应，C正确：题图所示的治疗性克隆技术不悖于伦理问 题，但我国政府不赞成、不允许、不支持、不接受任何生殖性克隆人实 验，D错误。故选D。 第三节世界范围内应全面禁止生物武器 1.A解析：为了世界和平，各国共同努力达成协议，即不允许任何国家 保存和使用生物武器，A错误；生物武器可以直接或者间接通过食 物、生活必需品等散布，由此生物武器是恐怖的，B正确：经过基因重 组的生物武器，是经过定向改造之后产生的，因此可能使受害国居民 感染而施放者不易感染，C正确：生物武器种类包括致病菌、病毒、生 化毒剂以及经过基因重组的致病菌等，D正确。故选A。 2.D解析：在生物恐怖威胁不断上升、全球传染病疫情频发的情况下， 消除生物武器威胁、防止生物武器扩散是生物安全防控的重要方面， A正确。由于克隆技术尚不成熟，现在的克隆技术很可能孕育出有 严重生理缺陷的孩子。理由是重构胚胎成功率低，移植入母体子宫 后胚胎着床率低、流产率高、胎儿畸形率高，出生后死亡率高等，正常 的个体极少，B正确。为了尽力规避基因诊断的风险，避免可能产生 的基因歧视，基因检测机构不能随意泄露基因检测的结果，C正确。 从外来入侵害虫的原产地引入天敌进行治理，由于短期内天敌在资 源和空间等方面不变限制，可能会对入侵地造成生态影响，D错误。 故选D。 3.D解析：由于嵌合病毒是一种基因工程重组病毒，所以嵌合病毒含 有受体病毒和供体病毒的遗传物质，因此其性状可由受体病毒和供 体病毒的遗传物质共同控制，A正确：嵌合病毒可能携带一些受害国 家的科研人员不太了解的抗原，进而雉以预防，B正确；若将嵌合病 毒制成生物武器，则可能具有感染特定人群的特点，C正确：嵌合病 毒对人体而言，依然属于抗原，可以识别，D错误。故选D。 4.(1)致病菌、病毒等(2)皮肤、黏膜等特异性免疫(3)接种常见 病原体的疫苗使参战人员体内产生相关的抗体和记忆细胞，当病 原体侵入时，会迅速产生强烈的免疫反应 解析：(1)生物武器包括致病菌类、病毒类、生化毒剂类等，故细菌、病 毒、衣原体、立克次氏体等都可能成为“生物战剂气溶胶”病原体的生 物。(2)人体抵抗病原体一共有三道防线，皮肤、黏膜属于第一道防 线，吞噬细胞、体液中的杀菌物质属于第二道防线，特异性免疫属于 第三道防线，其中特异性免疫为最有效的防线。(3)为预防敌方的生 物武器，可采取接种疫苗、穿隔离衣等措施，其中最有效的措施为接 种常见病原体的疫苗，其原理为疫苗使参战人员体内产生相应的记 忆细胞和抗体，当病原体侵入时，会迅速产生强烈的免疫反应，消灭 相关的病原体。 黑白题36进阶 突破 第四章基因工程 第一节基因工程赋予生物新的遗传特性 课时1》基因工程的基本工具 1.(2023·山西卷)某同学拟用限制酶（酶1、酶2、酶3和酶4）、DNA连接酶为工具，将目的基因 (两端含相应限制酶的识别序列和切割位，点)和质粒进行切割、连接，以构建重组表达载体。 限制酶的切割位点如图所示。 酶3酶2酶1 5-GAATTC-3 5-GGATCC-3 5-CCCGGG-3 5-AGATCT-3 抗生素 3-CTTAAG-5 3-CCTAGG-5 3-GGGCCC-5 3-TCTAGA-5 酶4《抗性基因 酶1 酶2 酶3 酶4 下列重组表达载体构建方案合理且效率最高的是 A.质粒和目的基因都用酶3切割，用E.coli DNA连接酶连接 B.质粒用酶3切割、目的基因用酶1切割，用T4DNA连接酶连接 C.质粒和目的基因都用酶1和酶2切割，用T4DNA连接酶连接 D.质粒和目的基因都用酶2和酶4切割，用E.coli DNA连接酶连接 2.(2023·河南平顶山月考)图1表示含有目的基因D的DNA片段长度(bp即碱基对)和部分碱 基序列，图2表示一种质粒的结构和部分碱基序列。现有MspI、BamH I、MboI、SmaI4种限制 性内切核酸酶，它们识别的碱基序列和酶切位点分别为CCGG、GGATCC GATC、CCCGGG。 目的基因D 启动子 GGATCC CCGG CCTAGG TIIIIIIIITTIEITTITTIITTIITTTIT GGCCT 抗生素A GGATCC CCCGGG CCCGGG GGATCC 质粒 抗性基因 CCTAGG GGGCCO CCTAGG Lumii —534bp -796bp —658bp NGATC ICTAG 图1 图2 (1)限制性内切核酸酶切断的化学键的具体名称是 (2)下列有关限制酶的叙述，正确的是 A.从反应类型来看，限制酶催化的是一种水解反应 B.限制酶的活性受温度、pH的影响 C.一种限制酶只能识别双链DNA中某种特定的脱氧核苷酸序列 D.限制酶识别序列越短，则该序列在DNA中出现的概率越小 (3)若用限制酶Sma完全切割图1所示DNA片段，其产物长度为537bp、bp和bp。 (4)若图1中虚线方框内的碱基对被T-A碱基对替换，那么基因D就突变为基因d。从杂合 子中分离出图1及其对应的DNA片段，用限制酶SmaI完全切割，产物中共有 种不同长度的DNA片段。 (5)若将图2中质粒和目的基因D通过同一种限制酶处理后进行连接，形成重组质粒，那么 应选用的限制酶是 理由是 10黑白题生物|选择性必修三ZK 课时2》基因工程的基本操作 1.(2023·浙江6月选考)某研究小组利用转基因技术，将绿色荧光蛋白基因(GFP)整合到野生 型小鼠Gata3基因一端，如图甲所示。实验得到能正常表达两种蛋白质的杂合子雌雄小鼠各 1只，交配以期获得Gata3-GFP基因纯合子小鼠。为了鉴定交配获得的4只新生小鼠的基因 型，设计了引物1和引物2用于PCR扩增，PCR产物电泳结果如图乙所示。 Gata3 启动子区： 编码区 插入前 非编码区3 1234 5 大片段 启动子区： Gata3引物1 GEP 编码区 编码区非编码区3 插入后 小片段 3 引物3 引物2 甲 乙 下列叙述正确的是 A.Gata3基因的启动子无法控制GFP基因的表达 B.翻译时先合成Gata3蛋白，再合成GFP蛋白 C.2号条带的小鼠是野生型，4号条带的小鼠是Gata3-GFP基因纯合子 D.若用引物1和引物3进行PCR,能更好地区分杂合子和纯合子 2.(2023·湖北恩施期末)乳酸乙酯是白酒中重要的呈香物质，由乳酸脱氢酶催化产生，影响白 酒品质和风格。科研人员将酿酒酵母质粒上的丙酮酸脱氢酶基因(PD)替换为植物乳杆菌中 的乳酸脱氢酶基因(L-PG),可获得乳酸乙酯高产菌株，该过程如图所示。下列关于该过程的 分析不合理的是 () am吧 PA PA amp PA Yep352 PD L-PG Yep352 L-PG PB水 PB 复制原点 PB 复制原点 A.转入的L-PG基因表达产物不能影响酿酒酵母活性 B.可以利用PCR技术筛选含有L-PG基因的受体细胞 C.L-PG基因可在乳酸乙酯高产菌株体内复制与表达 D.标记基因amp'可检测是否成功构建乳酸乙酯高产菌株 3.(2023·浙江月考)我国科学家利用链霉菌的靛蓝合成酶基因(dgS)及其激活基因()构建 基因表达载体（如下图），通过农杆菌转化法导人白玫瑰细胞中，获得蓝玫瑰。下列叙述错误 的是 () Pme I BamH I Spe I Sac I 幻◆ T-DNA 口→dgs☐ Ti质粒 T-DNA Ti质粒 idgS 口终止子1 令启动子1 口终止子2中启动子2 注：PmeI、BamH I、SpeI、SacI为不同限制酶。 进阶突破·拔高练11 A.表达载体中s布和dgS具有各自的启动子，表达相互独立 B.可以从链霉菌的基因文库中获取s和idgS基因 C.在构建表达载体时所需的限制酶是PmeI、BamH I、SpeI、SacI D.若受体白玫瑰细胞不变蓝，则可说明s和idgS未导入或导入后未成功表达 4.(2023·浙江6月选考)赖氨酸是人体不能合成的必需氨基酸，而人类主要食物中的赖氨酸含 量很低，利用生物技术可提高食物中赖氨酸含量。回答下列问题： (1)植物细胞合成的赖氨酸达到一定浓度时，能抑制合成过程中两种关键酶的活性，导致赖 氨酸含量维持在一定浓度水平，这种调节方式属于 。根据这种调节方式，在培 养基中添加 ,用于筛选经人工诱变的植物悬浮细胞，可得到抗赖氨酸 类似物的细胞突变体，通过培养获得再生植株。 (2)随着转基因技术与动物细胞工程的结合和发展，2011年我国首次利用转基因和体细胞核 移植技术成功培育了高产赖氨酸转基因克隆奶牛。其基本流程为： ①构建乳腺专一表达载体。随着测序技术的发展，为获取富含赖氨酸的酪蛋白基因（目 的基因)，可通过检索 获取其编码序列，用化学合成法制备得到。再将获得 的目的基因与含有乳腺特异性启动子的相应载体连接，构建出乳腺专一表达载体。 ②表达载体转人牛胚胎成纤维细胞(BEF)。将表达载体包裹到磷脂等构成的脂质体内， 与BEF膜发生 ,表达载体最终进入细胞核，发生转化。 ③核移植。将转基因的BEF作为核供体细胞，从牛卵巢获取卵母细胞，经体外培养及去 核后作为 。将两种细胞进行电融合，电融合的作用除了促进细胞融合， 同时起到了 重组细胞发育的作用。 ④重组细胞的体外培养及胚胎移植。重组细胞体外培养至 阶段，植入代孕母牛 子宫角，直至小牛出生。 ⑤检测。DNA水平检测：利用PCR技术，以非转基因牛耳组织细胞作为阴性对照，以 为阳性对照，检测到转基因牛耳组织细胞中存在目的基因。RNA水平检测： 从非转基因牛乳汁中的脱落细胞、转基因牛乳汁中的脱落细胞和转基因牛耳组织细 胞，提取总RNA,对总RNA进行 处理，以去除DNA污染，再经逆转录形成 cDNA,并以此为 ,利用特定引物扩增目的基因片段。结果显示目的基因在转 基因牛乳汁中的脱落细胞内表达，而不在牛耳组织细胞内表达，原因是什么？ 12黑白题生物1选择性必修三ZK 第二节基因工程及其延伸技术应用广泛 1.某种微生物合成的蛋白酶与人体消化液中的蛋白酶的结构和功能很相似，只是其热稳定性较 差，进入人体后容易失效。现要将此酶开发成一种片剂，临床治疗食物消化不良，最佳方案是 ( ) A.替换此酶中的少数氨基酸，以改善其功能B.将此酶与人蛋白酶进行拼接，形成新的蛋白酶 C.重新设计与创造一种蛋白酶 D.减少此酶在片剂中的含量 2.(2023·辽宁凌源月考)天然人白细胞介素-2(L-2)是一种由133个氨基酸残基组成的多 肽，该多肽含有3个半胱氨酸，其中一个半胱氨酸(Cs125)残基以游离方式存在，另两个 (Cys58和Cys105)缩合成活性所必需的二硫键，人们利用定位诱变技术将基因中编码Cvs125 的碱基TGT转换成TCT或GCA,使Cvs125转换成丝氨酸或丙氨酸，不仅避免了错误配对发 生，而且产生的新L一2的生物活性不受影响，其热稳定性也得到了明显的改善。下列相关叙 述正确的是 () A.天然的L-2是由白细胞分泌的具有免疫能力的抗体 B.人工改造合成新L-2,属于蛋白质工程 C.可通过直接改造L-2的氨基酸成为新L-2,从而改善其稳定性 D.利用定位诱变后的基因表达新L-2的过程不遵循中心法则 3.(2023·山东临沂期中)T4溶菌酶来源于T4噬菌体，是重要的工业用酶。T4溶菌酶(A,)在 温度较高时易失去活性，科学家利用一定的技术使T4溶菌酶的第3位的异亮氨酸变为半胱 氨酸。在该半胱氨酸与第97位的半胱氨酸之间形成了一个二硫键。获得了耐热性高的T4 溶菌酶(A)。下列叙述正确的是 () A.检测A,活性时先将A与底物混合，再置于高温环境 B.T4溶菌酶的改造属于蛋白质工程，自然界中的酶都可通过蛋白质工程进行改造 C.氨基酸替换和二硫键的形成需要通过改造基因实现 D.蛋白质工程与中心法则的流动方向一致，即DNA->mRNA→蛋白质 4.单基因遗传病可以通过核酸杂交技术进行早期诊断。镰刀形贫血症是一种在地中海地区发 病率较高的单基因遗传病。有一对夫妇被检测出均为该致病基因的携带者，为了能生下健康 的孩子，每次妊娠早期都进行产前诊断。如图为其产前核酸分子杂交诊断和结果示意图。下 列叙述不正确的是 A.可以利用光学显微镜检测某人是否患镰刀形贫 突变的血红 血症 蛋白基因b 模板链+巴ACGTCT巴 B.根据凝胶电泳条带分析，四个孩子中基因型纯模板链一 1-ACGAGTT-1 合的是Ⅱ，和Ⅱ 凝胶电泳分离酶切片段 正常的血红 及探针杂交显示的条带 蛋白基因B C.检测突变基因转录的RNA分子，其核糖核苷酸 标注1限制醉口姿使羲 切位，点 序列为-UGCACAA D.将正常的血红蛋白基因导入患者的骨髓造血干细胞中，可以达到治疗的目的 进阶突破·拔高练13