第1章 第2节 课时2 微生物的选择培养和计数-【学霸黑白题】2025-2026学年高中生物选择性必修3 生物技术与工程（人教版）

及特殊生长因子。葡萄糖是含碳有机物，能为红酵母提供碳源，蛋白 胨是含碳和含氮的有机物，能提供碳源和氮源，C正确。制备培养基 时，先调节pH再灭菌，若先灭菌后调节pH可能对培养基造成污染， D正确。故选A。 2.C解析：培养基中一般含有水、碳源、氨源和无机盐，题图中黄豆粉 和葡萄糖能够作为氮源和碳源，故除题图成分外，培养基中还应添加 水和无机盐，此外还可添加维生素等，A正确：微生物培养的关键是 无菌技术，培养基常用高压蒸汽灭菌法进行灭菌，B正确；培养细菌 时需将pH调至中性或弱碱性，C错误；观察微生物需要其形成菌落， 形成菌落需要使用固体培养基，该培养基中含有琼脂，属于固体培养 基，故可作为实验室常用的观察微生物的载体，D正确。 3.D解析：在微生物的培养过程中，由单一个体繁殖所获得的微生物 群体称为纯培养物，A正确；采用平板划线法或稀释涂布平板法均可 获得单一菌体形成的菌落，从而获得纯培养物，B正确；不同微生物 的生长需要的培养基成分和条件存在差异，获得纯培养物的关键是 无菌操作，因此实验中合适的培养基、严格的无菌条件是获得纯培养 物的基础，C正确；巴氏消毒法和在100℃条件下煮沸5~10min的 方法都属于消毒，只能杀死部分微生物，D错误。 4.D解析：从功能上分析，含有愈创木酚的平板培养基可用于筛选具 有潜在产漆酶活性的土壤真菌，但未抑制其他种类微生物生长，属于 鉴别培养基，A正确；对培养基进行灭菌时，应采用的灭菌方法是高 压蒸汽灭菌法，B正确：平板冷凝后皿盖上会凝结水珠，若将平板倒 置培养，既可以防止培养基表面的水分过快地挥发，又可以防止皿盖 上的水珠落入培养基，造成污染，C正确：制备培养基的基本步骤是 计算、称量、溶化、定容、灭菌、倒平板，D错误。故选D。 5.A解析：将手掌在配制的牛肉膏蛋白胨固体培养基上轻轻按压后， 手上的微生物转移到培养基上，经过培养形成了菌落，因此培养结果 显示出手掌上布满了微生物，A错误：待高温灭菌后的培养基冷却至 50℃左右，再进行倒平板，该温度为刚好不烫手的温度，且表现为液 态，因而可以进行倒平板操作，B正确：在超净工作台上和酒精灯火 焰旁进行操作，目的是防止杂菌污染，C正确：手掌在牛肉膏蛋白胨 固体培养基上轻轻按压相当于接种操作，可将手上的微生物转移到 培养基上，D正确。故选A。 6.D解析：步骤①中，接种前灼烧接种环至变红，目的是杀灭接种环上 可能引起污染的微生物，A正确：步骤②中，将接种工具冷却时不宜 距酒精灯火焰太远，防止受到杂菌污染，B正确；题图中所示的接种 方法是平板划线法，目的是使接种的菌种逐步稀释，经培养后获得由 单个微生物繁殖而来的单菌落，C正确：题图所示的平板划线法不能 用于微生物的计数，D错误。故选D。 7.B解析：菜籽粕含有较多的粗蛋白和维生素，麦麸含有粗纤维、蛋白 质和微量元素，故菜籽粕与麸皮能够为微生物提供碳源和氨源，A正 确；接种前的培养基需要进行高压蒸汽灭菌，培养基的制作过程为计 算、称量、溶化、调pH、灭菌、倒平板，B错误：由题图分析可知，黑曲 霉菌处理的发酵菜籽粕中的单宁含量最低，由此说明黑曲霉菌对单 宁的去除效果最为理想，C正确；实验用的植物乳酸菌和枯草芽孢杆 菌是原核生物，其细胞壁的主要成分是肽聚糖，酵母菌细胞壁的主要 成分是葡聚糖和甘露聚糖，黑曲霉菌细胞壁的主要成分是几丁质，D 正确。故选B。 8.BCD解析：鲜牛奶用巴氏消毒法，使用后的液体培养基需要用高压 蒸汽灭菌法灭菌后再丢弃，防止对环境造成污染，A错误；NaCI属于 无机盐，无机盐在培养基中具有调节和维持微生物细胞渗透压的作 用，因此肉汤培养基加入一定量NaCl的目的是维持微生物细胞的渗 透压，B正确：振荡培养的目的是使微生物与营养物质充分接触，增 加0，浓度，更有利于微生物生长，C正确：根据题图可知是用接种环 接种，故接种方法是平板划线法，金黄色葡萄球菌可破坏菌落周围的 红细胞，产生透明的溶血圈，D正确。故选BCD。 压轴挑战 9.(1)无菌水(2)涂布器平板划线(3)碳源、水、无机盐蛋白质 和核酸(4)培养基中只含VOT一种碳源，只有能分解V0T的微生 物才能在该培养基上生长菌体在液体培养基中与营养物质接触更 充分(5)灭菌 解析：(1)在配制菌悬液时，需将瘤胃提取物加人无菌水中进行配制， 以避免杂菌污染。(2)由题图可知，①过程采用的是稀释涂布平板 法，故使用的接种工具是涂布器：除稀释涂布平板法外，还可用平板 正本参考答案 划线法获得纯培养物。(3)培养基的基础成分为氮源、碳源、水、无机 盐，因此培养基甲为微生物提供的营养成分除氮源外，还有碳源、水、 无机盐。蛋白质和核酸这两种大分子都含N元素，因此氮源进入细 胞后，可参与合成的多聚体有蛋白质和核酸。(4)因为甲、乙培养基 中只含VOT一种碳源，只有能分解V0T的微生物才能在该培养基上 生长，因而能选择出VOT分解菌。甲中的细菌比乙中的生长速度 快，是因为菌体在液体培养基中与营养物质接触更充分，从而为菌体 的生长、发育和繁殖提供更多能量。(5)使用后的培养基中存在微生 物，因此丢弃前一定要进行灭菌处理，以免污染环境。 课时2微生物的选择培养和计数 白题 基础过关练 1.D解析：缺氮培养基上固氨菌可以生长；含青霉素的培养基上真菌 可以生长，如酵母菌：不含有机物的培养基（无机培养基）能筛选出自 养微生物，如硝化细菌。D符合题意。故选D。 2.B解析：用稀释涂布平板法统计菌落数，当两个或多个细胞连在一 起时，平板上观察到的只是一个菌落，这样统计的菌落数往往比活菌 的实际数目少，A正确：涂布接种前，应先灼烧涂布器，待酒精燃尽， 涂布器冷却后再进行涂布，否则会因为高温而杀死菌种，B错误；若 菌液稀释度不够，会导致平板上长满菌落，无法获得由单个菌种繁殖 而来的单菌落，应再增大稀释倍数，C正确；为了保证结果准确，一个 稀释度下至少需涂布3个平板进行重复实验，D正确。故选B。 3.B解析：步骤②为选择培养，该液体培养基中含有的唯一氨源是尿 素，A正确；步骤③的平板培养基应该是以尿素作为唯一氨源的固体 培养基，其目的是筛选、纯化出分解尿素的微生物，而LB固体培养基 中本身就含有氨源，B错误：步骤③采用稀释涂布平板法接种，其目 的是通过梯度稀释获得能分解尿素细菌的单菌落，C正确：步骤④挑 取③中菌落分别接种，可通过溶液pH的变化比较细菌分解尿素的能 力，尿素在分解过程中会产生氨和二氧化碳，进而会导致培养基中 pH发生变化，D正确。故选B。 4.C解析：涂布前必须使用无菌水对土壤样品进行充分稀释，A错误： 采用稀释涂布平板法和平板划线法接种，都能在培养基甲上获得单 菌落，B错误：有抑菌圈说明该圈内S菌不生长，即有抑菌圈的菌落 产生的抗生素能抑制S菌的生长，C正确；抑菌圈直径与菌落直径的 比值越大，说明该菌落产生抗生素的能力越强，不能只看抑菌圈直径 的大小，D错误。故选C。 5.D解析：涂布了一个平板，误差大，结果不准确，A错误：涂布了两个 平板，误差大，结果不准确，B错误：选择菌落数在30~300的平板进 行记数，菌落数21与其他两个平板相比误差太大，应舍去，C错误； 由分析可知，涂布了三个平板，统计的菌落数分别是210、240和255， 符合计数要求，取平均值235，D正确。故选D。 6.A解析：当稀释倍数太小时，涂布平板上两个或多个细胞连在一起 形成一个菌落，造成显微镜直接计数得到的菌体数远远大于平板计 数得到的菌体数，这是出现稀释涂布平板法计数异常的最可能原因 A符合题意；利用稀释涂布平板法计数，由于培养时间较短，平板上 的菌落数目没有达到最大值，可能造成显微镜直接计数得到的菌体 数大于平板计数得到的菌体数，但这不是出现稀释涂布平板法计数 异常的最可能原因，B不符合题意：两种计数操作时都没有被杂菌污 染，这不是出现稀释涂布平板法计数异常的原因，C不符合题意：稀 释倍数越大，稀释涂布平板法计数越不准确，但不会造成显微镜直接 计数得到的菌体数远远大于平板计数得到的菌体数，D不符合题意。 7.ACD解析：当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是 个菌落，所以用稀释涂布平板法统计的菌落数往往比活菌的实际数 目少，A正确：据题图可知，该实验用稀释涂布平板法接种，且稀释涂 布平板法可以用来统计活菌数目，平板划线法不能用来计数，B错 误：实验结果表明，每克土样中含有尿素分解菌数目=(48+52+53)÷ 3÷0.1×105=5.1×107,C正确；该实验需要设置一个未接种的平板在 相同的条件下培养作为空白对照组，检验培养基灭菌是否合格， D正确。 8.(1)脲酶(2)琼脂稀释涂布平板法酚红(3)当两个或多个细 胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落(4)维持渗透压 作为缓冲剂保持细胞生长过程中pH的稳定 解析：(1)脲酶可催化尿素分解成C02和NH3,因此某些细菌能合成 脲酶从而将尿素分解成CO2和NH,供植物吸收和利用。(2)培养基 中一般含有水、碳源、氮源和无机盐，琼脂是固体培养基的必要成分。 黑白题03 根据培养基上形成了菌落可知，题图所示为固体培养基，故X通常是 琼脂；分析题图可知，图中将细菌转为固体培养时用的接种方法是稀 释涂布平板法。尿素分解菌可以用酚红指示剂进行鉴定，原因是其 体内产生的脲酶能够将尿素转化为氨使酚红指示剂呈红色。(3)由 于当两个或多个细胞连在一起时，平板上规察到的只是一个菌落，因 此用稀释涂布平板法进行计数时，一般统计的菌落数会比活菌实际 数目低。(4)KH2P04和Na2HP04可以为细菌生长提供无机盐离子， 还能作为缓冲剂保持细胞生长中pH的稳定，以及维持细胞渗透压。 重难聚焦 9.A解析：据题图可知，I号培养基上形成的单个菌落分布均匀，故② 过程是利用稀释涂布平板法分离并筛选耐热古细菌，A正确。配制 I号培养基时需要加人琼脂形成固体培养基，培养细菌的pH应调节 至中性或微碱性，因此需要调节pH≥7，B错误。为防止污染需要对 I、Ⅱ号培养基进行高压蒸汽灭菌，对培养皿进行干热灭菌，C错误。 在固体培养基中，耐热古细菌分解淀粉会形成透明圈，透明圈越大说 明分解淀粉的能力越强。为筛选能高效产生淀粉酶的耐热古细菌， 从I号培养基中选择透明圈与菌落直径比值最大的菌落接种到Ⅱ号 培养基，D错误。故选A。 四归纳总结 实验室常用的灭菌方法 (1)灼烧灭菌：将微生物的接种工具，如接种环、接种针或其他金 属工具，直接在酒精灯火焰的外焰灼烧，可以迅速彻底地灭菌，此 外，在接种过程中，试管口或瓶口等容易被污染的部位，也可以通 过火焰灼烧来灭菌。 (2)干热灭菌：能耐高温的，需要保持干燥的物品，如玻璃器皿（吸 管、培养皿)和金属用具等，可以采用这种方法灭菌。 (3)高压蒸汽灭菌：将灭菌物品放置在盛有适量水的高压蒸汽灭 菌锅内，为达到良好的灭菌效果，一般在压力为100kPa,温度为 121℃的条件下，维持15~30min。 黑题应用提优练 1.D解析：题意是研究细菌的种类和数量，所以需要采用稀释涂布平 板法进行接种才能计数，A错误：尽管瓜瓢浸出液是液体，但培养时 平板也需要倒置，这样可以防止培养皿盖上凝结的水珠落入培养基 造成污染，还可防止培养基表面的水分挥发，B错误：该实验是比较 两种不同处理方式下西瓜上菌体的种类和数量，所以除需要设置盛 有培养基的空白平板作对照，还需要设置不盖保鲜膜同样条件保存 三天的西瓜表面的瓜瓢浸出液接种的平板作对照，C错误：不同菌体 的菌落特征（菌落的大小、形状、颜色、隆起程度等）不同，所以可通过 平板上菌落的特征初步判断细菌的种类，D正确。故选D。 2.B解析：加入碳酸钙的培养基属于鉴别培养基，乳酸菌的同化类型 为异养型，不能利用碳酸钙作为唯一碳源，A错误；培养基都要进行 严格的灭菌处理，B正确：分离纯化乳酸菌时，需要用无菌水对泡菜 滤液进行梯度稀释，C错误；分离纯化乳酸菌时，乳酸菌产生的乳酸 将碳酸钙分解，应挑选出具有透明圈的菌落作为候选菌，D错误。 3.B解析：筛选降解土霉素的菌株应该到土霉素含量较高的畜禽类粪 便或污水中去取样，A正确：培养基调节pH一般应在灭菌前进行，否 则容易带入新的杂菌，B错误：筛选时随转接次数的增加，土霉素的 用量也应逐步增加，以便筛选出高效降解的菌株，C正确：平板菌落 过于密集，需要进一步提高稀释的倍数，将每块平板上的菌落数保持 在30~300为宜，D正确。故选B。 4.A解析：①②是完全培养基，运用影印法将分离到的菌种接种到③ ④两种培养基中，③中菌落数明显少于④中的菌落数，说明③是基本 培养基，④是添加色氨酸的基本培养基或完全培养基，A错误：紫外 线是物理诱变因素，紫外线处理可以提高突变率，以获得色氨酸营养 缺陷型菌株，B正确：将①置于摇床中，可以增加菌液中的氧气浓度， 使菌种与营养物质充分接触，有利于菌体充分利用培养基中的营养 物质，C正确；运用原位影印法将分离到的菌种接种到③④两种培养 基上，③中的菌落数明显少于④中的菌落数，说明③是基本培养基」 可生长野生型菌种，④是添加色氨酸的基本培养基或完全培养基，野 生型和色氨酸营养缺陷型菌种均可生长，根据题图中平板③和平板 ④可判断甲是色氨酸营养缺陷型菌落，可用平板划线法进一步纯化 培养，D正确。 5.D解析：欲从工业污水中分离耐盐苯酚降解细菌(W3),则分离W3 选择性必修第三册·RJ 的培养基中需要以苯酚为唯一的碳源，A正确；由题图可知，当盐浓 度由5%升至10%时，W3种群的K值(W3细菌数量相对值)及对苯 酚的降解率均降低（苯酚浓度增大），B正确；与盐浓度1%相比，W3 在盐浓度5%条件下对苯酚的降解率基本相同（苯酚浓度曲线几乎重 合)，C正确：W3细菌是原核生物，无液泡，D错误。故选D。 四解题指导 由题图可知，与盐浓度1%相比，W3在盐浓度5%条件下细菌数量 相对值几乎不变，苯酚浓度曲线几乎重合，说明在这两个浓度条 件下，W3的K值和降解率几乎相等。当盐浓度由5%升至10% 时，W3种群的K值(W3细菌数量相对值)及对苯酚的降解率均 降低（苯酚浓度增大）。 6.ACD解析：据题图分析，接种后的菌落均匀分布，推测该过程接种 的方法为稀释涂布平板法，接种后的培养皿不能立即进行倒置培养 A正确；进行②过程培养时，为了防止将完全培养基中特定营养成分 带入基本培养基，应将丝绒布先转印至基本培养基上再“复印”至完 全培养基上，B错误：在基本培养基中氨基酸缺陷型菌株不能生长， 而在完全培养基中能够生长，比较基本培养基和完全培养基中的菌 落可知，氨基酸缺陷型菌株应从基本培养基上没有、完全培养基上对 应位置有的菌落中挑选，C正确；统计菌落种类和数目应在菌落数目 稳定时进行，为了保证统计结果准确，应每隔一定时间观察统计 次，直到各类菌落数日稳定为止，D正确。 四解题指导 分析：题图中首先利用稀释涂布平板法分离细菌，然后运用“影印 法”将菌种接种到两种培养基（基本培养基、完全培养基）中，则在 基本培养基中，氨基酸缺陷型菌株不能生长，而在完全培养基中 能够生长，由此可以选择出氨基酸缺陷型菌株。 压轴挑战 7.(1)筛选出耐铝性更高的菌株(2)形态、大小、颜色提高发酵液 的pH并降低发酵液中A1CL3的含量(3)稀释涂布平板法三种菌 株均能分解铝(4)不污染土壤 解析：(1)分析题意可知，本实验目的是筛选出耐铝性良好的促生细 菌，菌落长出后经纯化，继续接种到A1C13浓度升高的培养基上，多次 重复上述操作，目的是通过提高ACl2浓度，筛选出耐铝性更高的菌 株。(2)菌落特征包括菌落的形态、大小、颜色等，可进行菌株鉴 定。分析题表可知，与对照组相比，A1、A23、X6的实验组剩余A1C1 含量都降低，pH都升高，说明三种菌株都能提高发酵液的pH并降低 发酵液中A1C13的含量。(3)题图所示菌落在平板上分布相对均匀， 说明接种方法是稀释涂布平板法。据题图可知，三种菌株均能形成 透明圈，说明三种菌株均能分解铝。(4)石灰在土壤中溶解度低，易 对土壤造成污染，故将耐铝菌株制成菌肥与施用石灰相比，优点是不 污染土壤。 第3节发酵工程及其应用 白题基础过关练 1.A解析：发酵工程是指采用现代工程技术手段，利用微生物的某些 特定功能，为人类生产有用的产品，或直接把微生物应用于工业生产 过程的一种技术。发酵工程的基本环节有选育菌种、扩大培养、配制 培养基、灭菌、接种和发酵、产品的分离和纯化，A正确：发酵罐内发 酵是发酵工程的中心环节，B错误：在发酵过程中，要随时检测培养 液中的微生物数量、产物浓度，以了解发酵进程，同时要严格控制发 酵条件，如温度、pH、溶解氧等，并可能需要适时添加营养物质，C错 误：现代发酵工程中，计算机控制系统可以通过负反馈机制，使发酵 罐内的发酵全过程处于最佳状态，D错误。故选A。 2.C解析：若选育自养型微生物，则需添加无机碳源，而选育异养型微 生物，则培养基中需添加有机碳源，A项不符合题意：不同微生物缺 乏生长因子的种类可能不同，故在培养基中增减不同的生长因子能 选择所需的微生物，B项不符合题意；在培养基中加入不同比例的核 酸(DNA和RNA),其不会直接影响到微生物自身的遗传组成，不能 对微生物起选择作用，C项符合题意：抗生素也可对微生物起选择作 用，D项不符合题意。 3.B解析：果酒发酵的适宜温度为18~30℃，因此夏季生产果酒时， 常需对罐体进行降温处理，A正确；乙醇是酵母菌无氧呼吸的产物， 黑白题04课时2微生物1 白题基础过关练 题型1选择培养基 1.(2023·吉林通化阶段练习)利用选择培养基 可以从混杂的微生物群体中分离出所需的微 生物，通过缺氮培养基、含青霉素的培养基、含 氨的无机培养基，可从土壤中分离出的微生物 依次是 A.硝化细菌、放线菌、根瘤菌 B.根瘤菌、青霉菌、圆褐固氨菌 C.圆褐固氮菌、乳酸菌、硝化细菌 D.圆褐固氮菌、酵母菌、硝化细菌 题型2稀释涂布平板法 2.(2023·甘肃武威开学考试)稀释涂布平板法 是一种常见的微生物接种方法。下列关于稀 释涂布平板法的叙述，错误的是 () A.采用稀释涂布平板法统计的菌落数往往少 于实际的活菌数 B.涂布接种前应先灼烧涂布器，待酒精燃尽 后，立即进行涂布 C.若涂布的平板上长满菌落，则很可能是菌 液稀释度不够导致 D.某稀释度下至少需涂布接种三个平板，统 计时取平均值，以减小误差 3.如图是研究人员从红棕壤中筛选高效分解尿 素细菌的过程示意图。 上清液 2 mL 0.1m ①制备红②在选择培③筛选、纯化分④细菌分解 棕壤浸出液养基中培养解尿素的细菌尿素能力的 鉴定和比较 下列叙述错误的是 ( A.步骤②的液体培养基含有的唯一氮源是 尿素 B.步骤③的平板培养基是加入了适量尿素的 LB固体培养基 C.步骤③采用稀释涂布平板法接种，期待获 得能分解尿素细菌的单菌落 第1章 选择培养和计数 限时：30min D.步骤④挑取③中菌落分别接种，可通过溶 液pH的变化比较细菌分解尿素的能力 题型3微生物的选择培养 4.（2023·辽宁沈阳第三十一中学期末)研究小 组欲从土壤中筛选某种抗生素产生菌，进行如 下实验：首先将土壤样品充分稀释涂布在培养 基甲上，待长出单菌落后，再将单菌落取出并 移至涂布有S菌的培养基乙上，一段时间后观 察结果如下图所示。下列说法正确的是 ( 培养基甲 培养基乙 培养 转移 。● 一S菌生长区 ● ●。S菌生长 抑制区 在培养基上涂 长出单菌 涂布有S菌 布土壤稀释液 落后取出 的培养基 A.涂布前必须使用清水对土壤样品进行充分 稀释 B.只有采用稀释涂布平板法接种，才能在培 养基甲上获得单菌落 C.有抑菌圈的菌落产生的抗生素能抑制S菌 的生长 D.抑菌圈的直径越大，说明菌落产生抗生素 的能力就越强 题型4微生物的数量测定 5.测定同一土壤样品中的细菌数，在对应稀释倍 数为10的培养基中，得到以下几种统计结果， 其中正确的是 A.涂布了一个平板，统计的菌落数是230 B.涂布了两个平板，统计的菌落数是216和 260,取平均值238 C.涂布了三个平板，统计的菌落数分别是21、 212和256，取平均值163 D.涂布了三个平板，统计的菌落数分别是 210、240和255，取平均值235 6.利用稀释涂布平板法对土壤中微生物细胞进 行计数时，发现显微镜直接计数法得到的菌体 黑白题09 数远远大于平板计数得出的菌体数。出现稀 释涂布平板法计数异常的原因最可能是 ( A.涂布平板上两个或多个细胞连在一起形成 一个菌落 B.培养时间较短时，平板上的菌落数目没有 达到最大值 C.两种计数操作时都没有被杂菌污染 D.稀释倍数越大，稀释涂布平板法计数越不 准确 7.(不定项)(2023·安徽合肥期中)科研分离、 计数土壤中的尿素分解菌的流程如下图所示， 步骤④三个平板上的菌落数量分别为48、52 和53。下列叙述正确的是 ( 1 mL I mL 0.1mL 1 mL 土样 用无菌水定 9mL无菌水 容至100mL ① ② ③ ④ A.该方法统计的菌落数往往比活菌的实际数 目少 B.步骤④可采用平板划线法或稀释涂布平板 法获得单菌落 C.实验结果表明，每克土样中含有5.1×10个 尿素分解菌 D.需设置一个未接种的平板在相同的条件下 培养作为对照 题型5土壤中分解尿素的细菌的分离与计数 8.(2023·湖北武汉期末)尿素是一种重要的农 业肥料，经微生物分解后能更好地被植物利 用。某生物兴趣小组试图探究土壤中微生物 对尿素是否具有分解作用，设计并成功筛选到 能高效分解尿素的细菌（目的菌）。培养基的 成分包含KH,P04、Na2HP04、MgS04·7H20 葡萄糖、尿素和X,将以上物质按照一定比例 溶解后，用蒸馏水定容至100mL。实验过程 如图所示： (1)某些细菌能将尿素分解成C0,和NH供植物 选择性必修第三册·RJ 吸收和利用， 有些细菌不 能，原因是前土壤悬液 稀释倍数为103~10？的试管 接种 者能合 成 含尿素培养基 (2)培养基中的成分X通常是 ;图中 将细菌接种到固体培养基上时，采用的方 法是 ;初步筛选出的菌种还 需要进一步鉴定：在培养基中加入 指示剂，接种并培养初步筛选的 菌种，若指示剂变红色，则说明该菌种 能分解尿素。 (3)对平板中的微生物进行计数通常是以菌 落数代表活菌数量，统计的菌落数往往比 活菌的实际数目低，原因是 (4)培养基中的成分KH2P0,和Na2HP0,的作 用是为细菌生长提供无机盐离子，还 有 重难聚焦 9.(2023·河南信阳期末)温泉中含有能够分 解淀粉的耐热古细菌，在固体培养基中，该 类细菌分解淀粉会形成透明圈。如图表示 筛选能高效产生淀粉酶的耐热古细菌的过 程，下列分析正确的是 ( 选出 a ② 菌落 ao I号培养基Ⅱ号培养基 嗜热菌 样液 A.②过程是利用稀释涂布平板法分离并筛 选耐热古细菌 B.配制I号培养基时需要加入琼脂，需要调 节pH<7 C.为防止杂菌污染需要对I、Ⅱ号培养基及 培养皿进行干热灭菌 D.从I号培养基中选择透明圈最小的菌落 接种到Ⅱ号培养基 黑白题10 黑题应用提优练 1.(2023·黑龙江哈尔滨阶段练习)将没有吃完 的西瓜，盖上保鲜膜后放入冰箱，是许多人日 常储藏西瓜的方法，目前有一种观点认为：盖 上保鲜膜储藏的西瓜中细菌种类和数目反而 比没用保鲜膜的多。某生物研究小组针对上 述观点进行探究，他们用盖上保鲜膜保存了三 天的西瓜表面的瓜瓢制备浸出液，研究细菌的 种类和数量。下列说法正确的是 () A.应该采用平板划线法进行接种 B.瓜瓤浸出液是液体，因此培养时平板不用倒置 C.仅需要设置盛有培养基的空白平板做对照 D.可通过平板上菌落的特征初步判断细菌的 种类 2.已知固体培养基会因碳酸钙存在而呈乳白色， 且乳酸菌能分解培养基中的碳酸钙。某同学 用新鲜的泡菜滤液为材料进行了分离纯化乳 酸菌的实验，下列叙述正确的是 () A.加入碳酸钙的培养基属于选择培养基，且 碳酸钙作为唯一碳源 B.分离纯化所用的培养基都要进行严格的灭 菌处理 C.分离纯化乳酸菌时，需要用蒸馏水对泡菜 滤液进行梯度稀释 D.分离纯化乳酸菌时，应挑选出不具有透明 圈的菌落作为候选菌 3.养殖业中常用到土霉素（一种抗生素），其在 畜禽类粪便和污水中的残留量较高。科研人 员欲筛选一种能高效降解土霉素的菌株，以便 解决养殖业废弃物中土霉素含量超标的问题， 下列有关叙述不正确的是 () A.筛选菌种时可从家畜粪便、药渣的废水中 取样进行筛选 B.培养基要维持正常的pH和渗透压，调节 pH一般应在灭菌后 C.筛选时随转接次数的增加，土霉素的用量 第1章 限时：35min 也应逐步增加 D.计数时平板上菌落过于密集，应该进一步 提高稀释的倍数 4.氨基酸营养缺陷型菌株是野生型菌株突变后 失去合成某种氨基酸的能力，只能在完全培养 基或补充相应氨基酸的基本培养基中才能正 常生长的变异菌株。如图是获得并纯化色氨 酸营养缺陷型突变株的过程，①②③④是培养 基编号，甲、乙代表菌落。下列说法错误的是 ( 无菌落 紫外线 无菌绒布 原位影印 37℃48h ① ② A.①②是完全培养基，③是添加色氨酸的基 本培养基，④是基本培养基 B.紫外线处理的目的是提高突变率，以获得 色氨酸营养缺陷型菌株 C.将①置于摇床中，有利于菌体充分利用培 养基中的营养物质 D.甲是色氨酸营养缺陷型菌落，可用平板划 线法进一步纯化培养 5.(2023·河北唐山开学考试)苯酚及其衍生物 对人和动植物具有很强的毒害作用，已被列入 环境优先控制污染物名单。某生物科技小组 欲从工业污水中分离耐盐苯酚降解细菌 (W3)并测定不同盐度下其生长、降解 200mg/L苯酚的情况，实验结果如图所示。 下列有关说法错误的是 ( 0.4 100 .OD660 0.3 8 0- 0.2 40 不同×1% 0.1 -0 盐浓度口5% 20 010% 00 0 2 24 48 7296120时间/h 黑白题11 A.分离W3的培养基需要以苯酚为唯一碳源 B.当盐度由5%升至10%时，W3种群的K值 及对苯酚的降解率均降低 C.与盐度1%相比，W3在盐度5%条件下对苯 酚的降解率基本相同 D.可检测W3在高盐条件下液泡内溶质的种 类和含量变化以探究其耐盐机理 6.（不定项)(2023·湖北开学考试)营养缺陷型 菌株是突变后某些酶被破坏，导致代谢过程中 某些合成反应不能进行的菌株。下图是科研 人员利用影印法（用无菌丝绒布轻盖在已长 好菌落的原培养基上，然后不转动任何角度， “复印”至新的培养基上)初检某种氨基酸缺 陷型菌株的过程。相关说法正确的是( 灭菌的丝绒布 揭起丝绒布 B 8 待测 丝绒布 经诱变处 培养皿吸附菌体 菌落B 基本培养基 理的菌液 28℃ 2 828 2d 菌落A 完全培养基 A.①过程接种方法为稀释涂布平板法，接种 后的培养皿不能立即进行倒置培养 B.进行②过程的顺序是先将丝绒布“复印”至 完全培养基上，再“复印”至基本培养基上 C.氨基酸缺陷型菌株应从基本培养基上没 有、完全培养基上对应位置有的菌落中 挑选 D.统计菌落种类和数量时要每隔一定时间观 察统计一次，直到各类菌落数目稳定为止 压轴挑战 7.(2023·山东德州期末)土壤酸化往往伴随 着铝毒害。当土壤pH<5时铝溶解成A3+, 该形态的铝对植物的毒害作用很大。甘蔗 种植面临严重的酸性土壤危害，为解决这一 问题，科研人员从甘蔗根系土壤中筛选分离 选择性必修第三册·RJ黑 出耐铝性良好的促生细菌，并进行相关研究， 研究过程中使用的两种培养基成分如下： 培养基I:蛋白胨10.0g、酵母膏5g、NaCl 5g、琼脂20.0g、A1CL32mM、蒸馏水定容至 1000mL,pH=4.5; 培养基Ⅱ：蔗糖10.0g、K2HP040.5g、 Mgs04·7H200.2g、NaCl0.2g、CaC031.0g、琼 脂20.0g、蒸馏水定容至1000mL,pH=7.0。 (1)取甘蔗根部土壤稀释液接种至灭菌的 培养基I上，待菌落长出后经纯化，继 续接种到ACl,浓度升高的培养基上， 多次重复上述操作，目的是 (2)研究人员筛选出三种目的菌株：A1、 A23、X6,根据菌落的 （至少答 出两点)初步确定这3个菌株的种属。 将三种菌株分别接种在含有AICL,的液 体培养基中，培养2d后测定发酵液中 相关指标，结果如下表所示。由结果可 知三种菌株均能 组别 pH 剩余A1Cl,含量(%) 对照组 4.50 100 A1 7.91 81.99 A23 7.02 82.87 X6 7.79 77.58 (3)将菌株A1、A23、X6接 种至培养基Ⅱ上，培养 结果如图所示。所使 X6 用的接种方法为 A23 培养结果说明 (4)在传统生产上常通过施用石灰来降低 土壤酸度和土壤中可溶性A13+的含量， 但石灰在土壤中溶解度低，将耐铝菌株 制成菌肥与施用石灰相比，优点 是 进阶突破拔高练P03 白题12