1.2 微生物的培养技术及应用第四课时导学案-2025-2026学年高二下学期生物人教版选择性必修3

学科 生物 年级 高二 时间 课题 1.2 微生物的培养技术及应用 课型 新授课 课时 第4课时（共4课时） 主备教师 学习目标 1.运用适应观，说明选择培养基的原理。 2.采用归纳与概括等方法，阐述测定微生物数量的常用方法。 二 微生物的选择培养和计数 （四）土壤中分解尿素的细菌的分离与计数 1. 提出问题 ① 如何分离土壤中能分解尿素的细菌？ ② 如何计算每克土壤样品中有多少分解尿素的细菌？ 2. 基础知识 绝大多数微生物都能利用葡萄糖，但是只有能合成 的微生物才能分解尿素。 利用尿素作为 的选择培养基，可以从土壤中分离出分解尿素的细菌。 3. 实验过程 Ⅰ.土壤取样 ①取样地点要求： 。 ②取样过程：铲去表层土（一般3cm左右）。细菌绝大部分分布在距地表 的土壤层。 ③注意事项：取土样时用的铁铲和取样袋在使用前都需要灭菌。操作完成后一定要洗手。 Ⅱ.样品的稀释与涂布平板 测细菌时，一般选用1×104、1×105、×106倍稀释的稀释液进行平板培养。 在初次实验中，对于稀释的范围没有把握，应选择一个比较宽的范围，将1×103～1×107倍稀释的稀释液分别涂布到平板上培养，以保证能从中选择出菌落数在 的平板进行计数。 ①每个浓度至少设置 个平板，1、2、3平板是选择培养基（实验组，三个重复），4为牛肉膏蛋白胨培养基。 思考与讨论： 1、设置4为牛肉膏蛋白胨培养基的目的是什么？ 2、若出现什么现象则能说明选择培养基具有筛选作用？ 3、如何验证培养基中是否含有杂菌？ 4、案例分析； 两位同学用稀释涂布平板法测定同一土壤样品中的细菌数。从对应稀释倍数为106的培养基中，得到以下两种统计结果。 1.甲同学在该浓度下涂布了一个平板，统计的菌落数为230。 2.乙同学在该浓度下涂布了A、B、C三个平板，统计的菌落数分别为21、212、256，该同学以这三个平板上菌落数的平均值163作为统计结果。 你认为这两位同学的做法正确吗？ 如果有问题，错在哪？ 如何改进？ Ⅲ.微生物的培养与观察 ①培养条件：不同种类的微生物，往往需要不同的培养温度和培养时间。 ②观察：每隔24h统计一次菌落数目，选取菌落数目稳定时的记录作为结果。（一般来说，在相同的培养条件下，同种微生物表现出稳定的菌落特征，如形状、大小和颜色等） 4.进一步探究 利用尿素作为唯一氮源的培养基分离出的微生物不一定都是能分解尿素的微生物，因为有些微生物可以利用能分解尿素的细菌的代谢物进行生长繁殖。对分离的菌种进行鉴定还需要借助生物化学的方法。你可以查阅相关资料,进一步设计实验来鉴定自己分离的菌种。 5.拓展：鉴别培养基 在培养基中加入某种指示剂或化学药品（不影响微生物正常生长），使微生物的某种代谢产物与培养基中的特定指示剂或化学药品发生反应。从而达到鉴定的作用。 方法：在培养基中加入 指示剂——鉴别培养基 ①液体培养基可以直接看液体的变色情况； ②固体培养基上可以观察菌落周围是否出现红色环带。 核心归纳——选择培养基与鉴别培养基 练一练： 1．欲从土壤中分离出能分解尿素的细菌，下列实验操作中不正确的是( ) A．在距地表3～8 cm接近中性的潮湿土壤中取样 B．在30～37 ℃条件下培养，并定期观察记录 C．可将未接种的培养基在相同条件下培养作为对照 D．用加入硝酸盐为唯一氮源的培养基筛选分解尿素的细菌 2．在做分离分解尿素的细菌实验时，甲同学从对应10－6培养基上筛选出大约150个菌落，而其他同学只选择出大约50个菌落。下列有关叙述，出现科学性错误的是( ) A．甲同学出现这种结果的原因可能是由于土样不同，也可能是操作过程出了问题 B．将甲同学配制的培养基再接种菌种培养作为空白对照，以证明培养基是否受到污染 C．让其他同学用与甲同学相同土壤进行实验，结果与甲同学一致，则可以证明甲同学无误 D．可以将甲同学配制的培养基在不加土样的情况下进行培养作为空白对照，以证明培养基是否受到污染 3．研究者从牛的瘤胃中筛选产生纤维素酶的纤维素分解菌，其筛选过程如图1所示。将丙中的菌悬液转接于含有稻草作碳源的固体培养基上培养，得到若干菌落后用刚果红处理(刚果红能与培养基中的纤维素形成红色复合物，当纤维素被纤维素酶分解后，刚果红—纤维素的复合物就无法形成，培养基中会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈)，看到如图2所示情况，下列有关叙述正确的是( ) A．②过程是用涂布器取乙中的菌液并均匀地涂布在Ⅰ号培养基表面 B．甲、乙试管中的液体都属于液体培养基，主要作用是稀释菌种 C．Ⅰ号、Ⅱ号培养基都属于固体培养基，配制时先灭菌后调节pH D．可挑取图2中周围出现透明圈的菌落，用平板划线法继续纯化 4.(不定项）野生型大肠杆菌菌株能在基本培养基上生长，氨基酸营养缺陷型突变株无法合成某种氨基酸，只能在完全培养基上生长，下图为纯化某氨基酸营养缺陷型突变株的部分流程图，①②③④代表培养基，A、B、C表示操作步骤，D、E为菌落。下列叙述错误的是( ) A．图中①②④为完全培养基，③为基本培养基 B．A操作的目的是提高突变率，增加突变株的数量 C．B的正确操作是用涂布器蘸取菌液后均匀地涂布在②表面 D．经C过程原位影印及培养后，可从④中挑取E进行纯化培养 1.2 微生物的培养技术及应用-第2课时1 / 3 学科网（北京）股份有限公司 $