内容正文:
学科
生物
年级
高二
时间
课题
1.2 微生物的培养技术及应用
课型
新授课
课时
第3课时(共4课时)
主备教师
学习目标
1.运用适应观,说明选择培养基的原理。
2.采用归纳与概括等方法,阐述测定微生物数量的常用方法。
二 微生物的选择培养和计数
(一)选择培养基
1.概念:在微生物学中,将允许 的微生物生长,同时 其他种类微生物生长的培养基,称为选择培养基。
2.原理:人为提供有利于目的菌生长的条件(包括营养、温度和PH等),同时抑制或阻止其他微生物的生长。
阅读教材P16思考∙讨论,回答下列问题;
①让你配制一种培养基,将土壤稀释液中能分解尿素的细菌分离出来,培养基配方该如何设计?
②该培养基与普通培养基有哪些共同点和不同点?
3.选择培养基四种常见制备方法或实例
练一练
1.选择培养基筛选出来的微生物只有一种。( )
2.筛选分解尿素的细菌的培养基为液体培养基,且可以加入抗生素以防杂菌污染。( )
3.(2023·云南玉溪高二期中)下表为某培养基的配方,有关叙述错误的是( )
注:已知用含有伊红—亚甲蓝的培养基培养大肠杆菌,其菌落呈黑色
A.若根据用途划分,该培养基属于鉴别培养基
B.若培养霉菌需将pH调至碱性
C.可通过观察菌落的特征(如形状、大小和颜色等)初步判断大肠杆菌的存在情况
D.若用该培养基筛选土壤中能合成脲酶的细菌,应将蛋白胨改成尿素
4.以氮源设计选择培养基,下列叙述错误的是( )
A.培养基中以尿素为唯一氮源,分离的微生物一定是分解尿素的微生物
B.培养基中以NH3为唯一氮源,可分离硝化细菌
C.培养基中无氮源,可分离固氮微生物
D.以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂,培养细菌后,指示剂变红色,可判断该细菌能分解尿素
5.甲、乙、丙是三种微生物,下表Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ是用来培养微生物的三种培养基。甲、乙、丙都能在Ⅲ中正常生长繁殖;甲能在Ⅰ中正常生长繁殖,而乙和丙都不能;乙能在Ⅱ中正常生长繁殖,甲、丙都不能。下列说法正确的是( )
A.甲、乙、丙都是异养微生物
B.甲、乙都是自养微生物、丙是异养微生物
C.甲是异养微生物、乙是固氮微生物、丙是自养微生物
D.甲是固氮微生物、乙是自养微生物、丙是异养微生物
(二)微生物的选择培养——稀释涂布平板法(教材P17)
①铲取土样,将样品装入纸袋中。将10g土样加入盛有90mL无菌水的锥形瓶中,充分摇匀,制成菌液。
②取 上清液加入盛有 无菌水的试管中,依次等比稀释。
③取0.1mL菌液,滴加到培养基表面。
④将涂布器浸在盛有 的烧杯中。
⑤将涂布器放在火焰上灼烧,待 后,再进行涂布。
⑥用涂布器将菌液均匀地涂布在培养基表面。涂布时可转动培养皿,使涂布均匀。
(三)微生物的数量测定
方法1:间接计数法:
① 原理
当样品的稀释度足够高时,培养基表面生长的一个单菌落,来源于样品稀释液中的一个活菌。通过统计平板上的菌落数,就能推测出样品中大约含有多少活菌。
② 计数原则
选用一定稀释范围的样品液进行培养,以保证获得菌落数为_______、适于计数的平板。
在同一稀释度下,应至少对___个平板进行重复计数,然后求出_______。
思考讨论:稀释涂布平板法的缺点是什么?原因?
缺点: 统计的_________往往比______的实际数目少
③ 计算公式
例题:4号试管的结果表明每克土壤中的活菌数约为_____________个。
方法2:直接计数法:
①原理:利用细菌计数板或血细胞计数板,在显微镜下计算一定容积里样品中微生物数量。
②优点: 快速、直观
③缺点:
比较稀释涂布平板法和显微镜直接计数法
两种纯培养方法的比较
练一练:
1.利用稀释涂布平板法准确估计菌落数目的关键是有恰当的稀释度。( )
2.平板划线法和稀释涂布平板法都能纯化细菌,稀释涂布平板法还能计数。( )
3.用涂布器将菌液均匀涂布在培养基表面后,应立即将平板倒置,并放入恒温培养箱中培养。( )
4.关于平板划线法和稀释涂布平板法的叙述不正确的是( )
A.都能应用于固体培养基接种
B.都可以用于微生物的计数
C.接种培养后都可获得单菌落
D.接种用具需进行严格灭菌
5.图甲和图乙是两种微生物接种方法的部分操作过程或结果,下列有关叙述正确的是( )
A.图甲中涂布前需要将涂布器置于酒精中灭菌处理
B.涂布平板时取各浓度菌液稀释液1 mL涂布平板
C.图乙中的连续划线的起点是上一次划线的末端
D.完成图乙操作,乙中接种环需要灼烧5次
6.关于统计微生物数目的说法,正确的是( )
A.因为细菌个体小,真菌个体大,细菌需选用稀释倍数更高的稀释液进行平板培养
B.分别测定土壤中细菌的总量和能分解尿素的细菌的数量时选择相同的稀释范围
C.若空白对照组有7个菌落,则在实验组数据基础上减去7,以获得最准确数据
D.若摇瓶中细菌估算数为2×107个/mL,每个平板接种量为100 μL,菌落平均数为200个,则摇瓶内菌液至少稀释104倍
7.关于微生物的计数方法说法正确的是( )
A.常用计数方法有稀释涂布平板法、平板划线法、血细胞计数法
B.显微镜直接计数法统计的结果是活菌的数目
C.用血细胞计数板或细菌计数板计数的方法属于显微镜直接计数法
D.稀释涂布平板法计数值一般比真实值大
1.2 微生物的培养技术及应用-第2课时1 / 3
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