内容正文:
学科
生物
年级
高二
时间
课题
1.2 微生物的培养技术及应用
课型
新授课
课时
第2课时(共4课时)
主备教师
学习目标
1.运用适应观,阐明培养基的营养构成。
2.采用分析与比较、归纳与概括的方法,说明常用无菌技术的异同。
一、微生物的类群和实验室培养条件
(三)微生物的纯培养
1.概念:
(1)培养物:在微生物学中,将接种于培养基内,在合适条件下形成的含特定种类微生物的群体成为培养物;
(2)纯培养物、纯培养:由 称为纯培养物,获得 的过程就是纯培养。
2.纯培养的步骤:配制培养基、 、 、分离和培养
3.酵母菌的纯培养
(1)原理:
(2)菌落
①概念:分散的微生物在适宜的 培养基表面或内部可以繁殖形成肉眼可见的、有一定形态结构的子细胞群体,这就是菌落。
②特征:大小、形状、隆起程度、颜色等
③功能:
(3)※获得单菌落的方法:
(4)材料用具
天平,小刀,纱布,烧杯,锥形瓶,棉塞、牛皮纸(或报纸); 皮筋,培养皿,接种环,酒精灯,超净工作台; 高压蒸汽灭菌锅,干热灭菌箱和恒温培养箱等;
(5)步骤——教材P12
Ⅰ.制备培养基
①配制培养基;称取去皮的马铃薯200 g,切成小块,加水1 000 mL,加热煮沸至马铃薯软烂,用纱布过滤。向滤液中加入20 g葡萄糖(可用蔗糖代替)、15〜20 g琼脂,用蒸馏水定容至1000 mL。
②灭菌;
培养基—— 培养皿——
③倒平板;
a.拔出锥形瓶的棉塞。
b.将瓶口迅速通过火焰。
c.用拇指和食指将培养皿打开一条稍大于瓶口的缝隙,将培养基倒入培养皿(10~20mL),立即盖上皿盖。
d.等待培养基冷却凝固后,将培养皿倒过来放置。
思考与讨论:
1、培养基灭菌后,需要冷却到多少 ℃左右时,才能用来倒平板?为什么?
2、等待培养基冷却凝固后,将培养皿倒过来放置。为什么要倒置培养?
Ⅱ.接种和分离酵母菌
注意事项:
①接种环只蘸一次菌液,但要在培养基不同位置连续划线多次;
②划线首尾不能相接;
③每次划线前灼烧接种环进行灭菌;
④划线操作结束后,仍需灼烧接种环,培养皿倒置培养。
思考与讨论:
1.为什么在操作的第一步以及每次划线之前都要灼烧接种环?在划线操作结束时,仍然需要灼烧接种环吗?为什么?
2.在灼烧接种环之后,要等其冷却后再进行划线的原因?
3.在作第二次以及其后的划线操作时,总是从上一次划线的末端开始划线的原因?
Ⅲ.培养酵母菌
完成平板划线后,待菌液被培养基吸收,将接种后的平板和一个未接种的平板倒置,
放入 左右(培养温度因酵母菌种类的不同而稍有差异)的恒温培养箱中培养24-48h。
思考与讨论: 为什么要同时放入未接种的平板?
实验结果的分析:
(1)培养未接种的培养基的目的是检测培养基是否被杂菌污染(或检查培养基制备是否合格)。未接种的培养基表面若有菌落生长,则说明培养基被污染,应该重新制备;若无菌落生长,则说明未被污染。
(2)在接种酵母菌的培养基上可观察到独立的菌落,这些菌落在颜色、形状和大小上相似,酵母菌菌落一般表面光滑,多呈乳白色。
(3)若在培养基中观察到不同形态的菌落,原因可能是菌液不纯,混入其他杂菌,或在实验操作过程中被杂菌污染。
练一练:
1.下列关于微生物的纯培养的相关说法,错误的是( )
A.微生物是难以用肉眼观察的微小生物的统称,包括细菌、真菌和病毒等
B.纯培养物是由单一个体繁殖所获得的微生物群体
C.纯培养是指获得纯培养物的过程
D.纯培养只包括配制培养基、灭菌、分离几个步骤
2.下列关于“酵母菌的纯培养”实验的叙述,错误的是( )
A.马铃薯捣烂后的滤液中含有酵母菌生长所需的多种营养成分
B.接种环灭菌时,顶端的环和环后的部分柄均需通过火焰灼烧
C.平板划线时,接种环应在固体培养基表面轻轻地连续划线
D.完成平板划线后,应将平板立刻倒置培养以免污染培养基
3.下列有关微生物的分离与培养的叙述,正确的是( )
A.高压蒸汽灭菌结束后,立即打开放气阀并开启锅盖
B.用记号笔标记培养皿中的菌落时,应标记在皿底上
C.倒平板时,为方便操作应将皿盖完全打开放到一边
D.接种前,所有用到的工具都必须进行高压蒸汽灭菌
4.用平板划线法接种酵母菌菌种时,下列叙述错误的是( )
A.接种前将接种环放在酒精灯火焰上灼烧,并需要在酒精灯火焰旁冷却才能接种
B.划线操作时,因培养皿盖不能完全打开,所以操作无须在酒精灯火焰旁进行
C.接种环蘸取菌液前,需将试管口通过火焰,蘸取菌液后,需将试管口通过火焰并塞上棉塞
D.划线时将培养皿打开一条缝隙,用接种环在培养基表面迅速划线,划线后需及时盖上皿盖
5.下图为微生物平板划线示意图,划线的顺序为1、2、3、4、5。下列叙述正确的是( )
A.在每一区域内划线时接种环上的菌种直接来源于菌液
B.划线操作时应在酒精灯火焰旁边打开皿盖划线接种,接种完后在皿盖上做上相应标记
C.每次划线只能从上一次划线的末端开始,才能确保菌种逐步稀释以得到单菌落
D.第1区和第5区的划线最终要连接起来,以便比较前后的菌落数
1.2 微生物的培养技术及应用-第1课时1 / 3
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