内容正文:
第2节 微生物的培养技术及应用
第1课时 微生物的基本培养技术
[学习目标] 1.概述培养基的成分和配制方法。 2.区分消毒和灭菌,掌握不同物品的灭菌方法。 3.概述微生物纯培养的基本操作要求。
任务一 培养基的配制
1.培养基的概念、用途和类型
2.培养基的配方
(1)主要营养物质:水、碳源、氮源、无机盐。
(2)其他条件:pH、特殊营养物质和氧气。如下表:
微生物
乳酸杆菌
霉菌
细菌
厌氧型微生物
特殊需求
添加维生素
pH调至酸性
pH调至中性或弱碱性
无氧
1.培养基的配制原则:目的要明确;营养要协调;pH要适宜。
2.固体培养基中的琼脂仅作为凝固剂,不能为微生物生长提供能量和碳源。
【自我诊断】
1.培养基按照物理性质的不同可分为固体培养基和液体培养基两种基本类型,两者的区别在于前者因加入凝固剂呈固体状态而后者为液体状态。 (√)
2.培养基的主要成分为水、碳源、氮源、无机盐等,此外还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的需求。 (√)
3.培养细菌时,需要将培养基的pH调至酸性,培养霉菌时则需调至中性或弱碱性。
(×)
4.培养厌氧型微生物时,除需要提供无机碳源之外,还需要提供无氧条件。 (×)
5.琼脂固体培养基是在液体培养基中加入琼脂制成的,是实验室中最常用的培养基之一,微生物在其表面或内部生长后可形成光镜可见的菌落。 (×)
[活动1] 深入分析培养基的种类和营养构成
材料1:配制培养酵母菌的培养基:称取去皮的马铃薯200 g,切成小块,加水1 000 mL,加热煮沸至马铃薯软烂,用纱布过滤。向滤液中加入20 g葡萄糖(也可用蔗糖代替)、15~20 g琼脂,用蒸馏水定容至1 000 mL。
材料2:100 g马铃薯中含有80 g水、2 g蛋白质、16 g碳水化合物,还有维生素、无机盐等。
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结合提供的材料和教材中的“1 000 mL牛肉膏蛋白胨培养基的营养构成”,分析并回答下列问题:
(1)按物理性质划分上述两种培养微生物的培养基的种类。
提示:由于琼脂是凝固剂,所以培养酵母菌的培养基是固体培养基,而牛肉膏蛋白胨培养基未加凝固剂,是液体培养基。
(2)分析上述两种培养微生物的培养基的营养构成。
提示:都含有水、碳源、氮源、无机盐和维生素等营养物质,其中培养酵母菌的培养基中主要由糖类提供碳源,蛋白质提供氮源,牛肉膏蛋白胨培养基中主要由牛肉膏和蛋白胨提供碳源、氮源。
(3)为什么培养基需要氮源?
提示:培养基中的氮元素是微生物合成蛋白质、核酸等物质所必需的。
【归纳总结】
培养基营养成分的作用和主要来源
针对练1.(2025·江苏启东中学模拟)下列有关以CO2为唯一碳源的自养微生物所需营养物质的描述中,错误的是( )
A.铵盐和硝酸盐等无机氮为该微生物提供必要的氮素
B.碳源物质不是该微生物的能源物质
C.水、无机盐也是该微生物不可缺少的营养物质
D.琼脂是该微生物的营养要素之一
答案:D
解析:铵盐和硝酸盐等无机氮为该微生物提供必要的氮元素,A正确;以CO2为唯一碳源的自养微生物,CO2是无机物,不是该微生物的能源物质,B正确;水、无机盐也是该微生物不可缺少的营养物质,C正确;琼脂是凝固剂,不是该微生物的营养要素之一,D错误。
不是所有微生物的培养基中都需要加入碳源、氮源
(1)自养微生物能利用无机碳源(如空气中的CO2),故培养基中不用添加碳源。
(2)固氮微生物可利用N2作为氮源,故培养基中不用加入氮源。
(3)对异养微生物来说,含C、H、O、N的有机化合物(尿素除外)既可能是碳源,又可能是氮源。
针对练2.(多选)培养基是人们按照微生物对营养物质的不同需求,配制出供其生长繁殖的营养基质。下列叙述错误的是( )
A.微生物在液体培养基内部生长,可以形成肉眼可见的菌落
B.培养乳酸杆菌时,需要在培养基中添加维生素
C.在培养细菌时一般需要将培养基调至酸性
D.培养基中的营养物质浓度越高,越有利于微生物的生长
答案:ACD
解析:菌落是分散的微生物在适宜的固体培养基表面或内部繁殖形成的,在液体培养基中不会形成菌落,A错误;乳酸杆菌自身不能合成维生素,培养乳酸杆菌时,需要在培养基中添加维生素,B正确;培养细菌时,一般需要将培养基调至中性或弱碱性,C错误;培养基中的营养物质浓度过高,会导致微生物细胞失水,不利于微生物的生长,D错误。
几种微生物的营养和能量来源
微生物
碳源
氮源
能源
蓝细菌
CO2
N、N等
光能
硝化细菌
CO2
NH3
无机氮化合物的氧化
根瘤菌
糖类等有机物
N2
有机物
大肠杆菌
糖类、蛋白质等有机物
蛋白质等
有机物
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任务二 无菌技术
1.获得纯净的微生物培养物的关键:防止杂菌污染。
2.消毒和灭菌
3.注意事项
(1)实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围的物品接触。
(2)为了避免周围环境中微生物的污染,接下来的许多操作都应在超净工作台上并在酒精灯火焰附近进行。
1.芽孢是某些细菌生长到一定阶段,在细胞内形成的休眠体。孢子是某些微生物的繁殖体。
2.与煮沸消毒法相比,巴氏消毒法的优点是在达到消毒目的的同时,营养物质损失较少。
【自我诊断】
1.获得纯净的微生物培养物的关键是防止外来杂菌的入侵。无菌技术应围绕着如何避免杂菌的污染展开,主要包括消毒和灭菌。 (√)
2.灭菌相比消毒对微生物的杀灭更彻底。 (√)
3.无菌操作的对象只要是没有生物活性的材料(如培养基、接种环等)都可采用高压蒸汽灭菌法进行灭菌。 (×)
4.培养基最常用的灭菌方法是高压蒸汽灭菌。 (√)
5.做好消毒和灭菌工作后,要注意避免已经灭菌处理的材料用具与周围的物品接触。
(√)
6.为了避免周围环境中微生物的污染,许多操作都应在超净工作台并在酒精灯火焰的充分燃烧层进行。 (×)
[活动2] 深入理解无菌技术
情境:获得纯净的微生物培养物的关键是防止杂菌污染。无菌技术应围绕着如何避免杂菌的污染展开,主要包括消毒和灭菌。
阅读教材中消毒和灭菌的相关内容,结合上述情境,回答相关问题:
(1)消毒和灭菌的原理有哪些?试举例说明。
提示:使菌体蛋白质凝固变性,如高压蒸汽灭菌法;抑制微生物代谢和生长,或破坏微生物细胞膜的结构,改变其通透性,使细胞破裂、溶解,如某些化学消毒法;损伤微生物DNA等,如紫外线消毒法。
(2)消毒和灭菌都能杀死所有的微生物吗?
提示:灭菌可杀死物体内外所有的微生物,包括芽孢和孢子,而消毒仅能杀死部分微生物。
(3)用化学药物消毒时,某同学认为酒精浓度越高消毒效果越好,于是他用了体积分数为95%的酒精进行消毒,他的这种做法对吗?请解释原因。
提示:不对。体积分数为70%~75%的酒精常用于消毒,原因是环境中酒精浓度过高,会使菌体表面的蛋白质凝固形成一层保护膜,使酒精不能渗入其中。
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【归纳总结】
消毒和灭菌的主要方法及应用范围
项目
主要方法
应用范围
消
毒
巴氏
消毒法
在63~65 ℃消毒30 min或72~76 ℃处理15 s或80~85 ℃处理10~15 s
牛奶等不耐高温的液体
煮沸
消毒法
100 ℃煮沸5~6 min
家庭餐具等生活用品
紫外
线消毒
紫外线照射30 min
接种室、接种箱或超净工作台
化学药
物消毒
用体积分数为70%~75%的酒精、氯气、苯酚或煤酚皂溶液等处理
皮肤、伤口、动植物组织表面消毒和空气、水源
灭
菌
灼烧
灭菌
直接在酒精灯火焰的充分燃烧层灼烧
涂布器、接种环、接种针或其他金属用具、试管口或瓶口等
干热
灭菌
在160~170 ℃的热空气中维持1~2 h
耐高温的和需要保持干燥的物品,如玻璃器皿、金属用具等
高压蒸
汽灭菌
(湿热
灭菌)
100 kPa、121 ℃维持15~30 min
培养基及多种器材、物品
针对练3.(2025·长沙模拟)消毒和灭菌是微生物培养中常用的操作方法。下列说法不正确的是( )
A.接种疫苗前要对注射区域进行消毒
B.在100 ℃条件下煮沸5~6 min属于灭菌方法,可以杀死微生物的营养细胞和一部分芽孢
C.微生物接种技术的方法不同,但核心都是要防止杂菌污染,保证培养物的纯度
D.实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围物品相接触
答案:B
解析:在100 ℃条件下煮沸5~6 min属于消毒方法,B错误。
芽孢和孢子
(1)芽孢:有些细菌在一定的条件下,细胞里面形成一个椭圆形的休眠体(不是繁殖体),叫作芽孢。芽孢的壁很厚,对干旱、低温、高温等恶劣的环境有很强的抵抗力。芽孢又小又轻,可以随风飘散。当环境适宜的时候,芽孢又可以萌发,形成一个细菌。
(2)孢子:细菌、原生动物、真菌和植物等产生的一种有繁殖或休眠作用的生殖细胞。孢子的特点是能直接长成新个体。
针对练4.(2024·甘肃天水高三期末)实验室常用高压蒸汽灭菌锅进行灭菌,下列叙述正确的是( )
A.放入待灭菌物品后,关闭排气阀,即可打开电源加热
B.一般在压力为100 kPa、温度121 ℃的条件下灭菌10 min
C.高压蒸汽灭菌法可以杀灭物体内外所有的微生物,包括芽孢和孢子
D.若压力达到设定要求时,锅内没有达到相应温度,说明灭菌锅的温度计测量有误
答案:C
解析:放入待灭菌物品后,加热灭菌锅,打开排气阀,排除锅内冷空气,A错误;为达到良好的灭菌效果,一般在压力为100 kPa,温度为121 ℃的条件下,维持15~30 min,B错误;高压蒸汽灭菌法是常用的湿热灭菌法之一,可以杀灭物体内外所有的微生物,包括芽孢和孢子,C正确;若压力达到设定要求,而锅内没有达到相应温度,最可能的原因是未将锅内冷空气排尽,D错误。
高压蒸汽灭菌的2个注意点
(1)高压蒸汽灭菌开始之前要将锅内的冷空气排尽。因为空气的膨胀压大于水蒸气的膨胀压,所以,当水蒸气中含有空气时,在同一压力下,含空气蒸汽的温度低于饱和蒸汽的温度。
(2)灭菌完毕后,要待压力降到0时才能打开排气阀,否则会导致锅内压力突然下降,使容器内的培养基由于内外压力不平衡而冲出瓶口或试管口,造成棉塞沾染培养基而发生污染。
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任务三 微生物的纯培养
1.概念辨析
2.酵母菌的纯培养
3.倒平板的操作步骤
4.平板划线法的具体操作
(选择性必修3 P12~13“探究·实践”延伸思考)培养基灭菌后,需要冷却至50 ℃左右才能倒平板的原因是什么?用什么方法来估计培养基的温度?琼脂是一种多糖,在水中需加热至95 ℃时才开始熔化,熔化后的溶液温度需降至40 ℃时才开始凝固,倒平板时高于50 ℃则会烫手,低于50 ℃时若不及时操作,琼脂会凝固。可以用手触摸盛有培养基的锥形瓶,感觉锥形瓶的温度下降到刚刚不烫手时,即可以进行倒平板操作。
【自我诊断】
1.培养基分装到培养皿后再进行高压蒸汽灭菌。 (×)
2.倒平板操作中,等待平板冷却凝固后,要将平板倒置。 (√)
3.平板划线操作中,划完一个区域后要将接种环灼烧,再划下一个区域。 (√)
4.若皿盖和皿底之间溅上培养基,这个培养基不可再用。 (√)
5.平板划线法接种时,每一次划线前都要蘸取菌种。 (×)
6.需要将一个不接种的培养基放在相同的条件下培养,以检验培养基的灭菌是否合格。 (√)
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[活动3] 深入分析平板划线法的操作
情境:发酵生产啤酒的过程中,杂菌产生的微量副产物是啤酒“上头”的原因之一,可采用平板划线法对酵母菌进行纯化。
如图是平板划线操作的示意图,据图回答下列问题:
(1)用图中字母和箭头表示平板划线操作的正确步骤: 。
提示:d→b→f→a→e→c→h→g
(2)在划线操作结束时,仍然需要灼烧接种环吗?为什么?
提示:需要;划线结束后灼烧接种环,能及时杀死接种环上残留的菌种,避免污染环境和感染操作者。
(3)在第二次以及其后的划线操作时,为什么总是从上一次划线的末端开始划线?
提示:划线后,线条末端菌种的数目比线条起始处要少,每次从上一次划线的末端开始,能使菌种的数目随着划线次数的增加而逐步减少,最终能得到由单个微生物繁殖而来的菌落。
(4)接种结束后,为什么要将一个未接种的培养基和一个已接种的培养基放在一起培养?未接种的培养基表面如果有菌落生长,说明了什么?
提示:培养未接种的培养基的作用是对照,未接种的培养基经过培养后无菌落生长,说明培养基的制备是成功的;若有菌落生长,说明培养基灭菌不彻底,或培养基被污染了,需要重新制备。
【归纳总结】
1.配制培养基的注意事项
(1)如果需要调节培养基的pH,应该在定容完成之后、灭菌之前进行操作。
(2)培养基灭菌后需要冷却至50 ℃左右时才能倒平板。温度过高会烫手,且培养基凝固后皿盖上凝结的冷凝水过多,易落入培养基造成污染;温度过低,培养基会凝固。
(3)倒平板时,要使锥形瓶的瓶口通过火焰。通过灼烧灭菌,防止瓶口的微生物污染培养基。
(4)将培养皿打开一条稍大于瓶口的缝隙,不要完全打开,以免杂菌污染培养基。
(5)整个操作过程要在酒精灯火焰旁进行,避免杂菌污染。
2.平板划线操作的注意事项
(1)灼烧接种环,待其冷却后才能伸入菌液,以免温度太高杀死菌种。
(2)接种环蘸取菌液前后,要将试管口通过火焰;划线操作全程都要在酒精灯火焰旁进行。
(3)第二次及其以后的划线操作总是从上一次划线末端开始,能使微生物的数目随着划线次数的增加而逐步减少,最终得到由单个细菌繁殖而来的菌落。划线时最后一次的划线不要与第一次的划线相连。
(4)划线时用力大小要适当,避免用力过大将培养基划破。
(5)操作第一步即取菌种之前以及每次划线之前都需要将接种环进行火焰灼烧灭菌,划线操作结束时,仍需灼烧接种环。
3.实验结果的分析
(1)若未接种的培养基表面有菌落生长,则说明培养基被污染,应该重新制备;若无菌落生长,则说明未被污染。
(2)在接种酵母菌的培养基上可观察到独立的菌落,这些菌落在颜色、形状和大小上相似,酵母菌菌落一般表面光滑、多呈乳白色。
(3)若在培养基中观察到不同形态的菌落,原因可能是菌液中混入了其他杂菌,或在实验操作过程中被杂菌污染。
针对练5.(2025·辽宁沈阳模拟)下列有关微生物的分离与培养的叙述,错误的是( )
A.获得纯净培养物的关键是防止杂菌污染
B.倒置平板可防止培养皿皿盖上的冷凝水落入培养基
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C.倒平板时将培养皿的皿盖拿开,以便于将锥形瓶中的培养基倒入培养皿
D.检验培养基是否被杂菌污染的最有效方法是将未接种的培养基放在恒温培养箱中培养
答案:C
解析:倒平板时用食指和拇指将培养皿打开一条稍大于瓶口的缝隙,随后倒入培养基,C错误。
针对练6.(2024·广西桂林高二开学考试)微生物的纯培养包括配制培养基、灭菌、接种、分离和培养等步骤。下列关于酵母菌的纯培养的叙述错误的是( )
A.采用平板划线法和稀释涂布平板法均可分离酵母菌
B.可用湿热灭菌法对培养酵母菌的马铃薯琼脂培养基进行灭菌
C.通过接种环连续蘸取菌液在固体培养基表面划线的操作,可将菌种逐步稀释
D.完成平板划线后,待菌液被培养基吸收,再将接种后的平板进行培养
答案:C
解析:对于微生物进行分离的方法有平板划线法和稀释涂布平板法,A正确;可用湿热灭菌法(通常是高压蒸汽灭菌法)对培养酵母菌的马铃薯琼脂培养基进行灭菌,B正确;通过接种环在固体培养基表面连续划线的操作,将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面,该过程中只蘸取一次菌液,C错误;完成平板划线后,待菌液被培养基吸收,将接种后的平板(和一个未接种的平板)倒置培养,D正确。
针对练7. (2025·石家庄联考)接种微生物的方法很多,平板划线法是最常用的一种。如图是平板划线示意图,划线的顺序为①②③④。操作方法中错误的是( )
A.划线操作时,将蘸有菌种的接种环插入培养基
B.平板划线后培养微生物时要倒置
C.不能将第④区域的划线与第①区域的划线相连
D.在②~④区域中划线前后都要对接种环进行灭菌
答案:A
解析:将蘸有菌种的接种环在培养基表面迅速划三至五条平行线,而不能插入培养基,A错误;用平板培养基培养微生物时,为防止水蒸气凝集滴入培养基造成干扰或污染,应将平板倒过来放置培养,B正确;划线时要避免最后一区的划线与第一区的划线相连,因为最后一区的细菌最少,而第一区的细菌最多,如果连在一起则有可能影响单个菌落的分离效果,C正确;在②~④区域中划线前都要对接种环进行灼烧灭菌,保证每次划线的菌种来自上一区域的末端,划线结束灼烧接种环能防止菌种污染环境,D正确。
培养基中微生物数目过多或连成一片的原因
(1)菌液浓度过高。
(2)培养过程中被杂菌污染。
(3)利用接种环划线时,每次划线前未灼烧灭菌。
思维导图
要语必背
1.培养基中一般都含有水、碳源、氮源和无机盐等营养物质。
2.获得纯净的微生物培养物的关键是防止杂菌污染。
3.消毒是指使用较为温和的物理、化学或生物等方法杀死物体表面或内部一部分微生物。灭菌是指使用强烈的理化方法杀死物体内外所有的微生物,包括芽孢和孢子。
4.由单一个体繁殖所获得的微生物群体称为纯培养物,获得纯培养物的过程就是纯培养。
5.菌落是分散的微生物在适宜的固体培养基表面或内部繁殖形成的肉眼可见的、有一定形态结构的子细胞群体。
1.(2024·陕西西安高二期末)下列有关微生物培养基的配制表述错误的是( )
A.培养硝化细菌的培养基中添加的铵盐可作为能量来源
B.尿素固体培养基中的K2HPO4能用于维持培养基的pH
C.培养光能自养型蓝细菌的培养基中不需提供有机碳源
D.马铃薯琼脂固体培养基中的琼脂能作为酵母菌的碳源
答案:D
解析:硝化细菌是化能自养型生物,可利用氧化无机氮化合物获得能量,将无机物转化为有机物,故培养硝化细菌的培养基中的铵盐可作为能量来源,A正确;HP既能解离产生H+,又能结合H+,故尿素固体培养基中的K2HPO4能用于维持培养基的pH,保证微生物所需的酸碱环境,B正确;培养光能自养型蓝细菌的培养基中不需提供有机碳源,蓝细菌可利用二氧化碳和水合成有机物,C正确;琼脂的作用是凝固剂,不能作为碳源,D错误。
2.我国科学家从北极分离、鉴定出了一种耐冷细菌,过
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程如下:①接种在人造海水中,15 ℃条件下振荡培养3 h;②依次等比稀释后将样品涂布在TYS培养基中,15 ℃条件下培养7 d;③挑取生长菌落,进行划线,15 ℃条件下培养;④选择不同形态的菌落进行培养、鉴定和保存。下列叙述错误的是( )
A.过程①中的振荡培养可以提高培养液中的溶氧量
B.过程②③使用的接种器具均需灼烧并冷却后才能用于接种
C.过程②中的TYS培养基灭菌前需将pH调至酸性
D.涂布后再次划线培养的目的是进一步纯化所得菌种
答案:C
解析:过程①中的振荡培养,能使人造海水与氧气充分接触,提高溶解氧的供应量,A正确;过程②③使用的接种器具均需灼烧,是防止杂菌污染,冷却后操作是避免因接种器具温度太高杀死菌种,B正确;过程②中的TYS培养基灭菌前将pH调至酸性,会破坏该细菌的细胞结构,应将pH调至中性或弱碱性,C错误;稀释涂布平板法能获得单菌落,但为避免杂菌污染,保证培养物的纯度,会在涂布后再次划线培养,以保证可以进一步得到纯化的菌种,D正确。
3.(2025·武汉模拟)平板接种是微生物培养常用技术。下列叙述错误的是( )
A.不含碳源的平板可以用于某些微生物的培养
B.进行平板划线时,接种环使用前必须进行灼烧灭菌
C.接种后未长出菌落的培养基可以直接丢弃
D.以尿素为唯一氮源的培养基上长出的菌落不一定可以分泌脲酶
答案:C
解析:不含碳源的平板可以用于某些自养型微生物的培养,A正确;进行平板划线时,接种环使用前必须进行灼烧灭菌,冷却后接种,B正确;接种后未长出菌落的培养基上,可能含有少量肉眼观察不到的菌落,不可以直接丢弃,C错误;以尿素为唯一氮源的培养基上长出的菌落不一定可以分泌脲酶,也可能有固氮微生物的生长,D正确。
4.(多选)(2025·江苏南通期末)许多生物学实验十分重视无菌操作,防止杂菌污染。下列操作正确的是( )
A.对无菌室、超净工作台和实验员可采用紫外线杀菌
B.家庭制作酸奶时,要将容器和鲜牛奶进行灭菌
C.加入培养基中的指示剂和染料需要灭菌
D.灼烧灭菌法可杀死微生物的营养体和芽孢
答案:CD
解析:对无菌室、超净工作台可采用紫外线杀菌,对实验员的衣着和手可用酒精进行消毒,A错误;家庭制作酸奶时,要将容器煮沸消毒,鲜牛奶要进行巴氏消毒,保留营养成分,B错误;加入培养基中的指示剂和染料也需要灭菌,否则可能会污染培养基,C正确;灼烧灭菌法可杀死物体内外所有的微生物(包括微生物的营养体、芽孢和孢子),D正确。
5.(2025·黑吉辽蒙卷)科研人员通过稀释涂布平板法筛选出高耐受且降解金霉素(C22H23ClN2O8)能力强的菌株,旨在解决金霉素过量使用所导致的环境污染问题。下列叙述错误的是( )
A.以金霉素为唯一碳源可制备选择培养基
B.逐步提高培养基中金霉素的浓度有助于获得高耐受的菌株
C.配制选择培养基时,需确保pH满足实验要求
D.用接种环将菌液均匀地涂布在培养基表面
答案:D
解析:以金霉素为唯一碳源的选择培养基,仅允许能利用金霉素的微生物生长(其他无法利用金霉素的微生物被抑制),符合选择培养基的设计原理,A正确;逐步提高金霉素浓度可模拟环境胁迫,筛选出耐受性更强的菌株(类似“驯化”过程),B正确;培养基的pH需根据目标微生物的生长需求调整(如细菌通常需要中性或弱碱性环境,培养霉菌时,一般需要酸性环境),是配制培养基的基本要求,C正确;稀释涂布平板法需用涂布器将菌液均匀涂布在培养基表面,而接种环用于平板划线法(分离单菌落),用接种环涂布无法保证菌液均匀,D错误。
6.(创新情境)牛奶是微生物生长的良好培养基。牛奶在饮用前都要经过巴氏消毒,以杀死有害微生物。为检测自制酸奶是否被杂菌污染,先将酸奶进行一定程度的稀释,回答下列问题:
(1)牛奶用巴氏消毒的好处是 。
(2)取最终的牛奶稀释液在培养基上划线,应选择的工具是下图中的 (填选项)。
(3)理想情况下,培养一段时间后可在培养基表面形成菌落,如果培养基上出现 的菌落,说明自制酸奶已被杂菌污染。
(4)已知酸奶中的有益菌主要是乳酸菌,纯化乳酸菌时划线操作正确的是 (填选项)。
答案:(1)牛奶的营养成分不被破坏(或营养成分没有损失) (2)A (3)(形状、大小、颜色、光泽度)不同 (4)B
解析:(1)巴氏消毒的方法是指63~65 ℃消毒30 min或72~76 ℃处理15 s或80~85 ℃处理10~15 s,使用这种方法对生鲜牛奶进行消毒的好处是牛奶的营养成分不被破坏。(2)划线时所用的接种工具是接种环,即图中的A。(3)如果培养基上出现(形状、大小、颜色、光泽度)不同的菌落,说明自制酸奶已被杂菌污染。(4)A图很难得到由单个菌株繁殖而来的菌落;B图划线从上次划线末端开始,容易得到由单个菌株繁殖而来的菌落;C图划线没有从上次划线的末端开始,接种环上没有菌种,不能得到由单个菌株繁殖而来的菌落;D图划线不是从上次划线末端开始,不容易得到由单个菌株繁殖而来的菌落。
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