内容正文:
生物试题
本试卷为第I卷(选择题)和第Ⅱ卷(非选择题)两部分,共100分,考试时间75分钟。
注意事项:
1.答题前,考生先将自己的姓名、准考证号填写清楚;
2.选择题必须使用2B铅笔填涂;非选择题必须使用0.5m黑色签字笔答题:
3.请按题号顺序在各题目的答题区域内作答,超出区域书写的答案无效;
4.在草稿纸、试题卷上答题无效保持卡面清洁,不要折叠、损毁。
第I卷
一、选择题(共15个小题,每题3分,共45分,每小题只有一个正确答案)
1.核纤层系处于核膜内侧的纤维状蛋白网络。在细胞分裂进程中,核纤层蛋白发生磷酸化会致使核膜崩
解,去磷酸化则会促使核膜重新聚合。下列说法错误的是()
A.核纤层蛋白的单体都以若干个相连的碳原子构成碳链为基本骨架
B.核纤层蛋白的合成过程与tRNA、mRNA、rRNA有关
C.高温、强酸、强碱等不利条件会引起核纤层蛋白结构的改变
D.连续分裂的细胞中,核纤层蛋白两次磷酸化之间的过程即为一个细胞周期
2.生物膜上存在着一些能携带离子通过膜的载体分子。某种载体分子对X离子有专一的结合部位,能选
择性地携带X离子通过膜,转运机制如图所示。已知X离子可参与构成线粒体内的丙酮酸氧化酶;载体
IC的活化需要ATP。下列相关叙述正确的是()
-ATP
活化载体
激
X离子o
ADP
线
载体离子复合物区8
IC
粒
X离子
未活化载体
Pi
外州
膜
内细胞质
A.磷酸激酶能促进ATP的合成,磷酸酯酶能促进ATP的水解
B.图中X离子的跨膜运输需要消耗能量
C.载体携带X离子进入线粒体基质发挥作用至少需要穿过4层磷脂双分子层
D.在磷酸激酶的作用下,CIC分子发生去磷酸化过程中空间结构发生改变
3.某健康生物体受X刺激后,其体内相关生理指标变化示意图如图所示,则X刺激、生理指标及BC段
相关的生理变化对应一致的是()
生
X刺激
理
指标
时间
A.较高浓度的KNO3溶液处理—植物根细胞的吸水能力一K+、NO进入根细胞
B.一次性摄取过多碱性饮料一血液中pH变化—缓冲物质与碱性物质结合
C,人刷烈运动一血钠含量一肾上腺髓质分泌醛固酮增加
[u
·预祝考试顺利
D.注射适量胰岛素一人血糖浓度在肝和骨骼肌细胞中肝糖原分解加快
4.实验过程中的变化因素称为变量,变量有自变量、因变量和无关变量之分。下列关于实验叙述正确的
是()
A.比较过氧化氢在不同条件下分解的探究实验,自变量为催化剂的种类
B.探究土壤微生物对落叶的分解作用实验,60℃处理土壤1h组为实验组
C.探究淀粉酶对淀粉和蔗糖的水解作用实验,选用碘液对因变量进行检测
D.探究培养液中酵母菌种群数量变化实验,培养的时间属于无关变量
5.老化的线粒体会产生自由基,加速细胞衰老和产生疾病。“饿一饿,更健康”的核心机理是可以选择性清
除老化的线粒体。葡萄糖氧化分解首先生成丙酮酸,丙酮酸再生成乙酰辅酶A,乙酰辅酶A可以再转运回
细胞质。当营养减少时,细胞质中的乙酰辅酶A浓度下降,导致NLRX1蛋白构象改变从而与LC3蛋白结
合,引起线粒体自噬,相关机制如图所示。下列叙述正确的是(
)
营养物质浓度
乙酰辅酶A
乙酰捕酶A
⊙
NIRXI
0-Lc3
↓表示促进
线粒体自噬
线粒体自噬
⊥表示抑制
A.丙酮酸和水在线粒体基质中被分解,产生CO2和NADH并释放能量
B.糖尿病患者细胞内乙酰辅酶A含量高,NLRX1更容易与LC3结合
C.自由基攻击核酸分子会产生更多自由基,引发雪崩式反应加剧细胞衰老
D.线粒体自噬需要溶酶体的参与,自噬产生的物质全部排出细胞外
6.按下列步骤对一种红花油茶(2=30)染色体核型进行分析:①取幼苗根尖用
秋水仙素处理2→②对根尖进行固定、保存→③解离、漂洗、染色→④取根尖分
生区置于载玻片上、制片→⑤镜检、拍照、分析。其核型分析的染色体照片如图
所示,相关叙述错误的是()
A.步骤①的目的是抑制纺锤体的形成,使细胞停滞于有丝分裂中期
B.步骤②可用卡诺氏液固定0.5-1h后,再保存于95%的酒精中
C.图中应包括30条染色体、60个核DNA分子、2个染色体组
10米
D.除图示细胞外,视野中还应观察到含60条染色体的后期细胞
7.原核生物DNA复制、转录和翻译的过程如图,其中①②③分别表示生理过程,a、b分别表示亲代DNA
的两条链。下列说法错误的是()
a链,
b链-
①
A.①过程中b链的5'端指向解旋酶移动方向
B.②过程中启动子在基因的左侧
C.③过程中核糖体移动方向为从左到右
D.①②③三个过程均存在碱基互补配对现象
8.研究发现,促肾上腺皮质激素释放激素(CRH)、生长激素释放激素(GHRH)和皮质醇在睡眠一觉醒
周期的调控中占据重要地位,其调控机制如图所示。下列说法错误的是()
Iu
考试顺利
皮质醇←一促肾上腺
皮质激素
脑区蓝(什),大脑皮层兴奋,
(+)斑核
促进觉醒
下丘脑→CRH
(-GHRH
(+)进入慢波睡眠、
深度入睡
A.CRH诱导大脑皮层觉醒属于非条件反射
B.夜间CRH分泌量增多,清晨GHRH分泌量增多
C.皮质醇的分泌过程受分级调节与反馈调节影响
D.提高下丘脑皮质醇受体的敏感性可缓解失眠症状
9.为探究不同浓度的外源赤霉素(GA3)、生长素(IAA)以及脱落酸(ABA)对青稞种子生根的影响,
某兴趣小组选取健康无污染、颗粒饱满的青稞种子进行实验,第6天的实验结果如图所示。下列有关叙述
中,错误的是()
生根率(%)
平均根长(cm)
100.0f
4.00m
90.0t
-
GA:
3.50
80.01
3.00
70.01
60.01
2.50
50.0
ABA
2.00
40.0
1.50
30.0
IAA
20.0
1.00
ABA
10.0
0.50
0.00
0
246810
0
2
46810
植物激素浓度(moL)
植物激素浓度(molL)
A.浓度为4mol/L8mo/L时,IAA、GA3促进青稞种子生根,ABA抑制青稞种子生根
B.浓度为8ol/L的GA3对青稞种子的生根率和平均根长的影响均达到最大
C.浓度为10 umol/L的IAA对青稞种子根的伸长生长具有明显的抑制作用
D.青稞种子在休眠过程中,IAA、GA3的浓度可能较低,ABA的浓度可能较高
10.科学家通过小鼠低蛋白饮食与正常饮食的对比实验,发现亲代的低蛋白饮食可影响自身基因表达(其
机理如图),且这种影响可遗传给子代。据图分析,下列说法正确的是()
低蛋白饮食的小鼠
正常饮食的小鼠
信号传导
信号传导
G9列ATF7①
G9ATF7
磷酸化
O
低蛋白饮食小
@心相关基囚/
中©内②@相关基因,
鼠产生的精子
9mATF莎
正常饮食小
鼠产生的精子
睾丸
黎丸
注:G9a-ATP7转录复合因子·组蛋白染色体蛋白)甲基化
(1)抑制
广(↓)激活
A.生物体中只要自身基因表达和表型发生变化的现象即表观遗传
B.图中小鼠正常饮食后组蛋白甲基化水平升高,使相关基因表达量增加
C.G9a-AT℉7转录复合因子通过磷酸化和去磷酸化改变自身构象,调控相关基因表达
D.亲代低蛋白饮食导致的表观遗传改变可遗传至子代,影响其基因碱基排列序列
11.“碳汇”是指吸收大气中C02的过程或活动,“碳源”是指向大气释放C02的过程。图甲是某草原生态系
统中碳循环模式图,图乙是该草原生态系统中部分生物种群之间形成的食物网模型。下列说法正确的是
()
[山
·预祝考试顺利
分
A.图甲中的b是对应图乙中的Ⅱ和Ⅲ
B.图甲中缺少的碳流动方向是b→a,c→a、d→a
C.“碳汇和“碳源”使草原中的碳在生物群落中发生碳循环
D.提高草原植物的多样性有助于增加碳汇,体现生物多样性的直接价值
12.两种远缘植物细胞融合后,一方染色体会被排出。若融合前其中一个细胞染色体断裂,则不会全部排
出,未排出的染色体片段可整合到另一细胞染色体上,留存于杂种细胞中。大剂量的紫外线能随机破坏染
色体结构,使其发生断裂,导致细胞不再分裂。碘乙酰胺(IOA)可使细胞质中某些酶失活,从而抑制细
胞分裂。科研人员将产量高的普通小麦与耐盐性强的中间偃麦草(耐盐基因位于染色体上)进行体细胞杂
交,获得了耐盐小麦新品种,如图所示。下列说法错误的是()
I处理
普通小麦①普通小麦
细胞
原生质体②,杂种
杂种
耐盐
细胞
植株
小麦
中间偃麦草中间偃麦草
细胞①原生质体
Ⅱ处理
A.过程①需要利用纤维素酶和果胶酶去除两种植物细胞的细胞壁
B.I处理和Ⅱ处理分别代表大剂量紫外线处理和适量的IOA处理
C.过程②产生的能恢复分裂能力的细胞为融合成功的杂种细胞
D.可先对杂种幼苗进行耐盐性检测,然后移植到消过毒的蛭石环境中培养
13.肿瘤坏死因子-α(TNF-α)是一种重要的细胞因子,高浓度时会引发多种疾病。科研人员利用细胞工
程技术制备了抗TNT-α的单克隆抗体用于治疗,其核心流程如图所示,下列相关叙述错误的是()
注射了TNF-c
的小鼠
B淋巴细胞
融合
②
③
杂交瘤细胞
①
④
大规模培养
单克隆抗体
长
目标杂交瘤细胞
A.图中①是通常从小鼠的骨髓中获得的骨髓瘤细胞
B.用灭活病毒诱导法获得的②可能有未融合细胞、同种核或异种核融合细胞
C.步骤③用特定的选择培养基是为了筛选出能产生抗TNF-α抗体的杂交瘤细胞
D.步骤④对经过选择培养的杂交瘤细胞进行克隆化培养和抗体检测
14.某常染色体隐性遗传病是由A基因(长度约1000bp)突变导致的,已知A基因上没有限制酶EcoRI
的识别序列,但突变后的基因可能存在B℃oRI的识别序列。现有甲、乙两个家族的遗传系谱图及与该病相
关的基因经EcoRI酶切后的电泳图(如图所示)。下列叙述错误的是()
]第4页·预祝考试顺利
乙
●患病女性
■患病男性
○正常女性
口正常男性
bpI2IliⅡ2?
bp I3 14 II3 II4
1000
1000
900
900
750
A.A基因可产生不同突变型,体现了基因突变的不定向性
B.2的电泳结果出现3个条带,说明2为该病致病基因的携带者
C.据图推测,亚的电泳结果出现3个条带的概率为23
D.、山4的电泳结果均只出现1个条带,说明二者均为纯合子
15.研究发现鹌鹑突变基因A,和B1分别位于10号染色体的位点1和位点2,如图甲所示。已知双突变纯
合子致死,位点1只含基因A1的蛋壳为青色,位点2只含有基因B1的蛋壳为白色,其他的蛋壳为淡黄色
(野生型基因用A、B表示)。图乙为雌性鹤鹑,其一条10号染色体上含基因B1的片段缺失后,剩余片
段与W染色体结合,另一条正常10号染色体无法和该变异染色体联会,Z和W染色体可顺利完成联会。
下列分析不正确的是()
10号染色体ZW10
图甲
图乙
图丙
A.图乙个体形成过程中发生染色体数目变异和染色体结构变异
B.图乙可产生的配子基因组成为ABZ、WA、Z、ABWA
C,鹤鹑蛋壳表现为白色的个体基因型为AABB1或AAB1B1
D.若图乙与图丙所示个体交配,后代雌性个体中只有白色和淡黄色
第Ⅱ卷
二、非选择题(共5个小题,满分55分)
16(10分)·莴苣海蛞蝓是一种海洋软体动物,以滨海无隔藻等藻类为食。它能将藻类的叶绿体分离、储
存并加以利用。
31
组1:对照
P2X4
V-ATPase
组2:5-BDBD(P2X4阻断剂
+
组3:DCMU(光合作用抑制剂)
绿体
盗食质体
组1组2组3
图1
图2
(I)研究揭示,藻类叶绿体储存在莴苣海蛞蝓的消化腺细胞,形成特化细胞器一盗食质体,图1为盗食质
体模式图。
·“……一门第5页·预祝考试顺利
①盗食质体膜上的V型ATP酶质子泵(V-ATPase)可将H+以
方式转入盗食质体内,H与盗食质
体内丰富的HCO反应生成C02,C02进入叶绿体,经CO2的固定和
过程生成有机物。
②研究者围绕盗食质体膜上的通道蛋白P2X4开展研究,部分实验结果见图2。从图2可得出,正常情况
下莴苣海蛞蝓的光合速率约为
nmol-cm2s'。图2结果表明P2X4有助于维持叶绿体的光合功能,
依据是
③研究者经过一系列研究,推测盗食质体膜上的P2X4可被叶绿体产生的ATP激活,引起Na、K+等阳离
子流出,解决V-ATPase工作时产生的电荷不平衡,以维持V-ATPase的持续工作和盗食质体内酸性环境,
利于光合作用的进行。下列实验现象可为上述推测提供支持的有
(多选)。
A、从光照转为黑暗后,盗食质体膜上P2X4介导的阳离子外流显著减少
B.向分离的盗食质体内加入含Na的溶液,V-ATPase运输Ht的速率提高
C.P2X4阻断剂5-BDBD处理后,盗食质体内的pH比对照组高
(2)莴苣海蛞蝓无法持续补充藻类叶绿体中不断损耗的蛋白质,不摄食的情况下可存活约10周。研究发现,
当不摄食超过4周后,莴苣海蛞蝓会由绿变橙,甚至变白,检测到消化腺细胞中溶酶体数量增加,盗食质
体膜上的溶酶体标记物富集。请综合上述研究及所学知识。从物质与能量观的角度阐述莴苣海蛞蝓对盗食
质体利用的策略是
17(11分),肺癌是全球发病率和死亡率最高的恶性肿瘤之一,这与肺癌细胞的免疫逃逸现象密切相关。
研究发现,肺癌患者肿瘤组织及外周血中调节性T细胞(Treg)数量显著升高。为探究Trg在肺癌细胞免
疫逃逸中的作用,研究人员开展了以下研究,回答下列问题:
(1)Trg细胞起源于骨髓中的,在一(器官)中发育成熟。肺癌细胞在免疫系统攻击下死亡的方
式为
(2)研究人员检测了不同临床分期肺癌患者外周血中Trg细胞占总T细胞的比例、细胞毒性T细胞(Tc)
活性及肿瘤体积,部分结果如下表,由表中数据可推测Teg细胞通过
促进肺癌进展。
肺癌分期
Treg细胞占比(%)
Tc细胞活性(相对值)
平均肿瘤体积(cm)
I期
3.1±0.4
82.5±6.3
1.0±0.2
Ⅱ期
5.8±0.7
65.3±5.7
2.7±0.5
Ⅲ期
8.3±1.1
41.2±4.9
4.6±0.8
V期
12.4±1.5
28.7±4.2
6.5±1.0
(3)研究人员推测Trg细胞通过分泌Ⅱ-l0来影响Tc细胞活性,某实验小组为验证上述推测设计如下实验:
分组:甲组(Tc细胞+培养液)、乙组(Tc细胞+Treg细胞+培养液)、丙组(Tc细胞+Treg细胞+L-l0抗
体+培养液)
检测:培养一段时间后,检测各组Tc细胞的活性。
①从实验设计的严谨性角度分析,还需补充一组实验:
②预期结果:
(4)研究表明,肺癌细胞主要通过无氧呼吸获取能量,
0mol/九乳酸
□0.1mol/L乳酸
并将乳酸分泌到肿瘤微环境中。为了研究肺癌细胞分
1.5
国1.0mo1/九乳酸
冒10mo1/L乳酸
泌的乳酸的作用,研究人员用含有不同浓度乳酸的培
1.0
养液分别培养Tc细胞和Treg细胞,一段时间后检测细
胞增殖情况,结果如图(细胞分裂指数越高表示增殖
0.5
能力越强)。请综上阐述,肿瘤细胞通过分泌乳酸实
现免疫逃逸的主要机理
Tc细胞
Treg细胞
是
一··一】第6页·预祝考试顺利
18(12分),松毛虫是我国最主要的森林害虫,性别决定方式为ZW型(2N=60),赤眼峰是可用于针对
松毛虫等害虫的卵期寄生蜂,运用赤眼蜂可进行生物防治。赤眼蜂的性别由染色体数目决定,二倍体为雌
性,单倍体为雄性。
(1)自然界雌雄松毛虫的比例接近1:1,其原因是
(2)野生型松毛虫全体布满黑色的毛,某兴趣小组偶然发现一只白色雄虫。该兴趣小组让该白色雄虫与
多只黑色雌虫杂交,结果为子代松毛虫雌虫:雄虫=11,雌雄子代中白色:黑色均为1:1。故该组某同
学提出白色松毛虫的出现属于
一(填“显性”或“隐性”)突变,且黑白性状由常染色体上的基因控
制,但是有同学认为相关基因可能位于性染色体上,请你利用子代松毛虫为实验材料,欲判断控制黑白性
状基因的位置(不考虑ZW的同源区段)。设计两个独立实验杂交组合】
(3)赤眼蜂可以进行有性生殖,也可以进行无性生殖。在有性生殖过程中,已交配的雌蜂可产生受精卵
和未受精卵,其中未受精卵发育成雄性后代。孤雌生殖过程中,经减数分裂后未受精的卵细胞直接发育成
雄性后代。Wolbachia(一种细菌)广泛寄生于赤眼蜂体内,可诱导其发生孤雌产雌生殖现象,即未受精的
卵恢复二倍体发育成雌峰。科研人员认为:Wolbachia使宿主细胞第一次有丝分裂失败,促使染色体数目
加倍,导致未受精卵发育成雌性。为了探究四环素处理对赤眼蜂孤雌产雌生殖的影响,随机选取生长一致
的多只赤眼峰分为4组。F1组为对照组,喂食
其余3组分别喂食含有浓
度为5mg/mL、15mgmL、25mgmL四环素的蜂蜜水,连续饲喂4个世代。观察统计各世代赤眼蜂的子
代雄性比,结果如图。由图可知,用
处理可以获得最高程度赤眼峰子代雄性比。
100
904
雄
,F4
80H
70H
601
(%)5
0F
30
0F
10H
F
04
0
5
15
2方四环素浓度
(mgmL)
(4)请解释四环素是如何通过对Wolbachia的作用使赤眼蜂后代产生雄性个体的?
19(10分)·草原生态系统具有独特的物种组成和营养结构,其稳定性与生物间的相互作用密切相关。研
究人员对某草原开展了两项调查:一是草地蘑菇圈(大量蘑菇呈圈带状分布的生态现象)对圈上、圈内和
圈外植物和土壤的影响:二是该草原两种鼠类(子午沙鼠、大沙鼠)及其部分天敌(兔狲、赤狐)的昼夜
相对活动频次,调查结果如图1(蘑菇圈分布示意图)、图2(四种动物的相对活动频次图)所示。请结
合调查结果和生态学知识,回答下列问题。
100
圈上
口昼间
■夜间
圈内
圈外
60
口清晨与黄昏
40
草地
20
蘑菇
图1
免狲
赤狐大沙鼠子午沙鼠
图2
(1)生态系统的结构是指生态系统的
、。
处于平衡状态的生态系统具有结构平衡、功能平衡
和的特征。
(2)分析图1可知,圈上植物长势明显优于圈内和圈外,呈现出明显的圈带状分布。从群落结构角度看,这
种圈带状分布属于群落的结构,其形成的主要原因是
(3)有人认为“两种天敌间的竞争比两种沙鼠间的竞争更为激烈”,请结合图2说明此推断的理由:
(④)牧民在该草原放牧时需要考虑放牧量,主要遵循生态工程的
原理。牧民经常会除掉牲畜不喜欢
吃的杂草,请从能量流动的角度,说明这样做的科学道理是
20(12分).马铃薯作为重要农作物,提高其冷耐受性可拓展优质马铃薯的种植区域。我国科研人员发现,
[山峙
野生马铃薯中S基因的表达与其冷耐受性调控有关,将该基因导入栽培马铃薯中可显著增强其抗寒能力。
回答下列问题。
基因转录
方向
Sal I
引物2
①
细胞总RNA
3
RT-PCR
3
5
引物1
S基因
③
HimdⅢI KpnI
o
启动子
农杆菌
SalI
重组质粒
氯霉素抗性基因
T-DN
-Nhe I
终止子
④
Hind III
复制原点
抗冻马铃薯·一
栽培马铃薯
Kpn I
愈伤组织
新霉素抗性基因
可能用到的部分限制酶识别序列及酶切位点
限制酶
HindⅢ
Smal
KpnI
Sall
Nhel
Xhol
序列及切割
ALAGCTT
CCCLGGG
GGTACIC
GITCGAC
GICTAGC
CITCGAG
位点
(I)过程①中使用了RT-PCR技术。这是一种特殊的PCR技术,以RNA为模板通过多个反应获得所需的
cDNA,该反应过程中需要的酶有
(2)在过程②中,为了实现目的基因与质粒的结合,需在引物1的5端添加特定碱基序列,同时,对
质粒进行切割时所选用的限制酶为
(3)研究人员设计引物用PCR方法验证重组质粒是否构建成功(引物1~4结合位置如图所示,→表示引物
5→3方向),应该选择的引物是」
引物
目的基因
引物2
重组质粒
(4)过程③将重组质粒导入农杆菌,应用处理农杆菌。
(⑤)过程④用携带$基因的农杆菌侵染栽培马铃薯愈伤组织后,应该在愈伤组织的培养基中加入
检测
是否成功。愈伤组织培养过程中添加蔗糖的作用是一,该愈伤组织经形成芽、根,继续培育可
获得抗寒能力显著增强的马铃薯植株。
[山一一寸页·预祝考试顺利题号
2
3
4
5
6
7
8
9
10
答案
D
B
B
A
B
B
题号
11
2
13
14
15
答案
B
0
二、非选择题
16.
(1)①主动运输
C3的还原
②2.3(在2.12.5区间即可)
组2氧气释放速率低于组1、高于组3
③AC
(2)策略:未超过4周时,莴苣海蛞蝓利用盗食质体的光合作用合成有机物,为生命活动提供能量:超过4
周后,盗食质体光合功能减弱,无法提供足够能量,会通过降解盗食质体作为物质与能量的来源。
17.
()造血干细胞
胸腺
细胞调亡
(2)抑制T℃细胞的活性,降低机体对肺癌细胞的免疫清除((裂解)能力
(3)Tc细胞+L-10抗体+培养液Tc细胞活性:甲组=丙组>乙组(或甲组>丙组>乙组)
(4)高浓度的乳酸抑制Tc细胞增殖,但对Treg细胞无影响,增殖的Treg细胞通过分泌L-10来抑制Tc细
胞的活性
18.
(1)雌性个体产生两种比例为1:1的卵细胞,且两种卵细胞和精子结合发育为后代的比例相等
(2)显性
(子代)黑色雄虫×白色雌虫(子代)白色雄虫×白色雌虫
(3)等量不含四环素的蜂蜜水
含有浓度为25mgmL四环素的峰蜜水连续饲喂4个世代
(4)Wolbachia会影响赤眼蜂的第一次有丝分裂,从而诱导孤雌产雌生殖现象,而四环素杀死了Wolbachia,
所以只能以未受精卵发育成个体,仍然是单倍体,发育成雄性
19.
(1)组成成分和营养结构(食物链、食物网)
收支平衡
(2)水平
蘑菇菌丝分解有机质使圈上土壤养分更充足(或土壤理化性质的差异导致植物分布
差异)
(2)兔孙(主要是昼间和夜间活动)和赤狐(夜间)活动时间重叠多,竞争食物等资源更激烈:两种鼠活
动时间差异大,竞争弱
(3)协调(1分)调整生态系统中能量流动的关系,使能量持续高效的流向对人类最有益的部分
20.
(1)逆转录酶和Taq酶
(2)5-CTCGAG-3
SaI和NheI
(3)引物2和3或者引物1和4
(4)Ca2+
(5)氯霉素
调节渗透压,提供碳源,提供能源
再分化