第1章 第2节 第1课时 微生物的基本培养技术-【创新教程】2025-2026学年高中生物选择性必修3 生物技术与工程五维课堂课时作业（人教版）

第一章发酵工程 课时作业马 生课时 第2节微生物的培养技术及应用 物作业 第1课时 微生物的基本培养技术 纠错空间 基础点精练 A.此培养基可用于自养型微生物的 [知识点一]培养基的配制 培养 1.关于制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的 B.培养基中若加入氨基酸，则它可充当 叙述错误的是 碳源、氮源 ①将称好的牛肉膏连同称量纸一同放 C.若除去①，此培养基可培养硝化细菌 入烧杯溶解②等培养基冷却至40℃ D.此培养基按功能分类属于选择培 左右时进行倒平板③待平板冷却凝 养基 [知识点二]无菌技术 固5~10min后将平板倒过来放置 ④操作顺序为计算、称量、溶化、倒平 4.接种环的灼烧灭菌应该在何时进行 板、灭菌⑤牛肉膏和蛋白胨都能提供 ( 碳源、氮源、磷酸盐、维生素 A.使用前 B.使用后 A.①④⑤ B.②③④ C.使用前及使用后 D.储存前 方法总结 C.①②③ D.②④⑤ 5.获得纯净培养物的关键是防止外来杂 2.在微生物培养时需要制备培养基，下列 菌的进入，有关无菌技术的叙述正确 关于其制备过程的叙述，正确的是 的是 ( ) A.操作者的双手清洁后，用无水乙醇擦 拭消毒 A.称量好牛肉膏后将称量纸上的物质 迅速倒入烧杯 B.自来水用氯气消毒，可以杀灭全部微 B.培养霉菌的培养基在灭菌后要将pH 生物 调至酸性 C.平板划线接种微生物时须在酒精灯 C.用温度计测量培养基温度待降到50℃ 火焰旁操作 左右时可以用来倒平板 D.为防止杂菌污染，家庭制作果酒时的 D.倒平板时培养基溅在皿盖与皿底之 用具需严格灭菌 间时，这个平板应舍弃 [知识点三]微生物的纯培养 3.下表是某培养基的成分，下列相关叙述 6.关于细菌分离、培养的叙述中，正确 错误的是 的是 ( ) A.不同种类细菌的生长均需要相同 编号 ① ② ③ ④ ⑤ 碳源 成分 (NH)2SO KH,PO FeSO CaCl H2 O B.常用液体培养基分离获得细菌单 含量 0.4g 4.0g 0.5g 0.5g100ml 菌落 115 世生物 选择性必修第三册 C.用含尿素的培养基可选择分离出能 10.酸奶是牛奶经过乳酸菌发酵制成的。 分解利用尿素的细菌 间 乳酸菌可将牛奶中的乳糖转化为乳 D.含有机磷农药的培养基可分离出降 纠错空间 酸，从而减轻某些人群的乳糖不耐受 解有机磷农药的细菌 症状。请回答问题： 7.同种微生物表现出稳定的菌落特征，菌 (1)为鉴别市售酸奶中的菌种，应该采 落特征包括 ( 用平板划线法或 法在固 ①菌落形状 ②菌落的多少③菌落 体培养基上进行接种，观察所获单菌 的大小 ④菌落的颜色 ⑤菌落的隆 起程度 落的特征，在接种前，随机取若干灭菌 A.①②③④ B.②③④⑤ 后的空白平板先培养一段时间，这样 444444444444444444 C.①③④⑤ D.①②③⑤ 做的目的是 8.下面是微生物平板划线示意图，划线的 顺序为1、2、3、4、5。下列叙述正确的是 (2)采用平板划线法分离水样中的乳 ) 酸菌。操作时，接种环通过 灭菌，在第二次及以后划线时，总是从 方法总结 上一次的末端开始划线。这样做的目 的是 A.在五个区域中划线前后都要对接种 环和培养基进行灭菌 (3)某同学在配制平板时加入石灰石 B.划线操作时完全打开皿盖，划完立即 (CaCO3),从而成功筛选出能产生乳 盖上 酸的菌株。其筛选依据的原理是 C.接种时不能划破培养基，否则难以达 到分离单菌落的目的 。 并且单菌落周围 D.第1区和第5区的划线最终要连接 越大，说明该菌株产生乳酸的能 起来，以便比较前后的菌落数 力越强。 9.下图为平板划线法示意图，在图中哪个 区域更易获得单菌落 (4)发酵到后期时，酸奶含量继续增 开始处 加，当达到1.2%时，发酵速度逐渐变 缓甚至停止，主要原因是 3 (5)含有抗生素的牛奶不能发酵成酸 A.开始处 B.① 奶。其理由是 C.② D.③ ·116· 第一章发酵工程 课时作业乡 拓展点提升 无菌落生长 影印接种 1.下列有关培养基叙述正确的是( A.培养基的营养成分都有碳源、氮源、 纠错空间 A.将大肠杆菌接种到甲培养皿的方法 水、无机盐 为平板划线法 B.除水以外的无机物都属于无机盐 B.甲、丙两种培养基中均添加了特殊营 C.用培养基培养甲型H1N1流感病毒 养物质 用于科学研究 C.乙培养皿中能生长的为所需的营养 D.培养基配制过程中应调pH,以适应 缺陷型菌株 D.甲中的部分大肠杆菌发生了基因突 微生物的生长 变或染色体变异 2.餐厨垃圾中具有高效降解能力的微生 4.我国规定1L自来水中大肠杆菌数不 物，可用于餐厨垃圾高效无害化处理， 得超过3个。某兴趣小组利用滤膜法 科研人员取一定量的餐厨样品，制备不 (下图所示)对校内自来水中大肠杆菌 同浓度的样品稀释液，并将样品接种于 数量进行检测。有关叙述错误的是 利用蛋白胨、牛肉膏、氯化钠、琼脂配制 。。。。。。。。。。。。 待测水样 的培养基表面进行培养并分离。下列 将滤膜转移至伊 分析正确的是 红美蓝培养基上 方法总结 滤膜 A.牛肉膏主要为微生物提供氮源 滤液· B.接种时需用力将菌种接种到培养 A.取样水龙头应用火焰灼烧，打开水龙 基内 头一段时间后再取样 B.滤膜的孔径应小于大肠杆菌，过滤水 C.稀释样品获得单个菌落以便判断菌 样应足量 种类型 C.根据培养基上红色菌落的数目，计算 D.经过培养可筛选出具有高效降解能 水样中大肠杆菌数 力的微生物 D.进行细菌培养的同时需进行未接种 3.营养缺陷型菌株是指缺乏合成某些营 培养基的培养 5.下列关于微生物营养物质的描述正确 养物质（如氨基酸、维生素）的能力，必 的是 ( ) 须在基本培养基中补充特殊营养物质 A.同一物质不可能既作碳源又作氨源 才能正常生长的一类菌株，可自然产生 B.除水以外的无机物仅提供无机盐 或人工诱导获得。用一定方法诱变大 C.凡是碳源都能提供能量 肠杆菌并将其接种到甲培养皿中，一段 D.无机氮源也能提供能量 时间后将菌落影印接种（不改变菌落位 6.(多选)下列有关微生物培养的叙述错 误的是 ( ) 置)到乙、丙两培养皿中，进一步培养一 A.培养基灭菌常用的方法是湿热灭菌 段时间可筛选出营养缺陷型菌株，结果 B.硝化细菌的碳源、氮源依次是二氧化 如图所示。下列说法正确的是( 碳、氨 ·117 E生物 选择性必修第三册 C.各种微生物培养基的配方中必须包 含碳源、氨源、水、无机盐 间 D.纯化培养微生物常用的接种方法只 纠错空间 有平板划线法 7.(多选)以下关于无菌技术的叙述，其中 正确的是 ( (1)上图甲所示的是制备固体培养基时 A.对实验操作的空间、操作者的衣着和 的实验操作步骤之一，它称为 手进行灭菌 若用该培养基培养大肠杆菌，除考虑营养 B.将用于微生物培养的培养皿、接种用 条件外，还要考虑 具和培养基等进行灭菌 和渗透压等条件。 444444444444444444 (2)培养大肠杆菌时，在接种前需要检 C.为避免周围环境中微生物的污染，实 测培养基是否被污染。对于固体培养 验操作应在酒精灯火焰附近进行 基应采用的检测方法是 D.实验操作时应避免已经灭菌处理的 材料用具与周围物品相接触 (3)上图乙是平板划线法接种操作示意 8.(多选)如图为实验室培养和纯化大肠 图，正确的操作顺序是A→B→ 杆菌过程中的分操作步骤，下列说法 方法总结 (用字母和箭头表示)；找出图乙中两处 不正确的是 错误的操作： (用字 母表示)。 (4)上图丙是某同学用平板划线法接种 ① ② ④ 后的培养基培养12h后的实验结果，如 A.步骤①倒平板后需间歇晃动，以保证 果培养基上 表面平整 ,则说明无菌 B.步骤②在沾取一环菌液前后，接种环 操作基本符合要求。 都要通过酒精灯火焰 易错点警示 C.步骤③到④的过程中，每次划线后都 混淆消毒和灭菌的区别 需要对接种环进行灼烧处理 下列关于灭菌和消毒的理解不正确的 是 ( D.步骤④中平板与未接种的平板都放 A.灭菌是指杀灭环境中一切微生物的 入37℃的恒温箱中培养 细胞、芽孢和孢子 9.微生物的分离和培养是现代生物工程 B.消毒和灭菌实质上是相同的 应用中的重要环节。下图甲、乙、丙是 C.用酒精擦拭双手只能消毒，不能起到 大肠杆菌分离和培养过程中部分操作 灭菌的作用 和实验结果示意图，请据图回答有关 D.常用的灭菌方法有灼烧灭菌、干热灭 问题： 菌、湿热灭菌等 118参考答案 第2节微生物的培养技术及应用 第1课时微生物的基本培养技术 基础点精练 1.D[将称好的牛肉膏连同称量纸一同放入烧杯，加入少 量的水，加热，①正确；待培养基冷却至50℃左右时，在 酒精灯火焰附近倒平板，②错误；待平板冷却凝固约5一 l0min后，将平板倒过来放置，使皿盖在下，皿底在上， ③正确：制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的操作顺序为计 算、称量、溶化、灭菌、倒平板，④错误；蛋白胨不能提供 磷酸盐，⑤错误。 2.D[牛肉膏比较黏稠，溶化时将称好的牛肉膏连同称量 纸一起放入烧杯中，A错误；培养基配制时先调H,然 后再灭菌，B错误；用手触摸装培养基的锥形瓶，刚刚不 烫手时就是50℃左右时，此时可以用来倒平板，C错误： 倒平板时培养基溅在皿盖与皿底之间时，可能会造成培 养基的杂菌污染，这个平板应舍弃，D正确。] 3.C[由题表可知，此培养基中不含含碳有机物，自养型 微生物可利用空气中的C○2作碳源，故该培养基适合用 来培养自养型微生物，A正确；氨基酸的基本元素组成为 CH、ON,培养基中若加入氨基酸，则它可充当碳源、氨源， B正确；硝化细菌能进行化能合成作用，但不能固氯，因此若 除去①，此培养基不能培养硝化细菌，C错误；此培养基缺少 碳源，可以筛选出自养型微生物，故此培养基按功能分类属 于选择培养基，D正确。] 4.C[接种环在使用前灼烧灭菌是为了防止杂菌污染目 标菌，使用后灼烧灭菌是防止目标菌污染环境和感染操 作者。] 5,C[操作者的双手清洁后，用体积分数为75%的酒精擦 拭消毒，不能用无水乙醇进行消毒，这是因为过高浓度 的酒精会在细菌表面形成一层保护膜，阻止其进入细菌 体内，难以将细菌彻底杀死，达不到消毒的目的，A错 误；氯气消毒，可以杀死部分微生物，B错误；平板划线接 种微生物时须在酒精灯火焰旁操作，以保证接种时处于 无菌的环境，防止杂菌污染，C正确：传统发酵用具进行 消毒处理，D错误。] 6.D[不同种类细菌的生长需要不同碳源，A错误；常用 固体或半固体培养基分离获得细菌单菌落，B错误；用只 以尿素作为氨源的培养基可选择分离出能分解利用尿 素的细菌，C错误；含有机磷农药的培养基可分离出降解 有机磷农药的细菌，D正确。] 7.C[不同种类的细菌形成的菌落不同，菌落特征包括菌 落的大小、形状、颜色及菌落的隆起程度，菌落数量不是 菌落特征。综上所述，C正确。] ·18 课时作业乡 8.C[在每次划线前后都要对接种环进行灭菌；进行划线 操作时，将培养皿的皿盖打开一条缝隙，将沾有菌种的 接种环迅速伸入平板内，划三至五条平行线，盖上皿盖； 接种时不能划破培养基，否则难以达到分离单菌落的目 的；第1区和第5区的划线不能相连。] 9.D[据图分析，图为平板划线法，随着划线次数的增加， 菌种进一步被稀释，即图中从开始处到①处、再到②处， 最后到③处，菌落数逐渐减少，因此③区域更易获得单 菌落。] 10.解析：(1)微生物接种的方法有平板划线法和稀释涂布 平板法。在接种前，随机取若干灭菌后的空白平板先 培养一段时间，用于检测培养基平板灭菌是否合格。 (2)采用平板划线法分离水样中的乳酸菌，操作时，接 种环通过灼烧灭菌，在第二次及以后划线时，总是从上 一次的未端开始划线。这样做的目的是将聚集的菌体 逐步稀释以便获得单个菌落。 (3)培养基中加入CCO3,成功筛选出能产生乳酸的菌 株，其筛选依据的原理是生成的乳酸与CaCO反应生 成乳酸钙，周围形成透明圈，其透明圈越大说明该菌株 产生乳酸的能力越强。 (4)发酵到后期时，酸奶含量继续增加，当达到1.2% 时，发酵速度逐渐变缓甚至停止，主要原因是p过低 抑制了乳酸菌的生长。 (5)含有抗生素的牛奶不能发酵成酸奶，其理由是抗生 素能够杀死或抑制乳酸菌的生长。 答案：(1)稀释涂布平板检测培养基平板灭菌是否合 格(2)灼烧将聚集的菌体逐步稀释以便获得单个 菌落(3)生成的乳酸与CCO3反应生成乳酸钙，周围 形成透明圈透明圈(4)pH过低抑制了乳酸菌的生 长(5)抗生素能够杀死或抑制乳酸菌的生长 拓展点提升 1.D[对于固氨微生物，其培养基的营养成分中可无氨 源，A项错误；CO2和N2属于无机物，但不属于无机盐， B项错误；将H1N1流感病毒接种在相应的宿主细胞中 培养，以用于科学研究，C项错误：培养基配制过程中应 调DH,以适应微生物的生长，D项正确。] 2.C[牛肉膏主要为微生物提供碳源、磷酸盐和雏生素，A 错误；接种菌种时，应将菌种接入培养基表面，以有利于 其生长，如果用力接种会划破培养基，从而会影响菌株 的生长，不能形成正常的特征形态，影响对菌落形态的 观察及特征鉴别，B错误；通过稀释样液得到适宜浓度的 3 巴生物 菌液，再将菌液接种到培养基上获得单个菌落以便判断 菌种类型，C正确；经过培养、筛选后还需要进行鉴定，才 能选出具有高效降解能力的微生物，D错误。] 3.B[由菌落的分布情况可知，将大肠杆菌接种到甲培养皿 的方法为稀释涂布平板法，A错误；根据甲丙两种培养基中 菌落位置可知，甲中的菌种在丙培养基中均能生长，再结合 乙培养基中菌落的生长情况，可推测甲培养基和丙培养基 都添加了某种特殊物质，B正确：乙培养皿中不能生长的为 所需的营养缺陷型菌株，C错误；甲中的部分大肠杆菌发生 了基因突变，不可能发生染色体变异，因为大肠杆菌没有染 色体，D错误。] 4.C[为避免杂菌的污染，在取样时水龙头应用火焰灼烧 杀灭杂菌，打开水龙头一段时间后再取样是避免温度过 高杀死目的菌，A正确；实验将待测水样进行过滤，得到的 滤膜进行微生物培养，因此水中的大肠杆菌应留在滤膜上， 故滤膜的孔径应小于大肠杆菌，B正确；加入伊红美蓝能够 鉴别大肠杆菌，菌落颜色为黑色，C错误；为保证实验结果的 科学性与准确性，实验的同时应设置对照，即进行细菌培养 的同时需进行未接种培养基的培养，D正确。] 5.D[对异养微生物来说，含C、H,O,N的化合物既是碳源， 又是氯源，如氨基酸，A错误；CO和从是无机物，也是某 些微生物的碳源和氨源，B错误；有机碳源能提供能量，无机 碳源不能提供能量，C错误；自然界中一些微生物如硝化细 菌，可以以无机氨源合成细胞物质，同时通过氧化外界无机 物获得生长所需能量，此过程叫作化能合成作用，D正确。] 6.CD[培养基灭菌常用的方法是湿热灭菌，A正确；硝化细 菌是自养生物，可作为硝化细菌碳源、氧源的物质依次是二 氧化碳、氨，B正确；各种培养基一般都含有水、碳源、氨源、 无机盐，但也不是必须都有这几种成分，如培养固氨菌不需 要氨源，C错误；纯化培养微生物常用的接种方法有平板划 线法和稀释涂布平板法，D错误。] 7.BCD[对实验操作的空间、操作者的衣着和手进行消毒， A错误；为保证不被杂菌污染，应将培养器皿、接种用具和培 养基等进行灭菌，B正确；酒精灯火焰附近可以形成一个无 菌区，为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在酒精 灯火焰附近进行，C正确；周围物品可能会含有杂菌，为防止 污染，实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围 物品相接触，D正确。」 8.AB[倒平板时需左三圈，右三图地轻轻晃动，以保证表面 平整，A错误；步骤②在沾取一环菌液前后，试管口都要通过 酒精灯火焰，而不是接种环，其中为避免杀死目的菌株，需要 ·18 选择性必修第三册 注意将已冷却的接种环伸入菌液中蘸取一环菌液，B错误； 步骤③到④的过程中，每次划线后都需要对接种环进行灼 烧处理，以杀死上次划线结束后接种环上残留的菌种，C正 确：将接种后的培养基和未接种的培养基同时放入37℃恒 温箱，目的是作为空白对照，判断培养基是否被污染，一段时 间后若未接种的培养基有菌落说明培养基被污染，则培养 基不能使用，若无菌落说明培养基没有被污染，可以使用，D 正确。] 9.解析：(1)图甲所示操作为倒平板，需要在酒精灯火焰旁进行 操作。培养基中除营养成分外，还应考虑H、氧气、无菌、温 度、渗透压等条件。 (2)检测培养基是否被污染的方法是将未接种的培养基在适 宜的温度下放置适宜的时间，观察培养基上是否有菌落产 生，如有菌落，说明该培养基已被污染。 (3)平板划线法的操作顺序为灼烧接种环，冷却，挑取菌种， 划线，灼烧接种环，划线，灼烧接种环，平板倒置培养，即A→ BG→F→E→C→D→H。图乙中C操作应在酒精灯附近 进行，D中划线的首尾不应该相接。 (4)同一菌种的菌落颜色、形状、大小基本一致，如有杂菌污 染，会有异常菌落出现，可根据菌落的特征确定该菌落是否 为大肠杆菌 答案：(1)倒平板温度pH(后两空合理即可) (2)将未接种的培养基在适宜的温度下放置适宜的时间，观 察培养基上是否有菌落产生 (3)G→F-→E→C→D→HCD (4)生长的菌落颜色、形状、大小基本一致，并符合大肠杆菌 菌落的特点 易错点警示 B[灭菌是指采用强烈的理化方法杀死物体内外所有的微 生物，包括芽孢和孢子，A正确。消毒是指用较为温和的物 理、化学或生物等方法仅杀死物体表面或内部一部分对人 体有害的微生物，不包括芽孢和孢子，因此实质是不相同 的，B错误。用酒精擦拭双手属于消毒，C正确。常用的灭 菌方法有灼烧灭菌、干热灭菌、湿热灭菌等，D正确。] 第2课时微生物的选择培养和计数 基础点精练 1,C[将菌液稀释相同的倍数并接种，牛肉膏蛋白胨培养基 上的菌落数目应明显多于选择培养基上的菌落数目，因此， 应选择接种菌种的牛肉膏蛋白胨培养基作为对照。对照实 验遵循的原则是单一变量原则。]