第1章 第2节 第2课时 微生物的选择培养与计数（学生版）-【创新教程】2025-2026学年高中生物选择性必修3 生物技术与工程五维课堂同步复习（人教版）

5.解析：(1)从三个假说所指向的微生物来看，其差别主要在于 所需碳源不同。 (2)培养基配制的基本步骤是计算→称量→溶化→灭菌→倒 平板，培养皿等玻璃器皿一般采用干热灭菌，而培养基往往 采用湿热灭菌。 (3)A、B可以为绝大多数微生物提供碳源，而从实验目的分析，b 培养基应该要排除依靠此类碳源生活的微生物，故选AB。 (4)a培养基上长出菌落，b培养基上不长菌落说明该微生物 只能利用常规碳源生活，也就说明假说①更可靠。 (5)要出现菌落，需要用固体培养基，题干提示，琼脂是配制 固体培养基时常用的凝固剂之一，因此较为简单的做法是将 琼脂换用其他凝固剂，这样就可以通过b和c的对比来确定 该微生物能否利用琼脂作为碳源。 答案：(1)碳源(2)称量溶化干热灭菌湿热灭菌 (3)A、B(4)a培养基上长出菌落，b培养基上不长菌落 (5)将琼脂换用其他凝固剂 第2课时微生物的选择培养和计数 教材梳理·预新知 基础梳理 一，1.(1)平板划线法稀释涂布平板(2)选择培养基 2.(1)目的菌株抑制或阻止(2)特定种类抑制或阻止 尿素脲酶 二、2.(1)9(2)1混匀(3)13.0.1酒精冷却涂布 器菌液培养基转动倒置单 三、活菌 四、1.3~82.(1)稀释度菌落数目(2)30~300 3.(1)温度时间(2)24h菌落稳定4.(1)灭菌 火焰棉塞火焰(2)标记(3)制订计划 基础诊断 (1)/(2)/(3)×(4)×(5)×(6)× 互动探究·克疑难 疑难点一互动探究 1.提示：可同时用于分离微生物和统计活菌数的接种方法为稀 释涂布平板法。为了保证结果准确，一般选择菌落数为 30-300的平板进行计数。 2.提示：不能。为增加实验的说服力与准确性，应设置重复实 验，在同一稀释度下涂布3个平板，统计结果后计算平均值。 3.提示：微生物计数时，如果实验中出现重复实验的结果不一 致的情况，应分析实验过程中可能的影响因素，找出差异的 原因，需重新实验，而不能筒单地舍弃后进行计数。 对点训练 1.C[选择培养基是在培养基中加入特殊营养物质或化学物 质，抑制其他微生物的生长，有利于所需微生物生长的培 养基。] 2.C[对微生物计数时，培养液经过静置后，需要先摇匀，若 未摇匀，由于微生物的沉淀，培养液的上层微生物数量少，进 行直接计数会使计数值偏低：进行梯度稀释时，若每支试管 加入了过多的无菌水，会使菌液稀释超过需要稀释的倍数而 使结果偏低：利用显微镜直接计数时，如果先滴加菌液再加 ·9 参考答案 盖玻片，容易使盖玻片由于液滴的表面张力作用而不能严密 地盖到计数板表面上，使计数室内的体积增大，计数结果将 偏高；平板上有不少菌落是两个细菌长成的菌落连在一起形 成的，按一个菌落计数，会使数值偏小。」 疑难点二互动探究 (1)提示：用以尿素为唯一氮源的培养基进行选择培养。不能 合成脲酶的微生物无法分解尿素获得氮，生长受到抑制。 (2)提示：防止培养皿盖上的水滴落造成培养基的污染。 (3)提示：分解尿素的细菌能合成脲酶，而脲酶可将尿素分解成 氨和CO2,从而为微生物提供氮源。 (4)提示：(54+46十50)÷3×10°=5×10个。 对点训练 1.C[在“分解尿素的细菌的分离与计数”实验中，必须在含 微生物丰富的湿润、肥沃土壤中取样，所用小铁铲和信封必 须灭菌。] 2.D[对照组培养基也应严格灭菌，且不接触任何生物， A正确；对照组和实验组的培养基应放在相同的条件下培 养，所用培养基成分及H大小完全与实验组一致，B、C正 确：对照组培养基的量的大小与实验组不一定绝对相 同，D错误。] 课堂自测·固双基 1.C[只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素，缺乏脲酶的 微生物由于不能分解尿素，缺乏氨源，使其生长、发育及繁殖 受到抑制，所以，以尿素为唯一氨源的培养基能够选择出分 解尿素的微生物。] 2.A[分离菌种常用的接种方法是平板划线法和稀释涂布平 板法，对活菌进行计数常用稀释涂布平板法而不能用平板划 线法，A错误：实验目的是筛选出能分解石油的细菌，培养基 中应以石油为唯一碳源，B正确；对微生物进行分离时可用 稀释涂布平板法接种，C正确：微生物分离和培养的关键是 无菌技术，因此在微生物的分离和培养过程中称取和稀释土 壤等活动要在火焰旁进行，D正确。」 3.C[用稀释涂布平板法来统计样品中的活菌数时，平板上 的一个菌落一般来源于样品稀释液中的一个活菌，但偶尔也 可能来自两个或多个细菌，所以此方法统计的菌落数可能低 于活菌的实际数目。] 4,D[硝化细菌属于自养型生物，因此培养硝化细菌的培养 基中不需要加入有机碳源，则培养基中不能加入牛肉膏蛋白 胨，A错误；培养基制备过程中应先调节DH,再高压蒸汽灭 菌，B错误；用滴管或移液管取少量菌液滴到培养皿上，然后 用经过灭菌的涂布器将菌液均匀地涂布在培养基表面，C错 误；用稀释涂布平板法统计菌落数目时，由于会出现两个或 多个细菌连在一起形成一个菌落的情况，这样统计的菌落数 往往比活菌的实际数目少，D正确。] 5.解析：(1)配制的细菌培养基除了含有水、碳源、氨源和无机 盐等主要营养成分外，还应加入适量的雏生素和琼脂。在培 养基各成分溶化与灭菌之间，要先调DH。 (2)接种微生物的方法有很多，图1中过程①②③所示的方 法为稀释涂布平板法，用该方法统计样本菌落数时，同时需 生物·选择性必修第三册 要做A、B、C三个培养皿，分别计数3次，取平均值，使实验 结果更加准确可靠。分析图解可知，图中酸奶样品总共稀释 1X105倍，并且稀释涂布平板时只取了0.1mL,因此这里的 n=6.3个平板上的菌落数分别为：150、158和157，据此可 得出每毫升样品中的活菌数至少为(150十158十157)÷3× 10=1.55×10°个。 (3)步骤1：根据等量原则，应该分别取等量的青霉素、四环 素和无菌水加入三组无菌培养皿中。步骤3：根据对照原 则，应该将接种后的三组培养基和一个未接种的培养基都置 于适宜温度等条件下培养若干天作为对照实验。 答案：(1)维生素调pH(2)稀释涂布平板法分别计数 3次取平均值，使实验结果更加准确可靠6至少 1.55×108(3)等量的且适量的青霉素、四环素、无菌水 未接种的培养基 第3节 发酵工程及其应用 教材梳理·预新知 基础梳理 一、菌种的选育灭菌发酵1.自然界诱变育种基因工 程2.扩大培养3.反复试验4.培养基发酵设备 5.培养基6.微生物数量产物浓度营养组分温度pH 7.过滤、沉淀提取、分离和纯化 二、1.(1)酱油、啤酒(2)黑曲霉谷氨酸棒状杆菌 2.基因蛋白质3.(1)有机酸生物活性物质根瘤菌肥 固氮菌肥(2)微生物其代谢物生物防治可持续发展 (3)蛋白质微生物菌体4.资源短缺环境污染 基础诊断 (1)×(2)×(3)×(4)×(5)/ 互动探究·克疑难 疑难点一互动探究 1.提示：选择发酵工程用的菌种时，在考虑生产需要（如微生物 体内酶的催化能力强，微生物繁殖速度快)的同时，还要结合 当地的气候和发酵设备等实际情况。 2.提示：(1)反复试验确定培养基的配方 (2)对培养基和发酵设备进行严格的灭菌 (3)用计算机控制系统对发酵过程进行监测和控制 (4)控制发酵过程的温度、pH和溶解氧等发酵条件。可用 温度传感器，冷却水进入口、排出口控制温度，空气入口控制 氧气的量等。 3.提示：发酵过程中产生的气体和废弃培养液需经过相应的净化 设备，达到国家排放要求后才能排放到外界环境中。因为有些 气体和废弃培养液对人和生物有害或对环境有毒害作用。 对点训练 1.C[果酒与果醋制作需要的温度不同，果酒制作温度一般 控制在18~一30℃，果醋为3035℃，故如果改成果醋发酵 需要提高温度，A正确；酵母菌无氧呼吸产生酒精，醋酸发酵 需要氧气，因此如果改成果醋发酵，充气口应该打开，B正 确：醋酸菌可以利用酒精产生醋酸，因此不需要更换发酵液， C错误；酒精发酵与醋酸发酵需要的时间不同，D正确。] ·9 2.B[谷氨酸棒状杆菌属于原核生物，不能进行有性生殖，无 法通过杂交育种获得，A错误：严格灭菌可以杀死发酵配料 及发酵罐中的所有微生物，防止杂菌污染，从而保证发酵产 品的产量和品质，B正确；在发酵过程中，应通过放料口取 样，随时监测产物浓度和微生物数量，C错误；谷氨酸棒状杆 菌属于好氧菌，在发酵过程中要不断地通入无菌空气，不能 关闭通气口，D错误。] 疑难点二互动探究 (1)提示：与基因工程、细胞工程相比，发酵工程的生产条件 温和，原料来源丰富且价格低廉，产物专一、弃废物对环境的 污染小且易处理，这些优点使其广泛应用，形成规模庞大的 发酵工业。 (2)提示：用微生物发酵清理城市废弃物、垃圾，用发酵工程 使烟气脱硫，还可以用微生物工程除奥等。 (3)提示：人们可以采用基因工程的方法，将目的基因转移到 微生物中，获得具有某种药物生产能力的微生物，或者直接 对菌种进行改造，再通过发酵技术大量生产所需要的产品。 这大大拓宽了药物的来源，降低了价格。此外，科学家还利 用基因工程，将病原体的某个或某几个抗原基因转入适当 的微生物细胞，获得的表达产物就可以作为疫苗使用。 对点训练 1.A[随着发酵的进行，培养液会有一定的改变，菌种的生存 会受到一定的影响，发酵过程中需检测培养液中的细菌数目 和产物浓度，A错误；微生物的生长需要适宜的条件，发酵过 程要随时监控H,并及时添加碱性物质或氨水以利于谷氨 酸的积累，B正确；在生产实践中，培养基的配方需以满足培 养菌种的生存为前提，要经过反复试验才能最终确定，C正 确：不同代谢产物的分离和纯化的方法不同，可根据代谢物 的性质采取适当的提取分离和纯化措施来获得产品， D正确。] 2.D[醋酸菌是好氧菌，分布在试管上层，用于制醋，为甲试管； 乳酸菌是厌氧菌，分布于试管下层，用于泡莱发酵，为乙试管： 酵母菌是兼性厌氧型，有氧无氧都能生存，在试管中分布均 匀，用于果酒制作，为丙试管。] 课堂自测·固双基 1.B[发酵工程一般包括菌种的选育，扩大培养，培养基的配 制、灭菌，接种，发酵，产品的分离、提纯等方面。 2.A[黑曲霉广泛分布于世界各地的粮食、植物性产品和土 壤中，是重要的发酵工业菌种，黑曲霉可以用于酱油、柠檬 酸、凝乳酶的工业生产，A正确；发酵罐内发酵是发酵工程的 中心环节，B错误；发酵工程的优良性状的菌种可以从自然 界中筛选出来，也可以通过诱变育种和基因工程育种获得， C错误；单细胞蛋白是微生物菌体，可采用沉淀、过滤等方法 分离，而代谢物则采用蒸馏、萃取、离子交换等方法，D 错误。 3.C[实验中用的培养皿等玻璃器材，一般选用的灭菌方法 为干热灭菌，采用该灭菌方法灭菌的一般是能耐高温的、需 要保持干噪的物品，A正确；由图中结果可知（根据菌落的大第一章发酵工程 5.琼脂是一种多糖类物质，由于很少有微生物 (3)为了检验上述假说①是否正确，研究人 能将其降解而成为配制固体培养基时常用 员分别使用两种培养基对上述微生物进行 的凝固剂之一。某实验室在处理一批已进 培养，其中一种为牛肉膏蛋白胨培养基a, 行过微生物培养的废弃固体培养基时发现， 则另一培养基b中不能加入下列的 几乎全部培养基上的微生物都已死亡，但在 其中一个培养基上存在一个正常生长的菌 A.牛肉膏 B.蛋白胨 落。对此，研究人员做出了以下假说：①此 C.氯化钠 D.琼脂 培养基内的营养未被消耗殆尽：②形成此菌 (4)用上述a、b培养足够时间，菌落生长情 落的为自养型微生物；③形成此菌落的微生 况为 物能利用琼脂。 时，则排除了假说②③，证明假 (1)从研究人员所作的假说可以推测①所说 说①正确。 的“营养”指的最可能是 (填“碳源” (5)若上述实验否定了假说①，为进一步检 “氮源”或“无机盐”)。 验假说②和③，研究人员想要配制一种新的 (2)配制牛肉膏蛋白胨培养基的步骤包括： 培养基c,并以b与c上是否出现菌落作为 计算、 、灭菌、倒平板。 观察指标，则与b相比，c的成分需要做出 倒平板所用的培养皿和培养基所用的灭菌 的改变是 方法依次是 和 C温馨提店 学习至此，请完成配套训练 第2课时 微生物的选择培养和计数 课标内容要求 核心素养对接 1.举例说明通过调整培养基的配方可有目的地培养某种微生物 生命观念：理解微生物的选择培 2.概述平板划线法和稀释涂布平板法是实验室中进行微生 养和计数的原理 物分离和纯化的常用方法 科学探究：开展稀释涂布平板法 3.概述稀释涂布平板法和显微镜计数法是测定微生物数量 的操作和土壤中分解尿素的细菌 的常用方法 的分离与计数实验 教材梳理。预新知 ◆[基础梳理] 2.实验室中目的菌株的筛选 一、选择培养基 (1)原理：人为提供有利于 生长 1.自然界中微生物的分离 的条件（包括营养、温度、pH等），同时 其他微生物的生长。 (1)目的菌株是优势种群： 或 (2)方法：利用选择培养基分离。 法。 ①选择培养基：允许 的微生 (2)目的菌株非优势种群：利用 物生长，同时 其他种类微生 分离。 物生长的培养基。 11 生物·选择性必修第三册 ②实例：筛选分解尿素的细菌的培养基，以 三、微生物的数量测定 作为唯一氮源，只有能合成 微生物生长量的测定有计数法、重量法、生 的微生物才能分解尿素。 理指标法等方法，但是一般使用计数法，计 二、微生物的选择培养 数法可分为直接计数法和间接计数法。二 1.铲取土样，将样品装入纸袋中。 者的比较如下表所示： 2.将10g土样加入盛有90mL无菌水的锥形 瓶中，充分摇匀。取1mL上清液加入盛有 项目 直接计数法 间接计数法 9mL无菌水的试管中，依次等比稀释。 利用特定细 当样品的稀释度足够 梯度稀释操作 菌计数板或 高时，培养基表面生 I mL I ml I ml 1 mL I ml 血细胞计数 长的一个菌落，来源 板，在显微 于样品稀释液中的一 10 103 109 原理 镜下计算一 个活菌。通过统计平 9 mL 9 mL 9 mL 9 mL 9 mL 定容积的样 板上的菌落数，就能 菌液 无菌水无菌水无菌水无菌水无菌水无菌水 品中微生物 推测出样品中大约含 (1)将分别盛有 mL无菌水的6支试管按 的数量 有多少活菌 1×101~1×106的顺序编号。 (2)用移液管吸取 mL培养的菌液，注入 显微镜、细 主要用具 培养基 1×101倍稀释的试管中。用手指轻压移 菌计数板 液管上的橡皮头，吹吸3次，使菌液与水充 分 计数数据 菌体本身 培养基上菌落数 (3)从101倍稀释的试管中吸取 mL稀释 液，注入1×10倍稀释的试管中，重复(2) 计数方便、 优点 计数的是 步的混匀操作。依次类推，直到完成最后 操作简单 一支试管的稀释。 死菌、活菌 操作较复杂，有一 3.涂布平板操作 缺点 都计算在内 定误差 涂布器 每毫升原液 含菌数=每 每毫升原液含菌数= 小格平均菌 培养基上平均菌落 d用 将 计算公式 a.取少量菌b.将涂布c将沾有少量酒 体数×400× 数×稀释倍数÷涂 均匀地涂 液（不超过器浸在盛精的涂布器在火 布在表 10000×稀 布液体积 mL),滴有 焰上引燃，待酒 面。涂布时可 释倍数 加到培养基的烧杯中精燃尽后，一 培养皿，使 表面 8-10s 四、土壤中分解尿素的细菌的分离与计数 菌液分布均匀 待涂布的菌液被培养基吸收后，将平板， 1.土壤取样 放入30~37℃的恒温培养箱中培养1~2d。 从富含有机质、酸碱度接近中性且潮湿的土 在涂布有合适浓度菌液的平板上就可以观察 壤取样。先铲去表层土，在距地表约 到分离的菌落。 cm的土壤层取样。 第一章发酵工程 2.样品的稀释 ③在稀释土壤溶液的过程中，每一步都要 (1)稀释原因：样品的 直接影响平板 在 旁操作。 上生长的 (2)做好标记：本实验使用的平板和试管比较 (2)稀释标准：选用一定稀释范围的样品液进 多。为避免混淆，最好使用前就做好 行培养，保证获得菌落数在 之 间，便于计数。 (3)制订计划：对于耗时较长的生物实验，要事 (3)第一次做实验时，可以将稀释度的范围放 先 ,以便提高工作效率。 宽一点。 ◆[基础诊断] 3.微生物的培养与观察 (1)因为土壤中各类微生物的数量不同，所以， (1)培养：不同种类的微生物，往往需要不同的 为获得不同类型的微生物要按不同的稀释倍 培养 和培养 数进行分离。 (2)观察：每隔 统计一次 数 (2)转换划线角度后需要灼烧接种环再进行 目，最后选取菌落数目 时的记录 划线。 () 作为结果。 (3)筛选分解尿素的细菌所用的培养基为液体培 4.操作提示 养基 ( (1)无菌操作 (4)用平板划线法培养计数，应选择有10~ ①取土样的用具在使用前都需要 100菌落数的平板。 () (5)统计菌落数目时，统计的菌落数就是活菌 ②应在 旁称取土壤，并在火焰附 的实际数目。 () 近将称好的土样倒入锥形瓶中，塞好 (6)只要培养基中有尿素即可筛选出分解尿素的 细菌。 互动探究。克疑难 疑难点一 微生物的选择培养和计数 1.选择培养基的选择作用 续表 (1)原理：根据不同微生物的特殊营养需求或 方法 特点 举例 其对某化学、物理因素的抗性不同而制备培 养基。 在完全培养基中 (2)三种方法的比较： 加入某些化学物 利用某种 质，利用加人的 加入青霉 方法 特点 举例 化学物质 化学物质对微生 素可以分 利用营养 通过控制培养 缺乏氮源 进行的选 物产生的影响， 离出酵母 缺陷型选 基的营养成分， 时可以分 择培养 抑制某些微生 菌和霉菌 择培养基 使营养缺陷型 离固氮微 物，同时选择所 进行的选 微生物不能正 生物 需的微生物 择培养 常生长 ·13· 生物·选择性必修第三册 续表 2.A同学用稀释涂布平板法对稀释了1×106的 方法 特点 举例 菌液进行计数，得到了一个220的平板，他能 以此计算细菌个数吗？ 将培养基 利用培养 放在高温 条件进行 改变微生物的 环境中培 3.B同学也用稀释涂布平板法对稀释了1×106 的选择 培养条件 养可以得 的菌液进行计数，得到了三个平板，数目分别 培养 到耐高温 是18、209、231。他应该怎么处理这组数据？ 的微生物 「特别提醒]能在选择培养基上生长的不 定是所需要的目的菌。原则上选择培养基只 ◆汇对点训练] 能允许特定种类的微生物生长，但实际上，微 1.在微生物学中，将允许特定种类的微生物生 生物的培养是一个非常复杂的问题，有些微 长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的 生物可以利用其他微生物的代谢物生长繁 培养基称为 殖，因此能在选择培养基上生长的微生物不 A.鉴别培养基 B.加富培养基 一定都是所需的微生物，还需进一步的鉴定。 C.选择培养基 D.基础培养基 2.在进行微生物数量测定时，下列情况会造成 2.平板划线法和稀释涂布平板法的比较 结果偏多的是 (1)单细胞菌落的获得 A.经过静置后，取培养液的上层进行直接 利用平板划线法接种时，单细胞菌落从后 计数 划线的区域挑取；利用稀释涂布平板法接 B.进行梯度稀释时，每支试管加入了过多 种时，只有合适的稀释度才能得到单细胞 的无菌水 菌落。 C.利用显微镜直接计数时，滴加菌液后再 (2)两种接种方法的应用 盖盖玻片 两种方法都能将微生物分散到固体培养基 D.平板上有不少菌落是两个细菌长成的菌 表面，以获得单细胞菌落，达到分离纯化微 落连在一起形成的 生物的目的；稀释涂布平板法还能对微生 ◆[易错警示] 物进行计数，而平板划线法不能用于微生 稀释涂布平板法的注意事项 (1)稀释涂布平板法所选择倒平板的稀释度很 物的计数 重要，一般以3个稀释度中的第二个稀释 ◆[互动採究] 度倒平板，所出现的平均菌落数在50个左 1.能够对微生物计数的接种方法是哪一种？ 右的为最好。 为了保证结果准确，平板中的菌落数为 (2)在设计实验时，一定要涂布至少3个平板 多少？ 作为重复组。 (3)在分析结果时，一定要考虑所设置的重复 组的结果是否一致，如果差别过大，则意味 着操作有误，需要重新实验。 第一章发酵工程 疑难点二土壤中分解尿素的细菌的分离与计数实验 1.实验设计及操作提示 续表 步骤 实验操作 操作提示 ①不同微生物往往需 土壤微生物约 要不同的培养温度和 70%~90%为细 时间： 将平板倒置，于 菌，主要分布在距 ②一般来说，在一定的 培养 30~37℃温度下培 地表3~8cm土 培养条件下，同一种微 壤层。 观察 养1~2d,每隔24h 生物表现出稳定的菌落 统计一次菌落数目 ①要求：从富含有 特征，包括菌落的形状、 取样用的小铁铲和盛 土壤 机质、酸碱度接近 大小、隆起程度和颜色 土样的信封都要经过 取样 中性土壤中取样； 灭菌 等方面 ②取样层：先铲除 表层土，在距地表 选取菌落数在30~ 约3~8cm的土壤 300的平板进行计 层取样； 数。在同一稀释度 选取菌落数目稳定时 ③将样品装入事先 下，至少对3个平板 的记录作为结果，以 计 准备好的信封中 进行重复计数，然后 防止因培养时间不足 数 分别配制牛肉膏蛋 牛肉膏蛋白胨培养基可 求出平均值，并根据 而导致遗漏菌落的 制备 白胨培养基和尿素 以作为对照，用来判断 平板所对应的稀释 数目 培养 为唯一氮源的选择 选择培养基是否起到了 度计算出样品中细 基 培养基 选择作用 菌的数目 ①应在火焰旁称取土 ①称取10g土样加 2.结果分析与评价 样。在火焰附近将称好 到盛有90ml无菌 的土样倒入锥形瓶中， 内容 现象 结论 水的锥形瓶中，充分 塞好棉塞。 对照的培养皿中无 未被杂菌 摇匀； ②由于初次实验，对于 ②吸取上清液 菌落生长 污染 样品 稀释的范围没有把握， 有无杂 1mL,转移至盛有 的稀 因此选择了一个较为宽 培养物中菌落数 菌污染 被杂菌污染 9mL无菌水的无菌 释和 泛的范围1×103~1× 偏高 大试管中，按照上述 的判断 涂布 107倍稀释的稀释液。 流程进行样品的 菌落形态多样，菌 培养物中混 ③实验时要对所用的平 稀释； 落数偏高 入其他氮源 板、试管作好标记。如 ③选用1×103~ 培养皿要注明培养基类 选择培养 牛肉膏培养基上的 选择培养基 1×107倍稀释的稀 型、培养时间、稀释度、 基的筛选 菌落数目大于选择 具有筛选 释液涂布培养 培养物等 作用 培养基上的数目 作用 15 生物·选择性必修第三册 续表 (3)为什么只有能分解尿素的细菌才能在该培 内容 现象 结论 养基上生长？ 得到2个或2个以 样品的 (4)三个培养皿中分别形成了54个、46个、 上菌落数目在30~ 操作成功 稀释操作 50个菌落，则1g土壤样本中的活菌数有 300的平板 多少？ 重复组的 若选取同一种土样，统计结果应接近 结果 ◆[对点训练] ◆[互动探究] 1.下列关于土壤取样的叙述，错误的是() 某兴趣小组试图从土壤中分离分解尿素的细 A.土壤取样时，应选取肥沃、湿润的土壤 菌，流程图如下图所示。回答下列问题： B.先铲去表层土3cm左右，再取样 取lml取1ml取1ml取1mL取lmL C.取样用的小铁铲和信封在使用前不用 1g土壤 →→ 接种 计算菌落数 灭菌 水稀森10倍稀释0倍稀森10陪稀大 D.应在酒精灯火焰旁称取土壤 (1)要从土壤中分离目标菌，最关键的实验操 2.用稀释涂布平板法来统计样品中尿素分解 作步骤是什么，这样做的理由是什么？ 菌的数目时，为了提高实验结果的可信度， 往往要设置对照，对于对照组的要求不包括 A.对照组培养基也严格灭菌 (2)接种尿素分解菌后的培养基需要倒置培 B.对照组和实验组放在相同的条件下培养 养，原因是什么？ C.所用培养基成分及pH值大小完全与实验 组一致 D.培养基的量的大小，与实验组必须绝对 相同 课堂自测®固双基 1.土壤中分解尿素的微生物所需氮源为 A.利用平板划线法对细菌进行计数 B.利用以石油为唯一碳源的培养基筛选 A.硝酸 B.氨 C.采用稀释涂布平板法分离菌种 C.尿素 D.蛋白胨 D.称取和稀释土壤时应在火焰旁 2.某学者欲研究被石油污染过的土壤中细菌 3.用稀释涂布平板法来统计样品中的活菌数 数量，并从中筛选出能分解石油的细菌。下列 时，通过统计平板上的菌落数就能推测出样 操作错误的是 品中的活菌数。原因是 ·16· 第一章发酵工程 A.平板上的一个菌落就是一个细菌 用该方法统计样本菌落数后，所得数据需要 B.菌落中的细菌数是固定的 乘以10”后，才可表示乳酸菌的数量（单位： C.此时的一个菌落一般来源于样品稀释液 个/mL),这里的n= (填“4”“5”或 中的一个活菌 “6”)。经正确操作培养后，3个平板上的菌 D.此方法统计的菌落数一定与活菌的实际 落数分别为150、158和157。据此可得出 数相同 每毫升样品中的活菌数 (填“至多” 4.养殖池中存在的有毒物质主要是氨和亚硝 或“至少”)为 个。 酸，这两种物质可由硝化细菌吸收利用。研 (3)请完善“检测乳酸菌对青霉素、四环素耐 究人员从养殖池的池泥中分离出硝化细菌 药性”的实验操作步骤： 并进行了计数。有关叙述正确的是( ) 步骤1：分别取 A.需配制一定浓度含氨盐的牛肉膏蛋白胨 加入三组无菌培养皿中，再加 培养基以分离硝化细菌 入灭菌并冷却到50℃左右的培养基，立即 B.配制的培养基经高压蒸汽灭菌后通常还 混匀，静置凝固成平板。 需要调节pH才能使用 步骤2：向三组培养基中分别接种待检测的 C.涂布时，用涂布器沾取少量菌液并均匀 乳酸菌菌种。 地涂布在培养基的表面 步骤3：将接种后的三组培养基和一个 D.使用涂布平板法统计得到的菌落数目往 都置于适宜温度等条件下培 往比活菌的实际数目少 养一定时间，观察比较培养基中菌落生长 5.为研究“某品牌酸奶中乳酸菌数量及其对抗 情况。 生素耐药性情况”，某同学进行了如下实验： 过程 D 复3次 3 011 → 一耐药性检测 68 10ml 00m1 倒人 C 酸奶样品 无南水 无南水 无南水 培养、计数 请分析回答下列问题： (1)配制的细菌培养基除了含有水、碳源、氮 源和无机盐等主要营养成分外，还应加入适 量的 和琼脂。在培养基各成分溶 化与灭菌之间，要进行的操作是 (2)接种微生物的方法有很多，图中过程① ②③所示的方法为 。用 该方法统计样本菌落数时，同时需要做A、 B、C三个培养皿，原因是 C温馨提 学习至此，请完成配套训练 ·17·