第1章 第2节 第2课时 微生物的选择培养与计数（教师版）-【创新教程】2025-2026学年高中生物选择性必修3 生物技术与工程五维课堂同步复习（人教版）

世五维课堂 8.(多选)如图为实验室培养和纯化大肠杆菌过程中 的部分操作步骤，下列说法不正确的是 0 @ ③ ④ A.步骤①倒平板后需间歇晃动，以保证表面平整 B.步骤②在沾取一环菌液前后，接种环都要通过酒 精灯火焰 C.步骤③到④的过程中，每次划线后都需要对接种 环进行灼烧处理 D.步骤④中平板与未接种的平板都放人37℃的恒 温箱中培养 解析：AB[倒平板时需左三圈，右三圈的轻轻晃 动，以保证表面平整，A错误；步骤②在沾取一环菌 液前后，试管口都要通过酒精灯火焰，而不是接种 环，其中为避免杀死目的菌株，需要注意将已冷却 的接种环伸入菌液中蘸取一环菌液，B错误；步骤 ③到④的过程中，每次划线后都需要对接种环进行 灼烧处理，以杀死上次划线结束后接种环上残留的 菌种，C正确：将接种后的培养基和未接种的培养 基同时放入37℃恒温箱，目的是作为空白对照，判 断培养基是否被污染。一段时间后若未接种的培 养基有菌落说明培养基被污染，则培养基不能使 用，若无菌落说明培养基没有被污染，可以使用，D 正确。] 9.微生物的分离和培养是现代生物工程应用中的重 要环节。下图甲、乙、丙是大肠杆菌分离和培养过 程中部分操作和实验结果示意图，请据图回答有关 问题： 甲 丙 (1)上图甲所示的是制备固体培养基时的实验操作 步骤之一，它称为 ,若用该培养基培养大 肠杆菌，除考虑营养条件外，还要考虑 和渗透压等条件。 (2)培养大肠杆菌时，在接种前需要检测培养基是 否被污染。对于固体培养基应采用的检测方法是 18 生物·选择性必修3 (3)上图乙是平板划线法接种操作示意图，正确的 操作顺序是A>B→ （用字母和箭头表 示)；找出图乙中两处错误的操作（用字母表示）： (4)上图丙是某同学用平板划线法接种后的培养基 培养12h后的实验结果，如果培养基上 ,则说明无菌操作基本符 合要求。 解析：(1)图甲所示操作为倒平板，需要在酒精灯火 焰旁进行操作。培养基中除营养成分外，还应考虑 pH、氧气、无菌、温度、渗透压等条件。 (2)检测培养基是否被污染的方法是将未接种的培 养基在适宜的温度下放置适宜的时间，观察培养基 上是否有菌落产生，如有菌落，说明该培养基已被 污染。 (3)平板划线法的操作顺序为灼烧接种环，冷却，挑 取菌种，划线，灼烧接种环，划线，灼烧接种环，平板 倒置培养，即A→BG→F→EC→D→H。图乙 中C操作应在酒精灯附近进行，D中划线的首尾不 应该相接。 (4)同一菌种的菌落颜色、形状、大小基本一致，如 有杂菌污染，会有异常菌落出现，可根据菌落的特 征确定该菌落是否为大肠杆菌。 答案：(1)倒平板温度（氧气）pH(无菌) (2)将未接种的培养基在适宜的温度下放置适宜的 时间，观察培养基上是否有菌落产生 (3)G→F→E→C→D→HCD (4)生长的菌落颜色、形状、大小基本一致，并符合 大肠杆菌菌落的特点 易错点警示 》 混淆消毒和灭菌的区别 下列关于灭菌和消毒的理解不正确的是( A.灭菌是指杀灭环境中一切微生物的细胞、芽孢 和孢子 B.消毒和灭菌实质上是相同的 C.用酒精擦拭双手只能消毒，不能起到灭菌作用 D.常用的灭菌方法有灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸 汽灭菌等 解析：B[灭菌是指采用强烈的理化方法杀死物体 内外所有的微生物，包括芽孢和孢子。A正确。消 毒是指用较为温和的物理、化学或生物等方法仅杀 死物体表面或内部一部分对人体有害的微生物，不 包括芽孢和孢子，因此实质是不相同的，B错误。 用酒精擦拭双手属于消毒，C正确。常用的灭菌方 法有灼烧灭菌、千热灭菌、高压蒸汽灭菌等，D 正确。] 第一章发酵工程 五维课堂型 第2课时 微生物的分离与计数 课标内容要求 核心素养对接 1.举例说明通过调整培养基的配方可有目的地培养某种微生物 生命观念：理解微生物的选择培养和计 2.概述平板划线法和稀释涂布平板法是实验室中进行微生物分离 数的原理 和纯化的常用方法 科学探究：开展稀释涂布平板法的操作 3.概述稀释涂布平板法和显微镜计数法是测定微生物数量的常用 和土壤中分解尿素的细菌的分离与计数 方法 实验 教材梳理。预新知 对应学生讲义P9 ◆[基础梳理] (1)将分别盛有9mL无菌水的6支试管按101~10 一、选择培养基 的顺序编号。 1.自然界中微生物的分离 (2)用移液管吸取1mL培养的菌液，注人10'倍稀释 (1)目的菌株是优势种群：平板划线法或稀释涂布平 的试管中。用手指轻压移液管上的橡皮头，吹吸 板法。 3次，使菌液与水充分混匀。 (2)目的菌株非优势种群：利用选择培养基分离。 (3)从10'倍稀释的试管中吸取1mL稀释液，注人 2.实验室中目的菌株的筛选 102倍稀释的试管中，重复(2)步的混匀操作。依 (1)原理：人为提供有利于目的菌株生长的条件（包括 次类推，直到完成最后一支试管的稀释。 营养、温度、pH等)，同时抑制或阻止其他微生物 3.涂布平板操作 的生长。 (2)方法：利用选择培养基分离。 涂布 ①选择培养基：允许特定种类的微生物生长，同时 阻止或抑制其他种类微生物生长的培养基。 ②实例：筛选分解尿素的细菌的培养基，以尿素作 d.用涂布器将 a.取少量菌b.将涂 c将沾有少量酒 为唯一氮源，只有能合成脲酶的微生物才能分解 菌液均匀地涂 液（不超过布器浸在 精的涂布器在火 尿素。 布在培养基表 0.1mL),滴盛有酒精 焰上引燃，待酒 二、微生物的选择培养 面。涂布时可 加到培养基的烧杯中 精燃尽后，冷却 1.铲取土样，将样品装人纸袋中。 转动培养皿，使 表面 8~10s 菌液分布均匀 2.将10g土样加入盛有90mL无菌水的锥形瓶中， 待涂布的菌液被培养基吸收后，将平板倒置，放入 充分摇匀。取1mL上清液加人盛有9mL无菌水 的试管中，依次等比稀释。 30~37℃的恒温培养箱中培养1~2d。在涂布有 梯度稀释操作 合适浓度菌液的平板上就可以观察到分离的单 菌落。 I mL ml I mL I mL 三、微生物的数量测定 微生物生长量的测定有计数法、重量法、生理指标 101 109 法等方法，但是一般使用计数法，计数法可分为直 菌液 9 mL 9 mL 9 mL 9 mL 9 ml 9 mL 接计数法和间接计数法。二者的比较如下表 无菌水无菌水 ：无菌水无菌水无菌水无菌水 所示： 。19