第1章 第1节 传统发酵技术的应用(学生版)-【创新教程】2025-2026学年高中生物选择性必修3 生物技术与工程五维课堂同步复习(人教版)

2026-02-28
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资源信息

学段 高中
学科 生物学
教材版本 高中生物学人教版选择性必修3 生物技术与工程
年级 高二
章节 第1节 传统发酵技术的应用
类型 教案-讲义
知识点 -
使用场景 同步教学-新授课
学年 2026-2027
地区(省份) 全国
地区(市) -
地区(区县) -
文件格式 ZIP
文件大小 1.54 MB
发布时间 2026-02-28
更新时间 2026-02-28
作者 山东鼎鑫书业有限公司
品牌系列 创新教程·高中五维课堂同步
审核时间 2026-02-28
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来源 学科网

内容正文:

第一章发酵工程 第一章 发酵工程 第1节传统发酵技术的应用 课标内容要求 核心素养对接 社会责任:了解传统发酵技术,感受 1.举例说明日常生活中的某些食品是运用传统发酵技术 我国劳动人民的创造力 生产的 科学探究:设计果酒和果醋的制作 2.开展相关的教学活动:利用乳酸菌发酵制作酸奶或泡 流程,并探究如何控制果酒和果醋 菜;利用酵母菌、醋酸菌分别制作果酒和果醋 制作过程中的发酵条件 教材梳理⊙预新知 ◆[基础梳理] 二、尝试制作传统发酵食品:泡菜 一、发酵与传统发酵技术 1.菌种—一乳酸菌 1.约 年前,我们的祖先就会利用微生 (1)分布:在自然界中分布广泛,空气、土壤、植 物将谷物、水果等发酵成含酒精的饮料。 物体表、人或动物的肠道内都有分布。 2.1857年,法国微生物学家巴斯德通过实验 (2)常见种类:乳酸链球菌和 。其中 证明,酒精发酵是由 引起的。 常用于生产酸奶。制作传统泡菜是 3.发酵:是指人们利用 ,在适宜的条 利用植物体表面 的乳酸菌来进行 件下,将原料通过微生物的 转化为 发酵的。当乳酸质量百分比为0.4%~ 人类所需要的产物的过程。 0.8%时,泡菜的口味、品质最佳。 4.腐乳制作 2.制作原理 (1)原料:豆腐。 (2)主要变化:蛋白质→和 (3)主要微生物: 3.泡菜制作的流程 配制盐水:用清水和食盐配制质量百分比为 5.传统发酵技术 (1)定义:直接利用原材料中 存在的 的盐水, 待用 微生物,或利用前一次发酵保存下来的面 团、卤汁等 中的微生物进行发酵、 原料加工:选取 的蔬菜,切分成 制作食品的技术。 后放于坛 (2)发酵类型: 发酵及 发酵。 内,装至 时,放入调味 (3)实例: 、泡菜和豆豉等。 品,继续装至 ·1 生物·选择性必修第三册 5.方法步骤 装坛:徐徐注入配制好的 ,使盐水 (1)将发酵瓶、榨汁机等器具用洗洁精清洗干 没过 ,盖好坛盖 净,并用体积分数为 的酒精消毒, ¥ 晾干备用。 封坛发酵:向坛盖边沿的水槽中 (2)取 葡萄,用清水冲洗1~2次,再 发酵时间长短受室内 的 去除枝梗和腐烂的籽粒,沥干。 影响 (3)用榨汁机榨取葡萄汁,将葡萄汁装入发酵 瓶中(注意:要留有大约 的空间), 成品 盖好瓶盖。 三、尝试制作传统发酵食品:制作果酒和果醋 (4)将温度控制在 ℃进行发酵。在发 1.酿酒的菌种—一酵母菌 酵过程中,每隔12h左右将瓶盖 (1)酵母菌是一类单细胞 ,在一些含 次(注意:不是打开瓶盖),此后再拧紧瓶盖。 糖量较高的水果、蔬菜表面经常可以发现 发酵时间为10~12d。可通过从发酵瓶口 酵母菌的存在,许多新鲜水果(如葡萄)的 来对发酵的情况进行监测。 果皮表面附着有大量的 酵母菌。 (5)当葡萄酒制作完成后, 瓶盖,盖上 (2)代谢特点:酵母菌是兼性厌氧微生物,在无氧 一层纱布,进行葡萄醋的发酵。发酵温度 条件下能进行酒精发酵(可用于酿酒、制作馒 为 ℃,时间为78d。 头和面包等)。 6.传统发酵食品的制作过程中,利用 (3)影响因素:温度是影响酵母菌生长的重要 存在的菌种会造成发酵食品的品质不一。 因素,酿酒酵母的最适生长温度为28℃。 为了缩短发酵时间,确保品质稳定,工业生 2.酿酒原理 产中会先通过微生物培养技术获得 菌种,再将它们接种到物料中进行发酵。 3.酿醋的菌种 一醋酸菌 ◆[基础诊断] (1)代谢特点: 细菌。 (1)制作泡菜的原理是乳酸菌无氧呼吸产生 (2)影响因素:多数醋酸菌的最适生长温度为 乳酸。 ( ℃。 (2)泡菜坛不需要选择密封性好的坛子。 4.酿醋原理 ) 当 都充足时能将糖分解成醋酸;当 (3)泡菜制作时间与温度有关系。 ( 缺少 时则将乙醇转化为 (4)制作葡萄酒和葡萄醋的过程中,都要定时 再将乙醛变为醋酸。反应式如下: 拧松瓶盖放出CO2。 ( (5)葡萄酒的自然发酵中,起主要作用的是野 生型酵母菌。 ( ) (6)制作果酒和果醋时的温度不同。() ·2 第一章发酵工程 互动探究®克疑难 疑难点一 泡菜的制作 1.泡菜腌制过程中乳酸菌、乳酸的变化 ◆[互动探究] 乳酸菌 乳酸 下图为制作泡菜的过程,请据图思考回答 问题: 少(有O2,乳酸菌 发酵初期 少 活动受抑制) 选择 修整、洗涤、晾晒 原料 切分成条状或片状 加入调味 料,装坛 发酵成品 称取 配制 泡菜 最多(乳酸抑制其 食盐 盐水一盐水 发酵中期 增多 他菌活动) (1)制作泡菜时,盐水为什么按质量百分比为5% ~20%配制? 减少(乳酸继续积 发酵后期 累,pH继续下 继续增多 降,抑制其活动) (2)在泡菜制作的发酵过程中,为什么要经常 含量变 向泡菜坛的水槽中补充水? 化曲线 发酵时间 发酵时间 (3)为什么泡菜坛内有时会长一层白膜?你认 2.泡菜制作的注意事项 为这层白膜是怎么形成的? (1)泡菜坛的选择:应选用火候好、无裂纹、无 砂眼、坛沿深、盖子吻合好的泡菜坛。检查 时,可将坛口向上压入水中,看坛内有无渗 水现象。 (2)腌制的条件:要注意控制时间、温度和食盐 ◆[对点训练] 的用量。温度过高、食盐用量过低、腌制时 1.在制作泡菜的过程中,不正确的是( 间过短,容易造成细菌大量繁殖,亚硝酸盐 A.按照清水与盐的质量比为1:4的比例 含量增加。 配制盐水 (3)腌制方法:盐水要配制质量百分比为5%~ B.配制好的盐水需煮沸冷却 20%的,盐水要煮沸冷却后备用。蔬菜和配 C.腌制过程中,要注意控制腌制的时间、温 料装至八成满时,加盐水没过全部菜料,盖好 度和食盐用量 坛盖后向坛盖边沿的水槽中注满水,以保证 D.在坛盖边沿的水槽中要注满水,以保证 坛内形成无氧环境,以便乳酸菌发酵。 坛内的无氧环境 ·3 生物·选择性必修第三册 2.下列关于乳酸菌的说法错误的是 ◆汇方法总结] 制作泡菜时控制无氧条件的措施 A.乳酸菌广泛分布于人或动物肠道内 ①选择密封好的发酵容器,如泡菜坛。 B.乳酸菌无氧呼吸产生乳酸和CO2 ②盐水煮沸后冷却待用,排出其中的氧气。 C.乳酸菌与醋酸菌的细胞结构相似 ③装坛时压实,盐水没过全部菜料,排出菜料 之间的空气。 D.在泡菜制作过程中,起主要作用的是乳 ④泡菜坛用水封口不让空气进入,创造一个封 酸菌 闭无氧的环境,故发酵期间不宜开盖,并注意 在发酵过程中经常补水。 疑难点二 果酒与果醋的制作 1.果酒制作与果醋制作的比较 2.果酒和果醋的制作流程 果酒制作 果醋制作 ①榨汁机:清洗干净,并晾干 实验用 (1) ②发酵瓶:清洗干净,用体积分数为 附着在葡萄皮上 空气中的 具消毒 来源 70%的酒精消毒 的野生型酵母菌 醋酸菌 ①先冲洗后除去枝梗 挑选、冲 发 单细胞原 (2) ②不能反复冲洗,防止洗去野生型 分类地位 单细胞真核生物 洗葡萄 酵 核生物 酵母菌 菌 分裂 ①温度:1830℃ 种 繁殖方式出芽生殖、孢子生殖 生殖 果酒 ②时间:10~12d (3) 发酵 ③排气:发酵过程要注意及时排气, 异养需 代谢类型 异养兼性厌氧型 防止发酵瓶爆裂 氧型 取样①10~12d取样检测酒精含量 (4) 温度 1830℃ 3035℃ 检测{②酵母菌数量检测 发 时间 10~12d 7~8d ①温度:加入醋酸菌后,温度控制 酵 果醋在30~35℃ 一直需要 条 (5) 氧气 前期需氧,后期无氧 发酵 ②时间:7~8d 充足氧气 件 ③通气:适时通过充气口充气 pH 酸性 酸性 ◆[互动探究] 酒精与酸性的重 反应液pH 1.在糖源充足和缺乏条件下,醋酸菌的发酵有 结果检测 铬酸钾溶液反应 下降 何不同? 呈现灰绿色 醋酸发酵可以在酒精发酵的 联系 基础上进行,酒精发酵为醋酸 2.为什么果酒搁置时间过久会有酸味? 发酵提供原料 第一章发酵工程 ◆[对点训练] 挑选葡萄→①→榨汁→酒精发酵→醋酸发酵 1.制作果酒、果醋两个实验的共同点是( A.菌种为异养原核生物 ② ③ A.①为冲洗,目的是去掉葡萄表面的污物, B.将原料灭菌后再发酵 但不能冲洗次数过多 C.保证无氧环境下发酵 B.②为果酒,酒精发酵过程中要严格控制 D.发酵液最终呈现酸性 氧气和温度 2.下图是制作果酒和果醋的流程,下列相关叙 C.③为果醋,醋酸发酵过程中要间断通气 述中,错误的是 ( D.②的制作过程中既涉及有氧呼吸又涉及 无氧呼吸 课堂自测⊙固双基 1.制作四川泡菜时要用特殊的坛子,坛子需加 C.果酒发酵过程中温度控制在30℃,果醋 水密封,密封坛口的目的是 发酵过程中温度控制在20℃ A.隔绝空气,抑制细菌繁殖 D.在果醋发酵过程中,适时通过充气口充 B.阻止尘埃,防止污染 入O2,有利于醋酸菌的代谢 C.造成缺氧环境,利于乳酸菌发酵 5.苹果醋是以苹果汁为原料经发酵而成的。 D.防止污染,利于醋酸菌发酵 回答下列问题: 2.家庭用鲜葡萄制作果酒的正确操作是( H,O+CO, A.让发酵装置接受光照 ®1 B.给发酵装置适时排气 葡萄糖①,丙酮酸®,酒精+C0, C.向发酵装置通入氨气 D.将发酵装置放在45℃处 (1)酵母菌的呼吸代谢途径如图所示。图中 过程①和②是苹果醋生产的第一阶段,在酵 3.(不定项)果酒、果醋和泡菜制作过程中,发酵液 母菌细胞的 中进行,过程③在 最终都呈酸性,下列原因解释正确的是() 酵母菌细胞的 中进行。与无 A.制作果酒初期酵母菌进行有氧呼吸产 氧条件相比,在有氧条件下,酵母菌的增殖 生CO2 速度 B.制作果酒后期酵母菌进行无氧呼吸产 (2)第二阶段是在醋酸杆菌的作用下将第一 生CO 阶段产生的乙醇转变为乙酸的过程,根据醋 C.制作泡菜时乳酸菌进行无氧呼吸产生 酸杆菌的呼吸作用类型,该过程需要在 乳酸 D.制作果醋时醋酸菌进行无氧呼吸产生 条件下才能完成。 (3)在生产过程中,第一阶段和第二阶段的 醋酸 发酵温度不同,第一阶段的温度 4.下列有关果酒和果醋制作的叙述,正确的是 (填“低于”或“高于”)第二阶段的温度。 (4)醋酸杆菌属于 核生物,其细胞结构 A.葡萄汁要装满发酵瓶,造成无氧环境,有 中 利于发酵 (填“含有”或“不含有”)线粒体。 B.在葡萄酒发酵过程中,每隔12h左右打 C温馨提西 学习至此,请完成配套训练 开瓶盖一次,放出CO2 。5参芳 第一章发酵工程 第1节传统发酵技术的应用 教材梳理·预新知 基础梳理 一、1.90002.活的酵母菌3.微生物代谢4.(2)肽氨 基酸(3)毛霉5.(1)天然发酵物(2)固体半固体 (3)酱、酱油、醋 二、1.(2)乳酸杆菌乳酸杆菌天然 2.CH0,醇2CH,0(乳酸)十能量 3.5%~20%煮沸冷却新鲜条状或片状晾干半坛 八成满盐水全部菜料注满水温度 三1.1)真菌野生2.CHO,醇2C,H,OH(酒精)十 2C02十能量3.(1)好氧(2)30354.02、糖源糖源 酶 乙醛CH2O。十2O22 CH,COOH(乙酸)+2H,O十 2c0,十能量C,H,OH+0,酶.CH,CO0H(乙酸)+H,0+ 能量5.(1)70%(2)新鲜(3)1/3 (4)1830拧松取样(5)打开3035 6.天然单一 基础诊断 (1)/(2)X(3)/(4)×(5)/(6)/ 互动探究·克疑难 疑难点一互动探究 (1)提示:食盐用量过高,口味不佳,乳酸发酵受抑制,泡菜风 味差;食盐用量过低,会导致杂菌大量繁殖,制作泡菜腐烂。 (2)提示:泡菜坛是通过水进行密封的,保持无氧状态,当水 槽中水少时,要及时补充。 (3)提示:形成白膜是由于产膜酵母的繁殖。酵母菌是兼性 厌氧微生物,泡菜发酵液营养丰富,其表面氧气含量也很丰 富,适合酵母菌繁殖。 对点训练 1.A[在制作泡莱的过程中,用清水和食盐配制质量百分比 为5%~20%的盐水,A错误;盐水入坛前要煮沸冷却,煮沸 是为了去除氧气并杀灭微生物,冷却是为了避免杀死坛内微 生物,保证乳酸菌正常的生命活动,B正确;腌制过程中,要 注意控制时间、温度和食盐的用量,来防止杂菌的大量繁殖 和亚硝酸盐含量过高,C正确;乳酸菌是异养厌氧型生物,在 坛盖边沿的水槽中要注满水,以保证坛内的无氧环 境,D正确。] 2.B[乳酸菌广泛分布于人或动物肠道内,A正确;乳酸菌是 厌氧型细菌,无氧呼吸产生乳酸,不产生CO2,B错误;乳酸 菌与醋酸菌都属于原核生物,结构相似,C正确:泡莱制作利 用了乳酸菌的无氧发酵过程,D正确。] ·9 参考答案 答案 疑难点二互动探究 1.提示:(1)当氧气充足、糖源充足时,醋酸菌将葡萄汁中的糖 分解成乙酸。 (2)当氧气充足、缺少糖源时,醋酸菌将乙醇转化为乙醛,再 转化为乙酸。 2.提示:醋酸菌在缺乏糖源时,可以将酒精转化为乙醛,再将乙 醛转化为乙酸,所以果酒搁置时间过久,会因醋酸菌的代谢 产生乙酸而有酸味。 对点训练 1.D[制作果酒、果醋的实验所用菌种分别为酵母菌、醋酸 菌,其中醋酸菌属于细菌,为原核生物,而酵母菌属于真菌, 为真核生物,A错误;这两个实验都利用了自然界中的菌种 (即原料上携带的菌种),不能将原料灭菌,否则将无法实现 发酵,B错误;制作果醋时所用的醋酸菌属好氧细菌,即制作 果醋需在有氧环境下发酵,酒精发酵和乳酸发酵在无氧环境 下发酵,C错误;利用酵母菌发酵制作果酒时会产生二氧化 碳,会使发酵液呈酸性,果醋制作时,生产出的果醋呈酸性, 导致发酵液最终呈酸性,D正确。] 2.C「①为冲洗,目的是去掉葡萄表面的污物,但不能冲洗次 数过多,否则会冲洗掉葡萄表面的野生型酵母菌,A正确;酒 精发酵的产物是果酒,氧气和温度是影响果酒制作的两个重 要因素,需要在发酵过程中严格控制,B正确;③为果醋,果 醋制作所用微生物是醋酸菌,醋酸菌是好氧菌,在发酵过程 中如果中断氧气供应会抑制醋酸菌的代谢,甚至引起醋酸菌 的死亡,所以应持续通入空气,C错误;果酒制作既需要酵母 菌的有氧呼吸以大量繁殖,又要通过无氧呼吸产生酒精, D正确。] 课堂自测·固双基 1.C[制作泡莱利用的微生物主要是乳酸菌,为厌氧型微生 物,加水封坛是为了营造无氧环境,利于乳酸菌发酵。] 2.B[家庭果酒制作的原理是利用附着在葡萄皮上的野生型 酵母菌的无氧呼吸产生酒精,无氧呼吸过程产生的CO2要 定期排出。果酒发酵或葡萄酒贮藏都要避光,因为光会加速 酒的氧化,容易引起酒变质。酵母菌进行酒精发酵时,一般 将发酵装置的温度控制在18~30℃。发酵时没有必要通入 氨气。] 3.ABC[制作果酒初期,酵母菌先进行有氧呼吸产生二氧化 碳和水,故A正确;制作果酒后期,发酵罐中没有氧气,酵母 菌进行无氧呼吸产生二氧化碳和酒精,故B正确:制作泡莱 时,乳酸菌进行无氧呼吸产生乳酸,故C正确;制作果醋时, 醋酸菌进行有氧呼吸产生醋酸,故D错误。] 4.D[葡萄汁装入发酵瓶时要留有1/3的空间,以防止发酵液 溢出导致杂菌污染。在葡萄酒发酵过程中,每隔12h左右将瓶 盖拧松一次,放出CO,但不能打开瓶盖,以防止杂菌污染。 果酒发酵时,温度在28℃左右最适合酵母菌繁殖,而果醋制 作中醋酸菌的最适生长温度为30~35℃。醋酸菌是一种好 氧菌,只有O2充足时,才能进行旺盛的生命活动。] 生物·选择性必修第三册 5.解析:(1)图中过程①和②是酵母菌进行无氧呼吸产生酒精 的过程,无氧呼吸的场所是细胞质基质。过程③为有氧呼吸 的第二和第三阶段,场所为线粒体。在有氧条件下酵母菌进 行有氧呼吸,产生更多的能量供酵母菌繁殖利用,故有氧条 件下酵母菌的繁殖速度更快。(2)醋酸杆菌是好氧型细菌, 因此,在醋酸杆菌作用下,将乙醇转变为乙酸的过程需要在 有氧条件下才能完成。(3)在生产过程中,第一阶段酵母菌 产生乙醇的适宜温度为18~30℃,第二阶段醋酸杆菌产生 醋酸的适宜温度为30一35℃,第一阶段的温度低于第二阶 段的温度。(4)醋酸杆菌属于原核生物,原核细胞中的细胞 器只有核糖体一种,不含线粒体。 答案:(1)细胞质基质线粒体快(2)有氧(3)低于 (4)原不含有 第2节微生物的培养技术及应用 第1课时微生物的基本培养技术 教材梳理·预新知 基础梳理 1.(1)营养物质生长繁殖(2)水、碳源、氨源pH特殊营 养物质(3)液体2.(1)杂菌污染(2)外来杂菌 方法 类型 对象 ①灼烧灭菌 I.接种针(环 ②干热灭菌 ,a.消毒 (3) Ⅱ培养皿 ③巴氏消毒 b.灭菌八 ④紫外线 Ⅲ.操作者的 衣着和手 ⑤化学药物 ⑥高压蒸汽灭菌 V水源地 3.温和芽孢孢子干热 基础诊断 (1)×(2)×(3)×(4)×(5)×(6)/ 互动探究·克疑难 疑难点一互动探究 1.提示:碳源、磷酸盐和维生素氮源和维生素。 2,提示:在科研和生产上,研究和应用微生物的前提是进行微 生物的培养。实验室中培养微生物应注意无菌操作,根据不 同物品选择不同的灭菌或消毒方法。 3.提示:还可以保护实验人员的安全。 4.提示:①使菌体蛋白凝固变性,如湿热灭菌;②抑制细菌代谢 和生长,或破坏细菌细胞膜的结构,改变其通透性,使细胞破 裂、溶解,如某些化学消毒法;③损伤细菌DNA等,如紫外 线消毒法。 对点训练 1.C[培养基中一般都含有水、碳源、氨源和无机盐,此外还 应考虑pH、特殊营养物质及O,等条件。] 2.B[在细菌接种的前后都需要灼烧接种环,A不符合题意; 高压蒸汽灭菌一般用于培养基的灭菌,而在细菌接种过程中 不需要高压蒸汽灭菌,B符合题意;细菌接种过程应该在超 净工作台上操作,以防止杂菌的污染,C不符合题意:细菌接 种过程应该在酒精灯火焰附近进行,以防止杂菌的污染, D不符合题意。] ·9 疑难点二互动探究 (1)提示:通过灼烧灭菌,防止瓶口的微生物污染培养基。 (2)提示:平板冷凝后,皿盖上会凝结水珠,凝固后的培养基 表面的湿度也比较高,将平板倒置,既可以使培养基表面的 水分更好地挥发,又可以防止皿盖上的水珠落入培养基造 成污染。 对点训练 1.D[在平板划线时,已灭过菌的接种环在每次划线后,必须 用灼烧灭菌法灭菌,以杀死上次划线结束后接种环上残留的 菌种;盛有菌种的试管在打开后或重新塞棉塞前,都需将试 管口通过酒精灯火焰灼烧和灭菌:在平板内划三至五条平行 线后应盖上皿盖,并灼烧接种环,待其冷却后,从第一区域划 线的末端开始往第二区域划线,并按此操作继续往三、四、五 区域划线;接种完成后,需将平板倒置放入培养箱,以防培养 皿皿盖上的水珠落入培养基,造成污染。门 2.B[对未接种的培养基进行培养,起对照作用,可确定培养 基是否被杂菌污染。] 课堂自测·固双基 1.B[纤雏素分解菌是异养型微生物,其碳源为有机碳源,硝 化细菌是自养型微生物,其碳源为CO2,A错误;雏生素是乳 酸杆菌生长繁殖所必需的生长因子,而乳酸杆菌不能合成, 所以实验室培养乳酸杆菌时需要在培养基中添加雏生素, B正确;培养基中的营养物质浓度过高会导致微生物不能从 培养基中吸水,将出现失水过多而死亡的现象,对生长不利, C错误;培养基不一定都含有碳源、氨源,如培养自养型微生 物的培养基中不需要加入碳源,分离自生固氨菌的培养基中 不需要加入氨源,D错误。] 2.C[①无菌技术的关键是防止杂菌的污染,①错误;②煮沸 消毒法中l00℃煮沸5~6min可以杀死微生物细胞和一部 分芽孢和孢子,②正确;③经巴氏消毒法处理的食品因微生 物未被彻底消灭,所以不能在常温下长期保存,③正确:④高压 蒸汽灭菌时若不将锅内冷空气排出则达不到预期的灭菌效果, ④正确;⑤将接种环直接在酒精灯火焰的充分燃烧层灼烧,可以 迅速彻底地灭菌,⑤正确;⑥无菌技术中,若处理对象为液体,可 以用高压蒸汽灭菌法灭菌,⑤错误。故选C。] 3.D[图A使用的工具是接种环,接种前需在明火上灼烧灭 菌,冷却后再进行划线操作,图B使用的接种工具是涂布 器,涂布器的处理方法是将沾有少量酒精的涂布器在酒精灯 上引燃,燃尽且冷却后即可涂布,A错误;操作者的双手应进 行酒精消毒处理,B错误;平板划线法不能对细菌计数, C错误;A、B所使用的培养基可以相同,且制作时要先调 pH再灭菌最后倒平板,D正确。] 4.C[每一次划线前后都要灼烧灭菌,所以共要灼烧6次, A错误;随着划线次数增多,细菌数目依次减少,在第3次或 第4次划线区域也可能形成单菌落,B错误;平板划线时一 定在火焰旁,培养皿盖只打开一道缝隙,以避免杂菌污染,C 正确;平板划线法不能用于微生物计数,D错误。]

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