第3章 基因工程 B卷 素养提升卷-【创新教程】2025-2026学年高中生物选择性必修3 生物技术与工程五维课堂单元双测卷（人教版）

参考 第三章基因工程(B卷) 1.C[由于基因的选择性表达，在人的胰岛A细胞中没 有胰岛素基因转录的mRNA,A错误；表达载体的复 制启动于复制原（起），点，胰岛素基因的表达启动于启 动子，B错误：标记基因位于运载体上，利用标记基因 筛选出来的受体细胞可能只含有运载体而不含有目 的基因，C正确：胰岛素基因的表达启动于启动子，终 止于终止子，而密码子在翻译过程中起作 用，D错误。 2.C[供体是指提供目的基因的生物：限制酶能切割 DNA分子，是基因的剪刀；DNA连接酶能将DNA片 段连接起来，是基因的针线；运载体包括质粒、噬菌体 或动植物病毒；基因工程的受体可以是动物细胞、植 物细胞或微生物细胞，但常以大肠杆菌等微生物细胞 作为受体。故选C。] 3.C[DNA连接酶能连接双链DNA片段的黏性末端 或平末端，故A错误：原核生物含有的限制酶是对外 源DNA进行切割，并不是只能切割目的基因，故B错 误：基因工程常用的载体包括质粒，动植物病毒，噬菌 体的衍生物等，故C正确：载体应该有一至多个限制 酶的切点，以便与外源基因连接，故D错误。] 4.A[基因工程又叫DNA重组技术，是指按照人们的 意愿，进行严格的设计，并通过体外DNA重组和转基 因等技术，赋予生物以新的遗传特性，从而创造出更 符合人们需要的新的生物类型和生物产品。由此可 见，DNA重组技术至少需要三种工具：限制性内切核 酸酶（限制酶）一分子“剪刀”，DNA连接酶一分子“针 线”，质粒、动植物病毒或噬菌体一运载体，故选A。] 5.B[DNA连接酶连接的是两个DNA片段，故A错 误；限制酶只能切割DNA分子，烟草花叶病毒的核酸 是RNA,不能切割，故B正确：E·coli DNA连接酶只 能连接黏性末端，不能连接平末端，故C错误；限制酶 主要从原核生物中分离纯化而来，但是不会剪切自身 的DNA,故D错误。] 6.B「使用限制性内切核酸酶是为了切割目的基因和 载体，不需要解旋酶解开DNA双螺旋，A错误；限制 性内切核酸酶1和3切出的黏性末端相同，都是 GATC,B正确；限制性内切核酸酶1、2识别的序列 都由4个脱氧核苷酸组成，限制酶3、4识别的序列都 由6个脱氧核苷酸组成，C错误：限制性内切核酸酶1 和2切割形成的DNA片段的黏性末端不同，前者是 GATC一，后者是一CATG,不能通过T4DNA连接酶 拼接，D错误。] 5 答案 7.B[cDNA文库只包含该物种部分基因，因此同一物 种的cDNA文库不只1种，A错误：真核生物的基因 组文库中的基因含有内含子、启动子、终止子等，而真 核生物的CDNA文库的基因中不含有这些，因此某真 核生物的cDNA文库中的某基因一定比基因组文库 中的该基因短，B正确：可以利用反转录法获取CDNA 文库，但不能获得基因组文库，C错误；cDNA文库的 基因都可实现物种间的基因交流，基因组文库的部分 基因也可实现物种间的基因交流，D错误。] 8.D[水稻属于单子叶植物，一般利用基因枪法将目的 基因导入受体细胞，A错误：由于密码子的简并性，用 氨基酸序列推测合成的目的基因与原基因的编码区 中的外显子不一定相同，B错误：探针是用放射性同位 素（或荧光分子）标记的含有目的基因单链DNA片 段，可以检查饮用水中是否含有病毒，而不能检查重 金属，C错误；作为运载体要有多种限制酶的切点，但 对一种限制酶而言，最好只有一个切点，D正确。] 9.A[通过观察害虫吃棉叶是否死亡，属于个体水平上 的鉴定，A符合题意；检测目的基因片段与DNA探 针能否形成杂交带，采用的是DNA分子杂交技术，属 于分子水平上的检测，B不符合题意：检测目的基因 转录形成的mRNA与DNA探针能否形成杂交带，采 用的是分子杂交技术，属于分子水平上的检测，C不 符合题意：检测目的基因表达产物蛋白质能否与特定 抗体形成杂交带，采用的是抗原一抗体杂交技术，属 于分子水平上的检测，D不符合题意。] 10.A[从个体水平上鉴定转基因大豆是否培育成功 时，可通过喷洒草甘膦后观察转基因大豆的存活情 况来检测，A正确：也可以用大豆的体细胞作为基因 工程的受体细胞，再采用植物组织培养技术将受体 细胞培育成转基因植株，B错误；在转基因操作过程 中往往用同一种限制性内切核酸酶，但也可以用不 同的限制酶切割，C错误；只有EPSPS合成酶基因进 入大豆细胞并在大豆细胞中成功表达，大豆才会表 现出抗草甘膦性状，D错误。] 11.B[科学家研究清楚了蓝色素基因序列，所以可以 用化学方法合成蓝色素基因，A项正确：质粒与蓝色 素基因的连接用的是DNA连接酶，B项错误；重组 质粒首先进入农杆菌的Ti质粒的T一DNA分子中， 再利用农杆菌侵染玫瑰细胞，将重组质粒导入玫瑰 细胞的染色体上，C项正确：含有目的基因的受体细 胞可通过植物组织培养技术获得转基因植株，D项 正确。」] 生物·选扌 12.C[限制酶2和3识别的序列分别是CCGCGG和 GGATCC,均为6个碱基对，所以包含6个脱氧核苷 酸，A正确：限制酶1和3剪出的粘性末端相同，均为 GATC,B正确：限制酶只能识别特定的DNA序列， 因此三种限制酶均不能识别和切割RNA中核糖核 苷酸序列，C错误：酶具有专一性，不同的限制酶有 不同的识别序列和切割位，点，D正确。 13.AC[根据题千信息“由一个向导RNA(sgRNA)分 子引导Cas9蛋白到一个特定的基因位，点进行切 割”，再结合图解可知能够行使特异性识别DNA序 列并切割特定位点功能的分子是向导RNA (sgRNA)分子和Cas9蛋白，其类似于基因工程中限 制酶，作用的化学键是磷酸二酯键，A错误：非基因 编辑对象也可能含有与gRNA配对的碱基序列，造 成SgRNA选错对象与之错误结合而脱靶，SgRNA 的序列长短影响成功率，序列越短，脱靶率越高，B正 确：染色体变异会引起基因的数目或排列顺序改变， 利用此技术对目标基因部分DNA片段进行切除属 于基因内部碱基对的改变，不改变基因的数目和排 列顺序，故不属于染色体变异，C错误：SgRNA的双 链区域的碱基互补配对原则遵循的是DNA与RNA 之间的配对关系，而目标基因的双链区域遵循的是 DNA之间的配对方式，故两者不同，D正确。] 14.BC[据图分析可知，在目的基因的两端、启动子和 终止子之间都有限制性内切核酸酶EcoR I的切割 位，点，因此可以用限制性内切核酸酶EcoR I切割目 的基因和运载体，之后再用DNA连接酶连接形成基 因表达载体，A正确：启动子是RNA聚合酶特异性 识别和结合的DNA序列，B错误；图2中显示标记 基因是潮霉素抗性基因，应该在培养基中添加潮霉 素，筛选被转化的菊花细胞，C错误；用抗原一抗体 杂交法检测基因C在菊花细胞中表达的产 物，D正确。] 15.BCD[从微生物细胞中获取的基因由于存在非编 码序列，对基因的表达会造成影响，所以一般需要将 目的基因与载体的启动子等调控组件结合在一起 后，再导入玉米细胞，A正确：基因表达载体构建的 过程需要DNA连接酶、限制酶，一般不需要DNA聚 合酶，B错误；③④分别表示脱分化、再分化过程，这 两个过程中都需要生长素和细胞分裂素，但二者的 含量、比例不相同，C错误：用抗原一抗体杂交的方 法检测没有出现杂交带，只能说明目的基因没有表 达，但不能说明目的基因导入不成功，D错误。] 泽性必修3 16.CD[马拉硫磷小菜蛾正常细胞不会发生逆转录过 程，因此抗农药马拉硫磷小莱蛾体内没有逆转录酶， A错误：过程②表示利用PCR技术对目的基因进行 扩增，该过程中的解旋是通过高温解链实现的，不需 要解旋酶，B错误：过程③将目的基因导入微生物细 胞用Ca2+处理大肠杆菌，使其处于感受态，C正确； 过程④得到的工程菌是指能使CarE基因高效表达 的菌类细胞株系，从而生产出羧酸酯酶(CarE)制剂 用于降解农药，D正确。] 17.解析：(1)以RNA为模板合成cDNA的过程为逆转 录过程，该过程需要逆转录酶的参与；退火温度过高 会破坏引物与模板的碱基配对。因为G一C之间含 有三个氢键，故长度相同但G一C含量高的引物需要 设定更高的退火温度。 (2)探针是指被放射性同位素标记或荧光标记的一 段单链核酸，因此制作该探针的依据是新型冠状病 毒的核苷酸序列；利用该探针对新型冠状病毒进行 检测的原理是分子杂交中的碱基互补配对原则。 (3)上述方案制备的是单克隆抗体，采用的技术手段 有动物细胞培养、动物细胞融合：其中步骤②中经多 次筛选检测选择出杂交瘤细胞，故遭淘汰的细胞有B 细胞、骨髓瘤细胞及B一B型、瘤一瘤型融合细胞：步 骤③中为防止细胞代谢产物积累对细胞自身造成危 害，应定期更换培养液。获得杂交瘤细胞后，常用的 培养方法除了体外培养，还有注射到小鼠腹腔内增 殖进行体内培养。 答案：(1)逆转录引物模板GC(2)碱基互 补配对(3)动物细胞培养、动物细胞融合B细胞、 骨髓瘤细胞及B一B型、瘤一瘤型融合细胞防止细 胞代谢产物积累对细胞自身造成危害注射到小鼠 腹腔内增殖 18.解析：(1)为了防止目的基因、质粒的任意连接和自 身环化，应该用不同的限制酶分别切割目的基因和 质粒，据图分析可知：应该采用PstI、SMaI酶切处 理目的基因和载体。 (2)对精子进行获能处理的方法有培养法和化学诱 导法，②过程采集的奶牛精子常用化学诱导法，即用 一定浓度的肝素（或钙离子载体A23187溶液）诱导 精子获能。与成熟的卵子在专用受精溶液中完成受 精，受精过程中，在精子触及卵细胞膜的瞬间会产生 透明带反应，这是防止多精入卵的第一道屏障。 参考 (3)进行性别鉴定时，宜取囊胚期的滋养层细胞进 行，一般采用SRY一PCR方法，选择出现阴性反应的 雌性胚胎进行移植：胚胎移植时，为了使胚胎移植能 成功，需使受体与供体的生理状况保持相同，需要对 代孕奶牛C进行同期发情。 答案：(1)PstI、SmaI(2)化学诱导卵细胞膜 (3)阴性同期发情处理 19.解析：(1)同种限制酶切割质粒和含目的基因的 DNA,可获得相同的黏性末端，以构建基因表达载 体。重组质粒含完整的卡那霉素抗性基因，故应使 用含卡那霉素的选择培养基筛选含重组质粒的农 杆菌。 (2)实验过程中将棉花细胞与农杆菌混合后共同培 养，其目的是利用含重组质粒的农杆菌将T一DNA 导入棉花细胞中。除去农杆菌后在含卡那霉素的培 养基上培养，其目的是筛选出含有目的基因的棉花 细胞。 (3)培养基中生长素用量与细胞分裂素用量比值高 时，利于根的分化，抑制芽的形成，反之，有利于芽的 分化，抑制根的形成。因芽顶端可合成生长素，故接 种在无激素的培养基上的芽也能长根」 (4)可用投放棉铃虫的方法检测抗虫棉的抗虫效果。 转基因抗虫棉的种植可减少农药使用量，从而减轻 环境污染。 答案：(1)限制性内切核酸选择(2)T一DNA 筛选获得T一DNA片段的植物细胞(3)细胞分裂 素浓度芽顶端合成的生长素向基部运输，促进根 的分化(4)投放棉铃虫农药 20.解析：(1)PCR技术是利用DNA双链复制的原理进 行目的基因扩增的生物技术。其中引物的选择至关 重要，由于复制子链的延伸方向是5'3'，结合图示 4种引物的配对和母链的方向分析，选择引物A、B 使子链向左延仲，选择引物C、D则使子链向右延仲， 要使目标DNA片段正好被复制完整，选择引物B和 C是最恰当的。(2)用两种酶切出目的基因和质粒， 可以防止目的基因和质粒自身环化和反向连接。 (3)将重组质粒导入植物细胞中常用的方法是农杆 菌转化法，我国科学家将重组质粒导入棉花受体细 胞所用的方法是花粉管通道法。(4)重组细胞经过 G、H过程成功地培育出了转基因抗病棉花植株，此 过程涉及的细胞工程技术是植物组织培养。植物组 织培养技术广泛应用于植物体细胞杂交育种、基因 答案 工程育种、单倍体育种等育种过程中。(5)花粉中含 有精子，几乎不含细胞质，而受精卵中的细胞质几乎 全部来自卵细胞，所以科学家设法将目的基因整合 到受体细胞的叶绿体基因组中，就不会通过花粉转 移到自然界的其他植物中。 答案：(1)DNA双链复制B、C(2)目的基因和质 粒自身环化(3)农杆菌转化法花粉管通道法 (4)基因工程育种、单倍体育种(5)通过花粉向其 他植物扩散 第四章生物技术的安全性与 伦理问题(A卷) 1,C[转基因作物可通过杂交将自身的基因传播到野 生植物中：基因污染可能会对生物的多样性构成威 胁；虽然转基因生物存在危害，但我们应理性地看待 转基因生物的研究，而不是全面禁止：自然杂交是同 种生物个体之间的基因交流，而转基因是引入外源基 因实现不同物种之间基因的交流。] 2.B「基因污染是可以通过自然界中的生物扩散的，譬 如，转基因作物可通过花粉散落到它的近亲作物上， 从而污染生物基因库：杂草、害虫从它的近亲获得抗 性基因，可能破坏生态系统的稳定性：转基因生物还 有可能成为“入侵的外来物种”，威胁生态系统中其他 生物的生存。] 3.D[转基因技术是一把双刃剑，既有有利的一面，又 存在安全性问题，各种生物之间不一定都存在生殖隔 离，如1996年一些科学家发现转入抗除草剂基因的 油菜可以与某些杂草杂交，并结出种子。] 4.C「转基因生物引发的安全性问题包括食物安全、生 物安全、环境安全，A正确：转基因生物引起安全性问 题的原因之一是外源基因插入宿主基因组的部位往 往是随机的，B正确：转基因生物引发的安全性问题是 有办法解决或弥补的，C错误：转基因生物有可能造 成安全性问题，也能造福人类，因此不能一概而论， D正确。故选C。] 5.D[转基因植物有可能像“入侵的外来物种”，这一观 点支持转基因生物引发生物安全。 6.D[只在体内外培养骨髓瘤细胞，是无法制备出单克 隆抗体的，必须与免疫后的B淋巴细胞融合。] 7.C[利用核移植技术获得所需器官来救治病人符合 伦理道德：保护个人遗传信息隐私权符合伦理道德： 用生物武器去消灭敌人不符合伦理道德；通过基因检 测避免有严重基因缺陷的胎儿出生符合伦理道德。]生 新高考 第 物 同步单元双测卷 B卷 一、选择题（本题共12小题，每小题2分，共24 分。每小题只有一个选项符合题目要求。) 1.下列有关人胰岛素基因表达载体的叙述，正确 的是 A.表达载体中的胰岛素基因可通过胰岛A细 胞的mRNA反转录获得 B.表达载体的复制和胰岛素基因的表达均启动 于复制原点 C.借助标记基因筛选出的受体细胞不一定含有 目的基因 如 D.起始密码子和终止密码子均在胰岛素基因的 转录中起作用 2.下列关于基因工程中有关操作的名词及对应的 内容，正确的组合是 供体 剪刀 针线 载体 受体 提供目 DNA连 大肠杆 质粒 限制酶 的基因 接酶 菌等 的生物 提供目 DNA连 大肠杆 B 的基因 限制酶 质粒 接酶 菌等 的生物 提供目 DNA连 大肠杆 的基因 限制酶 质粒 接酶 菌等 的生物 提供目 大肠杆 DNA连 D 限制酶 的基因 质粒 菌等 接酶 的生物 茵 3.下列关于基因工程的基本工具的说法中，正确 的是 ( A.DNA连接酶只能连接双链DNA片段互补 的黏性末端，连接效率不同 B.限制酶可从原核细胞中提取，只能用于切割 目的基因 C质粒是基因工程中最常用的载体，某些病毒 也可以作为载体 D.质粒要具有标记基因，有且只有一个限制酶 切点，以便得到与外源基因相同的黏性末端 三章 基因工程 ·素养提升卷 4.在基因工程中，常用的“剪刀”“针线”和“载体” 分别指 ( A.限制酶、DNA连接酶、质粒 B.噬菌体、质粒、DNA连接酶 C.限制酶、RNA连接酶、质粒 D.大肠杆菌病毒、质粒、DNA连接酶 5.限制酶和DNA连接酶是基因工程的工具酶，以 下说法正确的是 () A.DNA连接酶能将单个核苷酸加到已有的核 苷酸片段上形成磷酸二酯键 B.限制酶只能切割双链DNA片段，不能切割烟 草花叶病毒的核酸 C.E·coliDNA连接酶既能连接黏性末端，也能 连接平末端 D.限制酶主要从原核生物中分离纯化而来，所 以也能剪切自身的DNA 6.下面是4种限制酶所识别的DNA分子序列和 剪切位点（￥表示剪切点、切出的断面为黏 性末端)： 限制酶1：一GATC 限制酶2：一CATG 限制酶3：一GGATCC 限制酶4：一CCGC GG 请指出下列哪项表达正确 A.在使用限制酶的同时还需要解旋酶 B.限制酶1和3剪出的黏性末端相同 C.限制酶1、2、4识别的序列都由4个脱氧核苷 酸组成 D.限制酶1和2切出的DNA片段可通过 T4DNA连接酶拼接 7.下列关于cDNA文库和基因组文库的说法中， 正确的是 () A.同一物种的cDNA文库只有1种 B.某真核生物的cDNA文库中的某基因一定比 基因组文库中的该基因短 C.可以利用反转录法获取cDNA文库和基因组 文库 D.只有cDNA文库的基因可实现物种间的基因 交流 8.下列关于基因工程及其应用的叙述正确的是 () A.若要生产转基因抗病水稻，可先将目的基因 导人大肠杆菌中，再转人水稻细胞 B.用氨基酸序列推侧合成的目的基因与原基因 的编码区中的外显子一致 C.用DNA探针能检测饮用水中重金属物质的 含量 D.作为运载体要有多种限制酶的切点，但对一 种限制酶而言，最好只有一个切点 9.用于判断目的基因是否转移成功的方法中，不 属于分子检测的是 A.通过害虫吃棉叶看其是否死亡 B.转基因生物基因组DNA与DNA探针能否 形成杂交带 C.转基因生物中提取的mRNA与DNA探针能 否形成杂交带 D.转基因生物中提取的蛋白质能否与抗体形成 杂交带 10.草甘膦是一种可以杀灭多种植物（包括农作 物)的除草剂。草甘膦杀死植物的原理在于能 够破坏植物叶绿体或质体中的EPSPS合成 酶。通过转基因的方法，让农作物产生更多的 EPSPS酶，就能抵抗草甘膦，从而让农作物不 被草甘膦杀死。下列有关抗草甘膦转基因大 豆的培育分析正确的是 () A.可通过喷洒草甘膦来检验转基因大豆是否 培育成功 B.只能以大豆受精卵细胞作为基因工程的受 体细胞 C.在转基因操作过程中一定要用同一种限制 性内切核酸酶 D.只要EPSPS合成酶基因进人大豆细胞，大 豆就会表现出抗草甘膦性状 11.天然的玫瑰没有蓝色花，科学家研究清楚了三 色紫罗兰的蓝色素基因序列，并利用农杆菌成 功培育了转基因蓝玫瑰，下列叙述错误的是 A.可用化学方法合成蓝色素基因 B.质粒与蓝色素基因的连接需用DNA聚合酶 C.重组质粒首先进入农杆菌，然后再进入玫瑰 细胞 D.转基因蓝玫瑰的培育过程可运用植物组织 培养技术 12.下图是3种限制性内切核酸酶对DNA分子的 识别序列和剪切位点图（箭头表示切点，切出 断面为黏性末端)。下列叙述错误的是() 限制酶1：--GATC- 限制酶2：-CCGCY GG 限制酶3：-GGATCC A.限制酶2和3识别的序列都包含6个核 苷酸 B.限制酶1和3切割得到的黏性末端相同 C.能够识别和切割RNA分子内一小段核苷 酸序列的酶只有限制酶2 D.不同的限制酶有不同的识别序列和切割位 点，体现了酶的专一性 二、选择题（本题共4小题，每小题4分，共16分。 每小题有一个或多个选项符合题目要求，全选对 得4分，选对但不全得2分，有选错的得0分。) 13.CRISPR/Cas9系统基因编辑是一种对靶向基 因进行特定DNA修饰的技术，其原理是由一 个向导RNA(sgRNA)分子引导Cas9蛋白到 一个特定的基因位点进行切割。受此机制启 发，科学家们通过设计sgRNA中碱基的识别 序列，即可人为选择DNA上的任一目标位点 进行切割（如图所示）。CRISPR/Cas9系统基 因编辑技术有时存在编辑对象出错而造成脱 靶。下列相关叙述错误的是 () α链 Cas9蛋白 目标DNA mmm 识别序列 向导RNA 血正一目标DNA A.Cas9蛋白通过破坏目标DNA的氢键实现 对DNA的切割，与解旋酶的作用类似 B.若脱靶率与sgRNA序列的长度有关，则 sgRNA的序列越短脱靶率越高 C.利用此技术对目标基因部分DNA片段进 行切除可能导致染色体变异 D.sgRNA的双链区域的碱基互补配对原则与 目标基因的双链区域不同 14.为了增加菊花花色类型，研究者从其他植物中 克隆出花色基因C(图1)，拟将其与质粒（图2） 重组，再借助农杆菌导入菊花中。下列操作与 实验目的不相符的是 十 EcoR I、 启动子 BamH I EcoR I EcoR I 终止子 启动子 C基因 质粒 图1 潮霉素抗性基因 终止子 图2 A.用限制酶EcoRI和DNA连接酶构建重组 质粒 B.启动子是DNA聚合酶特异性识别和结合的 RNA序列 C.在培养基中添加青霉素，筛选被转化的菊花 细胞 D.用抗原一抗体杂交法检测基因C在菊花细 胞中表达的产物 15.研究者从某微生物提取出抗旱基因，将其与载体 DNA重组，再借助农杆菌导人玉米中增加玉米的 抗旱性，如图表示该转基因玉米的培育过程，其中 字母a、b表示具体的结构，数字①~④表示具体 的过程，下列叙述错误的是 供体① 细胞 基因表 达载体 载体DNA 玉米→玉米细胞③b①转基因 玉米 题号 1 2 4 5 6 答案 三、非选择题（本题共4小题，共60分。） 17.(18分)通过咽拭子取样进行RT一PCR技术 检测是目前临床上诊断新型冠状病毒感染疑 似患者的常用方法，用于核酸检测的RT一 PCR试剂盒的部分工作原理简图如下。回答 下列问题： 含病毒样本裂解、病毒RNA RT-PCR /N000X (痰、鼻咽拭子)提纯 (1)RT-PCR是指以病毒的RNA为模板通过 过程合成cDNA,并对cDNA进行PCR 扩增的过程。PCR扩增时，退火温度的设定是 成败的关键。退火温度过高会破坏与 的碱基配对。退火温度的设定与引物长 度、碱基组成有关，长度相同但 碱基对含 量高的引物需要设定更高的退火温度。 A.从微生物细胞中获取的基因需要加工后才 能作为目的基因导人玉米细胞中 B.基因表达载体构建的过程需要DNA聚合 酶、DNA连接酶、限制酶 C.图中b是愈伤组织，③与④过程中所需植物 激素的含量、比例相同 D.用抗原一抗体杂交的方法检测没有杂交带 出现，说明目的基因导入不成功 16.用基因工程技术生产羧酸酯酶(CarE)制剂的 流程如图所示，下列叙述正确的是 抗农 mRNA cDNA②CarE基因 ① 表达载体 药马 拉硫 工程菌 7④ 大肠杆菌-③ 重组表达载体 磷小 菜蛾 CarE制剂 降解马拉硫磷残留 A.过程①所需的逆转录酶可取自于抗农药马 拉硫磷小菜蛾的任一细胞 B.过程②利用PCR技术扩增目的基因需使用 解旋酶和引物 C.过程③须用Ca+处理大肠杆菌，使其处于 感受态 D.过程④得到的工程菌是指能使CarE基因高 效表达的菌类细胞株系 9 10 11 12 13 14 15 16 (2)利用RT-PCR试剂盒对新型冠状病毒进行 检测时，除借助上述RT-PCR技术外，还需要 有特异性探针，利用该探针对新型冠状病毒进 行检测的原理是 (3)除核酸检测外，研究人员还研发了基于病 毒蛋白的检测技术，该项技术的关键是生产出 能与新冠病毒结合的特异性抗体。生产该种 抗体的大致方案如下： ①向小鼠体内注射新冠病毒的抗原蛋白；②分 离免疫小鼠的B淋巴细胞，并与小鼠的骨髓瘤 细胞融合，多次筛选、检测，最终获得所需杂交 瘤细胞；③将获得的杂交瘤细胞在体外条件下 做大规模培养，获得大量的特异性抗体。 上述生产抗体的方案中使用的技术手段有 :其中步骤②中经多次 筛选、检测后遭淘汰的细胞有 ；步骤③大规模培养时要注意 定期更换培养液，其目的是 获得杂交瘤细 胞后，常用的培养方法除了体外培养，还有 18.(12分)I型糖尿病又名胰岛素依赖型糖尿病 (IDDM),I型糖尿病病人自身不能产生胰岛 素，所以病人从发病开始就需使用胰岛素治 疗，并且终身使用，因此临床上对胰岛素需求 量很大。如图是利用奶牛乳腺生物反应器制 备胰岛素的流程图，据图回答下列问题： 奶牛A 奶牛B Pa ISma l Aho I Ps1 Sma ① 胰岛素 卵子 精子 基因 HindΠ 3③ 重组 受精卵 ④ 质粒 早期胚胎⑤代孕奶牛日 6 转基因奶牛D (1)构建重组质粒时，为避免人胰岛素基因末 端发生任意连接和载体的自身环化应选用 酶切处理目的基因和载体。 (2)②过程采集的奶牛精子常用 法使 其获能，与成熟的卵子在专用受精溶液中完成 受精，受精过程中，在精子触及 的瞬 间会产生透明带反应，这是防止多精子人卵受 精的第一道屏障。 (3)对移植前的胚胎需进行性别鉴定，一般采 用SRY一PCR方法，选择出现 (填 “阳性”或“阴性”)反应的胚胎进行移植。为了 使胚胎移植能成功，需要对代孕奶牛C进行 处理，使之与供体的生理状况保 持相同。 19.(16分)将苏云金杆菌Bt蛋白的基因导人棉花 细胞中，可获得抗棉铃虫的转基因棉，其过程 如下图所示（注：农杆菌中Ti质粒上只有T一 DNA片段能转移到植物细胞中)。 含B1基因 农杆菌含重组T质粒 的DNA 的农杆菌 2⊙ 、③ T质粒重组T质粒棉花细胞愈伤组织分化形成的芽试管苗 质粒中“Bt”代表“Bt基因”，“KmR”代表“卡那 霉素抗性基因” (1)过程①需用同种 酶对含 Bt基因的DNA和Ti质粒进行酶切。为将过 程②获得的含重组质粒的农杆菌筛选出来，应 使用 培养基。 24 (2)过程③中将棉花细胞与农杆菌混合后共同 培养，旨在让 进人棉花细胞：除尽农 杆菌后，还须转接到含卡那霉素的培养基上继 续培养，目的是 (3)若过程④仅获得大量的根，则应在培养基 中增加 以获得芽；部分接种 在无激素培养基上的芽也能长根，原因是 (4)检验转基因棉的抗虫性状，常用方法是 。 种植转基因抗虫棉能减少 的使用，以减轻环境污染。 20.(14分)下图为某种转基因抗病棉花培育过程 图，请据图回答下列问题： 上日标片段 3,靶DNA片段 引物A 引物B 引物C 引物D 目标片段 重组质粒 拉柄植闭“®伤的到-重组细型 筛选 受体细胞 (1)PCR技术利用的基本原理是 些 利用该技术扩增目标DNA片段（子链的延伸 方向从5'→3')，应选择图中的引物 (填字母)与模板DNA结合。 (2)在构建基因表达载体时，常用两种不同的 限制酶切割目的基因和质粒，获得不同的黏性 末端，其主要目的是防止 和反向连接。 烯 (3)将重组质粒导人植物细胞中常用的方法是 。我国科学家将重组质粒导人 棉花受体细胞所用的方法是 (4)重组细胞经过G、H过程成功地培育出了 转基因抗病棉花植株，此过程涉及植物组织培 养技术，该技术广泛应用于 、植物体细胞杂交育种等育种过 程中。 (5)研究表明，转基因植物可以通过花粉将外 源基因扩散到其他植物，从而对生态环境造成 潜在的危害。因此，科学家设法将目的基因整 合到受体细胞的叶绿体基因组中，这样做的目 的是防止目的基因