内容正文:
第3章 基因的本质
第3节 DNA 的复制
1
01
问题·探讨
沃森和克里克在发表DNA双螺旋结构的那篇著名短文的结尾处写道:“值得注意的是,我们提出的这种碱基特异性配对方式,暗示着遗传物质进行复制的一种可能的机制。”
?碱基互补配对原则暗示DNA的复制机制可能是怎样的 ?
碱基互补配对原则是指DNA两条链的碱基之间有准确的一一对应关系,暗示DNA的复制可能需要先解开DNA双螺旋的两条链,然后通过碱基互补配对合成互补链。
02
对DNA复制的推测
半保留复制
DNA复制时,DNA双螺旋解开,互补的碱基之间的氢键断裂,解开的两条单链分别作为复制的模板,游离的脱氧核苷酸根据碱基互补配对原则,通过形成氢键,结合到作为模板的单链上。
新合成的每个DNA分子中,都保留了原来DNA分子中的一条链。
半保留复制
02
对DNA复制的推测
全保留复制:
DNA复制以DNA双链为模板,子代DNA的双链都是新合成的。
全保留复制
02
对DNA复制的推测
弥散复制:
亲代DNA分子将断裂成短片段,以这些亲本短片段为模板合成同样长短的新的DNA片段,再将这些新旧片段混合连接,形成完整的全长DNA分子。
02
对DNA复制的推测
?这三种复制方式最关键的区别是什么 ?
子代DNA的两条链组成情况不同
半保留复制
全保留复制
弥散复制
提出假说
03
DNA半保留复制的实验证据
设计实验验证假设:半保留复制/全保留复制/弥散复制
问题2: 如果用同位素进行标记,可标记什么元素?
1、如何设计实验?
同位素标记法
可标记C、H、O、N、P等元素
15N 14N
(N元素稳定、易于标记、操作简单)
问题1: 如何区分亲代DNA分子的母链和新合成DNA的子链?
03
DNA半保留复制的实验证据
设计实验验证假设:半保留复制/全保留复制/弥散复制
1、如何设计实验?
问题3: 如何检测带有不同标记的DNA?
14N和15N是N的两种稳定的同位素,这两种同位素的相对原子质量不同,含15N的DNA比含14N的DNA密度_____,意味着更重。
大
03
DNA半保留复制的实验证据
等密度
密度梯度离心法
CsCl溶液超速离心时,会在离心管中形成一个连续的密度梯度,溶液密度在底部最高,顶部最低。如果DNA分子溶解其中,DNA就会悬浮在与其_______的部位。然后用紫外光照射后,管中就会显示出不同密度的DNA条带。
03
DNA半保留复制的实验证据
设计实验验证假设:半保留复制/全保留复制/弥散复制
1、如何设计实验?
问题4: 如何让亲代的母链和新合成的子链带上不同的标记?
在含有15NH4Cl的培养液中繁殖若干代
15N/15N-DNA
03
DNA半保留复制的实验证据
科学家先用含15NH4Cl的培养液培养大肠杆菌,让大肠杆菌繁殖若干代,这时大肠杆菌的DNA几乎都是_____标记的。
再将大肠杆菌转移到含14N的普通培养液中,获得第一代和第二代大肠杆菌。然后,在不同时刻收集大肠杆菌并提取DNA,再进行密度梯度离心。
15N
按照DNA复制的三种假说,预测离心后试管中DNA的位置。
03
如果DNA复制
是半保留复制
15N/14N-DNA
14N
第一代会出
现的结果是
第二代会出
现的结果是
14N
14N
15N/15N-DNA
14N/14N-DNA
15N/14N-DNA
15N/14N-DNA
中带
中带和轻带
03
15N/15N-DNA
14N
14N
14N
15N/15N-DNA
14N/14N-DNA
如果DNA复制
是全保留复制
第一代会出
现的结果是
第二代会出
现的结果是
重带+轻带
重带+轻带
14N/14N-DNA
14N/14N-DNA
14N/14N-DNA
15N/15N-DNA
03
如果DNA复制
是弥散复制
第一代会出
现的结果是
第二代会出
现的结果是
(15N+14N)
2
(15N+14N)
2
+
(15N+3×14N)
4
+
(15N+3×14N)
4
中带
轻中带之间
03
演绎推理
DNA复制方式 半保留复制 全保留复制 弥散复制
第一代结果
第二代结果
中带
中带+轻带
重带+轻带
重带+轻带
中带
轻中带之间
03
DNA半保留复制的实验证据
实验结论:
大肠杆菌DNA的复制方式是半保留复制
重带
中带
1/2轻带1/2中带
P
F1
F2
实验结果:
演绎推理结果:
符合半保留复制的推理结果
03
DNA半保留复制的实验证据
发现问题
提出假说
演绎推理
实验验证
得出结论
假说演绎法
DNA的是如何复制的?
推测可能的复制方式:
半保留复制
全保留复制
分散复制
推理不同复制方式下得到子代DNA的可能情况,预测实验结果
证明DNA半保留复制的实验(密度梯度离心)
DNA复制是半保留复制
04
DNA复制的过程
①能量:
②酶 :
③模板:
④原料:
亲代DNA的两条链
4种游离的脱氧核苷酸
解旋酶,DNA聚合酶等
ATP
DNA复制的条件:
DNA复制的场所:
DNA复制的概念:
DNA复制的时间:
以亲代DNA为模板合成子代DNA的过程
在真核生物中,这一过程是在细胞分裂前的间期,随着染色体的复制而完成的。
真核细胞:主要在细胞核中,
少部分发生在线粒体和叶绿体中;
原核细胞:主要在拟核中,在质粒处也有DNA的复制。
04
DNA复制的过程
解旋酶将DNA双螺旋的双链解开
1.解旋
2.合成子链
以母链为模板,根据碱基互补配对合成子链
3.形成DNA
子母链盘绕成双螺旋结构
模板链方向:3'→5'
合成子链方向:5'→3'
DNA聚合酶不能催化DNA新链从头合成,只能催化dNTP加入核苷酸链的3'-OH末端。
因而复制之初需要一段RNA(DNA)引物的3'一OH端为起点,合成5’→3’方向的新链。
04
DNA复制的过程
DNA复制的特点:
DNA复制的结果:
边解旋边复制
半保留复制
双向复制
多起点复制
形成了两个完全相同的DNA分子
DNA准确复制的原因:
①DNA具有独特的双螺旋结构,能为复制提供精确的模板。
②碱基互补配对,保证了复制能够准确地进行。
A—T G—C
解旋
04
DNA复制的过程
复制
着丝粒分裂
DNA通过复制,将遗传信息从亲代细胞传递给子代细胞。从而保持了遗传信息的连续性和稳定性。
DNA复制的意义:
05
DNA复制的有关计算
一个DNA分子复制n次,则有:
(1)DNA分子数(双链)
①子代DNA分子数= 个,新合成的DNA分子数为: 个
②含有亲代DNA链的子代DNA分子数= 个。
③不含亲代DNA链的子代DNA分子数= 个。
2
2n
2n-2
(2)脱氧核苷酸链数(单链)
①子代DNA分子中脱氧核苷酸链数= 条。
②子代中含有亲代脱氧核苷酸链数= 条。
③新合成的脱氧核苷酸链数= _________条。
2n+1
2
2n+1-2
2n-1
(3)DNA复制中消耗的脱氧核苷酸数
若亲代DNA分子含有某种脱氧核苷酸m个,则:
①经过n次复制需要消耗该种脱氧核苷酸数为 个。
②第n次复制需要该种脱氧核苷酸数为 个。
m·(2n-1)
m· 2n-1
将DNA双链都被15N标记的大肠杆菌放在含有14N的培养基中培养,使其分裂3次,下列叙述正确的是( )
A.所有的大肠杆菌都含有15N
B.含有15N的大肠杆菌占全部大肠杆菌的比例为1/2
C.含有15N的大肠杆菌占全部大肠杆菌的比例为1/4
D.含有15N的DNA分子占全部DNA分子的比例为1/8
C
06
小结
★DNA复制方式的探究历程:
★过程:
亲代DNA提供
原则:
条件:
游离的脱氧核苷酸
碱基互补配对原则
模板:
原料:
能量:
酶:
★特点:
★意义:
保持世代遗传信息的连续性、稳定性。
解旋
合成子链
形成DNA
ATP
解旋酶、DNA聚合酶等
边解旋边复制
半保留复制
双向复制、多起点复制
假说--演绎法
THANK YOU
本节课就上到这里,谢谢大家!
$