2026届高三二轮复习生物：基因工程微专题2——引物的选择导学案

生物选择性必修3一轮复习学案 __________________________________________________________________________________________________________________________ 第3章 基因工程微专题2——引物的选择 班级___________ 姓名___________ 方法点拨 1. 转录方向的判断：（1）根据启动子和终止子确定转录方向：5’→3’； （2）根据模板链的方向确定，模板链3’→5’，与转录方向相反； 2. 引物延伸方向：5’→3’（与互补链方向相反），两种引物方向指向目的基因。 3. 引物选择范围： （1）若只PCR扩增为了目的基因，引物在目的基因两侧，不包含其他原件； （2）若PCR扩增为了判断目的DNA片段（将目的基因或启动子）是否准确插入载体，引物 要包含目的DNA片段以及两侧的部分序列。（排除反向连接或者内源基因的影响） 1．（2020·北京·高考真题）为了对重金属污染的土壤进行生物修复，研究者将从杨树中克隆的重金属转运蛋白（HMA3）基因与外源高效启动子连接，导入杨树基因组中（如图）。 为检测获得的转基因杨树苗中是否含有导入的HMA3基因，同时避免内源HMA3基因的干扰，在进行PCR扩增时，应选择的引物组合是（    ） A． ①+③ B．①+② C．③+② D．③+④ 2.（2025·湖南，节选）非洲猪瘟病毒是一种双链DNA病毒，可引起急性猪传染病。基因A编码该病毒的主要结构蛋白A，其在病毒侵入宿主细胞和诱导机体免疫应答过程中发挥重要作用。回答下列问题： (1)制备特定抗原 ①获取基因A，构建重组质粒（该质粒的部分结构如图所示）。为确定基因A已连接到质粒中且插入方向正确，应选用图中的一对引物 对待测质粒进行PCR扩增，预期扩增产物的片段大小为 bp。 3.（25-26高三上·湖南·阶段练习）陆地棉中 M基因编码的M蛋白具有良好的抗虫效果。科研小组利用基因工程技术培育出了高表达M蛋白的转基因棉花，图1表示 M 基因片段，图2表示农杆菌的Ti质粒及几种限制酶的酶切位点，其中 AmpR表示氨苄青霉素抗性基因，TetR为四环素抗性基因。请回答下列问题： (2)若不清楚目的基因M 的全部序列，则可利用PCR 技术对其进行体外扩增，M基因转录的模板链为b链，则扩增M基因时应选择的引物是 。M基因两侧没有限制酶切位点，为了与图2 质粒构建基因表达载体，需要在引物两侧添加的酶是 。 4．（2023·山东，节选）科研人员构建了可表达J-V5融合蛋白的重组质粒并进行了检测，该质粒的部分结构如图甲所示，其中V5编码序列表达标签短肽V5。 (2)构建重组质粒后，为了确定J基因连接到质粒中且插入方向正确，需进行PCR检测，若仅用一对引物，应选择图甲中的引物 。已知J基因转录的模板链位于b链，由此可知引物F1与图甲中J基因的 （填“a链”或“b链”）相应部分的序列相同。 5．（2024·吉林，节选）将天然Ti质粒改造成含有Vir基因的辅助质粒（辅助T-DNA转移）和不含有Vir基因、含有T-DNA的穿梭质粒，共同转入农杆菌，可提高转化效率。细菌和棉花对密码子偏好不同，为提高翻译效率，增强棉花抗病虫害能力，进行如下操作。回答下列问题。 注：F1-F3，R1-R3表示引物；T-DNA-LB表示左边界；T-DNA-RB表示右边界；Ori表示复制原点；KanR表示卡那霉素抗性基因；HygBR表示潮霉素B抗性基因。 (5)为检测棉花植株是否导入目的基因，提取棉花植株染色体DNA作模板，进行PCR，应选用的引物是 和 。 第 1 页 学科网（北京）股份有限公司 $