内容正文:
发酵工程及其应用
学习目标
1.说出发酵工程的概念及其基本环节;
2.举例说明发酵工程在各个领域的应用。
学习过程
【新课导入】
青霉素是世界上第一个应用于临床的抗生素,1943 年开始批量生产,但早期科学家只能从青霉菌中提取少量青霉素,它的价格贵如金。随着高产菌种的选育、发酵技术的发展等,青霉素步入了产业化生产的道路。如今,1 瓶规格 160 万单位的青霉素注射剂的价格只要 1 元左右。在工业上,青霉素究竟是怎样生产的呢?
【新知讲解】
内容一:发酵工程的基本环节
1.发酵工程一般包括菌种的选育,扩大培养,培养基的配制、灭菌,接种,发酵,产品的分离、提纯等方面。 是发酵工程的中心环节。
思考:发酵工程有哪些优点?
【学以致用】
例 1 :发酵工程在工业生产上得到广泛的应用,下图是发酵工程生产产品的流程简图。下列叙述错误的是( )
A .若生产人胰岛素的工程菌是通过①获得的,则①是基因工程
B .在生产实践中,培养基的配方需要经过反复试验才能确定
C .发酵工程的中心环节是④,需严格控制温度、pH 等条件
D .若⑥是微生物本身,可采用过滤、沉淀等方法将菌体分离
内容二:发酵工程的应用
啤酒是以大麦为主要原料经酵母菌发酵制成的,其发酵过程分为 和 两个阶段。酵母菌的繁殖、大部分糖的分解和代谢物的生成都在 阶段完成。主发酵结束后,发酵液还不适合饮用,要在低温、
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密闭的环境下储存一段时间进行后发酵,这样才能形成澄清、成熟的啤酒。发酵的温度和发酵的时间随啤酒品种和口味要求的不同而有所差异。啤酒的工业化生产流程如下:
发芽→ →碾磨→ → →发酵→ →终止
思考:与传统的手工发酵相比,在利用发酵工程生产啤酒的过程中,哪些工程手段使啤酒的产量和质量明显提高?
总结发酵工程的应用,完成下表。
具体应用
举例
在食品工业上的应用
生产传统的发酵产品
以大豆为主要原料,利用产生蛋白酶的霉菌(如 )发酵生产酱油,利用酿酒酵母发酵生产各种酒类
生产食品添加剂
通过黑曲霉发酵生产柠檬酸,利用谷氨酸棒状杆菌发酵得到的 制作味精
生产酶制剂
利用微生物发酵生产 α 一 淀粉酶、 β 一 淀粉酶、果胶酶、氨基肽酶和脂肪酶等
在医药工业上的应用
利用基因工程、蛋白质工程等将植物或动物的基因转移到微生物中,或直接改造菌种来生产药物
利用经过基因改造的微生物发酵生产生长激素释放抑制激素
利用基因工程将病原体的抗原基因转入微生物细胞,生产疫苗
将乙型肝炎病毒的抗原基因转入酵母菌,再通过发酵生产乙型肝炎疫苗
在农牧业上的应用
生产微生物肥料
①利用微生物在代谢过程中产生的有机酸、生物活性物质等来增进土壤肥力,改良土壤结构,促进植株生长,如根瘤菌肥、固氮菌肥等
②抑制土壤中病原微生物的生长,减少病害的发生
生产微生物农药。利用 或其 来防治病虫害,是 防治的重要手段
①苏云金杆菌可以用来防治 80 多种农林虫害
②白僵菌可以防治玉米螟、松毛虫等虫害
③一种放线菌产生的抗生素—井冈霉素可以用于防治水稻枯纹病
生产微生物饲料。通过发酵可获得大量微生物菌体,即
①可作为食品添加剂
②能使家畜、家禽增重快,产奶或产蛋量显著提高
③在青贮饲料中添加乳酸菌,可以提高饲料的品质,使饲料保鲜,提高动物免疫力
在其他方面的应用
解决资源短缺与环境污染问题
利用纤维废料发酵生产酒精、乙烯等能源物质
对极端微生物的应用
利用嗜热菌、嗜盐菌生产洗涤剂,利用嗜低温菌提高热敏性产品的产量
【学以致用】
例 2 :啤酒生产的简要流程如图所示,制麦时用赤霉素溶液浸泡大麦种子,糖化主要将麦芽中的淀粉等有机物水解为小分子。下列说法错误的是( )
A .啤酒生产的发酵过程分为主发酵和后发酵两个阶段
B .用赤霉素溶液浸泡大麦种子, 目的是促进 α 一 淀粉酶合成
C .在接种酵母菌前进行冷却处理,是为了避免杀死酵母菌种
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D .在整个发酵过程中,要始终保持严格的无菌、厌氧环境
【课堂小结】
学习过程答案
【学以致用】
例 1 :【答案】C
例 2 :【答案】D
一、单选题(本题共 4 小题)
1.味精是一种鲜味调味料,谷氨酸经过一系列处理能制成味精。好氧菌谷氨酸棒状杆菌经发酵工程可生产谷氨酸。下列叙述错误的是( )
A .发酵应在中性和弱碱性条件下进行
B .发酵时要通入无菌空气并在一定转速下搅拌
C .发酵接种前需要对菌种进行扩大培养
D .发酵结束后采用过滤、沉淀等方法获取谷氨酸
【答案】D
【解析】A、谷氨酸的发酵生产:在中性和弱碱性条件下会积累谷氨酸;在酸性条件下则容易形成谷氨酰胺和N 一 乙酰谷氨酰胺。因此生产谷氨酸时,发酵应在中性和弱碱性的条件下进行,A 正确;
B、谷氨酸棒状杆菌是好氧菌,发酵时要通入无菌空气并在一定转速下搅拌,B 正确;
C、发酵接种前需对发酵菌种进行扩大培养,C 正确;
D、谷氨酸是代谢物,可根据性质采取适当的提取、分离和纯化措施来获得产品,D 错误。
2.发酵工程在我国食品工业、医药工业及农牧业等许多领域都得到了广泛的应用。下列相关叙述正确的是( )
A .通过发酵工程生产的食品添加剂,可改善食品的口味、色泽和品质,但不能增加食品营养
B .利用酵母菌等发酵生产的单细胞蛋白属于分泌蛋白,可制成微生物饲料
C .将病原体的抗原基因通过转基因技术转入适当的微生物细胞,可获得用作疫苗的表达产物
D .利用发酵工程生产的微生物农药防治病虫害属于化学防治
【答案】C
【解析】A、食品添加剂不仅可以增加食品的营养,改善食品的口味、色泽和品质,有时还可以延长食品的保存期,A 错误;
B、用酵母菌等生产的单细胞蛋白可作为食品添加剂,单细胞蛋白指的是酵母菌菌体,B 错误;
C、科学家利用基因工程,将病原体的某个抗原基因转入适当的微生物细胞,获得的表达产物为抗原,可用于疫苗接种预防疾病,C 正确;
D、微生物农药是利用微生物或其代谢物来防治病虫害的,微生物农药是生物防治的重要手段,D 错误。
3.柠檬酸广泛应用于食品、医疗和化工领域,具有重要的商业价值。以玉米粉为原料,利用黑曲霉有氧发酵生产柠檬酸的基本流程如图所示。下列分析错误的是( )
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A .玉米清液可以为黑曲霉提供碳源和能源
B .发酵前将黑曲霉孢子接种到种子培养基进行扩大培养
C .发酵培养基和种子培养基灭菌后加入到发酵罐内发酵
D .需严格控制发酵罐内的温度、溶解氧和pH 等条件
【答案】C
【解析】培养基是人们按照微生物对营养物质的不同需求,配制出供其生长繁殖的营养基质,是进行微生物培养的物质基础。通常含有水、碳源、氮源和无机盐。
A.玉米清液中含有蛋白质(含有 C 、H 、O 、N 等元素)和糖类(含有 C 、H 、O 元素)等物质,故可以为黑曲霉提供碳源和能源,A 正确;
B.据图可知,发酵前将黑曲霉孢子接种到种子培养基,该措施的目的是进行扩大培养,增加黑曲霉孢子的数量,B 正确;
C.加入发酵罐中的种子培养基中包含发酵所需的菌种,若进行灭菌处理会杀灭菌种而导致发酵失败,C 错误;
D.黑曲霉属于异养需氧生物,且微生物发酵过程需要适宜条件,所以在发酵罐内发酵需严格控制溶解氧、温度、pH 等条件,D 正确。
4.利用杨木生产燃料乙醇的基本流程主要包括原料粉碎、提高纤维素浓度的预处理、释放单糖的酶解糖化、产生乙醇的微生物发酵、乙醇脱水的蒸馏工艺等步骤(预处理过程所需的果胶酶常来自于黑曲霉等微生物)。下图为发酵阶段菌种接种量对发酵结果的影响。下列说法正确的是( )
A .培养黑曲霉时一般需将培养基调至酸性,果胶酶是黑曲霉分泌的一种单细胞蛋白
B .在伊红—亚甲蓝培养基上可筛选出高产纤维素酶的菌株用于酶解糖化过程
C .接种的菌种为酵母菌,当接种量为 12%左右时,发酵后的酒精含量与残糖含量相等
D .接种量超过 15%时酒精产量反而有所降低的原因可能是菌种生长消耗大量的糖分【答案】D
【解析】A.培养黑曲霉时一般需将培养基调至酸性,但单细胞蛋白指微生物菌体,果胶酶不属于单细胞蛋白,A 错误;
B.伊红—亚甲蓝培养基是鉴定大肠杆菌的培养基,本实验应该用刚果红培养基筛选高产纤维素酶的菌株, B 错误;
C .酒精发酵的菌种为酵母菌,当接种量为 12%左右时,发酵后的酒精含量与残糖含量曲线有交点,但两者的纵坐标数值及单位均不同,故发酵后二者含量不同,C 错误;
D .由图可知,菌种接种量为 15%时对应的酒精含量达到最大值,接种量超过 15%,菌种数量大,自身的生长会大量消耗反应物,导致酒精产量降低,D 正确。
二、多选题(本题共 1 小题。在每小题给出的四个选项中,有多项符合题目要求。)
5.下图为啤酒生产的简要流程,有关叙述合理的有( )
A .制麦时需浸泡大麦,可提高种子中结合水与自由水的比例
B .过程②破碎有利于淀粉与α 一 淀粉酶充分接触,缩短糖化时间
C .过程③要始终保持厌氧环境,以便完成酒精的生成
D .打开包装后放置的啤酒变酸且产生表面菌膜,一般可从中分离得到醋酸菌【答案】B D
【解析】A、制麦时需浸泡大麦,可提高种子中自由水与结合水的比例,促进细胞代谢,A 错误;
B、糖化的目的是将麦芽中的淀粉等有机物水解为小分子物质,过程②破碎有利于淀粉与α 一 淀粉酶的充分接触,缩短糖化过程所用的时间,B 正确;
C、酵母菌是兼性厌氧微生物,在整个发酵过程③中,要先通气使酵母菌大量繁殖,然后保持严格的无菌、厌氧环境,使其无氧呼吸进行发酵,C 错误;
D、打开包装后放置的啤酒变酸且产生表面菌膜,这是因为醋酸菌在有氧条件下将酒精转化为醋酸,所以一般可从中分离得到醋酸菌,D 正确。
故选 BD。
三、非选择题(本题共 1 大题)
6.柠檬酸是一种应用广泛的食品添加剂,主要用于生产碳酸饮料、果汁饮料、乳酸饮料等。柠檬酸主要通过黑曲霉发酵生产,工业生产中以玉米为原料生产柠檬酸的发酵装置如图所示。回答下列问题:
(1)菌种选择时要经过 1 后筛选出产酸量高的黑曲霉,再将选育出的优良菌种经过多次的 2 ,达到一定数量后再接种。
(2)发酵工程的中心环节是 3 。从加料口加入的玉米必须经过严格的 4 处理。图中搅拌器的运转既能使空气和发酵液充分混合,增加培养液中的 5 ,又能使菌种与培养液 6 ,提高原料利用率。除此之外还需要随时检测培养液中的 7 (写出两点),以了解发酵进程。
(3)该发酵过程还需要以一定的速度更新培养基, 目的是 8 。
【答案】1、诱变育种 2、扩大培养 3、发酵罐内发酵 4、灭菌 5、溶氧量 6、充分接触 7、微生物数量、产物浓度等 8、补充营养物质,去除代谢废物,维持发酵液的良好环境,保证微生物持续高效地发酵
【解析】(1)为了获得理想的菌种,常常会采用诱变育种的方法,通过物理或化学因素诱导菌种发生基因突变,从而产生具有新性状的菌株。然后对诱变后的菌株进行筛选,挑出那些产酸量高、性能优良的菌株。经过初步筛选得到的优良菌种,往往还需要经过多次的扩大培养。这是为了增加菌种的数量,以满足大规模发酵生产的需求。
(2)发酵罐内发酵是整个发酵工程的核心部分,决定着最终产物的产量、质量和经济效益。灭菌处理是非常关键的步骤,其目的是消除玉米原料中可能存在的各种微生物,以防止它们在发酵过程中与发酵菌种竞争营养物质、产生有害代谢产物或者干扰发酵的正常进行。图中搅拌器的运转既能使空气和发酵液充分混合,增加培养液中的溶氧量,又能使菌种与培养液充分接触。除此之外还需要随时检测培养液中的微生物数量、营养物质浓度、代谢产物浓度、pH 值、溶氧含量等,以了解发酵进程。
(3)该发酵过程还需要以一定的速度更新培养基, 目的是补充营养物质,去除代谢废物,维持发酵液的良好环境,保证微生物持续高效地发酵。
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