第一章 第2节 第1课时 微生物的基本培养技术-【创新教程】2025-2026学年高中生物选择性必修3 生物技术与工程五维课堂课时作业word（人教版）

[知识点一]培养基的配制 1．关于制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的叙述错误的是(　　 ) ①将称好的牛肉膏连同称量纸一同放入烧杯溶解　②等培养基冷却至40℃左右时进行倒平板 ③待平板冷却凝固5～10分钟后将平板倒过来放置　④操作顺序为计算、称量、溶化、倒平板、灭菌　⑤牛肉膏和蛋白胨都能提供碳源、氮源、磷酸盐、维生素 A．①④⑤　　　　　　　　　 B．②③④ C．①②③ D．②④⑤ 解析：D　[将称好的牛肉膏连同称量纸一同放入烧杯，加入少量的水，加热，①正确；待培养基冷却至50℃左右时，在酒精灯火焰附近倒平板，②错误；待平板冷却凝固约5～10 min后，将平板倒过来放置，使皿盖在下，皿底在上，③正确；制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的操作顺序为计算、称量、溶化、灭菌、倒平板，④错误；蛋白胨只能提供碳源、氮源、维生素，⑤错误。] 2．在微生物培养时需要制备培养基，下列关于其制备过程的叙述，正确的是(　　 ) A．称量好牛肉膏后将称量纸上的物质迅速倒入烧杯 B．培养霉菌的培养基在灭菌后要将pH调至酸性 C．用温度计测量培养基温度待降到50℃左右时可以用来倒平板 D．倒平板时培养基溅在皿盖与皿底之间时，这个平板应舍弃 解析：D　[牛肉膏比较粘稠，溶化时将称好的牛肉膏连同称量纸一起放入烧杯中，A错误；培养基配制时先调pH，然后再灭菌，B错误；用手触摸装培养基的锥形瓶，刚刚不烫手时就是50℃左右时，此时可以用来倒平板，C错误；倒平板时培养基溅在皿盖与皿底之间时，可能会造成培养基的杂菌污染，这个平板应舍弃，D正确。] 3．下表是某培养基的成分，下列相关叙述错误的是(　　 ) 编号 ① ② ③ ④ ⑤ 成分 (NH4)2SO4 KH2PO4 FeSO4 CaCl2 H2O 含量(g) 0.4 4.0 0.5 0.5 100mL A.此培养基可用于自养型微生物的培养 B．培养基中若加入氨基酸，则它可充当碳源、氮源 C．若除去①，此培养基可培养硝化细菌 D．此培养基按功能分类属于选择培养基 解析：C　[由题表可知，此培养基中不含含碳有机物，自养型微生物可利用空气中的CO2作碳源，故该培养基适合用来培养自养型微生物，A正确；氨基酸的元素组成为C、H、O、N，培养基中若加入氨基酸，则它可充当碳源、氮源，B正确；硝化细菌能进行化能合成作用，但不能固氮，因此若除去①，此培养基不能培养硝化细菌，C错误；此培养基缺少碳源，可以筛选出自养型微生物，故此培养基按功能分类属于选择培养基，D正确。] [知识点二] 无菌技术 4．接种环的灼烧灭菌应该在何时进行(　　 ) A．使用前 B．使用后 C．使用前及使用后 D．储存前 解析：C　[接种环在使用前灼烧灭菌是为了防止杂菌污染目标菌，使用后灼烧灭菌是防止目标菌污染环境和感染操作者。] 5．获得纯净培养物的关键是防止外来杂菌的进入，有关无菌技术的叙述正确的是(　　 ) A．操作者的双手清洁后，用无水乙醇擦拭消毒 B．自来水用氯气消毒，可以杀灭全部微生物 C．平板划线接种微生物时须在酒精灯火焰旁操作 D．为防止杂菌污染，家庭制作果酒时的用具需严格灭菌 解析：C　[操作者的双手清洁后，用体积分数为75%的酒精擦拭消毒，不能用无水乙醇进行消毒，这是因为过高浓度的酒精会在细菌表面形成一层保护膜，阻止其进入细菌体内，难以将细菌彻底杀死，达不到消毒的目的，A错误；氯气消毒，可以杀死部分微生物，B错误；平板划线接种微生物时须在酒精灯火焰旁操作，以保证接种时处于无菌的环境，防止杂菌污染，C正确；传统发酵用具进行消毒处理，D错误。] [知识点三] 微生物的纯培养 6．关于细菌分离、培养的叙述中，正确的是(　　 ) A．不同种类细菌的生长均需要相同碳源 B．常用液体培养基分离获得细菌单菌落 C．用含尿素的培养基可选择分离出能分解利用尿素的细菌 D．含有机磷农药的培养基可分离出降解有机磷农药的细菌 解析：D　[不同种类细菌的生长需要不同碳源，A错误；常用固体或半固体培养基分离获得细菌单菌落，B错误；用只以尿素作为氮源的培养基可选择分离出能分解利用尿素的细菌，C错误；含有机磷农药的培养基可分离出降解有机磷农药的细菌，D正确。] 7．同种微生物表现出稳定的菌落特征，菌落特征包括(　　 ) ①菌落形状　②菌落的多少　③菌落的大小 ④菌落的颜色　⑤菌落的隆起程度 A．①②③④ B．②③④⑤ C．①③④⑤ D．①②③⑤ 解析：C　[不同种类的细菌形成的菌落不同，菌落特征包括菌落的大小、形状、颜色及菌落的隆起程度，菌落数量不是菌落特征，综上所述，C正确。] 8．下面是微生物平板划线示意图，划线的顺序为1、2、3、4、5。下列叙述正确的是(　　 ) A．在五个区域中划线前后都要对接种环和培养基进行灭菌 B．划线操作时完全打开皿盖，划完立即盖上 C．接种时不能划破培养基，否则难以达到分离单菌落的目的 D．第1区和第5区的划线最终要连接起来，以便比较前后的菌落数 解析：C　[在每次划线前后都要对接种环进行灭菌；进行划线操作时，左手将培养皿的皿盖打开一条缝隙，右手将沾有菌种的接种环迅速伸入平板内，划三至五条平行线，盖上皿盖；接种时不能划破培养基，否则难以达到分离单菌落的目的；第1区和第5区的划线不能相连。] 9．下图为平板划线法示意图，在图中哪个区域更易获得单菌落(　　 ) A．开始处 B．① C．② D．③ 解析：D　[据图分析，图为平板划线法，随着划线次数的增加，菌种进一步被稀释，即图中从开始处到①处、再到②处，最后到③处，菌数逐渐减少，因此③区域更易获得单菌落。] 10．酸奶是牛奶经过乳酸菌发酵制成的。乳酸菌可将牛奶中的乳糖转化为乳酸，从而减轻某些人群的乳糖不耐受症状。请回答问题： (1)为鉴别市售酸奶中的菌种，应该采用平板划线法或　____________　法在固体培养基上进行接种，观察所获单菌落的特征，在接种前，随机取若干灭菌后的空白平板先培养一段时间，这样做的目的是　____________________________　。 (2)采用平板划线法分离水样中的乳酸菌。操作时，接种环通过　________　灭菌，在第二次及以后划线时，总是从上一次的末端开始划线。这样做的目的是　________________________________________　。 (3)某同学在配制平板时加入石灰石(CaCO3)，从而成功筛选出能产生乳酸的菌株。其筛选依据的原理是　________________________________________________　。并且单菌落周围　________　越大，说明该菌株产生乳酸的能力越强。 (4)发酵到后期时，酸奶含量继续增加，当达到1.2%时，发酵速度逐渐变缓甚至停止，主要原因是　________________________　。 (5)含有抗生素的牛奶不能发酵成酸奶。其理由是　____________________________　。 解析：(1)微生物接种的方法有平板划线法和稀释涂布平板法。在接种前，随机取若干灭菌后的空白平板先培养一段时间，用于检测培养基平板灭菌是否合格。 (2)采用平板划线法分离水样中的乳酸菌，操作时，接种环通过灼烧灭菌，在第二次及以后划线时，总是从上一次的末端开始划线。这样做的目的是将聚集的菌体逐步稀释以便获得单个菌落。 (3)培养基中加入CaCO3，成功筛选出能产生乳酸的菌株，其筛选依据的原理是生成的乳酸与CaCO3反应生成乳酸钙，周围形成透明圈，其透明圈越大说明该菌株产生乳酸的能力越强。 (4)发酵到后期时，酸奶含量继续增加，当达到1.2%时，发酵速度逐渐变缓甚至停止，主要原因是pH过低抑制了乳酸菌的生长。 (5)含有抗生素的牛奶不能发酵成酸奶，其理由是抗生素能够杀死或抑制乳酸菌的生长。 答案：(1)稀释涂布平板　检测培养基平板灭菌是否合格　(2)灼烧　将聚集的菌体逐步稀释以便获得单个菌落　(3)生成的乳酸与CaCO3反应生成乳酸钙，周围形成透明圈　透明圈　(4)pH过低抑制了乳酸菌的生长　(5)抗生素能够杀死或抑制乳酸菌的生长 1．下列有关培养基叙述正确的是(　　 ) A．培养基的营养成分都有碳源、氮源、水、无机盐 B．除水以外的无机物都属于无机盐 C．用培养基培养甲型H1N1流感病毒用于科学研究 D．培养基配制过程中应调pH，以适应微生物的生长 解析：D　[对于固氮微生物，其培养基的营养成分中可无氮源，A项错误；CO2和N2属于无机物，但不属于无机盐，B项错误；将H1N1流感病毒接种在相应的宿主细胞中培养，以用于科学研究，C项错误；培养基配制过程中应调pH，以适应微生物的生长，D项正确。] 2．餐厨垃圾中具有高效降解能力的微生物，可用于餐厨垃圾高效无害化处理，科研人员取一定量的餐厨样品，制备不同浓度的样品稀释液，并将样品接种于利用蛋白胨、牛肉膏、氯化钠、琼脂配制的培养基表面进行培养并分离。下列分析正确的是(　　 ) A．牛肉膏主要为微生物提供氮源 B．接种时需用力将菌种接种到培养基内 C．稀释样品获得单个菌落以便判断菌种类型 D．经过培养可筛选出具有高效降解能力的微生物 解析：C　[牛肉膏主要为微生物提供碳源、氮源、磷酸盐和维生素，A错误；接种菌种时，应将菌种接入培养基表面，以有利于其生长，如果用力接种会划破培养基，从而会影响菌株的生长，不能形成正常的特征形态，影响对菌落形态的观察及特征鉴别，B错误；通过稀释样液得到适宜浓度的菌液，再将菌液接种到培养基上获得单个菌落以便判断菌种类型，C正确；经过培养、筛选后还需要进行鉴定，才能选出具有高效降解能力的微生物，D错误。] 3．营养缺陷型菌株是指缺乏合成某些营养物质(如氨基酸、维生素)的能力，必须在基本培养基中补充特殊营养物质才能正常生长的一类菌株，可自然产生或人工诱导获得。用一定方法诱变大肠杆菌并将其接种到甲培养皿中，一段时间后将菌落影印接种(不改变菌落位置)到乙、丙两培养皿中，进一步培养一段时间可筛选出营养缺陷型菌株，结果如图所示。下列说法正确的是(　　 ) A．将大肠杆菌接种到甲培养皿的方法为平板划线法 B．甲、丙两种培养基中均添加了特殊营养物质 C．乙培养皿中能生长的为所需的营养缺陷型菌株 D．甲中的部分大肠杆菌发生了基因突变或染色体变异 解析：B　[由菌落的分布情况可知，将大肠杆菌接种到甲培养皿的方法为稀释涂布平板法，A错误；根据甲丙两种培养基中菌落位置可知，甲中的菌种在丙培养基中均能生长，再结合乙培养基中菌落的生长情况，可推测甲培养基和丙培养基都添加了某种特殊物质，B正确；乙培养皿中不能生长的为所需的营养缺陷型菌株，C错误；甲中的部分大肠杆菌发生了基因突变，不可能发生染色体变异，因为大肠杆菌没有染色体，D错误。] 4．我国规定1L自来水中大肠杆菌数不得超过3个。某兴趣小组利用滤膜法(下图所示)对校内自来水中大肠杆菌数量进行检测。有关叙述错误的是(　　 ) A．取样水龙头应用火焰灼烧，打开水龙头一段时间后再取样 B．滤膜的孔径应小于大肠杆菌，过滤水样应足量 C．根据培养基上红色菌落的数目，计算水样中大肠杆菌数 D．进行细菌培养的同时需进行未接种培养基的培养 解析：C　[为避免杂菌的污染，在取样时水龙头应用火焰灼烧杀灭杂菌，打开水龙头一段时间后再取样是避免温度过高杀死目的菌，A正确；实验将待测水样进行过滤，得到的滤膜进行微生物培养，因此水中的大肠杆菌应留在滤膜上，故滤膜的孔径应小于大肠杆菌，B正确；加入伊红美蓝能够鉴别大肠杆菌，菌落颜色为黑色，C错误；为保证实验结果的科学性与准确性，实验的同时应设置对照，即进行细菌培养的同时需进行未接种培养基的培养，D正确。] 5．下列关于微生物营养物质的描述正确的是(　　 ) A．同一物质不可能既作碳源又作氮源 B．除水以外的无机物仅提供无机盐 C．凡是碳源都能提供能量 D．无机氮源也能提供能量 解析：D　[对异养微生物来说，含C、H、O、N的化合物既是碳源，又是氮源，如牛肉膏，A错误；CO2和N2是无机物，也是某些微生物的碳源和氮源，B错误；有机碳源能提供能量，无机碳源不能提供能量，C错误；自然界中一些微生物如硝化细菌，可以以无机氮源合成细胞物质，同时通过氧化外界无机物获得生长所需能量，此过程叫做化能合成作用，D正确。] 6．下列有关微生物培养的叙述错误的是(　　 ) A．培养基灭菌常用的方法是高压蒸汽灭菌 B．硝化细菌的碳源、氮源依次是二氧化碳、氨 C．各种微生物培养基的配方中必须包含碳源、氮源、水、无机盐 D．纯化培养微生物常用的接种方法只有平板划线法 解析：CD　[培养基灭菌常用的方法是高压蒸汽灭菌，A正确；硝化细菌是自养生物，可作为硝化细菌碳源、氮源的物质依次是二氧化碳、氨，B正确；各种培养基一般都含有水、碳源、氮源、无机盐，但也不是必须都有这几种成分，如培养固氮菌不需要氮源，C错误；纯化培养微生物常用的接种方法有平板划线法和稀释涂布平板法，D错误。] 7．(多选)以下关于无菌技术的叙述，其中正确的是(　　 ) A．对实验操作的空间、操作者的衣着和手进行灭菌 B．将用于微生物培养的培养皿、接种用具和培养基等进行灭菌 C．为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在酒精灯火焰附近进行 D．实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围物品相接触 解析：BCD　[对实验操作的空间、操作者的衣着和手进行消毒，A错误；为保证不被杂菌污染，应将培养器皿、接种用具和培养基等进行灭菌，B正确；酒精灯火焰附近可以形成一个无菌区，为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在酒精灯火焰附近进行，C正确；周围物品可能会含有杂菌，为防止污染，实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围物品相接触，D正确。] 8．(多选)如图为实验室培养和纯化大肠杆菌过程中的部分操作步骤，下列说法不正确的是(　　 ) A．步骤①倒平板后需间歇晃动，以保证表面平整 B．步骤②在沾取一环菌液前后，接种环都要通过酒精灯火焰 C．步骤③到④的过程中，每次划线后都需要对接种环进行灼烧处理 D．步骤④中平板与未接种的平板都放入37℃的恒温箱中培养 解析：AB　[倒平板时需左三圈，右三圈的轻轻晃动，以保证表面平整，A错误；步骤②在沾取一环菌液前后，试管口都要通过酒精灯火焰，而不是接种环，其中为避免杀死目的菌株，需要注意将已冷却的接种环伸入菌液中蘸取一环菌液，B错误；步骤③到④的过程中，每次划线后都需要对接种环进行灼烧处理，以杀死上次划线结束后接种环上残留的菌种，C正确；将接种后的培养基和未接种的培养基同时放入37℃恒温箱，目的是作为空白对照，判断培养基是否被污染。一段时间后若未接种的培养基有菌落说明培养基被污染，则培养基不能使用，若无菌落说明培养基没有被污染，可以使用，D正确。] 9．微生物的分离和培养是现代生物工程应用中的重要环节。下图甲、乙、丙是大肠杆菌分离和培养过程中部分操作和实验结果示意图，请据图回答有关问题： (1)上图甲所示的是制备固体培养基时的实验操作步骤之一，它称为　________　，若用该培养基培养大肠杆菌，除考虑营养条件外，还要考虑　________　、　________　和渗透压等条件。 (2)培养大肠杆菌时，在接种前需要检测培养基是否被污染。对于固体培养基应采用的检测方法是 ________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________。 (3)上图乙是平板划线法接种操作示意图，正确的操作顺序是A→B→　________　(用字母和箭头表示)；找出图乙中两处错误的操作(用字母表示)：　________　、　________　。 (4)上图丙是某同学用平板划线法接种后的培养基培养12 h后的实验结果，如果培养基上　______________________________　，则说明无菌操作基本符合要求。 解析：(1)图甲所示操作为倒平板，需要在酒精灯火焰旁进行操作。培养基中除营养成分外，还应考虑pH、氧气、无菌、温度、渗透压等条件。 (2)检测培养基是否被污染的方法是将未接种的培养基在适宜的温度下放置适宜的时间，观察培养基上是否有菌落产生，如有菌落，说明该培养基已被污染。 (3)平板划线法的操作顺序为灼烧接种环，冷却，挑取菌种，划线，灼烧接种环，划线，灼烧接种环，平板倒置培养，即A→B→G→F→E→C→D→H。图乙中C操作应在酒精灯附近进行，D中划线的首尾不应该相接。 (4)同一菌种的菌落颜色、形状、大小基本一致，如有杂菌污染，会有异常菌落出现，可根据菌落的特征确定该菌落是否为大肠杆菌。 答案：(1)倒平板　温度(氧气)　pH(无菌) (2)将未接种的培养基在适宜的温度下放置适宜的时间，观察培养基上是否有菌落产生 (3)G→F→E→C→D→H　C　D (4)生长的菌落颜色、形状、大小基本一致，并符合大肠杆菌菌落的特点 混淆消毒和灭菌的区别 下列关于灭菌和消毒的理解不正确的是(　　 ) A．灭菌是指杀灭环境中一切微生物的细胞、芽孢和孢子 B．消毒和灭菌实质上是相同的 C．用酒精擦拭双手只能消毒，不能起到灭菌作用 D．常用的灭菌方法有灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌等 解析：B　[灭菌是指采用强烈的理化方法杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子。A正确。消毒是指用较为温和的物理、化学或生物等方法仅杀死物体表面或内部一部分对人体有害的微生物，不包括芽孢和孢子，因此实质是不相同的，B错误。用酒精擦拭双手属于消毒，C正确。常用的灭菌方法有灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌等，D正确。] 学科网（北京）股份有限公司 $