1.2.2微生物的选择培养和计数-粪菌能治疗疾病（情境课件）生物人教版选择性必修3

该高中生物学课件聚焦微生物的选择培养和计数，以“粪菌治疗”情境导入，通过科学实例（如耐高温DNA聚合酶筛选）阐释选择培养基原理，结合梯度稀释及涂布平板操作视频，构建从理论到实践的学习支架，衔接微生物培养技术与数量测定方法。 其亮点在于以真实情境渗透社会责任，通过“土壤中分解尿素的细菌分离与计数”探究实践培养科学思维与探究实践能力，对比表格（如选择与鉴别培养基）助力知识结构化，丰富练习题强化应用，能提升学生实验操作与分析能力，为教师提供系统教学资源。

人教版选择性必修3 第1章 发酵工程 第2节 微生物的培养技术及应用 二 微生物的选择培养和计数 粪菌能治疗疾病？ 目录 生命观念 1. 掌握微生物分离、纯化及计数的原理与方法。 科学思维 1.学会使用稀释涂布平板法分离微生物并统计菌落数。 2.能分析不同菌落的形态特征，筛选潜在有益菌。 社会责任 1.通过“粪菌治疗”案例感受微生物与人类健康的紧密联系。 2.培养科学探究精神，树立合理使用微生物资源的观念。 素 养 目 标 情境导入 粪菌能治疗疾病？ 情境启思 有益菌获取和培养 一个肠道缺乏乳酸杆菌等有益菌的肠道疾病患者，医生建议给他做菌群移植，首先得选出富含它们的粪菌。 “如何从健康人的粪便中分离出有益菌群？“ 可以提供有利于目的菌生长，不利于其它菌生长的环境。 寻找耐高温的DNA聚合酶 （一）科学实例： 聚合酶链式反应（PCR）是一种在体外扩增DNA片段的技术，此项技术要求使用耐高温的DNA聚合酶。 1973年，布鲁克在美国黄石国家公园的一个热泉中发现了耐热的水生栖热菌，并从这种菌种提取出耐高温的DNA聚合酶。 筛选原因：水生栖热菌能在70-80℃高温条件下生存，而绝大多数微生物在此条件下不能生存。 那么，如何从众多的微生物中筛选出单一菌种？ 美国黄石公园 情境串讲 一、选择培养基 寻找耐高温的DNA聚合酶 （一）科学实例： 筛选水生栖热菌的条件是什么？为什么该条件能让其“ 脱颖而出”? 你还知道哪些条件能影响微生物的生存？ 因为热泉温度为70～80℃，淘汰了绝大多数微生物，只有水生栖热菌被筛选出来。 pH和氧气浓度等； 在实验室中选择培养特定的微生物有什么启示? 寻找目的菌种时要根据它对生存环境的要求，到相应的环境中去寻找。 耐寒微生物 耐热微生物 石油分解菌 情境串讲 一、选择培养基 情境串讲 一、选择培养基 选择培养基配方的设计 思考•讨论 尿素［CO(NH2)2］含氮量高，化学性质稳定，是现代农业生产中一种重要的氮肥。尿素被土壤中某些细菌分解成NH3,再被转化为NO3-、NH4+等被植物吸收。这些细菌之所以能分解尿素，是因为能合成脲酶，来催化尿素分解。 CO(NH2)2+H2O CO2+2NH3 脲酶 尿素分子模型 情境串讲 一、选择培养基 选择培养基配方的设计 思考•讨论 1.如果让你配制一种培养基，将土壤稀释液中能分解尿素的细菌分离出来，培养基的配方该如何设计？ 在选择培养基中，以尿素作为唯一氮源，只有能合成脲酶的细菌才能生长发育繁殖。 2.该培养基与普通培养基有哪些共同点和不同点？ 除以尿素作为唯一氮源外，该培养基的其他营养成分与普通培养基基本相同。 （二）实验室中微生物筛选的原理： 人为提供 的条件（包括 、 和 等），同时 。 有利于目的菌生长 抑制或阻止其他微生物的生长 营养 温度 pH （三）选择培养基概念： 在微生物学中，将允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基称为选择培养基。 （四）选择培养基类型： 在培养基中加入某种化学物质 改变培养基中的营养成分 改变微生物的培养条件 情境串讲 一、选择培养基 培养基中加氨苄青霉素 具有氨苄青霉素抗性的菌落 没有氨苄青霉素抗性的细菌 培养基应有菌落 没有氨苄青霉素抗性的细菌被淘汰 怎样选择出抗氨苄青霉素能力的细菌? 举例 怎么证明一个选择培养基具有选择性呢？ 拓展延伸 选择培养基 应该设置基础培养基（如牛肉膏蛋白胨培养基）或完全培养基作为对照，若基础培养基或完全培养基中生长的菌落数菌多于该选择培养基，则该选择培养基具有选择性。 基础培养基 怎么证明一个选择培养基具有选择性呢？ 选择培养基 拓展延伸 选择培养基 分离酵母菌、霉菌等真菌 分离固氮菌 分离自养型微生物 ④加高浓度食盐 金黄色葡萄球菌 ⑤加入石油 能消除石油污染的微生物 ③不加含碳有机物的无碳培养基 ②不加氮源的无氮培养基 ①加入青霉素的培养基 知识归纳 选择培养基 即学即练 选择培养基 1．(2023·浙江1月选考)某同学想从泡菜汁中筛选耐高盐乳酸菌，进行了如下实验：取泡菜汁样品，划线接种于一定NaCl浓度梯度的培养基，经培养得到了单菌落。下列叙述正确的是(　　) A．培养基酸碱度需偏碱性 B．泡菜汁需多次稀释后才能划线接种 C．需在无氧条件下培养 D．分离得到的微生物均为乳酸菌 C 乳酸菌进行无氧呼吸产生乳酸，推测其生活的环境应偏酸性 使用平板划线法接种时不需要稀释泡菜汁 参与泡菜发酵的微生物不是纯化后的菌种，因此分离得到的微生物除乳酸菌外，还有其他耐高盐的微生物 即学即练 选择培养基 2．(2023·河北选择考)为筛选能平衡肠道菌群和降解胆固醇的乳酸菌，下列相关实验设计错误的是(　　) A．从酸奶和泡菜中采样分离乳酸菌 B．平板倒置培养为筛选乳酸菌创造无氧环境 C．对目的菌株进行胆固醇降解能力的测定 D．检测目的菌株对消化道环境的耐受力 平板倒置的目的是使培养基表面的水分更好地挥发和防止皿盖上的水珠落入培养基，造成污染 B 1.概念： 如果想知道1g土壤中有多少能分解尿素的细菌，还需对土壤菌液进行稀释及科学的微生物数量测定方法---稀释涂布平板法。 （一）稀释涂布平板法： 情境串讲 二、微生物的选择培养 将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，进行培养。 稀释度足够高时，能在培养基表面形成单个菌落。 情境串讲 二、微生物的选择培养 某兴趣小组在从土壤中分离能分解尿素的细菌时，发现土壤中细菌的数量庞大，要想得到能分解尿素的细菌的纯培养物，必须要对土样进行充分稀释，然后再将菌液涂布到制备好的培养基上，也就是要采用稀释涂布平板法。相关流程如图所示。回答下列问题： 单菌落 梯度稀释 涂布平板 1.请简述稀释凃布平板法的操作步骤？ 2.与平板划线法相比，为什么稀释涂布平板法可用于细菌计数？ 接种 土壤溶液的梯度稀释及涂布平板操作的视频 情境串讲 二、微生物的选择培养 细菌宜在酸碱度接近中性的潮湿土壤中生长，绝大部分分布在距地表3-8cm的土壤层。铲去表层土3cm左右，取样，将样品装入事先准备好的信封中。 ①土壤取样 取土样时用的铁铲和取样袋在使用前都需要灭菌。操作完成后，一定要洗手。 2.步骤： （1）梯度稀释菌液 情境串讲 二、微生物的选择培养 将10g土样加入盛有90mL无菌水的锥形瓶中，充分摇匀。取1mL上清液加入盛有9mL无菌水的试管中，依次等比稀释。 1×10 1 mL 1 mL 1 mL 1 mL 1 mL 1 mL 1×102 1×103 1×104 1×105 1×106 1×107 9 mL 无菌水 90mL无菌水 10g （一）稀释涂布平板法： 情境串讲 二、微生物的选择培养 ②样品的稀释 2.步骤： （1）梯度稀释菌液 ③取0.1mL菌液，滴加到培养基表面。 ④将涂布器浸在盛有酒精的烧杯中。 ⑤将涂布器放在火焰上灼烧，待酒精燃尽、涂布器冷却后，再进行涂布。 ⑥用涂布器将菌液均匀地涂布在培养基表面。涂布时可转动培养皿，使涂布均匀。 微量移液器 （2）稀释涂布平板法操作 情境串讲 二、微生物的选择培养 2.步骤： 待涂布的菌液被培养基吸收 将平板倒置 30～37℃恒温培养1～2d后进行计数 （3）菌落培养 培养时要将一个未接种的培养基和一个已接种的培养基放在一起培养为什么？ 培养未接种的培养基的作用是对照。 稀释103倍 稀释104倍 稀释105倍 空白对照 2.步骤： 情境串讲 二、微生物的选择培养 平板划线法最开始的划线很可能菌类会长成一片，导致无法计数，此外灼烧接种环的时候也会杀死一部分菌类。 与平板划线法相比，为什么稀释涂布平板法可以用于细菌的计数？ 平板划线法 稀释涂布平板法 稀释103倍 稀释104倍 稀释105倍 稀释106倍 情境串讲 二、微生物的选择培养 平板划线法最开始的划线很可能菌类会长成一片，导致无法计数，此外灼烧接种环的时候也会杀死一部分菌类。 (1)图A是利用____________(填方法名称)进行微生物接种，图示方法不能用于微生物的计数，原因是? (2)示意图B表示的是 接种培养后得到的结果。用该方法统计的菌落数往往比活菌的实际数目___,原因是？ 平板划线法 稀释涂布平板法 少 当两个或多个细胞连在一起时,培养基 上观察到的往往只是一个菌落 A B 归纳总结 比较平板划线法与稀释涂布平板法 项目 平板划线法 稀释涂布平板法 关键操作 接种环在固体平板培 养基表面连续划线 ①一系列的梯度稀释 ②涂布平板法操作 注意事项 每次划线前后均需灼烧接种环 稀释度要足够高，为确保试验成功可以增加稀释度的范围 菌体获取 在具有显著的菌落特征的区域菌落中挑取菌体 从适宜稀释度的平板上的菌落中挑取菌体 优点 可以根据菌落的特点获得某种微生物的单细胞菌落 既可以获得单细胞菌落，又能对微生物计数 缺点 不能对微生物计数 操作复杂，需要涂布多个平板 归纳总结 比较平板划线法与稀释涂布平板法 即学即练 微生物的选择培养 1.解脂菌能利用分泌的脂肪酶将脂肪分解成甘油和脂肪酸并吸收利用。脂肪酸会使醇溶青琼脂平板变为深蓝色。将不能直接吸收脂肪的甲、乙两种菌分别等量接种在醇溶青琼脂平板上培养。甲菌菌落周围呈现深蓝色，乙菌菌落周围不变色。下列说法错误的是(　　) A．甲菌属于解脂菌 B．实验中所用培养基以脂肪为唯一碳源 C．可将两种菌分别接种在同一平板的不同区域进行对比 D．该平板可用来比较解脂菌分泌脂肪酶的能力 B 乙菌菌落周围不变色，说明乙菌不能分泌脂肪酶分解脂肪，但其能在此培养基中存活并形成菌落，表明实验中所用培养基脂肪不是唯一碳源 即学即练 微生物的选择培养 2.某小组同学为了调查湖水中细菌的污染情况而进行了实验，包括制备培养基、灭菌、接种培养、菌落观察与计数。下列与此实验相关问题的叙述正确的是(　　) A．实验用过的带菌培养基经过加热后就能倒掉 B．利用平板划线法对细菌进行分离纯化并计数 C．观察细菌培养的实验时，最好是在另一块平板上接种清水作为对照实验 D．培养基中的淀粉提供碳源，蛋白胨提供碳源、氮源和维生素 实验用过的带菌培养基要高压蒸汽灭菌后才能倒掉，以免污染环境 应利用稀释涂布平板法对细菌进行分离纯化并计数 要使该实验所得结果可靠，还应该同时在另一平板上接种无菌水作为对照实验 D １.稀释涂布平板法进行计数的原理是什么？为什么可以用于细菌的计数？ ２.稀释涂布平板法进行计数有什么注意事项？ ３.通过稀释涂布平板法统计的细菌的数目与它的实际数目相同吗 ？ ４.用显微镜进行直接计数方法统计的细菌的数目与它的实的际数目相同吗? 请结合教材18页，思考以下问题： 稀释103倍 稀释104倍 稀释105倍 空白对照 稀释106倍 情境串讲 三、微生物的数量测定 （一）统计菌体数目： 1 2 显微镜直接计数法 稀释涂布平板计数法 血细胞/细菌计数板 ——间接计数法 ——直接计数法 稀释103倍 稀释104倍 稀释105倍 空白对照 情境串讲 三、微生物的数量测定 当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌。通过计数平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少活菌。 (1)原理： 稀释涂布平板法计数的原理是什么？为什么可用于细菌计数？ （一）统计菌体数目： 1.稀释涂布平板计数法 情境串讲 三、微生物的数量测定 选择30-300个菌落的平板进行计数； 每个稀释度至少取3个平板取其平均值； (2)计数原则: 稀释103倍 稀释104倍 稀释105倍 空白对照 稀释106倍 （一）统计菌体数目： 1.稀释涂布平板计数法 情境串讲 三、微生物的数量测定 统计的菌落数往往比活菌的实际数目少，这是因为当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落。因此，统计结果一般用菌落数而不是用活菌数来表示。 通过此方法统计的细菌的数目与它的实际数目相同吗 ？ (3)计数特点: （一）统计菌体数目： 1.稀释涂布平板计数法 情境串讲 三、微生物的数量测定 情境串讲 三、微生物的数量测定 （一）统计菌体数目： 1.稀释涂布平板计数法 例:乙同学涂布了三个平板，统计的菌落数是210、240和230. 每克样品中的菌落数=平板上菌落数的平均值÷体积×稀释倍数=230÷0.2×106=1.15×109； （4）计算公式： M代表稀释倍数 C代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数 V代表涂布平板时所用的稀释液的体积(mL) 每g样品中的菌落数＝ (C÷V)×M 稀释103倍 稀释104倍 稀释105倍 空白对照 两位同学用稀释涂布平板法测定同一土壤样品中的细菌数。从对应稀释 倍数为106的培养基中，得到以下两种统计结果。 1.甲同学在该浓度下涂布了一个平板，统计的菌落数为230。 2.乙同学在该浓度下涂布了A、B、C三个平板，统计的菌落数分别为21、212、256，该同学以这三个平板上菌落数的平均值163作为统计结果。 你认为这两位同学的作法正确吗？如果有问题，错在哪？ 甲：没有重复实验（至少涂布3个平板） 乙：其中一个平板计数结果与其他两个相差太大，操作过程可能出现了错误。 情境串讲 三、微生物的数量测定 情境串讲 三、微生物的数量测定 （一）统计菌体数目： ——直接计数法 （1）原理： 利用细菌计数板或血细胞计数板，在显微镜下计算一定容积里样品中微生物的数量。 血细胞计数板 常用于相对较大的酵母菌细胞、霉菌孢子等的计数。 细菌计数板 对细菌等较小的细胞进行观察和计数。 相关信息 细菌计数板和血细胞计数板有什么区别 2.显微镜直接计数法 旁栏思考 （一）统计菌体数目： （2）优缺点： ①优点： ②缺点： 快速、直观 A.不能区分死菌和活菌→偏大 B.不适于对运动细菌的计数。 C.个体小的细菌在显微镜下难以观察。 情境串讲 三、微生物的数量测定 2.显微镜直接计数法 台盼蓝染液染色，可以通过统计无色细胞的个数来对活菌进行计数。 = 80 ×400×104×稀释倍数 A1+A2+A3+A4+A5 1mL样品中酵母菌数= A1+A2+A3+A4+A5 80 ×400÷0.1mm3×稀释倍数 A1、A2、A3、A4、A5分别为五个中方格中的酵母菌数。 25×16型 A1 A2 A3 A4 A5 1mm3=10-3mL (3)计算公式 （一）统计菌体数目： 情境串讲 三、微生物的数量测定 2.显微镜直接计数法 = 100 ×400×104×稀释倍数 A1+A2+A3+A4 16×25型 A1 A2 A4 A3 1mL样品中酵母菌数= A1、A2、A3、A4分别为四个中方格中的酵母菌数。 A1+A2+A3+A4 100 ×400÷0.1mm3×稀释倍数 1mm3=10-3mL (3)计算公式 （一）统计菌体数目： 情境串讲 三、微生物的数量测定 2.显微镜直接计数法 项目 直接计数法 间接计数法 原理 利用特定细菌计数板或血细胞计数板，在显微镜下计算一定容积的样品中微生物的数量 当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌。通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少活菌 主要用具 显微镜、细菌计数板 培养基 计数数据 菌体本身 培养基上菌落数 优点 计数方便、操作简单 计数的是活菌 缺点 死菌、活菌都计算在内 操作较复杂，有一定误差 计算公式 每毫升原液含菌数=每小格平均菌体数×400×10000×稀释倍数 每毫升原液含菌数=培养基上平均菌落数×稀释倍数÷涂布液体积 归纳总结 直接计数法和间接计数法的比较 即学即练 微生物的数量测定 1.(2025·黑吉辽卷)科研人员通过稀释涂布平板法筛选出高耐受且降解金霉素(C23H23CIN208。)能力强的菌株,旨在解决金霉素过量使用所导致的环境污染问题。下列叙述错误的是:( ) A.以金霉素为唯一碳源可制备选择培养基 B.逐步提高培养基中金霉素的浓度有助于获得高耐受的菌株 C.配制选择培养基时,需确保 pH 满足实验要求 D.用接种环将菌液均匀地涂布在培养基表面 D 稀释涂布法不需要接种环,而是需要涂布器 2．(2023·山东等级考)平板接种常用在微生物培养中。下列说法正确的是(　　) A．不含氮源的平板不能用于微生物培养 B．平板涂布时涂布器使用前必须进行消毒 C．接种后未长出菌落的培养基可以直接丢弃 D．利用以尿素为唯一氮源的平板能分离出合成脲酶的微生物 不含氮源的平板可用于固氮菌的培养 平板涂布时涂布器使用前必须浸在酒精中，然后在火焰上灼烧，这种操作属于灭菌，不属于消毒 即学即练 微生物的数量测定 D 使用后的培养基即使未长出菌落也要在丢弃前进行灭菌处理，不能直接丢弃，以免污染环境 1.提出问题： (1)土壤中含有能分解尿素的细菌，我们如何分离它们？ (2)每克土壤样品究竟含有多少这样的细菌？ 利用以尿素作为唯一氮源的选择培养基，可以分离。 2.做出假设： 3.实验原理： 土壤 取样 制备 培养基 样品稀释 与取样涂布 微生物的 培养与观察 菌落计数 4.实验步骤： 绝大多数微生物都能利用葡萄糖，但是只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素。利用以尿素作唯一氮源的选择培养基，可以从土壤中分离出分解尿素的细菌。 探究•实践 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数 探究•实践 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数 探究•实践 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数 4.实验步骤： 样品稀释涂布平板 微生物的培养与观察 菌落计数 土壤取样 制备培养基 取土样时用的铁铲和取样袋在使用前都需要灭菌。操作完成后，一定要洗手。 ①土壤要求：酸碱度接近中性且潮湿。 ②取样部位：距地表约3～8 cm的土壤层。 ①制备选择培养基 （尿素为唯一氮源） 提供无机盐；调节pH ②制备牛肉膏蛋白胨培养基 葡萄糖 10.0g 尿素 1.0g KH2PO4 1.4g Na2HPO4 2.1g MgSO4·7H2O 0.2g 琼脂 15.0g 蒸馏水 1000ml 探究•实践 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数 样品稀释涂布平板 微生物的培养与观察 菌落计数 土壤取样 制备培养基 4.实验步骤： 测细菌数：一般用104、105、106稀释液。 测放线菌：一般用103、104、105稀释液。 测真菌数：一般用102、103、104稀释液。 不同微生物在土壤中含量不同，分离不同的微生物采用不同的稀释度，以保证获得菌落数在30～300之间适于计数的平板。 B A C 在初次实验中，对于稀释的范围没有把握，怎样做才能保证从中选择出菌落数在30～300的平板进行计数？ 选用稀释范围更大的稀释液进行平板培养 探究•实践 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数 样品稀释涂布平板 微生物的培养与观察 菌落计数 土壤取样 制备培养基 4.实验步骤： 选择培养基（平行重复） 牛肉膏蛋白胨培养基 ①每个浓度至少设置4个平板，1、2、3平板是选择培养基（实验组，三个重复），4为牛肉膏蛋白胨培养基 接种：稀释液涂布平板法 探究•实践 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数 判断选择培养基是否具有筛选作用 设置两个空白对照 以验证培养基中是否含有杂菌 ②如何验证培养基中是否含有杂菌？ 不涂布稀释液的选择培养基和牛肉膏蛋白胨培养基 牛肉膏蛋白胨培养基 若对照的培养基中无菌落生长，则说明未被杂菌污染。 若牛肉膏蛋白胨培养基上的菌落数目大于选择培养基上的数目，则说明选择培养基具有筛选作用。 样品稀释涂布平板 微生物的培养与观察 菌落计数 土壤取样 制备培养基 4.实验步骤： 接种：稀释液涂布平板法 探究•实践 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数 样品稀释涂布平板 微生物的培养与观察 菌落计数 土壤取样 制备培养基 4.实验步骤： ①培养： ②观察： 根据不同微生物的需要，控制适宜的培养温度和培养时间。细菌一般在30～37 ℃的温度下培养1～2 d。 a．观察方法：每隔24 h统计一次菌落数目，选取菌落数目稳定时的记录作为结果，这样可以防止因培养时间不足而遗漏部分菌落。 b．记录菌落的特征： 包括菌落的形状、大小和颜色等。 探究•实践 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数 样品稀释涂布平板 微生物的培养与观察 菌落计数 土壤取样 制备培养基 4.实验步骤： 当菌落数目稳定时，选取菌落数在30-300的平板进行计数，同一稀释度下至少计数3个平板，求出平均值，并根据所对应的稀释度计算出样品中细菌的数目。设计如下表格记录并计数。 稀释度 104 105 106 107 1 2 3 平均值 1 2 3 平均值 1 2 3 平均值 1 2 3 平均值 菌落数/平板 探究•实践 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数 5.结果分析与评价 内容 现象 结论 有无杂菌污 染的判断 选择培养基 的筛选作用 样品的稀 释操作 重复组的结果 对照的培养皿中无菌落生长 未被杂菌污染 选择培养基中菌落数偏高 被杂菌污染 菌落形态多样，菌落数偏高 培养基中混入其他氮源 牛肉膏蛋白胨培养基上的菌落数目大于选择培养基上的数目 选择培养基具有筛选作用 得到3个或3个以上菌落数目在30～300的平板 操作成功 若选取同一种土样，统计结果应接近 得到的菌落不一定是分解尿素的细菌，还需要进一步的鉴定 过渡 本活动只是初步筛选了能分解尿素的细菌,对分离的菌种进行鉴定还需要借助生物化学的方法。你可以查阅相关资料,进一步设计实验来鉴定自己分离的菌种。 需要用“鉴别培养基” 一、原理： 脲酶催化尿素分解成氨→培养基碱性增强→ 酚红变红→脲酶阳性 CO(NH2)2 + H2O 2NH3 + CO2 脲酶 呈碱性，遇酚红指示剂呈 色。 红 在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂。培养某种细菌后，如果PH升高，指示剂将变红，说明该细菌能够分解尿素。 拓展延伸 尿素分解菌的鉴定 鉴别培养基 二、方法： 可以观察菌落周围是否出现红色环带，红色环带直径与菌落直径比值越大，说明分解能力越强。 液体培养基： 可以直接看液体的变色情况。 固体培养基： 在培养基中加入某种指示剂或化学药品(不影响微生物正常生长)，使微生物的某种代谢产物与培养基中的特定指示剂或化学药品发生反应。从而达到鉴定的作用。 伊红和美蓝培养基鉴别大肠杆菌 刚果红培养基鉴别纤维素分解菌 拓展延伸 尿素分解菌的鉴定 知识归纳 选择培养基和鉴别培养基的比较 比较项目 选择培养基 鉴别培养基 特殊成分 控制某一条件（如唯一氮源）或加入某种物质（如青霉素） 加入某种指示剂或化学药品 目的 抑制其他微生物生长，促进目的微生物的生长 与微生物的代谢产物或培养基中的成分发生特定反应 用途 培养、分离出特定微生物 鉴别不同的微生物 举例 培养酵母菌和霉菌，可在培养基中加入青霉素，抑制细菌的生长；用以尿素为唯一氮源的培养基来培养尿素分解菌 可用伊红—美蓝坚定饮用水或乳制品中是否有大肠杆菌（若有，菌落呈深紫色，并带有金属光泽） 将一定体积的水用细菌过滤器过滤后，将滤膜放到 伊红-美蓝 培养基上培养，大肠杆菌菌落呈现黑色，通过记算得出水样中大肠杆菌的数量。 伊红和美蓝培养基鉴别大肠杆菌 到社会中去 测定饮水中大肠杆菌数量的方法： 1.下列关于“土壤中分解尿素的细菌的分离与计数”实验操作的叙述，不正确的是（ ） A.利用稀释涂布平板法准确估计菌落数目的关键是有恰当的稀释度 B.若要判断选择培养基是否起到了选择作用，需要设置未接种的牛肉膏 蛋白胨培养基作为对照 C.该实验应采用稀释涂布平板法 D.用以尿素为唯一氮源且添加了酸碱缓冲剂的培养基来培养该细菌后不 会使酚红指示剂变红 对点训练 B 即学即练 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数 2.在做“土壤中分解尿素的细菌的分离与计数”的实验时，甲同学从对应稀释倍数为106的培养基上筛选出大约150个菌落，而其他同学只筛选出大约50个菌落。下列有关叙述错误的是（ ） A.甲同学出现这种结果的原因可能是土样不同，也可能是操作过程出了问题 B.将甲同学配制的培养基在不加土样的情况下进行培养作为空白对照， 可以证明培养基是否受到污染 C.让其他同学用与甲同学一样的土壤进行实验，如果结果与甲同学一致， 则可以证明甲同学无误 D.B、C选项的实验思路都遵循了实验的对照原则 对点训练 D 即学即练 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数 微生物的数量测定 选择培养基的作用 微生物选择培养获取纯培养物的方法-稀释涂布平板法 微 生 物 的 选 择 培 养 和 计 数 选择培养基 微生物的选择培养 科学实例 筛选原则 选择培养基的概念及举例 稀释涂布平板法的操作过程 间接计数法 — 稀释涂布平板法 直接计数 —计数板计数法 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数 培养基的制备 （1）土壤取样 （2）样品的稀释 （3）稀释涂布平板法接种 （4）微生物的培养与观察 实验设计 课堂小结 微生物的基本培养技术 A.在配制步骤②③的培养 基时，应先调pH后湿热 灭菌 B.步骤③纯化分解尿素的 细菌的原理是将聚集的细菌分散，以获得单菌落 C.步骤③采用稀释涂布平板法接种，并需向牛肉膏蛋白胨培养基中加入尿素 D.步骤④挑取③中不同种的菌落分别接种，比较不同种细菌分解尿素的能力 1.如图是研究人员从红棕壤中筛选高效分解尿素的细菌的过程示意图。下列有关叙述错误的是（ ） C 课堂练习 能力提升 2.如图是纯化微生物时采用的两种接种方法接种后培养的效果图，下列相关叙述正确的是（ ）   A.图甲三个平板中所用培养液的稀释倍数相同 B.图甲、乙均适合分离微生物，但乙不适合对微生物进行计数 C.图甲、图乙所用的接种工具分别是接种环和涂布器 D.图乙每次划线应从同一起点开始以便使聚集的菌种逐步稀释获得单菌落 B 课堂练习 能力提升 3.某些土壤细菌可将尿素分解成CO2和NH3供植物吸收和利用。以下说法错误的是（ ） A.土壤中的细菌之所以能分解尿素，是因为它们能合成脲酶 B.能分解尿素的细菌也能以尿素的分解产物CO2作为碳源 C.为了筛选可分解尿素的细菌，在配制培养基时应选择尿素作为唯一氮源 D.筛选分解尿素细菌的培养基含有KH2PO4的作用是提供无机盐和维持pH B 课堂练习 能力提升 4.平板划线法和稀释涂布平板法是接种微生物的两种常用方法，下列叙述正确的是（ ） A.采用稀释涂布平板法获得的菌落数往往多于实际的活菌数 B.平板划线法是将不同稀释度的菌液通过接种环连续划在固体培养基表面 C.稀释涂布平板法是将不同稀释度的菌液倒入液体培养基中进行培养 D.与平板划线法相比，稀释涂布平板法形成单菌落的效果更好 D 课堂练习 能力提升 5.原油中含有大量有害的、致癌的多环芳烃。土壤中有些细菌可以利用原油中的多环芳烃为碳源，在培养基中形成分解圈。为筛选出能高效降解原油的菌株并投入除污，某小组同学设计了相关实验。下列有关实验的叙述，不正确的是（ ） A.应配制来源于被原油污染土壤的土壤稀释液备用 B.配制以多环芳烃为唯一碳源的选择培养基 C.将土壤稀释液灭菌后接种到选择培养基上 D.在选择培养基上能形成分解圈的即为所需菌种 C 课堂练习 能力提升 6.某研究小组为了探究覆盖保鲜膜对西瓜表面微生物的种类和数量的影响，他们将覆盖保鲜膜保存了三天的西瓜的瓜瓤制备成浸出液，再将浸出液接种到培养基平板上进行观察。下列说法正确的是( ) A.应用液体培养基接种浸出液进行培养 B.应采用平板划线法对浸出液进行计数 C.每组至少设置三个平板，确保实验结果的准确性 D.只需要设置未接种瓜瓤浸出液的空白平板作对照 C 课堂练习 能力提升 7.养殖池中存在的有毒物质主要是氨及亚硝酸，这两种物质可由硝化细菌吸收利用。在“养殖池底泥中硝化细菌的分离和计数”实验中，下列说法正确的是（ ） A.需要配制添加一定浓度铵盐的牛肉膏蛋白胨培养基，以筛选硝化细菌 B.对采集底泥使用的工具进行灭菌,全部接种过程均需在酒精灯火焰旁进行 C.采用平板划线法进行分离和计数时,还需与未接种的空白培养基同时培养 D.若空白对照组上长出了菌落，需要在实验组数据的基础上减去空白对照组的菌落数 B 课堂练习 能力提升 9.下列有关稀释涂布平板法计数和显微镜直接计数法的叙述，不正确的是( ) A.利用血细胞计数板计数属于显微镜直接计数法，其缺点是不能区分死 菌与活菌 B.两种计数方法，其统计值与实际值相比，均有差异，但产生差异的原 因不同 C.两种计数方法均能在计数的同时观察到所研究微生物的形态特征 D.当菌落数目稳定时，一般选取菌落数在30～300的且差异不大的平板进 行计数 C 课堂练习 能力提升 课堂练习 能力提升 10.金黄色葡萄球菌是一种病原菌，它可耐受质量分数为7.5%的NaCl溶液。金黄色葡萄球菌在添加适量血液的血平板上生长时，可破坏菌落周围的红细胞，使其褪色。为检测鲜牛奶中是否存在金黄色葡萄球菌，科研人员设计了如图所示的流程。下列说法错误的是（ ） A. 振荡培养时应选用含质量分数为7.5%NaCl溶液的鉴别培养基 B. 振荡培养可使微生物与营养物质充分接触，提高培养液中的氧气含量 C. 若血平板中菌落周围出现透明圈，则初步说明鲜牛奶中存在金黄色葡萄球菌 D. 为使检测更严谨，应设置加灭菌的鲜牛奶但其他操作均与图示相同的对照组 人教版选择性必修3 感谢观看！ Multimedia Cloud Transcode (cloud.baidu.com) Lavf58.51.100 $粪便治病是黑科技，武汉大学的粪菌移植技术竟能逆转顽固疾病。别怀疑，今天老师就揭秘这项创新疗法如何重建肠道健康，拯救百万患者。核心答案是，武汉大学在粪菌移植领域有三大突破，前沿研究成果、专利技术创新和广泛临床应用。首先，研究进展显著。武汉大学通过动物实验证实，粪菌移植能有效治疗结肠炎和炎症性肠病，机制是重建肠道菌群，抑制炎症因子并增强免疫调节。例如移植后的小鼠结肠炎症状改善超80%。这项成果已发表于临床消化病杂志等期刊。其次，技术专利领先。武汉大学研发了慈溪市粪菌移植胶囊装置，通过磁吸附件固定肠道位置，确保药液缓慢释放，避免早期排出。这种创新设计已获国家专利，操作简单且安全性高，大幅提升治疗效率。最后，应用前景广阔。在武汉大学人民医院，粪菌移植已用于治疗腹泻、便秘及皮肤病等，单疗程有效率超90%，未来更拓展至抑郁症、帕金森病等领域。社区调查显示，近80%居民愿捐献粪便。推动技术普及肠道菌群是人体第二基因组用科技重塑微生态，武汉大学正引领医疗革命，为健康开辟全新路径。谢谢大家，今天就到这里，拜拜。