章末质量检测（2） 细胞工程-【优学精讲】2024-2025学年高中生物选择性必修第三册教用Word(人教版)

该教案聚焦细胞工程核心知识，涵盖植物体细胞杂交、动物细胞培养、胚胎工程等要点。通过猕猴桃杂交育种、辣椒素细胞培养等实例导入，衔接细胞结构与代谢知识，构建“理论-技术-应用”学习支架，梳理细胞工程操作流程与原理。 资料以最新科研案例（如“猪—猴嵌合体”培育、iPS细胞应用）为载体，突出科学思维与探究实践。如单克隆抗体制备题考查实验设计，培养严谨求实态度；胚胎工程题结合伦理讨论，强化社会责任。丰富的实例与检测题帮助学生深化生命观念，助力教师高效巩固教学效果。

章末质量检测（二）　细胞工程 （满分：100分） 一、单项选择题（本题共14小题，每小题2分，共28分。在每小题给出的四个选项中，只有一项是符合题目要求的） 1.（2024·江苏常州期末）下列关于利用中华猕猴桃和狗枣猕猴桃进行植物体细胞杂交的叙述，错误的是（　　） A.中华猕猴桃和狗枣猕猴桃存在生殖隔离，不宜使用杂交育种方法培育新品种 B.常采用酶解法制备原生质体，且原生质体的产量和活力与酶解时间呈正相关 C.发生融合后的原生质体中高尔基体的活动比较旺盛，以形成新的细胞壁 D.利用这种方法培育猕猴桃新品种的原理属于染色体变异 解析：B　中华猕猴桃和狗枣猕猴桃存在生殖隔离，通过杂交不能产生可育的后代，因此，不宜使用杂交育种方法培育新品种，A正确；获得原生质体的方法是酶解法，但原生质体的产量和活力与酶解时间未必呈正相关，随着酶解时间的延长，原生质体的产量会下降，B错误；与细胞壁形成有关的细胞器是高尔基体，因此，发生融合后的原生质体中高尔基体的活动比较旺盛，C正确；利用这种方法，即体细胞杂交培育猕猴桃新品种的原理属于染色体变异，D正确。 2.（2024·山东聊城期末）辣椒素是辣椒的主要呈味分子。除了可以从辣椒果实和种子中萃取，科学家使用植物细胞培养技术大规模生产辣椒素，技术路线如图。下列表述正确的是（　　） A.①过程需对外植体进行消毒，通常需要进行至少两次 B.愈伤组织是薄壁组织团块，细胞小、排列紧密，没有液泡，分裂能力强，分化能力弱 C.单细胞的获得一般需要用盐酸进行处理 D.辣椒素属于辣椒的初生代谢物 解析：A　①过程表示脱分化，需对外植体进行消毒，防止杂菌的干扰，通常需要进行至少两次，A正确；愈伤组织的分裂分化的能力强，B错误；盐酸处理会让单细胞失去活性，C错误；辣椒素属于辣椒的次生代谢物，D错误。 3.（2024·北京朝阳期末）用一定剂量的紫外线处理具有抗盐特性的拟南芥原生质体可使其染色体片段化，再利用此原生质体与水稻原生质体融合，以获得抗盐水稻植株。以下说法不正确的是（　　） A.用纤维素酶和果胶酶去除植物细胞的细胞壁 B.使用灭活的病毒诱导两种原生质体的融合 C.通过调整植物激素的比例诱导生芽或生根 D.利用一定浓度的盐水浇灌以筛选抗盐水稻植株 解析：B　植物细胞壁的主要成分是纤维素和果胶，因此可用纤维素酶和果胶酶去除植物细胞的细胞壁，A正确；灭活的病毒只能诱导动物细胞融合，不能诱导植物原生质体融合，B错误；通过调整植物激素的比例可诱导生芽或生根，生长素/细胞分裂素的值大于1，有利于生根，小于1有利于生芽，C正确；抗盐水稻植株具有抗盐特性，因此利用一定浓度的盐水浇灌可筛选抗盐水稻植株，D正确。 4.（2024·浙江联考模拟）无菌操作在微生物培养、植物组织培养和动物细胞培养中都至关重要。下列叙述正确的是（　　） A.生物技术实验中所有器皿、培养基及生物材料均需进行灭菌处理 B.酒精能使细胞中的蛋白质变性失活，95％的酒精用来消毒效果最好 C.动物细胞培养基配制时，加入抗生素即可达到无菌培养的目的 D.易分解的活性物质过滤除菌后，在无菌条件下加入灭菌的培养基中 解析：D　要对所有培养基和培养皿消毒，但是生物材料要根据实际情况来，比如说植物组织培养，外植体只能消毒，不能灭菌，不然高温下植物细胞会死亡，A错误；一般消毒用的是70％的酒精，B错误；抗生素只能杀灭细菌和一部分真菌，不能达到无菌的效果，C错误；易分解的活性物质应该用过滤灭菌，无菌条件下加入灭菌培养基，D正确。 5.现代生物工程的操作常常涉及到如图的流程，下列说法正确的是（　　） A.若图为核移植过程，则②从卵巢中获取的卵母细胞直接作为受体细胞和①供体细胞融合 B.若图为单克隆抗体的制备过程，需要筛出产生所需抗体的杂交瘤细胞 C.若图为试管动物的培育过程，需培育到原肠胚才能进行胚胎分割与胚胎移植 D.若图为植物体细胞杂交过程，则形成③常用灭活的病毒直接处理两种植物细胞 解析：B　若图为核移植过程，在体细胞核移植过程中，应选择处于MⅡ期的卵母细胞作为受体细胞，因此需要将卵母细胞培养至MⅡ期，不是直接作为受体，A错误；若图为单克隆抗体的制备过程，则①和②是经过免疫的B淋巴细胞和骨髓瘤细胞，形成融合细胞需要经过筛选，筛出产生所需抗体的杂交瘤细胞，B正确；若图为试管动物的培育过程，需培育到桑葚胚或者囊胚才能进行胚胎分割与胚胎移植，C错误；诱导原生质体融合的方法有物理法和化学法，物理法包括离心、振动、电刺激等，化学法一般是用聚乙二醇（PEG）作为诱导剂，灭活的病毒是常用来诱导动物细胞融合的，D错误。 6.乳头瘤病毒（HPV）感染是诱发宫颈癌的重要因素。HPV具有多种类型，其中的HPV16和HPV18属于高危型，可引起宫颈癌及宫颈上皮内高度病变。现对某就诊者的取样细胞进行培养，来进行确诊。下列说法不正确的是（　　） A.分散取样的细胞能剪碎，并可采用胰蛋白酶、胶原蛋白酶处理 B.培养取样细胞时，需要为这些细胞提供充足的营养条件、稳定的生长环境等 C.让取样细胞进行贴壁生长，若产生了接触抑制现象，则不属于HPV高危型 D.原代培养时需将培养瓶放在CO2培养箱中培养，传代培养时则不需要 解析：D　分散取样的细胞能剪碎，并可采用胰蛋白酶、胶原蛋白酶处理，分散成单个细胞，A正确；培养取样细胞时，需要为这些细胞提供充足的营养条件、稳定的环境等，让其正常生长，B正确；若被HPV感染成为癌细胞，则不会出现接触抑制现象，因此若出现接触抑制现象时，则可确定不属于HPV高危型，C正确；CO2培养箱中含有95％空气和5％ CO2，CO2的主要作用是维持培养液的pH，进行细胞培养时，都需用到CO2培养箱，D错误。 7.细胞毒素类药物能有效杀伤肿瘤细胞，但也会对健康细胞造成伤害，科学家将细胞毒素与单克隆抗体结合制成抗体－药物偶联物（ADC），ADC又被称作“生物导弹”，通常由抗体、接头和药物三部分组成，如图所示。下列相关叙述错误的是（　　） A.杂交瘤细胞释放单克隆抗体，体现了细胞膜具有一定的流动性 B.接头的结构不稳定会导致药物分子脱落，造成正常细胞被破坏 C.ADC中的抗体能特异性识别并杀伤肿瘤细胞 D.利用放射性同位素或荧光标记的单克隆抗体可定位诊断肿瘤、心血管畸形等疾病 解析：C　单克隆抗体由杂交瘤细胞通过胞吐的方式释放，体现了细胞膜具有一定的流动性，A正确；ADC通常由抗体、接头和药物三部分组成，如果接头的结构不稳定会导致药物分子脱落，则药物分子失去了靶向性，造成正常细胞被破坏，B正确；单克隆抗体能与抗原特异性结合，这种靶向作用使ADC中的药物对肿瘤细胞具有杀伤能力，不是抗体杀伤肿瘤细胞，C错误；利用放射性同位素或荧光标记的单克隆抗体可定位诊断肿瘤、心血管畸形等疾病，该过程利用抗原—抗体特异性结合原理来实现，D正确。 8.研究人员利用体细胞核移植技术成功培育出苏淮猪“龙凤胎”，主要步骤如下。相关叙述错误的是（　　） 步骤①：分离培养一对苏淮猪的耳组织体细胞，低温保存。 步骤②：从其他品种母猪卵巢中获取卵母细胞并培养。 步骤③：细胞核移植获得重构胚。 步骤④：将不同性别的多个胚胎移植到代孕母猪体内。 步骤⑤：孕育出苏淮小猪“龙凤胎”。 A.步骤①分离获取苏淮猪耳组织体细胞时需要使用胰蛋白酶、胶原蛋白酶、动物细胞培养液等 B.步骤②培养卵母细胞时，应一直培养到卵母细胞外出现1个极体 C.步骤③可将步骤①获得的体细胞直接显微注射到培养成熟的卵母细胞中 D.步骤④移植胚胎的性别可依据步骤①提供体细胞个体的性别确定 解析：C　步骤①分离获取苏淮猪耳组织体细胞时需要使用胰蛋白酶、胶原蛋白酶处理，目的是获得单细胞悬液，也需要动物细胞培养液等，以保持细胞的活性，A正确；步骤②培养卵母细胞时，应培养到减数分裂Ⅱ中期，因为此时卵母细胞具有受精能力，且卵母细胞外存在一个极体，B正确；步骤③可将步骤①获得的体细胞直接显微注射到培养成熟的去核卵母细胞中，C错误；步骤④移植胚胎的性别由步骤①中提供体细胞个体的性别确定，因此，可依据步骤①提供体细胞个体的性别来确定胚胎的性别，D正确。 9.如图为哺乳动物早期胚胎发育的过程，下列有关叙述正确的是（　　） A.过程a和b使胚胎中有机物的含量增加 B.Ⅰ、Ⅱ时期的胚胎中都含有全能细胞 C.Ⅱ时期细胞分化达到最大限度 D.胚胎移植必须使用处于Ⅱ或Ⅲ时期的胚胎 解析：B　过程a表示卵裂形成桑葚胚，过程b表示桑葚胚形成囊胚，这两个过程细胞均需要消耗能量，故胚胎中有机物的含量均减少，A错误；Ⅰ表示桑葚胚，含有的所有细胞都是全能细胞，Ⅱ表示囊胚，含有的内细胞团细胞为全能细胞，B正确；早期胚胎在Ⅱ囊胚时期才开始出现细胞分化，C错误；胚胎移植必须使用处于Ⅰ桑葚胚或Ⅱ囊胚时期的胚胎，D错误。 10.原肠运动是指囊胚细胞有规则地移动，使未来的内胚层和中胚层细胞迁入胚胎内部，而未来的外胚层细胞铺展在胚胎的表面，从而形成原肠胚，是早期胚胎发育最特殊的阶段，细胞会从几百个增加到几千、几万个。下列有关说法正确的是（　　） A.卵裂期胚胎中细胞数量不断增加，胚胎总体积不断增大 B.原肠胚开始出现细胞分化并形成两个胚层 C.取原肠胚外胚层细胞做染色体分析鉴定胚胎的性别 D.如果早期胚胎不能正常孵化，胚胎就无法继续发育 解析：D　胚胎发育的卵裂期的胚胎中细胞数目不断增加，但胚胎的总体积并不增加或略有缩小，A错误；细胞分化是从囊胚期开始出现的，B错误；切取囊胚期的滋养层细胞进行性别鉴定，C错误；胚胎内部逐渐出现囊胚腔，囊胚的扩大会导致透明带的破裂，胚胎伸展出来，这一过程叫作孵化。如果不能发生孵化，胚胎就无法继续发育，D正确。 11.食蟹猴是实验动物的最佳选择之一，我国科学家首次通过把食蟹猴的胚胎干细胞注射到猪的胚胎中，培育出了“猪—猴嵌合体”仔猪（如图所示）。下列相关叙述错误的是（　　） A.囊胚期的内细胞团将来发育成胎儿的各种组织，此嵌合胚胎包含两种动物的组织 B.仔猪没有表现出食蟹猴的性状是因为食蟹猴的基因在仔猪体内不能进行表达 C.胚胎干细胞培养过程中需要提供无菌、无毒的环境，适宜的温度、pH和渗透压等 D.若该实验成功则有望将人的胚胎干细胞注入猪早期胚胎内，培育出人体细胞发育成的器官 解析：B　囊胚期细胞开始出现分化，其中的内细胞团具有全能性，发育成胎儿的各种组织；此嵌合胚胎包含两种动物的组织，分别是食蟹猴和猪，A正确；分析题意，本技术最终培育出了“猪—猴嵌合体”仔猪，即仔猪中有食蟹猴的相关性状表达，B错误；胚胎干细胞培养过程中需要提供无菌、无毒的环境，适宜的温度、pH和渗透压等，以保证细胞正常生长，C正确；若该实验成功则有望将人的胚胎干细胞注入猪早期胚胎内，培育出人体细胞发育成的器官，该研究能够解决器官移植的供体不足问题，避免在器官移植过程中发生免疫排斥反应，D正确。 12.哺乳动物的单倍体胚胎干细胞是指只含有一套染色体、拥有类似于正常胚胎干细胞特性的细胞类群，可分为孤雌单倍体胚胎干细胞和孤雄单倍体胚胎干细胞两种类型，在研究隐性基因突变、表观遗传修饰和配子发育中具有独特的优势。下列叙述错误的是（　　） A.在体外培养条件下，单倍体胚胎干细胞可增殖而不发生细胞分化 B.单倍体胚胎干细胞可能由精子或卵细胞激活后发育形成，仍保持配子的生殖功能 C.单倍体胚胎干细胞具有发育的全能性，可诱导分化成各种功能的细胞、组织和器官 D.单倍体胚胎干细胞中不含等位基因，可直接培育成单倍体动物模型研究性状与基因的关系 解析：D　在体外培养条件下，在饲养层细胞上或在添加抑制因子的培养液中，单倍体胚胎干细胞能够维持不分化的状态，A正确；单倍体胚胎干细胞只含有一套染色体，可能由精子或卵细胞激活后发育形成，仍保持配子的生殖功能，B正确；单倍体胚胎干细胞具有发育的全能性，在培养液中加入分化诱导因子，如牛磺酸、丁酰环腺苷酸等化学物质时，可诱导分化成各种功能的细胞、组织和器官，C正确；单倍体胚胎干细胞中不含等位基因，但动物细胞核具有全能性，需要核移植技术才能培育成单倍体动物，D错误。 13.细胞工程和胚胎工程技术为优良种畜的快速繁殖带来了无限生机。下图是优质奶牛的几种操作技术示意图，有关叙述错误的是（　　） A.为使更多的胚胎移植成功，需对供体母牛与受体母牛进行同期发情处理 B.防止多精入卵的两道屏障是先发生“卵细胞膜反应”，接着发生“透明带反应” C.卵裂时通过有丝分裂增殖，细胞的细胞核与细胞质两者的体积之比逐渐变大 D.早期囊胚a、b、c的基因型不一定相同，d可直接移植给受体孕育成遗传物质相同的后代 解析：B　为使更多的胚胎移植成功，需对供体母牛与受体母牛进行同期发情处理，保证胚胎能够成功着床进行发育，A正确；防止多精入卵的两道屏障是先发生“透明带反应”，接着发生“卵细胞膜反应”，B错误；卵裂过程通过有丝分裂方式增殖，细胞卵裂过程中，细胞数量增加，胚胎总体积不增加，单个细胞体积减小，因此细胞的细胞核与细胞质两者的体积之比逐渐变大，C正确；据图可知，三种早期囊胚由不同受精卵发育而来，故a、b、c细胞核中的遗传物质不一定相同，其基因型不一定相同，d是经过胚胎分割形成的两个健康的胚胎，可直接移植给受体，D正确。 14.（2024·山东威海期末）科学家通过体外诱导黑鼠成纤维细胞获得了诱导多能干细胞（iPS细胞），继而利用iPS细胞培育出了嵌合体克隆鼠，培育流程如下：先将取自白鼠的2细胞胚胎进行特殊处理，使之形成的囊胚中内细胞团不能发育；然后将获得的iPS细胞注入该囊胚中形成重组囊胚；最后将重组囊胚移植到代孕白鼠体内，可得到克隆鼠。下列说法错误的是（　　） A.iPS细胞需置于含有95％空气和5％CO2混合气体的CO2培养箱中培养 B.注入iPS细胞的重组囊胚中的内细胞团发育成了克隆鼠的各种组织 C.需用激素对代孕白鼠进行同期发情处理 D.欲确定嵌合体克隆鼠的性别，需在胚胎移植前取样鉴定 解析：D　嵌合体克隆鼠的性别由提供iPS细胞的黑鼠决定，不需在胚胎移植前取样鉴定，D错误。 二、多项选择题（本题共5小题，每小题3分，共15分。在每小题给出的四个选项中，有两个或两个以上选项符合题目要求，全部选对得3分，选对但不全的得1分，有选错的得0分） 15.（2024·河北邯郸期末）微载体培养动物细胞技术是目前公认的最有发展前途的一种动物细胞大规模培养技术，其兼具悬浮培养和贴壁培养的优点。培养的细胞贴附在微载体表面，可以在较短时间内得到大量的细胞，细胞传代只需要添加新的微载体，基本上可避免细胞在胰蛋白酶消化过程中受到的损伤。下列叙述正确的是（　　） A.动物细胞必须贴壁才可以在培养液中生长 B.培养液中添加微载体可以使细胞在悬浮状态下培养 C.培养动物细胞时应保证无菌、无毒的环境及适宜的温度、pH等条件 D.在培养动物细胞时提供的气体环境应为95％的空气和5％的CO2 解析：CD　动物细胞培养时，有些细胞需要贴壁生长，而有些细胞可以悬浮生长，如肿瘤细胞，A错误；微载体为细胞提供附着位点，使细胞能够在微载体上贴壁生长，B错误；培养动物细胞时应保证无菌、无毒的环境及适宜的温度、pH等条件，C正确；在培养动物细胞时应提供的气体环境为95％的空气和5％的CO2，D正确。 16.（2024·山东烟台模拟）黄曲霉毒素在保存不当的霉变粮油食品中含量较高，具有很强的致癌性。研究表明黄曲霉毒素能引起细胞中粗面内质网上的核糖体不断脱落。科研人员用黄曲霉毒素偶联抗原制备出单克隆抗体以检测食品中黄曲霉毒素的含量。下列叙述正确的是（　　） A.当人误食黄曲霉毒素后，肠腺细胞可能发生消化酶的合成分泌减少 B.可用电融合法、PEG融合法或灭活病毒诱导法诱导B淋巴细胞和骨髓瘤细胞的融合 C.细胞融合体现了细胞膜的流动性，杂交瘤细胞体外增殖体现了细胞的全能性 D.单克隆抗体用于检测食品中黄曲霉毒素的原理是抗原—抗体杂交 解析：ABD　当人误食黄曲霉毒素后，能引起肠腺细胞中粗面内质网上的核糖体不断脱落，可能发生消化酶的合成分泌减少，A正确；可用电融合法、PEG融合法或灭活病毒诱导法等物理、化学或生物的方法诱导B淋巴细胞和骨髓瘤细胞的融合，B正确；细胞融合体现了细胞膜的流动性，杂交瘤细胞体外增殖并没有形成新个体或分化成其他各种细胞，不能体现细胞的全能性，C错误；利用抗原—抗体杂交原理，单克隆抗体可用于检测食品中的黄曲霉毒素，D正确。 17.第三次全国大熊猫野外种群调查显示，全国野生大熊猫不足1 600只，为保护和繁殖大熊猫，科研人员进行了如图实验，相关叙述不正确的是（　　） A.克隆熊猫培育成功的部分原因是卵细胞质具有调控细胞核发育的作用 B.图中用激素处理可使供体超数排卵，代孕受体在移植前不需要进行处理 C.图中的熊猫甲与亲代雌性大熊猫的性状基本相同 D.熊猫乙和熊猫丙的基因型和表型一定都相同 解析：BCD　核移植时卵细胞质具有调控细胞核发育的作用是克隆成功的部分原因，A正确；代孕受体在胚胎移植前需要经过同期发情处理，以便早期胚胎成功植入或着床，B错误；发育成克隆熊猫甲的重组细胞的细胞质来自亲代雌性熊猫的卵母细胞，细胞核来自亲代的卵细胞与精子受精形成的受精卵，其性状由亲代雌雄个体共同决定，C错误；虽然熊猫乙、熊猫丙由同一受精卵发育而来，遗传物质相同，但环境因素对其性状表现也有一定的影响，故二者表型未必完全一致，D错误。 18.（2024·江苏苏州期末）人类病原微生物在人与实验动物上症状表现和代谢差异大，导致实验结果无法准确应用于人体。人源化肝脏嵌合鼠的成功构建提供了一种新的实验动物模型，下图为建立人源化肝脏嵌合鼠的主要流程，相关叙述正确的有（　　） A.选择免疫缺陷的小鼠可以防止其对肝毒性基因的免疫排斥 B.可将iPS细胞在一定条件下定向分化成有功能的肝细胞，用于移植 C.人源化肝脏嵌合鼠是含有人、鼠各两个染色体组的四倍体 D.人源化肝脏嵌合鼠适用于人类病毒性肝炎的研究 解析：ABD　选择免疫缺陷的小鼠的免疫功能下降，可防止其对肝毒性基因的免疫排斥，A正确；可通过诱导iPS细胞分化成有功能的肝细胞用于移植，B正确；人源化肝脏嵌合鼠是含有人、鼠的细胞，但是两种细胞并没有融合，仍然是二倍体，C错误；人源化肝脏嵌合鼠可用作感染模型，则人源化肝脏嵌合鼠适用于人类病毒性肝炎的研究，D正确。 19.（2024·江苏徐州期中）我国科研人员将一个极体注入修饰后的次级卵母细胞后（类似受精作用），最终创造出“孤雌生殖”的小鼠。实验过程如下图所示。下列相关叙述错误的是（　　） A.囊胚期内细胞团细胞分化成了滋养层细胞 B.通过电融合法可以使第二极体和次级卵母细胞融合 C.孤雌生殖产生的小鼠的体细胞中只有一条X或Y染色体 D.“孤雌小鼠”的诞生过程体现了体细胞细胞核的全能性 解析：ACD　囊胚期时，胚胎进一步发育，细胞逐渐分化。聚集在胚胎一端的细胞形成内细胞团，而沿透明带内壁扩展和排列的细胞，称为滋养层细胞，故滋养层细胞不是由内细胞团分化的，A错误；可通过电融合法使两个细胞发生融合，故电融合法可以使第二极体和次级卵母细胞融合，B正确；孤雌生殖产生的小鼠是由第二极体和次级卵母细胞融合形成（类似于受精作用），极体和修饰后的次级卵母细胞都只有X染色体，没有Y染色体，故孤雌小鼠的体细胞中应不含Y染色体，且体细胞应有两条X染色体，C错误；动物细胞核移植形成的个体原理为体细胞细胞核的全能性，而孤雌小鼠的形成，类似于受精作用，不能体现体细胞细胞核的全能性，D错误。 三、非选择题（本题共4小题，共57分） 20.（14分）花椰菜和黑芥均为十字花科植物，花椰菜易患黑腐病（致病菌为黄单胞杆菌，属细菌）。拟通过植物体细胞杂交技术（如图1），将黑芥的抗黑腐病基因引入到花椰菜中。 （1）在用酶解法制备原生质体时，需先用较高渗透压的溶液处理植物细胞，使细胞处于微弱的失水状态，然后用纤维素酶和果胶酶消化去除细胞壁，获得原生质体。 （2）用不同剂量紫外线处理黑芥原生质体，统计愈伤组织数和再生植株率，结果如图2。 由图2可知，处理黑芥原生质体的适宜紫外线剂量为0.1J·cm－2，此处理下融合细胞的再生能力较强，既能得到大量愈伤组织，再生植株率也最高。 （3）杂种细胞经组织培养发育成植株，该过程所用培养基中包括水、无机盐、有机营养等营养物质，此外还需加入一定浓度和比例的植物激素，以调节细胞的发育方向。 解析：（1）根据渗透原理，外界溶液浓度高于细胞液浓度时，细胞会失水；植物细胞壁的主要成分是纤维素和果胶，因此去除植物细胞壁应该用纤维素酶和果胶酶。（2）由图2可知，紫外线剂量为0.1 J·cm－2时，细胞的再生能力较强，既能得到大量愈伤组织，再生植株率较高，因此处理黑芥原生质体的适宜紫外线剂量为0.1 J·cm－2。（3）植物组织培养时，培养基中包括水、无机盐、有机营养等营养物质，此外还需加入一定浓度和比例的植物激素（生长素和细胞分裂素），以调节细胞的发育方向。 21.（14分）回答下列有关动物细胞培养的问题： （1）现用某种大分子染料对细胞进行染色时，观察到死细胞能被染色，而活细胞不能被染色，原因是活细胞的细胞膜具有选择透过性，大分子染料不能进入活细胞内（或死细胞的细胞膜丧失了选择透过性，大分子染料能够进入死细胞内而着色）。 （2）检查某种毒物是否能改变细胞染色体的数目，最好选用处于有丝分裂中期的细胞在显微镜下进行观察。 （3）在细胞培养过程中，通常在冷冻（或超低温、液氮）条件下保存细胞。因为在这种条件下，细胞中酶的活性降低，细胞新陈代谢的速率降低。 解析：（1）活细胞的细胞膜具有选择透过性，大分子染料不能通过，所以活细胞不能被染色；死细胞的细胞膜失去了选择透过性，大分子染料可以通过，所以死细胞能被大分子染料染色。（2）有丝分裂中期时，染色体形态固定、数目清晰，是观察染色体数目的最佳时期。（3）在细胞培养过程中，通常在冷冻（或超低温、液氮）条件下保存细胞。因为在这种条件下，细胞中酶的活性降低，细胞新陈代谢的速率降低。 22.（14分）据第三次全国大熊猫野外种群调查，全世界野生大熊猫数量不足1 600只，因此，如何保护和繁殖大熊猫是亟待解决的问题，现设计如图所示繁殖过程。请回答下列问题： （1）获取的精子需要获能处理后才能参与受精，用促性腺激素处理雌性大熊猫可以促进排卵，如果卵子来自卵巢，则需要培养至MⅡ期才能参与受精。 （2）培育克隆熊猫采用的技术有细胞核移植、早期胚胎的培养、胚胎移植（答出2条即可）等，克隆熊猫体细胞中的遗传物质来源是细胞核遗传物质来自雌性和雄性大熊猫，细胞质遗传物质来自雌性大熊猫。 （3）胚胎移植需要对供体和受体进行同期发情处理，通常选桑葚胚或囊胚期进行移植。胚胎移植的实质是早期胚胎在相同生理环境条件下空间位置的转移　，进行胚胎移植的优势是可以充分发挥雌性优良个体的繁殖潜力。 23.（15分）人心肌细胞中的肌钙蛋白由三种结构不同的亚基组成，即肌钙蛋白T（cTnT）、肌钙蛋白I（cTnI）和肌钙蛋白C（cTnC），其中cTnI在血液中含量上升是心肌损伤的特异性指标。为制备抗cTnI的单克隆抗体，科研人员完成了以下过程。请据图分析回答下列问题： （1）细胞培养中，为防止有害代谢物的积累，可采用定期更换培养液的方法。每隔2周用cTnI作为抗原注射小鼠1次，共注射3次，其目的是加强免疫，刺激小鼠机体产生更多的B淋巴细胞，最后一次免疫后第3天，取脾脏内部分组织制成细胞悬液与骨髓瘤细胞诱导融合，常用的化学诱导因素是聚乙二醇（PEG）。 （2）甲、乙、丙中，只含杂交瘤细胞的是乙和丙，过程②表示将乙细胞接种到多孔培养板上，进行抗体阳性检测，之后稀释、培养、再检测，并多次重复上述操作，其目的是筛选获得能产生特异性强、灵敏度高的抗cTnI抗体的杂交瘤细胞。 解析：（1）细胞培养中，为防止有害代谢物的积累对细胞自身造成危害，可采用定期更换培养液的方法，以便清除代谢物。每隔2周用cTnI作为抗原注射小鼠1次，共注射3次，其目的是加强免疫，刺激小鼠机体产生更多的B淋巴细胞；诱导动物细胞融合常用的化学诱导因素是聚乙二醇（PEG）。（2）图中过程①②依次表示单克隆抗体制备过程中的两次筛选，其中过程①第一次筛选是用选择培养基筛选出杂交瘤细胞，过程②第二次筛选是通过克隆化培养和抗体检测筛选出能产生抗cTnI抗体的杂交瘤细胞。因此，甲、乙、丙中，只含杂交瘤细胞的是乙和丙；过程②的目的是筛选获得能产生特异性强、灵敏度高的抗cTnI抗体的杂交瘤细胞。 9 / 9 学科网（北京）股份有限公司 $