1.2.1微生物的基本培养技术（导学案）生物人教版选择性必修3

该高中生物学导学案聚焦微生物基本培养技术，涵盖培养基的种类、成分及配制，消毒灭菌原理与方法，微生物接种分离和纯培养（以酵母菌为例）等核心知识点。通过小组讨论、探究实践等方式导入，引导学生从培养基基础认知过渡到无菌技术操作，再到纯培养过程，构建连贯的学习支架。 这份导学案突出探究实践与科学思维培养，设置“探究•实践”环节引导学生分析培养基成分、比较消毒灭菌差异，结合具体实验步骤（如倒平板、划线接种）强化操作技能。习题设计针对性强，覆盖核心知识点，助力学生在实践中理解生命观念（结构与功能观），提升科学探究能力和严谨实验态度。

1.2.1微生物的基本培养技术（第一课时） （导学案） 1.概述培养基的种类、成分和配制方法。 2.通过对培养皿和培养基进行灭菌，了解消毒和灭菌的原理及方法。 3.通过对酵母菌进行纯培养，理解并掌握微生物接种、分离和培养的基本原理和过程。 1.微生物纯培养的基本操作要求，微生物选择培养的原理。 2.酵母菌的纯培养。 一、培养基的配制 1.培养基　 （1）概念：人们按照 对营养物质的不同需求，配制出的供其生长繁殖的 　。 （2）作用： 、 、鉴定、保存微生物或积累其代谢物。  （3）类型 培养基种类 划分标准 培养基特点 作用 培养基 加凝固剂，如 微生物的分离与鉴定，活菌计数，保藏菌种 半固体培养基 容器放倒不致流出，剧烈震动则破散 观察微生物的运动、分类鉴定 培养基 不加凝固剂 常用于工业生产 2.培养基的配制 （1）营养成分：水、无机盐、 、 等。  （2）某种常见的细菌培养基——牛肉膏蛋白胨培养基的营养构成如下表。 组分 含量 提供的主要营养 牛肉膏 5 g 等 蛋白胨 10 g 等 NaCl 5 g 无机盐 H2O 定容至1 000 mL 水 （3）pH 二、无菌技术 1.获得 的微生物培养物的关键是 。无菌技术主要包括 和 。  2.消毒 指使用较 的物理、化学或生物等方法杀死物体 或内部 微生物。  3.灭菌 指使用 的理化方法杀死物体内外 的微生物，包括 和 。   三、微生物的纯培养　　　 1.纯培养 （1）概念：由 繁殖所获得的微生物群体称为 ，获得纯培养物的过程就是 。  （2）步骤：配制 、 、接种、 培养。  2.探究实践 （1）菌落：分散的微生物在适宜的固体培养基表面或内部可以繁殖形成肉眼可见的、有一定形态结构的 ，这就是菌落。  （2）方法：采用 和 　将单个微生物分散在固体培养基上，之后经培养得到的单菌落一般是由单个微生物繁殖形成的 。  （3）步骤 ①制备培养基 a.配制培养基 称取去皮的马铃薯200 g，切成小块，加水1 000 mL，加热煮沸至马铃薯软烂，用纱布过滤。向滤液中加入20 g葡萄糖（也可用蔗糖代替）、15~20 g琼脂，用蒸馏水定容至1 000 mL。 b.灭菌 将配制好的培养基转移到锥形瓶中，加棉塞，包上牛皮纸，并用皮筋勒紧，再放入高压蒸汽灭菌锅中，在压力为 、温度为 _的条件下，灭菌15~30 min。将5~8套培养皿包成一包，用几层牛皮纸包紧，放入干热灭菌箱内，在160~170 ℃灭菌2 h。  c.倒平板 待培养基冷却至 左右时，在酒精灯火焰附近倒平板。  倒平板注意事项： 。  ②接种和分离酵母菌 通过 在固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。经数次划线后培养，可以分离得到 。  ③培养酵母菌 完成平板划线后，待菌液被培养基吸收，将接种后的平板和一个未接种的平板倒置，放入 左右的恒温培养箱中培养 。 一、探究•实践→培养基的配制 【小组讨论】 1.培养基的概念、作用、种类及用途？ 2.结合教材P10中“表1-1 1000ml牛肉膏蛋白胨培养基的营养构成”，分析培养微生物的培养基必备营养成分有哪些？ 3.配制培养基时，如何满足不同微生物的特殊需求？举例说明。 二、探究•实践→无菌技术 【小组讨论】1.获得纯净的微生物培养物的关键？ 2.无菌技术包括什么？消毒和灭菌的对象？ 3.常用的消毒和灭菌方法？ 4.概括实验前、中、后防止杂菌污染的具体措施。 5.(旁栏思考)无菌技术除用来防止培养物被污染外，还有什么作用？ 2、 探究•实践→微生物的纯培养 【小组讨论】 1.培养物、纯培养物、纯培养的概念？ 2.什么是菌落？单菌落？ 3.获得单菌落的方法？ 4.酵母菌的纯培养的基本步骤？（注意倒平板和接种的具体操作） 1.下列关于培养基成分的叙述，错误的是（ ）​ A. 碳源是微生物生长繁殖所需能量的主要来源​ B. 氮源用于合成微生物的蛋白质、核酸等物质​ C. 琼脂是固体培养基中常用的凝固剂，也能为微生物提供营养​ D. 无机盐可参与微生物细胞的组成，也能调节培养基的渗透压​ 2.某同学要配制供酵母菌生长的培养基，下列培养基类型与用途匹配正确的是（ ）​ A. 选择培养基 —— 分离纯化酵母菌​ B. 固体培养基 —— 观察酵母菌的菌落形态​ C. 液体培养基 —— 对酵母菌进行计数​ D. 鉴别培养基 —— 扩大培养酵母菌种群​ 3.下列关于消毒和灭菌的说法，错误的是（ ）​ A. 消毒的目的是杀死物体表面或内部的部分微生物​ B. 灭菌是指杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子​ C. 接种环常用灼烧灭菌法，培养皿常用干热灭菌法​ D. 煮沸消毒法能杀死所有微生物，可用于培养基的灭菌​ 4.配制培养基时，下列操作步骤的顺序正确的是（ ）​ ①调节 pH ②计算称量 ③灭菌 ④溶解 ⑤倒平板​ A. ②④①③⑤ B. ②①④③⑤ C. ④②①③⑤ D. ②④③①⑤​ 5.下列关于微生物接种方法的叙述，错误的是（ ）​ A. 平板划线法能将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基表面​ B. 稀释涂布平板法可用于微生物的计数和纯培养​ C. 平板划线法中，每次划线后接种环都要进行灭菌处理​ D. 两种接种方法都需要在无菌条件下进行，且接种工具都需灼烧灭菌​ 6.某实验室配制的培养基在灭菌后出现了浑浊现象，下列分析合理的是（ ）​ A. 培养基配制时 pH 调节不当​ B. 灭菌过程中温度未达到规定要求​ C. 培养基中加入了过多的凝固剂​ D. 灭菌后未及时倒平板，培养基冷却凝固​ 7.为获得酵母菌的纯培养物，下列操作中不必要的是（ ）​ A. 对培养皿、培养基进行严格灭菌​ B. 接种前对接种工具进行灼烧灭菌​ C. 接种过程在酒精灯火焰旁进行​ D. 接种后将培养皿倒置在 4℃冰箱中培养​ 8.关于微生物培养中相关操作的原理，下列解释错误的是（ ）​ A. 培养基灭菌后冷却至 50℃左右倒平板，是为了防止高温杀死接种的微生物​ B. 平板划线法中最后一次划线不与首次划线相连，是为了保证最后划线区域出现单个菌落​ C. 培养酵母菌时将培养皿倒置，是为了防止皿盖上的冷凝水滴落污染培养基​ D. 稀释涂布平板法中进行梯度稀释，是为了使微生物在培养基上均匀分布，便于计数​ 1.思考讨论：培养基种类及用途？ 2.怎样选择出抗氨苄青霉素能力的细菌? / 学科网（北京）股份有限公司 $ 1.2.1微生物的基本培养技术（第一课时） （导学案） 1.概述培养基的种类、成分和配制方法。 2.通过对培养皿和培养基进行灭菌，了解消毒和灭菌的原理及方法。 3.通过对酵母菌进行纯培养，理解并掌握微生物接种、分离和培养的基本原理和过程。 1.微生物纯培养的基本操作要求，微生物选择培养的原理。 2.酵母菌的纯培养。 一、培养基的配制 1.培养基　 （1）概念：人们按照微生物 对营养物质的不同需求，配制出的供其生长繁殖的 营养基质　。 （2）作用： 培养 、分离 、鉴定、保存微生物或积累其代谢物。  （3）类型 培养基种类 划分标准 培养基特点 作用 固体 培养基 物理性质 加凝固剂，如琼脂 微生物的分离与鉴定，活菌计数，保藏菌种 半固体培养基 容器放倒不致流出，剧烈震动则破散 观察微生物的运动、分类鉴定 液体 培养基 不加凝固剂 常用于工业生产 2.培养基的配制 （1）营养成分：水、无机盐、碳源 、氮源 等。  （2）某种常见的细菌培养基——牛肉膏蛋白胨培养基的营养构成如下表。 组分 含量 提供的主要营养 牛肉膏 5 g 碳源、氮源、磷酸盐和维生素 等 蛋白胨 10 g 碳源、氮源和维生素 等 NaCl 5 g 无机盐 H2O 定容至1 000 mL 水 （3）pH 二、无菌技术 1.获得纯净 的微生物培养物的关键是防止杂菌污染 。无菌技术主要包括消毒 和灭菌 。  2.消毒 指使用较温和 的物理、化学或生物等方法杀死物体表面 或内部 一部分 微生物。  3.灭菌 指使用强烈 的理化方法杀死物体内外所有 的微生物，包括芽孢 和孢子 。   三、微生物的纯培养　　　 1.纯培养 （1）概念：由单一个体 繁殖所获得的微生物群体称为纯培养物 ，获得纯培养物的过程就是纯培养 。  （2）步骤：配制培养基 、灭菌 、接种、分离 培养。  2.探究实践 （1）菌落：分散的微生物在适宜的固体培养基表面或内部可以繁殖形成肉眼可见的、有一定形态结构的子细胞群体 ，这就是菌落。  （2）方法：采用平板划线法 和稀释涂布平板法　将单个微生物分散在固体培养基上，之后经培养得到的单菌落一般是由单个微生物繁殖形成的 纯培养物 。  （3）步骤 ①制备培养基 a.配制培养基 称取去皮的马铃薯200 g，切成小块，加水1 000 mL，加热煮沸至马铃薯软烂，用纱布过滤。向滤液中加入20 g葡萄糖（也可用蔗糖代替）、15~20 g琼脂，用蒸馏水定容至1 000 mL。 b.灭菌 将配制好的培养基转移到锥形瓶中，加棉塞，包上牛皮纸，并用皮筋勒紧，再放入高压蒸汽灭菌锅中，在压力为100 kPa 、温度为121 ℃ _的条件下，灭菌15~30 min。将5~8套培养皿包成一包，用几层牛皮纸包紧，放入干热灭菌箱内，在160~170 ℃灭菌2 h。  c.倒平板 待培养基冷却至50 ℃ 左右时，在酒精灯火焰附近倒平板。  倒平板注意事项： 温度控制在50 ℃左右；在酒精灯火焰附近操作；冷凝后平板倒置 。  ②接种和分离酵母菌 通过接种环 在固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。经数次划线后培养，可以分离得到单菌落 。  ③培养酵母菌 完成平板划线后，待菌液被培养基吸收，将接种后的平板和一个未接种的平板倒置，放入 28 ℃ 左右的恒温培养箱中培养 24~48 h 。 一、探究•实践→培养基的配制 【小组讨论】 1.培养基的概念、作用、种类及用途？ 2.结合教材P10中“表1-1 1000ml牛肉膏蛋白胨培养基的营养构成”，分析培养微生物的培养基必备营养成分有哪些？ 3.配制培养基时，如何满足不同微生物的特殊需求？举例说明。 1.①概念：人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质。 ②作用：用以培养、分离、鉴定、保存微生物或积累其代谢物。 ③种类及用途：液体培养基（扩大培养、工业生产） 固体培养基（微生物的分离、鉴定、活菌计数） 2.（1）一般都含有碳源、氮源、水、无机盐 （2）特殊需求：满足微生物对pH、特殊营养物质、 O2 的需求。 3.①培养乳酸杆菌时，需要在培养基中添加维生素②培养霉菌时，需要将培养基pH调至酸性 ③培养细菌时，需要将培养基pH调至中性或弱碱性 ；④培养厌氧微生物时，需要提供无氧的条件。 二、探究•实践→无菌技术 【小组讨论】1.获得纯净的微生物培养物的关键？ 2.无菌技术包括什么？消毒和灭菌的对象？ 3.常用的消毒和灭菌方法？ 4.概括实验前、中、后防止杂菌污染的具体措施。 5.(旁栏思考)无菌技术除用来防止培养物被污染外，还有什么作用？ 1.获得纯净的微生物培养物的关键是防止杂菌污染 2.无菌技术包括：消毒 灭菌 消毒的对象：用较为温和的物理、化学或生物等方法，杀死物体表面或内部一部分微生物。针对操作的空间、操作者的手。 灭菌的对象：指使用强烈的理化方法杀死物体内外所有微生物，包括芽孢和孢子。针对培养微生物的器皿、接种用具和培养基。 3.（1）常用的消毒方法：①煮沸消毒 ②巴氏消毒 ③化学药物消毒④紫外线消毒 ⑤生物消毒法 （2）常用的灭菌方法：①湿热灭菌 ②干热灭菌 ③灼烧灭菌 4.实验前： 对操作空间、操作人员消毒 对所用器皿、接种用具和培养基灭菌 操作时： 避免已经灭菌处理的材料用具与周围物品接触（再次污染）。 实验操作在超净工作台上并在酒精灯火焰附近进行。 实验后： 培养基需灭菌之后再丢弃，避免污染环境或感染操作者。 5. 还能有效避免操作者自身被微生物感染。 2、 探究•实践→微生物的纯培养 【小组讨论】 1.培养物、纯培养物、纯培养的概念？ 2.什么是菌落？单菌落？ 3.获得单菌落的方法？ 4.酵母菌的纯培养的基本步骤？（注意倒平板和接种的具体操作） 1.①.培养物：在微生物学中，将接种于培养基内，在合适条件下形成的含有特定种类微生物的群体。 ②纯培养物：由单一个体繁殖所获得的微生物群体。③纯培养：获得纯培养物的过程。 2. ①菌落：分散的微生物在适宜的固体培养基表面或内部可以繁殖形成肉眼可见的、有一定形态结构的子细胞群体。 ②单菌落：一般是由单个微生物繁殖形成的纯培养物。 3. ①平板划线法 ②稀释涂布平板法 4. （1）制备培养基① 配制培养基② 灭菌③ 倒平板 （2） 接种和分离酵母菌 （3）培养酵母菌 1.下列关于培养基成分的叙述，错误的是（ ）​ A. 碳源是微生物生长繁殖所需能量的主要来源​ B. 氮源用于合成微生物的蛋白质、核酸等物质​ C. 琼脂是固体培养基中常用的凝固剂，也能为微生物提供营养​ D. 无机盐可参与微生物细胞的组成，也能调节培养基的渗透压​ ​ 答案：C 解析：琼脂是从藻类中提取的多糖，作为固体培养基的凝固剂，其化学性质稳定，不能被微生物分解利用，因此不能为微生物提供营养，仅起到固定培养基形态的作用，C 选项表述错误。A 选项，碳源是微生物生长的必需营养物质，可为微生物的代谢提供能量，是能量的主要来源，表述正确；B 选项，蛋白质、核酸的组成元素均含氮，因此氮源是合成这些物质的重要原料，表述正确；D 选项，无机盐如钾离子、钙离子等可参与微生物细胞结构的组成，同时也能调节培养基的渗透压，维持微生物细胞的正常形态和生理功能，表述正确。​ 2.某同学要配制供酵母菌生长的培养基，下列培养基类型与用途匹配正确的是（ ）​ A. 选择培养基 —— 分离纯化酵母菌​ B. 固体培养基 —— 观察酵母菌的菌落形态​ C. 液体培养基 —— 对酵母菌进行计数​ D. 鉴别培养基 —— 扩大培养酵母菌种群​ 答案：B​ 解析：固体培养基中添加了凝固剂（如琼脂），微生物在固体培养基上生长会形成特定形态的菌落，因此可用于观察酵母菌的菌落形态，B 选项匹配正确。A 选项，分离纯化酵母菌常用平板划线法或稀释涂布平板法，对应的培养基为固体培养基，选择培养基的作用是筛选特定微生物（如抑制杂菌生长、促进目标菌生长），并非分离纯化的核心匹配类型，表述错误；C 选项，对酵母菌进行计数需统计单个菌落的数量，对应的是固体培养基（稀释涂布平板法），液体培养基中酵母菌均匀分散，无法计数，表述错误；D 选项，扩大培养酵母菌种群需为酵母菌提供充足的营养和生长空间，应使用液体培养基（营养物质分布均匀，酵母菌繁殖速度快），鉴别培养基的作用是区分不同种类的微生物，表述错误。​ 3.下列关于消毒和灭菌的说法，错误的是（ ）​ A. 消毒的目的是杀死物体表面或内部的部分微生物​ B. 灭菌是指杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子​ C. 接种环常用灼烧灭菌法，培养皿常用干热灭菌法​ D. 煮沸消毒法能杀死所有微生物，可用于培养基的灭菌​ 答案：D​ 解析：煮沸消毒法的原理是通过高温破坏微生物的结构，但其温度一般为 100℃（常压下），只能杀死物体表面或内部的部分微生物，无法杀死芽孢和孢子（芽孢和孢子对高温、干燥等环境具有极强的抵抗力），因此不能用于培养基的灭菌。培养基的灭菌需采用高压蒸汽灭菌法（121℃、100kPa 下维持 15-30 分钟），可彻底杀死包括芽孢和孢子在内的所有微生物，D 选项表述错误。A 选项，消毒的核心目的是减少微生物数量，杀死部分有害微生物，表述正确；B 选项，灭菌是比消毒更彻底的处理方式，需杀死物体内外所有微生物（包括芽孢和孢子），表述正确；C 选项，接种环直接接触菌种，需通过灼烧灭菌（火焰上充分灼烧）达到彻底灭菌效果，培养皿耐高温，常用干热灭菌法（160-170℃下维持 2-3 小时），表述正确。​ 4.配制培养基时，下列操作步骤的顺序正确的是（ ）​ ①调节 pH ②计算称量 ③灭菌 ④溶解 ⑤倒平板​ A. ②④①③⑤ B. ②①④③⑤ C. ④②①③⑤ D. ②④③①⑤​ 答案：A​ 解析：培养基的正确配制流程需遵循 “计算→称量→溶解→调 pH→灭菌→倒平板” 的逻辑顺序，具体分析如下：首先根据培养基的配方计算所需各成分的用量（②计算称量），然后准确称量各成分并加入适量蒸馏水溶解（④溶解）；溶解后需调节培养基的 pH（①调节 pH），因为不同微生物对 pH 的要求不同，且灭菌后 pH 可能发生轻微变化，需在灭菌前调整到位；之后对调节好 pH 的培养基进行灭菌（③灭菌），防止杂菌污染；灭菌完成后，待培养基冷却至 50℃左右时倒平板（⑤倒平板），避免高温烫手或培养基凝固，因此正确顺序为②④①③⑤，A 选项正确。其他选项的顺序均存在逻辑错误，如 B 选项中 “先调 pH 后溶解” 会导致成分未溶解时 pH 调节不准确；C 选项中 “先溶解后称量” 会导致称量误差；D 选项中 “先灭菌后调 pH” 会使调节 pH 时引入杂菌，破坏灭菌效果。​ 5.下列关于微生物接种方法的叙述，错误的是（ ）​ A. 平板划线法能将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基表面​ B. 稀释涂布平板法可用于微生物的计数和纯培养​ C. 平板划线法中，每次划线后接种环都要进行灭菌处理​ D. 两种接种方法都需要在无菌条件下进行，且接种工具都需灼烧灭菌​ 答案：D​ 解析：微生物接种的核心是无菌操作，但不同接种方法的接种工具及灭菌方式不同：平板划线法的接种工具是接种环，需通过灼烧灭菌（火焰上充分灼烧）；而稀释涂布平板法的接种工具是涂布器，其灭菌方式为 “酒精引燃灭菌”（将涂布器浸在 70% 的酒精中，取出后在酒精灯火焰旁引燃，待酒精燃尽后冷却使用），并非灼烧灭菌，因此 D 选项中 “接种工具都需灼烧灭菌” 的表述错误。A 选项，平板划线法通过连续划线，将聚集的菌种逐步稀释，最终在划线末端形成单个菌落，实现分散菌种的目的，表述正确；B 选项，稀释涂布平板法通过梯度稀释将菌种分散成单个细胞，接种后形成单个菌落（可用于纯培养），且菌落数与稀释倍数相关，可用于微生物计数，表述正确；C 选项，平板划线法中每次划线后灭菌接种环，可避免残留的菌种污染下一次划线区域，保证划线效果，表述正确。​ 6.某实验室配制的培养基在灭菌后出现了浑浊现象，下列分析合理的是（ ）​ A. 培养基配制时 pH 调节不当​ B. 灭菌过程中温度未达到规定要求​ C. 培养基中加入了过多的凝固剂​ D. 灭菌后未及时倒平板，培养基冷却凝固​ 答案：B​ 解析：培养基灭菌的目的是杀死所有杂菌，若灭菌过程中温度未达到规定要求（如高压蒸汽灭菌时温度未达到 121℃），则杂菌（包括细菌、真菌等）未被彻底杀死，灭菌后杂菌在培养基中生长繁殖，会导致培养基出现浑浊现象，B 选项分析合理。A 选项，pH 调节不当会影响微生物的生长，但不会导致培养基灭菌后浑浊，表述错误；C 选项，凝固剂（如琼脂）过多会使培养基质地过硬、凝固速度加快，但不会引起浑浊，表述错误；D 选项，灭菌后未及时倒平板会导致培养基冷却凝固，形成块状或凝固的培养基，而非浑浊，表述错误。​ 7.为获得酵母菌的纯培养物，下列操作中不必要的是（ ）​ A. 对培养皿、培养基进行严格灭菌​ B. 接种前对接种工具进行灼烧灭菌​ C. 接种过程在酒精灯火焰旁进行​ D. 接种后将培养皿倒置在 4℃冰箱中培养​ 答案：D​ 解析：酵母菌的适宜生长温度为 18~25℃，接种后需将培养皿倒置在适宜温度的恒温培养箱中培养，以保证酵母菌正常生长繁殖，获得纯培养物。4℃冰箱为低温环境，会抑制酵母菌的生长，甚至导致酵母菌休眠，无法形成菌落，因此该操作不必要，D 选项正确。A 选项，对培养皿、培养基严格灭菌是避免杂菌污染的基础，是获得纯培养物的必要操作；B 选项，接种前对接种工具灭菌可防止工具上的杂菌污染菌种，必要且关键；C 选项，接种过程在酒精灯火焰旁进行（形成无菌区），可避免空气中的杂菌落入培养基，是无菌操作的核心步骤，必要且重要。​ 8.关于微生物培养中相关操作的原理，下列解释错误的是（ ）​ A. 培养基灭菌后冷却至 50℃左右倒平板，是为了防止高温杀死接种的微生物​ B. 平板划线法中最后一次划线不与首次划线相连，是为了保证最后划线区域出现单个菌落​ C. 培养酵母菌时将培养皿倒置，是为了防止皿盖上的冷凝水滴落污染培养基​ D. 稀释涂布平板法中进行梯度稀释，是为了使微生物在培养基上均匀分布，便于计数​ 答案：A​ 解析：培养基灭菌后冷却至 50℃左右倒平板，核心原因有两点：一是防止高温烫手，避免操作人员受伤；二是避免培养基温度过高导致凝固过快，无法顺利倒平板（若温度过低，培养基会提前凝固，无法均匀铺展在培养皿中）。而接种微生物是在倒平板冷却至室温后进行的，因此 “防止高温杀死接种的微生物” 并非该操作的原理，A 选项解释错误。B 选项，平板划线法中最后一次划线不与首次划线相连，可避免首次划线时浓度较高的菌种污染最后划线区域，保证最后划线区域的菌种浓度足够低，从而形成单个菌落，解释正确；C 选项，培养时将培养皿倒置，可防止皿盖上的冷凝水滴落至培养基表面，导致菌落连片生长或污染培养基，解释正确；D 选项，稀释涂布平板法中进行梯度稀释，可将浓度较高的菌种稀释为低浓度，使微生物在培养基上均匀分布，形成单个菌落，便于统计菌落数量（进而计算微生物浓度），解释正确。 1.思考讨论：培养基种类及用途？ 2.怎样选择出抗氨苄青霉素能力的细菌? / 学科网（北京）股份有限公司 $