内容正文:
3.1 DNA是主要的遗传物质
2021.4.6
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对遗传物质的早期推测
An early guess of genetic material
科学家发现:染色体主要组成成分蛋白质和DNA。
DNA
染色体在遗传上的连续性和稳定性
?
蛋白质
孟德尔通过豌豆实验证明生物的性状由遗传因子控制
摩尔根通过果蝇实验证明基因位于染色体上
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对遗传物质的早期推测
An early guess of genetic material
20世纪30年代:
DNA是由许多脱氧核苷酸聚合而成的生物大分子。
但由于对DNA分子的结构没有清晰的了解,人们认为蛋白质是遗传物质的观点仍占主导地位。
20世纪20年代:
蛋白质是由多种氨基酸连接而成的大分子。
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肺炎链菌的转化实验
Transformation experiment of Streptococcus pneumoniae
肺炎链球菌的转化实验
R型细菌
S型细菌
肺炎链球菌体内转化实验(格里菲思)
①英国微生物学家:格里菲思
②实验材料:两种肺炎链球菌、小鼠
肺炎链球菌体外转化实验(艾弗里)
①美国微生物学家:艾弗里
②实验材料:两种肺炎链球菌、蛋白酶、DNA酶等
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肺炎链菌的转化实验
Transformation experiment of Streptococcus pneumoniae
实验材料:
菌体特点 菌落特点 毒性
(动物实验)
S型细菌
R型
细菌
无毒
有毒
人肺炎
小鼠败血症
无荚膜
有荚膜
粗糙
Rough
光滑Smooth
小鼠、R型 和 S型肺炎连球菌
荚膜的化学本质是_______
多糖
1、格里菲思:体内转化实验
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肺炎链球菌的转化实验
Transformation experiment of Streptococcus pneumoniae
菌落与培养基
无菌条件下培养得到的一个菌落是一个种群
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肺炎链球菌的转化实验
Transformation experiment of Streptococcus pneumoniae
固体培养基
菌落与培养基
液体培养基
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肺炎链球菌的转化实验
Transformation experiment of Streptococcus pneumoniae
S型细菌菌落
R型活菌菌落
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说明R型菌无毒性
说明S型菌有毒性
说明加热杀死的S型菌失去毒性
将R型活细菌与加热致死的S型细菌混合后注射
第一组
第二组
第三组
第四组
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将R型活细菌与加热致死的S型细菌混合后注射
说明加热杀死的S型菌失去毒性
第三组
第四组
拓展:
在加热杀死S型细菌的过程中,其蛋白质变性失活,但是其内部的DNA在加热结束后随温度的降低又逐渐恢复活性。
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将R型活细菌与加热致死的S型细菌混合后注射
现象:从第四组实验的小鼠尸体中分离出的有致病性的S型活细菌,其后代也是有致病性的S型细菌。
格里菲斯推断:已经被加热杀死的S型细菌,含有某种促使R型活细菌转化为S型活细菌的活性物质—“转化因子” 。
第四组
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肺炎链球菌的转化实验
Transformation experiment of Streptococcus pneumoniae
R型菌
S型菌
转化因子
S型菌
后代
?
多糖 脂类 蛋白质 RNA DNA
加热杀死的S型细菌
“哪种物质在转化实验中起作用”,“转化因子究竟是什么物质”
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肺炎链球菌的转化实验
Transformation experiment of Streptococcus pneumoniae
2、艾弗里:体外转化实验
15
2、艾弗里:体外转化实验
条件对照
实验结论:DNA才是使R型菌产生稳定遗传变化的物质。
第一组
第二至四组
第五组
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自变量控制中的“加法原理” 和“减法原理”
在对照实验中控制自变量,可以采用“加法或减法原理”;
与常态比较,人为增加某种影响因素的称为“加法原理”。例如在“比较过氧化氢在不同条件下的分解”实验中,与对照组相比,实验组分别作加温、滴加FeCl3溶液、滴加肝脏研磨液的处理,利用了“加法原理”;
与常态相比,人为去除某种影响因素的称为“减法原理”。例如在艾弗里的肺炎链球菌转化实验中,每个实验组特异性地去除了一种物质,从而鉴定出DNA是遗传物质,这利用了“减法原理”。
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肺炎链球菌的转化实验
Transformation experiment of Streptococcus pneumoniae
基因重组
R型细菌转化为S型细菌的本质:
S型细菌
荚膜
控制荚膜形成的X基因
加热
杀死
被破坏的S型细菌
X基因吸附在R型细菌表面
X基因进入R型细菌
重组
R型细菌转化成S型细菌
注意:只是少数R型细菌转化为S型细菌
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体内转化实验和体外转化实验区别
项目 体内转化实验 体外转化实验
培养细菌
实验对照
巧妙构思
实验结论
联系
在小鼠体内
体外培养基
R型细菌与S型细菌的致病性对照
S型细菌各组成成分的作用进行对照
用加热杀死的S型细菌注射到小鼠体内作为对照实验来说明确实发生了转化
用“酶解法”将细胞提取物中的某一物质分解、去掉,直接、单独地观察该种物质在实验中是否起作用
S型细菌体内有“转化因子”
S型细菌的DNA是遗传物质
(1)所用材料相同;
(2)体内转化实验是体外转化实验的基础,体外转化实验是体内转化实验的延伸;
(3)两个实验都遵循对照原则、单一变量原则
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随堂练习
In-class practice
1、将下列各种细菌注射到小鼠体内,能使小鼠死亡的是( )
① R型活细菌
② S型活细菌
③ 加热杀死后的R型细菌
④ 加热杀死后的S型细菌
⑤ R型活细菌+加热杀死后的S型细菌
⑥ S型活细菌+加热杀死后的R型细菌
A、①③⑤ B、②④⑥
C、①⑤⑥ D、②⑤⑥
D
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随堂练习
In-class practice
2、格里菲思用肺炎链球菌在小鼠身上进行了著名的转化实验,此实验结果是( )
A、证明了DNA是遗传物质
B、证明了RNA是遗传物质
C、证明了蛋白质是遗传物质
D、没有具体证明哪一种物质是遗传物质
D
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有没有比细菌更为简单的实验材料?
1952年,赫尔希和蔡斯以T2噬菌体为实验材料,利用放射性同位素标记的新技术,完成了另一个更具有说服力的实验。
思维碰撞
艾弗里的实验引起了人们的注意。但是,由于艾弗里实验中无法真正提取出纯DNA来进一步验证遗传物质就是DNA,因此,仍有人对实验结论表示怀疑。
赫尔希 蔡斯
噬菌体侵染细菌的实验
Experiment of bacteriophage infection of bacteria
噬菌体侵染细菌实验(赫尔希&蔡斯)
①美国遗传学家赫尔希和助手蔡斯
②实验材料:T2噬菌体
选取原因:a.成分只有DNA和蛋白质
b.仅能在大肠杆菌内繁殖
c.繁殖时,仅将遗传物质导入
大肠杆菌,其他物质保留在体外
③实验方法:放射性同位素标记法
标记元素:35S(蛋白质)32P (DNA)
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噬菌体侵染细菌的实验
Experiment of bacteriophage infection of bacteria
1. 实验材料
T2噬菌体是一种专门寄生在大肠杆菌体内的病毒,它的头部和尾部的外壳都是由蛋白质构成的,头部内含有DNA。T2噬菌体侵染大肠杆菌后,就会在自身遗传物质的作用下,利用大肠杆菌体内的物质来合成自身的组成成分,进行大量增殖。当噬菌体增殖到一定数量后,大肠杆菌裂解,释放出大量的噬菌体。
T2噬菌体
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噬菌体侵染细菌的实验
Experiment of bacteriophage infection of bacteria
T2噬菌体的繁殖过程
:吸附,注入,合成,组装,释放
注入
合成
组装
释放
吸附
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噬菌体侵染细菌的实验
Experiment of bacteriophage infection of bacteria
放射性同位素标记法
?
DNA和蛋白质,应分别标记哪一种元素?
蛋白质的组成元素:DNA的组成元素:
C、H、O、N、S
C、H、O、N、P
(标记32P)
(标记35S)
T2噬菌体中60%是蛋白质,40%是DNA。
2.研究方法:
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噬菌体侵染细菌的实验
Experiment of bacteriophage infection of bacteria
3.T2噬菌体侵染大肠杆菌实验过程
②细菌+含32P的培养基
含32P的细菌
①噬菌体+含35S的细菌
②噬菌体+含32P的细菌
第一步:标记大肠杆菌
含35S的细菌
①细菌+含35S的培养基
第二步:标记噬菌体(标记细菌分别培养噬菌体)
含35S的噬菌体
含32P的噬菌体
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噬菌体侵染细菌的实验
Experiment of bacteriophage infection of bacteria
分别用35S或32P标记噬菌体与大肠杆菌混合
经短时间保温后用搅拌器搅拌
离心检测上清液和沉淀物中的放射性物质
细菌裂解后检测子代噬菌体的放射性
32P标记的噬菌体
35S标记的噬菌体
上清液放射性很高,
沉淀物放射性很低。
子代噬菌体中无35S
上清液放射性很低,
沉淀物放射性很高。
子代噬菌体中含32P
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噬菌体侵染细菌的实验
Experiment of bacteriophage infection of bacteria
分别用35S或32P标记噬菌体与大肠杆菌混合
经短时间保温后用搅拌器搅拌
32P标记的噬菌体
35S标记的噬菌体
短时间保温
搅拌后离心
搅拌的目的是使吸附在细菌上的噬菌体与细菌分离;
离心的目的是让上清液中析出重量较轻的T2噬菌体颗粒,而离心管的沉淀物中留下被侵染的大肠杆菌。
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噬菌体侵染细菌的实验
Experiment of bacteriophage infection of bacteria
结论:DNA是遗传物质。
2)细菌裂解释放的噬菌体中,可以检测到32P标记的DNA,但却不能检测到35S标记的蛋白质。
实验结果
1)用35S标记的一组实验,放射性同位素主要分布在上清液中;
用32P标记的一组实验,放射性同位素主要分布在试管的沉淀物中。
(说明噬菌体在侵染细菌时,DNA进入到细菌的细胞中,而蛋白质外壳留在外面。)
能不能说明蛋白质不是遗传物质?
不能说明蛋白质不是遗传物质
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噬菌体侵染细菌的实验
Experiment of bacteriophage infection of bacteria
用35S标记噬菌体与大肠杆菌混合
经短时间保温后用搅拌器搅拌
离心检测上清液和沉淀物中的放射性物质
细菌裂解后检测子代噬菌体的放射性
35S标记的实验发现沉淀物中也有放射性,可能是什么原因造成的?
搅拌不充分导致部分蛋白质外壳吸附在细菌上,离心时随细菌到沉淀物中。
32P标记的实验发现上清液中也有放射性,可能是什么原因造成的?
培养(保温)时间过短,部分噬菌体还未侵染细菌;
培养(保温)时间过长,部分子代噬菌体已经释放。
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噬菌体侵染细菌的实验
Experiment of bacteriophage infection of bacteria
(1)能否在含放射性同位素的培养基中标记噬菌体?
不能。噬菌体只能寄生在活细胞中,不能再培养基上存活。
(2)能否用35S和32P同时标记噬菌体?
不能。因为放射性检测时只能检测到放射部位,不能确定是何种元素的放射性,所以35S和32P不能同时标记同一组噬菌体,应将两者分别标记,即把实验分为两组。
(3)用C、H、O、N的同位素标记可行吗?
不可行。因为T2噬菌体蛋白质和DNA中都含有这几种元素,且O和N的同位素18O、15N不具有放射性。
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遗传物质的现代发现
Modern discovery of genetic material
只有DNA是遗传物质吗?
烟草花叶病毒
流感病毒
2019-nCoV
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RNA是遗传物质的证明实验
结论:RNA是烟草花叶病毒的遗传物质
蛋白质
RNA
分别侵染健康烟草植株
患病
不患病
得到全新病毒
不能得到病毒
RNA
蛋白质
遗传物质的现代发现
Modern discovery of genetic material
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烟草花叶病毒实验拓展--重建实验
TMV 2
RNA 2
蛋白质 2
蛋白质 1+RNA 2
TMV 2
TMV 1
RNA 1
蛋白质 1
蛋白质 2+RNA 1
TMV 1
烟草花叶病毒的遗传物质是RNA
遗传物质的现代发现
Modern discovery of genetic material
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遗传物质的现代发现
Modern discovery of genetic material
项目 细胞生物 非细胞生物
真核生物 原核生物 多数病毒 少数病毒
核酸种类
遗传物质
不同生物的遗传物质
DNA和RNA
DNA和RNA
DNA
RNA
DNA
DNA
DNA
RNA
因为绝大多数生物的遗传物质是DNA,所以说DNA是主要的遗传物质。
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遗传物质的现代发现
Modern discovery of genetic material
总结:
1、在非细胞结构的生物体内,只有一种核酸(DNA或RNA)是遗传物质;
2、具有细胞结构的生物含有DNA和RNA两种核酸,其中DNA是遗传物质;
3、染色体是DNA的主要载体;
4、遗传物质控制蛋白质的合成,蛋白质是生命活动的主要承担者。
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随堂练习
In-class practice
3、在证明DNA是遗传物质的实验中,赫尔希和蔡斯分别用32P和35S标记噬菌体的DNA和蛋白质,在下图中标记元素所在部位依次是( )
A.①、④ B.②、④ C.①、⑤ D.③、⑤
A
40
随堂练习
In-class practice
4、如图为“噬菌体侵染大肠杆菌实验”的实验流程,第一组实验用的是35S标记的噬菌体,第二组实验用的是32P标记的大肠杆菌。则下列关于该实验的描述,理论上正确的是( )
A.第一组实验的上清液中放射性强,沉淀物中无放射性
B.第二组实验的上清液和沉淀物中均无放射性
C.实验中噬菌体是用35S直接标记的
D.35S标记的是噬菌体的DNA,32P标记的是大肠杆菌的蛋白质
A
41
随堂练习
In-class practice
5、用32P标记的噬菌体侵染大肠杆菌,经培养、搅拌、离心、检测,上清液的放射性占10%,沉淀物的放射性占90%。上清液带有放射性的原因可能是( )
A.离心时间过长,上清液中析出较重的大肠杆菌
B.搅拌不充分,吸附在大肠杆菌上的噬菌体未与细菌分离
C.噬菌体侵染大肠杆菌后,大肠杆菌裂解释放出子代噬菌体
D.32P标记了噬菌体蛋白质外壳,离心后存在于上清液中
C
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随堂练习
In-class practice
6、下图表示同位素32P、35S分别标记T2噬菌体和大肠杆菌的DNA和蛋白质(氨基酸),然后进行“噬菌体侵染细菌的实验”,侵染后产生的子代噬菌体的DNA分子和蛋白质分子含有的元素(仅考虑P和S)应分别是( )
B
A.31P、32P;32S B.31P、32P;35S
C.31P、32P;32S、35S D.32P、32S;35S[来
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