卷16 生物技术与工程(二)-【三新金卷·先享题】2026年安徽省高考生物真题分类优化卷(分项3A)

最新5年高考真题分类优化卷·生物学（十六） 卷16生物技术与工程（二） 姓名 班级 考号 得分 本卷共20小题，满分100分，考试时间75分钟 一、选择题：本题共15小题，每小题3分，共45分。在每小题给出的四个 选项中，只有一项符合题目要求。 1.(2025·云南卷)孕酮具有促进子宫内膜增生，为受精卵着床做准备的 作用。某奶牛场发现一头高产奶量母牛生产两胎后重复配种均未成功 妊娠，该牛可正常排卵但孕酮量低于正常母牛。为获得该母牛的后代， 下列说法正确的是 愈伤组织 芽 脱毒苗 ① ② 转接 兰州百合 分生区 1号培养基 2号培养基 3号培养基 A.运用体外受精或人工授精技术可提高该牛的妊娠率 B.使用外源促性腺激素处理该牛获得更多卵子进而可获得多枚胚胎 C.体外受精或人工授精后形成受精卵移植到健康受体可提高存活率 D.使用该牛MⅡ期卵母细胞的细胞核进行核移植可获得可育后代 2.(2024·北京)大豆叶片细胞的细胞壁被酶解后，可获得原生质体。以下 对原生质体的叙述错误的是 ( A制备时需用纤维素酶和果胶酶 B.膜具有选择透过性 C,可再生出细胞壁 D.失去细胞全能性 3.(2024·安徽)植物细胞悬浮培养技术在生产中已得到应用。某兴趣小 组尝试利用该技术培养胡萝卜细胞并获取番茄红素，设计了以下实验流 程和培养装置（如图），请同学们进行评议。下列评议不合理的是( ) 胡萝卜直根 加料口 充气口 外植体 脱分化 充气管 愈伤组织 胰蛋白酶等处理 培养液 细胞 悬浮细胞 搅拌叶轮 细胞培养 番茄红素 培养容器 →出料口 实验流程 细胞培养装置 A.实验流程中应该用果胶酶等处理愈伤组织，制备悬浮细胞 B.装置中的充气管应置于液面上方，该管可同时作为排气管 C.装置充气口需要增设无菌滤器，用于防止杂菌污染培养液 D.细胞培养需要适宜的温度，装置需增设温度监测和控制设备 4.(2024·湖北)植物甲抗旱、抗病性强，植物乙分蘖能力强、结实性好。科 研人员通过植物体细胞杂交技术培育出兼有甲、乙优良性状的植物丙， 过程如下图所示。下列叙述错误的是 ( 酶解(1.5小时) 植物甲 甲的 →原生 叶片 显 质体 融合 ①混合酶液处理 ②的原 ③杂种④愈伤⑤ 生质 细胞 组织 植物丙 植物乙 的 叶片 ~ 酶解(2小时) 质体 A.过程①中酶处理的时间差异，原因可能是两种亲本的细胞壁结构有 【最新5年高考真题分类优化卷·生物学（十六）16-1】3A 差异 B.过程②中常采用灭活的仙台病毒或PEG诱导原生质体融合 C.过程④和⑤的培养基中均需要添加生长素和细胞分裂素 D.可通过分析植物丙的染色体，来鉴定其是否为杂种植株 5.(2024·黑吉辽)迷迭香酸具有多种药理活性。进行工厂化生产时，先诱 导外植体形成愈伤组织，再进行细胞悬浮培养获得迷迭香酸，加入诱导 剂茉莉酸甲酯可大幅提高产量。下列叙述错误的是 A,迷迭香顶端幼嫩的茎段适合用作外植体 B.诱导愈伤组织时需加入NAA和脱落酸 C.悬浮培养时需将愈伤组织打散成单个细胞或较小的细胞团 D.茉莉酸甲酯改变了迷迭香次生代谢产物的合成速率 6.(2024·浙江)山药在生长过程中易受病毒侵害导致品质和产量下降。 采用组织培养技术得到脱毒苗，可恢复其原有的优质高产特性，流程如 图。下列操作不可行的是 ( 外植体→愈伤组织→丛生芽→试管苗 A.选择芽尖作为外植体可减少病毒感染 B.培养基中加入抗生素可降低杂菌的污染 C.将丛生芽切割后进行继代培养可实现快速繁殖 D.提高生长素和细胞分裂素的比值可促进愈伤组织形成丛生芽 7.(2025·广东卷)Solexa测序是一种将PCR与荧光检测相结合的高通量 测序技术。为了确保该PCR过程中，DNA聚合酶催化一个脱氧核苷酸 单位完成聚合反应后，DNA链不继续延伸，应保护底物中脱氧核糖结构 上的 A.1'一碱基 B.2一氢C.3一羟基D.5- 磷酸基团 8.(2024·浙江)某动物细胞培养过程中，细胞贴壁生长至接触抑制时，需 分装培养，实验操作过程如图。 ③制成细胞悬液，分装 ①吸收培养液。 ②吸除消化液。 加消化液 加培养液 下列叙述错误的是 A.①加消化液的目的是使细胞与瓶壁分离 B.②加培养液的目的是促进细胞增殖 C.③分装时需调整到合适的细胞密度 D.整个过程需要在无菌、无毒条件下进行 9.(2024·湖北)糖尿病是危害人类健康的主要疾病之一。恢复功能性胰 岛B细胞总量是治疗糖尿病的重要策略。我国学者研究发现，向患有糖 尿病的小鼠注射胰高血糖素受体单克隆抗体(mAb),可以促进胰岛A 细胞增殖，诱导少数胰岛A细胞向胰岛B细胞转化，促进功能性胰岛B 细胞再生。根据上述实验结果，下列叙述错误的是 A.mAb的制备可能涉及细胞融合技术 B.注射mAb可降低胰腺分泌胰高血糖素的量 C.mAb和胰高血糖素均能与胰高血糖素受体特异性结合 D.胰高血糖素主要通过促进肝糖原分解和非糖物质转化为糖，升高血 糖水平 10.(2024·北京)我国科学家体外诱导食蟹猴胚胎干细胞，形成了类似囊 胚的结构（类囊胚），为研究灵长类胚胎发育机制提供了实验体系（如 图)。下列相关叙述错误的是 食蟹猴 胚胎干细胞 类囊胚 【16-2】3A A.实验证实食蟹猴胚胎干细胞具有分化潜能 B.实验过程中使用的培养基含有糖类 C.类囊胚的获得利用了核移植技术 D.可借助胚胎移植技术研究类囊胚的后续发育 11.(2024·甘肃)甘加藏羊是甘肃高寒牧区的优良品种，是季节性发情动 物，每年产羔一次，每胎一羔，繁殖率较低。为促进畜牧业发展，研究人 员通过体外受精、胚胎移植等胚胎工程技术提高藏羊的繁殖率，流程如 下图。下列叙述错误的是 () 藏超数卵母 羊甲 排卵细胞 受精卵早期植入受体妊娠 后 公藏 培养门胚胎母藏羊丙分娩 代 羊乙 精子 A.藏羊甲需用促性腺激素处理使其卵巢卵泡发育和超数排卵 B.藏羊乙的获能精子能与刚采集到的藏羊甲的卵母细胞受精 C.受体藏羊丙需和藏羊甲进行同期发情处理 D.后代丁的遗传物质来源于藏羊甲和藏羊乙 12.(2024·湖北)研究者探究不同浓度的雌激素甲对牛的卵母细胞和受精 卵在体外发育的影响，实验结果如下表所示。根据实验数据，下列叙述 错误的是 甲的浓度 卵母细 第一极体 成熟率 卵裂 卵裂 (ug/mL) 胞（个） 排出（个） (%) 数（个） 率(%)》 0 106 70 66.0 28 40.0 1 120 79 65.8 46 58.2 10 113 53 46.9 15 28.3 100 112 48 42.8 5 10.4 A.实验结果说明甲抑制卵裂过程 B.甲浓度过高抑制第一极体的排出 C.添加1g/mL的甲可提高受精后胚胎发育能力 D.本实验中，以第一极体的排出作为卵母细胞成熟的判断标准 13.(2024·湖北)波尔山羊享有“世界山羊之王”的美誉，具有生长速度快、 肉质细嫩等优点。生产中常采用胚胎工程技术快速繁殖波尔山羊。下 列叙述错误的是 () A.选择遗传性状优良的健康波尔母山羊进行超数排卵处理 B.胚胎移植前可采集滋养层细胞进行遗传学检测 C.普通品质的健康杜泊母绵羊不适合作为受体 D.生产中对提供精子的波尔公山羊无需筛选 14.(2023·广东)科学家采用体外受精技术获得紫羚羊胚胎，并将其移植 到长角羚羊体内，使后者成功妊娠并产仔，该工作有助于恢复濒危紫羚 羊的种群数量。此过程不涉及的操作是 () A.超数排卵 B.精子获能处理 C.细胞核移植 D.胚胎培养 15.（2023·浙江)在家畜优良品种培育过程中常涉及胚胎工程的相关技 术。下列叙述错误的是 () A.经获能处理的精子才能用于体外受精 B.受精卵经体外培养可获得早期胚胎 C.胚胎分割技术提高了移植胚胎的成活率 D.胚胎移植前需对受体进行选择和处理 二、非选择题：本题共5小题，共55分。 16.(10分)为降低乳腺癌治疗药物的副作用，科研人员尝试在单克隆抗体 【16-3】3A 技术的基础上，构建抗体药物偶联物(ADC),过程如下图1所示。回答 下列有关问题： 注射特定的抗原多种B淋巴细胞 一 →/ ①包②@0→9r才→ 接头 培养骨髓瘤细胞骨髓瘤细胞 ADC (1)本实验中，小鼠注射的特定抗原应取自 (2)步骤①常用方法包括 融合法、电融合法和灭活病 毒诱导法等。 (3)步骤②的细胞必须经过步骤③克隆化培养和 才能筛选得 到符合要求的杂交瘤细胞，杂交瘤细胞可采用注射到小鼠腹腔内培养 或进行体外培养的方式进行扩大培养。体外培养时，首先应保证其处 于 的环境，除了适宜的营养物质、温度等条件外，还需要控制气体 条件是 与5%二氧化碳的混合气体，二氧化碳的主要作用是 。在使用合成培养基时通常需加入血清，血清的作用是 (4)单克隆抗体的优点是 ,与特定抗原发生特异性结 合、并且可大量制备。单克隆抗体是ADC中的 (填“a”或“b”) 部分。 (5)研究发现，ADC在患者体内的作用如下图2所示 鹅暖染鼠+中 不识别心？识别并结合 胞核 溶酶体 正常细胞 ADC 肺癌细胞 ①单克隆抗体除了运载药物外，还有作为诊断试剂、治疗疾病等作用。 ②ADC进入乳腺癌细胞后，细胞中的溶酶体可将其水解，释放出的药 物最终作用于细胞核，导致细胞调凋亡，推测其原理是 17.（2024·浙江)(10分)植物体在干旱、虫害或微生物侵害等胁迫过程中 会产生防御物质，这类物质属于次生代谢产物。次生代谢产物在植物 抗虫、抗病等方面发挥作用，也是药物、香料和色素等的重要来源。次 生代谢产物X的研发流程如下： 筛选高产细胞→细胞生长和产物X合成关系的确定→发酵生产X 回答下列问题： (1)获得高产细胞时，以X含量高的植物品种的器官和组织作为 经脱分化形成愈伤组织，然后通过液体振荡和用一定孔径的筛网进行 获得分散的单细胞。 (2)对分离获得的单细胞进行 培养，并通过添加 或营 养缺陷培养方法获取细胞周期同步、遗传和代谢稳定、来源单一的细胞 群。为进一步提高目标细胞的X含量，将微生物菌体或其产物作为诱 导子加入到培养基中，该过程模拟了 的胁迫。 (3)在大规模培养高产细胞前，需了解植物细胞生长和产物合成的关 系。培养细胞生产次生代谢产物的模型分为3种，如图所示。若X只 在细胞生长停止后才能合成，则X的合成符合图 (填“甲”、 “乙”或“丙”)，根据该图所示的关系，从培养阶段及其目标角度，提出获 得大量X的方法」 【16-4】3A 一细胞生物量（反映细胞生长）---次生代谢产物产量 培养时间 培养时间 培养时间 甲 乙 (4)多种次生代谢产物在根部合成与积累，如人参、三叶青等药用植物， 可通过 培养替代细胞悬浮培养生产次生代谢产物。随着 基因组测序和功能基因组学的发展，在全面了解生物体合成某次生代 谢产物的 和 的基础上，可利用合成生物学 的方法改造酵母菌等微生物，利用 工程生产植物的 次生代谢产物。 18.(12分)我国科研人员通过基因治疗，成功治愈了全球首例B一地中海 贫血症患者。研究人员运用高精准变形式碱基编辑器(tBE),对患者自 体造血干细胞中的单个碱基进行编辑，以重新激活Y珠蛋白的表达，最 终使患者血红蛋白水平恢复正常，过程如图1所示。相较于图2中基 于CRISPR技术的B地贫基因编辑疗法，该方法见效更快、疗效更好， 且不引发患者基因组突变或片段缺失。请回答下列问题。 胞嘧啶脱氨酶 _nCas9 碱基编辑纠正突变 馨编辑后的造血干细胞 采集自体 了碱基错配修复 鄙造血干细胞 自回输至患者体内 疵 ,DNA复制 应 图1 图2 (1)基因治疗中通常用到AAV(腺病毒)等，AAV的作用为 (2)据图2分析CRISPR技术中gRNA起 (填“导向”或“切 割”)的作用。相比CRISPR技术（切断双链），tBE不需要破坏DNA双 链就能对致病的碱基突变进行校正，由此可知tBE具有 优点（写 出1点即可)。 (3)为了检测目的基因是否翻译成Y珠蛋白，可采用的技术为 。 采用自体造血干细胞编辑移植的优点为 (写出1点即可)。 (4)欲验证图1中基因治疗方法对B地中海贫血症患者的疗效，请写出 大致实验思路。（注：使用的测量工具无需说明，阝一地中海贫血症志愿 者、健康志愿者多人) 19.(2025·四川卷)杆菌M2合成的短肽拉索西丁能有效杀死多种临床耐 药细菌。拉索西丁能与细菌的核糖体结合，阻止携带氨基酸的tRNA 进入核糖体位点2。有人将合成拉索西丁的相关基因(lrcA一lrcF)导 入链霉菌，基因克隆流程及拉索西丁的作用机制如下图。回答下列 问题： ”启动子 EcoR I BamH I 标记基因 终止 克隆、表达 复制原点 rre re 拉素丁 注：①F1、F2、F3和F4为与相应位置的DNA配对的单链引物，“→”指 【16-5】3A 引物5一3方向。②密码子对应的氨基酸：AAA一赖氨酸；AUG一甲硫 氨酸（起始）；UUC一苯丙氨酸；ACA一苏氨酸：UCG一丝氨酸。 (1)用PCR技术从杆菌M2基因组中扩增lrcA一lrcF目的基因时，应 选用 引物。本研究载体使用了链霉菌的复制原点，其目的 是 (2)采用EcoRI和BamHI完全酶切构建的重组质粒，产物通过琼脂糖 凝胶电泳检测应产生 条电泳条带，电泳检测酶切产物的目的 是 (3)由图可知，拉索西丁与核糖体结合后，会阻止携带 (填氨基 酸名称)的tRNA进入结合位点，导致 ,最终引起细菌死亡。 (4)重组链霉菌的目的基因产物经验证有杀菌活性，但重组菌在实验室 多次培养后，提取的目的基因产物杀菌活性丧失，可能的原因是 若运用发酵工程来生产拉索西丁工程药物，除产物活性外 还需进一步研究的问题有 (答出1点即可)。 20.(2023·浙江)(14分)赖氨酸是人体不能合成的必需氨基酸，而人类主 要食物中的赖氨酸含量很低，利用生物技术可提高食物中赖氨酸含量。 回答下列问题： (1)植物细胞合成的赖氨酸达到一定浓度时，能抑制合成过程中两种关 键酶的活性，导致赖氨酸含量维持在一定浓度水平，这种调节方式属于 根据这种调节方式，在培养基中添加 用于筛选经人工诱变的植物悬浮细胞，可得到抗赖氨酸类似物的细胞 突变体，通过培养获得再生植株。 (2)随着转基因技术与动物细胞工程结合和发展，2011年我国首次利 用转基因和体细胞核移植技术成功培育了高产赖氨酸转基因克隆奶 牛。其基本流程为： ①构建乳腺专一表达载体。随着测序技术的发展，为获取富含赖氨酸 的酪蛋白基因（目的基因），可通过检索 获取其编码序列，用 化学合成法制备得到。再将获得的目的基因与含有乳腺特异性启动子 的相应载体连接，构建出乳腺专一表达载体。 ②表达载体转入牛胚胎成纤维细胞(BEF)。将表达载体包裹到磷脂等 构成的脂质体内，与BEF膜发生 ,表达载体最终进入细 胞核，发生转化。 ③核移植。将转基因的BEF作为核供体细胞，从牛卵巢获取卵母细 胞，经体外培养及去核后作为 。 将两种细胞进行电融合， 电融合的作用除了促进细胞融合，同时起到了 重组细胞 发育的作用。 ④重组细胞的体外培养及胚胎移植。重组细胞体外培养至 ,植入代孕母牛子宫角，直至小牛出生。 ⑤检测。DNA水平检测：利用PCR技术，以非转基因牛耳组织细胞作 为阴性对照，以 为阳性对照，检测到转基因牛耳组织细胞 中存在目的基因。RNA水平检测：从非转基因牛乳汁中的脱落细胞、 转基因牛乳汁中的脱落细胞和转基因牛耳组织细胞，提取总RNA,对 总RNA进行 处理，以去除DNA污染，再经逆转录形成cD NA,并以此为 ,利用特定引物扩增目的基因片段。结果 显示目的基因在转基因牛乳汁中的脱落细胞内表达，而不在牛耳组织 细胞内表达，原因是什么？ 【16-6】3A卷16生物技术与工程（二） 1.C体外受精是指将卵子和精子在体外人工控制的环 境中完成受精过程的技术。A、该母牛孕酮量低于正 常母牛，子宫内膜增生可能不足，不利于受精卵着床， 即使运用体外受精或人工授精技术，也难以提高妊娠 率，A错误；B、使用外源促性腺激素处理该牛，可促 使其超数排卵，获得更多卵子，但孕酮量低于正常母 牛，受精卵不能成功着床，不能获得成活胚胎，B错 误；C、该牛可正常排卵但孕酮量低于正常母牛，故可 通过体外受精或人工授精后形成受精卵移植到健康 的受体内可提高存活率，C正确；D、使用该牛MⅡ期 卵母细胞的细胞核进行核移植，由于该牛本身孕酮分 泌异常等问题，获得的后代也可能存在发育等方面的 问题，不一定可育，D错误。 2.D大豆叶片细胞是植物细胞，具有细胞壁，其细胞壁 的成分是纤雏素和果胶，所以制备原生质体，需用纤 雏素酶和果胶酶进行处理，A正确；生物膜的功能特 点是具有选择透过性，所以膜具有选择透过性，B正 确；原生质体可以再生出新的细胞壁，C正确：分离出 的原生质体具有全能性，可用于植物体细胞杂交，为 杂种植株的获得提供了理论基础，D错误。故选D。 3.B植物细胞壁的主要成分是纤雏素和果胶，欲利用 愈伤组织制备悬浮细胞，可用纤雏素酶和果胶酶进行 处理愈伤组织，A正确；装置中的充气管应置于液面 下方，以利于培养液中的溶氧量的增加，该管不能同 时作为排气管，B错误；为了防止杂菌污染培养液，装 置充气口需要增设无菌滤器，C正确：细胞培养时需 要保证适宜的温度，因此装置需增设温度监测和控制 设备，D正确。故选B。 4.B酶解是为了去除植物细胞的细胞壁，过程①中酶 处理的时间不同，说明两种亲本的细胞壁结构有差 异，A正确；过程②为原生质体的融合，常用PEG诱 导原生质体融合，灭活的仙台病毒可诱导动物细胞融 合，不能用于植物，B错误；过程④脱分化和⑤再分化 的培养基中均需要添加生长素和细胞分裂素，但在两 个过程中比例不同，C正确：植物丙是植物甲和植物 乙体细胞杂交形成的个体，应具备两者的遗传物质， 因此可通过分析植物丙的染色体，来鉴定其是否为杂 种植株，D正确。故选B。 【61】 5.B迷迭香顶端幼嫩的茎段适合用作外植体，生长旺 盛，分裂能力较强，A正确；诱导愈伤组织时需加入 NAA和细胞分裂素，B错误；悬浮培养时需将愈伤组 织打散成单个细胞或较小的细胞团，获得更多的营养 物质和氧气，使得其可以进一步分裂，C正确；加入诱 导剂茉莉酸甲酯可大幅提高产量，推测茉莉酸甲酯改 变了迷选香次生代谢产物（不是植物生长所必须的） 的合成速率，D正确。故选B。 6,D芽尖等分生组织分裂旺盛，且含病毒少，取材时常 选用其作为外植体，A正确；培养基中有大量的营养 物质容易被细菌污染，加入抗生素可降低杂菌的污 染，B正确；将丛生芽切割后转移到新的培养基上继续 进行扩大培养称为继代培养，其又可分为第二代培 养，第三代培养等。大多数植物每隔4~6周进行一 次继代培养，每进行一次继代培养，培养物一般能增 殖3~4倍。正因为培养物可以不断继代培养，所以 离体繁殖速度比常规方法通常要快数万倍，可实现快 速繁殖，C正确；提高生长素和细胞分裂素的比值可 促进愈伤组织形成根而不是芽，D错误。故选D。 7.C在DNA复制过程中，在DNA聚合酶的催化作用 下，将一个个的脱氧核苷酸连接形成磷酸二酯键，使 子链延伸，但是DNA聚合酶催化延伸子链方向只能 从5'→3'。已知DNA聚合酶催化延伸子链方向只能 从5'→3'，原因是脱氧核苷酸的3碳有羟基，可以结合 下一个脱氧核苷酸的5′碳的磷酸基团，故为了DNA 聚合酶催化一个脱氧核苷酸单位完成聚合反应后， DNA链不继续延仲，应保护底物中脱氧核糖结构上 的3”一羟基，使其不能结合下一个脱氧核苷酸的5′碳 的磷酸基团，C正确。 8.B①加消化液的目的是使细胞与瓶壁分离，A正确； ②加培养液，多次加培养液先洗去残留的消化酶，然 后终止消化液的消化作用，并对细胞加以稀释，B错 误；③分装时需调整到合适的细胞密度，因为若密度 过大细胞直接仍存在接触抑制，C正确；动物细胞培 养需要无菌无毒环境，因此整个过程需要在无菌、无 毒条件下进行，D正确。故选B。 9.B单克隆抗体的制备涉及细胞融合技术和动物细胞 培养技术，mAb属于单克隆抗体，其制备可能涉及细 胞融合技术，A正确；单克隆抗体(mAb),可以促进胰 岛A细胞增殖；而胰岛A细胞可分泌胰高血糖素，可 -3A 见注射mAb可提高胰岛A细胞分泌胰高血糖素的 量，B错误；题千信息，mAb是胰高血糖素受体单克隆 抗体，可见Ab和胰高血糖素均能与胰高血糖素受体 特异性结合，C正确；胰高血糖素主要作用于肝，促进 肝糖原分解成葡萄糖进入血液，促进非糖物质转变成 糖，使血糖浓度回升到正常水平，D正确。故选B。 10.C体外诱导食蟹猴胚胎干细胞，形成了类似囊胚的 结构（类囊胚），证实了食蟹猴胚胎干细胞具有分化 潜能，A正确；实验过程中使用的培养基需含有糖 类，糖类可为细胞培养提供能源物质，B正确；类囊胚 的获得利用了动物细胞培养技术，并没有进行核移 植，C错误；可借助胚胎移植技术将类囊胚移植到相 应的雌性受体中继续胚胎发育，从而可以用来研究 类囊胚的后续发育，D正确。故选C。 11.B促性腺激素能作用于卵巢，藏羊甲需用促性腺激 素处理使其卵巢卵泡发育和超数排卵，A正确；从卵 巢中刚采集的卵母细胞需培养成熟（减数第二次分 裂中期)后才可与获能的精子进行体外受精，B错误； 在胚胎移植前要对接受胚胎的受体和供体进行同期 发情处理，使受体的生理状况相同，因此受体藏羊丙 需和藏羊甲进行同期发情处理，C正确；后代丁是由 藏羊甲的卵细胞和藏羊乙的精子结合形成的受精卵 发育而来，因此后代丁的遗传物质来源于藏羊甲和 藏羊乙，D正确。故选B。 12.A由表可知，甲低浓度时促进卵裂，高浓度时抑制 卵裂，A错误；对照组第一极体排出个数为70个，甲 浓度过高(>10g/mL,第一极体排出个数<70)抑 制第一极体的排出，B正确；添加1ug/mL的甲，卵 裂数增大，即该条件可提高受精后胚胎发育能力，C 正确：卵母细胞成熟的判断标准是第一极体的排出， D正确。故选A。 13.D选择遗传性状优良的健康波尔母山羊作为供体， 进行超数排卵处理，A正确；胚胎移植前，采集部分 滋养层细胞进行遗传学检测，B正确；作为受体的杜 泊母山羊只需具备健康的体质和正常繁殖能力即 可，但山羊和绵羊是不同的物种，具有生殖隔离，不 能将山羊的胚胎移植到绵羊子宫发育，即普通品质 的健康杜泊母锦羊不适合作为受体，C正确；生产中 需选择品质良好的波尔公山羊提供精子，D错误。 故选D。 【62】 14.C由题干信息可知，该过程通过体外受精获得胚 胎，再通过胚胎移植，使长角羚羊成功妊娠并产仔， 因此需要进行超数排卵、精子获能处理，并对获得的 受精卵进行胚胎培养；由于该过程为有性生殖，因此 不需要涉及细胞核移植，所以C正确，A、B、D错误。 故选C。 15,C精子需要经过获能处理才具有受精能力，A正 确；受精卵经体外培养可获得早期胚胎，B正确；胚胎 分割可以获得多个胚胎，分割次数越多，分割后胚胎 成活的概率越小，C错误；胚胎移植前，需选择健康 体质和正常繁殖能力的受体且进行同期发情处理，D 正确。故选C。 16.解析：(1)该技术操作的目的是为获得治疗乳腺癌的 单克隆抗体，因此，给小鼠注射的特定抗原应取自人 的乳腺癌细胞。 (2)步骤①为动物细胞融合，诱导动物细胞融合的方 法主要有PEG融合法、高Ca2十一高pH、电融合法 和灭活病毒诱导法。 (3)获得的杂交瘤细胞必须进行③克隆化培养和专 一抗体检测，才能筛选得到符合要求的杂交瘤细胞。 动物细胞培养的关键是无菌操作，故体外培养时，首 先应保证其处于无菌无毒的环境；动物细胞培养的 气体条件是95%的空气和5%二氧化碳的混合气体， 其中二氧化碳的主要作用是维持培养液的pH;在动 物细胞体外培养过程中，由于血清等含有一些未知 的成分，在使用合成培养基时通常需加入血清等天 然成分，补充培养基中缺乏的物质，利于细胞生长。 (4)单克隆抗体的优点是特异性强（与特定抗原发生 特异性结合)、灵敏度高（能准确识别抗原的细微差 异)、可大量制备；ADC药物是利用单克隆抗体的导 向作用选择性杀伤癌细胞，单克隆抗体对应图中的 部分。 (5)据图2可知，ADC进入乳腺癌细胞后，细胞中的 溶酶体释放水解酶可将其水解，释放出的药物最终 作用于细胞核。推测药物进入细胞核后会引起相关 基因的表达（转录和翻译），产生相关蛋白，从而导致 细胞调亡。 答案：(1)人的乳腺癌细胞 (2)聚乙二醇(PEG)(或高Ca2十-高pH) (3)抗体检测无菌无毒95%的空气维持培养液 -3A 的H补充未知成分，利于动物细胞生长（人们对细胞 所需营养物质尚未全部研究清楚) (4)能准确识别抗原的细微差异a (5)药物作用于细胞核后，引起相关基因的表达（转 录和翻译)，产生相关蛋白，从而导致细胞调亡。 17.解析：(1)植物体的器官和组织、细胞都可以作为外 植体，经脱分化形成愈伤组织，将愈伤组织进行振荡 培养，使其分散成小的细胞团或单细胞，然后用适当 孔径的不锈钢筛网过滤，除去大的细胞团和残渣，离 心除去小的残渣，得到单细胞悬浮液。 (2)分离获得的单细胞进行扩大培养，并通过添加过 量胸苷（向细胞培养液中加入过量胸苷(TdR),处于 S期的细胞立刻被抑制，洗去TdR后可恢复正常分 裂，而处于其他时期的细胞不受过量TdR影响)或营 养缺陷培养方法获取细胞周期同步、遗传和代谢稳 定、来源单一的细胞群。将微生物菌体或其产物作 为诱导子加入到培养基中，模拟了微生物侵害的迫 害条件。 (3)由题意可知X只在细胞生长停止后才能合成，所 以丙图符合。所以要获得大量X的方法，是将细胞 培养至稳定期（即停止生长时期）一定时间后，通过 分离提纯获得大量X。 (4)由题意知，多种次生代谢产物在根部合成与积 累，所以要对根进行培养，为了方便进行次生代谢物 的收集，可以对根进行水培。要大量获得次生代谢 物可以通过基因工程，将相关基因转入酵母菌体内， 然后通过发酵工程获得，基因工程的前提是要了解 生物体合成某次生代谢产物的相关基因组成和基因 表达过程。 答案：(1)外植体过滤 (2)扩大过量的胸苷微生物侵害 (3)丙将细胞培养至稳定期（即停止生长时期）一 定时间后，通过分离提纯获得大量X (4)根的水培养相关基因组成基因表达过程 基因工程和发酵 18.解析：(1)基因治疗中通常用到AAV(腺病毒)等，孩 技术中用到转基因技术，腺病毒AAV作为载体将目 的基因导入（受体）细胞。 (2)图2中CRISPR技术中gRNA起导向的作用，即 能通过碱基互补配对原则实现基因中碱基的定点改 【63】 变。相比CRISPR技术（切断双链），tBE不需要破 坏DNA双链就能对致病的碱基突变进行校正，由此 可知BE具有高安全性、高特异性；针对单碱基进行 编辑，正常不发生错编或误编的情况；见效更快、疗 效更好，且不引发患者基因组突变和片段缺失。 (3)为了检测目的基因是否翻译成Y珠蛋白，由于要 检测蛋白质的存在，因而可采用的技术为抗原一抗 体杂交技术。采用自体造血干细胞编辑移植的优，点 表现为由于造血干细胞取自患者本身，因而在改造 后的造血干细胞移植后不会发生免疫排斥，因而更 安全，治疗成功率高，且不需要在手术后服用免疫抑 制剂。 (4)本实验的目的是验证基因治疗方法对B地中海 贫血症患者的疗效，自变量应为是否进行基因治疗， 因变量为血红蛋白的含量，因此实验设计思路为：将 生理状态、性别、年龄等相同的B地中海贫血症志愿 者随机均分为甲乙组，分别测量二者的血红蛋白水 平后，对甲组采用碱基编码疗法进行治疗，乙组不采 用，适宜条件下生活一段时间后，分别再次测量二者 的血红蛋白水平，并与健康志愿者的血红蛋白水平 进行比较。若甲组体内血红蛋白低含量高于对照 组，则表明基因治疗方法对3一地中海贫血症患者的 疗效。 答案：(1)作为载体将目的基因导入（受体）细胞 (2)导向高安全性、高特异性：针对单碱基进行编 辑，正常不发生错编或误编的情况；见效更快、疗效 更好，且不引发患者基因组突变和片段缺尖 (3)抗原一抗体杂交不发生免疫排斥反应 (4)将生理状态、性别、年龄等相同的？地中海贫血 症志愿者随机均分为甲、乙两组，分别测量二者的血 红蛋白水平后，对甲组采用碱基编码疗法进行治疗， 乙组不采用，适宜条件下生活一段时间后，分别再次 测量二者的血红蛋白水平，并与健康志愿者的血红 蛋白水平进行比较。 19.解析：基因工程技术的基本步骤：1、目的基因的获 取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和 人工合成。2、基因表达载体的构建：是基因工程的 核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终 止子和标记基因等。3、将目的基因导入受体细胞： 根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。将目的 -3A 基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪 法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有 效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细 胞的方法是感受态细胞法。4、目的基因的检测与鉴 定：(1)分子水平上的检测：①检测转基因生物染色 体的DNA是否插入目的基因一一DNA分子杂交技 术；②检测目的基因是否转录出了mRNA一一分子 杂交技术：③检测目的基因是否翻译成蛋白质一 抗原一抗体杂交技术。(2)个体水平上的鉴定：抗虫 鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。【小问1】引物需要结 合到模板的3端，且与目的基因的部分碱基序列互补 配对，子链延伸方向为5端→3端，因此用PCR技术 从杆菌M2基因组中扩增lrcA一lrcF目的基因时，应 选用F2、F4引物。载体使用链霉菌的复制原，点，是 为了保证载体能在链算菌细胞中复制，也使目的基 因能够在链霉菌中稳定存在并遗传给后代。【小问 2】采用EcoRI和BamHI完全酶切构建的重组质粒， 会得到载体片段和目的基因片段，共2条电泳条带。 电泳检测酶切产物的目的是检测重组质粒是否构建 成功，若能得到预期的戟体片段和目的基因片段大 小的条带，说明酶切成功，重组质粒构建可能成功 但是还需要进一步的鉴定。【小问3】观察拉索西丁 的作用机制图，结合所给密码子信息，可知拉索西丁 与核糖体结合后，会阻止携带苯丙氨酸的tRNA进 入结合位，点。因为位，点2对应的密码子是UUC,编 码苯丙氨酸。拉索西丁阻止携带苯丙氨酸的tRNA 进入结合位，点，会导致翻译过程无法正常进行，进而 使细菌无法合成蛋白质，最终引起细菌死亡。【小问 4】重组链寡菌在实验室多次培养后，提取的目的基 因产物杀菌活性丧失，可能的原因是目的基因发生 突变或变异，导致其表达的产物结构改变，从而失去 杀菌活性；也可能是目的基因的表达受到抑制等。 若运用发酵工程来生产拉索西丁工程药物，除产物 活性外还需进一步研究的问题有：优化发酵条件，如 温度、PH、溶氧量等；如何提高发酵产物的产量；产物 的分离和纯化方法等。 答案：(1)①.F2、F4;②.保证载体能在链霉菌细胞 中能正常复制；(2)①.2：②.验证重组质粒是否构 建成功；：(3)①.苯丙氨酸或phe;②.翻译受阻；(4) ①.目的基因发生突变或变异：②，发酵条件优化。 【64】 20.解析：(1)负反馈调节是指在一个系统中系统工作的 效果，反过来又作为信息调节该系统的工作，并且使 系统工作的效果减弱或受到限制，有助于系统保持 稳定。植物细胞合成的赖氨酸达到一定浓度时，能 抑制合成过程中两种关键酶的活性，导致赖氨酸含 量雏持在一定浓度水平，这种调节方式属于负反馈 调节。如果想得到抗赖氨酸类似物的细胞突变体可 在培养基中添加过量赖氨酸类似物。 (2)①从基因数据库获取目的基因编码序列，用化学 合成法制备可得到目的基因。 ②表达载体包裹到磷脂等构成的脂质体内，根据细 胞膜成分，其与BEF膜发生融合。 ③去核的卵母细胞作为受体细胞，其处于减数第二 次分裂中期，因为卵母细胞中含有促使细胞核表达 全能性的物质和营养条件。电融合的作用除了促进 细胞融合，同时起到了激活重组细胞发育的作用。 ④胚胎发育到适宜阶段可取出向受体移植。牛、羊 一般要培养到桑椹胚或囊胚阶段；植入代孕母牛子 宫角，直至小牛出生。 ⑤阳性对照：按照当前实验方案一定能得到正面预 期结果的对照实验。阳性对照是已知的对测量结果 有影响的因素，目的是确定实验程序无误。阴性对 照和阳性对照相反，按照当前的实验方案一定不能 得到正面预期结果的对照实验。排除未知变量对实 验产生的不利影响。本实验以非转基因牛耳组织细 胞作为阴性对照，为了检测到转基因牛耳组织细胞 中存在目的基因，应该以含有目的基因的牛耳组织 细胞为阳性对照。为了除去DNA污染，可以使用 DNA酶使其水解。经逆转录形成cDNA,并以此为 PCR的模板进行扩增。目的基因在转基因牛乳汁中 的脱落细胞内表达，而不在牛耳组织细胞内表达，原 因是构建的表达载体只含有乳腺特异性启动子，只 能在乳腺细胞中启动转录，而在牛耳细胞中不能 表达 答案：(1)负反馈调节过量赖氨酸类似物 (2)基因数据库融合核受体细胞激活早期 囊胚转基因BEF DNA酶PCR的模板构建 的表达载体只含有乳腺特异性启动子，只能在乳腺 细胞中启动转录，而在牛耳细胞中不能表达。 -3A