课时作业(3) 微生物的选择培养和计数（Word练习）-【金榜题名】2025-2026学年高二生物选择性必修3 生物技术与工程同步学案（人教版）

课时作业(三) 一、选择题 1．关于从土壤中分离自生固氮菌的做法正确的是(　　) A．培养基中无需添加葡萄糖 B．培养基中无需添加有机氮源 C．培养基用自来水配置 D．37 ℃恒温培养 解析：选B　分离自生固氮菌需要使用不含有机氮源的选择培养基，但需要添加葡萄糖作为碳源，A错误；自生固氮菌能固氮，因此培养基中无需添加有机氮源，B正确；培养基用蒸馏水配制，C错误；在常温下培养即可，D错误。 2．下列是关于“检测土壤中细菌总数”实验操作的叙述，其中错误的是(　　) A．用蒸馏水配制牛肉膏蛋白胨培养基，经高温、高压灭菌后倒平板 B．取104、105、106倍的土壤稀释液和无菌水各0.1 mL，分别涂布于各组平板上 C．将实验组和对照组平板倒置，37 ℃恒温培养24～48 h D．确定对照组无菌后，选择菌落数在300以上的实验组平板进行计数 解析：选D　确定对照组无菌后，选择菌落数在30～300的平板进行计数。 3．分离土壤中分解尿素的细菌，对培养基的要求是(　　) ①加尿素　②不加尿素　③加琼脂 ④不加琼脂　⑤加葡萄糖　⑥不加葡萄糖 ⑦加硝酸盐　⑧不加硝酸盐 A．①③⑤⑦　　　　　 B．②④⑥⑧ C．①③⑤⑧ D．①④⑥⑦ 解析：选C　要分离土壤中分解尿素的细菌，培养基中尿素应是唯一的氮源，不能加硝酸盐；在固体培养基上形成菌落，要加琼脂作凝固剂；分解尿素的细菌是异养生物，要加有机碳源(如葡萄糖)。 4．下列关于统计菌落数目的方法的叙述，不正确的是(　　) A．采用平板计数法获得的菌落数往往少于实际的活菌数 B．当样品的稀释度足够高时，一个活菌会形成一个菌落 C．为了保证结果准确，一般采用密度较大的平板进行计数 D．在某一浓度下涂布3个平板，若3个平板统计的菌落数差别不大，则应以它们的平均值作为统计结果 解析：选C　采用平板计数法计数时，当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落，因此统计的菌落数往往比活菌的实际数目少。一般选择菌落数在30～300的平板进行计数。密度过大会使计数结果偏小，影响结果的准确性。涂布3个平板，作为重复组，取其平均值计数能增强实验的说服力与准确性。 5．想要对土壤中分解尿素的细菌进行分离与计数，下列操作需要在火焰旁进行的是(　　) ①土壤取样　②称取土壤　③稀释土壤溶液　④涂布平板　⑤微生物的培养 A．①②③④⑤ B．②③④⑤ C．③④⑤ D．②③④ 解析：选D　对土壤中分解尿素的细菌进行分离与计数时，称取土壤、稀释土壤溶液和涂布平板都在火焰旁进行；土壤取样在野外进行；微生物的培养在恒温箱中进行。 6．下列叙述不正确的是(　　) A．因为土壤中各类微生物的数量不同，所以，为获得不同类型的微生物要按不同的稀释倍数进行分离 B．测定土壤中细菌的总量和测定土壤中能分解尿素的细菌的数量，选用的稀释范围不同 C．如果得到了两个或两个以上菌落数目在30～300的平板，则说明稀释操作比较成功，并能够进行菌落的计数 D．牛肉膏蛋白胨培养基上的菌落数目明显少于选择培养基上的菌落数目，说明选择培养基已筛选出一些菌种 解析：选D　牛肉膏蛋白胨培养基上的菌落数目明显大于选择培养基上的菌落数目，才说明选择培养基具有筛选作用。 7．为了判断培养基是否被杂菌污染和选择培养基是否起到了选择作用，需要设置的对照组的培养基分别是(　　) A．未接种的选择培养基，未接种的牛肉膏蛋白胨培养基 B．未接种的培养基，接种了的牛肉膏蛋白胨培养基 C．接种了的选择培养基，接种了的牛肉膏蛋白胨培养基 D．接种了的培养基，未接种的牛肉膏蛋白胨培养基 解析：选B　若要判断培养基是否被杂菌污染，可将未接种的培养基放在恒温箱中培养，一段时间后若有菌落产生，说明培养基被污染，若无菌落产生，说明培养基没有被污染。要判断选择培养基是否起到了选择作用，接种了的选择培养基是实验组，将等量的稀释相同倍数的菌液接种到牛肉膏蛋白胨培养基上，作为对照组，在相同的条件下进行培养，观察比较对照组和实验组中的菌落数，在牛肉膏蛋白胨培养基上生长的菌落数目应明显多于选择培养基上的菌落数目，综上所述，B正确。 8．在分解尿素的细菌的分离和鉴定中，对先后用到的两种培养基，叙述正确的是(　　) A．加入唯一氮源——尿素作为选择培养基，加入酚红指示剂作为鉴别培养基 B．加入唯一氮源——尿素作为鉴别培养基，加入酚红指示剂作为选择培养基 C．加入酚红指示剂作为选择培养基，加入唯一碳源——尿素作为鉴别培养基 D．加入酚红指示剂作为选择培养基，加入唯一碳源——尿素作为鉴别培养基 解析：选A　以尿素为唯一氮源的培养基可作为选择培养基，筛选出分解尿素的细菌；在以尿素为唯一氮源的选择培养基中加入酚红指示剂，培养某种细菌后，如果pH升高，指示剂变红，就可初步鉴定该细菌能够分解尿素。综上所述，A正确。 9．若将某种细菌置于有营养的物体上，它会繁殖并形成细胞群。以下用来检验两种抗生素的杀菌效果的对照实验，最恰当的分组设计是(　　) 解析：选C　要检验某种抗生素的杀菌效果，必须将抗生素与细菌一起培养，观察细菌繁殖情况。实验的变量是有无抗生素，其他条件应相同。因此，应该设计一个有细菌无抗生素的对照组和有细菌有抗生素的实验组，C合理。 10．某种细菌菌株需要亮氨酸才能生长，但此菌株对链霉素敏感。实验者用诱变剂处理此菌株，想筛选出表格中细菌菌株类型，则配制相应选择培养基类型正确的是(　　) 选项 筛选出不需要亮氨酸的菌株 筛选出抗链霉素的菌株 筛选出不需要亮氨酸且抗链霉素的菌株 A L＋　S＋ L－　S－ L＋　S－ B L－　S－ L＋　S＋ L－　S＋ C L－　S＋ L＋　S＋ L－　S－ D L＋　S－ L－　S－ L＋　S＋ 注：L代表亮氨酸，S代表链霉素；＋代表加入，－代表不加入 解析：选B　筛选不需要亮氨酸的菌株时培养基中不需要添加亮氨酸；筛选抗链霉素的菌株时需要向培养基中添加链霉素；筛选不需要亮氨酸且抗链霉素的菌株时需要向培养基中添加链霉素，但不添加亮氨酸。 11．(不定项)黑茶是以肉食为主的中国边疆游牧民族的主要饮品。在一系列微生物的作用下，黑茶会产生一种对人体非常有益的金黄色颗粒“金花”。研究人员对“金花”中的微生物进行了分离和鉴定，过程如图。下列说法不正确的是(　　) A．向“金花”样品中加入蒸馏水制成样品悬液 B．可根据菌落特征对菌种进行初步鉴定 C．涂布平板上长出的菌落可通过划线进一步纯化 D．可通过基因组测序对菌种进行准确鉴定 解析：选A　应该向“金花”样品中加入无菌水制成样品悬液，而不能加入蒸馏水，A错误；根据菌落的大小、形态、颜色等特征对菌种进行初步鉴定，B正确；涂布平板上长出的菌落可以通过划线作进一步纯化，C正确；对菌种进行基因组测序可准确鉴定菌种，D正确。 12．(不定项)原油中含有大量有害的、致癌的多环芳烃。土壤中有些细菌可以利用原油中的多环芳烃为碳源，在培养基中形成分解圈。为筛选出能高效降解原油的菌株并投入除污，某小组同学设计了相关实验。下列有关实验的叙述，正确的是(　　) A．应配制来源于被原油污染土壤的土壤稀释液备用 B．配制以多环芳烃为唯一碳源的选择培养基 C．将土壤稀释液灭菌后接种到选择培养基上 D．在选择培养基上能形成分解圈的即为所需菌种 解析：选ABD　为了筛选、获取能利用多环芳烃为碳源的菌种，首先是取材，应配制来源于被原油污染土壤的土壤稀释液备用，A项正确；其次配制以多环芳烃为唯一碳源的选择培养基，B项正确；然后进行接种，在无菌环境下，将土壤稀释液接种到选择培养基上，在适宜的条件下进行培养，若将土壤稀释液进行灭菌，就不能筛选出能高效降解原油的菌株，C项错误；在选择培养基上形成的菌种，若该菌落周围有分解圈，即为所需菌种，D项正确。 二、非选择题 13．石油污染土壤的微生物修复技术以效率高、治理费用低和现场可操作性强的特点得到广泛研究和应用。回答相关问题： (1)土壤中含有分解石油的多种微生物，向多孔结构的污染土壤中通入空气，可使微生物的________增强，同时由于石油主要含有碳和氢，因此还需加入适量含______元素的物质促进微生物的生长繁殖，进而加快石油污染物的降解。 (2)为了得到能够分解石油的单一假单胞菌(细菌的一种)，所用的培养基只能以________为唯一碳源；纯化菌株常用________或________法。 (3)土壤中分解石油的微生物数量直接影响治理的效果，因此常开展计数工作。实际操作中通常选用一定稀释范围的土壤样品液进行培养，目的是保证获得菌落数为________的平板进行计数，这种方法统计的结果____________(填“>”“＝”或“<”)活菌的实际数目，原因是_________________________________________________。 解析：(1)土壤中含有分解石油的多种微生物，向多孔结构的污染土壤中通入空气，可使微生物的代谢(或有氧呼吸)增强，同时由于石油主要含有碳和氢，因此还需加入适量含氮和磷元素的物质促进微生物的生长繁殖，进而加快石油污染物的降解。(2)要得到能够分解石油的单一假单胞菌(细菌的一种)，应该用以石油为唯一碳源的选择培养基；纯化菌株常用平板划线法或稀释涂布平板法。(3)实际操作中通常选用一定稀释范围的土壤样品液进行培养，目的是保证获得菌落数为30～300的平板进行计数；由于两个或多个细菌细胞连在一起时，平板上只能观察到一个菌落，因此采用稀释涂布平板法计数的结果偏小。 答案：(1)代谢(或有氧呼吸)　氮和磷　(2)石油　平板划线法　稀释涂布平板　(3)30～300　<　两个或多个细菌细胞连在一起时，平板上只能观察到一个菌落 14．临床使用抗生素前，有时需要做细菌耐药实验。实验时，首先要从患者身上获取少量样本，然后按照一定的实验步骤操作，以确定致病菌对不同抗生素的敏感性。回答下列问题： (1)为了从样本中获取致病菌单菌落，可用________法和________法将样本接种于固体培养基表面，经过选择培养、鉴别等步骤获得。 (2)取该单菌落适当稀释，用________法接种于固体培养基表面，在37 ℃培养箱中培养24 h，使其均匀生长，布满平板。 (3)为了检测该致病菌对抗生素的敏感性，将分别含有A、B、C、D四种抗生素的滤纸片均匀置于该平板上的不同位置，培养一段时间后，含A的滤纸片周围出现透明圈，说明该致病菌对抗生素A________；含B的滤纸片周围没有出现透明圈，说明该致病菌对抗生素B______________；含C的滤纸片周围的透明圈比含A的小，说明________________；含D的滤纸片周围的透明圈也比含A的小，且透明圈中出现了一个菌落，在排除杂菌污染的情况下，此菌落很可能是抗生素D的_______________________。 (4)根据上述实验结果，为达到抗菌目的，最好选用抗生素________。 解析：(1)微生物的常用接种方法为平板划线法和稀释涂布平板法。(2)能够使菌落均匀生长、布满平板的接种方法为稀释涂布平板法。(3)含A的滤纸片周围出现透明圈，说明该致病菌对抗生素A敏感；含B的滤纸片周围没有出现透明圈，说明该致病菌对抗生素B不敏感；含C的滤纸片周围的透明圈比含A的小，说明该致病菌对抗生素C的敏感性比对抗生素A的弱；含D的滤纸片周围的透明圈比含A的小，且透明圈中出现了一个菌落(排除杂菌污染)，说明该致病菌可能对抗生素D产生了耐药性。(4)根据实验结果，为达到抗菌目的，最好选用抗生素A。 答案：(1)平板划线　稀释涂布平板(两空顺序可颠倒)　(2)涂布　(3)敏感　不敏感　该致病菌对抗生素C的敏感性比对抗生素A的弱　耐药菌　(4)A 15．经人工诱变后，部分细菌由于某种酶被破坏，其细胞中某些化学反应不能正常进行，就形成了营养缺陷型菌株，这在工业生产上有较广阔的应用前景。以下是实验人员利用影印法初检某种氨基酸缺陷型菌株的过程，请回答下列问题： (1)微生物生长需要的营养物质有水、碳源和________等，除此之外，制备如图所示的培养基还需要加入________。 (2)制备培养基时调节pH应该在灭菌________(填“前”或“后”)进行，培养基的灭菌方法一般为_____________________。过程①的接种方法是________________。 (3)根据用途分类，图中基本培养基属于________(填“选择”或“鉴别”)培养基。 (4)进行过程②培养时，应先将丝绒布转印至________(填“基本”或“完全”)培养基上，原因是______________________。 (5)利用影印法培养的优点是不同培养基中同种菌株的接种位置相同，为了完成对初检的营养缺陷型菌株的鉴定，实验人员应挑取________(填“菌落A”或“菌落B”)进行接种培养，并进一步鉴定。 (6)科研人员用放射线处理目的菌获得两个突变株C和D，然后对突变株C和D进行实验，结果如表所示。 接种的菌种 一般培养基 实验处理及结果 C 不生长 添加营养物质甲，能生长 D 不生长 添加营养物质乙，能生长 接种的菌种 一般培养基 实验处理及结果 C＋D 能生长 不添加营养物质甲、乙，都能生长 突变株C不能在一般培养基上生长的原因最可能是__________________。将突变株C和D混合在一起，接种于一般培养基上，都能生长的最可能原因是____________________________。 解析：(1)微生物的营养物质包括水、无机盐、碳源、氮源等，图示培养基上最后都长出了菌落，说明为固体培养基，因此制备培养基时还需要加入凝固剂，常见的凝固剂是琼脂。(2)制备培养基过程中注意应该先调节pH，再灭菌，以防止杂菌污染；培养基灭菌的常用方法是高压蒸汽灭菌法。过程①导致菌落均匀分布，因此该方法为稀释涂布平板法。(3)根据用途分类，图中基本培养基属于选择培养基。(4)进行过程②培养时，为防止特定氨基酸混入基本培养基中，应先将丝绒布转印至基本培养基上。(5)比较基本培养基和完全培养基可知，菌落A为氨基酸缺陷型菌株，因此需要挑取菌落A进行接种培养，并进一步鉴定。(6)突变株C的生长依赖于营养物质甲，突变株D的生长依赖于营养物质乙。不添加营养物质甲和乙，二者混合培养时都能生长，最可能的原因是突变株C为突变株D提供了营养物质乙，突变株D为突变株C提供了营养物质甲。 答案：(1)氮源、无机盐　凝固剂(或琼脂) (2)前　高压蒸汽灭菌法　稀释涂布平板法　(3)选择　(4)基本　防止基本培养基中混入特定氨基酸　(5)菌落A　(6)突变株C缺乏合成营养物质甲所需要的酶　突变株D可以提供突变株C生长需要的营养物质甲；突变株C可以提供突变株D生长需要的营养物质乙 学科网（北京）股份有限公司 $