第1章 第2节 第1课时 微生物的基本培养技术-【精讲精练】2025-2026学年高中生物选择性必修3 生物技术与工程知能达标训练（人教版）

[基础达标练] 1．(2025·宿迁高二月考)下列有关培养基配制原则的叙述，错误的是(　　) A．异养微生物的培养基必须有有机物 B．任何培养基都必须含有水、碳源、氮源、无机盐及特殊营养物质 C．配制培养基时，要注意各种营养物质的浓度和比例 D．配制培养基时，应特别考虑细胞产物 解析　虽然各种培养基的具体配方不同，但一般都含有水、碳源、氮源和无机盐，有些微生物可以固定空气中的碳元素或者氮元素，因此培养基中不需要额外添加碳源或者氮源，有些微生物不需要特殊营养物质，B错误。 答案　B 2．下列关于微生物实验室培养的叙述，正确的是(　　) A．制备培养基时，应先灭菌后定容再倒平板 B．培养霉菌时需将培养基的pH调至中性或弱碱性 C．培养乳酸杆菌时需要在培养基中添加维生素 D．培养破伤风芽孢杆菌时需要提供有氧的条件 解析　制备培养基时，应先定容后灭菌再倒平板，A错误；培养霉菌时需将培养基的pH调至酸性，B错误；维生素是乳酸杆菌生长繁殖所必需的，但其自身不能合成，因此培养乳酸杆菌时需要在培养基中添加维生素，C正确；破伤风芽孢杆菌属于厌氧菌，培养破伤风芽孢杆菌时需要提供无氧的条件，D错误。 答案　C 3．(2025·平遥中学检测)下列关于灭菌和消毒的理解，正确的是(　　) A．医务人员进入工作区要全身灭菌 B．接种疫苗前要对注射区域进行消毒 C．消毒与灭菌的含义本质是相同的 D．常用的消毒方法有灼烧和高压蒸汽 解析　医务人员进入工作区要全身消毒，A错误；接种疫苗前要对注射区域进行消毒，B正确；灭菌是指使用强烈的理化方法杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子，而消毒是指使用较为温和的物理、化学或生物等方法杀死物体表面或内部一部分微生物，C错误；常用的消毒方法有煮沸消毒、巴氏消毒、紫外线消毒和化学药物消毒等，灼烧和高压蒸汽都是灭菌的方法，D错误。 答案　B 4．(2025·临汾高二统考)某同学欲判断某品牌消毒液的消毒效果，分别在使用消毒液洗手前后在手的相同部位取样，之后接种、培养并观察统计培养基上的菌落形态和数目。相关操作错误的是(　　) A．对配制的培养基进行高压蒸汽灭菌 B．使用无菌棉拭子从手的皮肤表面取样 C．用取样后的棉拭子在固体培养基上划线 D．接种后的培养皿要倒置，以防培养污染 解析　取样后的棉拭子需要用无菌水在试管内稀释，然后将稀释液涂布在固体培养基上，C错误。 答案　C 5．如图是实验室培养和纯化酵母菌过程中的部分操作步骤，下列说法错误的是(　　) A．①步骤使用的培养基已经灭菌 B．①②③步骤操作时均需要在酒精灯火焰旁进行 C．④在恒温培养箱中培养时需要将平板倒置 D．④操作过程中，需灼烧接种环5次 解析　①为倒平板，该步骤使用的培养基已经灭菌，A正确；①②③步骤操作时需要在酒精灯火焰旁进行，防止被杂菌污染，B正确；④在恒温培养箱中培养时需要将平板倒置，防止冷凝水滴入培养基，造成污染，C正确；每次划线前后都要灼烧接种环，因此④操作过程中，需灼烧接种环6次，D错误。 答案　D 6．微生物的纯培养既需要适宜的培养基，又需要防止杂菌污染。下列相关表述正确的是(　　) A．微生物的纯培养物就是不含有代谢废物的微生物培养物 B．培养基中的营养物质浓度越高，对微生物的生长越有利 C．消毒和灭菌的杀菌程度存在差异 D．为了防止污染，接种环经火焰灭菌后应趁热快速挑取菌落 解析　微生物的纯培养物是不含杂菌的微生物，而不是不含有代谢废物的微生物，A错误；培养基中的营养物质浓度并不是越高对微生物的生长越有利，当营养物质浓度过高时，可能会导致微生物细胞失水，这对微生物的生长是不利的，B错误；消毒是用较为温和的物理、化学或生物等方法杀死物体表面或内部的部分微生物，而灭菌则是指使用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子，消毒和灭菌的杀菌程度存在差异，C正确；接种环经火焰灼烧后，待冷却后才可以快速挑取菌落，避免温度太高烫死菌种，D错误。 答案　C 7．下列有关倒平板的操作，叙述错误的是(　　) A．不能将培养基溅到培养皿壁上 B．将打开的锥形瓶瓶口迅速通过火焰 C．将培养皿打开，培养皿盖放在桌子上 D．感觉锥形瓶的温度刚刚不烫手时倒平板 解析　倒平板时不能将培养基溅到培养皿壁上，否则可能造成污染，A正确；使打开的锥形瓶瓶口迅速通过火焰，对锥形瓶的口径处进行灼烧灭菌，防止空气中的杂菌污染，B正确；倒平板时不能把培养皿盖完全打开并放到桌面上，这样可能会污染培养基，C错误；已灭菌的培养基冷却到大约50 ℃时可倒平板，D正确。 答案　C 8．(2025·广东清远模拟)某小组从有机废水中用平板划线法接种并分离微生物用于废水处理。下列叙述正确的是(　　) A．培养基分装到培养皿后进行灭菌 B．转换角度划线前需灼烧接种环并冷却 C．接种后的培养皿需放在CO2培养箱中培养 D．培养过程中每隔一周观察一次 解析　培养基应该先灭菌，然后再分装到灭菌后的培养皿中，A错误；平板划线法通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作，转换划线角度后需灼烧接种环冷却后再进行划线，B正确；接种后的培养皿需要倒置在恒温培养箱中培养，C错误；培养过程中观察的间隔时间不能太长，可以每隔24 h统计一次菌落数目，选取菌落数目稳定时的记录作为结果，D错误。 答案　B [素能提升练] 9．(多选)接种微生物的方法很多，平板划线法是最常用的一种。如图是平板划线示意图，划线的顺序为①②③④。操作方法中错误的是(　　) A．划线操作时，将沾有菌种的接种环插入培养基 B．平板划线后培养微生物时要倒置培养 C．可将第④区域的划线与第①区域的划线相连 D．在②～④区域中划线前后都要对接种环进行灭菌 解析　将沾有菌种的接种环在培养基表面迅速划三至五条平行线，而不能插入培养基；用平板划线法培养微生物时，为防止水蒸气凝集滴入培养基造成干扰或污染，应将平板倒过来放置培养；划线时要避免最后一区的划线与第一区相连，因为最后一区的细菌最稀少，而第一区的细菌最致密，如果连在一起则有可能影响单个菌落的分离效果；在②～④区域中划线前都要对接种环进行灼烧灭菌，保证每次划线的菌种来自上一区域的末端，划线结束灼烧接种环是为了防止菌种污染环境和感染操作者。 答案　AC 10．(多选)菜籽粕中含有35%～45%的蛋白质，是畜禽饲料的重要原料，但其中的单宁等抗营养因子限制了菜籽粕的应用。研究者将不同菌种接种到菜籽粕与麸皮制成的固体培养基中发酵48 h，测定菜籽粕中单宁的含量，结果如下图。 下列相关叙述正确的是(　　) A．菜籽粕与麸皮为微生物提供碳源和氮源 B．接种后需对培养基进行高压蒸汽灭菌 C．黑曲霉菌对单宁的去除效果最为理想 D．对照组为不接种微生物的固体培养基 解析　菜籽粕中含有35%～45%的蛋白质，麸皮富含纤维素，菜籽粕与麸皮可为微生物提供碳源和氮源，A正确；对培养基灭菌应在接种前，接种后再灭菌，菌种将被全部杀死，B错误；据图可知，与对照组相比，黑曲霉菌发酵菜籽粕中单宁含量最低，说明黑曲霉菌对单宁的去除效果最为理想，C正确；对照组为不接种微生物的固体培养基，目的是作为对照，D正确。 答案　ACD 11．(2024·昆明检测)某兴趣小组欲对葡萄皮上的野生酵母菌进行纯培养。请回答下列问题。 (1)酵母菌的纯培养可使用__________________(填“牛肉膏蛋白胨”或“马铃薯琼脂”)培养基，培养基中还应加入链霉素以抑制________的生长。该培养基应采用________灭菌法灭菌。 (2)采用平板划线法将葡萄皮上的野生酵母菌接种到平板上，之后经培养得到的单菌落一般是由________________形成的纯培养物。上述方法能分离得到单菌落的原理是________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________。 (3)下图为不同初始氧气浓度下，利用等量酵母菌进行发酵产生酒精实验的相关曲线。其中，初始氧气浓度较高的是____________(填字母)，判断依据是_____________________ _______________________________________________________________________________。 解析　(1)马铃薯琼脂培养基常用于真菌的筛选，因此酵母菌的纯培养可使用马铃薯琼脂培养基；培养基中加入链霉素可以抑制细菌(原核微生物)的生长，培养基应采用湿热灭菌法灭菌。(2)单菌落一般是由单一个体繁殖形成的纯培养物。平板划线法通过接种环在固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基表面，经数次划线培养，可以分离得到单菌落。(3)初始氧气浓度高时，酵母菌进行有氧呼吸的时间长，酒精发酵的起始时间较晚(或初始氧气浓度高，酵母菌有氧呼吸大量繁殖，在酒精发酵的初期产生酒精的速率较快)，因此初始氧气浓度较高的是a。 答案　(1)马铃薯琼脂　细菌(原核微生物)　湿热 (2)单一个体繁殖　通过接种环在固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基表面，经数次划线培养，可以分离得到单菌落 (3)a　初始氧气浓度高，酵母菌进行有氧呼吸的时间长，酒精发酵的起始时间较晚(或初始氧气浓度高，酵母菌有氧呼吸大量繁殖，在酒精发酵的初期产生酒精的速率较快) 12．(2025·江西宜春期中)乳链菌肽(Nisin)是由某些乳酸链球菌产生的天然生物活性抗菌肽。Nisin 能有效杀死或抑制引起食品腐败的革兰氏阳性菌，现已作为一种高效、无毒的绿色食品防腐剂。研究人员从新鲜牛奶中获得了多株乳酸链球菌并进行了筛选和纯化培养。回答下列问题： (1)筛选菌株：选用质地均匀的滤纸，用打孔机打成直径相同的圆片，灭菌后烘干，浸泡于备选菌株培养液中，然后置于涂布了革兰氏阳性菌的平板中，培养一段时间后，通过测定________(填文字)的大小，选取抑菌作用最强的菌株。若①内出现一个菌落，则该菌落出现的原因可能是___________________________________________________________。 (2)培养基常用的灭菌方法是________。在接种前，随机取若干灭菌后的空白平板先培养一段时间，这样做的目的是______________________________________________________。 (3)Nisin作为绿色食品防腐剂，不会改变人体肠道中的正常菌群，也不会进入内环境，推测可能的原因是_____________________________________________________________。 解析　(1)在筛选具有抑菌作用的菌株时，通常是通过测定抑菌圈的大小来判断菌株的抑菌能力。抑菌圈越大，说明该菌株产生的抑菌物质(如乳链菌肽)扩散到周围抑制革兰氏阳性菌生长的范围越大，也就意味着该菌株的抑菌作用越强。如果抑菌圈内出现一个菌落，可能是因为实验时混入其他杂菌或该菌落为抗性突变菌落。(2)培养基常用的灭菌方法是高压蒸汽灭菌法。高压蒸汽灭菌法能够在高温(通常为121 ℃)、高压的条件下杀死培养基中的所有微生物，包括细菌的芽孢等耐高温的微生物结构，从而保证培养基的无菌状态。在接种前，随机取若干灭菌后的空白平板先培养一段时间，目的是检测培养基灭菌是否彻底。如果空白平板在培养后出现菌落，说明培养基灭菌不彻底，存在微生物污染；如果空白平板没有菌落生长，则说明培养基灭菌彻底，可以用于后续的接种实验。(3)Nisin作为绿色食品防腐剂，不会改变人体肠道中的正常菌群，也不会进入内环境。人体肠道中有大量的正常菌群，这些菌群形成了一种相对稳定的微生态环境，可能的原因是Nisin可能被消化道中的蛋白酶(或肽酶)所降解。 答案　(1)抑菌圈　实验时混入其他杂菌或该菌落为抗性突变菌落 (2)高压蒸汽灭菌　检测培养基灭菌是否彻底 (3)Nisin可能被消化道中的蛋白酶(或肽酶)所降解 学科网（北京）股份有限公司 $