第9单元 第48课时 微生物的培养技术与应用-【红对勾】2026年高考生物一轮复习金卷（单选版）

、1182网肉·高考一轮复习金卷生物 第48课时 微生物的培养技术与应用 一、选择题 1.(2025·辽宁鞍山开学考试)微生物培养时，常利用无菌技术来避免 杂菌污染。下列相关叙述正确的是 ) A.无菌技术主要包括消毒和灭菌，消毒和灭菌的杀菌程度必然存 在差异 B.配制好的培养基转移到锥形瓶中，再放入干热灭菌箱中进行灭菌 C.为防止倒平板时培养基溅到培养皿盖上，须将培养皿盖完全打开 D.接种前接种环必须灼烧灭菌，而接种后接种环是否灼烧不做 要求 2.(2025·广东东莞开学联考)下列关于“检测土壤中细菌总数”的实 验操作的叙述，错误的是 A.常用稀释涂布平板法计数 B.取10、105、10倍的土壤稀释液和无菌水各0.1mL,分别涂布于 各组平板上 C.将实验组和对照组平板倒置，37℃恒温培养24~48小时 D.确定对照组无菌后，选择菌落数在300以上的实验组平板进行计数 3.某同学想从土壤中筛选出能降解塑料的细菌，其操作流程如图所 示。下列有关此实验的描述，错误的是 ) 梯度 驯化 e 稀释 称量土样振荡培养 划线纯化菌种保藏 目的菌株 A.振荡培养的目的是便于培养液与菌种充分接触 B.用平板划线法纯化不能测定细菌的活菌数 C.用于筛选的培养基是以塑料为唯一碳源的培养基 D.培养基上的单个菌落都是由一个细菌繁殖而来的 4.研究者用酸笋开发具有降低胆固醇功能的益生菌。步骤一：酸笋发 酵液接种到含有CCO3的固体培养基上，筛选出乳酸菌。步骤二： 将乳酸菌接种到含有胆固醇的培养液中，筛选出能够降解胆固醇的 乳酸菌。下列相关叙述不正确的是 A.腌制酸笋需要水封，为乳酸菌发酵提供无氧环境 B.将酸笋发酵液用稀释涂布平板法接种到固体培养基中 C.溶钙圈直径与菌落直径比值大的菌落为步骤一的目标菌落 D.胆固醇属于脂质，主要为微生物的生长提供碳源和氮源 5.(2024·湖南郴州模拟)为筛选苯胺(C,HN)高效降解菌，科研人员 先通过增大苯胺浓度驯化培养苯胺降解菌，再从浓度为1000mg/L 的培养液中取1mL加入9mL无菌水中进行等浓度梯度稀释 (102、103、104、105和106)，然后从每种浓度中取0.1mL稀 释液涂布在三个平板（含500mg/L苯胺的培养基），最后统计得到 稀释度为105平板上的平均菌落数为62个。下列说法错误的是 () A.选择培养基应以苯胺作为唯一的碳源和氨源 B.驯化培养的目的是筛选降解效率更高的菌株 C.不选择103稀释度的平板进行菌落记数是由于它的菌落数大 于300 D.浓度为1000mg/L的驯化培养液中1mL苯胺降解菌的数量为 6.2×10个 6.(2024·福建南平二模)聚乳酸(PLA)是以乳酸为主要原料的聚合 物。与聚丙烯等材料相比，具有更好的生物可降解性，但在自然条 件下降解还是较缓慢。某科研机构拟从黄粉虫肠道中筛选PLA降 解菌，按照如图流程进行培养鉴定。下列叙述错误的是 用PLA粉末 60天制作成肠道微梯度稀释选择 为唯一食物 喂养黄粉虫 生物提取液 培养 纯化培养 挑选单菌落 鉴定菌种 A.实验过程中需要设置适宜的温度和pH环境，并保证严格的无菌 操作 B.PLA既可为PLA降解菌提供碳源，又对培养基中微生物起选择 作用 C.体外培养可采用平板划线法接种，灼烧接种环后，待其冷却后再 蘸取菌液 D.纯化培养后，可根据菌落形状、大小、颜色及DNA检测等进行菌 种鉴定 7.(2024·安徽合肥联考)一次性手套的主要成分是聚乙烯，难以降 解，丢弃后容易形成“白色垃圾”。下图表示科研人员筛选聚乙烯降 解菌的流程。下列有关叙述错误的是 土壤取样，制备土壤稀释液→接种于培养液→振荡培养→ 平板划线法接种后培养→降解效能鉴定 A.可将一次性手套埋在土壤里一段时间后再从土壤取样 B.两处培养基均以聚乙烯为唯一碳源，均属于选择培养基 C.振荡培养的目的是增加聚乙烯降解菌的数量 D.平板划线法接种可用于分离纯化和计数聚乙烯降解菌 8.亚硒酸钠对细菌的生长有明显的毒害作用，土壤中的富硒细菌可将 其还原为红色单质硒，下图表示土壤中富硒细菌的筛选和纯化过 程，①~⑤为相应步骤。下列相关叙述错误的是 ( 梯度稀释后分 挑选单菌 将土壤样品 m别取102~10的 落重复分 接种到含亚 、培养 稀释液接种一培养⊙⊙离纯化 培养 硒酸钠的液 鉴定 体培养基中 2 ① ② ③ ④ ⑤ A,培养富硒细菌时，培养基应调至酸性并添加维生素 B.步骤①中的培养基可进行高压蒸汽灭菌，对吸管、培养皿等可采 用干热灭菌 C.步骤②→③采用的是稀释涂布平板法，该方法可用于微生物分 离和活菌计数 D.步骤④中可以根据菌落周围是否出现红色区域对目的菌株进行筛选 9.(2024·重庆高考)养殖场粪便是农家肥的重要来源，其中某些微生 物可使氨氮化合物转化为尿素进而产生NH?,影响畜禽健康。为 筛选粪便中能利用氨氮化合物且减少NH3产生的微生物，兴趣小 组按下图进行实验获得目的菌株，正确的是 ) 菌株保存 培养 接种≥ 甲：不产 畜禽筛选利用氨氮氨 培养、离心脲酶的 粪便 化合物的 生肉音蛋白筛选不能利用取上清液 胨培养基 菌株 样本 ① 多个菌落 接种 尿素的多检测 4> ②个单菌落 尿素唯 ⑤ 乙分泌 氮源培养基 脲酶抑制 剂的菌株 A.①通常在等比稀释后用平板划线法获取单个菌落 B.②挑取在2种培养基上均能生长的菌株用于后续的实验 C.③可通过添加脲酶并检测活性，筛选得到甲、乙 D.粪便中添加菌株甲比乙更有利于NH3的减少 二、非选择题 10.(2025·江西九江开学联考)煤化工企业产生的焦化废水中的吡啶 (CHN)具有明显的致癌、致畸和致突变作用，易在生物体内富 集，会对人体健康及生态系统产生危害。实验人员从焦化废水处 理系统中分离出甲、乙两种吡啶降解菌，采用平板培养法比较二者 降解吡啶的能力。回答下列问题： (1)配制液体培养基I进行扩大培养：成分如下表所示，将甲菌株、 乙菌株分别接种在两瓶液体培养基I中培养。培养基中能为菌株 的生长提供碳源的物质是 ,为菌株的生长提供氨源的 物质是 配制好的培养基要进行灭菌，对培养基灭 菌常用的方法是 成分 MgSO, NH NO 吡啶 水 含量 5g 10g 10g 1000mI (2)配制不含NHNO3(其他条件不变)的液体培养基Ⅱ，然后在 培养基I和培养基Ⅱ中加入一定量的 ,分别制成平板I、 Ⅱ，并在两平板上打A、B两孔（大小相同），如图1所示。在无菌 条件下，将等量等浓度的甲菌株菌液和乙菌株菌液分别接种到平 板I的A和B两孔处，平板Ⅱ也进行同样的操作。在相同且适宜 的条件下培养一段时间，两个平板的两孔处的降解圈大小如图2 所示。 B B 平板 平板Ⅱ 图1 图2 据图分析能够得出的结论： (答出2点)。根据图中所示实验结果可知，治理焦化废水中吡啶 造成的污染应选用的菌株是 (3)实验人员采用显微镜直接计数法和稀释涂布平板法分别对取 自平板Ⅱ中的甲细菌的数量进行计数，发现测得的细菌数量前者 大于后者，其原因是 第49课时 植物细胞工程 一、选择题 1.(2024·北京高考)大豆叶片细胞的细胞壁被酶解后，可获得原生质 体。以下对原生质体的叙述错误的是 ( A.制备时需用纤维素酶和果胶酶 B.膜具有选择透过性 C.可再生出细胞壁 D.失去细胞全能性 2.甲植物的细胞质基因决定高产性状，乙植物的细胞核基因决定耐盐 性状。某研究小组用一定的方法使甲植物细胞的细胞核失活、乙植 物细胞的细胞质失活，之后利用植物体细胞杂交技术培育高产耐盐 再生植株。下列相关叙述错误的是 () A.进行植物体细胞杂交之前，先利用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁 B.失活处理可使得未融合和同种融合的原生质体均不能正常生长分裂 C.愈伤组织经再分化可形成胚状体，长出芽和根，进而发育成完整植株 D.再生植株含有两种优良性状的基因，一定能表现出高产耐盐的性状 3.(2024·甘肃高考)兰州百合栽培过程中易受病毒侵染，造成品质退 化。某研究小组尝试通过组织培养技术获得脱毒苗，操作流程如下 图。下列叙述正确的是 ( 愈伤组织 芽 脱毒苗 取术 ① ② 转接 兰州百合 分生区 1号培养基 2号培养基 3号培养基 A.①为脱分化过程，1号培养基中的愈伤组织是排列规则的薄壁组 织团块 B.②为再分化过程，愈伤组织细胞分化时可能会发生基因突变或基 因重组 C.3号培养基用于诱导生根，其细胞分裂素浓度与生长素浓度的比 值大于1 D.百合分生区附近的病毒极少，甚至无病毒，可以作为该研究中的 外植体 4.(2024·江苏徐州统考)植物细胞工程在农业、医药工业等方面有着 广泛的应用，下列相关叙述错误的是 () A.切取一定大小的草莓植株茎尖进行组织培养，可获得脱毒苗 B.用Y射线处理烟草的愈伤组织细胞，可培育抗盐碱的烟草 C.在离体条件下对紫草细胞进行植物细胞培养，可大量获得紫草宁 D.炼苗后的植株应移栽到含有蔗糖和多种植物激素的基质上 5.(2025·江苏南京学情调研)马铃薯长期营养繁殖会导致病毒葛延， 我国科研人员利用马铃薯茎尖培养获得脱毒苗，使马铃薯的产量和 品质大幅度提高，脱毒流程如下图。下列叙述正确的是 母株选择材料消毒→剥离茎尖一诱导培养一病毒检测 无病毒快速繁殖 A.茎尖材料消毒时，要用配制好的酒精和次氯酸钠溶液各处理 30 min B.茎尖培养到愈伤组织后须先转移到生长素比例较高的培养基再 培养 C.病毒检测时可用抗毒血清进行免疫检测，呈阳性反应则为带毒苗 D.生根试管苗炼苗后，应连带培养基栽植于消过毒的蛭石或珍珠岩中 6.(2024·广西南宁三模)青蒿素是从黄花蒿中提取的抗疟疾特效药， 在黄花蒿产青蒿素的代谢过程中FPS酶起决定性作用。研究人员 在对黄花蒿进行植物组织培养时，发现培养到丛芽或胚状体阶段才 有青蒿素，下列表述错误的是 ( A.可用蛋白质工程对FPS酶进行改造以提高青蒿素产量 B.通过对愈伤组织进行植物细胞培养也可以得到青蒿素 C.从外植体到愈伤组织形成过程中发生了基因的选择性表达 D.植物组织培养技术产青蒿素，可以不受原材料和季节限制 7.(2025·四川成都摸底考试)植物细胞质中的叶绿体有相对独立的 遗传体系，控制着许多优良性状。胞质杂交是植物体细胞杂交应用 的一个重要方面，下图是利用胞质杂交培育抗病植株的实验流程， 下列叙述正确的是 ( 植株1 ①叶肉细胞」 X射线 原生质体 ·细胞质基因 破坏染色体 ④ ⑤ 植株2 →叶肉细胞原生质体 ②融合的③ 原生质体 再生细胞壁愈伤组织→抗病植株 A.过程①需用纤维素酶和蛋白酶处理细胞壁 B.利用聚乙二醇可诱导②和③过程的发生 C.在③④⑤过程中都会形成新的细胞壁 D.④和⑤过程通常在同一种培养基中进行 8.(2024·湖北高考)植物甲抗旱、抗病性强，植物乙分蘖能力强，结实 性好。科研人员通过植物体细胞杂交技术培育出兼有甲、乙优良性 状的植物丙，过程如下图所示。下列叙述错误的是 酶解(1.5小时) 植物甲 甲的 叶片 → 原生 质体 融合 ①混合酶液处理 ②的原 ③杂种④愈伤 ⑤， 生质 细胞 组织 植物丙 体 植物乙 乙的 原生 叶片 · 酶解(2小时) 质体 第九单元生物技术与工程19 A,过程①中酶处理的时间差异，原因可能是两种亲本的细胞壁结 构有差异 B.过程②中常采用灭活的仙台病毒或PEG诱导原生质体融合 C.过程④和⑤的培养基中均需要添加生长素和细胞分裂素 D.可通过分析植物丙的染色体，来鉴定其是否为杂种植株 9.(2024·安徽合肥联考)青霉素发酵是高耗氧过程，为保证发酵过程 中青霉素的持续高产，研究人员将透明颤菌的血红蛋白引入青霉 菌，设计方案如图所示。下列叙述正确的是 ( 甲硫氨酸营养处理①原生 缺陷型青霉菌 质体A 处理③融合处理④杂种 细胞 菌株 精氨酸营养缺处理②原生 陷型透明颤菌 质体B A.①②过程需要用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁获得原生质体 B.③过程通常在低渗溶液中采用PEG融合法诱导原生质体融合 C.除上述方案外，通过杂交育种的方式也可以培养出该杂种菌株 D.可利用缺乏甲硫氨酸和精氨酸的基本培养基筛选出融合细胞 二、非选择题 10.(2025·辽宁大连期中) 紫外线 非对称细胞融合技术常 抗病胡 根细胞 指利用某种外界因素 萝卜肉 下原生质体 愈再 质根薄片 ② (如射线)辐照某一细胞 ① ③伤④生 烟草叶 叶肉细胞培养、筛选织 植 种植號 原生质体，选择性地破 肉细胞 原生质体 坏其细胞核，使其染色体片段化并丧失再生能力；再利用此原生质 体作为部分遗传物质的供体与另一原生质体融合，从而实现有限 基因的转移，在保留亲本之一全部优良性状的同时，改良其某个不 良性状。用这种方法可以将胡萝卜的抗黑腐病性状转移到烟草 中，获得抗黑腐病（由真菌引起）烟草杂种植株，流程如图所示。回 答下列问题： (1)原生质体培养液中需要加入适宜浓度的甘露醇以保持一定的 渗透压，其作用是 。与诱导动物细胞融合相比， ②过程不宜采用的诱导方法是 :③④过程中需添加的 两种关键性植物激素是 (2)非对称细胞融合过程中，染色体丢失的程度在同一组合不同的 杂种植株中是不一致的，导致融合后再生后代中的 数量 变化很大。影响细胞融合染色体丢失程度的因素，除了紫外线，还 可能是 (答两点)。 (3)对杂种植株进行 接种实验，可筛选出对黑腐病具有 高抗性的杂种植株。无氧的环境，保证乳酸菌的无氧呼吸，C错误：平板划线法无法 对培养的微生物进行计数，D错误。 5.D对原材料进行预处理时不可对竹笋进行灭菌处理，灭菌会 杀死材料表面的菌种，A错误；密封发酵时山泉水不能注满发 酵装置，因为在发酵初期有其他微生物，如酵母菌等无氧呼吸 可产生二氧化碳，如果发酵装置装得太满，可能会使发酵液溢 出，B错误；酸笋的制作流程与泡莱类似，所用菌种为乳酸菌， 故酸笋中的酸味主要来自乳酸菌发酵产生的乳酸，C错误；适 当延长发酵时间可使亚硝酸盐被分解，减少酸笋中亚硝酸盐的 含量，D正确 6.A果醋发酵所需菌种是醋酸菌，其可在糖源充足时将糖直接 转化为乙酸，当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛 变为乙酸，A错误；发酵工程的内容包括菌种选育、培养基的配 制、灭菌、菌种扩大培养和接种、发酵过程和产品的分离提纯 (生物分离工程)等方面，B正确；酿酒酵母菌种相对单一，利用 酿酒酵母发酵生产白酒可以使酒的产量和质量明显提高，C正 确；溶菌酶具有溶解细胞壁的能力，特别是对于细菌的细胞壁 具有很强的溶解作用，延长食品的保存期主要是防止微生物污 染、杀死微生物或抑制其在食品中的生长繁殖，因此为了延长 食品的保存期可以添加适量的溶菌酶，D正确 7.B家中制作葡萄酒不需要接种酵母菌，A错误；泡莱和果酒都 是在厌氧条件下发酵产生的传统食品，B正确：传统发酵的培 养基不需要严格灭菌，C错误；现代发酵工程生产谷氨酸需要 严格控制中性或弱碱性条件，否则得不到谷氨酸，D错误 8.D酶具有专一性，米曲霉所分泌的蛋白酶只能分解蛋白质，不 能分解淀粉，A错误；米曲霉、乳酸菌、酵母菌等菌种在发酵过 程中为种间竞争关系，B错误：氨源主要来自大豆中的蛋白质， C错误；发酵池内发酵主要是无氧发酵，所以转至发酵池发酵 的过程中，需要提供无氧条件，D正确 9.B在发酵环节中，发酵条件变化不仅会影响微生物的生长繁 殖，也会影响微生物的代谢途径，A正确；产朊假丝酵母和啤酒 酵母属于不同的物种，菌落的差异体现了物种多样性，B错误： 对微生物进行扩大培养选用液体培养基，因为液体培养基有能 进行通气培养、振荡培养的优，点，有利于微生物与营养物质和 氧气充分接触，利于其繁殖，C正确；青霉素可以杀死细菌，可 利用加入青霉素的选择培养基进行产朊假丝酵母等真菌的分 离，D正确。 10.(1)让酵母菌在有氧条件下大量繁殖C:H,O。 2 C:H;OH(酒精)十2CO2十能量(2)温度、pH、溶解氧酵 母菌数量、酒精浓度(3)不足发酵前后的H酵母菌及 醋酸菌产生的大量代谢物如酒精及乙酸抑制了其他杂菌的生 长繁殖(4)醋酸菌是好氧细菌，最适生长温度为30~35℃， 夏天温度较高，导致醋酸菌大量繁殖产生醋酸 解析：(1)制作果酒时，一般要先通气后密封，其中先通气的目 的是让酵母菌在有氧条件下大量繁殖。在无氧条件下酵母菌 酶 能将葡萄糖发酵产生酒精和CO2,其反应式为C:H2O。 2C,HOH(酒精)十2CO,十能量。(2)酒精发酵过程中必须 严格控制好温度、H、溶解氧、罐压、营养物质等发酵条件，使 发酵全过程处于最佳状态，同时定期检测微生物数量（酵母菌 数量)、产物浓度（酒精浓度）等，以了解发酵进程，实施终止发 酵或更换发酵液。(3)醋酸菌将乙醇变为乙酸的环境条件是 糖源不足，在糖源和氧气都充足的情况下，醋酸菌将葡萄糖直 接发酵成乙酸。乙酸的产生会导致发酵液PH变化，鉴定果 醋的常用方法是检测发酵液前后的H变化。酵母菌及醋酸 菌产生的大量代谢物如酒精及乙酸会柳制其他杂菌的生长繁 殖，因此通常不需要进行严格的消毒灭菌处理。(4)醋酸菌是 好氧细菌，最适生长温度为30一35℃，夏天温度较高，所以酿 制成功的果酒如果暴露在空气中，会导致醋酸菌大量繁殖而 逐渐出现酸味。 第48课时微生物的培养技术与应用 1.A无菌技术主要包括消毒和灭菌，消毒是不彻底的，只能消灭 大部分的细菌、病原体，而灭菌是彻底的，可以消灭所有的细 菌、病原体，A正确；配制好的培养基转移到锥形瓶中，再通过 湿热灭菌法进行灭菌，B错误：倒平板时不能把培养皿盖完全 打开，以免外来杂菌带来污染，C错误：接种前接种环必须灼烧 灭菌，接种完成后接种环也需要灼烧灭菌，防止对环境造成污 染，D错误。 2.D“检测土壤中细菌总数”常用稀释涂布平板法计数，A正确 由于土壤中细菌的数量庞大，需要对土样进行充分稀释，因此 取101、10°、105倍的土壤稀释液和无菌水各0.1mL,分别涂布 于各组平板上，B正确：待涂布的菌液被培养基吸收后，需要将 平板倒置，并在37℃恒温环境中培养24~48小时，C正确：确 定对照组无菌后，选择菌落数在30~300之间的实验组平板进 行计数，D错误 3 3.D振荡培养的目的有两个，一方面使菌株与培养液充分接触， 提高营养物质的利用率，另一方面能增加培养液中的溶氧量， A正确：平板划线法通过接种环在固体培养基表面连续划线的 操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面，经数次划 线后培养，可以分离得到单菌落，这种纯化方法不能用于活菌 计数，B正确；实验目的是从土壤中筛选出能降解塑料的细菌， 则应用以塑料为唯一碳源的选择培养基筛选，能降解塑料的菌 株可生存繁殖，不能降解塑料的菌株因无可利用的碳源生长受 到抑制，C正确；当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到 的只是一个菌落，因此单菌落可能是由一个或多个细菌繁殖而 来的，D错误 4.D腌制酸笋是利用乳酸菌发酵产生乳酸，而乳酸菌是厌氧微 生物，所以腌制酸笋需要水封，为乳酸菌发酵提供无氧环境， A正确；将酸笋发酵液接种到固体培养基中可以采用稀释涂布 平板法，B正确；溶钙圈直径与菌落直径比值越大，表明该菌落 产生的乳酸越多，即为目标菌落，C正确；胆固醇只含有C、H、 O三种元素，不含N,所以不能为微生物生长提供氯源， D错误。 5.D 苯胺为有机物，含有碳元素和氨元素，选择培养基应以苯胺 作为唯一的碳源和氨源，可以用来筛选苯胺降解菌，A正确；驯 化培养的过程中苯胺的浓度逐渐增大，其目的是筛选降解效率 更高的菌株，B正确：结果显示在10一5稀释度所得的三个平板 中的平均菌落数为62个，此数值在30和300之间，符合要求， 则103稀释度下平板中的菌落数大于300，C正确；浓度为 1000mg/L的驯化培养液中1L苯胺降解菌的数量利用公 式C÷V×M可以计算为62÷0.1×105=6.2×102（个）， D错误。 6.C微生物培养需要有一定的营养、适宜的温度和DH等条件」 故实验过程中需要设置适宜的温度和DH环境，并保证严格的 无菌操作，A正确；聚乳酸(PLA)是以乳酸为主要原料的聚合 物，故可为PLA降解菌提供碳源，不能利用PLA的微生物无 法在该培养基上生存，故PLA又对培养基中微生物起选择作 用，B正确；根据题图可知，体外培养可采用稀释涂布平板法进 行接种，同时将接种和未接种的平板倒置培养，C错误；菌落形 状、大小、颜色及DNA检测等是进行菌种鉴定的重要依据，故 纯化培养后，可根据菌落形状、大小、颜色及DNA检测等进行 菌种鉴定，D正确 7.D 一次性手套的主要成分是聚乙烯，可将一次性手套埋在土 壤里一段时间后，再从土壤取样，聚乙烯降解菌的含量会增多， A正确；题图中两处培养基只允许降解聚乙烯的微生物生长， 因此均以聚乙烯为唯一碳源，均属于选择培养基，B正确；振荡 培养可以增加溶氧量，促进微生物充分接触和利用营养物质， 能够增加聚乙烯降解菌的数量，C正确：平板划线法接种可用 于分离纯化聚乙烯降解菌，但不能对其进行计数，D错误。 8.A 培养细菌时，培养基应该调至中性或弱碱性，且培养某些细 菌（如乳酸杆菌）时才需要在培养基中添加雏生素，A错误；获 得纯培养物的关键是没有杂菌污染，培养基需要灭菌但又需保 持其中水分，因此可用高压蒸汽灭菌，吸管、培养皿等需要保持 千燥，可用干热灭菌，B正确；步骤②→③采用的是稀释涂布平 板法，该方法可用于微生物分离和活菌计数，C正确；步骤 ④中，如果菌落周围出现红色区域，则说明含有富硒细菌，为了 筛选出高效菌株，可比较单菌落周围红色区域的大小，从平板 中挑取实验效果明显的目的菌株，接种于新的培养基平板，对 菌株进行进一步的纯化，D正确。 9.C平板划线法不需要稀释，A错误；由图可知，②筛选不能在 尿素唯一氨源培养基上生长，而能在牛肉膏蛋白胨培养基上生 长的菌株用于后续的实验，B错误；所筛选出的菌株之所以不 能利用尿素，可能是由于该菌株不产生脲酶或分泌脲酶抑制 剂，所以③可通过添加脲酶并检测活性，筛选得到甲、乙，C正 确：甲不产生脲酶，乙能分泌脲酶抑制剂，粪便中可能还含有其 他能产生脲酶的菌株，粪便中添加菌株乙能柳制其他菌株产生 的脲酶活性，所以粪便中添加菌株乙比甲更有利于NH?的减 少，D错误。 10.(1)吡啶吡啶和NH,NO3 湿热灭菌法（或高压蒸汽灭菌 法)(2)琼脂在添加了NH,NO3的培养基中，甲菌株和乙 菌株对吡啶都有一定的降解能力，且甲菌株的降解能力大于 乙菌株的：在没有添加NH,NO,的培养基中，甲菌株对毗啶 的降解能力有所下降，乙菌株不能增殖甲菌株(3)前者微 生物分散，活菌和死菌一起计数：后者存在多个活菌形成一个 菌落的情况，且只计数活菌 解析：(1)培养基的成分有碳源、氨源、无机盐和水等。从组成 培养基的物质所含的化学元素可知，作为碳源的成分是吡啶， 作为氨源的成分是吡啶和NHNO3。常用湿热灭菌（或高压 蒸汽灭菌)法对培养基进行灭菌。(2)制作固体培养基时，需 要加入琼脂。根据图2可知，在添加了NH,NO,的培养基 中，甲菌株和乙菌株都能生长，两者对吡啶都有一定的降解能 参考答案 力，A处的降解圈大于B处的，说明甲菌株对吡啶的降解能力 大于乙菌株的。在没有添加NH,NO3的培养基中，A处的降 解圈变小，说明甲菌株对吡啶的降解能力有所下降，而B处的 降解圈与图1的B处孔的大小相同，说明乙菌株不能增殖。 综上分析，治理焦化废水中吡啶造成的污染应选用甲菌株。 (3)显微镜直接计数法把死菌和活菌一起计数，稀释涂布平板 法只计数活菌，还可能存在多个活菌形成一个菌落的情况，故 前者测得的细菌数量多于后者的。 第49课时植物细胞工程 1.D大豆叶片细胞具有细胞壁，细胞壁的成分主要是纤雏素和 果胶，因而制备原生质体时需用纤雏素酶和果胶酶进行处理以 去除细胞壁，A正确：原生质体包含细胞膜以及胞内细胞器膜 (如液泡膜)等，生物膜的功能特点是具有选择透过性，B正确： 原生质体经过培养可以再生出新的细胞壁，C正确；分离出的 原生质体保留了植物细胞的遗传物质，具有全能性，D错误。 2.D细胞壁的主要成分为纤维素和果胶，在获取原生质体时，常 采用纤维素酶和果胶酶进行去壁处理，A正确：对甲植物细胞 的细胞核、乙植物细胞的细胞质进行失活处理，可使得未融合 和同种融合的原生质体均不能正常生长分裂，从而筛选出杂种 细胞，B正确；愈伤组织经再分化可形成胚状体，长出芽和根， 进而发育成完整植株，这是植物组织培养过程中的正常发育途 径，C正确；再生植株含有两种优良性状的基因，但基因的表达 是复杂的，受到多种因素的调控，因此再生植株不一定能表现 出高产耐盐的性状，D错误。 3.D在脱分化过程中，1号培养基中的愈伤组织是排列不规则 的薄壁组织团块，A错误；愈伤组织细胞分化时可能会发生基 因突变，但基因重组发生在减数分裂过程中，而愈伤组织细胞 的分化过程不会发生基因重组，B错误；3号培养基用于诱导生 根，其细胞分裂素浓度与生长素浓度的比值应该小于1，C错 误：百合分生区附近的病毒极少，甚至无病毒，因此可以作为该 研究中的外植体，D正确 4.D因为植物顶端分生区附近的病毒极少，甚至没有病毒，所以 将草莓植株茎尖进行组织培养能获得脱毒苗，A正确；由于基 因突变是不定向的，所以用Y射线处理烟草的愈伤组织细胞， 进行诱变育种，可筛选得到抗盐碱的烟草新品种，B正确；离体 的条件下对紫草细胞进行植物细胞培养，可获得大量紫草细 胞，从中获得大量紫草宁，C正确；炼苗后的植株应移栽到条件 适宜的土壤中，D错误。 5.C茎尖材料消毒时，酒精处理的时间一般较短，通常为30s左 右，次氯酸钠溶液处理的时间一般为30min,A错误；脱分化和 再分化使用的培养基不同，通常使愈伤组织先生芽再生根，所 以茎尖培养到愈伤组织后须先转移到细胞分裂素比例较高的 培养基再培养，B错误；病毒含有特定的蛋白质抗原，可利用抗 毒血清进行检测，呈阳性反应则为带毒苗，C正确；生根试管苗 在培养箱内生长几日，用流水清洗掉根部的培养基后，将幼苗 移植到消过毒的蛭石或珍珠岩等环境中，待其长壮后再移栽入 土，D错误。 6.B在黄花蒿产青蒿素的代谢过程中FPS酶起决定性作用，所 以可用蛋白质工程对FPS酶进行改造以提高青蒿素产量，A正 确；在对黄花蒿进行植物组织培养时，发现培养到丛芽或胚状 体阶段才有青蒿素，说明通过对愈伤组织进行植物细胞培养不 能得到青蒿素，B错误；从外植体到愈伤组织形成过程中发生 了脱分化，该过程中发生了基因的选择性表达，C正确；植物组 织培养技术产青蒿素，可以不受原材料和季节限制，D正确 7.C植物细胞壁的主要成分是纤雏素和果胶，过程①需用纤雏 素酶和果胶酶处理细胞壁，A错误；过程②是植株1的叶肉细 胞原生质体与植株2的叶肉细胞原生质体发生融合的过程，该 过程可以利用聚乙二醇诱导，但不会诱导细胞壁的再生，B错 误；过程③融合的原生质体会再生细胞壁，过程④⑤存在有丝 分裂，故在③④⑤过程中都会形成新的细胞壁，C正确；过程 ④是脱分化形成愈伤组织，过程⑤是再分化形成芽和根，过程 ④和⑤通常不在同一种培养基中进行，D错误。 8.B酶解是为了去除植物细胞的细胞壁，过程①中酶处理的时 间不同，说明两种亲本的细胞壁结构有差异，A正确；过程②为 原生质体的融合，常用PEG诱导原生质体融合，灭活的仙台病 毒可诱导动物细胞融合，不能用于植物，B错误；过程④脱分化 和⑤再分化的培养基中均需要添加生长素和细胞分裂素，但在 两个过程中两者比例不同，C正确；植物丙是由植物甲和植物 乙体细胞杂交形成的个体，应具备两者的遗传物质，因此可通 过分析植物丙的染色体，来鉴定其是否为杂种植株，D正确 9.D酶具有专一性，纤雏素酶和果胶酶可去除植物细胞的细胞 壁，但透明颤菌属于细菌，细胞壁的成分主要是肽聚糖，青霉菌 是真菌，细胞壁的成分主要是几丁质，A错误：③过程在低渗溶 液中会发生渗透吸水，导致原生质体涨破，B错误：杂交育种在 自然状态下适用于进行有性生殖的真核生物，上述杂种菌株不 2对勾·高考一轮复习金卷生物 2( 适合进行杂交育种，C错误：融合细胞兼有两个细胞的特，点，可 利用缺乏甲硫氨酸和精氨酸的基本培养基筛选出融合细胞， D正确。 10.(1)保持原生质体的完整性（正常形态）灭活病毒诱导 生 长素和细胞分裂素(2)染色体进行细胞融合的不同物种 的亲缘关系、细胞所处的分裂时期(3)黑腐病菌 解析：(1)原生质体无细胞壁，原生质体培养液中只需要加入 适宜浓度的甘露醇以保持一定的渗透压，其作用是雏持细胞 的形态和功能，从而保持原生质体的完整性。诱导动物细胞 融合与诱导植物细胞融合都可用化学方法和物理方法，此外 动物细胞融合还可用灭活的病毒作为诱导剂，因此与诱导动 物细胞融合相比，②过程不宜采用的诱导方法是灭活病毒诱 导；③④过程分别表示脱分化和再分化，③④过程中需添加的 两种关键性植物激素是生长素和细胞分裂素。(2)非对称细 胞融合过程中，染色体丢失的程度在同一组合不同的杂种植 株中是不一致的，导致融合后再生后代中的染色体数量变化 很大。非对称细胞融合技术利用此原生质体作为部分遗传物 质的供体与另一原生质体融合，从而实现有限基因的转移，在 保留亲本之一全部优良性状的同时，改良其某个不良性状，因 此影响细胞融合染色体丢失程度的因素，除了紫外线还有进 行细胞融合的不同物种的亲缘关系；紫外线使染色体发生变 异，而分裂的细胞更容易发生染色体变异，因此影响细胞融合 染色体丢失程度的因素，还可能有细胞所处的分裂时期。 (3)对杂种植株进行鉴定最简单的方法是从个体水平上进行 检测，即接种黑腐病菌实验，该实验可筛选出对黑腐病具有高 抗性的杂种植株。 第50课时 动物细胞工程 1.A植物顶端分生区附近（如茎尖）的病毒极少，甚至无病毒，因 此，切取一定大小的茎尖进行组织培养，再生的植株就有可能 不带病毒，从而获得脱毒苗，A错误：在斋牧生产中，利用体细 胞核移植技术，可以加速家高遗传改良进程、促进优良高群繁 育，B正确；单克隆抗体一药物偶联物利用抗原抗体特异性结 合的原理，通过将细胞毒素与能特异性识别肿瘤抗原的单克隆 抗体结合，实现了对肿瘤细胞的选择性杀伤，C正确；将自体体 细胞经诱导形成具有胚胎千细胞特性的PS细胞，将它移植回 病人体内后，理论上可以避免免疫排斥反应，D正确 2.D传代培养时，培养皿等实验用具需要灭菌处理防止污染， 密封会导致培养环境中氧气减少，不利于细胞培养，A错误； 与①相比，②所处时期细胞增长变缓，所以选取②的细胞进行 传代培养比①更合理，B错误；悬浮生长的细胞直接用离心法 收集进行传代培养，贴壁生长的细胞需要先用胰蛋白酶等处 理，然后再用离心法收集，C错误；细胞密度过大、营养物质减 少、代谢废物增多，都会导致细胞停止分裂而进入平台期， D正确。 3.D向小鼠注射抗原是为了获得能产生特定抗体的B细胞，即 ①，A正确；过程②为B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合的过程，可 以用灭活的病毒诱导，B正确；②表示细胞融合，可能存在同种 细胞核融合的细胞，因此需要在特定的选择培养基上进行筛 选，C正确；④过程表示用抗体阳性检测筛选出能无限增殖并 能分泌特异性抗体的杂交瘤细胞群，D错误 4.D为防止细菌污染，培养4CL千细胞时可向培养液中加入适 量的抗生素，A错误；4CL干细胞不会与其他胚胎细胞发生细 胞融合，B错误：对嵌合囊胚进行胚胎分割后移植，可以产生更 多的嵌合体猴，C错误；嵌合体猴中，由4CL干细胞增殖分化形 成的组织可发出绿色荧光，如果存在于体细胞中，其遗传信息 不能遗传给后代，D正确。 5.D用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理可将组织分散成单个细胞， A正确；动物细胞培养的气体环境是95%空气（细胞代谢必需 的)和5%CO2,CO2的作用是雏持培养液的pH稳定，B正确 生物反应器中的支架提供了更多的细胞附着面积，有利于细胞 贴壁生长，即可为细胞贴壁生长提供更多贴附空间，C正确；原 代培养是指动物组织经处理后的初次细胞培养，不是指肌肉母 细胞的第一次细胞增殖，D错误。 6.A体外培养至MⅡ期的卵母细胞不需要进行获能处理就可 进行后续操作，A错误；卵母细胞去核通常是用显微操作法去 除细胞中的纺锤体和染色体的复合物，B正确；过程③构建重 构胚时是将供体细胞整个注入去核卵母细胞中，因此图中的重 构胚中含有卵母细胞和供体细胞的细胞质，C、D正确。 7.D天然抗原可直接刺激B细胞，但通常需要通过抗原呈递细 胞呈递给辅助性T细胞，A错误；过程①多次注入的目的是获 得较多的免疫的B淋巴细胞，该过程不提取抗体，B错误；胶原 蛋白酶可制备单个动物细胞，过程③中无须加入胶原蛋白酶， C错误；抗原与抗体的结合具有特异性，单克隆抗体可针对一 种特定抗原，故多克隆抗体对病原体的免疫可能较单克隆抗体 全面，D正确。 08