周测评(二十四) 基因工程、生物技术的安全性与伦理问题-【衡水真题密卷】2025-2026全学年高二生物学科素养周测评（人教多选版 鲁湘辽黑吉蒙冀赣专版）

2025一2026学年度高二学科素养周测评（二十四） 生物学·基因工程、生物技术 的安全性与伦理问题 本试卷总分100分，考试时间40分钟。 一、选择题：本题共7题，每小题4分，共28分。在每小题给出的四个选项中，只有一项是 符合要求的。 题号 1 2 3 4 6 7 答案 1.化疗会造成癌症病人血小板减少。血小板生成素(TPO)可促进血小板产生。研究人员 将含人TPO基因的表达载体导入中国仓鼠卵巢细胞中，获得有生物活性的TPO并应 用于临床。下列叙述错误的是 () A.用PCR技术可获取和扩增人TPO基因 B.构建表达载体需要解旋酶和DNA聚合酶 C.表达载体包括TPO基因、标记基因、启动子和终止子等 D.用抗原一抗体杂交技术可检测TPO基因的表达情况 2.生物技术就像一把“双刃剑”，它既可以造福人类，也可能在使用不当时给人类带来潜在 的危害。下列叙述错误的是 ) A.生物武器是用病毒类、干扰素及生化毒剂类等来形成杀伤力 B.干细胞培养在临床医学等领域前景广泛，但也可能面临一些问题，如存在导致肿瘤发 生的风险 C.研究转基因农作物时应采取多种方法防止转基因花粉的传播，避免基因污染 D.反对设计试管婴儿的原因之一是避免有人滥用此技术选择性设计婴儿 3.下列关于PCR扩增DNA片段及电泳鉴定的叙述，错误的是 A.在凝胶中DNA分子的迁移速率主要和DNA分子的大小、构象等有关 B.耐高温的DNA聚合酶只能从引物的5'端开始连接核糖核苷酸 C.反应过程中的每一轮循环依次包括变性、复性、延伸三步 D.PCR扩增产物一般可通过琼脂糖凝胶电泳来进行鉴定 4.DREB1A是克隆自拟南芥的逆境诱导转录因子，可以调控多个与植物干旱、高盐及低温 耐性有关的功能基因表达。某科研小组通过实验研究以花生茎尖细胞作为DREB1A 基因受体的可行性。下列叙述错误的是 () A.用PCR技术扩增DREB1A基因，扩增n次需要引物2n+1一2个 B.该实验是利用基因重组原理将DREB1A基因整合到花生基因组 C.该实验应选择合适的启动子以驱动DREB1A基因的复制和转录 D.该实验可以利用农杆菌转化法将DREB1A基因导入花生茎尖细胞 5.B-半乳糖苷酶由lacZ基因编码，能将无色的X-gal分解为蓝色物质。将lacZ基因分成 两段，分别放在质粒（如图）和受体菌中，表达出的两条肽α肽和ω肽通过非共价键结合 仍有相同的酶活性。在含有氨苄青霉素、X-gal、IPTG(诱导lacZ基因表达)的LB培养 基上培养转化后的受体菌。下列叙述正确的是 () 高二学科素养周测评（二十四）生物学第1页（共4页）】 真题 每一次桃战，都是成长的契机 LB培养基的配方如下： 班级 flori 胰蛋白胨10gL Ampr 氨苄青霉素 酵母提取物5g/L 抗性基因 lac Z-a -MC5 目的基因 氯化钠10g/L 姓名 pGEM-T Vector 多克隆抗体 琼脂 (3000bp) 水 ori 得分 A.所有未转化菌株均能生长且呈白色，重组质粒转化的菌落呈蓝色 B.转化失败的菌落呈白色，空载体转化的菌落呈蓝色，重组质粒转化的菌落呈白色 C.转化失败的菌株无法生长，空载体转化的菌落呈蓝色，重组质粒转化的菌落呈白色 D.转化失败的菌株无法生长，空载体转化的菌落呈白色，重组质粒转化的菌落呈蓝色 6.水蛭素是一种蛋白质，可用于预防和治疗血栓。研究人员发现用赖氨酸替换水蛭素第 47位的天冬酰胺可以提高它的抗凝血活性。下列叙述正确的是 () A.该项替换研究中，目前可行的直接操作对象是蛋白质 B.该项替换研究中，改造前后水蛭素的空间结构未发生改变 C.该项替换研究的思路与按照中心法则合成蛋白质的思路一致 D.改造的水蛭素基因导入微生物后可利用发酵工程生产水蛭素 7.载体是基因工程中携带外源DNA片段（目的基因）进入受体细胞的重要运载工具，常见 的载体类型主要有基因克隆载体和基因表达载体。如图是利用细菌生产人胰岛素的基 本流程示意图，下列叙述正确的是 () 组 导人 载体B 载体A受体菌 o8 O切制1 出有B 细菌A 胰岛素基因 人体染色体DNA片段 平板筛选、鉴定分析 A.重组载体A、重组载体B分别是基因表达载体和基因克隆载体 B.载体A和载体B都必须含有限制酶切割位点、复制原点和标记基因 C.必须把目的基因插入重组载体A的启动子和终止子之间 D.基因表达载体可使目的基因在受体细胞中稳定存在 二、选择题：本题共3小题，每小题8分，共24分。在每小题给出的四个选项中，有一个或 多个选项符合题目要求。全部选对得8分，选对但不全的得4分，有选错的得0分。 题号 8 9 10 答案 8.春季是感冒多发季，很多人感染甲流或细菌性感冒，出现高烧、咳嗽、乏力、呕吐等症状， 为确诊病原体是否为甲流病毒（遗传物质为单链RNA),通常采用PCR和琼脂糖凝胶电 泳技术鉴定，以下分析正确的是 () A.呼吸道取样，提取RNA,先逆转录成cDNA,再进行PCR扩增 B.PCR扩增时，引物越短，特异性越强，鉴定时只出现特异性条带 C.电泳原理是利用DNA的带电粒子向与它所带电荷相反的电极移动 D.若确诊患者感染甲流病毒，可通过注射抗生素进行治疗 卷 高二学科素养周测评（二十四）生物学第2页（共4页） D 9.除草剂有效成分草甘膦的作用机理是和PEP竞争性结合EPSP合酶，从而扰乱生物体 的正常氨代谢。但作为一种非选择性除草剂，草甘膦对农作物同样具有杀伤作用，这大 大限制了其在农业生产中的应用，培育抗草甘膦作物将会解决这一难题。下列说法正 确的是 () A.长期使用草甘膦除草剂，会导致杂草产生抗除草剂突变，降低除草剂的效果 B.根据草甘膦的作用机理，可通过导入强启动子使EPSP合酶过量表达获得抗草甘膦 作物 C.可通过蛋白质工程直接替换EPSP合酶个别氨基酸，使草甘膦无法与EPSP酶结合 D.在培育抗草甘膦作物时，为避免外源基因流入杂草，最好将外源基因插入细胞核基 因组 10.蛋白A是动物细胞分泌的一种优质蛋白，为使得大肠杆菌具备合成蛋白A的能力， 研究人员进行了如图1所示的操作，图2表示3种限制酶的切割位点。下列叙述正 确的是 () 启动子、BamH I Sal I 氯霜素抗 四环素抗 5-GGATCC-3' 3-CCTAGG-5' 性基因 性基因 终止子 BamH I EcoR I 复制原点 酶切、连接、转化 5'-GTCGAC-3' 大肠杆菌 3-CAGCTG-5' 引物1 引物3 含康生物M的平板 SalI PATTACGGATCG..CGTGCTAACGT-OD 5-GAATTC-3 ① D 3-CTTAAG-5 引物2 基因A 引物4 EcoR I 图1 图 A.利用PCR技术扩增基因A应选择的一对引物是引物2和引物3 B.为使得扩增出的目的基因带有限制酶的切割序列，上游引物序列为5'-GGATC CATTACGGATCG-3' C.抗生素M应为氯霉素，在该平板上能生长的菌落就是含有重组质粒的大肠杆菌 D.从动物细胞提取DNA扩增获得的基因A正确导入大肠杆菌后能正常表达出蛋白 质A 三、非选择题：本题共2小题，共48分。 11.（24分)利用转基因的工程菌生产药用蛋白，近些年在我国制药行业中异军突起，我国 科学家采用基因工程技术生产干扰素已实现量产。图1中质粒是基因工程常用的一 种质粒pBR322,目的基因干扰素基因在的DNA片段酶切位点如图2所示。 氨苄青霉素抗性基因 酶A pBR322 酶A 酶C 启动子 四环素 抗性基因 酶B目的基因 图1 图2 (1)DNA分子经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式 和平末端。在基因工程操作中，DNA连接酶主要有两类：分别是 和 ,这两类酶都能将双链DNA片段“缝合”起来，恢复被限制酶切开 的 (2)据图分析，在基因工程操作中，构建重组DNA分子时，可以选用 两种 限制酶对质粒pBR322和干扰素基因进行双酶切，目的是既能保证目的基因和质粒正 D 高二学科素养周测评（二十四）生物学第3页（共4页）》 真题密 向连接，又能防止质粒与目的基因自身环化，除此之外，还可防止 0 (3)为了获得更多的目的基因，可用PCR扩增，PCR的原理是 PCR反应体系中加入了dNTP,这些物质的作用有 (4)PCR中通常会得到不同的DNA产物，常采用 法鉴定，不同DNA 片段因 等不同，在电场中的迁移速率也不同，因而可以形成不同条带。 (5)质粒作为基因工程的载体，具备的基本条件有 (答出 两点即可)。 12.(24分)除草剂的有效成分草甘膦能够专一地抑制EPSP合酶的活性，从而干扰植物代 谢而导致植物死亡。为自主研发抗除草剂的甘蓝，科学家从细菌中克隆EPSP合酶基 因，通过农杆菌转化法将EPSP合酶基因转入甘蓝体内，使甘蓝产生草甘膦抗性。培 育过程如图所示。回答下列问题： 潮霉素 抗性基因 BamH I 义T-DNAX 启动子 20 kb EPSP合酶基因 Ti质粒 (200kb) T-DNA 卡那霉素 EcoR I 衣杆省巴精织马特损味 终止子 抗性基 BamH I Bglll 25kb中 EPSP合酶基因 EcoR I (1)从细菌中克隆EPSP合酶基因，可通过 技术扩增，该过程中添加引物的 作用是 (2)步骤①构建基因表达载体时，应选择的限制酶是 ,酶切后的目的基 因存在正向与反向两种连接方式，可用Bam H I和EcoR I对两种重组质粒进行剪切， 后通过琼脂糖凝胶电泳技术对产物分别进行分析，结果如图所示，图中 (填 “样品1”或“样品2”)为所需基因表达载体。 限制酶 识别序列和切割位点 BamHI -GGATCC BglⅡ -A GATCT- EcoRI GYAATTC- 样品1样品2 (3)步骤②③的目的是 ,接着若想通过标记 基因筛选出含目的基因的甘蓝植株，步骤④的培养基中可以添加 (4)若要验证转基因甘蓝产生了草甘膦抗性，可用草甘膦同时喷洒转基因植株和对照 组植株。预期结果： 。如 果增加转入的外源EPSP合酶基因的数量，转基因甘蓝对草甘膦的抗性是否会增强？ 请你给出进一步探究的思路： 卷 高二学科素养周测评（二十四）生物学第4页（共4页）·生物学· (3)据题千信息和图2分析可知，naive干细胞 中OGT相对含量高，OGA相对含量低，OGT 是负责在蛋白质上加糖基的酶，OGA是负责将 糖基从蛋白质上去除的酶，naive干细胞发育潜 能更高的原因可能是naive千细胞中的蛋白质 糖基化程度低。该实验设置细胞骨架蛋白表达 量组别作为对照，是因为其表达量相对稳定，不 受实验处理的影响，可以作为内参基因用于校 正其他蛋白的表达水平，排除细胞本身蛋白表 达受阻的情况（或保证细胞都具有正常表达蛋 白质的功能)。 (4)过程①是将primed千细胞诱导形成naive 千细胞，需在图2中的诱导培养基中完成，目的 是primed千细胞中表达更多的OGA,从而转 化为naive千细胞。与过程①相比，过程②是 naive千细胞的培养，naive千细胞具有较高的 发育潜能，所以培养液中还应添加能促进胚胎 发育的物质。primed千细胞全能性相对较低， 神经千细胞是已经分化的细胞，primed千细胞 与神经千细胞相比，primed千细胞是具有分化 为成年动物体内任何一种类型的细胞，并进一 步形成机体所有的组织和器官甚至个体的 潜能。 12.(24分，每空4分) (1)促性腺激素 (2)内细胞团 95%空气和5%C02 图 2025一2026学年度高二学 生物学·基因工程、生物技 一、选择题 1.B【解析】PCR(聚合酶链式反应)技术是一种 在体外快速扩增特定DNA片段的技术，所以可 以利用PCR技术获取和扩增人TPO基因，A正 确；构建表达载体需要限制酶来切割目的基因和 载体，以及DNA连接酶来连接切割后的片段， 而解旋酶在DNA复制等过程中起作用，DNA 聚合酶主要用于DNA复制过程中合成DNA子 链，构建表达载体不需要解旋酶和DNA聚合 酶，B错误；基因表达载体通常包含目的基因（这 里是TPO基因)、标记基因（用于筛选含有重组 载体的细胞)、启动子（启动转录的部位）和终止 49 参考答案及解析 中有两个极体、雌原核和雄原核 (3)纺锤体一染色体复合物 (4)① 【解析】(1)超数排卵是指应用外源促性腺激 素，诱发卵巢排出比自然情况下更多的成熟 卵子。 (2)聚集在胚胎一端的细胞形成内细胞团，将来 发育为胎儿的各种组织，沿透明带内壁扩展和 排列的细胞称为滋养层细胞，将来发育为胎膜 和胎盘，所以体外构建孤雌单倍体胚胎千细胞 时，最好取囊胚的内细胞团细胞；体外培养动物 细胞应置于含有95%空气和5%C○2的混合 气体的CO2培养箱中进行培养；图中第2阶 段，孤雌单倍体胚胎干细胞入卵后，形成雄原核 的同时，卵子完成减数分裂Ⅱ，排出第二极体， 形成雌原核，第2阶段原核形成的图中有两个 极体、雌原核和雄原核，说明卵母细胞已完成了 减数分裂。 (3)卵母细胞中的“核”是纺锤体一染色体复 合物。 (4)根据题意，在正常情况下，来自父本的 Rasgrf1基因处于不表达状态是由于表观遗传 调控，而这种调控通常是通过甲基化实现的。 在孤雌生殖时，为了模拟该父系印记基因的不 表达状态，对Rasgrf1基因的最佳处理方式是 进行甲基化修饰，①正确。 科素养周测评（二十四） 术的安全性与伦理问题 子（终止转录的部位）等元件，C正确；抗原一抗 体杂交技术的原理是抗原和抗体的特异性结合， 若TPO基因表达产生了相应的蛋白质(TPO), 则可以用相应的抗体进行抗原一抗体杂交来检 测其表达情况，D正确。 A【解析】生物武器是指利用致病菌类、病毒类 和生化毒剂类等作为战争武器，危害极大，A错 误；千细胞培养在临床医学等领域前景广泛，比 如用于治疗一些疑难疾病，但由于干细胞的分化 和增殖等特性，也可能面临安全性问题，如免疫 排斥、肿瘤形成等，B正确；研究转基因农作物时 应采取多种方法防止转基因花粉的传播，避免基 D 真题密卷 因污染，符合生物技术的安全与伦理规范，C正 确；为了防止有人滥用设计试管婴儿技术选择性 设计婴儿性别，我国反对设计试管婴儿，D正确。 3.B【解析】在凝胶中DNA分子的迁移速率主要 和DNA分子的大小、构象等有关，一般DNA分 子越大，迁移越慢，A正确；耐高温的DNA聚合 酶只能从引物的3端开始连接脱氧核苷酸，B错 误；反应过程中的每一轮循环依次包括变性（将 双链DNA解聚为单链)、复性（引物与模板链结 合)、延伸（合成新的DNA链）三步，C正确；PCR 扩增产物一般可通过琼脂糖凝胶电泳来进行鉴 定，根据不同DNA分子迁移的结果进行鉴别，D 正确。 4.C【解析】PCR扩增n次所需的引物数量为 2"+1一2，因为新合成的子链均需要引物，A正 确；将外源基因(DREB1A)整合到花生基因组 中，属于基因工程范畴，其原理是基因重组，B正 确；启动子的功能是启动基因的转录，而非驱动 基因的复制。基因复制依赖载体上的复制原，点 (origin),而非启动子，C错误；农杆菌转化法适 用于双子叶植物（如花生）的基因转化，茎尖细胞 可作为受体，D正确。 5.C【解析】转化失败的菌株，即没有获得空载 体，也没有获得重组质粒的菌株，该类菌株没有 氨苄青霉素抗性基因，因此在含氨苄青霉素的培 养基中无法生长；空载体转化的菌落含有氨苄青 霉素抗性基因和完整的lacZ基因，可以在含氨 苄青霉素的培养基中生长，且lacZ基因表达形 成的B半乳糖苷酶能将无色的X-gal分解为蓝 色物质，从而使得菌落呈蓝色；重组质粒转化的 菌落由于目的基因插入在lαcZ基因内部导致该 基因失去功能，因此菌落呈白色，C正确。 6.D【解析】蛋白质工程的直接操作对象是基因 而非蛋白质，通过修改基因序列来改变氨基酸组 成，而非直接对蛋白质进行操作，A错误；将天冬 酰胺（极性氨基酸）替换为赖氨酸（带正电荷的碱 性氨基酸)，两者的理化性质差异显著，可能导致 局部电荷分布和空间结构改变，从而影响蛋白质 功能，B错误；中心法则是从DNA到RNA再到 蛋白质的正向流程，而蛋白质工程的思路是逆向 的：先设计所需蛋白质结构，再反向推导并修改 基因序列，因此，两者的研究思路并不一致，C错 误；改造后的水蛭素基因导入微生物（如大肠杆 菌或酵母菌)后，可通过发酵工程大规模生产水 蛭素，D正确。 D 学科素养周测评 7.B【解析】重组载体A导入受体菌后随着受体 菌的繁殖而扩增，因此是基因克隆载体，而重组 载体B导入受体菌后，表达产生胰岛素，因此是 基因表达载体，A错误；作为运载体必须要具备 的条件：含有限制酶的切割位，点（便于目的基因 的插入)、复制原点（便于目的基因的扩增）及标 记基因（便于筛选含有目的基因的受体细胞）等， 因此载体A和载体B都必须含有限制酶切割位 点、复制原，点和标记基因，B正确；培养细菌A的 目的是扩增目的基因，不需要获得表达产物，因 此目的基因不一定要插入重组载体A的启动子 和终止子之间，C错误；基因克隆载体可使目的 基因在受体细胞中稳定存在，并进行增殖，D 错误。 二、选择题 8.AC【解析】由于RNA相比DNA稳定性差，往 往将病毒样本的RNA反转录成cDNA,扩增之 后进行分段测序，A正确；用于PCR的引物长度 通常为20~30核苷酸。引物越短，特异性越弱， B错误；电泳原理是利用DNA的带电粒子向与 它所带电荷相反的电极移动，C正确；抗生素往 往用于治疗细菌感染而引起的疾病，对于甲流病 毒引起的感冒应选择抗病毒药物，D错误。 9.B【解析】杂草中原本存在抗除草剂突变，除草 剂起选择作用，长期使用除草剂，抗除草剂个体 数量增多，表现为抗药性下降，A错误；草甘膦的 作用机理是和PEP竞争性结合EPSP合酶，通 过导入强启动子使EPSP合酶过量表达，可以和 草甘膦结合，并且有足够的酶满足自身代谢需 要，B正确；可利用蛋白质工程改造EPSP合酶 的基因，使其表达产物与草甘膦无法结合，但是 可以和PEP结合，达到抗草甘膦的效果，不能直 接替换氨基酸，C错误；在培育抗草甘膦作物时， 为避免外源基因流入杂草，最好将外源基因插入 细胞质基因组，D错误。 10.AB【解析】引物均是5'端→3'端，且根据目的 基因部分已知序列设计合成，与目的基因3'端 (-OH端)碱基互补配对，扩增基因A应选择的 是引物2和引物3，A正确；由图1可知，上游引 物2序列应为5'-ATTACGGATCG-3',由于目 的基因需要插入载体的启动子和终止子之间， 故需要的限制酶为Bam HI和SalI,根据图2 中限制酶的酶切位点可知，为使得扩增出的目 的基因带有限制酶的切割序列应添加在引物的 5端，综上应选择的引物2是5'-GGATCCATT ·生物学· ACGGATCG-3',B正确；图1中质粒插入目的 基因时，四环素抗性基因被破坏了，所以制备含 抗生素M的培养基时，抗生素M是指氯霉素， 但能在平板上生长的菌落可能是含有空载质粒 的大肠杆菌，C错误；从动物细胞提取DNA扩 增获得的基因A中含有内含子序列，直接导入 原核生物中转录翻译，过程中没有相应的加工 过程，所以不能正确表达出蛋白质A,D错误。 三、非选择题 11.（24分，除标注外，每空2分) (I)黏性末端E.coli DNA连接酶T4DNA连 接酶磷酸二酯键 (2)酶B、酶C同时破坏质粒中的两个标记基因 (3)DNA的半保留复制作为原料和提供能量 (4)琼脂糖凝胶电泳大小和构象 (5)具有一个至多个限制酶切割位点，供外源 DNA片段（基因）插入其中；能够在受体细胞中 自我复制，或整合到受体DNA上，随受体DNA 同步复制；有特殊的标记基因，便于重组DNA 分子的筛选；对受体细胞无害(4分) 【解析】(1)DNA分子经限制酶切割产生的 DNA片段末端通常有两种形式—平末端和 黏性末端。将质粒载体和目的基因进行双酶 切，用DNA连接酶连接重新形成磷酸二酯键， DNA连接酶主要有两类：分别是E.coli DNA 连接酶和T4DNA连接酶，其中后者既能连接 平末端，也能连接黏性末端。 (2)标记基因可用于鉴定目的基因是否导入受 体细胞，所以重组质粒上至少要保留一个标记 基因，由于两个标记基因上均含有酶A的酶切 位，点，所以不能用酶A切割，防止同时破坏质 粒中的两个标记基因。为了保证目的基因和质 粒正向连接，防止连接时质粒与目的基因自 环化，故在构建重组载体DNA分子时，可以选 用酶B和酶C两种限制酶对质粒pBR322和干 扰素基因进行双酶切。 (3)PCR的原理是DNA的半保留复制，PCR反 应体系中加入dNTP后，这些物质既可以作为 原料，也可以为反应提供能量，同时体系中还需 要加入相应的酶。 (4)PCR中通常会得到不同的DNA产物，常 用琼脂糖凝胶电泳法鉴定，不同DNA片段因 相对分子质量、所带电荷等不同，在电场中的迁 移速率也不同，因而可以形成不同条带，据此可 对鉴定的DNA做出判断。 5 参考答案及解析 (5)质粒被选用为基因工程的载体是因为：质粒 DNA分子上具有一个至多个限制酶切割位点， 供外源DNA片段（基因）插入其中；能够在受 体细胞中自我复制，或整合到受体DNA上，随 受体DNA同步复制；有特殊的标记基因，便于 重组DNA分子的筛选；对受体细胞无害。 12.(24分，除标注外，每空3分) (1)PCR(2分)使DNA聚合酶能从引物的 3'端开始连接脱氧核苷酸 (2)BamHI和BglⅡ样品2(2分) (3)将目的基因导入受体细胞（分开作答也给 分：步骤②是将重组质粒导入农杆菌，步骤③是 将农杆菌与甘蓝细胞共培养)(4分) 潮 霉素 (4)对照组植株死亡，转基因植株存活，但也受 到了影响将不同拷贝数的EPSP合酶基 因分别转入甘蓝细胞中，培育转基因植株，比较 它们对草甘膦抗性的差异(4分) 【解析】(I)可通过PCR技术扩增目的基因，因 此从细菌中克隆EPSP合酶基因，可通过PCR 技术扩增，引物的作用是使DNA聚合酶能从 引物的3'端开始连接脱氧核苷酸。 (2)根据目的基因的两端含有BamH I和BglⅡ 的酶切位，点，可知步骤①构建基因表达载体时， 应选择的限制酶是Bam HI和BglⅡ。质粒上 不含BglⅡ酶切位，点，但Bam H I和BglⅡ切割 后的黏性末端是相同的，因此质粒可用BamH I 切割，由于目的基因的两端黏性末端相同，因此 与切割后的质粒连接时可能会出现反接的情 况。正向连接时，EPSP合酶基因右侧的黏性 末端与质粒上的黏性末端连接后形成一个新的 序列AGATCC,该序列不能再被Bam HI识别 和切割，因此用EcoR I酶和BamHI酶会将 正向连接的目的基因片段剪切去除；正向连接 的重组质粒会被切去20十25=45kb长度的片 段，而反向连接后，质粒靠近启动子的位置形成 一个新的序列GGATCT,该序列不能被BamH I 识别和切割，但EPSP合酶基因的另一端与质 粒拼接后形成GGATCC序列，该序列可被 BamH I识别和切割，故反向连接的重组质粒 会被EcoR I酶和BamH I酶切去20kb长度 的片段，电泳凝胶中，DNA分子量越大，在凝胶 中受到的阻力越大，迁移距离越短，正向连接的 重组质粒被切割后两个片段的大小介于反向连 接的重组质粒被切割后两个片段的大小之间， 说明样品2是所需的基因表达载体。 D 真题密卷 (3)步骤②是将重组质粒导入农杆菌，步骤③是 将农杆菌与甘蓝细胞共同培养，通过农杆菌能 感染植物细胞的特性，将重组质粒导入受体细 胞。由图可知，卡那霉素抗性基因不在T-DNA 片段中，潮霉素抗性基因在T-DNA片段中，可 随T-DNA转移并整合到被侵染的细胞的染色 体DNA上，从而使含目的基因的甘蓝植株有 抗潮霉素的抗性，所以能在含潮霉素的培养基 上筛选含目的基因的甘蓝植株，故步骤④的培 养基中添加潮霉素，以便筛选出含目的基因的 甘蓝植株。 (4)若要验证转基因甘蓝产生了草甘膦抗性，可 2025一2026学年度高二 生物学·选择 一、选择题 1.C【解析】腐乳制作过程中，确实利用了毛霉等 能产生蛋白酶的微生物进行发酵。毛霉等微生 物产生的蛋白酶可以将豆腐中的蛋白质分解成 小分子的肽和氨基酸，脂肪酶可将脂肪水解为甘 油和脂肪酸，使得腐乳具有独特的风味，A正确； 果酒制作过程中，酵母菌进行无氧呼吸产生酒精 和二氧化碳，二氧化碳溶于发酵液中，会使发酵 液的pH逐渐降低；果醋制作过程中，醋酸菌将 乙醇转变为醋酸，醋酸是酸性物质，也会导致发 酵液的pH降低，故二者使pH降低的原因不 同，B正确；谷氨酸发酵生产中，在中性和弱碱性 条件下会积累谷氨酸，而在酸性条件下容易形成 谷氨酰胺和N乙酰谷氨酰胺，C错误；在青霉素 生产过程中，如果污染了能分泌青霉素酶的某些 杂菌，青霉素酶会分解青霉素，从而影响青霉素 的产量，D正确。 2.D【解析】配制培养基时，需要先调节pH,后进 行高压蒸汽灭菌处理，A错误；为防止冷凝水落 入培养基造成污染，接种后的培养基需要倒置于 无菌培养箱中进行培养，B错误；在培养基中加 入刚果红，可与培养基中的纤维素形成红色复合 物，当纤维素被分解后，红色复合物不能形成，培 养基中会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈， 透明圈直径/菌落直径的比值越大，表明微生物 的分解能力越强，C错误；滤纸的主要成分是纤 维素，可以通过此操作获得能够分解纤维素的微 生物，D正确。 D 学科素养周测评 用草甘膦同时喷洒转基因植株和对照组植株。 由于转基因甘蓝具有草甘膦抗性，而对照组没 有草甘膦抗性，故预期对照组植株死亡，转基因 植株存活，但也受到了影响。若要研究增加转 入的外源EPSP合酶基因的数量，转基因甘蓝 对草甘膦的抗性是否会增强，自变量为EPSP 合酶基因的数量，因变量为转基因甘蓝对草甘 膦的抗性，因此进一步探究的思路为：将不同拷 贝数的EPSP合酶基因分别转入甘蓝细胞中， 培育转基因植株，比较它们对草甘膦抗性的 差异。 学科素养周测评（二十五） 性必修3综合 3.A【解析】治疗疾病可以利用核移植技术获得 具有特定遗传特性的细胞或组织等。例如，将患 者的体细胞核移植到去核的卵母细胞中，构建重 组细胞，然后诱导其分化形成所需的细胞、组织 或器官用于治疗，克隆动物的培育主要采用核移 植技术，将供体细胞的细胞核移植到去核的卵母 细胞中，形成重组细胞，再经过早期胚胎培养和 胚胎移植等过程，获得与供体遗传物质基本相同 的克隆动物，两条途径既能治疗疾病，也能获得 克隆动物，A正确；镰状细胞贫血症可利用基因 编辑技术对患者来源的PS细胞中的致病基因 修复后进行镰状细胞贫血症的治疗，B错误；PS 细胞类似于胚胎干细胞，不具有组织特异性，C 错误；试管动物主要利用了体外受精技术，D 错误。 4.A【解析】该重组质粒可能整合到了猪胎儿成 纤维细胞的染色体上，故提取出的细胞核含有该 基因，可最终发育成转基因克隆猪，A正确；MⅡ 期的细胞更容易激发细胞核的全能性表达，故需 要将去核卵母细胞培养至MⅡ期，B错误；“转基 因”克隆猪的出现利用了体细胞核移植技术，体 现了猪胎儿成纤维细胞的细胞核具有全能性，高 度分化的动物细胞的全能性受到了限制，C错 误；早期胚胎形成的过程中，只发生有丝分裂，D 错误。 5.C【解析】DNA聚合酶的功能是催化DNA链 的延伸（如PCR中），而连接两个基因需要的是 DNA连接酶（如T4DNA连接酶），因此使用 DNA连接酶催化C基因和Bt基因连接，A错 2