板块5 专题14 细胞工程与基因工程-【备考最优解】2025版高考生物学二轮专题复习教用课件

该高中生物学高考复习课件覆盖细胞工程、胚胎工程、基因工程等核心专题，严格对标新课标要求，通过梳理命题点（如植物组织培养原理、单克隆抗体制备流程）和分析近三年高考真题，明确基因工程操作流程、细胞全能性等高频考点权重，归纳实验分析、流程填空等常考题型，体现备考针对性。 课件亮点在于“真题演练+易错排查+素养提升”策略，如结合2024新课标卷基因工程真题，剖析限制酶选择理由，培养科学思维；设计抗虫鉴定实验探究，强化探究实践。特设长句特训（如单克隆抗体两次筛选目的）和答题模板，助力学生掌握得分技巧，教师可据此高效规划复习，提升备考实效。

专题十四　细胞工程与基因工程 　1.植物细胞工程包括组织培养和体细胞杂交等技术。　2.动物细胞工程包括细胞培养、核移植、细胞融合和干细胞的应用等技术。　3.对动物早期胚胎或配子进行显微操作和处理以获得目标个体。　4.基因工程是一种重组DNA技术。　5.蛋白质工程是基因工程的延伸。　6.转基因产品的安全性引发社会的广泛关注。　7.中国禁止生殖性克隆人。　8.世界范围内应全面禁止生物武器。 二 轮 专 题 复 习 返回导航 细胞的全能性　 细胞增殖　 细胞膜的流动性　 细胞核的全能性　 获能　 桑葚胚、囊胚 将内细胞团均等分割　 限制酶　 利用PCR获取和扩增　 基因表达载体的构建　 分子水平　 基因 二 轮 专 题 复 习 返回导航 命题点1 1 命题点2 2 内容 索引 命题点3 3 创设情境 长句特训 4 命题点1 PART 01 第一部分 5 命题点1　植物细胞工程   1．植物细胞工程的两大技术 全能性　 二 轮 专 题 复 习 返回导航 2．植物组织培养的条件 (1)植物组织培养的关键　　　　　　　　　 添加蔗糖的目的是提供营养和调节渗透压　　 ↑ ①条件：________，一定营养物质，激素(生长素、细胞分裂素)等。 ②培养基状态：固体培养基。→加入的琼脂不能被利用 ③体内细胞未表现全能性的原因：基因的表达具有选择性。 离体　 二 轮 专 题 复 习 返回导航 (2)植物激素的使用 生长素与细胞分裂素的比值 作用效果 高 促进根分化、抑制______形成 低 促进芽分化、抑制根形成 适中 促进___________________形成 芽　 愈伤组织　 二 轮 专 题 复 习 返回导航 3.植物体细胞杂交的关键 (1)酶解法——用_________和__________去除细胞壁。　　　　 不能利用病毒融合法 (2)融合的方法——电融合法、离心法、聚乙二醇(PEG)融合法、高Ca2＋—高pH融合法等。 (3)杂种细胞的形成标志——____________的形成。 (4)培养杂种植株的技术——植物组织培养。 (5)杂种植株培育成功的原理——细胞具有全能性。 纤维素酶 果胶酶　 新细胞壁 二 轮 专 题 复 习 返回导航 1．(选择性必修3 P40图2－7)单倍体植株是进行体细胞诱变育种和研究遗传突变的理想材料，其原因是大多数单倍体植株的细胞中只含有一套染色体，染色体加倍后得到的植株的隐性性状容易显现。 2．(选择性必修3 P116附录1)不同作用的培养基 (1)诱导菊花愈伤组织的培养基：在MS培养基中加入BA(苄基腺嘌呤)和NAA(萘乙酸)，质量浓度均为0.5 mg/L。 二 轮 专 题 复 习 返回导航 (2)诱导菊花生芽的培养基：在MS培养基中加入BA和NAA，质量浓度分别为2～3 mg/L和0.02～0.3 mg/L。 (3)诱导菊花生根的培养基：将上述MS培养基中NH4NO3、KNO3、KH2PO4、MgSO4·7H2O和CaCl2·2H2O的用量减半，并添加NAA或IAA(吲哚乙酸)，质量浓度均为0.1 mg/L。 二 轮 专 题 复 习 返回导航 √ 【最新考情】 1．(2024·浙江1月选考)山药在生长过程中易受病毒侵害导致品质和产量下降。采用组织培养技术得到脱毒苗，可恢复其原有的优质高产特性，流程如图。下列操作不可行的是(　　) 外植体→愈伤组织→丛生芽→试管苗 A．选择芽尖作为外植体可减少病毒感染 B．培养基中加入抗生素可降低杂菌的污染 C．将丛生芽切割后进行继代培养可实现快速繁殖 D．提高生长素和细胞分裂素的比值可促进愈伤组织形成丛生芽 二 轮 专 题 复 习 返回导航 解析：芽尖等分生组织分裂旺盛，病毒浓度很低甚至无病毒，故选择芽尖作为外植体可减少病毒感染，A不符合题意。 培养基中有大量的营养物质，其容易被杂菌污染，加入抗生素可降低杂菌的污染，B不符合题意。 将初代培养获得的培养物转移到新的培养基上继续进行扩大培养称为继代培养，其又可以分为第二代培养、第三代培养等。大多数植物每隔4～6周进行一次继代培养，每继代培养一次，培养物一般能增殖3～4倍。正因为培养物可以不断继代培养，所以离体繁殖速度比常规方法通常要快数万倍，可实现快速繁殖，C不符合题意。 提高生长素和细胞分裂素的比值可促进愈伤组织形成根，D符合题意。 二 轮 专 题 复 习 返回导航 √ 2．(2024·湖北选择考)植物甲抗旱、抗病性强，植物乙分蘖能力强、结实性好。科研人员通过植物体细胞杂交技术培育出兼有甲、乙优良性状的植物丙，过程如下图所示。下列叙述错误的是(　　)  A．过程①中酶处理的时间差异,原因可能是两种亲本的细胞壁结构有差异 B．过程②中常采用灭活的仙台病毒或PEG诱导原生质体融合 C．过程④和⑤的培养基中均需要添加生长素和细胞分裂素 D．可通过分析植物丙的染色体，来鉴定其是否为杂种植株 二 轮 专 题 复 习 返回导航 解析：利用纤维素酶和果胶酶去除植物细胞壁时，可能因植物细胞壁结构差异而调整酶处理的时间，A正确； 灭活的仙台病毒是动物细胞融合特有的诱导剂，B错误； 植物组织培养过程中的脱分化(④)和再分化(⑤)过程均需要添加生长素和细胞分裂素，但两过程中两种激素比例不同，C正确； 杂种植物细胞应含有两种生物的染色体，因此可通过分析植物丙的染色体，来鉴定植物丙是否为杂种植株，D正确。  [把脉高考]　该知识点为中低频考点。试题情境常与生活、生产、育种紧密联系，考查教材知识的内涵和外延。 二 轮 专 题 复 习 返回导航 【历年考情】   (1)(2022·辽宁T14)宜选用蓝莓成熟叶片为材料制备外植体。(　　) (2)(2022·浙江1月T7)农作物秸秆的回收利用方式很多，其中之一是将秸秆碎化后作为食用菌的栽培基质。碎化秸秆中纤维所起的作用，相当于植物组织培养中固体培养基的琼脂＋蔗糖。(　　) (3)(2021·江苏T5)植物组织培养过程中，用同一植株体细胞离体培养获得的再生苗不会出现变异。(　　) ×　 √　 ×　 二 轮 专 题 复 习 返回导航 (4)(2020·北京T13)为培育具有市场竞争力的无子柑橘，研究者设计如下流程。   过程③需应用植物组织培养技术。(　　) √　 二 轮 专 题 复 习 返回导航 (5)(2020·天津T15节选)在诱导形成愈伤组织阶段时通常选择茎尖、幼叶等作为外植体，原因是__________________________________________。 (6)(经典高考题)①植物微型繁殖是植物繁殖的一种途径。与常规的种子繁殖方法相比，这种微型繁殖技术的特点有_________________________ _________________(答出2点即可)。 ②用脱毒苗进行繁殖，可以减少作物感染病毒。为了获得脱毒苗，可以选取植物________进行组织培养。 细胞分化程度低，容易诱导产生愈伤组织　 能保持优良品种的遗传特性、繁殖速度快　 茎尖 二 轮 专 题 复 习 返回导航 √ 1．(2024·河北唐山高三一模)紫杉醇具有良好的抗癌作用。科研人员用植物外植体获得愈伤组织，然后在液体培养基中进行细胞悬浮培养，以获得更多紫杉醇。下列叙述错误的是(　　) A．诱导愈伤组织需要考虑外植体的取材部位、培养基组成和激素种类等 B．由愈伤组织得到悬浮细胞可以使用纤维素酶和果胶酶进行处理 C．使用液体培养基并振荡有利于细胞获取氧气和营养物质,促进细胞生长 D．利用植物细胞培养技术获得初生代谢物紫杉醇能避免大量破坏野生红豆杉种群 二 轮 专 题 复 习 返回导航 解析：诱导愈伤组织需要考虑外植体的取材部位、培养基组成和激素种类等，A正确； 由愈伤组织得到悬浮细胞可以使用纤维素酶和果胶酶进行处理，去除细胞壁，B正确； 使用液体培养基并振荡可增大培养基溶氧量，使细胞与培养基充分接触，有利于细胞获取氧气和营养物质，促进细胞生长，C正确； 紫杉醇属于次生代谢物，D错误。 二 轮 专 题 复 习 返回导航 √ 2．(2024·广东梅州高三一模)花椰菜易受黑腐病菌的危害而患黑腐病，野生黑芥具有黑腐病的抗性基因。用一定剂量的紫外线处理黑芥原生质体可使其染色体片段化，并丧失再生能力。利用此原生质体作为部分遗传物质的供体与完整的花椰菜原生质体融合，以获得抗黑腐病杂种植株。流程如下图所示，下列相关叙述错误的是(　　) A．融合成功的杂种细胞中染色体数目可能不同 B．最终获得的抗病植株具有完整的黑芥和花椰菜的遗传信息 C．初步筛选杂种细胞可在过程②后，以融合的活细胞中有叶绿体为标志 D．可将黑腐病菌接种到杂种植株上以鉴定其是否具有抗病性状 二 轮 专 题 复 习 返回导航 解析：由题干可知，紫外线处理黑芥原生质体可使其染色体片段化，故融合成功的杂种细胞染色体数目可能不同，A正确； 利用经紫外线处理的黑芥原生质体作为部分遗传物质的供体与完整的花椰菜原生质体融合，因黑芥原生质体提供部分遗传物质，因此最终获得的抗病植株不具有完整的黑芥遗传信息，B错误； 叶肉细胞原生质体和根细胞原生质体融合细胞，有叶绿体的存在，说明细胞融合初步成功，可以以融合的活细胞中有无叶绿体的存在作为初步筛选杂种细胞的标志，C正确； 个体水平上鉴定转基因植株是否具有抗黑腐病的性状，可用黑腐病菌侵染该植株，观察植物生长状况，D正确。 二 轮 专 题 复 习 返回导航 命题点2 PART 02 第二部分 23 命题点2　动物细胞工程与胚胎工程 1. 二 轮 专 题 复 习 返回导航 2. 特定抗原　 二 轮 专 题 复 习 返回导航 特定抗体　 二 轮 专 题 复 习 返回导航 3. MⅡ期　 去核　 重构胚　 二 轮 专 题 复 习 返回导航 [易错提醒] 核移植获得的克隆动物与提供细胞核的亲本性状可能不同的三个原因： (1)克隆动物的遗传物质来自两个亲本。 (2)发育过程中可能发生基因突变或染色体变异。 (3)外界环境可能引起不可遗传的变异。  二 轮 专 题 复 习 返回导航 4. 二 轮 专 题 复 习 返回导航 超数排卵　 二 轮 专 题 复 习 返回导航 妊娠　 二 轮 专 题 复 习 返回导航 (2)生理学基础 二 轮 专 题 复 习 返回导航 5．胚胎分割 桑葚胚或囊胚　 动物的无性繁殖或克隆 二 轮 专 题 复 习 返回导航 1．(选择性必修3 P44旁栏思考)动物细胞培养时不能用胃蛋白酶分散细胞的原因：胃蛋白酶适于在较强的酸性条件下发挥作用，多数动物细胞培养的适宜pH为 7.2～7.4，胃蛋白酶在此环境下没有活性。 2．(选择性必修3 P46正文)干细胞包括胚胎干细胞和成体干细胞等。2006年，科学家通过体外诱导小鼠成纤维细胞，获得了诱导多能干细胞(简称iPS细胞)。 3．(选择性必修3 P48相关信息)灭活是指用物理或化学手段使病毒或细菌失去感染能力，但并不破坏它们的抗原结构。 二 轮 专 题 复 习 返回导航 4．(选择性必修3 P50思考·讨论)抗体—药物偶联物(ADC)通过将细胞毒素与能特异性识别肿瘤抗原的单克隆抗体结合，实现了对肿瘤细胞的选择性杀伤。ADC的抗体具有特异性识别肿瘤细胞的作用，药物有杀伤肿瘤细胞的作用。 5．(选择性必修3 P60正文)胚胎工程技术目前在医学和生产上应用较多的是体外受精、胚胎移植和胚胎分割等，借助这些技术，可进一步挖掘动物的繁殖潜力。 二 轮 专 题 复 习 返回导航 √ 【最新考情】 1．(2024·黑吉辽选择考)从小鼠胚胎中分离获取胚胎成纤维细胞进行贴壁培养，在传代后的不同时间点检测细胞数目，结果如图。下列叙述正确的是(　　) A．传代培养时，培养皿需密封防止污染 B．选取①的细胞进行传代培养比②更合理 C．直接用离心法收集细胞进行传代培养 D．细胞增长进入平台期可能与细胞密度过大有关 二 轮 专 题 复 习 返回导航 解析：动物细胞培养需要O2、CO2等气体，因此传代培养时，培养皿不能密封，A错误； 原代培养的细胞出现接触抑制现象后，需要分瓶进行传代培养，①的细胞处于增长初期，细胞还未出现接触抑制现象，因此选取②的细胞进行传代培养比①更合理，B错误； 由于成纤维细胞贴壁生长，进行传代培养时，需用胰蛋白酶等处理，使其分散成单个细胞后再用离心法收集，C错误； 细胞密度过大时，产生的代谢废物较多，营养物质消耗较快，可能导致细胞增长进入平台期，D正确。 二 轮 专 题 复 习 返回导航 √ 2．(2024·甘肃选择考)甘加藏羊是甘肃高寒牧区的优良品种，是季节性发情动物，每年产羔一次，每胎一羔，繁殖率较低。为促进畜牧业发展，研究人员通过体外受精、胚胎移植等胚胎工程技术提高藏羊的繁殖率，流程如下图。下列叙述错误的是(　　) A．藏羊甲需用促性腺激素处理使其卵巢卵泡发育和超数排卵 B．藏羊乙的获能精子能与刚采集到的藏羊甲的卵母细胞受精 C．受体藏羊丙需和藏羊甲进行同期发情处理 D．后代丁的遗传物质来源于藏羊甲和藏羊乙 二 轮 专 题 复 习 返回导航 解析：可使用促性腺激素促进卵巢卵泡发育和超数排卵，A正确； 卵母细胞需培育到MⅡ期才能与获能的精子结合形成受精卵，B错误； 受体藏羊丙需要和供体藏羊甲进行同期发情处理，C正确； 后代丁是藏羊甲和藏羊乙通过受精作用产生的，其遗传物质来自藏羊甲和藏羊乙，D正确。  [把脉高考]　该知识点为高频考点。试题常结合免疫调节和基因工程进行综合考查，涉及人体健康、制药，渗透社会责任。 二 轮 专 题 复 习 返回导航 【历年考情】   (1)(2023·湖南T21)研究人员通过肺上皮干细胞诱导生成肺类器官，可自组装或与成熟细胞组装成肺类装配体。肺类装配体培养需要满足适宜的营养、温度、渗透压、pH、无菌、无毒环境、含95%空气和5%CO2的气体环境等基本条件。(　　) (2)(2023·北京T12)研究者制备单克隆抗体用于快速检测甲状旁腺激素(PTH)，制备过程中能筛选分泌多种抗体的单个杂交瘤细胞。(　　) √　 ×　 二 轮 专 题 复 习 返回导航 (3)(2023·广东T3)科学家采用体外受精技术获得紫羚羊胚胎，并将其移植到长角羚羊体内，使后者成功妊娠并产仔，该工作有助于恢复濒危紫羚羊的种群数量。此过程不涉及精子获能处理。(　　) (4)(2023·浙江1月T12)胚胎分割技术提高了移植胚胎的成活率。(　　) (5)(2022·湖北T7)某兴趣小组开展小鼠原代神经元培养的研究，结果发现其培养的原代神经元生长缓慢，其原因不可能是血清经过高温处理后加入培养基。(　　) ×　 ×　 ×　 二 轮 专 题 复 习 返回导航 (6)(2021·江苏T11)将骨髓瘤细胞和B淋巴细胞混合，经诱导后融合的细胞即为杂交瘤细胞。(　　) (7)(2021·浙江1月T18)动物细胞培养过程中用盐酸溶解细胞间物质使细胞分离。(　　) ×　 ×　 二 轮 专 题 复 习 返回导航 (8)(2023·湖北T22节选)①添加脂溶性物质PEG可促进细胞融合，该过程中PEG对细胞膜的作用是_________________________________________ ______________________________________。 ②在杂交瘤细胞筛选过程中，常使用特定的选择培养基(如HAT培养基)，该培养基对___________________和_________________________生长具有抑制作用。 ③单克隆抗体筛选中，将抗体与该病毒外壳蛋白进行杂交，其目的是_____________________________________________________。 使细胞接触处细胞膜的脂类分子发生疏散和重组，从而导致细胞膜相互亲和，促进融合　 未融合的(亲本)细胞　 融合的具有同种核的细胞　 通过抗体检测呈阳性来获得分泌所需抗体的杂交瘤细胞　 二 轮 专 题 复 习 返回导航 (9)(2022·全国甲T38节选)①为了实现体外受精需要采集良种公羊的精液，精液保存的方法是________。在体外受精前要对精子进行获能处理，其原因是_____________________________________________________________。 ②请以保存的囊胚和相应数量的非繁殖期受体母羊为材料进行操作，以获得具有该公羊优良性状的后代。主要的操作步骤是__________________________________________________________。 冷冻保存　 刚排出的精子不能与卵子受精，只有获能后才具备受精能力(合理即可)　 对受体母羊进行同期发情处理，将保存的囊胚进行胚胎移植 二 轮 专 题 复 习 返回导航 √ 突破1　动物细胞的培养及核移植 1．Vero细胞系来源于非洲绿猴肾上皮细胞，具有无限分裂和贴壁生长的特性。将新冠病毒接种到Vero细胞后，经Vero细胞培养、新冠病毒灭活及提纯，可制成新冠病毒灭活疫苗。下列叙述错误的是(　　) A．Vero细胞可作为新冠病毒大量繁殖的“培养基” B．向Vero细胞培养液中加入适量抗生素可防止杂菌污染 C．分瓶前需要用胰蛋白酶处理贴壁生长的Vero细胞 D．每传代1次，培养瓶中的Vero细胞分裂1次 二 轮 专 题 复 习 返回导航 解析：将新冠病毒接种到Vero细胞，Vero细胞可作为新冠病毒大量繁殖的“培养基”，A正确； 向Vero细胞培养液中加入适量抗生素可防止杂菌污染，B正确； 分瓶进行传代培养前需要用胰蛋白酶处理贴壁生长的Vero细胞，C正确； 每传代1次，培养瓶中的Vero细胞可能分裂多次，D错误。 二 轮 专 题 复 习 返回导航 √ 2．(2024·河北沧州八县高三联考)为研究治疗性克隆技术能否用于帕金森病的治疗，科研人员利用帕金森病模型鼠进行下图所示实验，下列叙述错误的是(　　)   A．过程①中选择MⅡ期的卵母细胞有利于细胞核全能性恢复 B．过程②重组细胞培养经历了桑葚胚、原肠胚和囊胚等过程 C．过程③的关键是利用特定条件诱导胚胎干细胞相关基因表达 D．过程④无需对受体小鼠注射免疫抑制剂以抑制其细胞免疫功能 二 轮 专 题 复 习 返回导航 解析：由于卵母细胞含有易于细胞核表达的物质，过程①中选择MⅡ期的卵母细胞有利于细胞核全能性恢复，A正确； 过程②重组细胞培养并获取胚胎干细胞，依次经历了桑葚胚、囊胚过程，B错误； 过程③的关键是利用特定条件诱导胚胎干细胞相关基因表达，使之分化形成神经元，C正确； 由于移植神经元来自小鼠自身皮肤细胞的诱导分化，不会出现免疫排斥反应，因此过程④中无需对受体小鼠注射免疫抑制剂，D正确。 二 轮 专 题 复 习 返回导航 √ 突破2　动物细胞融合及单克隆抗体 3．(2024·河北衡水高三一模)科研人员研发出单克隆抗体—肺癌药物偶联物以减少肺癌药物对正常细胞的伤害，基本流程如下图。下列相关叙述正确的是(　　) A．注射的特定抗原是正常肺细胞和肺癌细胞共有的大分子 B．抗体—肺癌药物偶联物中a代表肺癌药物，b代表抗体 C．经②③最终得到的杂交瘤细胞只能产生针对肺癌细胞的抗体 D．抗体—肺癌药物偶联物只能定向运输至肺癌细胞，将其杀伤 二 轮 专 题 复 习 返回导航 解析：由题意可知，科研人员研发出单克隆抗体—肺癌药物偶联物，以减少肺癌药物对正常细胞的伤害，据此可推测，该单克隆抗体制备过程中需要注射的特定抗原是肺癌细胞特有的大分子，A错误； 抗体—肺癌药物偶联物中b代表肺癌药物，a代表抗体，B错误； 经②③两次筛选最终得到的杂交瘤细胞只能产生针对肺癌细胞的抗体，C正确； 抗体—肺癌药物偶联物能运输到全身各处，但只能定向作用于肺癌细胞，将其杀伤，D错误。 二 轮 专 题 复 习 返回导航 √ 4．采用抗原试剂盒可以进行甲流病毒检测。试剂盒中的一种抗PD-L1单克隆抗体能与甲流病毒表面的PD-L1特异性结合，发挥诊断作用。利用小鼠制备抗PD-L1单克隆抗体的流程如下图所示，下列叙述错误的是(　　) A．制备抗PD-L1单克隆抗体使用的B淋巴细胞取自注射过PD-L1的小鼠的脾 B．放入96孔板的细胞为多种杂交瘤细胞，均能大量增殖，其中部分还能产生所需抗体 C．杂交瘤细胞在培养过程中一般无接触抑制现象，不需要用胰蛋白酶处理 D．将图中细胞群a在体外大规模培养，可以提取出大量的抗PD-L1单克隆抗体 二 轮 专 题 复 习 返回导航 突破3　胚胎工程综合应用 5．(2024·湖南长沙高三联考)第三代试管婴儿技术(PGD/PGS)是对早期胚胎细胞进行基因诊断和染色体检测后再进行胚胎移植，流程如下图所示。图中检测包括PGD、PGS(PGD是指胚胎植入前的基因诊断，PGS是指胚胎植入前的染色体数目和结构检测)。下列叙述正确的是(　　) A．采集的卵子需培养至MⅠ期才能与获能的精子进行受精 B．PGD和PGS技术可分别用于筛选红绿色盲和唐氏综合征 C．将成熟的精子放入ATP溶液中进行获能处理 D．“理想胚胎”需培养至桑葚胚或原肠胚才能植入子宫 √ 二 轮 专 题 复 习 返回导航 解析：体外受精时，需要将采集到的卵母细胞在体外培养到MⅡ期，才可以与获能的精子完成受精作用，A错误。 PGD是指胚胎植入前的基因诊断，PGD可用于筛选红绿色盲；PGS是指胚胎植入前的染色体数目和结构检测，PGS可用于筛选唐氏综合征，B正确。 将精子放在一定浓度的肝素或Ca2＋载体溶液中，用化学药物诱导精子获能，C错误。 “理想胚胎”需培养至桑葚胚或囊胚才能植入子宫，D错误。 二 轮 专 题 复 习 返回导航 命题点3 PART 03 第三部分 54 命题点3　基因工程、生物技术的安全性与伦理问题   1．基因工程的操作流程 (1)目的基因的筛选与获取 二 轮 专 题 复 习 返回导航 [易错提醒] (1)目的基因主要是指编码蛋白质的基因。 (2)在已有mRNA前提下，可通过逆转录法获取目的基因。 (3)当基因较小且序列已知时，可采用化学合成法进行人工合成。 二 轮 专 题 复 习 返回导航 (2)基因表达载体的构建——重组质粒的构建 二 轮 专 题 复 习 返回导航 [易错提醒] (1)基因工程中的载体与细胞膜上的载体不同。 (2)启动子、终止子 ①启动子(DNA片段)≠起始密码子(位于mRNA上)。 ②终止子(DNA片段)≠终止密码子(位于mRNA上)。 ③目的基因插入位置：启动子与终止子之间。 ④利用乳腺生物反应器生产药物时，应将目的基因与乳腺蛋白基因的启动子连接到一起。 二 轮 专 题 复 习 返回导航 (3)将目的基因导入受体细胞 Ca2＋处理法　 二 轮 专 题 复 习 返回导航 [易错提醒] 农杆菌转化法中的“两个两次” 二 轮 专 题 复 习 返回导航 (4)目的基因的检测与鉴定 PCR　 PCR　 抗原—抗体　 二 轮 专 题 复 习 返回导航 [易错提醒] PCR不仅可用于获取和扩增目的基因，还能用于检测受体细胞中是否含有目的基因或受体细胞中的目的基因是否转录出mRNA。 二 轮 专 题 复 习 返回导航 2．蛋白质工程 基因合成　 新的蛋白质 蛋白质结构　 脱氧核苷酸序列　 二 轮 专 题 复 习 返回导航 3．生物技术的安全性与伦理问题 (1)理性看待转基因技术 ①需要以完备的相关科学知识为基础，即清晰地了解转基因技术的原理和操作规程。 ②应看到人们的观点受到许多复杂的政治、经济和文化等因素的影响。 ③要靠确凿的证据和严谨的逻辑进行思考和辩论。 二 轮 专 题 复 习 返回导航 (2)治疗性克隆与生殖性克隆的关系 项目 类型 治疗性克隆 生殖性克隆 区别 目的 用于医学研究和治疗疾病 用于生育，获得人的复制品 水平 细胞、组织或器官水平 个体水平 联系 都属于无性生殖；产生的新个体或新组织遗传信息相同 二 轮 专 题 复 习 返回导航 (3)区分试管婴儿和“设计试管婴儿”   ①“设计试管婴儿”比试管婴儿多出的是过程________。 ②试管婴儿主要解决不孕夫妇的生育问题，“设计试管婴儿”可用于致命血液病等疾病的治疗。 d 二 轮 专 题 复 习 返回导航 1．(选择性必修3 P68科技探索之路)艾弗里等人通过肺炎链球菌的转化实验，不仅证明了遗传物质是DNA，还证明了DNA可以在同种生物的不同个体之间转移。 2．(选择性必修3 P74拓展应用1)限制酶不能切割细菌自身DNA分子的原因：原核生物DNA分子中不存在该酶的识别序列或识别序列已经被修饰。 3．(选择性必修3 P77相关信息)真核细胞和细菌的DNA聚合酶都需要Mg2＋激活。因此，PCR反应缓冲液中一般要添加Mg2＋。引物是一小段能与DNA母链的一段碱基序列互补配对的短单链核酸。用于PCR的引物长度通常为20～30个核苷酸。 二 轮 专 题 复 习 返回导航 4．(选择性必修3 P81资料卡)农杆菌细胞内含有Ti质粒，当它侵染植物细胞后，能将Ti质粒上的T-DNA(可转移的DNA)转移到被侵染的细胞中，并且将其整合到该细胞的染色体DNA上。 二 轮 专 题 复 习 返回导航 【最新考情】 1．(2024·高考新课标卷)某研究小组将纤维素酶基因(N)插入某种细菌(B1)的基因组中，构建高效降解纤维素的菌株(B2)。该小组在含有N基因的质粒中插入B1基因组的M1与M2片段；再经限制酶切割获得含N基因的片段甲，片段甲两端分别为M1与M2；利用CRISPR/Cas9基因组编辑技术将片段甲插入B1的基因组，得到菌株B2。酶切位点(Ⅰ～Ⅳ)、引物(P1～P4)的结合位置、片段甲替换区如图所示，→表示引物5′→3′方向。回答下列问题。 二 轮 专 题 复 习 返回导航 (1)限制酶切割的化学键是____________。为保证N基因能在菌株B2中表达，在构建片段甲时，应将M1与M2片段分别插入质粒的Ⅰ和Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ酶切位点之间，原因是________________________________________________ __________________________________。 解析：限制酶(限制性内切核酸酶)能识别双链DNA分子的特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的磷酸二酯键断开。N基因表达需要RNA聚合酶与启动子结合启动转录，还需要终止子终止转录，在题述对应位置插入M1与M2片段，可以防止N基因上游的启动子和下游的终止子在插入B1的基因组时被破坏，保证N基因能在菌株B2中表达。 磷酸二酯键 可以防止N基因上游的启动子和下游的终止子被破坏，保证N基因能在菌株B2中表达　 二 轮 专 题 复 习 返回导航 (2)CRISPR/Cas9技术可以切割细菌B1基因组中与向导RNA结合的DNA。向导RNA与B1基因组DNA互补配对可以形成的碱基对有G—C和_______________。 解析：向导RNA中存在碱基A、G、C、U，而B1基因组DNA中存在碱基A、G、C、T，RNA与DNA互补配对时也遵循碱基互补配对原则，可以形成的碱基对有G—C、A—T和U—A。 A—T、U—A 二 轮 专 题 复 习 返回导航 (3)用引物P1和P2进行PCR可验证片段甲插入了细菌B1基因组，所用的模板是_____________________；若用该模板与引物P3和P4进行PCR，实验结果是______________________。 解析：根据题意，为验证片段甲是否插入了细菌B1基因组，应该以菌株B2的基因组DNA为模板进行PCR。该模板没有引物P4的结合位置，若用该模板与引物P3和P4进行PCR，则实验结果是无法扩增出目的产物。 菌株B2基因组DNA　 无法扩增出目的产物　 二 轮 专 题 复 习 返回导航 (4)与秸秆焚烧相比，利用高效降解纤维素的细菌处理秸秆的优点是_______________________________________(答出2点即可)。 解析：秸秆焚烧会产生浓烟和二氧化碳等物质，造成环境污染，而利用高效降解纤维素的细菌处理秸秆，可在一定程度上有效减少环境污染；无火灾隐患，更加安全；此外降解产物中含有大量的葡萄糖，可以作为原料生产燃料乙醇等，实现废物利用。 减少环境污染；实现废物利用(合理即可) 二 轮 专 题 复 习 返回导航 2．(2024·河北选择考)新城疫病毒可引起家禽急性败血性传染病，我国科学家将该病毒相关基因改造为γ2HN，使其在水稻胚乳特异表达，制备获得γ2HN疫苗，并对其免疫效果进行了检测。回答下列问题： (1)实验所用载体的部分结构及其限制酶识别位点如图1所示。其中GtP为启动子，若使γ2HN仅在水稻胚乳表达，GtP应为________________________ 启动子。Nos为终止子，其作用为________________。γ2HN基因内部不含载体的限制酶识别位点。因此，可选择限制酶________和________对γ2HN基因与载体进行酶切，用于表达载体的构建。 水稻胚乳中特异表达的基因的　 终止转录过程　 Hind Ⅲ　 EcoR Ⅰ 二 轮 专 题 复 习 返回导航 解析：根据题意可知，若使γ2HN基因仅在水稻胚乳表达，GtP(启动子)应为水稻胚乳中特异表达的基因的启动子。Nos为终止子，其作用为终止转录过程。GtP内部含有Kpn Ⅰ的酶切位点，用Kpn Ⅰ酶切会破坏启动子，Nos下游含有Sac Ⅰ的酶切位点，用Sac Ⅰ酶切会使重组基因表达载体缺失终止子，故构建基因表达载体时，可选择限制酶Hind Ⅲ和EcoRⅠ对γ2HN基因与载体进行酶切。 二 轮 专 题 复 习 返回导航 (2)利用____________方法将γ2HN基因导入水稻愈伤组织。为检测γ2HN表达情况，可通过PCR技术检测_____________________________，通过________________技术检测是否翻译出γ2HN蛋白。 解析：水稻是单子叶植物，可用农杆菌转化法将γ2HN基因导入水稻愈伤组织。为检测γ2HN基因表达情况，可用PCR检测γ2HN基因是否转录出mRNA，若要检测γ2HN基因是否翻译出γ2HN蛋白，可用抗原—抗体杂交技术。 农杆菌转化　 γ2HN基因是否转录出了mRNA　 抗原—抗体杂交　 二 轮 专 题 复 习 返回导航 (3)获得转基因植株后，通常选择单一位点插入目的基因的植株进行研究。此类植株自交一代后，γ2HN纯合体植株的占比为__________。选择纯合体进行后续研究的原因是___________________。 遗传性状稳定 二 轮 专 题 复 习 返回导航 (4)制备γ2HN疫苗后，为研究其免疫效果，对实验组鸡进行接种，对照组注射疫苗溶剂。检测两组鸡体内抗新城疫病毒抗体水平和特异应答的CD8＋T细胞(细胞毒性T细胞)水平，结果如图2所示。据此分析，获得的γ2HN疫苗能够成功激活鸡的________免疫和________免疫。 体液　 细胞　 二 轮 专 题 复 习 返回导航 解析：通过体液免疫，机体可产生较多相应抗体，通过细胞免疫，机体可产生较多细胞毒性T细胞。据题图可知，实验组的抗体和CD8＋T细胞(细胞毒性T细胞)均明显高于对照组，因此获得的γ2HN疫苗能够成功激活鸡的体液免疫和细胞免疫。 二 轮 专 题 复 习 返回导航 (5)利用水稻作为生物反应器生产γ2HN疫苗的优点是_____________________________。(答出两点即可) 解析：利用水稻作为生物反应器生产γ2HN疫苗，有生产成本低、生物安全性较高、提取和处理目标产物简易等优点。 生产成本低、生物安全性较高 二 轮 专 题 复 习 返回导航 [把脉高考]　基因工程和蛋白质工程代表了生物科学技术的前沿，体现了生物科学的应用性和创新性，因此该知识点属于高频考点，也是高考的必考点，试题情境专业性较强，常涉及PCR、电泳技术和基因表达的调控机制等。基因工程也常与细胞工程、遗传、育种等知识联系并结合生活、生产、临床实践，探究科技前沿，渗透生命观念和社会责任。 二 轮 专 题 复 习 返回导航 【历年考情】   (1)(2023·全国乙T38)启动子是RNA聚合酶识别和结合的部位，驱动基因翻译。(　　) (2)(2022·山东T25)两种引物分别与两条模板链3′端的碱基序列互补配对。(　　) (3)(2022·山东T20)通过转基因技术可减少啤酒酵母双乙酰的生成，缩短啤酒的发酵周期。(　　) ×　 √　 √　 二 轮 专 题 复 习 返回导航 (4)(2021·湖北T16)某实验利用PCR技术获取目的基因，实验结果显示除目的基因条带(引物与模板完全配对)外，还有2条非特异条带(引物和模板不完全配对)。为了减少反应非特异条带的产生，可以提高复性的温度。(　　) (5)(2020·天津T11)目的基因是基因工程的关键要素，必须从动物、植物或微生物的基因组文库中直接获取。(　　) √　 ×　 二 轮 专 题 复 习 返回导航 (6)(2023·全国甲T38节选)乙肝病毒是一种DNA病毒。重组乙肝疫苗的主要成分是利用基因工程技术获得的乙肝病毒表面抗原(一种病毒蛋白)。回答下列问题。 ①接种上述重组乙肝疫苗不会在人体中产生乙肝病毒，原因是_______________________________________________。 ②若要通过实验检测目的基因在酵母细胞中是否表达出目的蛋白，请简要写出实验思路。__________________________________________________ _________________________________。 重组乙肝疫苗成分为蛋白质，无法在宿主体内增殖 通过使用相应抗体，利用抗原—抗体杂交技术，检测目的基因是否翻译形成蛋白质　 二 轮 专 题 复 习 返回导航 (7)(2022·全国乙T38节选)已知某种病毒的特异性蛋白S(具有抗原性)的编码序列(目的基因)。为了制备蛋白疫苗，可以通过基因工程技术获得大量蛋白S。基因工程的基本操作流程是_________________________________ ______________________________________________________________。 (8)(2022·湖北T22节选)制备转基因植物时，用农杆菌侵染植株叶片外植体，其目的是______________________________________________________。 获取目的基因→构建基因表达载体→将目的基因导入受体细胞→目的基因的检测与鉴定　 通过农杆菌的转化作用，使目的基因进入植物细胞　 二 轮 专 题 复 习 返回导航 (9)(2022·广东T22节选)研究者构建了一种表达载体pMTL80k，用于在梭菌中建立多基因组合表达库，经筛选后提高丙酮的合成量。该载体包括了启动子、终止子及抗生素抗性基因等，其中抗生素抗性基因的作用是______________________________________________，终止子的作用是___________________________________________。 作为标记基因，筛选含有目的基因的受体细胞　 终止转录，使转录在需要的地方停下来 二 轮 专 题 复 习 返回导航 突破1　基因工程的操作步骤及应用 1．(2024·湖南张家界高三二模)某生物的W基因可编码一种营养价值极高的W物质。为了大批量获得W物质，某研究小组构建了W基因的表达载体，并利用工程菌生产W物质。质粒、含W基因的DNA片段及限制酶切割位点如下图所示，下表为有关限制酶识别序列。回答下列问题： 二 轮 专 题 复 习 返回导航 限制酶 识别序列和切割位点(5′→3′) BamHⅠ ↓ GGATTC EcoRⅠ ↓ GAATTC MfeⅠ ↓ CAATTG KpnⅠ ↓ GGTACC Hind Ⅲ ↓ AAGCTT 二 轮 专 题 复 习 返回导航 (1)质粒作为常用的载体，其特点有_______________________________ _________________________________________(答出2点即可)。 解析：质粒作为常用的载体，其特点是具有多个限制酶切割位点、具有标记基因、能在受体细胞内复制等。 具有多个限制酶切割位点、有标记基因、能在受体细胞内复制(答出2点即可)　 二 轮 专 题 复 习 返回导航 (2)若图中W基因的转录方向是从左向右，结合图1和图2分析，应使用限制酶________________切割图中质粒，使用限制酶__________________切割图中含W基因的DNA片段。不能选择BamHⅠ切割质粒和含W基因的DNA片段的理由是__________________________________________________ ____________________。 解析：结合题图1和题图2分析，BamHⅠ会切割质粒的启动子，导致目的基因(W基因)无法转录；EcoRⅠ会在2个位点切割质粒，从而影响重组DNA分子的构建；MfeⅠ会切割W基因，使用KpnⅠ会使W基因和质粒反向连接，故应使用限制酶MfeⅠ、HindⅢ切割题图中质粒，使用限制酶EcoRⅠ、HindⅢ切割题图中含W基因的DNA片段。 MfeⅠ、HindⅢ　 EcoRⅠ、HindⅢ　 BamHⅠ会切割质粒的启动子，导致目的基因(W基因)无法转录　 二 轮 专 题 复 习 返回导航 (3)若图中W基因的转录方向是从左向右，则W基因转录的模板链是______(填“甲链”或“乙链”)。利用PCR对W基因进行扩增的原理是_______________________。 解析：若W基因的转录方向是从左向右，则mRNA链的合成方向为从左向右5′→3′，与乙链从左向右3′→5′互补，故W基因转录的模板链是乙链。利用PCR扩增目的基因的原理是DNA的半保留复制。 乙链　 DNA半保留复制　 二 轮 专 题 复 习 返回导航 (4)研究人员利用W基因的mRNA进行逆转录得到了cDNA，已知其mRNA的序列为5′—UGAACGCUA…(中间序列)…GUCGACUCG—3′。为了便于将扩增后的基因和载体连接构建重组质粒，用于PCR扩增的引物应为________。 A．5′—GAATTCTGAACG—3′ B．5′—AAGCTTCGAGTC—3′ C．5′—GAATTCCGAGTC—3′ D．5′—AAGCTTTGAACG—3′ AB 二 轮 专 题 复 习 返回导航 解析：W基因经逆转录得到的cDNA的序列为5′—CGAGTCGAC…(中间序列)…TAGCGTTCA—3′，利用PCR对cDNA进行扩增，PCR过程需要两种引物，它们能分别与目的基因两条链的3′端通过碱基互补配对结合，并具有EcoRⅠ、HindⅢ的识别序列，故PCR扩增时所需引物的碱基序列为5′—GAATTCTGAACG—3′，5′—AAGCTTCGAGTC—3′，A、B符合题意。 二 轮 专 题 复 习 返回导航 2．(2024·广东深圳高三一模)番茄在种植过程中容易发生虫害。研究人员将双价抗虫载体转入番茄中，获得具有抗虫特性的转基因番茄。下图为所用载体的部分结构示意图，其中Bar为除草剂抗性基因，Cry1Ac为苏云金杆菌毒蛋白基因，Pta为半夏凝集素基因。 二 轮 专 题 复 习 返回导航 回答下列问题： (1)双价抗虫载体中的P1、P2和P3属于基因表达载体中的________，其作用是______________________________。 解析：双价抗虫载体中的P1、P2和P3位于基因的首端，属于基因表达载体中的启动子，启动子是转录的起点，是RNA聚合酶识别和结合的位点。 (2)构建的载体通常用________________法转入番茄子叶中并进行植物组织培养，并在培养基中添加__________用于筛选转基因番茄。 解析：番茄为双子叶植物，常用农杆菌转化法将构建的载体转入番茄子叶中并进行植物组织培养，基因表达载体中有Bar(除草剂抗性基因)，可作为标记基因，可在培养基中添加除草剂用于筛选转基因番茄。 启动子　 RNA聚合酶识别和结合的位点　 农杆菌转化　 除草剂　 二 轮 专 题 复 习 返回导航 (3)为验证Pta基因是否转入番茄基因组中，研究人员使用________(填技术)筛选转基因番茄中的Pta基因，再进行凝胶电泳鉴定，结果如下图所示。  图中①为阳性对照，②为阴性对照，③为待测植株，试分析③中出现2条条带的可能原因是____________________________。 解析：为验证Pta基因是否转入番茄基因组中，可使用PCR筛选转基因番茄中的Pta基因，再进行凝胶电泳鉴定，若PCR过程中引物特异性不高，可能会出现多条条带，③中出现2条条带的可能原因是所使用的Pta引物特异性不高。 PCR　 所使用的Pta引物特异性不高 二 轮 专 题 复 习 返回导航 (4)对于成功转化的番茄植株还需进一步进行抗虫鉴定，研究人员选取3株阳性转基因番茄进行小菜蛾幼虫抗性实验，结果见下表。 株系编号 CK 1 2 3 幼虫致死率/% 0 39.8 6.5 48.9 注：CK表示对照。 由表中可知，株系2的幼虫致死率较低，推测其可能原因是____________________________________________。 解析：由题表数据可知，株系2的幼虫致死率较低，可能是因为抗虫基因在转基因番茄株系2的表达水平比较低。 抗虫基因在转基因番茄株系2的表达水平比较低 二 轮 专 题 复 习 返回导航 突破2　蛋白质工程基本原理及应用 3．(2024·辽宁沈阳高三二模)基于AI(人工智能)的蛋白质设计方法可以利用现有蛋白质数据库以及机器深度“学习算法”来预测新型蛋白质的结构及功能。下列说法错误的是(　　) A．AI可帮助人们更深入了解蛋白质的结构与功能关系 B．AI预测新型蛋白质的结构和功能依据原理是中心法则 C．可通过改造或合成基因来获得AI设计的蛋白质 D．AI可帮助人们高效地设计出自然界没有的蛋白质 √ 二 轮 专 题 复 习 返回导航 解析：AI可以利用现有蛋白质数据库帮助人们更深入了解蛋白质的结构与功能关系，A正确； AI对新型蛋白质的预测应从预期的蛋白质功能出发，设计预期的蛋白质结构，B错误； 获得新型蛋白质是通过改造或合成基因来完成的，C正确； AI可用于蛋白质工程，帮助人们高效地设计出自然界没有的蛋白质，D正确。 二 轮 专 题 复 习 返回导航 4．(2022·湖南选择考)水蛭是我国的传统中药材，主要药理成分水蛭素为水蛭蛋白中重要成分之一，具有良好的抗凝血作用。拟通过蛋白质工程改造水蛭素结构，提高其抗凝血活性。回答下列问题： (1)蛋白质工程流程如图所示，物质a是__________，物质b是__________。在生产过程中，物质b可能不同，合成的蛋白质空间构象却相同，原因是_________________。 多肽链　 mRNA　 密码子具有简并性　 二 轮 专 题 复 习 返回导航 解析：蛋白质工程的基本思路：从预期的蛋白质功能出发→设计预期的蛋白质结构→推测应有的氨基酸序列→找到并改变相对应的脱氧核苷酸序列(基因)或合成新的基因→获得所需要的蛋白质。由此可知，物质a是多肽链，物质b是mRNA。在生产过程中，物质b可能不同，合成的蛋白质空间构象却相同，原因是密码子具有简并性，即一种氨基酸可由几个密码子编码。 二 轮 专 题 复 习 返回导航 (2)蛋白质工程是基因工程的延伸，基因工程中获取目的基因的常用方法有________________________、________________________和利用 PCR 扩增。PCR遵循的基本原理是___________________。 解析：基因工程中获取目的基因的常用方法有通过构建基因文库获取、用化学合成法进行人工合成和利用 PCR 扩增。PCR遵循的基本原理是 DNA半保留复制。 通过构建基因文库获取　 用化学合成法进行人工合成 　DNA半保留复制　 二 轮 专 题 复 习 返回导航 (3)将提取的水蛭蛋白经甲、乙两种蛋白酶水解后，分析水解产物中的肽含量及其抗凝血活性，结果如图所示。推测两种处理后酶解产物的抗凝血活性差异主要与肽的__________(填“种类”或“含量”)有关，导致其活性不同的原因是____________________________________________________ ____________________________________。 种类　 提取的水蛭蛋白的酶解时间和处理的酶的种类不同，导致水蛭蛋白空间结构有不同程度破坏　 二 轮 专 题 复 习 返回导航 解析：将提取的水蛭蛋白经甲、乙两种蛋白酶水解后，据题图可知，水解产物中的肽含量随着酶解时间的延长均上升，且两种酶差别不大；而水解产物抗凝血活性差异较大，经酶甲处理后，随着酶解时间的延长，抗凝血活性先上升后相对稳定，经酶乙处理后，随着酶解时间的延长，抗凝血活性先上升后下降，且酶甲处理后的酶解产物的抗凝血活性最终高于经酶乙处理后的酶解产物的抗凝血活性，差异明显，据此推测两种处理后酶解产物的抗凝血活性差异主要与肽的种类有关，导致其活性不同的原因是提取的水蛭蛋白的酶解时间和酶的种类不同，导致水蛭蛋白空间结构有不同程度破坏。 二 轮 专 题 复 习 返回导航 (4)若要比较蛋白质工程改造后的水蛭素、上述水蛭蛋白酶解产物和天然水蛭素的抗凝血活性差异，简要写出实验设计思路。___________________ _____________________________________________________________________________________________________________________________________________________。 解析：若要比较蛋白质工程改造后的水蛭素、题述两种水蛭蛋白酶解产物和天然水蛭素的抗凝血活性差异，实验设计思路为取四支试管，分别加入等量的蛋白质工程改造后的水蛭素、题述两种水蛭蛋白酶解产物、天然水蛭素，再向四支试管中各加入等量的新鲜血液，观察四支试管中血液的凝固情况。 取四支试管，分别加入等量的蛋白质工程改造后的水蛭素、题述两种水蛭蛋白酶解产物、天然水蛭素，再向四支试管中各加入等量的新鲜血液，观察四支试管中血液的凝固情况 二 轮 专 题 复 习 返回导航 突破3　生物技术的安全性与伦理问题 5．(2024·浙江1月选考)关于生物技术的安全与伦理问题，我国相关法规明令禁止的是(　　) A．试管动物的培育　 B．转基因食品的生产 C．治疗性克隆研究 D.生物武器的发展和生产 √ 二 轮 专 题 复 习 返回导航 解析：试管动物的培育属于胚胎工程，我国对此没有禁止，A不符合题意； 我国目前不反对转基因食品的生产，B不符合题意； 我国政府坚持反对生殖性克隆，不反对治疗性克隆，但主张对其进行有效监控和严格审查，C不符合题意； 生物武器致病能力强、攻击范围广，世界范围内应全面禁止生物武器，D符合题意。 二 轮 专 题 复 习 返回导航 6．(2024·辽宁协作体高三模拟)生物技术的进步在给人类带来福祉的同时，也会引起人们对其安全性和伦理道德的关注，下列关于相关生物技术的说法中，合理的是(　　) A．为防止生物技术用于生产生物武器，严禁进行生物技术的新研究 B．只要数量不太大，生殖性克隆人是允许的 C．在移植前对人类胚胎进行遗传学诊断不符合伦理要求 D．基因工程将创造出新物种而影响区域生态平衡 √ 二 轮 专 题 复 习 返回导航 解析：可合理地使用生物技术进行新研究，A不合理； 我国禁止生殖性克隆人，B不合理； 设计试管婴儿在移植前对人类胚胎进行遗传学诊断，虽然能解决一些问题比如治疗白血病，但不符合伦理要求，C合理； 基因工程是指按照人们的愿望，通过转基因等技术，赋予生物新的遗传特性，创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品，基因工程不能创造出新物种，D不合理。 二 轮 专 题 复 习 返回导航 创设情境 长句特训 PART 04 第四部分 事实概述类 1．植物组织培养技术可与基因工程技术相结合获得转基因植株。将含有目的基因的细胞培养成一个完整植株的基本程序是_______________________________________________________________________________________________(用流程图表示)。 二 轮 专 题 复 习 返回导航 2．在单克隆抗体制备过程中，有两次筛选，其目的分别是________________________________________________________________________________________________________________________________。 答案：第一次是筛选出杂交瘤细胞(用选择培养基)；第二次是进一步筛选出能分泌所需抗体的杂交瘤细胞(用抗原—抗体杂交法) 二 轮 专 题 复 习 返回导航 3．质粒载体用EcoRⅠ切割后产生的片段如下： AATTC……G G……CTTAA 为使载体与目的基因相连，含有目的基因的DNA除可用EcoRⅠ切割外，还可用另一种限制性内切核酸酶切割，该酶必须具有的特点是_____________________________________________________________。 答案：切割产生的DNA片段末端与EcoRⅠ切割产生的DNA片段末端相同 二 轮 专 题 复 习 返回导航 4．为确定转基因抗盐烟草是否培育成功，既要利用______进行分子水平检测，又要在个体生物学水平上进行鉴定，后者的具体过程是_________________________________________________________________。 PCR　 将培育的烟草幼苗栽培于含有一定盐的土壤中,观察该烟草植株的生长状态 二 轮 专 题 复 习 返回导航 5．从受体细胞中分离纯化出用基因工程方法制备的HIV某蛋白(目的蛋白)，该蛋白作为抗原注入机体后，刺激机体产生的可与此蛋白结合的相应分泌蛋白是________________，该分泌蛋白可用于检测受试者血清中的HIV，检测的原理是________________________________。 抗体　 抗原与抗体特异性结合 二 轮 专 题 复 习 返回导航 原因分析类 6．若想利用植物体细胞杂交技术培养出马铃薯—草莓杂种植物，以提高土地的利用率，____________(填“能”或“不能”)把两物种细胞直接融合，理由是_________________________________________________。 不能　 植物细胞外面有一层细胞壁，阻碍了细胞间的融合 7．动物体细胞进行体外培养时，_________(填“需要”或“不需要”)脱分化过程，原因是_____________________________________________ ________________________。 不需要　 高度分化的动物细胞分化的潜能变窄，失去发育成完整个体的能力 二 轮 专 题 复 习 返回导航 8．若用重组质粒转化大肠杆菌，一般情况下，不能直接用未处理的大肠杆菌作为受体细胞，原因是_____________________________ _______________________________________________________。 答案：未处理的大肠杆菌吸收质粒(外源DNA)的能力极弱 二 轮 专 题 复 习 返回导航 实验探究类 9．蛋白质NLP是拟南芥细胞内的硝酸盐受体，与硝酸盐结合后会激活硝酸盐响应基因的启动子。科研人员通过构建多种转基因拟南芥研究NLP的功能，在NLP研究中利用硝酸盐响应基因的启动子与荧光素酶基因组成报告基因。回答下列问题： (1)报告基因中添加荧光素酶基因的优点是____________________________ _______________________________。报告基因的受体拟南芥须为NLP合成突变型，以避免_____________对实验的干扰。 荧光素酶基因表达产物可催化荧光素氧化发出荧光，易于检测 　细胞内NLP　 二 轮 专 题 复 习 返回导航 (2)为获得NLP的氨基端和羧基端以分别研究其功能，科研人员构建了包含NLP片段的重组基因，如下图所示，其中需要人为添加起始密码子编码序列的是___________________________。 若通过引物同时为NLP基因片段添加限制酶识别序列和起始密码子编码序列，起始密码子编码序列需添加在限制酶识别序列的________(填“3′端”“5′端”或“3′端、5′端均可以”)。 编码羧基端的NLP基因片段　 3′端　 二 轮 专 题 复 习 返回导航 (3)利用报告基因与上述三种重组NLP基因分别制备转基因拟南芥，并编号为1组、2组、3组，与对照组分别置于含KCl或KNO3的培养基中培养，实验结果如下图。 二 轮 专 题 复 习 返回导航 对照组拟南芥的实验处理是________________________________。根据实验结果可知激活硝酸盐响应基因表达的是________(填“氨基端”“羧基端”或“氨基端、羧基端均可以”)；硝酸盐存在时，NLP激活硝酸盐响应基因表达的机制是_____________________________________________________ ___________。 导入报告基因，不导入重组NLP基因　 羧基端 　 NLP的氨基端会抑制羧基端的激活作用，硝酸盐能够解除抑制作用 二 轮 专 题 复 习 返回导航 $