1.2微生物的培养技术及应用（第1课时）导学案-2024-2025学年高二下学期生物人教版选择性必修3

该高中生物学导学案聚焦“微生物的基本培养技术”，涵盖培养基配制、无菌技术及纯培养核心知识，通过课前预习案（填空、对比表格）梳理基础，课堂探究案（问题链、重难点拨）深化理解，结合教材微点图示（接种环灼烧、倒平板步骤）搭建学习支架。 突出科学思维（消毒与灭菌对比分析）、探究实践（酵母菌纯培养操作指导）及生命观念（培养基结构与功能观），设计预习-探究-实践闭环，培养学生实验技能与严谨态度，助力高二生物教学高效开展。

高二生物导学案第1章第2节 微生物的培养技术及应用课题名称： 编号 ： 编制： 审核： 包科领导： 班级： 小组： 姓名： 教师评价： 第1课时 微生物的基本培养技术 （认真阅读课本9-15页，划出重要知识，规范完成课前预习案，做好疑难标记） 【学习目标】 1.比较消毒和灭菌的不同，联系生产生活实际，锻炼应用无菌技术解决生活问题。 2.解释微生物的纯培养和菌落。 3.概述培养基的配制方法和微生物纯培养的基本操作要求，进行酵母菌的纯培养，提升操作技能。 课 前 预 习 案 一、培养基的配制 1．培养基的含义：人们按照微生物对 的不同需求，配制出供其 的营养基质。 2．培养基的种类(按物理性质分类) 3．培养基的营养组成 各种培养基一般都含有 和无机盐等营养物质。此外，还需要满足微生物生长对 、特殊营养物质以及 的需求。 二、无菌技术 1．获得纯净的微生物培养物的关键：防止 。 2．消毒和灭菌 项目 消毒 灭菌 概念 使用较为 的物理、化学或生物等方法杀死物体 或内部一部分微生物 使用 的理化方法杀死物体内外所有的微生物，包括 常用方法 消毒法、巴氏消毒法、 消毒法、紫外线消毒法 灭菌、干热灭菌、 灭菌 适用对象 操作空间、双手等 接种环、接种针、玻璃器皿、培养基等 3.具体操作 (1)对操作的空间、操作者的衣着和手进行清洁和 。 (2)将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等进行 。 (3)为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在超净工作台上，并在 附近进行。 (4)实验操作时应注意避免已经灭菌处理的材料用具与 接触。 三、微生物的纯培养 1．纯培养：在微生物学中，将接种于培养基内，在合适条件下形成的含 的群体称为培养物。由 所获得的微生物群体称为纯培养物，获得纯培养物的过程就是纯培养。 2．微生物纯培养的步骤：微生物的纯培养包括配制培养基、 、 、分离和培养等步骤。 3．酵母菌的纯培养 (1)菌落：分散的微生物在适宜的 表面或内部可以繁殖形成肉眼可见的、有一定形态结构的 。 (2)获得单菌落的方法： 法和 法。 (3)酵母菌的纯培养步骤 【教材微点发掘】 1．(教材第11页图示拓展训练)下图为接种环灼烧灭菌的示意图，请据图回答下列问题： (1)酒精灯火焰A、B代表充分燃烧层的是 。 (2)灭菌先后的正确顺序是 (用序号和箭头表示)。 2．(教材第12页图示拓展训练)下图表示倒平板的正确操作步骤是 (用序号和箭头表示)。 课堂探究案 一、【质疑探究】 1．能够利用无机碳源的微生物的同化作用类型是什么？ 2．在科研和生产上，研究和应用微生物的前提是什么？在实验室中培养微生物应注意哪些问题？ 3．牛肉膏蛋白胨培养基是一种常见的细菌培养基，其中牛肉膏、蛋白胨能够提供哪些营养成分？ 4．对培养基、培养皿、接种环、实验者的双手、空气和牛奶常采用的灭菌或消毒方法分别是什么？ 5．用于生物消毒的微生物具有什么特点？ 6．消毒和灭菌的结果有什么不同？ 7．倒平板时，培养基冷凝后，为什么要将平板倒置？ 8．接种操作时每次划线接种前与接种后都要灼烧接种环或接种针，其目的分别是什么？ 9．接种结束后，为什么要将一个未接种的培养基和一个接种的培养基放在一起培养？如果未接种的培养基表面有菌落生长，说明了什么？ 二、【重难点拨】 一、制备培养基 1．培养基的配制原则：目的要明确；营养要协调；pH要适宜 2．培养基的成分 无机碳源：CO2、碳酸盐等；有机碳源：糖类、脂质、蛋白质等 无机氮源：N2、铵盐、氨、硝酸盐等；有机氮源：尿素、牛肉膏、蛋白胨等 二、培养基相关的几个特殊问题 1．加入培养基中的凝固剂(如琼脂)，一般不能被微生物利用。琼脂是一种从红藻中提取的多糖，在98 ℃以上熔化，在44 ℃以下凝固，在常规培养条件下呈现固态，其优点是透明度高。 2．微生物在固体培养基表面生长，可以形成肉眼可见的菌落，便于观察菌落形态。 3．扩大培养获得大量菌种时常用液体培养基。 4．不是所有微生物的培养基中都需要加入碳源、氮源。 (1)自养微生物能利用无机碳源(如空气中的CO2)，故培养基中不用添加碳源。 (2)固氮微生物可利用N2作为氮源，故培养基中不用加入氮源。 对异养微生物来说，含C、H、O、N的有机化合物(尿素除外)既可能是碳源，又可能是氮源和能源。 三、不同消毒方法 1．高温消毒的原理：蛋白质、核酸变性失活，从而达到消毒的目的。 2．巴氏消毒法的优点：达到消毒目的的同时营养物质损失较少。 3．用体积分数为70%的酒精杀菌 4．紫外线消毒法：在用紫外线照射前，适量喷洒苯酚或煤酚皂溶液等消毒液，可以加强消毒效果。 四、高压蒸汽灭菌问题分析 1．开始之前要将锅内的冷空气排尽。灭菌完毕后，要待压力降到0时才能打开排气阀。 2．在同一温度下，湿热的杀菌效力比干热大。 五、倒平板注意事项 1．培养基溶化后如需调整pH，应先调节pH，再灭菌。 2．平板冷凝后，要将平板倒置。因为平板冷凝后，皿盖上会凝结水珠，将平板倒置，既可以防止皿盖上的水珠落入培养基造成污染，又可避免培养基中的水分过快蒸发。 3．在倒平板的过程中，如果不小心将培养基溅在皿盖与皿底之间的部位，那么这个平板不能再用来培养微生物，应重新制备，因为空气中的微生物可能在皿盖与皿底之间的培养基上滋生。 4．平板划线操作的注意事项 (1)蘸取菌液及每次划线之前都需要灼烧接种环，划线操作结束后仍需灼烧接种环，三种灼烧的目的不同。 目的 项目 蘸取菌液前灼烧 避免接种环上可能存在的微生物污染菌种 每次划线前灼烧 杀死上一次划线结束后接种环上残留的菌种，使下一次划线时接种环上的菌种直接来源于上一次划线的末端 划线操作结束后灼烧 及时杀死接种环上残留的菌种，避免菌种污染环境和感染操作者 (2)在灼烧接种环之后，要等其冷却后再进行划线，以免温度过高杀死菌种。 (3)除第一次划线外，每次划线都从上一次划线的末端开始，这样能使细菌的数目随着划线次数的增加而逐步减少，最终能得到由单个细菌繁殖而来的菌落。 (4)划线时用力大小要适当，防止用力过大将培养基划破。 学科网（北京）股份有限公司 $