内容正文:
检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质
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一、实验原理及操作步骤
二、实验注意事项
一、实验原理及操作步骤
项目
检测原理
关键步骤
还原糖的检测
甲液:质量浓度为0.1 g/mL的NaOH溶液
乙液:质量浓度为0.05 g/mL的CuSO4溶液
等量混合,现配现用
脂肪的检测
苏丹III染色后,要用体积分数50%的酒精洗去浮色
蛋白质的检测
A液:质量浓度为0.1 g/mL的NaOH溶液
B液:质量浓度为0.01 g/mL的CuSO4溶液
先加A液营造碱性环境,再滴加B液
淀粉的检测
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记忆小妙招:三个“唯一”
唯一需要加热——还原糖的检测,且必须水浴加热,不能用酒精灯直接加热。若不加热,则无砖红色沉淀出现
唯一需要使用显微镜——脂肪的检测(且使用高倍镜)
唯一需要使用酒精溶液——脂肪的检测实验中,用体积分数为50%的酒精溶液洗去浮色
二、实验注意事项
1.选材标准:①目标物质含量高
②被测物质颜色浅(或无色)
2.还原糖:单糖(如葡萄糖、果糖、半乳糖、组成核酸的五碳糖)都是还原糖
二糖中的麦芽糖、乳糖是还原糖,蔗糖不是
多糖都不是还原糖
使用斐林试剂检测后出现砖红色沉淀,只能推知待测组织样液中含有还原糖,而不能推知是否含有葡萄糖;
3.非还原糖(如蔗糖)与斐林试剂水浴加热条件下呈现蓝色,即Cu(OH)2的颜色,而非无色;
4.双缩脲试剂能与含两个或两个以上肽键的蛋白质或多肽发生反应;蛋白质变性后肽键未断裂,仍可与双缩脲试剂反应呈紫色;
5.如果实验室没有双缩脲试剂,检测蛋白质可以使用斐林试剂,但是需要注意将其乙液稀释后使用;
6.使用鸡蛋清作为待测样液必须稀释,否则试管不易刷洗,反应也不彻底。
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