内容正文:
牛冷冻精液生产
专题复习讲练测
河北畜牧兽医类
《畜禽繁殖技术》(中国农业科学技术出版社)
掌握国家标准《机械制图》中有关图幅、比例、字体图线等基本规定。
考纲要求
一
1.了解:精液冷冻的基本原理、解冻及复苏的方法以及精液质量评估的方法等。
2.掌握:配制精液的稀释液,掌握精液的稀释方法。
3.理解:细管冻精液标记方法和精液冷冻的过程。
二
器械材料
不锈钢消毒锅、恒温水浴锅、玻璃棒、移液枪、精子密度测定仪、血球计数器、显微镜、高压蒸汽灭菌器、清洗消毒机、干燥箱、恒温箱。
任务二: 精液评价及处理
二
一、 准备
1.对所用器械用具进行清洗、消毒。
2.凡是接触精液的器皿均应该放在32~37℃的恒温箱中备用。
二、外观检查
1. 主要观察精液的色泽、气味及是否有脓性分泌物或血液等异物,正常情况下,精液为乳白色或微黄,略有腥味。
2.精液的颜色与气味出现异常的精液,不宜使用。
任务二: 精液评价及处理
二
三、采精量测定
(一) 称重
1.将盛有精液的集精管置于天平上称重(精确到0.1g) ,集精管重量(精确到0.1g)应预先称取。
2.计算
L=(M-P)/1.04
式中:
L: 精液量, 单位为mL;
M:装有精液的集精管重量,单位为g;P:集精管重量,单位为g。
任务二: 精液评价及处理
二
(二) 目测
1. 牛一次射精量一般5~10mL, 范围0.5~14mL, 不需过滤, 可在集精杯( 管) 中直接测定。
2. 直接读取集精管上刻度( 精确到0.1mL ) ,但集精管需经计量部门校准合格的才可使用。
四、精子的密度测定
使用精子密度测定仪进行测定。
任务二: 精液评价及处理
二
五、精子活力测定
取精液和稀释液5~10μL与载玻片上,加盖盖玻片或血盖片后,在37℃恒温装置的显微镜上评定活力,用百分率或相应数值表示,例如80%或0.8。
六、精液评价及处理
1.外观正常、密度大于等于6×10⁸个/mL、活力大于等于65%、畸形率小于等于15%的精液进行后续处理,可加入一定量的复合抗生素(进行性控冷冻精液生产的必须添加)。
2.其中任何一项不合格的精液做废弃处理。
任务二: 精液评价及处理
任务二: 精液评价及处理
二
练一练
1.精液评价前,所有接触精液的器皿应预热的温度是( )。
A. 20-25℃
B. 25-30℃
C. 32-37℃
D. 37-42℃
E. 40-45℃
【答案】C
【解析】凡是接触精液的器皿均应该放在32-37℃的恒温箱中备用。
任务二: 精液评价及处理
二
练一练
2.正常牛精液的颜色应为( )。
A. 无色透明
B. 纯白色
C. 乳白色或微黄色
D. 淡红色
E. 深黄色
【答案】C
【解析】正常情况下,精液为乳白色或微黄,略有腥味。
任务二: 精液评价及处理
二
练一练
3.用于测定精液量的集精管,在使用前必须( )。
A. 高温烘烤
B. 经计量部门校准合格
C. 紫外线照射
D. 装满水测试
E. 预冷处理
【答案】B
【解析】直接读取集精管上刻度,但集精管需经计量部门校准合格的才可使用。
二
器械材料
精液冷冻细管灌装封口一体机、低温柜、水浴锅、稀释瓶、烧杯、细管、不透明的塑料盒、稀释液、精液、冰块。
任务三: 精液的稀释、平衡与灌装
二
一、稀释液准备
1.根据精液的密度、活力、采精量等确定应加稀释液量。
2.稀释液放在32~35℃恒温水浴锅中备用,盛装稀释液的稀释瓶应做明显标记。
任务三: 精液的稀释、平衡与灌装
二
二、稀释、平衡、灌装
(一) 一种稀释液法
1.取一个已盛有30mL稀释液经34℃水浴预先加温的稀释瓶,对精液进行稀释并混匀,在34℃水浴锅中暂存10min后加稀释液至最终稀释量。
任务三: 精液的稀释、平衡与灌装
二
二、稀释、平衡、灌装
(一) 一种稀释液法
2.再按如下方法之一操作。
(1) 先灌装后平衡:放置10min后,即可在20℃以下常温实验室操作台上进行精液的灌装、封口和标识。灌装后的细管放入不透明的塑料盒内,每盒以盛放300支为宜。把塑料盒放入3~5℃低温柜中平衡3~4h,评定活力。
(2) 先平衡后灌装:加完稀释液后,用水杯盛适量的34℃水,把稀释瓶放入后送3~5℃低温柜内降温平衡。2h后水杯中加冰块,促使其快速降温至3~5℃(细管亦应降至3~5℃) ,评定活力。在低温柜中进行细管灌装、封口和标识。
任务三: 精液的稀释、平衡与灌装
二
二、稀释、平衡、灌装
( 二) 两种稀释液法
1.把精液倒入34℃预先加温的稀释瓶中,用5mL 34℃的第一液加入集精管,摇晃数下,然后倒入稀释瓶中。
2.剩余的第一液缓慢地加入稀释瓶中,摇匀,评定活力。
3.第一液量的计算见式:
Y=[(Q+J) /2]-J
式中:
Y: 第一液量, 单位为mL;Q:应加稀释液量,单位为mL;J: 精液量, 单位为mL。
任务三: 精液的稀释、平衡与灌装
二
二、稀释、平衡、灌装
( 二) 两种稀释液法
4.用水杯盛适量的34℃水,把稀释瓶放入后送3~5℃低温柜内降温平衡,与此同时,把第二液一并放入低温柜。
5.2h后水杯中加冰块,促使其快速降温至3~5℃时加入第二液。
6.第二液量的计算见式:
R=Q-Y
式中:
R: 第二液量, 单位为mL;Y: 第一液量, 单位为mL;Q:应加稀释液量,单位为mL。
任务三: 精液的稀释、平衡与灌装
二
二、稀释、平衡、灌装
( 二) 两种稀释液法
7.加入第二液摇匀后再平衡0.5h以上,评定活力。
8.在低温柜中进行细管灌装、封口和标识。
任务三: 精液的稀释、平衡与灌装
任务三: 精液的稀释、平衡与灌装
二
练一练
1.稀释液在使用前应预热到的温度范围是( )。
A. 20-25℃
B. 25-30℃
C. 32~35℃
D. 37-40℃
E. 4-8℃
【答案】C
【解析】稀释液放在32-35℃恒温水浴锅中备用。
任务三: 精液的稀释、平衡与灌装
二
练一练
2.盛装稀释液的稀释瓶应( )。
A. 无色透明
B. 做明显标记
C. 预先冷冻
D. 装满不留空隙
E. 使用金属材质
【答案】B
【解析】盛装稀释液的稀释瓶应做明显标记。
任务三: 精液的稀释、平衡与灌装
二
练一练
3.第一次稀释后,精液应在34℃水浴锅中暂存( )。
A. 立即使用
B. 5min
C. 10min
D. 30min
E. 1h
【答案】C
【解析】在34℃水浴锅中暂存10min后加稀释液至最终稀释量。
真题练讲
三
1.(单选题)牛一次射精量的正常范围大约是( )。
A. 0.1-1 mL
B. 0.5-14 mL
C. 5-10 mL
D. 10-20 mL
E. 20-30 mL
【答案】B
【解析】牛一次射精量一般5~10mL, 范围0.5~14mL。
真题练讲
三
2.(单选题)使用称重法计算精液量(L)的公式是( )。
A. L = M - P
B. L = (M - P) / 1.04
C. L = (M + P) * 1.04
D. L = M / 1.04
E. L = P / 1.04
【答案】B
【解析】使用称重法计算精液量(L)的公式是L=(M-P)/1.04。
真题练讲
三
3.(单选题)公式 L=(M-P)/1.04 中,1.04 代表( )。
A. 精子的平均密度
B. 精液的近似密度(g/mL)
C. 集精管的校正系数
D. 温度补偿系数
E. 稀释液的体积系数
【答案】B
【解析】重量差(M-P)除以精液的密度(约1.04 g/mL)来换算成体积(mL)。
真题练讲
三
4.(单选题)灌装操作应在( )进行。
A. 3-5℃低温柜
B. 34℃水浴锅
C. 20℃以下常温实验室操作台
D. 4℃冰柜
E. 37℃恒温箱
【答案】C
【解析】在20℃以下常温实验室操作台上进行精液的灌装、封口和标识。
真题练讲
三
5.(单选题)灌装后的细管应放入( )中平衡。
A. 水浴锅
B. 不透明的塑料盒
C. 开放的托盘
D. 金属盒
E. 稀释瓶
【答案】B
【解析】灌装后的细管放入不透明的塑料盒内,每盒以盛放300支为宜。把塑料盒放入3-5℃低温柜中平衡。
真题练讲
三
6.(判断题)灌装封口后,细管可以直接投入液氮中冷冻。( )。
【答案】错误
【解析】灌装封口和平衡完成后,还需要经过一个特定的冷冻程序(通常在液氮蒸气中)才能最终冻结,而非直接投入液氮。
限时练习
四
1.(单选题)进行精子活力评定时,需要在( )条件下进行。
A. 室温(25℃)
B. 4℃冷藏
C. 37℃恒温
D. 45℃高温
E. 任意温度
【答案】C
【解析】在37℃恒温装置的显微镜上评定活力。
限时练习
四
2.(单选题)精子活力的表示方式为( )。
A. 精子浓度(个/mL)
B. 精液量(mL)
C. 百分率或相应数值(如0.8)
D. 畸形精子比例
E. pH值
【答案】C
【解析】用百分率或相应数值表示,例如80%或0.8。
限时练习
四
3.(单选题)可用于进行后续处理(如制作冷冻精液)的精液,其活力最低标准为( )。
A. ≥ 30%
B. ≥ 50%
C. ≥ 65%
D. ≥ 80%
E. ≥ 90%
【答案】C
【解析】活力最低标准为密度大于等于6×10⁸个/mL、活力大于等于65%、畸形率小于等于15%。
限时练习
四
4.(单选题)先平衡后灌装法的灌装操作在( )进行。
A. 20℃以下常温实验室操作台
B. 34℃水浴锅旁
C. 3~5℃低温柜中
D. 37℃显微镜室
E. 任意环境均可
【答案】C
【解析】在低温柜中进行细管灌装、封口和标识。
限时练习
四
5.(单选题)用于盛放稀释瓶以辅助降温的容器是( )。
A. 不透明的塑料盒
B. 烧杯
C. 水杯
D. 稀释瓶
E. 细管盒
【答案】C
【解析】用水杯盛适量的34℃水,把稀释瓶放入后送3-5℃低温柜内降温平衡。
限时练习
四
6.(判断题)精液评价是一项标准化操作,必须严格按照规程执行。( )。
【答案】正确
【解析】精液评价是一项标准化操作,必须严格按照规程执行。
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内容小结
五
精液评价及处理
准备
外观检查
采精量测定
精子密度测定
精子活力测定
精液评价与处理
牛冷冻精液生产
精液稀释平衡罐装
稀释液准备
稀释、平衡、罐装
星光不问赶路人,
时光不负有心人。
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