内容正文:
DNA是主要的遗传物质
一、实验:探究遗传物质的经典实验
(一)肺炎链球菌转化实验
1.实验材料:肺炎链球菌的两种类型
类型
菌落特征
菌体结构
致病性
差异
S型细菌
表面光滑
有荚膜(多糖类)
有(可抵抗吞噬细胞吞噬)
荚膜基因的有无
R型细菌
表面粗糙
无荚膜
无
缺少荚膜合成相关基因
2. 格里菲思(体内转化实验)—提出转化因子
实验过程与现象:
①R型活细菌注射小鼠→小鼠不死亡(无致病性)。
②S型活细菌注射小鼠→小鼠死亡,分离出S型活细菌(有致病性)。
③加热致死的S型细菌注射小鼠→小鼠不死亡(致病性消失)。
④R型活细菌+加热致死的S型细菌注射小鼠→小鼠死亡,分离出S型活细菌(R型被转化)。
结果分析
①对比①②:S型细菌有致病性,R型细菌无致病性。
②对比②③:加热可使S型细菌失去致病性。
③对比②③④:加热致死的S型细菌中存在转化因子,能使R型细菌转化为S型细菌。
实验结论:提出转化因子的存在,但未明确其化学本质。
3.艾弗里(体外转化实验)—证明DNA是遗传物质
实验思路:利用减法原理,特异性去除S型细菌细胞提取物中的糖类、蛋白质、脂质、RNA等,单独观察DNA的作用。
实验过程:
①S型细菌细胞提取物(含DNA、蛋白质等)+R型细菌→培养出R型+S型细菌。
②提取物+蛋白酶(去除蛋白质)+R型细菌→仍培养出R型+S型细菌。
③提取物+RNA酶(去除RNA)+R型细菌→仍培养出R型+S型细菌。
④提取物+酯酶(去除脂质)+R型细菌→仍培养出R型+S型细菌。
⑤提取物+DNA酶(去除DNA)+R型细菌→仅培养出R型细菌。
结果分析:
①去除蛋白质、RNA、脂质后,转化仍能发生,说明这些物质不是转化因子。
②去除DNA后,转化无法发生,说明DNA是转化因子。
实验结论:DNA是使R型细菌产生稳定遗传变化的物质,即DNA是遗传物质。
4.转化的本质与关键细节
本质:S型细菌的DNA片段进入R型细菌细胞,与R型细菌的基因组发生同源重组,使R型细菌获得荚膜合成基因,进而转化为S型细菌(属于基因重组)。
细节:①加热致死的S型细菌:蛋白质变性失活,但DNA双链解开后缓慢冷却可恢复双螺旋结构,仍保持活性。②R型细菌需处于感受态(分泌感受态因子,具备与DNA结合的活性)才能完成转化。③转化后的S型细菌遗传物质与原S型细菌不完全相同(基因组含R型细菌原有基因+S型细菌荚膜基因)。
(二)噬菌体侵染细菌实验(赫尔希和蔡斯)—进一步验证DNA是遗传物质
1.实验材料:T2噬菌体与大肠杆菌
T2噬菌体结构:仅含DNA(含P元素)和蛋白质外壳(含S元素),专一寄生在大肠杆菌体内。
实验方法:放射性同位素标记法(分别标记DNA和蛋白质,单独追踪其去向)。
3. 实验设计与过程(对比实验)
分组
实验组1
实验组2
标记对象
噬菌体蛋白质
噬菌体DNA
标记方法
用含35S的培养基培养大肠杆菌,再用噬菌体侵染
用含32P的培养基培养大肠杆菌,再用噬菌体侵染
实验过程
35S标记的噬菌体→侵染未标记的大肠杆菌→搅拌(使噬菌体外壳与细菌分离)→离心
32P标记的噬菌体→侵染未标记的大肠杆菌→搅拌→离心
离心后放射性分布
上清液(噬菌体外壳)放射性高,沉淀物(细菌)放射性低
沉淀物(细菌及内部噬菌体DNA)放射性高,上清液放射性低
3.实验关键操作的目的
保温:使噬菌体充分侵染大肠杆菌(注入DNA,合成子代噬菌体)。
搅拌:使吸附在大肠杆菌表面的噬菌体蛋白质外壳与细菌分离。
离心:让质量较轻的噬菌体外壳进入上清液,质量较重的大肠杆菌进入沉淀物。
4.误差分析
32P标记组上清液放射性偏高:①保温时间过短(部分噬菌体未侵染细菌)。②保温时间过长(细菌裂解,子代噬菌体释放)。
35S标记组沉淀物放射性偏高:搅拌不充分(部分噬菌体外壳未与细菌分离,随细菌进入沉淀物)。
5.实验结论:噬菌体侵染细菌时,DNA进入细菌细胞,蛋白质外壳留在细胞外,子代噬菌体的性状由亲代DNA遗传,故DNA是噬菌体的遗传物质。
(三)烟草花叶病毒感染实验证明RNA也可作为遗传物质
实验过程:
①烟草花叶病毒(TMV)的RNA+烟草→烟草出现花叶病。
②TMV的蛋白质+烟草→烟草不出现花叶病。
③TMV的RNA+RNA酶+烟草→烟草不出现花叶病。
实验结论:烟草花叶病毒的遗传物质是RNA,而非蛋白质。
二、结论:DNA是主要的遗传物质
1.不同生物的遗传物质
生物类别
核酸类型
遗传物质
实例
有细胞结构的生物(原核生物、真核生物)
同时含DNA和RNA
DNA
细菌、植物、动物
无细胞结构的生物(病毒)
仅含DNA
DNA
T2噬菌体、乙肝病毒
仅含RNA
RNA
烟草花叶病毒、HIV
2.主要的含义:
绝大多数生物(有细胞结构的生物+DNA病毒)的遗传物质是DNA,只有少数RNA病毒的遗传物质是RNA,因此DNA是主要的遗传物质。
三、遗传物质的必备特征(源于经典实验推导)
具有相对稳定性(如DNA双链结构稳定)。
能精确自我复制(保证亲代与子代遗传连续性)。
能指导蛋白质合成(控制生物性状)。
能产生可遗传的变异(适应环境变化)。
四、实验设计的思路与方法
1.思路:
将遗传物质的两大候选者(DNA和蛋白质)分开,单独观察其对生物性状的影响(排除相互干扰)。
2.方法:
肺炎链球菌体外转化实验:减法原理(逐步去除某种物质,观察效果)。
噬菌体侵染细菌实验:放射性同位素标记法(特异性标记DNA和蛋白质)。
烟草花叶病毒实验:分离重组法(分离RNA和蛋白质,再重组侵染)。
五、高考高频考点与易错点总结
1.考点
经典实验的实验思路、操作目的、结果分析及结论。
遗传物质的判断(不同生物的遗传物质类型)。
实验误差分析(噬菌体侵染实验中放射性分布异常的原因)。
转化实验的本质(基因重组)。
2.易错点辨析
①格里菲思实验证明DNA是遗传物质(×,仅提出转化因子,未证明其是DNA)。
②艾弗里实验中单独的DNA能使小鼠死亡(×,单独DNA无致病性,需与R型细菌混合才能产生S型细菌)。
③噬菌体侵染实验中可用¹⁵N标记DNA(×,DNA和蛋白质均含N,无法区分)。
④所有病毒的遗传物质都是RNA(×,DNA病毒的遗传物质是DNA)。
⑤R型细菌转化为S型细菌是基因突变(×,是基因重组,源于S型细菌DNA片段的整合)。
⑥加热致死的S型细菌中DNA完全不变(×,DNA双链解开但冷却后可恢复,仍保持活性)。
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