内容正文:
马铃薯细胞
番茄细胞
去
壁
原生
质体
融合
人工
诱导
愈伤组织
脱分化
杂种植株
(异源多倍体)
再分化
植物细胞融合
杂交细胞
再生出新
的细胞壁
植物组织培养
标志:融合成功
去
壁
方法:酶解法
融合的方法:
物理法:离心、振动、电刺激
化学法:聚乙二醇(PEG)
意义:(与有性杂交方法比较)克服植物远缘杂交不亲和性
细胞膜的流动性
细胞全能性
导
复习导入
能不能用类似方法让动物体细胞进行杂交呢?
2.2 细胞工程
2.2.2 动物细胞融合与单克隆抗体
1.知道动物细胞融合与植物体细胞杂交的区别与联系。
2.清楚动物细胞融合与单克隆抗体制备的过程。
3.了解单克隆抗体在医学实践中的应用,并说出其运用实例。
学习目标
思
自读深思
阅读课本52页—54页,思考以下问题:
1.什么是动物细胞融合?其运用了什么原理?
2.动物细胞融合技术常用的方法有哪些?该技术意义何在?
3.单克隆抗体的制备过程是怎样的?其有何优点?
讲
突重攻难
一、动物细胞融合
1.概念:
动物细胞融合(也称细胞杂交):是指两个或多个细胞融合形成一个单核细胞的过程。
(1)原理:细胞膜的流动性
(2)诱导因素:聚乙二醇、灭活的病毒、电激;
(3)诱导成功的标志:细胞核融合在一起。
意义:突破有性杂交方法的局限,是远缘杂交成为可 能。为制造单克隆抗体开辟新途径。
1.为什么灭活的病毒能作诱导剂?
灭活丧失感染性,保留融合活性
2.植物体细胞杂交技术与动物细胞融合技术有什么不同?
比较项目 植物体细胞杂交 动物细胞融合
细胞融合原理 细胞膜的流动性
细胞全能性 细胞膜的流动性
细胞融合的方法 去除细胞壁后诱导原生质体融合 诱导细胞融合
诱导方法 物理(离心、振荡、电激)
化学(聚乙二醇) 物理、化学方法
灭活的病毒
用途 获得杂种植株 用于制备单克隆抗体
讲
突重攻难
人们发现,在动物发生免疫反应的过程中,体内的B细胞可以产生多达百万种以上的特异性抗体,但是每个B细胞只分泌一种化学性质单一、特异性强的抗体。要想获得大量的单一抗体,必须用单个B细胞进行无性繁殖,即克隆。
单克隆抗体:
单个B细胞克隆产生的化学性质单一,特异性强的抗体
二、单克隆抗体
传统血清抗体的生产方法
抗原
反复注射动物
从动物的血清中分离抗体
产量低、纯度低、
抗体特性异性差
二、单克隆抗体—制备
讲
突重攻难
抗原注入小鼠体内
B淋巴细胞
骨髓瘤细胞
杂交瘤细胞
选择培养细胞
体内培养
体外培养
单克隆抗体
分离
细胞融合
细胞培养
注入小鼠
培养基
从腹水提取
从培养液提取
BB 、B瘤 、瘤瘤 (B、瘤)
1.B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合会有几种融合方式?
2.制备单克隆抗体时,不直接用经过免疫的B淋巴细胞(浆细胞)获得单克隆抗体的原因是什么?
浆细胞高度分化,不能增殖
3.单克隆抗体制备过程中用到的技术手段有哪些?
动物细胞培养、动物细胞融合
4.选择杂交瘤细胞的两步筛选的目的分别是什么?
第二步:获得能产生所需单一抗体的杂交瘤细胞。
第一步:获得杂交瘤细胞。
细胞 特点
骨髓瘤细胞 能无限增殖,但不能产生抗体。
效应B细胞 能产生单一抗体,但不能无限增殖。
杂交瘤细胞 能产生特殊的抗体,也能在组培条件下无限增殖。
单克隆抗体的优点:
特异性强、灵敏度高、可大量制备。
“生物导弹”=单克隆抗体 +药物
诊断试剂
治疗疾病
运载药物
优点:准确,高效,快速
二、单克隆抗体—应用
检
课堂检测
1.与植物体细胞杂交相比,动物细胞融合的原理及其特有的诱导因子分别是( )
A.细胞膜的流动性、离心
B.细胞膜的流动性、灭活的病毒
C细胞的全能性、电刺激
D,细胞的全能性、灭活的病毒
3.单克隆抗体与血清抗体相比,其优越之处在于( )
A.单克隆抗体可作为某些药物的载体
B.单克隆抗体可以在体外制备
C.单克隆抗体特异性强、灵敏度高,并可大量制备
D.单克隆抗体的制备过程简单,操作方便
B
C
展
成果展示
4.用动物细胞工程技术制备单克隆抗体,下列实验步骤错误的是( )
A.将抗原注人小鼠体内,获得能产生抗体的B淋巴细胞
B.用氯化钙作诱导剂,促使能产生抗体的B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞 融合
C.筛选杂交瘤细胞,并从中选出能产生所需抗体的细胞群,培养后提 取单克隆抗体
D.该杂交瘤细胞株的增殖方式和产物分别是有丝分裂和单克隆抗体
B
5.学习与测评P30
评
小结点评
如何检测新冠肺炎疑似患者?
用
迁移应用
B淋巴细胞
小鼠注射新冠病毒
骨髓瘤细胞
多种杂交细胞
筛选产生特异性抗体的杂交瘤细胞
从小鼠腹水或培养液中提取抗新冠肺炎的单克隆抗体
小鼠腹腔培养
体外培养
新冠肺炎单克隆抗体制备流程
用
迁移应用
上个月,多名新冠肺炎重症患者接受血浆抗体治疗效果显著的消息传出后,“血浆治疗”一时大热。
有人称其为抗疫“新希望”,也有人质疑血浆治疗存诸多风险,且来源是一大问题,只能算作一根“稻草”。
“不要只盯着血浆,血细胞也是个‘宝’!”2月15日,中国工程院院士、治疗型疫苗国家工程实验室主任闻玉梅在接受《中国科学报》独家专访时表示,利用最新技术,将恢复期病人产生的特异性抗体的记忆B细胞制备成单克隆抗体,不仅不愁“数量”,安全性也相对更高。
闻玉梅还表示,做单克隆抗体也很快,“我们一个半月左右就能做出来”。
安全、快速、量产,单克隆抗体会比血浆治疗更高效吗?
闻玉梅院士详解“单克隆抗体”新思路
用
迁移应用
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