第41讲 动物细胞工程、胚胎工程（复习课件）（安徽专用）2026年高考生物一轮复习讲练测

安徽专用 第41讲 动物细胞工程、 胚胎工程 2026年高考一轮复习 1 01 考情解码·考点定标 智能导览·极速定位 02 体系构建·思维领航 03 考点突破·考向探究 04 真题感知·命题洞见 05 学以致用·能力提升 长句作答类 情境分析类 易错易混类 考点一　动物细胞培养 知识点1 动物细胞培养 知识点2 干细胞培养及其应用 考向1 动物细胞培养 考向2 干细胞的培养及应用 考点二　动物细胞融合技术与单克隆抗体 知识点1 动物细胞融合技术 知识点2 单克隆抗体及其应用 考向1 单克隆抗体的制备 考点三　动物体细胞核移植技术和克隆动物 知识点1 动物细胞核移植技术 知识点2 体细胞核移植技术的应用前景及存在的问题 考向1 动物体细胞核移植过程和克隆动物 考点四　胚胎工程的理论基础 知识点1 胚胎工程 知识点2 受精 知识点3 胚胎早期发育 考向1 胚胎工程的理论 考点五　胚胎工程及其应用 知识点1 体外受精 知识点2 胚胎移植 知识点3 胚胎分割 考向1 胚胎工程及其应用 01 考情解码·考点定标 考情解码·考点定标 考点要求 考查形式 考查频率 1.动物细胞培养 选择题 非选择题 2025.广东.T5 2025.湖北.T6 2024·浙江1月.T13 2024·黑吉辽蒙.T14 2024·重庆.T8 2.动物细胞融合技术与单克隆抗体 选择题 非选择题 2025.湖南.T21 2025.黑吉辽蒙.T19 2025.甘肃.T16 2025.安徽.T14 2024·江西.T16 2023·辽宁.T7 2023·北京.T12 3.动物体细胞核移植技术 选择题 非选择题 2025.山东.T14 2025.重庆.T4 2025.山东.T14 2024·北京.T11 2024·重庆.T10 2024·江苏.T17 2023·天津.T7 2023·海南.T7 4.胚胎工程 选择题 非选择题 2025·云南卷，14；2025·重庆卷，4；2024·湖北卷，102025·陕晋青宁卷，7；2024·贵州卷，13；2024·甘肃卷，16；2024·湖北卷，5 4 考情解码·考点定标 考情分析 1.从命题题型与内容上看：安徽高考的考查频率中等，高考对本部分的考查常以生产或科研实践为情境，也可以图为载体，主要考查动物细胞培养、动植物细胞融合的异同、单克隆抗体的制备等，既有选择题，也有非选择题。 2．从命题思路上看 ：常考点： 动物细胞培养的基本条件（无菌、营养、温度pH、气体环境）、单克隆抗体的制备原理与流程。考查重点变化趋势：常以生产或科研实践为情境，考查对单克隆抗体等在疾病防治中应用的理解。 3.复习策略：精确掌握细胞贴壁、接触抑制、原代与传代培养、杂交瘤细胞等核心概念，清晰区分植物与动物细胞工程的关键差异；重点掌握单克隆抗体制备的完整流程，深刻理解每一步的目的（如为何要进行两次筛选）及其生物学原理；通过真实科研或医学案例进行训练，提升运用技术原理分析和解决实际问题的能力。 复习目标 1.阐明动物细胞培养是从动物体获得相关组织，分散成单个细胞后，在适宜的培养条件下让细胞生长和增殖的过程。动物细胞培养是动物细胞工程的基础； 2.阐明动物细胞核移植一般是将体细胞核移入一个去核的卵母细胞中，并使重组细胞发育成新胚胎，继而发育成动物个体的过程； 3.阐明动物细胞融合是指通过物理、化学或生物学等手段，使两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程，概述细胞融合技术是单克隆抗体制备的重要技术，简述干细胞在生物医学工程中有广泛的应用价值。 5 02 体系构建·思维领航 体系构建·思维领航 动物细胞培养 动物细胞培养的概念和原理 动物细胞培养的条件 原理：细胞的增殖 在适当的培养条件下，让这些细胞生长和增殖的技术 (1)营养条件 (2)无菌、无毒的环境 (3)温度、pH和渗透压 (4)气体环境 干细胞培养及其应用 干细胞的分布 干细胞的类型 干细胞的应用 胚胎干细胞（ ES细胞） 成体干细胞 早期胚胎、骨髓和脐带血等多种组织和器官中 主要应用在医学上 动物细胞融合技术 细胞膜具有流动性 物理法、化学法、生物法 原理： 方法： 体系构建·思维领航 受精 精子获能 受精前的准备 卵子准备 MⅡ期具备受精能力 雌性动物的生殖道或培养到获能液(肝素或Ca2+载体)中 精子穿过卵细胞外结构 精子接触卵细胞膜 精子入卵称为雄原核；卵子释放第二极体，形成雌原核 雌雄原核靠近 核膜消失 桑葚胚 受精卵 每个细胞能发育成组成个体的任何细胞类型及胚外组织 囊胚 原肠胚 卵裂 细胞在透明带内分裂，胚胎总体积并不增加 孵化 内细胞团 滋养层 组成个体的各种组织细胞 胎盘、胎膜等胚外组织细胞 外胚层内胚层中胚层 03 考点突破·考向探究 知识点1  动物细胞培养的概念 知识夯基 考向研析 考点一 动物细胞培养 指从动物体中取出相关的组织，将它分散成单个细胞，然后在适宜条件下，让这些细胞生长和增殖的技术。 （1）概念： 营养： 无菌、无毒的环境： 温度、pH和渗透压： 气体环境： 原理： 方法：胰蛋白酶 加血清的液体培养液 培养液和培养用具灭菌；定其更换培养液 95%空气和5%CO2（维持培养液pH） 36.5±0.5℃、 7.2-7.4 考点一 动物细胞培养技术 取动物组织 用机械法或用胰蛋白酶、胶原蛋白酶等处理 加培养液 细胞悬液 在培养皿或培养瓶内，放入CO2培养箱 原代培养 悬浮生长 贴壁生长 细胞密度过大、有害代谢物积累、营养物质缺乏等 出现接触抑制 细胞分裂受阻 解决方法 传代培养 分瓶培养 ②制成细胞悬液，分瓶培养 ①收集细胞 悬浮培养的细胞：直接用离心法收集 贴壁细胞：用胰蛋白酶处理分散成单个细胞，用离心法收集 ①原代培养：指动物组织经处理后的初次培养。 ②细胞贴壁：某些细胞需要贴附于某些基质表面才能增殖，这类细胞往往贴附在培养瓶的瓶壁上。 ③接触抑制：当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时，细胞停止分裂增殖的现象。 ④传代培养：分瓶后的细胞培养。 使细胞与培养液充分接触；保证细胞所需氧气和营养的供应;保证细胞内代谢物及时排出。 知识点1  动物细胞培养的概念 知识夯基 考向研析 考点一 动物细胞培养 细胞贴壁和接触抑制 ①细胞贴壁：某些细胞需要贴附于某些基质表面才能增殖，这类细胞往往贴附在培养瓶的瓶壁上。 ②接触抑制：当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时，细胞就会停止分裂增殖，这种现象称为接触抑制。 正常细胞 平面观 肿瘤细胞 失去接触抑制 但肿瘤细胞失去接触抑制，在培养液可以无限增殖下去。 考点一 动物细胞培养技术 知识点1  动物细胞培养的概念 知识夯基 考向研析 考点一 动物细胞培养 原代培养 传代培养 少数形成细胞株 少数形成细胞系 遗传物质改变 遗传物质有的改变 多数细胞固定在表面生长和分裂 随细胞增多，细胞就会停止分裂增殖 细胞悬浮液 10代细胞 50代细胞 无限传代 培养危机： 危机1 危机2 遗传物质上来讲： 传代培养过程中部分细胞可能发生细胞转化 （即遗传物质改变） 绝大部分细胞凋亡 考点一 动物细胞培养技术 知识点1  动物细胞培养的概念 知识夯基 考向研析 考点一 动物细胞培养 （1）将组织分散成单个细胞的原因: ①成块组织中细胞与细胞靠在一起，彼此限制了生长与增殖。 ②利于与培养液充分接触，保证O2与营养供应和代谢物及时排出。 （2）常用胰蛋白酶分散细胞，这说明细胞间的物质主要是什么成分？ 用胃蛋白酶行吗？为使细胞分散，处理时间越久越好吗？ 多数动物细胞培养的适宜pH为7.2~7.4。 细胞间: 主要是蛋白质。 胃蛋白酶作用的适宜pH约为2； 胃蛋白酶在此环境中没有活性，所以用胃蛋白酶不行。 因为细胞膜的成分中含有蛋白质，而胰蛋白酶能够水解蛋白质 因此，胰蛋白酶处理的时间不能太长。 考点一 动物细胞培养技术 知识点1  动物细胞培养的概念 知识夯基 考向研析 考点一 动物细胞培养 知识点1  动物细胞培养的概念 知识夯基 考向研析 考点一 动物细胞培养 （3）在用胰蛋白酶处理组织时应注意什么？ 细胞膜含有蛋白质，长时间处理会损伤细胞，要控制好时间。 （4）用胰蛋白酶处理了几次？目的一样吗？ 第一次处理的目的是使组织细胞分散开。 第二次处理的目的是使细胞从瓶壁上脱离下来，便于分瓶后继续培养。 （5）动物细胞培养能否像绿色植物组织培养那样最终培养成新个体？ 不能，动物细胞培养只能使细胞数目增多，不能发育成新的动物个体。 （遗传物质没改变） 原代 保持细胞正常二倍体核型 部分细胞核型改变 传代 遗传物质改变突破细胞寿限 （遗传物质有的改变） 原代培养和传代培养的辨析 考点一 动物细胞培养技术 知识点1  动物细胞培养的概念 知识夯基 考向研析 考点一 动物细胞培养 比较项目 植物组织培养 动物细胞培养 取材 培养前处理 培养基的成分 特殊环境条件 结果 应用 离体植物器官、组织、细胞 比较：植物组织培养和动物细胞培养 动物胚胎或幼龄动物的组织、器官 无菌、离体 用机械法或胰蛋白酶、胶原蛋白酶将组织细胞分散开 有机营养成分 无机营养成分 植物激素 糖类、氨基酸、无机盐、维生素等营养物质及一些天然成分如血清 再分化需光 气体环境 新的植株 许多细胞 快速繁殖、作物脱毒、细胞产物的工厂化生产和单倍体育种 人造皮肤的构建、动物分泌蛋白的规模化生产 考点一 动物细胞培养技术 知识点1  动物细胞培养的概念 知识夯基 考向研析 考点一 动物细胞培养 比较项目 植物组织培养 动物细胞培养 原理 培养基的物理性质 培养基特有成分 过程 相同点 固体培养基 葡萄糖、动物血清 液体培养基(又称培养液) 细胞增殖 植物细胞的全能性 蔗糖、植物激素 ①都进行有丝分裂，不涉及减数分裂 ②均需无菌操作，需要适宜的温度、pH和渗透压等条件 外植体 ↓脱分化 愈伤组织 　 ↓再分化 芽、根或胚状体 ↓生长发育 植物体 动物的组织 　　　　　 ↓ 机械法或胰蛋白酶、 ↓ 胶原蛋白酶处理 细胞悬液 ↓ 原代培养 ↓ 细胞悬液 ↓ 传代培养 比较：植物组织培养和动物细胞培养 考点一 动物细胞培养技术 知识点1  动物细胞培养的概念 知识夯基 考向研析 考点一 动物细胞培养 知识点2  干细胞培养及其应用 知识夯基 考向研析 考点一 动物细胞培养 1.干细胞的概念： 动物和人体内仍保留的少数具有分裂和分化能力的细胞，在一定条件下，干细胞可以分化成其他类型的细胞。 2.干细胞的分布： 干细胞存在于____________、________和___________等多种组织和器官中。 早期胚胎 骨髓 脐带血 3.干细胞的应用： 有着自我更新能力及分化潜能的干细胞，与组织、器官的发 育、再生和修复等密切相关。 知识点2  干细胞培养及其应用 知识夯基 考向研析 考点一 动物细胞培养 取成纤维细胞 转入相关因子 细胞转化为iPS细胞 诱导iPS细胞定向分化为多种组织细胞 移植回病人体内 移植 取成纤维细胞等 iPS细胞 转入相关因子 细胞发生转化 分化 胰岛细胞 神经元 血细胞 肠上皮细胞 心肌细胞 肝细胞 病人 iPS细胞用于治疗人类疾病示意图 4.干细胞的应用: 知识点2  干细胞培养及其应用 知识夯基 考向研析 考点一 动物细胞培养 干细胞的分类： 种类 胚胎干细胞（ES细胞） 成体干细胞 诱导多能干细胞（iPS细胞） 来源 特点 应用 局限性 能分化为成年动物体内任何一种类型的细胞，并进一步形成有机体的组织和器官甚至个体，体积小、 细胞核大、核仁明显 分化成特定的细胞或组织，不具有发育成完整个体的能力 体外分化成心肌细胞、神经元和造血干细胞等 造血干细胞用于治疗白血病，神经干细胞用于治疗帕金森病、阿尔兹海默症等，干细胞将在再生医学、药物安全性与有效性检测等领域发挥大作用。 是一种类似胚胎干细胞的细胞，可定向分化为多种组织细胞，无须破坏胚胎，可以来源于病人自身的体细胞，将它移植回病人体内后，且避免免疫排斥反应。 治疗小鼠的镰状细胞贫血、阿尔兹海默症、心血管疾病等 需从胚胎中获取，涉及伦理问题，限制了它在医学上的应用 不具有发育成完整个体的能力，存在导致肿瘤发生的风险 技术不成熟。 成体组织或器官，如造血干细胞、神经干细胞和精原干细胞等 早期胚胎 ①将特定基因或特定蛋白导入细胞②用小分子化合物诱导形成。 ③体细胞（如成纤维细胞等） 知识点2  干细胞培养及其应用 知识夯基 考向研析 考点一 动物细胞培养 拓展 ①胚胎干细胞为什么可以解决供体器官不足和器官移植后免疫排斥的问题？其应用有什么限制因素？ 通过胚胎干细胞体外诱导分化，可以培育出人造组织器官，从而解决供体器官不足问题，另一方面，由于是自身细胞经诱导分化形成的，所以无免疫排斥反应。胚胎干细胞必须从胚胎中获取，这涉及伦理问题，因而限制了应用。 ②为什么科学家认为iPS细胞的应用前景优于胚胎干细胞？ iPS细胞的诱导过程无需破坏胚胎，而且iPS细胞可以来源于病人自身的体细胞，将它移植回病人体内后，理论上可以避免免疫排斥反应。 ③科学家已尝试采用多种方法来制备iPS细胞，尝试说出几种获取iPS细胞的方法。 借助载体将特定基因导入细胞中，直接将特定蛋白导入细胞中或者用小分子化合物等来诱导形成iPS细胞。iPS细胞最初是由成纤维细胞转化而来的，后来发现已分化的T细胞、B细胞等也能被诱导为iPS细胞。 知识点2  干细胞培养及其应用 知识夯基 考向研析 考点一 动物细胞培养 成纤维细胞 T细胞和B细胞 导入特定基因 导入特定蛋白 小分子化合物诱导 iPS细胞 治疗阿尔茨海默症 治疗心血管疾病 二.干细胞培养及其应用 再生医学： 运用克隆技术获得患者“自身” 的胚胎干细胞，然后在合适的条件下，定向分化成患者所需的各种细胞类型，如胰岛细胞可用于移植和糖尿病的治疗。如图示过程。 胚胎干细胞的培养：将治疗性克隆技术与人胚胎干细胞的制备相结合，利用体外构建的自身组织与器官来使患者得以康复。 知识点2  干细胞培养及其应用 知识夯基 考向研析 考点一 动物细胞培养 1.对某种动物的肝肿瘤细胞进行细胞培养，下列说法错误的是（ ） A.在利用肝组织块制备细胞悬液时，可用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理 B.动物细胞培养应在含5%CO2的CO2培养箱中进行，CO2的作用维持培养 液的pH C.为了防止动物细胞培养过程中受污染，可向培养液中加入适量的干扰素 D.在合成培养基中，通常需加入血清等一些天然成分 为防止动物细胞培养过程中杂菌的污染，可向培养液中加入适量的抗生素 B 知识夯基 考向研析 考向1   动物细胞培养 考点一 动物细胞培养 2. (2024·黑吉辽卷，14)从小鼠胚胎中分离获取胚胎成纤维细胞进行贴壁培养，在传 代后的不同时间点检测细胞数目，结果如下图。下列叙述正确的是(　　) A.传代培养时，培养皿需密封防止污染 B.选取①的细胞进行传代培养比②更合理 C.直接用离心法收集细胞进行传代培养 D.细胞增长进入平台期可能与细胞密度过大有关 D 对于贴壁生长的细胞进行传代培养时，先需要用胰蛋白酶等处理 选取②的细胞比①细胞进行传代培养更合理 置于含有95%空气＋5%CO2的气体环境，而非密封 知识夯基 考向研析 考向1   动物细胞培养 考点一 动物细胞培养 解析　传代培养时通常采用培养皿或松盖培养瓶，并置于含有95%空气＋5%CO2的气体环境，而非密封，A错误； 当贴壁生长的细胞分裂到表面相接触时，细胞通常会停止分裂，此时需对细胞进行分瓶培养，让细胞继续增殖，选取②的细胞比①细胞进行传代培养更合理，B错误； 对于贴壁生长的细胞进行传代培养时，先需要用胰蛋白酶等处理，使之分散为单个细胞，然后再用离心法收集，C错误。 26 3.(2024·浙江1月选考，13)某动物细胞培养过程中，细胞贴壁生长至接触抑制时，需分装培养，实验操作过程如图。 B 下列叙述错误的是(　　) A.①加消化液的目的是使细胞与瓶壁分离 B.②加培养液的目的是促进细胞增殖 C.③分装时需调整到合适的细胞密度 D.整个过程需要在无菌、无毒条件下进行 故②加培养液的目的是更方便地制造细胞悬液 知识夯基 考向研析 考向1   动物细胞培养 考点一 动物细胞培养 解析　因为动物细胞培养过程中，会贴壁生长，所以加消化液的目的是使细胞和瓶壁分离，A正确； ②加完培养液以后，要制备细胞悬液，故②加培养液的目的是更方便地制造细胞悬液，B错误； ③分装时要调整到合适的细胞密度，便于后续的细胞培养，C正确； 动物细胞培养需要在无菌、无毒条件下进行，D正确。 4.某学术期刊发表论文称，利用人类多能干细胞培养的皮肤类器官在培养4～5个月后，形成了多层皮肤组织，包含毛囊、皮脂腺和神经元回路，是迄今最逼真的人皮肤类器官。下列相关叙述正确的是( ) A.多能干细胞形成多层皮肤组织的过程中，遗传物质通常会发生改变 B.多能干细胞培养形成多层皮肤组织，说明动物的体细胞具有全能性 C.给烧伤病人移植自身多能干细胞培养成的皮肤类器官可减弱免疫排斥反应 D.该项研究结果表明多能干细胞可以分化成为人体内所需的各种组织和器官 遗传物质并未发生改变，只是基因的选择性表达 未分化成各种细胞或发育成完整个体，不能体现动物体细胞的全能性 研究结果表明，多能干细胞能形成多层皮肤组织，包含毛囊、皮脂腺和神经元回路，但不能说明其能分化成各种组织和器官 知识夯基 考向研析 考向2   干细胞的培养及应用 考点一 动物细胞培养 C 5.(2023·江苏卷)我国科学家利用人的体细胞制备多能干细胞，再用小分子TH34成功诱导衍生成胰岛B细胞。下列相关叙述错误的是(　　) A.基因选择性表达被诱导改变后，可使体细胞去分化成多能干细胞 B.在小分子TH34诱导下，多能干细胞发生基因突变，获得胰岛素基因 C.衍生的胰岛B细胞在葡萄糖的诱导下能表达胰岛素，才可用于移植治疗糖 尿病 D.若衍生的胰岛B细胞中凋亡基因能正常表达，细胞会发生程序性死亡 B 不会突然发生基因突变获得胰岛素基因 知识夯基 考向研析 考向2   干细胞的培养及应用 考点一 动物细胞培养 6.(2023·海南卷，7)某团队通过多代细胞培养，将小鼠胚胎干细胞的Y染色体去除，获得XO胚胎干细胞，再经过一系列处理，使之转变为有功能的卵母细胞。下列有关叙述错误的是(　　) A.营养供应充足时，传代培养的胚胎干细胞不会发生接触抑制 B.获得XO胚胎干细胞的过程发生了染色体数目变异 C.XO胚胎干细胞转变为有功能的卵母细胞的过程发生了细胞分化 D.若某濒危哺乳动物仅存在雄性个体，可用该法获得有功能的卵母细胞用于繁育 A 传代培养的胚胎干细胞增殖到贴满瓶壁时会发生接触抑制 知识夯基 考向研析 考向2   干细胞的培养及应用 考点一 动物细胞培养 解析　传代培养的胚胎干细胞增殖到贴满瓶壁时会发生接触抑制，A错误； 据题干“将小鼠胚胎干细胞的Y染色体去除，获得XO胚胎干细胞”可知，该过程中发生了染色体数目变异，B正确； XO胚胎干细胞转变为有功能的卵母细胞过程中，细胞的形态、结构和生理功能发生了变化，即发生了细胞分化，C正确； 若某濒危哺乳动物仅存雄性个体，可以通过去除胚胎干细胞的Y染色体等一系列处理获得有功能的卵母细胞，用于繁殖后代，D正确。 7.我国科学家使用小分子化合物处理小鼠体细胞，成功获得诱导多能干细胞(iPS细胞)，降低了通过导入原癌基因c－Myc等基因制备iPS细胞的潜在成瘤风险。下列叙述正确的是( ) A.iPS细胞的潜在成瘤风险来自c－Myc基因抑制了细胞的分裂分化 B.单基因遗传病患者使用iPS细胞治疗后，体内不再携带致病基因 C.人工制备的iPS细胞同时具备多向分化潜能和自我更新能力 D.使用非亲缘iPS细胞能解决干细胞移植中HLA造成的免疫排斥 C 单基因遗传病患者使用iPS细胞治疗后，只是利用了iPS细胞分化出正常细胞来替代病变细胞，但体内依旧携带致病基因 c－Myc等原癌基因会促进细胞的分裂、分化 非亲缘iPS细胞的HLA不同，使用非亲缘iPS细胞不能解决干细胞移植中HLA造成的免疫排斥 知识夯基 考向研析 考向2   干细胞的培养及应用 考点一 动物细胞培养 知识点1  动物细胞融合技术 知识夯基 考向研析 考点二 动物细胞融合技术与单克隆抗体 动物细胞融合 动物细胞培养 AA、AB、BB 1.概念： 使两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的技术。 2.结果： 形成的 具有原来两个或多个细胞的 。 3.原理： 4.诱导融合方法： 杂交细胞 遗传信息 细胞膜具有一定的流动性 物理法：离心法、电融合法 化学法：聚乙二醇（PEG)融合法 生物法：灭活病毒诱导法 与植物原生质体融合的方法相同 ——动物细胞融合特有 知识点1  动物细胞融合技术 知识夯基 考向研析 考点二 动物细胞融合技术与单克隆抗体 生物方法：灭活病毒诱导法 灭活：是指用物理或化学手段使病毒或细菌失去感染能力，但并不破坏它们的抗原结构。 原理：病毒表面含有的糖蛋白和一些酶能够与细胞膜上的糖蛋白发生作用，使细胞相互凝集，细胞膜上的蛋白质分子和脂质分子重新排布，细胞膜打开，细胞发生融合。 灭活的病毒颗粒黏附于细胞表面 ↓ 细胞膜被病毒颗粒穿通 ↓ 细胞膜连接 ↓ 细胞核融合，形成杂交细胞 知识点1  动物细胞融合技术 知识夯基 考向研析 考点二 动物细胞融合技术与单克隆抗体 动物细胞融合 动物细胞培养 6.意义： 突破了 的局限， 使 成为可能。 有性杂交 远缘杂交 5.动物细胞融合的过程： 细胞膜融合 细胞核融合 细胞质融合 细胞融合的实质（标志） 7.应用： 成为研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和培育生物新品种等的重要手段，为制造单克隆抗体开辟了新途径。 知识点1  动物细胞融合技术 知识夯基 考向研析 考点二 动物细胞融合技术与单克隆抗体 ①受精作用：是在同种生物之间进行的，精子与卵细胞的融合不需要任何诱导剂，受精卵内具备同种生物的两个亲本的遗传物质。 ②动物细胞融合：可在不同物种间进行，由于物种间存在生殖隔离，所以自然条件下不能融合成杂交细胞，必须有诱导剂才能融合。形成的杂交细胞具备两个亲本细胞的遗传物质，从而体现两个亲本的遗传特性。 动物细胞融合与受精作用的区别 知识点1  动物细胞融合技术 知识夯基 考向研析 考点二 动物细胞融合技术与单克隆抗体 植物体细胞杂交 动物细胞融合 原理 处理的细胞 融合前的处理方法 诱导融合方法 结果 融合成功标志 意义 应用 细胞膜具有一定的流动性、植物细胞的全能性 细胞膜具有一定的流动性 用果胶酶和纤维素酶去除细胞壁 用胰蛋白酶或胶原蛋白酶使细胞分散成单个细胞 电融合法、离心法；聚乙二醇（PEG）融合法、高Ca2+-高pH融合法 PEG融合法、电融合法、灭活病毒诱导法 再生出细胞壁 细胞核的融合 获得完整的杂种植株（白菜-甘蓝等新作物） 制造单克隆抗体等 打破生殖隔离，实现远缘杂交育种，培育植物新品种 突破了有性杂交的局限，使远缘杂交成为可能 杂种植株 杂交细胞 不同来源的植物体细胞 可同一个体甚至同一类型的细胞 比较植物体细胞杂交与动物细胞融合技术 血清 （抗体主要分布部位） 传统抗体制备方法: 向动物体内反复注射某种抗原，使动物产生抗体，然后从动物血清中分离所需抗体。 缺陷： 产量低、纯度低，特异性差。 血清含量有限 知识点2  单克隆抗体及其应用 知识夯基 考向研析 考点二 动物细胞融合技术与单克隆抗体 知识点2  单克隆抗体及其应用 知识夯基 考向研析 考点二 动物细胞融合技术与单克隆抗体 Q.大量制备单一抗体的思路 遗憾的是，在体外培养条件下，一个B淋巴细胞是不可能无限增殖的 每一个B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体 B淋巴细胞群 克隆 单一B淋巴细胞 选择 大量纯度高特异性强的抗体 产生 骨髓瘤细胞能在体外大量增殖 Q.有什么办法能得到既能迅速大量增殖又能产生大量特定抗体的细胞呢？ （但不能产生抗体） 单 克 隆 抗 体 米尔斯坦 【英国】 科勒 【德国】 知识点2  单克隆抗体及其应用 知识夯基 考向研析 考点二 动物细胞融合技术与单克隆抗体 2、单克隆抗体制备 （1）基本原理 动物细胞融合 杂交细胞 动物细胞培养 单克隆抗体 骨髓瘤细胞 （能无限增殖） 一种B淋巴细胞（只分泌一种特异性抗体） 杂交瘤细胞 既能迅速大量增殖，又能产生专一抗体 单克隆抗体技术手段： 动物细胞融合、动物细胞培养 细胞膜的流动性、细胞增殖 原理： 优点： 特异性强、灵敏度高、可大量制备 知识点2  单克隆抗体及其应用 知识夯基 考向研析 考点二 动物细胞融合技术与单克隆抗体 2、单克隆抗体制备过程 不是为了得到抗体 BB 、B瘤 、瘤瘤 知识点2  单克隆抗体及其应用 知识夯基 考向研析 考点二 动物细胞融合技术与单克隆抗体 2、单克隆抗体制备过程 特定抗原 多种B淋巴细胞 骨髓瘤细胞 诱导 融合 多种融合细胞 选择培养基进行筛选 杂交瘤细胞 抗体检测 分泌所需抗体的杂交瘤细胞 体外培养 注射小鼠腹腔内增殖 克隆化培养 多次筛选 单克隆抗体 获取 注射 小鼠 培养骨髓瘤细胞 未融合细胞 (第一次筛选) (第二次筛选) 从血清中分离 多克隆抗体 知识点2  单克隆抗体及其应用 知识夯基 考向研析 考点二 动物细胞融合技术与单克隆抗体 项目 腹腔培养 体外培养 优点 缺点 易于控制培养条件（如无需提供无菌环境等），操作简单，成本较低 规模小，产量少 可大规模培养，大量生产 需要人为控制培养条件，成本相对较高 相关技术和原理： 动物细胞融合、动物细胞培养、细胞膜的流动性、有丝分裂 一 对比体内培养和体外培养 知识点2  单克隆抗体及其应用 知识夯基 考向研析 考点二 动物细胞融合技术与单克隆抗体 一 拓展：第一次筛选获得杂交瘤细胞 知识点2  单克隆抗体及其应用 知识夯基 考向研析 考点二 动物细胞融合技术与单克隆抗体 ①细胞合成DNA有两条途径，正常细胞内两种途径都有，其中D（Dis)途径（全合成途径）能被氨基蝶呤阻断。若全合成途径被阻断，可以通过S（Salvage)途径（补救合成途径）合成DNA。 ②骨髓瘤细胞不能合成转化酶（次黄嘌呤-鸟嘌呤磷酸核苷转移酶，既HGPRT）和激酶（胸腺嘧啶核苷激酶，既TK），因此只能进行全合成途径。 ③全合成途径能被氨基喋呤（A）阻断。因为叶酸作为重要辅酶参与该途径） ④次黄嘌呤（H）、胸腺嘧啶核苷（T）是补救合成途径的原料。 ⑤无增殖能力的细胞在培养基中存活仅5-7天，细胞的多聚体也容易死去。 培养基中加入 氨基喋呤 ⑥人淋巴细胞中有这两种DNA的合成途径，但一般不分裂增殖，本身也不能在体外长期存活。 ⑦鼠骨髓瘤细胞中只有D途径（先小分子合成嘌呤、嘧啶，后合成核酸），没有S途径（直接利用外源核苷酸合成DNA），可是能不断分裂增殖。因为实验用的骨髓瘤细胞是经毒性培养基筛选的HGPRT缺陷型的细胞） 将诱导融合后的细胞接种于HAT培养基后两周，则细胞生存状况及原因为： B细胞和B-B细胞__________________________________________________ 骨髓瘤细胞和瘤-瘤细胞______________________________________________ 杂交瘤细胞________________________________________________________ 死亡，能进行补救合成途径，但是无增殖能力。 死亡，两种途径均无法进行，无法合成DNA，无法增殖。 存活，能进行补救合成途径，能合成DNA，可大量增殖。 一 拓展：第一次筛选获得杂交瘤细胞 知识点2  单克隆抗体及其应用 知识夯基 考向研析 考点二 动物细胞融合技术与单克隆抗体 抗体检测的方法——抗原-抗体杂交技术 在单克隆抗体制备过程中，两次筛选的目的和方法是不相同的。 将杂交瘤细胞群稀释，约每孔1个细胞进行培养（克隆化培养） 一段时间后，检测各孔上清液中细胞分泌的抗体 上清液可与特定抗原结合的培养孔为阳性孔 多孔细胞培养板 抗体检测板 分泌抗体能跟特定抗原结合的细胞即为所需杂交瘤细胞 阳性孔 知识点2  单克隆抗体及其应用 知识夯基 考向研析 考点二 动物细胞融合技术与单克隆抗体 项目 第一次筛选 第二次筛选（需要多次筛选） 筛选原因 方法 筛选结果 诱导融合后得到多种杂交细胞，还有未融合细胞等 用特定的选择培养基进行筛选：未融合的亲本细胞和融合的具有同种核的细胞都会死亡，只有融合的杂交细胞才能生长。 筛选出融合的杂交细胞 选择培养获得的杂交瘤细胞中有能产生其抗体的细胞。 用96孔板培养，在每个孔中尽量接种一个杂交瘤细胞的情况下进行克隆化培养和抗体检测，经过多次筛选得到足够数量的专一抗体检验呈阳性的细胞。无性生殖、抗原-抗体杂交。 筛选出分泌所需单一抗体的杂交瘤细胞 比较两次筛选 知识点2  单克隆抗体及其应用 知识夯基 考向研析 考点二 动物细胞融合技术与单克隆抗体 ①如何得到多种B淋巴细胞？ 注射特定的抗原蛋白，从而获得B淋巴细胞 。该细胞能产生特异性抗体 ②如何诱导融合？ 加入聚乙二醇（PEG）、灭活病毒 、电激等 ③细胞两两融合后，有哪些融合细胞类型？ B-B 、B-瘤(杂交瘤细胞) 、瘤-瘤 ④第二次筛选的杂交瘤细胞有什么特点？ 融合了两个亲本细胞的特征，既能迅速大量繁殖，又能产生专一抗体 ⑤融合后的细胞，在培养时通过什么方式进行繁殖?细胞中染色体数目与淋巴 细胞相比有何不同? 有丝分裂。融合后细胞内染色体数目加倍。 知识点2  单克隆抗体及其应用 知识夯基 考向研析 考点二 动物细胞融合技术与单克隆抗体 ⑥筛选过程中对细胞克隆培养时，在特定培养基上使每个孔一个细胞的目的是什么? 使每个孔内不多于一个细胞，达到单克隆培养的目的(或单一细胞培养以保证抗体的纯度)。 ⑦单克隆抗体制备过程中用到的技术手段有哪些？ 动物细胞培养、动物细胞融合 ⑧如何大规模培养杂交瘤细胞？如何提取？体外培养的条件？ 体内培养：注入小鼠腹腔内增殖 体外培养：细胞培养液 体外培养条件：葡萄糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、血清或血浆等天然成分 ⑨制备单克隆抗体时，不直接用经过免疫的B淋巴细胞(浆细胞)获得单克隆抗体的原因是什么? 浆细胞高度分化，不能增殖 知识点2  单克隆抗体及其应用 知识夯基 考向研析 考点二 动物细胞融合技术与单克隆抗体 应用： ①能准确地识别抗原的细微差异 （灵敏度高） ②与特定抗原发生特异性结合 （特异性强） ③可以大量制备 优点： 抗人绒毛促性腺激素单克隆抗体 新冠病毒抗原检测试剂盒 艾滋病检测试剂 诊断优点：具有准确、高效、简易、快速特点 知识点2  单克隆抗体及其应用 知识夯基 考向研析 考点二 动物细胞融合技术与单克隆抗体 一 ①作为诊断试剂 诊断疾病 ②运载药物 治疗疾病 ③作为药物治疗疾病 单克隆抗体+接头+药物（如细胞毒素）=ADC（抗体-药物偶联物） 高效 低毒 靶向 知识点2  单克隆抗体及其应用 知识夯基 考向研析 考点二 动物细胞融合技术与单克隆抗体 1.如图所示，将由2种不同的抗原分别制备的单克隆抗体分子，在体外解偶联 后重新偶联可制备双特异性抗体，简称双抗。下列说法错误的是( ) D A. 双抗可同时与2种抗原结合 B. 利用双抗可以将蛋白类药物运送至靶细胞 C. 筛选双抗时需使用制备单克隆抗体时所使用 的2种抗原 D. 同时注射2种抗原可刺激B细胞分化为产双抗 的浆细胞 一个B淋巴细胞只能分泌一种抗体 知识夯基 考向研析 考向1   单克隆抗体的制备 考点二 动物细胞融合技术与单克隆抗体 52 2.(2023·北京卷，12)甲状旁腺激素(PTH)水平是人类多种疾病的重要诊断指标。研究 者制备单克隆抗体用于快速检测PTH，有关制备过程的叙述错误的是(　　) A.需要使用动物细胞培养技术 B.需要制备用PTH免疫的小鼠 C.利用抗原—抗体结合的原理筛选杂交瘤细胞 D.筛选能分泌多种抗体的单个杂交瘤细胞 D 由于一种B淋巴细胞经分化形成浆细胞后通常只能产生一种抗体，故筛选出的单个杂交瘤细胞无法分泌多种抗体 知识夯基 考向研析 考向1   单克隆抗体的制备 考点二 动物细胞融合技术与单克隆抗体 解析　单克隆抗体制备过程中需要对骨髓瘤细胞等进行培养，即需要使用动物细胞培养技术，A正确； 该操作的目的是制备单克隆抗体用于快速检测PTH，故应用PTH刺激小鼠，使其产生相应的B细胞，B正确； 抗原与抗体的结合具有特异性，可利用抗原—抗体结合的原理筛选杂交瘤细胞，C正确； 由于一种B淋巴细胞经分化形成浆细胞后通常只能产生一种抗体，故筛选出的单个杂交瘤细胞无法分泌多种抗体，D错误。 3.(2023·辽宁卷，7)大量悬浮培养产流感病毒的单克隆细胞，可用于流感疫苗的生产。下列叙述错误的是(　　) A.悬浮培养单克隆细胞可有效避免接触抑制 B.用于培养单克隆细胞的培养基通常需加血清 C.当病毒达到一定数量时会影响细胞的增殖 D.培养基pH不会影响单克隆细胞的病毒产量 D 培养基pH会影响单克隆细胞的代谢，进而影响其病毒产量 知识夯基 考向研析 考向1   单克隆抗体的制备 考点二 动物细胞融合技术与单克隆抗体 解析　贴壁培养的细胞会发生接触抑制。悬浮培养是指通过振荡或转动装置使细胞始终处于分散悬浮于培养液内的培养方法，可有效避免接触抑制，A正确； 在体外培养动物细胞时，培养基中应含有细胞所需要的各种营养物质。将细胞所需的营养物质按种类和所需量严格配制而成的培养基，称为合成培养基。由于人们对细胞所需的营养物质尚未全部研究清楚，因此在使用合成培养基时，通常需要加入血清等一些天然成分，B正确； 病毒必须寄生在活细胞内，利用宿主细胞中的物质和能量才能完成自身的生命活动，当病毒达到一定数量时，细胞的生命活动会受到影响，进而会影响细胞的增殖，C正确； 单克隆细胞的正常生命活动需要适宜的pH，培养基pH会影响单克隆细胞的代谢，进而影响其病毒产量，D错误。 4.(2024·福建卷,1)我国科研团队研制出全球首个以尿液中的抗原为靶标的戊肝诊断试剂盒，该成果属于单克隆抗体在临床上的应用。下列叙述错误的是(　　) A.该试剂盒的研制过程应用了动物细胞融合技术 B.该试剂盒的检测原理为抗原抗体的特异性结合 C.该试剂盒检测前的采样不会对受检者造成创伤 D.该试剂盒还可用于其他类型病毒性肝炎的检测 D 单克隆抗体特异性强，不可用于其他类型病毒性肝炎的检测 知识夯基 考向研析 考向1   单克隆抗体的制备 考点二 动物细胞融合技术与单克隆抗体 5.(2024·海南卷，7)海南龙血树具有药用和观赏价值，可利用植物组织培养技术产生愈伤组织，进而获得该种植株。动物细胞融合技术可将骨髓瘤细胞和产生特定抗体的B淋巴细胞融合形成杂交瘤细胞，进而制备单克隆抗体。下列有关这两种技术的叙述，正确的是(　　) A.利用的原理均是细胞的全能性 B.使用的培养基均需添加葡萄糖和血清 C.培养时的温度和pH均相同 D.产生的愈伤组织细胞或杂交瘤细胞均具有增殖能力 D 细胞增殖和细胞膜具有流动性 蔗糖 均不相同 知识夯基 考向研析 考向1   单克隆抗体的制备 考点二 动物细胞融合技术与单克隆抗体 6.猪繁殖与呼吸综合征是一种严重威胁养猪业发展的传染病,由PRRSV病毒引起。我国科学家制备出PRRSV病毒GP3蛋白的单克隆抗体可对该病进行诊断和治疗,过程如下图所示。下列叙述不正确的是(　　) A.用纯化的GP3蛋白反复注射到小鼠体内,以获得相应的B淋巴细胞 B.过程①可以用PEG诱导融合,融合原理是细胞膜具有一定的流动性 C.用特定的选择培养基对细胞乙进行筛选,融合细胞都能正常生长 D.丙和丁只含杂交瘤细胞,第2次筛选前需对细胞丙进行克隆培养 淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合产生的杂交瘤细胞可以生长,其他细胞(未融合的和同种融合的细胞)不能生长 知识夯基 考向研析 考向1   单克隆抗体的制备 考点二 动物细胞融合技术与单克隆抗体 C 7.抗体—药物偶联物(ADC)通过采用特定技术将具有生物活性的小分子药物连接到能特异性识别肿瘤细胞的单克隆抗体上，实现对肿瘤细胞的选择性杀伤。ADC的结构及其发挥作用的机理如图所示，下列有关说法错误的是（ ） A.单克隆抗体制备过程中通常将免疫后得到的B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合 B.用96孔板培养和多次筛选杂交瘤细胞后，在体外大规模培养可获得单克隆抗体 C.ADC通过抗体与细胞膜上的受体特异性结合，以主动运输的方式进入肿瘤细胞 D.ADC在肿瘤细胞里被溶酶体裂解，释放药物，使肿瘤细胞死亡 ADC通过胞吞的方式进入肿瘤细胞，溶酶体使其裂解，释放药物，实现了对肿瘤细胞的选择性杀伤 知识夯基 考向研析 考向1   单克隆抗体的制备 考点二 动物细胞融合技术与单克隆抗体 C 知识点1  动物细胞核移植技术 知识夯基 考向研析 考点三 动物体细胞核移植技术和克隆动物 将动物一个细胞的________移入________________中，使这个______________发育成______，继而发育成_________的技术； 细胞核 去核的卵母细胞 重新组合的细胞 新胚胎 动物个体 用核移植的方法得到的动物称为克隆动物 1.概念: 动物体细胞核的全能性 ①胚胎细胞核移植：细胞分化程度低，恢复全能性容易 ②体细胞核移植：细胞分化程度高，恢复全能性十分困难 供体提供细胞核；受体（去核卵细胞）提供细胞质 2、原理： 3、种类： 4、供体与受体： 卵母细胞 动物细胞 去核 取核 移入 重组细胞 发育 新胚胎 发育 克隆动物 知识点1  动物细胞核移植技术 知识夯基 考向研析 考点三 动物体细胞核移植技术和克隆动物 非人灵长类动物体细胞核移植的困难原因： ① 供体细胞的细胞核在去核卵母细胞中不能完全恢复其分化前的功能状态，这导致了胚胎发育率低。 ② 对非人灵长类动物胚胎操作的技术尚不完善。 我国科学家经过多年努力，攻克了这些障碍，终于成功获得了体细胞克隆猴。 知识点1  动物细胞核移植技术 知识夯基 考向研析 考点三 动物体细胞核移植技术和克隆动物 采集卵母细胞，在体外培养到MⅡ期 从供体高产奶牛身上取体细胞 显微操作去核 对体细胞进行培养 去核的卵母细胞 供体细胞 电融合法 将供体细胞注入去核的卵母细胞 重构胚 早期胚胎 将胚胎移入受体（代孕）母牛体内 生出与供体奶牛遗传物质基本相同的犊牛 早期胚胎培养 动物细胞培养 胚胎移植 动物细胞融合 动物细胞核移植技术 细胞核移植 动物细胞培养 细胞融合 体细胞核移植用到的技术 早期胚胎培养 胚胎移植 激活重构胚使其完成 细胞分裂和发育过程 ①为何选用MⅡ期卵母细胞？ 卵母细胞体积大，易操作 含有激发和促使细胞核全能性表达的物质和营养条件。（如促成熟因子（MPF）其水平高低可影响供体染色体的状态和复制） 卵黄多，营养物质丰富。 正常排出的卵子即处于MⅡ期 ②一般选用传代10代以内的细胞，为什么？ 因为当传代至10-50代左右时，部分细胞核型可能会发生变化，而10代以内的细胞一般能保持正常的二倍体核型，保证了供体细胞正常的遗传基础。 知识点1  动物细胞核移植技术 知识夯基 考向研析 考点三 动物体细胞核移植技术和克隆动物 ③卵母细胞去核的原因是什么？ 为使核移植的胚胎或动物的遗传物质全部来自于有重要利用价值的动物提供的体细胞。并防止细胞染色体的数量发生变化。 ④卵母细胞去核的方法？ 显微操作去核法，也有人采用梯度离心、紫外线短时间照射和化学物质处理等方法。 优点：使DNA变性失活，达到去核的目的。没有刺破透明带或卵母细胞质膜，对卵母细胞伤害小。 ⑤注入卵母细胞中的是供体细胞还是细胞核？ 供体细胞，注入去核卵母细胞透明带 ⑥将供体细胞整个注入去核卵母细胞中的原因？ 对卵母细胞损伤较小，保证供体细胞的细胞核不被破坏，使克隆动物更像供体动物，操作方便。伴随着两细胞融合，体现出细胞膜具有一定的流动性的结构特点。 知识点1  动物细胞核移植技术 知识夯基 考向研析 考点三 动物体细胞核移植技术和克隆动物 去核时，由于MⅡ期卵母细胞核的位置靠近第一极体,故用微型吸管一般会将核和第一极体一并吸出 ⑦用物理或化学方法(如电刺激、Ca2+载体、乙醇、蛋白酶合成抑制剂等)激活重构胚胎，使其完成细胞分裂和发育进程。 ⑧新生个体的细胞质基因一部分来自去核卵母细胞，一般分来自供体细胞。 ⑨为了早期胚胎移植能成功，对受体（代孕）动物有何要求？ 移植到同种、生理状态相同的其他雌性动物子宫中。 ⑩动物体细胞核移植技术的原理是什么？ 该过程用到哪些技术手段？ 动物细胞核的全能性 动物细胞核移植、 动物细胞培养、 动物细胞融合、 早期胚胎培养、 胚胎移植。 ⑪克隆动物的遗传特点 克隆动物的亲本有三个，即体细胞核供体、卵母细胞细胞质供体和代孕母体。 细胞核基因来自体细胞核供体，因此，克隆动物的性状与体细胞核供体基本相同。 知识点1  动物细胞核移植技术 知识夯基 考向研析 考点三 动物体细胞核移植技术和克隆动物 ⑪克隆动物的遗传特点 细胞质基因来自卵母细胞，因此，克隆动物的性状与卵母细胞细胞质供体部分相同。 克隆动物的性状与代孕母体没有直接关系。 ⑫你认为用上述体细胞核移植技术培育的克隆动物，是对体细胞供体动物进行了100%的复制吗？为什么？ 克隆动物绝大部分DNA来自供体动物的细胞核，但线粒体中的DNA（细胞质中的DNA）同时来自供体细胞和受体卵母细胞。 性状是基因与环境共同作用的结果，克隆动物所处的环境与核供体细胞生活的环境不会完全相同。 克隆动物在个体发育过程中有可能发生基因突变、染色体变异等可遗传变异。 知识点1  动物细胞核移植技术 知识夯基 考向研析 考点三 动物体细胞核移植技术和克隆动物 ⑬卵母细胞“去核”，去掉的是什么 纺锤体-染色体复合物（由于MⅡ期卵母细胞核的位置靠近第一极体，用微型吸管一般一并吸出第一极体），“去核”是去除该复合物。 ⑭动物细胞核移植技术的实验结论是什么？ 证明了动物已分化的体细胞的细胞核具有全能性 ⑮结果：重新组合的细胞发育成新胚胎，继而发育成动物个体。 ⑯重构胚是指人工重新构建的胚胎，具有发育成完成个体的能力。 ⑰对比多莉羊和高产奶牛的克隆过程，找出操作过程的不同点？ 多莉克隆过程的受体细胞是去核卵细胞，而高产奶牛的克隆过程的受体细胞是去核次级卵母细胞。卵母细胞当中的细胞周期蛋白含量、活性比卵细胞高，用它作受体更容易成功。 多莉克隆过程是将供体细胞核注入受体细胞。高产奶牛的克隆过程是将供 体细胞注入受体细胞，使克隆动物更像供体动物，操作简便。 知识点1  动物细胞核移植技术 知识夯基 考向研析 考点三 动物体细胞核移植技术和克隆动物 治疗性克隆与iPS细胞治疗 病人 取核 去核卵母细胞 重构胚胎 各种细胞组织或器官 诱导 取出 体细胞 核移植 移植 成纤维细胞 取出 转入相关因子 iPS细胞 各种细胞组织或器官 胚胎干细胞 取出 诱导 移植 治疗性克隆 iPS细胞治疗 细胞发生转化 知识点1  动物细胞核移植技术 知识夯基 考向研析 考点三 动物体细胞核移植技术和克隆动物 知识点2  体细胞核移植技术的应用前景及存在的问题 知识夯基 考向研析 考点三 动物体细胞核移植技术和克隆动物 前景 畜牧业 加速家畜 进程、促进优良畜群繁育 医药卫生 ①作为 生产医用蛋白； ② 的细胞、组织或器官可以用于异种移植； ③人核移植 经过诱导分化形成相应的细胞、组织或器官，可用于器官移植 遗传改良 生物反应器 转基因克隆动物 胚胎干细胞 知识点2  体细胞核移植技术的应用前景及存在的问题 知识夯基 考向研析 考点三 动物体细胞核移植技术和克隆动物 前景 科学 研究 ①研究克隆动物可使人类更深入地了解 及衰老过程；②克隆一批遗传背景相同的动物，可以通过它们之间的对比来分析 ；③克隆特定疾病模型的动物，为研究 和开发相应的药物提供帮助 保护濒危物种 增加濒危物种的存活数量 问题 ①成功率 ；②绝大多数克隆动物存在 问题，表现出________________ 胚胎发育 致病基因 致病机制 非常低 健康 遗传和生理缺陷 1.某杂志报道，我国科学家以一只雌性猕猴胎儿成纤维细胞为核供体成功克隆两只猕猴，成为全球首例体细胞克隆灵长类动物。下列相关叙述错误的是（ ） A.这项技术证明高度分化的动物体细胞具有全能性 B.研究中需要使用成熟卵母细胞作为核移植的受体 C.培育出的两只雌性猕猴的基因组成几乎完全相同 D.克隆猕猴的成功为大量培育灵长类遗传病模型动物提供了可能 该过程经过了细胞核移植，只能说明分化的动物体细胞的细胞核具有全能性 知识夯基 考向研析 考向1   动物体细胞核移植过程和克隆动物 考点三 动物体细胞核移植技术和克隆动物 A 2.“中中”和“华华”是两只在我国出生的克隆猕猴，它们也是国际上首例利用体细胞克隆技术获得的非人灵长类动物。如图表示培育“中中”和“华华”的流程。下列相关叙述正确的是( ) A.图示过程中利用的技术有核移植和干细胞移植技术等 B.这两只克隆猕猴是由同一受精卵发育而成的双胞胎 C.融合细胞的培养过程需要无菌、无毒的环境和营养等条件 D.利用A猴的胚胎干细胞核移植获得克隆猕猴的难度要更大 图示过程包括核移植、动物细胞培养、胚胎移植等技术，没有干细胞移植技术 这两只克隆猕猴是通过体细胞核移植、胚胎移植产生的，没有用到受精卵 知识夯基 考向研析 考向1   动物体细胞核移植过程和克隆动物 考点三 动物体细胞核移植技术和克隆动物 C 3.如图是利用体细胞核移植技术克隆优质奶牛的简易流程图，有关叙述正确的是(　　) B A.后代丁的遗传性状由甲和丙的遗传物质共同决定 B.过程①需要提供95%空气和5%CO2的混合气体 C.过程②常使用显微操作去核法对受精卵进行处理 D.过程③将激活后的重组细胞培养至原肠胚后移植 由甲和乙的遗传物质共同决定 对卵母细胞进行处理 囊胚或桑葚胚后移植 知识夯基 考向研析 考向1   动物体细胞核移植过程和克隆动物 考点三 动物体细胞核移植技术和克隆动物 解析　后代丁的细胞核的遗传物质来自甲，细胞质的遗传物质来自乙，则丁的遗传性状由甲和乙的遗传物质共同决定，A错误； 动物细胞培养中需要提供95%空气(保证细胞的有氧呼吸)和5%CO2(维持培养液的pH)的混合气体，B正确； 过程②常使用显微操作去核法对卵母细胞进行处理，C错误； 过程③将激活后的重组细胞培养至囊胚或桑葚胚后移植，D错误。 4.如图为体细胞克隆猴“中中”和“华华”的培育流程，为建立动物模型、研究疾病机理带来光明前景。下列叙述错误的是( ) A.过程①将成纤维细胞 注射到去核的卵母细 胞中，说明细胞膜的 控制作用是相对的 B.卵子细胞质中含有促使成纤维细胞核全能性表达的物质 C.中中、华华的性别由成纤维细胞的遗传物质决定 D.“去核”去除的是纺锤体—染色体复合物 A 不能说明 知识夯基 考向研析 考向1   动物体细胞核移植过程和克隆动物 考点三 动物体细胞核移植技术和克隆动物 过程①将成纤维细胞注射到去核的卵母细胞中是在人为操作下进行的，不能说明细胞膜的控制作用是相对的，A错误。 A.后代丁的遗传性状由甲和丙的遗传物质共同决定 B.过程①需要提供95%空气和5%CO2的混合气体 C.过程②常使用显微操作去核法对受精卵进行处理 D.过程③将激活后的重组细胞培养至原肠胚后移植 5.如图是利用体细胞核移植技术克隆优质奶牛的简易流程图，有关叙述正确的是(　　) B 后代丁的细胞核的遗传物质来自甲，细胞质的遗传物质来自乙，则丁的遗传性状由甲和乙的遗传物质共同决定 过程②常使用显微操作去核法对卵母细胞进行处理 过程③将激活后的重组细胞培养至囊胚或桑葚胚后移植 知识夯基 考向研析 考向1   动物体细胞核移植过程和克隆动物 考点三 动物体细胞核移植技术和克隆动物 A.从该牛种耳上取的体细胞培养时需在合成培养基中加入血清 B.从牛卵巢中采集的卵母细胞需要在体外培养至MⅡ期 C.代孕母牛为重构胚发育提供空间和营养，不会影响犊牛的遗传物质 D.胚胎移植前需要对供体牛与受体牛进行同期发情处理 6.我国科学家利用体细胞核移植技术成功克隆了濒临灭绝的某地方牛种。下列叙述错误的是(　　) D 体细胞核移植技术中，通常不需要对供体进行同期发情处理 知识夯基 考向研析 考向1   动物体细胞核移植过程和克隆动物 考点三 动物体细胞核移植技术和克隆动物 7.(2023·天津卷，7)多种方法获得的早期胚胎，均需移植给受体才能获得后代。下图列举了几项技术成果。 D 下列叙述正确的是(　　) A.经胚胎移植产生的后代，其遗传特性与受体均保持一致 B.①过程需获得MⅡ期的去核卵母细胞 C.②能大幅改良动物性状 D.③可通过②技术实现扩大化生产，①②可通过③技术实现性状改良 受体只提供胚胎发育的场所 不去核的卵母细胞 无性生殖，不能大幅改良动物性状 知识夯基 考向研析 考向1   动物体细胞核移植过程和克隆动物 考点三 动物体细胞核移植技术和克隆动物 知识点1  胚胎工程 知识夯基 考向研析 考点四 胚胎工程的理论基础 指对 进行多种 ，然后将获得的胚胎 生产后代，以满足人类的各种需求。胚胎工程技术包括 等。 操作对象 技术手段 生殖细胞、受精卵或早期胚胎细胞 显微操作和处理 移植到雌性动物体内 体外受精、胚胎移植和胚胎分割 目的 体外受精、胚胎移植、胚胎分割等 操作对象： 技术手段： 生殖细胞、受精卵或早期胚胎细胞 工程实质： 在体外条件下，对动物自然受精和早期胚胎发育条件进行的模拟操作 理论基础： 哺乳动物体内受精和早期胚胎发育的规律 知识点2  受精 知识夯基 考向研析 考点四 胚胎工程的理论基础 定义 阶段 指精子和卵子结合形成合子(即受精卵)的过程。 受精前的准备阶段 受精阶段 场所 输卵管内 体现细胞膜的功能？体现细胞膜的结构特点？ 准备阶段Ⅰ——精子获能 准备阶段Ⅱ——卵子的准备 知识点2  受精 知识夯基 考向研析 考点四 胚胎工程的理论基础 透明带 卵细胞膜 核 (纺锤体—染色体复合物) 第一极体 在 使精子获能； 培养在 中使其获能； 雌性动物生殖道 人工配制的获能液 肝素、Ca2+载体 卵子要在 内进一步成熟，达到 时，才具备与精子受精的能力。 输卵管 减数第二次分裂中期 (1)准备阶段——精子获能 (2)准备阶段——卵子的准备 知识点2  受精 知识夯基 考向研析 考点四 胚胎工程的理论基础 步骤 主要过程 生理反应 第一步 精子释放多种酶溶解卵细胞膜外的一些结构(如透明带等)，接触卵细胞膜 透明带反应：阻止后来的精子进入透明带，是防止多精入卵受精的第一道屏障 第二步 精子入卵，尾部脱落 卵细胞膜反应：拒绝其他精子再进入卵内，是防止多精入卵受精的第二道屏障 第三步 精子核膜破裂后形成新核，卵子被激活完成减数分裂Ⅱ，排出第二极体 形成雄原核和雌原核（观察到两个极体）：受精的标志 第四步 雌、雄原核充分发育后，相向移动，彼此靠近，核膜消失 形成合子(受精卵)：个体发育的起点 知识点2  受精 知识夯基 考向研析 考点四 胚胎工程的理论基础 【教材隐性知识】源于选择性必修3 P56“相关信息”：精子获能方法 ①直接利用雌性动物的生殖道使精子获能； ②精子培养在人工配制的获能液中使其获能等。获能液的成分因动物种类不同而有所差异，常见的有效成分有__________等 肝素 Ca2＋载体 ①卵子的减数分裂Ⅱ、受精作用和受精卵的早期细胞分裂都是在雌性动物的输卵管中进行的。 ②卵子减数分裂Ⅱ 是在精子和卵子结合的过程中完成的。 ③受精过程体现的细胞膜的功能：信息交流功能；体现的细胞膜的结构特点：一定的流动性。 ④受精卵中的遗传物质不是一半来自精子一半来自卵细胞，染色体是一半来自精子一半来自卵细胞。 注意事项 受精完成的标志： 雌雄原核形成合子 受精的标志： 观察到两个极体或雌雄原核 知识点3  胚胎早期发育 知识夯基 考向研析 考点四 胚胎工程的理论基础 受精卵→桑葚胚 ①时期： ②场所： ③特点： 在透明带内 项目 变化 细胞数目 胚胎的总体积 每个细胞体积 DNA总量 每个细胞内的DNA总量 有机物总量 增加 减小 增多 不变 减少 不增加 受精卵 2细胞胚 4细胞胚 8细胞胚 桑葚胚 囊胚 原肠胚 卵裂期 细胞数量 胚胎总体积 不断增加 并不增加 （1）卵裂（期） 原肠胚 受精卵 2细胞 4细胞 8细胞 桑葚胚 囊胚 知识点3  胚胎早期发育 知识夯基 考向研析 考点四 胚胎工程的理论基础 受精卵 2细胞胚 4细胞胚 8细胞胚 桑葚胚 囊胚 原肠胚 桑葚胚 (2)特点 当卵裂产生的子细胞数目达到32个，逐渐形成致密的细胞团，形似桑葚时，这时的胚胎称为桑葚胚。 (1)概念 这一阶段及之前的每个细胞都具有发育成完整胚胎的潜能，属于全能细胞。 桑葚胚 桑葚 知识点3  胚胎早期发育 知识夯基 考向研析 考点四 胚胎工程的理论基础 囊胚 内细胞团 聚集在胚胎一端，将来发育成胎儿的各种组织。 囊胚腔 沿透明带内壁扩展和排列，将来发育成胎膜和胎盘 滋养层细胞 胚胎内部含有液体的腔。 内细胞团 囊胚腔 滋养层 透明带 孵化：囊胚进一步扩大会导致透明带破裂破裂，胚胎从其中伸展出来，这一过程叫做孵化。孵化非常重要，如果不能正常孵化，胚胎就无法继续发育。 内细胞团细胞具有全能性 受精卵 2细胞胚 4细胞胚 8细胞胚 桑葚胚 囊胚 原肠胚 知识点3  胚胎早期发育 知识夯基 考向研析 考点四 胚胎工程的理论基础 受精卵 2细胞胚 4细胞胚 8细胞胚 桑葚胚 囊胚 原肠胚 原肠胚 外胚层 表面的细胞层 内胚层 内外两个胚层之间 中胚层 向内迁移的细胞 逐渐分化形成各种组织、器官等。 ——出现胚层分化 滋养层 内胚层 外胚层 原肠腔 知识点3  胚胎早期发育 知识夯基 考向研析 考点四 胚胎工程的理论基础 受精卵 2细胞胚 4细胞胚 8细胞胚 桑葚胚 囊胚 原肠胚 原肠胚 知识点3  胚胎早期发育 知识夯基 考向研析 考点四 胚胎工程的理论基础 1.胚胎发育中的细胞分裂均为有丝分裂，原肠胚阶段是个体发育中分化限度最大的阶段，但细胞分化贯穿于生物体整个生命历程中。 2.桑葚胚及以前的细胞均未分化，细胞全能性高，是胚胎分割的最佳时期。 3.桑葚胚到囊胚的发育过程中，细胞开始分化，但其全能性仍很高，也可用于胚胎分割。 4.卵裂期和桑葚胚时期，只进行细胞分裂，不需要从外界获取营养物质，胚胎发育所需营养主要来自卵黄。 ②囊胚期细胞开始分化，透明带破裂，滋养层细胞（以后发育成胎盘、胎膜，与母体建立联系）从外界吸收营养物质，使胚胎继续发育。 易错提醒 1.如图表示人的受精卵在卵裂期过程中，DNA总量、每个细胞体积、所有细胞体积之和、细胞数量的变化趋势(横坐标为发育时间)。其中正确的是（ ） A.①② B.①③ C.②④ D.③④ 知识夯基 考向研析 考向1   胚胎工程的理论 考点四 胚胎工程的理论基础 C 2.下图表示精子入卵后，发生(或引起)的一系列变化形成受精卵的过程。下列叙述错误的是（ ） A.图中X指卵细胞膜反应，Y指 卵子的减数分裂Ⅱ B.经图中Y过程只形成了雌原核 C.精子入卵主要指精子的头部外膜与卵细胞膜融合 D.精子入卵后精子的尾部留在外面，并在溶酶体的作用下自溶 Y过程既形成了雌原核，又形成了第二极体 知识夯基 考向研析 考向1   胚胎工程的理论 考点四 胚胎工程的理论基础 B 3.下列有关早期胚胎发育的叙述，错误的是( ) A.卵裂期每个细胞的核质比逐渐增大，胚胎中DNA总量逐渐增加 B.孵化是指透明带破裂，桑葚胚从透明带中伸展出来 C.滋养层细胞将发育成胎膜和胎盘并可用于性别鉴定 D.在胚胎移植中，选择桑葚胚或囊胚期的胚胎进行移植较易成功 知识夯基 考向研析 考向1   胚胎工程的理论 考点四 胚胎工程的理论基础 B 孵化是指透明带破裂，囊胚从透明带中伸展出来的过程 4. (2022·江苏卷，4)下列关于动物细胞工程和胚胎工程的叙述正确的是(　　) A.通常采用培养法或化学诱导法使精子获得能量后进行体外受精 B.哺乳动物体外受精后的早期胚胎培养不需要额外提供营养物质 C.克隆牛技术涉及体细胞核移植、动物细胞培养、胚胎移植等过程 D.将小鼠桑葚胚分割成2等份获得同卵双胎的过程属于有性生殖 C 对于贴壁生长的细胞进行传代培养时，先需要用胰蛋白酶等处理 还需加入血清等天然成分 指获得受精“能力”而不是获取能量 知识夯基 考向研析 考向1   胚胎工程的理论 考点四 胚胎工程的理论基础 解析　对精子进行获能处理包括培养法和化学诱导法，但精子获能是指获得受精“能力”而不是获取能量，A错误； 哺乳动物体外受精后的早期胚胎培养所需营养物质与体内基本相同，例如需要无机盐、激素、氨基酸、核苷酸、维生素等，还需加入血清等天然成分，B错误； 克隆牛技术涉及体细胞核移植、动物细胞培养、胚胎移植等过程，C正确； 将小鼠桑葚胚分割成2等份获得同卵双胎的过程可以看作动物无性繁殖或克隆，D错误。 91 5.下列有关哺乳动物早期胚胎发育的叙述错误的是(　　) A.在桑葚胚阶段胚胎的内部开始出现含有液体的腔 B.胚胎干细胞是一类未分化的细胞，可以从早期胚胎中分离获得 C.桑葚胚之前细胞一般都具有全能性，囊胚的细胞逐渐分化 D.受精卵早期分裂时，胚胎中细胞数目不断增加，但胚胎的总体积并不增加 A 囊胚阶段 知识夯基 考向研析 考向1   胚胎工程的理论 考点四 胚胎工程的理论基础 解析　在囊胚阶段胚胎的内部出现了含有液体的腔，A错误； 胚胎干细胞是一类未分化的细胞，存在于早期胚胎中，B正确； 桑葚胚之前细胞一般都具有全能性，囊胚的细胞逐渐分化，C正确； 受精卵早期分裂时，胚胎中细胞数目不断增加，但胚胎的总体积并不增加，D正确。 6.下列有关牛体外受精的叙述错误的是( ) A.精子需经过获能步骤，才可用于体外受精 B.卵母细胞需培养至MⅡ期，与精子结合完成受精 C.体外受精需加入聚乙二醇等诱导精卵结合 D.精子入卵后卵细胞膜发生生理反应，阻止其他精子进入 C 聚乙二醇常用于细胞融合，而不是用于体外受精过程 知识夯基 考向研析 考向1   胚胎工程的理论 考点四 胚胎工程的理论基础 知识夯基 考向研析 考向1   体外受精 考点五 胚胎工程及其应用 卵母细胞 成熟培养 成熟卵母细胞 精子 获能处理 获能的精子 体外受精 受精卵 雌性哺乳动物 雄性哺乳动物 卵母细胞的采集 精子的采集 ①卵母细胞的采集和培养 ②精子的采集和获能 ③体外受精 MⅡ期 试管动物:是指通过人工操作使卵细胞在体外受精，培养发育为早期胚胎后，在进行移植生产的个体。 注意：试管动物≠克隆动物 知识夯基 考向研析 考向2   胚胎移植 考点五 胚胎工程及其应用 转基因、核移植和体外受精 同种的、生理状 态相同 遗传性状优良、生产能力强 健康的体质和正常 繁殖能力 产生具有优良遗传特性的胚胎 承担繁重而漫长的妊娠和育仔任务 胚胎移植的意义： 充分发挥雌性优良个体的 。 繁殖潜力 优良供体母牛 受体母牛 受体发情 同期发 情处理 超数排卵处理 发情配种 或人工受精 胚胎移植 收集胚胎并检查 对受体进行妊娠检查 具有优良性状的后代 优良公牛 冲卵 正常繁殖或两三个月后进行另一次移植 使用孕激素等，是供受体母牛生殖器官生理变化相同，为供体胚胎植入受体提供相同的生理环境 同期发情 处理 超数排卵处理 注射促性腺激素 超数排卵处理 发情配种 或人工受精 体外受精技术可提高动物繁殖能力，包括卵母细胞的采集、精子的获取、受精等步骤。 知识夯基 考向研析 考向2   胚胎移植 考点五 胚胎工程及其应用 96 优良供体母牛 受体母牛 受体发情 同期发 情处理 超数排卵处理 发情配种 或人工受精 胚胎移植 收集胚胎并检查 对受体进行妊娠检查 具有优良性状的后代 优良公牛 冲卵 正常繁殖或两三个月后进行另一次移植 同期发情 处理 超数排卵处理 收集胚胎的方式： 除体外受精得到的胚胎，还有核移植、基因工程、胚胎分割得到的胚胎。 收集胚胎并检查 胚胎早期培养： 受精卵（在输卵管内）进行有丝分裂，卵裂期细胞的数量不断增加，胚胎的总体积不变。 知识夯基 考向研析 考向2   胚胎移植 考点五 胚胎工程及其应用 97 知识夯基 考向研析 考向2   胚胎移植 考点五 胚胎工程及其应用 两个条件 两次检查 两次使用激素 第一次对受、供体进行同期发情处理； 第二次用于供体的超数排卵。 第一次对收集的胚胎进行检查； 第二次对受体母牛是否妊娠进行检查。 胚胎移植一般应在同种的雌性供体和受体之间进行。进行胚胎移植的供体和受体的生理状态要相同。 注意事项 知识夯基 考向研析 考向2   胚胎移植 考点五 胚胎工程及其应用 （1）超数排卵使用的激素是 。 （2）用于胚胎移植的早期胚胎是 。 （3）良种牛的后代的遗传特性是由 牛决定的。 （4）胚胎工程的最后一道“工序”是 。 （5）胚胎移植的方法有 和 。 （6）冲卵 。且胚胎分割的次数不宜过多;但一次给受体动物 ，可增加双胞胎和多胞胎的比例 供体公牛和供体母 胚胎移植 手术法 非手术法 把供体子宫内的胚胎冲洗出来 植入多个胚胎 促性腺激素 桑椹胚或囊胚 知识夯基 考向研析 考向3   胚胎分割 考点五 胚胎工程及其应用 （1）概念：采用机械方法将早期胚胎切割成2等份、4等份或8等份等，经移植获 得________________的技术。 （2）仪器设备： 同卵双胎或多胎 理论依据：早期胚胎细胞具有很强的分裂能力，并保持着细胞全能性。 特点：后代具有相同的遗传物质，因此胚胎分割可以看做动物无性繁殖或克隆的方法之一。 显微操作仪 体视显微镜 知识夯基 考向研析 考向2   胚胎移植 考点五 胚胎工程及其应用 （3） 操作程序 ①选择胚胎：选择发育良好、形态正常的桑葚胚或囊胚，移入盛有操作液的培养皿中。 ②分割胚胎：在显微镜下用分割针或分割刀对胚胎进行分割 ③移植胚胎：分割后的胚胎可直接移植给受体，或经体外培养后，再移植给受体。 对囊胚阶段胚胎进行分割时一定要均分内细胞团。 知识夯基 考向研析 考向2   胚胎移植 考点五 胚胎工程及其应用 做DNA分析 鉴定性别 进行DNA分析的目的是进行遗传病筛查，以防止产生的后代具有严重的遗传病；进行性别鉴定，是为了人工筛选后代动物的性别。 问题1:为什么要取滋养层细胞进行分析和鉴定？ 知识夯基 考向研析 考向2   胚胎移植 考点五 胚胎工程及其应用 为什么要取滋养层细胞进行分析和鉴定？ 选取滋养层细胞。 因为内细胞团将来发育成胎儿的各种组织，如果取了内细胞团细胞，可能会影响胎儿以后的发育。而滋养层细胞将来发育成胎儿的胎盘和胎膜，只为胚胎提供营养；同时滋养层细胞和内细胞团细胞都是由同一个受精卵经有丝分裂和细胞分化形成，具有相同的遗传物质。 内细胞团 滋养层 囊胚腔 发育 胎盘和胎膜 发育 胎儿的各种组织 知识夯基 考向研析 考向2   胚胎移植 考点五 胚胎工程及其应用 (4)意义 ① 促进优良动物品种的繁殖,产生的__________相同的后代是进行遗传学 研究的宝贵材料。 ② 在胚胎移植前,进行__________、遗传病筛查等,对于人工控制动物性别、 动物繁育健康后代具有重要意义。 遗传性状 性别鉴定 1.下图表示精子入卵后，发生(或引起)的一系列变化形成受精卵的过程。下列叙述错误的是( ) A.图中X指卵细胞膜反应，Y指卵子的减数分裂Ⅱ B.经图中Y过程只形成了雌原核 C.精子入卵主要指精子的头部外膜与卵细胞膜融合 D.精子入卵后精子的尾部留在外面，并在溶酶体的作用下自溶 Y过程既形成了雌原核，又形成了第二极体 知识夯基 考向研析 考向1   胚胎工程及其应用 考点二 胚胎工程及其应用 A 2.下列关于“试管牛”培养流程的叙述，不正确的是( ) A.过程①可对供体母牛注射促性 腺激素，使其排出更多的卵子 B.过程②发生的标志是在卵细胞 膜和透明带的间隙观察到两个 极体或雌、雄原核 C.大量的研究已经证明，过程③基本不会发生免疫排斥反应 D.移入受体的供体胚胎的遗传特性，在孕育过程中受受体的影响 “试管牛”的遗传物质来自供体母牛和供体公牛，胚胎遗传性状取决于供体，在孕育过程中不受受体的影响 知识夯基 考向研析 考向1   胚胎工程及其应用 考点二 胚胎工程及其应用 D 3.近年来发展起来的胚胎工程技术为优良种畜的快速繁殖带来了无限可能。下图为经体外受精和胚胎分割移植培育优良奶牛的过程。下列相关说法正确的是（ ） A.体外受精所需的成熟卵子可以从母体卵巢中直接获取，但在受精前要对精子进行获能处理 B.进行胚胎分割时，应选择发育到原肠胚时期的胚胎进行操作 C.胚胎分割的方法只能用分割针在显微镜下将胚胎均等分割成若干份 D.胚胎在受体子宫内的发育过程中其遗传特性不受影响 卵巢中获取的卵细胞必须在体外培养到MⅡ期，才能与获能精子融合得到受精卵 进行胚胎分割时，应选择发育到桑葚胚或囊胚时期的胚胎进行操作 若胚胎处于卵裂期可以采用酶解法或机械法，若处于囊胚期则只能运用机械法分割 知识夯基 考向研析 考向1   胚胎工程及其应用 考点二 胚胎工程及其应用 D 4.下列有关哺乳动物体外受精的叙述，正确的是（ ） A.给实验动物注射促性腺激素，使其产生更多的精子 B.采集的卵母细胞可直接与获能的精子受精 C.获能的精子和成熟的卵子要在适当的培养液中完成受精 D.卵母细胞与精子受精前均已完成减数分裂Ⅱ 给实验动物注射促性腺激素，目的是使其产生更多的卵母细胞 采集的卵母细胞要在体外进行成熟培养，然后才能与精子共同培养完成受精 次级卵母细胞的减数分裂Ⅱ是在精子和卵子结合过程中完成的 知识夯基 考向研析 考向1   胚胎工程及其应用 考点二 胚胎工程及其应用 C 5.胚胎工程技术的迅速发展实现了优良家畜品种的大量繁殖，能显著提高畜产品质量改善人民生活，还可以解决濒危动物繁育的问题。下列有关哺乳动物胚胎工程的叙述，正确的是(　　) A.刚采集到的卵母细胞即可与获能处理后的精子在体外受精 B.在卵细胞膜和透明带之间观察到两个极体，标志着卵子受精 C.卵裂在透明带内进行，此时胚胎细胞数量和总体积不断增加 D.为了获得大量同卵多胚，可对囊胚或桑葚胚进行无限次分割 B 刚采集到的卵母细胞需培养到MⅡ期才能与获能处理后的精子在体外受精 受精卵在卵裂期，细胞数量增加但胚胎总体积并不增加 采用胚胎分割技术产生同卵多胎的可能性是有限的，分割次数越多，分割后胚胎成活的概率越小 知识夯基 考向研析 考向1   胚胎工程及其应用 考点二 胚胎工程及其应用 6.甘加藏羊是甘肃高寒牧区的优良品种，是季节性发情动物，每年产羔一次，每胎一羔，繁殖率较低。为促进畜牧业发展，研究人员通过体外受精、胚胎移植等胚胎工程技术提高藏羊的繁殖率，流程如下图。下列叙述错误的是(　　) A.藏羊甲需用促性腺激素处理使 其卵巢卵泡发育和超数排卵 B.藏羊乙的获能精子能与刚采集到的藏羊甲的卵母细胞受精 C.受体藏羊丙需和藏羊甲进行同期发情处理 D.后代丁的遗传物质来源于藏羊甲和藏羊乙 B 从卵巢中刚采集的卵母细胞需培养成熟(MⅡ期)后才可与获能的精子进行体外受精 知识夯基 考向研析 考向1   胚胎工程及其应用 考点二 胚胎工程及其应用 7.(2024·湖北卷，5)波尔山羊享有“世界山羊之王”的美誉，具有生长速度快、肉质细嫩等优点。生产中常采用胚胎工程技术快速繁殖波尔山羊。下列叙述错误的是(　　) A.选择遗传性状优良的健康波尔母山羊进行超数排卵处理 B.胚胎移植前可采集滋养层细胞进行遗传学检测 C.普通品质的健康杜泊母绵羊不适合作为受体 D.生产中对提供精子的波尔公山羊无需筛选 D 生产中需选择品质良好的波尔公山羊提供精子 知识夯基 考向研析 考向1   胚胎工程及其应用 考点二 胚胎工程及其应用 解析　选择遗传性状优良的健康波尔母山羊作为供体，进行超数排卵处理，A正确； 胚胎移植前，采集部分滋养层细胞进行遗传学检测，B正确； 虽然作为受体的母山羊只需具备健康的体质和正常繁殖能力即可，但山羊和绵羊是不同的物种，具有生殖隔离，不能将山羊的胚胎移植到绵羊子宫发育，即普通品质的健康杜泊母绵羊不适合作为受体，C正确； 生产中需选择品质良好的波尔公山羊提供精子，D错误。 8.近年来由于栖息地丧失和人为捕猎，亚洲黑熊数量骤减，科学家期望通过人工授精、胚胎移植等方法拯救亚洲黑熊，其过程如下图。下列说法正确的是( ) D A.胚胎工程一般采用促性腺激素释放激素处 理A使其超数排卵 B.后代遗传性状与A和C一致，后代 遗传 性状与B一致 C.D受体雌性必须和A、B进行同期发情处理 D.A排出的卵子必须培养到 Ⅱ期才能与C的获能精子结合 促性腺激素 F的遗传性状大部分与B一致，少数性状与A相同 B只需要提供体细胞，所以不需要对其进行同期发情处理 知识夯基 考向研析 考向1   胚胎工程及其应用 考点二 胚胎工程及其应用 [解析] 胚胎工程一般采用促性腺激素处理A使其超数排卵，A错误；后代 遗传物质来源于A和C，的遗传性状与A和C一致，而 的遗传物质来源于A和B， 的遗传性状大部分与B一致，少数性状与A相同，B错误；D接受来自A的胚胎，所以必须和A进行同期发情处理，目的是使体内的生理环境保持一致，提高胚胎的存活率，而B只需要提供体细胞，所以不需要对其进行同期发情处理，C错误。 04 真题感知·命题洞见 1.（2025·重庆）为保护濒危哺乳动物甲，科研工作者将甲的近亲物种乙（种群数量多）进行了如图所示的研究，下列叙述正确的是（    ） A．克隆动物的核基因组来源于甲、乙 B．体外受精需用获能的精子与MI期的卵母细胞受精 C．囊胚①的内细胞团可发育为胎盘、个体 D．滋养层可影响内细胞团的发育 D 真题感知·命题洞见 克隆动物的核基因组来源于甲，细胞质中的基因来源于乙，A错误；体外受精需用获能的精子与MⅡ期的卵母细胞受精，而不是MI期，B错误；囊胚①的内细胞团可发育为个体，滋养层细胞发育为胎膜和胎盘，C错误。 A、克隆动物的核基因组来源于甲，细胞质中的基因来源于乙，A错误； B、体外受精需用获能的精子与MⅡ期的卵母细胞受精，而不是MI期，B错误； C、囊胚①的内细胞团可发育为个体，滋养层细胞发育为胎膜和胎盘，C错误； D、滋养层可影响内细胞团的发育，如滋养层细胞分泌的某些物质可能会影响内细胞团细胞的分化等，D正确。 114 2.（2025·广东）将人眼睑成纤维细胞传代培养后，再培养形成支架，在该支架上接种人口腔黏膜上皮细胞，培养一段时间后分离获得上皮细胞片层，可用于人工角膜的研究。上述过程不涉及（    ） A．制备细胞悬液 B．置于等适宜条件下培养 C．离心收集细胞 D．用胰蛋白酶消化支架后分离片层 D 真题感知·命题洞见 不用胰蛋白酶消化支架，避免将上皮细胞片层分离成单独细胞，D错误。 A、动物细胞培养时，为增大细胞与培养液的接触面积，需要制备细胞悬液，A正确； B、置于等适宜条件下培养，其中5%的CO2可维持培养液的pH，B正确； C、在成纤维细胞传代培养过程中需要通过离心收集细胞，C正确； D、不用胰蛋白酶消化支架，避免将上皮细胞片层分离成单独细胞，D错误。 115 3.（2025·湖北）利用犬肾细胞MDCK扩增流感病毒，生产流感疫苗，具有标准化、产量高等优点。但MDCK细胞贴壁生长的特性不利于生产规模的扩大，严重制约疫苗的生产效率。研究人员通过筛选，成功获得一种无成瘤性的（多代培养不会癌变）、可悬浮培养的MDCK细胞——XF06.下列叙述错误的是（　　） A．XF06悬浮培养可提高细胞密度，进而提升生产效率 B．细胞贴壁生长特性的改变是由于流感病毒感染所导致 C．可采用离心技术从感染病毒的细胞裂解液中分离出流感病毒 D．采用无成瘤性细胞生产疫苗，是为了避免疫苗中有致瘤DNA的污染 B 真题感知·命题洞见 XF06细胞的贴壁特性改变是通过筛选获得的遗传特性，而非流感病毒感染所致（病毒感染仅用于扩增病毒，不改变宿主细胞生长方式），B错误。 A、悬浮培养的XF06细胞无需贴壁，可在培养液中自由增殖，从而提高细胞密度，扩大病毒产量，提升生产效率，A正确； B、XF06细胞的贴壁特性改变是通过筛选获得的遗传特性，而非流感病毒感染所致（病毒感染仅用于扩增病毒，不改变宿主细胞生长方式），B错误； C、流感病毒释放到细胞裂解液后，离心可分离细胞碎片（沉淀）与病毒（上清液），C正确； D、无成瘤性细胞不含癌基因，可避免疫苗中混入致瘤性DNA片段，确保疫苗安全性，D正确； 116 4.（2025·山东）利用动物体细胞核移植技术培育转基因牛的过程如图所示，下列说法错误的是（    ） A．对牛乙注射促性腺激素是为了收集更多的卵母细胞 B．卵母细胞去核应在其减数分裂Ⅰ中期进行 C．培养牛甲的体细胞时应定期更换培养液 D．可用PCR技术鉴定犊牛丁是否为转基因牛 B 真题感知·命题洞见 卵母细胞去核应在其减数分裂Ⅱ中期进行，B错误。 A、对牛乙注射促性腺激素进行超数排卵，目的是收集更多数量的卵母细胞，以便后续进行核移植操作，A正确； B、卵母细胞去核应在其减数分裂Ⅱ中期进行，B错误； C、在培养动物体细胞时，需要定期更换培养液，防止细胞代谢产物的积累对细胞自身造成危害，C正确； D、PCR技术可以扩增特定的DNA片段，通过检测犊牛丁细胞中是否含有转基因的DNA片段，就可以鉴定犊牛丁是否为转基因牛，D正确。 117 5.（2025·安徽）细胞工程技术已在生物制药和物种繁育等领域得到了广泛应用。下列关于动物细胞工程的叙述，正确的是（    ） A．从动物体内取出组织，用胰蛋白酶处理后直接培养的细胞称为传代细胞 B．将特定基因或特定蛋白导入已分化的T细胞，可将其诱导形成iPS细胞 C．将B淋巴细胞与骨髓瘤细胞混合，经诱导融合的细胞即为能分泌所需抗体的细胞 D．采用胚胎分割技术克隆动物常选用桑葚胚或囊胚，因这两个时期的细胞未发生分化 B 真题感知·命题洞见 胰蛋白酶处理后直接培养的细胞为原代细胞，A错误；融合细胞有具有同种核的融合细胞和杂交瘤细胞，需筛选才能获得分泌特定抗体的杂交瘤细胞，C错误;囊胚细胞已开始分化，D错误。 A、胰蛋白酶处理后直接培养的细胞为原代细胞，A错误； B、将特定基因或特定蛋白（特定的转录因子如Oct4、Sox2、Klf4和c-Myc）导入已分化的T细胞，可将其诱导形成iPS细胞，B正确； C、融合细胞有具有同种核的融合细胞和杂交瘤细胞，需筛选才能获得分泌特定抗体的杂交瘤细胞，C错误； D、囊胚细胞已开始分化，D错误。 118 6.（2025·甘肃）肿瘤坏死因子α（TNF-α）是一种细胞因子，高浓度时可以引发疾病。研究者利用细胞工程技术制备了TNF-α的单克隆抗体，用于治疗由TNF-α引发的疾病，制备流程如下图。下列叙述正确的是（　　） A．①是从小鼠的血液中获得的骨髓瘤细胞 B．②含未融合细胞、同种核及异种核融合细胞 C．③需用特定培养基筛选得到大量的杂交瘤细胞 D．④需在体外或小鼠腹腔进行克隆化培养和抗体检测 B 真题感知·命题洞见 骨髓瘤细胞应该从骨髓中获取，A错误；诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合，利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞，但不能得到大量的，C错误;进行克隆化培养，即用培养基培养和注入小鼠腹腔中培养，抗体检测不是在小鼠腹腔内进行，D错误。 A、骨髓瘤细胞应该从骨髓中获取，A错误； B、B细胞和骨髓瘤细胞的融合是随机的，可能有些细胞不发生融合，有些两两融合，有些多个融合，有同种核融合细胞，也有异种核融合细胞，B正确； C、诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合，利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞，但不能得到大量的，C错误； D、进行克隆化培养，即用培养基培养和注入小鼠腹腔中培养，抗体检测不是在小鼠腹腔内进行，D错误。 119 7.（2025·黑吉辽蒙卷）（多选）下图是制备抗白细胞介素-6（IL-6）单克隆抗体的示意图。下列叙述错误的是（     ） A．步骤①给小鼠注射IL-6后，应从脾中分离 筛选T淋巴细胞 B．步骤②在脾组织中加入胃蛋白酶，制成单 细胞悬液 C．步骤③加入灭活病毒或PEG诱导细胞融合，体现了细胞膜的流动性 D．步骤④经过克隆化培养和抗体检测筛选出了杂交瘤细胞 ABD 真题感知·命题洞见 步骤①给小鼠注射IL-6后，从小鼠的脾中获取B淋巴细胞，A错误；步骤②需要在组织中加入胰蛋白酶或胶原蛋白酶，使其成为单细胞，进而制成悬液，B错误;步骤④是在选择培养基上筛选得到的杂交瘤细胞，该过程得到的杂交瘤细胞不一定能产生所需抗体，步骤⑤克隆化培养和抗体检测筛选出了分泌所需抗体的杂交瘤细胞，D错误。 A、步骤①给小鼠注射IL-6后，应从小鼠的脾中获取B淋巴细胞，A错误； B、步骤②需要在组织中加入胰蛋白酶或胶原蛋白酶，使其成为单细胞，进而制成悬液，B错误； C、步骤③是诱导细胞融合过程，该过程可加入灭活病毒或PEG诱导，细胞融合的过程体现了细胞膜的流动性，C正确； D、步骤④是在选择培养基上筛选得到的杂交瘤细胞，该过程得到的杂交瘤细胞不一定能产生所需抗体，步骤⑤经过克隆化培养和抗体检测筛选出了分泌所需抗体的杂交瘤细胞，D错误。 120 8.（2025·湖南卷·节选）制备抗蛋白A单克隆抗体 用蛋白A对小鼠进行免疫后，将免疫小鼠B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合，诱导融合的常用方法有 （答出一种即可）。选择培养时，对杂交瘤细胞进行克隆化培养和 ，多次筛选获得足够数量的能分泌所需抗体的细胞。体外培养或利用小鼠大量生产的抗蛋白A单克隆抗体，可用于非洲猪瘟的早期诊断。 聚乙二醇（PEG）融合法  抗体检测 真题感知·命题洞见 诱导动物细胞融合的常用方法有聚乙二醇（PEG）融合法、灭活病毒诱导法、电融合法等，这里答出其中一种即可，比如聚乙二醇（PEG）融合法；选择培养时，对杂交瘤细胞进行克隆化培养和抗体检测，多次筛选获得足够数量的能分泌所需抗体的细胞。 ①诱导动物细胞融合的常用方法有聚乙二醇（PEG）融合法、灭活病毒诱导法、电融合法等，这里答出其中一种即可，比如聚乙二醇（PEG）融合法。 ②选择培养时，对杂交瘤细胞进行克隆化培养和抗体检测，多次筛选获得足够数量的能分泌所需抗体的细胞。 121 9.（2025·云南）孕酮具有促进子宫内膜增生，为受精卵着床做准备的作用。某奶牛场发现一头高产奶量母牛生产两胎后重复配种均未成功妊娠，该牛可正常排卵但孕酮量低于正常母牛。为获得该母牛的后代，下列说法正确的是（　　） A．运用体外受精或人工授精技术可提高该牛的妊娠率 B．使用外源促性腺激素处理该牛获得更多卵子进而可获得多枚胚胎 C．体外受精或人工授精后形成受精卵移植到健康受体可提高存活率 D．使用该牛MⅡ期卵母细胞的细胞核进行核移植可获得可育后代 C 真题感知·命题洞见 该母牛孕酮量低于正常母牛，子宫内膜增生可能不足，不利于受精卵着床，即使运用体外受精或人工授精技术，也难以提高妊娠率，A 错误；使用外源促性腺激素处理该牛，可促使其超数排卵，获得更多卵子，但孕酮量低于正常母牛，受精卵不能成功着床，不能获得成活胚胎，B 错误;使用该牛 MⅡ期卵母细胞的细胞核进行核移植，由于该牛本身孕酮分泌异常等问题，获得的后代也可能存在发育等方面的问题，不一定可育，D 错误。 A、该母牛孕酮量低于正常母牛，子宫内膜增生可能不足，不利于受精卵着床，即使运用体外受精或人工授精技术，也难以提高妊娠率，A 错误；    B、使用外源促性腺激素处理该牛，可促使其超数排卵，获得更多卵子，但孕酮量低于正常母牛，受精卵不能成功着床，不能获得成活胚胎，B 错误；   C 、该牛可正常排卵但孕酮量低于正常母牛，故可通过体外受精或人工授精后形成受精卵移植到健康的受体内可提高存活率，C 正确；    D 、使用该牛 MⅡ期卵母细胞的细胞核进行核移植，由于该牛本身孕酮分泌异常等问题，获得的后代也可能存在发育等方面的问题，不一定可育，D 错误。 122 10.（2025·江苏）梅花鹿和马鹿杂交后代生命力强、茸质好，但自然杂交很难完成，人工授精能解决此难题。胚胎工程技术的应用，可提高繁殖率，增加鹿场经济效益。下列相关叙述合理的是（    ） A．采集的精液无需固定、稀释，即可用血细胞计数板检测精子密度 B．人工授精时，采集的精液经获能处理后才能输入雌性生殖道 C．超数排卵处理时，常用含促性腺激素的促排卵剂 D．母体子宫对胚胎的免疫耐受性低下是胚胎移植的生理学基础 D 真题感知·命题洞见 采集的精子需要经过稀释和固定处理，否则活动精子会影响计数准确性，且血细胞计数板通常用于已固定的细胞，A错误；人工授精时，精子在雌性生殖道内自然获能，无需提前体外处理，B错误；胚胎移植的生理学基础是母体子宫对胚胎的免疫耐受性高，不会发生免疫排斥，而非耐受低下，D错误。 A、采集的精子需要经过稀释和固定处理，否则活动精子会影响计数准确性，且血细胞计数板通常用于已固定的细胞，A错误； B、人工授精时，精子在雌性生殖道内自然获能，无需提前体外处理，B错误； C、超数排卵通过注射促性腺激素（如FSH和LH）促进卵泡发育和排卵，C正确； D、胚胎移植的生理学基础是母体子宫对胚胎的免疫耐受性高，不会发生免疫排斥，而非耐受低下，D错误。 123 11.（2025·陕晋青宁卷）科研人员通过对绵羊受精卵进行基因编辑和胚胎移植等操作，获得了羊毛长度显著长于对照组的优良品系。下列叙述错误的是（    ） A．为获取足够的卵子，需对供体绵羊注射促性腺激素进行超数排卵处理 B．为确保受体绵羊与供体绵羊生理状态一致，需进行同期发情处理 C．受精卵发育至桑葚胚阶段，细胞数量和胚胎总体积均增加 D．对照组绵羊的选择需考虑年龄、性别等无关变量的影响 B 真题感知·命题洞见 桑葚胚阶段的细胞通过卵裂增殖，细胞数量增加，但胚胎总体积不变，C错误。 A、促性腺激素可促进供体超数排卵，从而获得更多卵子，A正确； B、为确保受体绵羊与供体绵羊生理状态一致，受体与供体需同期发情处理以保证胚胎移植后生理环境同步，B正确； C、桑葚胚阶段的细胞通过卵裂增殖，细胞数量增加，但胚胎总体积不变，C错误； D、本实验的自变量是是否对绵羊受精卵进行基因编辑等，其余为无关变量，对照组与实验组的无关变量（如年龄、性别）需保持一致，以排除干扰，D正确。 124 12.（2025·黑吉辽蒙卷）研究显示，约70%的小鼠体细胞核移植胚胎未能成功发育至囊胚期，且仅有约2%的胚胎移植到代孕母鼠后可正常发育。下列叙述错误的是（    ） A．体细胞核进入去核的MⅡ期卵母细胞形成重构胚 B．移植前胚胎发育率低，可能是植入的体细胞核不能完全恢复分化前的功能状态 C．胚胎移植到代孕母鼠后成活率低，可能是早期胚胎未能及时从滋养层内孵化 D．为提高胚胎成活率，可用胚胎细胞核移植代替体细胞核移植 C 真题感知·命题洞见 根据题干，早期胚胎大多都不能发育至囊胚期，必然不是孵化的原因，着床在孵化之后发生，孵化是胚胎从透明带中伸展出来（不是滋养层），C错误。 A、由于M Ⅱ期卵母细胞的细胞更大，便于进行技术操作，细胞质中含有激发细胞核全能性的物质，因此体细胞核移植到去核的MⅡ期卵母细胞形成重构胚，A正确； B、移植前胚胎发育率低，细胞核来自于已分化的体细胞，全能性容易受到影响，因此可能是植入的体细胞核不能完全恢复分化前的功能状态，B正确； C、根据题干，早期胚胎大多都不能发育至囊胚期，必然不是孵化的原因，着床在孵化之后发生，孵化是胚胎从透明带中伸展出来（不是滋养层），C错误； D、胚胎细胞核全能性高于体细胞，因此为提高胚胎成活率，可用胚胎细胞核移植代替体细胞核移植，D正确。 125 05 学以致用·能力提升 学以致用·能力提升 长句作答类 (选择性必修3 P45图2－12)用胰蛋白酶处理动物组织，对细胞的消化有两种情况： (1)短时间内细胞______(填“会”或“不会”)被消化，原因是____________________________________________________。 (2)长时间后细胞_____(填“会”或“不会”)被消化，原因是_______________________________________________________________________________________________。 不会　 细胞表面具有糖蛋白，对细胞具有一定的保护作用 会　 细胞表面糖蛋白的保护作用是有限的；细胞膜的主要成分包括磷脂和蛋白质，蛋白质可被胰蛋白酶水解 胰蛋白酶处理的时间不能太长，否则会损伤细胞。 127 源于选择性必修3 P54“相关信息”：目前动物细胞核移植技术中普遍使用的去核方法是　　　　　。也有人采用梯度离心、紫外线短时间照射和化学物质处理等方法。这些方法是在没有穿透卵母细胞透明带的情况下去核或使其中的　　　　　。 显微操作法 DNA变性 通过 去除卵母细胞的核，再用 可一并吸出细胞核和第一极体。 可用物理或化学方法（如 、钙离子载体、乙醇、蛋白酶合成抑制剂等）激活受体细胞，使其 的过程 显微操作 微型吸管 完成细胞分裂和发育 电脉冲 学以致用·能力提升 长句作答类 教材隐性知识：源于选择性必修3 P62“相关信息”：超数排卵是指应用外源___________，诱发卵巢排出比自然情况下更多的成熟卵子。 促性腺激素 请根据以下信息，设计一方法(不考虑机械方法)，从培养液中筛选出杂交瘤细胞，并写出其依据的原理。已知细胞合成DNA有D和S两条途径，其中D途径能被氨基嘌呤阻断。人淋巴细胞中有这两种DNA的合成途径，但一般不分裂增殖。小鼠骨髓瘤细胞中尽管只有D途径，但能不断分裂增殖，将这两种细胞在试管中混合，加入聚乙二醇促融，获得杂种细胞。 提示　可向培养液中加入氨基嘌呤，收集增殖的细胞 因为加入氨基嘌呤后，使D合成途径阻断，仅有D合成途径的骨髓瘤细胞及其彼此融合的细胞就不能增殖，但人的淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合后的杂种细胞可以利用淋巴细胞中的S途径合成DNA而增殖。 学以致用·能力提升 情境分析类 dMAb技术是一种通过DNA编码产生单克隆抗体的技术，比传统的单克隆抗体制备方法有更多的发展潜力。下图是dMAb技术在埃博拉病毒感染疾病的临床研究中的操作流程。 与传统利用杂交瘤细胞产生单克隆抗体的 技术相比，dMAb技术在抗体的制备上有 何优势？(请列举两点) 提示　①dMAb技术抗体的产生在生物 体内进行，不需要进行细胞体外培养； ②产生抗体的细胞种类不局限于免疫细胞(浆细胞)； ③抗体直接由DNA编码产生，省去抗原刺激免疫细胞、细胞融合和筛选的步骤。 学以致用·能力提升 情境分析类 ①诱导动物细胞融合常用的方法有：PEG融合法、电融合法和灭活病毒诱导法，激活重构胚的常用方法有电刺激、Ca2＋载体、乙醇和蛋白酶合成抑制剂等。核移植时，一般先用电融合法使供体和受体细胞融合，再用物理或化学方法激活受体细胞，使其完成细胞分裂和发育进程。　　　　　　 ②克隆动物技术属于无性繁殖技术。 ③动物体细胞核移植的原理是动物细胞核的全能性，而不是动物细胞的全能性。 ④核移植技术中的供体是提供细胞核的动物个体；受体是代孕的雌性动物个体，而非提供去核卵母细胞的动物个体。　　　　　　　　 ⑤动物体细胞核移植过程中，涉及的技术手段不仅有核移植技术，还有动物细胞融合技术、动物细胞培养技术，以及早期胚胎培养技术和胚胎移植技术等。　　　　　　　　　　 学以致用·能力提升 易错易混类 ⑥有关动物细胞培养知识点可归纳为4个“2” 培养材料为“2”：即动物胚胎、幼龄动物的组织和器官。 培养过程为“2”：即原代培养、传代培养。 胰蛋白酶使用“2”次：即原代培养和传代培养中均使用，第一次使用的目的是使组织细胞分散开，第二次使用的目的是使细胞从瓶壁上脱离下来，便于分散后继续培养。 细胞生长特点有“2”个：即贴壁生长和接触抑制 ⑦植物组织培养过程中存在脱分化和再分化过程，动物细胞培养没有脱分化和再分化过程。 ⑧植物组织培养过程中能获得新的个体，动物细胞培养只是获得细胞。 ⑨动植物细胞培养过程涉及有丝分裂，不涉及减数分裂。 学以致用·能力提升 易错易混类 讲师：xxx 感谢观看 THANK YOU 133 Lavf55.33.100 $