单元过关(14)发酵工程和细胞工程-【衡水真题密卷】2026年高考生物单元过关检测（湖南专版）

用信念去坚特你的梦想，让它成为你前进的动力和信念 2025一2026学年度单元过关检测（十四）》 C.以奶粉为唯一氮源的培养基能起到选择作用 班级 D.透明圈与南落直径比值较小的菌株为高产菌株 卺题 生物学·发酵工程和细胞工程 5.纤维素、半纤维素，木质素参与构成植物细胞壁。可白蚁的肠道中分离木质素分解菌来 本试卷总分100分，考试时间75分钟。 降解利用木质素，已知木质素降解过程使苯胺蓝培养基脱色。下列说法错误的是 姓名 ( 一、选择题：本题共12小题，每小题2分，共24分。在每小题给出的四个选项中，只有一项 A.以术质素为唯一碳源，用稀释涂布平板法分离木质素分解菌 得分 是符合题目要求的。 B.脱色圈直径与菌落直径比值越小，木质素分解菌分解效果越好 题号123456789101112 C.在选择培养基上挑选出菌落后，再通过平板划线法进一步纯化 答案 D.除了白蚁肠道，还可从离烂的树皮表面分离出木质素分解菌 1.高梁酒是一种传统的发酵酒，家庭制作高粱酒包括选料浸泡、蒸煮糊化、冷却拌酪、人桶 6.某些酵母可以利用工业废甲醇作为碳源进行培养，这样既可减少污染又可降低生产成 发酵几个步骤。下列分析错误的是 () 本。研究人员拟从土壤样品中分离该类酵母，并进行大量培养，如图为操作流程。下列 A“选料浸泡”时应选择颗粒饱满、质地坚实，淀粉含量高的高梁籽粒进行浸泡 说法正确的是 () B.“蒸煮糊化”时不仅可以杀死杂菌，还可使淀粉糊化，有利于后期淀粉酶发挥作用 C.“冷却拌醅”时需不停地搅拌，有利于酵母菌与高粱籽粒充分接触并大量繁殖 D.“人桶发酵”时为了加快和加大酒精的产生，需要定时往发酵桶中通入空气 2.腌制、风干、酱泡、冷冻等是中国历史悠久的食物保存方式。蕴涵了中国人的智慧，呈现 ①称量土样 2梯度稀释 3平板浇筑分离④对线纯化⑤扩大培养 着中国人的生活。下列叙述错误的是 () A,步骤②所用的培养基应以甲醇为碳源 A.为防止乳酸菌呼吸作用产生的CO2使发酵液溢出，泡菜坛只能装八成满 B.步骤③中应将温度约50℃的培养基倒入培养皿混匀 B.风干晾晒能降低食品的含水量，使微生物不易生长和繁殖，从面延长食品保存时间 C.进行步骤④前需从分离平板中挑取多个菌落，分别测定酵母细胞中甲醇的含量 C.低温或冷冻保存能降低酶的活性，抑制微生物的生命活动，防止食物腐败 D.步骤⑤可用真空发酵的方法来提取发酵产物 D.用于制作苹果醋的微生物主要是醋酸菌，其代谢类型为异养需氧型 ?.生物碱是一类碱性含氮化合物，它不是植物生长必需的物质，在植物体内含量少，有治 3.玉林兴业城？酸料（含泡菜）的独特风味远近闻名，其主要做法是将蔬菜、瓜果等用自己 疗疾病的作用，可从植物中获取。如图是以铁皮石斛为材料，运用组织培养技术培养拟 酿造的小米醋浸泡。而同学们课堂制作的传统泡菜是利用植物体表面的乳酸菌来发酵 原球茎（简称PLBs,类似愈伤组织）生产生物碱的实验流程。下列叙述正确的是() 的。两种方法得到的泡菜各具风昧，下列描述正确的是 () A.制作传统泡菜和酿造小米醋都需要用水密封坛子 新生代养闭，圆并结丝高产御胞同华。检包一实结习 2 3 B.制作传统泡菜发酵时相应酶活性不受有机酸含量增加的影响 A.为了提高PLBs的诱导率，诱导时应注意严格灭南并提供光照 C.制作传统泡菜发酵时需要保持适宜的温度以维持相应酶的活性 B.图中过程①为脱分化形成PLB5,过程②为再分化生产生物職 D.酿酒的产物乙醇不能作为酿小米醋的原料，因为乙醇会使相应菌种死亡 C.生物碱为铁皮石斛的次生代谢物，主要在③阶段合成并提取 4.芽孢杆菌耐高温，是常见的蛋白酶生产菌。培养基中的蛋白质被蛋白酶降解后，会在菌 D,若细胞数量/生物碱产量的值越大，则该细胞系为高产细胞系 落周围形成透明圈。如图是筛选蛋白酶高产菌株的过程。下列叙述错误的是() 8.杜泊羊以其生长速度快、肉质好等优点，成为受广大消费者喜欢的绵羊品种。科研工作 70-80℃水落10mn 稀释涂布法 奶粉培养基 者欲采用胚胎工程快速繁殖杜泊羊。下列叙述错误的是 () A.用促性腺激素处理供体杜泊羊可诱导卵巢排出更多的卵子 土壤采样一样品处理一一分离，纯化一初步糖志 B.经获能处理的精子和成熟培养的卵子，才能用于体外受精 A.70一80℃水浴10min的目的是杀死部分非芽孢杆菌 C.对桑葚胚或囊胚进行胚胎分割的次数越多，胚胎成活率越低 B.在酒精灯火馅旁将样品用无菌水稀释并涂布接种 D,将早期胚胎植入同期发情处理的受体母羊内，无免疫排斥反应 单元过关检测（十四）生物学第1页（共8页） 真题密卷 单元过关检测（十四）生物学第2页（共8页） 9.利用百合脱毒苗通过组织培养技术能生产出无病毒、健康，高产的百合植株。脱毒苗在 注：GFP指表达绿色荧光标记蛋白，可监测供体干细胞的存活情况以及其在嵌合体不同组织中的分 商业种植、科研育种和园艺观赏等方面具有广泛应用，为百合产业的发展提供了有力支 化、分布情况。 持。制备百合脱毒苗的实验操作流程如图所示。下列叙述错误的是 () A.具有清晰GFP信号的囊胚才能被转移至代孕雌猴体内，否则难以获得嵌合猴 愈伤组织 脱毒苗 取材 转接 B.代孕雌猴在移植嵌合囊胚前，需要饲喂含促性腺激素的饲料进行同期发情处理 A C.由图可知，代孕雌猴分娩的嵌合猴体细胞中，核遗传物质的一半来源于代孕雌猴 百合 分生区 培养基 培养基 培养基 D.图示过程中涉及动物细胞培养、体外受精、早期胚胎培养和胚胎移植等工程技术 A,取材于百合的分生区，是因为该部位所含的病毒极少，甚至无病毒 二、选择题：本题共4小题，每小题4分，共16分。在每小题给出的四个选项中，有一项或 B.过程①需要在培养基中加人细胞分裂素和生长素 多项符合题目要求。全部选对的得4分，选对但不全的得2分，有选错的得0分。 C.过程②不需要更换培养基，但需要增加光照 D.培养基中的脱毒苗在移栽前需要去除封口膜，并在培养箱中生长几日 题号 13 14 15 16 答案 10,疣粒野生稻对水稻白叶枯病具有高度的抗性。科研人员利用疣粒野生稻和栽培稻的 原生质体进行体细胞杂交培有抗白叶枯病水稻，主要流程如图所示。下列叙述正确 13.某研究小组设计了一个利用作物秸杆生产乙醇的小型实验。其主要步骤是：先将粉碎 的是 () 的作物秸秆堆放在底部有小孔的托盘中，喷水浸润、接种菌T,培养一段时间后，再用 栽培稻愈伤 栽培稻 清水淋洗秸秆堆（清水淋洗时菌T不会流失），在装有淋洗液的瓶中接种酵母菌，进行 组用报 原生质体 碘乙酰胺处理 乙醇发酵。实验流程如图所示。下列说法错误的是 () 融合的 →再生植株 浸润，接种黄T 清水淋洗 疣粒野生稻 、疣粒野生稻 愈伤组织细底 染色责受铜 粉醉的 培养 A.①过程为去除细胞壁，需加入经高压蒸汽灭菌的纤维素酶液 B.②过程须加人较高浓度的聚乙二醇，目的是维持一定的渗透压 灭菌、接种 淋洗液 培养、发健乙酚 C,测定原生质体密度时，可用血细胞计数板或稀释涂布平板法 酵母菌 D.碘乙酰胺处理目的是让细胞质失活，以简化筛选程序 A.菌T能够吸收秸秆中的纤维素，并利用细胞内的纤维素酶将其分解 11.植物组织培养和动物细胞培养及胚胎工程相关技术的应用取得了巨大的成就，为人类 B.酵母菌纯培养时，可使用稀释涂布平板法或平板划线法进行接种 的生产生活带来了很多积极的意义，下列叙述正确的是 () C,可分别使用湿热灭菌法和干热灭菌法对淋洗液和培养瓶进行灭陶 A.提高生长素和细胞分裂素的比值可促进愈伤组织形成丛生芽 D.本实验与以粮食为原料发酵生产乙醇，所利用的发酵底物均主要为葡萄糖 B.用果胶酶和胶原蛋白酶去除愈伤组织的细胞壁获得原生质体 14,沙洲牌黄酒作为苏派黄酒的典型代表，以其清爽的口感和独特的酿造技艺而闻名。该 C.胚胎工程中胚胎移植前可采集滋养层细胞进行遗传学检测 黄酒采用的后塍黄酒酿造技艺是江苏省非物质文化遗产，影显了深厚的历史底蕴。黄 D.动物细胞在进行传代培养时需要营造无菌、无毒以及95%空气+5%O2的气体环境 酒酿造主要有以下几个步骤： 12.2023年11月，我国科研人员利用食蟹猴培育出世界首只胚胎干细胞高贡献的活体嵌 浸米→蒸煮·冷却，拌曲→糖化发醇→压榨过滤→煎酒→包装 合猴，该研究部分过程如图所示，由于供体猴胚胎干细胞在体外培养和妊娠期间高度 下面说法错误的是 嵌合于受体胚胎，使得后代活体嵌合猴的各种组织中，高达90%的细胞来源于供体胚 A.浸米目的是使淀粉吸水膨胀，有利于后续蒸煮糖化 胎干细胞。下列叙述正确的是 () B.冷却时要缓慢地把蒸煮后的米饭温度降至微生物发酵的适宜温度 m世C饼O睡怎业 C.糖化发酵中要严格密封，避免气体进入抑制菌种发酵 G伊，供体教ES细脑受体联桑胚此合囊压 代孕雌数 活体怅合餐 D.煎酒又称灭菌，便于对液态发醇酿制得到的黄酒贮存和保管 单元过关检测（十四）生物学第3页（共8页） 真题密卷 单元过关检测（十四）生物学第4页（共8页） 15.嵌合体是指在同一个体中，由基因型不同的细胞或组织相互接触且维持各自并存的混 贿株培养液pH 亚硝酸钠降解能力(%) 合状态。科研人员利用大鼠的PS细胞与小鼠的囊胚构建嵌合体（大鼠和小鼠体细胞 3.6 72.5 中染色体数目分别为40条和42条)，培养过程如图所示。下列叙述错误的是() 3.7 97.8 3.6 88.2 18.(12分)柑橘酸腐病是由白地霉引起的柑橘贮藏期常见的病害之一。抗菌肽是一种抑 菌活性强、无环境污染的生物多肽，目前已用于多种农业病菌的防治。研究人员研究 精 代零绿显藏合体 了抗菌肽对白地霉的抑菌效果，并且对其作用机制进行了探究。回答下列问题： A.体外培养卵母细胞，为防止污染，应利用培养皿或培养瓶进行密闭培养 (1)白地霉从柑橘中获得其生长繁殖所需的水，无机盐、 和 等营养物质。 B.过程A前往往需要超数排卵处理，过程B为胚胎移植 (2)为研究抗菌肽对白地霉的抑菌效果，现用无南打孔器在果实相同部位打孔，每个打 C,移植后的囊胚进一步扩大，导致滋养层破裂，胚胎从其中伸展出来 孔处接种相同体积的处理液，比较15天后的病斑直径。各组处理及结果见表。 D.嵌合体鼠的体细胞在有丝分裂后期染色体数目为82条 组别 1 2 3 4 5 16,细胞融合技术突破了有性杂交的局限，使远缘杂交成为可能。某研究小组以小鼠甲为 先加人抗菌肽溶 实验材料设计实验，研制抗病毒A的单克隆抗体。下列叙述错误的是 接种一定体积的抗菌肽溶液与病 液，2h后接种 抗菌肽溶液与病原菌 () 接种处 病原菌孢子悬原菌孢子悬浮液 孢子悬浮液混合，培 剂备单细胞悬液 理方式 浮液 混合后直接接种 病原菌孢子悬 浮液 养2h后接种 蒂选2 小鼠甲一B淋巴细胞 筛迹1 ,融合细胞，杂交密跟胞 能产：生抗病毒A的单克降 15天后 骨菌墙细飞 抗体的杂交瘤细愈 病斑直 41.3 13.9 29.3 28.7 11.2 径/mm A实验前必须给小鼠甲注射病毒A是为了得到能产生特定抗体的B淋巴细胞 表中数据表明抗菌肽对白地霉有一定的抑菌效果，且抑菌效果与抗菌肽、病原菌孢子 B.将小鼠体内取出的脾脏用剪刀剪碎后加人胃蛋白酶处理，使其分散成单个细胞 悬浮液接种顺序有关，表中X为 与第2组相比， C.筛选1需用特定的选择培养基进行筛选才能获得融合的杂交瘤细胞 第5组抑南效果更好的可能原因是 D.筛选2利用96孔板经1次筛选获得足够数量的能分泌所需抗体的杂交瘤细胞 (3)一般情况下，电导率和离子浓度呈正相关，通过测量溶液电导率可以反映出溶液中 三、非选择题：本题共5小题，共60分。 离子浓度的大小。研究人员将白地霉孢子与抗菌肽在无菌水中混合，测定电导率，培 17,(12分)传统的泡菜制作工艺是以新鲜蔬菜为原料，经过择菜、洗菜、切分与晾干，加人 养一段时间后，再次测定电导率，结果发现电导率明显升高，据此推测抗菌肽抑制白地 煮沸冷却的盐水和一些“陈泡菜水”发酵制作而成。在泡菜腌制过程中会有亚硝酸盐 霉孢子的作用机制可能是 产生。筛选分离优质乳酸菌，既可以抑制有害菌生长，又可以快速产酸、降解亚硝酸 19,(12分)“人造精子”是一种可替代精子使卵细胞“受精”的单倍体胚胎干细胞。科学家 盐，是提升泡菜品质的重要途径。具体筛选流程为：对经多次发酵的泡菜汁进行过滤， 将某种动物单倍体胚胎干细胞注射到卵细胞中成功培育出健康的该种动物。该技术 然后取滤液进行梯度稀释，再用涂布平板法接种到乳酸菌鉴别培养基上进行筛选分 离，不断重复，直至分离纯化出纯菌落。请回答下列问题： 不仅为动物模型的获得提供了新手段，同时也为动物生殖、遗传与发育调控机理研究 (1)传统泡菜制作时加人“陈泡菜水”的目的是 :发酵 提供了新思路。如图是科研人员利用胚胎操作技术，通过两种方式获得重组细胞，进 过程中泡菜罐要加盖并水封，原因是 而培育出该种动物“人造精子”的流程。请回答下列问题： (2)在筛选、分离优质乳酸菌操作过程中，接种工具需要灭菌。此外，可通过 成熟精了 方式 观察菌落的 等特征（至少写出两个），初步鉴别出乳酸菌。 (3)为获得优质乳酸菌，研究人员将从泡菜汁中筛选获得的3株乳酸菌，接种到液体培 养基中，在37℃条件下培养72h,进行产酸、降亚硝酸盐能力测定实验，结果如表所 方式一 示。在该条件下，最理想的菌株是 ,理由是 数分装Ⅱ中 单杭体扩塑爱单信休 单元过关检测（十四）生物学第5页（共8页） 真题密卷 单元过关检测（十四）生物学第6页（共8页） (1)方式一成功获得“人造精子”的关键操作是及时去除 的细胞核 21.(12分)窑湾绿豆烧酒，香醇甜美，久享盛誉，被列为江苏省新沂市地方特产。它是以优 (2)方式二中选择卵母细胞作为受体细胞的原因是卵母细胞具有 质白酒为基酒，佐以红参、桂花、砂仁、杜仲等50余味名贵中药材和冰糖勾兑而成，其 (答出两点即可)的优点，操作中注入完整的精子而非精子的细胞核，原 色宛如绿豆汤。制作的工艺流程如图1所示。请回答下列问题： 因是 红、大 滴种选育。扩大培养 麦等原料 (3)目前，构建成功的该动物单倍体胚胎干细胞系，均为性染色为X染色体的细胞系， 蒸稻壳 拌和一蒸馏一冷却铵种一发健勾炮密藏一分装 无法获得性染色体为Y的单倍体胚胎干细胞系，这与该生物Y染色体比X染色体短 母相一 然制的中药 小有关。据此推测可能的原因是 。若将成功构建的“人造精子”与卵细胞结合 (1)蒸稻壳的目的除了去除稻壳中残留的农药，霉烂味，还有 作用。蒸 繁殖正常的二倍体动物，该动物的性别是 馏后要进行快速冷却，目的是为了防止 20.(12分)尼帕病毒(NV)是一种新型人畜共患病毒，该病毒的结构蛋白(X蛋白)可诱导 (2)菌种选有过程，为了纯化酵母菌，操作如图2所示。该过程的接种方法是 动物机体产生中和抗体，从而防御病毒感染。制备单克隆中和抗体的流程如图所示 ,接种工具进行了次灼烧灭菌。扩大培养目的是 回答下列问题： ,使用的培养基按物理性质分类，属于培养基。 骨简密 9 X蛋白 特定培 5 用林口 多种杂交 抗体检 优质革克隆 细胞 细胞 细胞 中和抗体 图2 (1)制备单克隆抗体过程中涉及的动物细胞工程技术包括 和 (3)窑湾绿豆烧的生产流程中，没有严格的灭菌操作，但发酵过程几乎不会受杂菌污染 (2)在特定培养基Y中不能存活的细胞包括下列 影响，这是因为 ①B淋巴细胞：②小鼠的骨髓瘤细胞：③B淋巴细胞自身融合的细胞：④小鼠的骨髓密 。 主发酵结束后，发酵液还不适合饮用，需要在低温、环境中储存一段 细胞自身融合的细胞：⑤杂交瘤细胞。 时间进行后发酵，这样才能形成醇香柔和的窑湾绿豆烧。 (3)图中符合生产的杂交瘤细胞具有 的特点。最终可从 (4)为了筛选优势酿酒酵母菌，将从发酵罐中分离得到的酵母菌编号为T24和F12,进 或 中获得大量的单克隆抗体。 行酒精、SO2耐受性试验。试验结果如图3所示。 (4)为鉴定单克隆抗体识别抗原的具体区域，可将抗原(X蛋白)进行逐步截短，分别与 6f -T24 T24 纯化的单克隆抗体反应，实验结果如图所示(“十”表示有反应，“一”表示无反应，“aa”表 一FI2 -F12 示氨基酸)。 6 9121518 50100150200250 酒精浓度VV. SO,含量(mg X蛋白 153 + W 60 aa + L2 综合耐受性试验的研究结果，确定为优势葡萄酒酵母菌，理由有 La 153a R2 40 153 结果证明该单克隆抗体识别抗原(X蛋白)的区域大概为 (填“40~50”“40~55” 或“40一60”)位aa。 单元过关检测（十四）生物学第7页（共8页） 真题密卷 单元过关检测（十四）生物学第8页（共8页）真题密卷 单元过关检测 (5)柳枝中的纤维素、木质素和单宁含量较高，因 意义是柳枝能量释放缓慢，可以持续为马鹿提供 为柳枝中的这些物质难以消化，所以其消化和排 能量，使马鹿可以在食物缺乏的冬季维持较长时 空速率都较草本食物慢，从能量的角度分析，其 间的生存。 2025一2026学年度单元过关检测（十四） 生物学·发酵工程和细胞工程 一、选择题 用，C正确；透明圈与菌落直径比值越大芽孢杆菌 1.D【解析】颗粒饱满、质地坚实的高粱籽粒淀粉 分解蛋白质的能力越强，故透明圈与菌落直径比 含量高，有利于酵母菌发酵，产生更多的酒精，A 值较大的菌株为高产菌株，D错误。 正确；蒸煮时温度高可以杀死杂菌，还可使淀粉糊5.B【解析】在筛选菌株的时候，常用选择培养基， 化，有利于酵母菌中的淀粉酶充分发挥作用，B正 以木质素为唯一碳源，用稀释涂布平板法分离木 确；不停地搅拌可以使酵母菌与高粱籽粒充分接 质素分解菌，A正确；木质素降解过程使苯胺蓝培 触，增加氧气含量，有利于酵母菌大量繁殖，C正 养基脱色，脱色圈直径与菌落直径比值越大，说明 确：酵母菌进行酒精发酵时进行的是无氧呼吸，不 菌落周围的木质素被分解得越多，分解效果越好， 需要通入空气，D错误。 B错误；平板划线法是一种常用的微生物纯化方 2.A【解析】发酵期间，乳酸会不断积累，泡菜的酸 法，通过连续划线的方式，可以逐步稀释并分离出 味主要来自乳酸。在无氧条件下，乳酸菌将葡萄 单个微生物，最终得到纯种的菌落，因此在选择培 糖分解成乳酸时不产生CO2,泡菜坛只能装八成 养基上挑选出菌落后，再通过平板划线法进一步 满是为了防止发酵初期酵母菌细胞呼吸产生气体 纯化，C正确；木质素是植物细胞壁的主要成分之 使发酵液溢出，A错误；风干晾晒等干制手段能降 一，因此，在植物组织分解的过程中，木质素分解 低食品的含水量，使微生物不易生长和繁殖，进而 菌起着重要的作用，除了白蚁肠道这种特定的环 延长食品保存时间，B正确；低温或冷冻保存可降 境外，腐烂的树皮等植物残骸也是木质素分解菌 低微生物的酶活性，进而抑制其生命活动，防止食 的重要栖息地，所以，我们可以从这些环境中分离 物腐败，C正确；苹果醋是在有氧条件下，经醋酸 出木质素分解菌，D正确。 菌发酵制成，醋酸菌的代谢类型为异养需氧型，D 6.B【解析】为了从土壤样品中分离可以利用工业 正确。 废甲醇作为碳源的酵母，步骤②所用的培养基应 3.C【解析】制作传统泡菜需要的是乳酸菌（厌氧 以甲醇为唯一碳源，A错误；步骤③中应将温度约 50℃的培养基倒入培养皿混匀，冷凝后倒置培养， 菌)和酿造小米醋需要的是醋酸菌（好氧菌），前者 需要密封坛子，后者不需要密封坛子，A错误；发 一段时间后，可在培养基的表层和内部出现单菌 落，B正确：步骤④为利用平板划线法分离纯化的 酵过程实质是酶促反应过程，需要将温度设置在 过程，需从分离平板中挑取一个菌落进行划线，且 酶的最适温度下，使发酵效果最好，酶的作用条件 不需要测定酵母细胞中甲醇的含量，C错误；酵母 较温和，乳酸菌在发酵过程中产生乳酸增多，H 菌是兼性厌氧型微生物，扩大培养过程中需要酵 降低，导致相应酶活性降低，B错误，C正确；当没 母菌进行有氧呼吸大量繁殖，不能用真空发酵的 有糖源的时候，醋酸菌可以利用乙醇转化为乙醛， 方法来提取发酵产物，D错误。 再由乙醛转化为乙酸，D错误。 7.C【解析】上述实验过程中需要在无菌条件下进 4.D【解析】细菌中的芽孢杆菌较为耐高温，7080℃ 行操作，实验器械需要进行灭菌处理，为了提高 水浴10min的目的是杀死非芽孢杆菌，A正确； PLBs的诱导率，诱导时应注意对实验器械进行严 为防止杂菌污染，在酒精灯火焰旁将样品用无菌 格灭菌，实验材料进行消毒，但不一定需要光照，A 水稀释并涂布接种，B正确；蛋白酶降解培养基中 错误；题意显示PLBs类似愈伤组织，因此，图中过 的蛋白质可在菌落周围形成透明圈，奶粉富含蛋 程①为脱分化形成PLBs,过程②为植物细胞培养 白质，以奶粉为唯一氨源的培养基能起到选择作 过程，不属于再分化，B错误；生物碱不是细胞进 7 。14· ·生物学· 参考答案及解析 行正常生命活动必需的物质，因此为铁皮石斛的 的细胞，也有受体猴的细胞，故细胞中的核遗传物质 次生代谢物，其主要在③阶段合成并提取，C正 源于受体猴或供体猴，C错误；据图可知，图示过程 确；若生物碱产量/细胞数量的值越大，则该细胞 没有涉及体外受精技术，D错误。 系为高产细胞系，D错误。 二、选择题 8.D【解析】用促性腺激素对雌性杜泊羊进行处 13.A【解析】在粉碎的秸秆中接种菌T,培养一段 理，可达到超数排卵的目的，A正确；经获能处理 时间后发现菌T能够将秸秆中的纤维素大量分 的精子和成熟培养的卵子（减数第二次分裂中 期)，才能用于体外受精，B正确；采用胚胎分割技 解，但菌T自身不能吸收秸秆中的纤维素，而是 术产生同卵多胎的可能性是有限的，通常胚胎分 菌T能够分泌纤维素酶，纤维素酶能将纤维素最 割的次数越多，胚胎成活率越低，C正确；将早期 终分解为葡萄糖，A错误；稀释涂布平板法和平 胚胎植入同期发情处理的受体母羊内，一般不会 板划线法都是酵母菌纯培养时常用的接种方法， 发生免疫排斥反应，D错误。 前者适用于需要计数的实验，后者适用于需要分 9.C【解析】用百合的分生区作为外植体培育脱毒 离单菌落的实验，B正确；湿热灭菌法适用于用 苗，是因为该部位所含的病毒极少，甚至无病毒，A 具、水及培养基的灭菌，包括玻璃器具、水及培养 正确；过程①是脱分化形成愈伤组织的过程，该过 基等，干热灭菌法则是一种通过干热空气进行灭 程所用的培养基需要加入细胞分裂素和生长素，B 菌的方法，因此可分别使用湿热灭菌法和干热灭 正确；过程①②培育过程中，细胞所需的激素及其 比例等条件不同，因此，过程②需要根据细胞的需 菌法对淋洗液和培养瓶进行灭菌，C正确；本实 要更换培养基，C错误；培养基中的脱毒苗在移栽 验利用的发酵底物主要是秸秆分解产生的葡萄 前需要去除封口膜，从而降低湿度，然后在培养箱 糖，以粮食为原料发酵生产乙醇，其发酵底物主 中生长几日，D正确。 要是粮食中的淀粉分解产生的葡萄糖，二者所利 10.D【解析】过程①表示采用酶解法去除植物细 用的发酵底物均主要为葡萄糖，D正确。 胞的细胞壁，获取原生质体，植物细胞细胞壁的 14.CD【解析】浸米目的是使淀粉吸水膨胀，有利 成分是纤维素和果胶，故须利用纤维素酶和果胶 于后续蒸煮糖化，A正确；冷却时要缓慢地把蒸 酶去除细胞壁，但纤维素酶的化学本质为蛋白 煮后米饭的温度降至微生物发酵的适宜温度，避 质，不能经高压蒸汽灭菌，A错误；②过程须加入 免因温度过高使发酵菌种死亡，B正确；糖化发 较高浓度的聚乙二醇，目的是改变细胞膜的结 酵前期，应适当让空气进入，以促使酵母菌大量 构，B错误：测定原生质体密度时，可用血细胞计 数板进行计数，C错误；碘乙酰胺处理能够让细 繁殖，C错误；煎酒又称消毒，煎酒目的是杀死黄 胞质失活，从而简化筛选程序，D正确。 酒中的大部分微生物，减少有机物的消耗，以延 11.C【解析】提高生长素和细胞分裂素的比值可 长它的保存期，D错误。 促进愈伤组织形成根而不是芽，A错误；植物细 15.ACD【解析】细胞培养过程中细胞代谢需要氧 胞壁的主要成分是纤维素和果胶，故用果胶酶和 气，因此不能进行密闭培养，A错误；过程A为卵 纤维素酶去除愈伤组织的细胞壁获得原生质体， 母细胞的获得，在此之前往往需要超数排卵处 B错误；胚胎移植前，采集部分滋养层细胞进行 理，过程B为胚胎移植，B正确；移植后的囊胚进 遗传学检测，C正确；传代培养时需要营造无菌、 一步扩大，囊胚内的细胞不断增殖分化，并通过 无毒以及95%空气十5%C02的气体环境，D 剧烈有序的运动，使囊胚细胞重新组合，最终形 错误。 成原肠胚，原肠胚进一步分裂分化形成胚胎，C 12.A【解析】具有清晰GFP信号的囊胚，说明此囊 错误；嵌合体鼠的体细胞中含有大鼠和小鼠的细 胚被成功导入供体猴S细胞，才能被转移至代孕 胞，因此在有丝分裂后期染色体数目为80或84 雌猴体内，否则难以获得嵌合猴，A正确；代孕雌猴 条，D错误。 在移植嵌合囊胚前，需要饲喂含促孕激素的饲料进 16.BD【解析】该实验前必须给小鼠甲注射病毒 行同期发情处理，而不是促性腺激素，B错误；据图 A,该处理的目的是诱导小鼠甲产生能够分泌抗 可知，代孕雌猴分娩的嵌合猴体细胞中既有供体猴 病毒A抗体的B淋巴细胞，A正确；将小鼠体内 ·15· M 真题密卷 单元过关检测 取出的脾脏用剪刀剪碎后加入胰蛋白酶处理，使 降解泡菜中的亚硝酸盐，从而提高泡菜的品质和 其分散成单个细胞，B错误；为了得到能产生抗 安全性。 病毒A单克隆抗体的杂交瘤细胞，需要进行筛 18.(12分，除标注外，每空2分) 选。筛选1用特定的选择培养基筛选：未融合的 (1)碳源氮源 细胞和同种细胞融合后形成的细胞(“B-B”细胞、 (2)先接种病原菌孢子悬浮液，2h后再加入抗菌 “瘤-瘤”细胞)都会死亡，只有融合的杂交瘤细胞 肽溶液相比第2组，第5组混合后培养2h,使 (“B瘤”细胞)才能生长，C正确；筛选2用多孔培 抗菌肽与病原菌孢子充分接触，更有效发挥作用 养皿培养，在每个孔只有一个杂交瘤细胞的情况 (3分) 下开始克隆化培养和抗体检测，经多次筛选得到 (3)抗菌肽破坏病原菌孢子的细胞膜，细胞内容 能产生特异性抗体的细胞群，该过程用到抗原抗 物释放(3分) 体杂交，获取的杂交瘤细胞通过培养获得大量的 【解析】(1)微生物生长一般都需要水、无机盐、 分泌特异性抗体的杂交瘤细胞，D错误。 氮源、碳源等营养物质。 三、非选择题 (2)根据表中接种处理方式可知，1组为对照组只 17.(12分，每空2分) 接种病原菌，2、3、5组均接种了等量且适量的抗 (1)接种乳酸菌，缩短发酵时间乳酸菌是厌氧 菌肽溶液与病原菌孢子悬浮液，但每组的接种顺 菌，加盖并水封能形成无氧环境，有利于乳酸菌 序不同，说明自变量为抗菌肽溶液与病原菌孢子 的繁殖，同时又能抑制好氧菌的生长 悬浮液的接种顺序，2组与5组均为二者先混和， (2)灼烧灭菌形状、大小、隆起程度、颜色 但2组混合后直接接种，5组混合后先培养2h (3)B在产酸能力差异不大的情况下，B菌株的 再接种，结合第3组先加入抗菌肽2h后接种病 亚硝酸钠降解能力最强 原菌孢子可分析得出，4组应与3组接种顺序相 【解析】(1)传统泡菜制作时加入“陈泡菜水”的 反，即先接种病原菌孢子2h后再加入抗菌肽溶 目的是提供乳酸菌菌种，因为“陈泡莱水”中富含 液；抗菌肽直接作用于病原体，因此先混合培养 乳酸菌，这些乳酸菌可以促进泡菜的发酵过程。 2h可使二者充分接触，使抗菌肽充分发挥抑菌 发酵过程中泡莱罐要加盖并水封，原因是乳酸菌 作用，再接种后，病原菌孢子数量大大减少，引起 是厌氧生物，在无氧条件下才能正常发酵产生乳 酸，同时水封还可以防止外界杂菌进入泡菜罐保 的病斑直径下降。 证泡菜的品质。 (3)白地霉孢子与抗菌肽在无菌水中混合培养一 (2)在筛选分离优质乳酸菌操作过程中，为了保 段时间后，溶液电导率明显上升，说明溶液中离 证无菌操作，接种工具需要进行灼烧灭菌。此 子浓度增大，增加的离子只能来源于白地霉孢子 外，我们可以通过观察菌落的形状、大小、隆起程 细胞中，因此推测抗菌肽抑制白地霉孢子的作用 度和颜色等特征，初步鉴别出乳酸菌。乳酸菌的 机制可能是抗菌肽破坏病原菌孢子的细胞膜，使 菌落通常具有特定的形态和颜色，这些特征可以 细胞内容物释放，杀死细胞。 帮助我们初步筛选出优质的乳酸菌。 19.(12分，除标注外，每空2分) (3)为了获得优质乳酸菌，研究人员将从泡菜汁 (1)卵母细胞 中筛选获得的乳酸菌菌株，接种到液体培养基 (2)体积大、易操作、营养物质丰富卵母细胞需 中，并在37℃、72h的条件下进行培养。然后进 要借助精子中的物质来完成减数分裂等一系列 行产酸、降亚硝酸盐能力测定实验，结果如表所 过程，如果只注入精子的细胞核则无法完成这些 示。在该条件下，最理想的菌株是B,因为与表中 过程(3分) 其他菌株相比，B菌株的产酸能力与其他菌株相 (3)Y染色体比X染色体短小，其携带的基因较 差不大，但亚硝酸钠降解能力也最强。这意味着 少，可能缺乏维持单倍体胚胎干细胞系构建和发 B菌株不仅可以快速发酵产生乳酸，还可有效地 育所必需的基因(3分)雌性 ·16· ·生物学· 参考答案及解析 【解析】(1)分析题图可知，在方式一中，一般用 (4)根据图可知，1~50aa序列片段与抗体无反应， 显微操作法对MⅡ中期卵母细胞去核，方式一成 而1~55aa序列片段与抗体有反应，说明该单克隆 功获得“人造精子”的关键操作是及时去除卵母 抗体识别的区域大概为50~55位aa。50~153aa 细胞的细胞核。 序列片段与抗体无反应，而40~153aa序列片段与 (2)从形态结构方面考虑，卵母细胞作为受体细胞具 抗体有反应，说明该单克隆抗体识别的区域大概为 有体积大、易操作、营养物质丰富等优点，故方式二 40~50位aa。综上分析可知，该单克隆抗体识别抗 中选择卵母细胞作为受体细胞：操作中注入完整的 原(X蛋白)的区域大概为40~55位aa。 精子而非精子的细胞核，原因是卵母细胞需要借助 21.(12分，除标注外，每空1分) 精子中的物质来完成减数分裂等一系列过程，如果 (1)消毒（去除杂菌）温度过高杀死酒曲中的微 只注入精子的细胞核则无法完成这些过程」 生物 (3)该实验无法获得含Y染色体的单倍体胚胎千 (2)平板划线法6增加菌种数量液体 细胞，其最可能原因可能是Y染色体上的基因无 (3)缺氧和酸性环境条件下酵母菌可以生长繁 法支持单倍体胚胎干细胞的存活（或Y染色体上 殖，而绝大多数其他微生物因无法适应而受到抑 缺少支持单倍体胚胎干细胞存活的基因)。根据 制(2分)密闭 题千信息“构建成功的该动物单倍体胚胎千细胞 (4)F12酒精浓度与S02含量相同的条件下， 系，均为性染色为X染色体的细胞系，无法获得 酵母菌编号为F12的发酵速率均高于T24,说明 性染色体为Y的单倍体胚胎干细胞系”，故若将 的编号为F12酵母菌的耐受性高于编号为T24 成功构建的“人造精子”与卵细胞结合繁殖正常 的酵母菌(2分) 的二倍体动物，该动物的性别是雌性。 【解析】(1)蒸稻壳的目的除了去除稻壳中残留的 20.(12分，除标注外，每空2分) 农药、霉烂味，还有消毒（去除杂菌）的作用，蒸馏 (1)动物细胞培养(1分)动物细胞融合(1分) 后，温度较高，通常需要进行冷却，再加入酒曲，其 (2)①②③④ 目的是防止温度过高杀死酒曲中的微生物 (3)既能无限增殖、又能产生所需抗体小鼠腹 (2)纯化菌种时，图2的接种方法是平板划线法，在 水培养液 第一次接种和每次接种后都需要灼烧接种环，图2 (4)40~55 中一共划线5次，故接种环需要灼烧6次，此外还可 【解析】(1)单克隆抗体的制备利用了动物细胞 采用稀释涂布平板法接种。两种方法的原理相似， 培养和动物细胞融合技术，让B淋巴细胞和骨髓 都是使聚集的菌种分散开，最后在平板上形成单个 瘤细胞融合。 菌落。挑取单菌落进行扩大培养，其目的是增加菌 (2)特定培养基培养细胞的目的是筛选出既能大 种数量，使其处于对数生长期，即菌体代谢旺盛，增 量增殖、又能产生特异性抗体的杂交瘤细胞，因 殖速度快，扩大培养使用液体培养基。按物理性质 此其他的细胞都不能在此培养基上生存，在这种 分类，该培养基属于液体培养基。 培养基上不能存活和繁殖的细胞有未融合的细 (3)制作窑湾绿豆烧的操作中没有进行严格的灭 胞和同种融合的细胞，包括①B淋巴细胞、②小 菌处理，但窑湾绿豆烧并没有被杂菌污染而腐 鼠的骨髓瘤细胞、③B淋巴细胞自身融合的细 败，这是因为缺氧和酸性环境条件下酵母菌可以 胞、④小鼠骨髓瘤细胞自身融合的细胞。 生长繁殖，而绝大多数其他微生物因无法适应而 (3)图中符合生产的杂交瘤细胞具有既能无限增 受到抑制。主发酵结束后，发酵液还不适合饮 殖、又能产生所需抗体的特点；对经选择培养的 用，需要在低温、密闭环境中储存一段时间进行 杂交瘤细胞进行克隆化培养和抗体检测，多次筛 后发酵，这样才能形成澄清、成熟的窑湾绿豆烧。 选后可获得足够数量的能分泌所需抗体的细胞， (4)据图3分析可知酒精浓度与SO2含量相同的 再将其注射到小鼠的腹腔内增殖或在体外培养 条件下，酵母菌编号为F12的发酵速率均高于 合成抗体，故最终能从小鼠腹水或培养液中获得 T24,说明编号为F12酵母菌的耐受性高于编号 大量的单克隆抗体。 为T24的酵母菌。 ·17· 7