单元过关(14)发酵工程和细胞工程-【衡水真题密卷】2026年高考生物单元过关检测（重庆安徽专版）

用信念去坚持你的梦想，让它成为你前进的动力和信念 2025一2026学年度单元过关检测（十四）》 70-80℃水济10min 稀释涂布法 奶粉培养基 班级 卺题 生物学·发酵工程和细胞工程 土壤采样一样品处理一分离、纯化 →初步筛选 姓名 本试卷总分100分，考试时间75分钟。 A.70~80℃水浴10min的目的是杀死部分非芽孢杆菌 一、选择题：本题共15小题，每小题3分，共45分。在每小题给出的四个选项中，只有一项 B.在酒精灯火焰旁将样品用无菌水稀释并涂布接种 得分 是符合题目要求的。 C.以奶粉为唯一氮源的培养基能起到选择作用 D.透明圈与菌落直径比值较小的菌株为高产菌株 题号123456789101112131415 5.野生型大肠杆菌能够在基本培养基上生长，经诱变获得了两种营养缺陷型的突变体M, 答案 N,且单独培养时均不能在基本培养基上生长。若将两种突变体在完全培养基（液体）中 1.高粱酒是一种传统的发酵酒，家庭制作高粱酒包括选料浸泡、蒸煮糊化、冷却拌醅、人桶 混合培养一段时间后，再采用稀释涂布平板法接种在基本培养基平板上，培养后长出了 发酵几个步骤。下列分析错误的是 () 大肠杆菌菌落。下列叙述正确的是 () A.“选料浸泡”时应选择颗粒饱满、质地坚实、淀粉含量高的高粱籽粒进行浸泡 A.野生型大肠杆菌诱变时发生了基因突变或染色体变异 B.“蒸煮糊化”时不仅可以杀死杂菌，还可使淀粉糊化，有利于后期淀粉酶发挥作用 B.突变体M和N能相互为对方提供所缺营养物质 C.“冷却拌醅”时需不停地搅拌，有利于酵母菌与高粱籽粒充分接触并大量繁殖 C.在混合培养期间突变体M和N发生了遗传物质的交流 D,混合培养获得的大肠杆菌都能在基本培养基中生长 D.“人桶发醉”时为了加快和加大酒精的产生，需要定时往发酵桶中通人空气 6.纤维素、半纤维素，木质素参与构成植物细胞壁。可白蚁的肠道中分离木质素分解菌来 2.青梅果实中含有大量的齐墩果酸、丙酮酸等活性物质，常制作成具有保健功能的青梅饮 降解利用木质素，已知木质素降解过程使苯胺蓝培养基脱色。下列说法错误的是 品，其中青梅酒和青梅醋深受人们喜爱，其制作流程如图。下列叙述正确的是() () 青的鲜果一孩一肩年白的雪有球专器面一消清分有一后发带一式商装餐一有将酒 A,以木质素为唯一碳源，用稀释涂布平板法分离木质素分解菌 反应2一→过选一灭菌装瓢一→青棉附 生物C B.脱色圈直径与菌落直径比值越小，木质素分解菌分解效果越好 A.生物A和生物C都能进行无氧呼吸并产生COg C.在选择培养基上挑选出菌落后，再通过平板划线法进一步纯化 D,除了白蚁肠道，还可从腐烂的树皮表面分离出木质素分解菌 B.可以用胰蛋白酶和果胶酶进行酶解以破坏细胞壁 7.某些酵母可以利用工业废甲醇作为碳源进行培养，这样既可减少污染又可降低生产成 C.由反应①到反应②需要提高温度并改善通气状况 本。研究人员拟从土壤样品中分离该类酵母，并进行大量培养，如图为操作流程。下列 D.可用澄清的石灰水来检测溶液B中是否含有乙醇 说法正确的是 () 3.腌制、风干、酱泡、冷冻等是中国历史悠久的食物保存方式。蕴涵了中国人的智慧，呈现 着中国人的生活。下列叙述错误的是 () A.为防止乳酸菌呼吸作用产生的CO2使发酵液溢出，泡菜坛只能装八成满 B.风干晾晒能降低食品的含水量，使微生物不易生长和繁殖，从而延长食品保存时间 ①称量土样 2梯度稀释 ①平板浇筑分离④线纯化⑤扩大培养 C.低温或冷冻保存能降低酶的活性，抑制微生物的生命活动，防止食物腐败 A,步骤②所用的培养基应以甲醇为碳源 D,用于制作苹果醋的微生物主要是醋酸菌，其代谢类型为异养需氧型 B.步骤③中应将温度约50℃的培养基倒入培养m混匀 4.芽孢杆菌耐高温，是常见的蛋白酶生产菌。培养基中的蛋白质被蛋白酶降解后，会在菌 C.进行步骤④前需从分离平板中挑取多个菌落，分别测定酵母细胞中甲醇的含量 落周围形成透明圈。如图是筛选蛋白酶高产菌株的过程。下列叙述错误的是() D,步骤⑤可用真空发酵的方法来提取发酵产物 单元过关检测（十四）生物学第1页（共8页） 真题密卷 单元过关检测（十四）生物学第2页（共8页） 10 8.滥用抗生素会导致“超级细菌”（对多种抗生素有高耐药性）的产生。某实验小组研究细 12.疣粒野生稻对水稻白叶枯病具有高度的抗性。科研人员利用疣粒野生稻和栽培稻的 菌产生青霉素抗性与青霉素之间的关系，过程及结果如图。下列叙述正确的是() 原生质体进行体细胞杂交培育抗白叶枯病水稻，主要流程如图所示。下列叙述正确的是 () 同时分别原位接种 栈培后愈街 裁培相 ● 平行转移全部菌落 组阴军胞 原生质体 碘乙酰胺处玛 背通细菌培养基 聪合的 多个含等量青霉素的培养基 射线处使核中黄体 2 再生植株 A.可通过提高抗生素浓度避免“超级细菌”的产生 优粒野生稻 疣粒野生稻 愈伤组织细跑 原生随奉 染色质受损 B.用接种环在培养基上连续划线获得实验菌落 C,图中含青霉素的培养基的菌落周围会出现抑菌圈 A.①过程为去除细胞壁，需加人经高压蒸汽灭菌的纤维素酶液 B.②过程须加人较高浓度的聚乙二醇，目的是维持一定的渗透压 D.细菌培养基在使用前、后均需经过灭菌处理 C,测定原生质体密度时，可用血细胞计数板或稀释涂布平板法 9.生物碱是一类碱性含氮化合物，它不是植物生长必需的物质，在植物体内含量少，有治 D.碘乙酰胶处理目的是让细胞质失活，以简化筛选程序 疗疾病的作用，可从植物中获取。如图是以铁皮石解为材料，运用组织培养技术培养拟 13.作为野生植物的后代，许多栽培植物与它们的祖先产生了生殖隔离。野生型油菜抗 原球茎（简称PLBs,类似愈伤组织）生产生物碱的实验流程。下列叙述正确的是() 病能力强，但出油率低，栽培油菜品种出油率高，但抗病能力低。科学家利用植物体 酒生有养买冈选并离培热商产相胞系不取件，修实验结闲 细胞杂交技术培有具有较强抗病能力的油菜新品种，培有过程如图所示。下列叙述 错误的是 () A.为了提高PLBs的诱导率，诱导时应注意严格灭菌并提供光照 一秦优797”油菜品种胚轴细胞 B.图中过程①为脱分化形成PLBs,过程②为再分化生产生物碱 ⊙·⊙ C.生物碱为铁皮石解的次生代谢物，主要在③阶段合成并提取 @里G D.若细胞数量/生物碱产量的值越大，则该细胞系为高产细胞系 野生型油菜叶肉细胞 10.杜泊羊以其生长速度快、肉质好等优点，成为受广大消费者喜欢的绵羊品种。科研工 A.进行①处理时能用纤维素酶和果胶酶 作者欲采用胚胎工程快速繁殖杜泊羊。下列叙述错误的是 () B.需要在低渗溶液环境下进行①处理 A,用促性腺激素处理供体杜泊羊可诱导卵巢排出更多的卵子 C,②过程中经PEG处理可诱导原生质体融合 B.经获能处理的精子和成熟培养的卵子，才能用于体外受精 D.细胞融合后，显微镜观察选用体积大、含叶绿体的细胞用于继续培养 C.对桑葚胚或囊胚进行胚胎分割的次数越多，胚胎成活率越低 14.植物组织培养和动物细胞培养及胚胎工程相关技术的应用取得了巨大的成就，为人类 的生产生活带来了很多积极的意义。下列叙述正确的是 () D.将早期胚胎植人同期发情处理的受体母羊内，无免疫排斥反应 A提高生长素和细胞分裂素的比值可促进愈伤组织形成丛生芽 11.《本草纲目》记载，樱桃具有利脾、止泻的功效。樱桃中的槲皮素等酚类化合物具有抗 B.用果胶酶和胶原蛋白酶去除愈伤组织的细胞壁获得原生质体 氧化活性。研究人员利用组织培养技术繁育樱桃优良品种，满足人们食用和药用需 C,胚胎工程中胚胎移植前可采集滋养层细胞进行遗传学检测 要。下列叙述错误的是 () D.动物细胞在进行传代培养时需要营造无菌、无毒以及95%空气+5%O2的气体环境 A.应用微型繁殖技术可获得大量腰桃脱毒苗 15.2023年11月，我国科研人员利用食蟹猴培育出世界首只胚胎干细胞高贡献的活体嵌 B.可选用樱桃幼嫩的芽原基和叶原基作外植体 合猴，该研究部分过程如图所示，由于供体猴胚胎干细胞在体外培养和妊娠期间高度 C.外植体形成完整植株需经过脱分化和再分化过程 嵌合于受体胚胎，使得后代活体嵌合猴的各种组织中，高达90%的细胞来源于供体胚 D.应用樱桃细胞培养可工厂化生产初生代谢产物槲皮素 胎干细胞。下列叙述正确的是 () 10 单元过关检测（十四）生物学第3页（共8页） 真题密卷 单元过关检测（十四）生物学第4页（共8页） C饼格态他7冈 (2)为研究抗菌肽对白地霉的抑菌效果，现用无菌打孔器在果实相同部位打孔，每个打 孔处接种相同体积的处理液，比较15天后的病斑直径。各组处理及结果见表。 GFP+供休猴ES细腹受体酸桑其胚嵌合囊胚 代孕雕觐活体嵌合酸 注：GFP指表达绿色荧光标记蛋白，可监测供体干细胞的存活情况以及其在嵌合体不同组织中的分 组别 1 2 3 4 5 先加人抗菌肽溶 化、分布情况 接种一定体积的抗菌肽溶液与病 抗盥肽溶液与病原菌 接种处 液，2h后接种 A.具有清晰GFP信号的囊胚才能被转移至代孕雌猴体内，否则难以获得嵌合猴 病原菌孢子悬原菌孢子悬浮液 孢子悬浮液混合，培 理方式 病原菌孢子悬 B.代孕雌猴在移植嵌合囊胚前，需要饲喂含促性腺激素的饲料进行同期发情处理 浮液 混合后直接接种 养2h后接种 浮液 C,由图可知，代孕雌猴分娩的嵌合猴体细胞中，核遗传物质的一半来源于代孕雌猴 15天后 D.图示过程中涉及动物细胞培养、体外受精、早期胚胎培养和胚胎移植等工程技术 病斑直 41.3 13.9 29.3 28.7 11.2 二、非选择题：本题共5小题，共55分。 径/mm 16.(11分)传统的泡菜制作工艺是以新鲜蔬菜为原料，经过择菜，洗菜、切分与晾干，加入 表中数据表明抗菌肽对白地霉有一定的抑菌效果，且抑菌效果与抗菌肽、病原菌孢子 煮沸冷却的盐水和一些“陈泡菜水”发酵制作而成。在泡菜腌制过程中会有亚硝酸盐 悬浮液接种顺序有关，表中X为 。与第2组相比， 产生。筛选分离优质乳酸菌，既可以抑制有害菌生长，又可以快速产酸、降解亚硝酸 第5组抑菌效果更好的可能原因是 盐，是提升泡菜品质的重要途径。具体筛选流程为：对经多次发酵的泡菜汁进行过滤， (3)一般情况下，电导率和离子浓度呈正相关，通过测量溶液电导率可以反映出溶液中 然后取滤液进行梯度稀释，再用涂布平板法接种到乳酸菌鉴别培养基上进行筛选分 离子浓度的大小。研究人员将白地霉孢子与抗菌肽在无菌水中混合，测定电导率，培 离，不断重复，直至分离纯化出纯菌落。请回答下列问题： 养一段时间后，再次测定电导率，结果发现电导率明显升高，据此推测抗菌肽抑制白地 (1)传统泡菜制作时加人“陈泡菜水”的目的是 :发酵 霉孢子的作用机制可能是 过程中泡菜罐要加盖并水封，原因是 18.(12分)“人造精子”是一种可替代精子使卵细胞“受精”的单倍体胚胎干细胞。科学家 (2)在筛选、分离优质乳酸菌操作过程中，接种工具需要」 灭菌。此外，可通过 将某种动物单倍体胚胎干细胞注射到卵细胞中成功培育出健康的该种动物。该技术 观察菌落的 等特征（至少写出两个），初步鉴别出乳酸菌。 不仅为动物模型的获得提供了新手段，同时也为动物生殖、遗传与发育调控机理研究 (3)为获得优质乳酸菌，研究人员将从泡菜汁中筛选获得的3株乳酸菌，接种到液体培 提供了新思路。如图是科研人员利用胚胎操作技术，通过两种方式获得重组细胞，进 养基中，在37℃条件下培养72h,进行产酸、降亚硝酸盐能力测定实验，结果如表所 而培育出该种动物“人造精子”的流程。请回答下列问题： 示。在该条件下，最理想的菌株是 ,理由是 器精子 方式一 菌株培养液pH 亚硝酸纳降解能力(%) 去核 注人精 本 A 3.6 72.5 构建 月式二 B 3.7 97.8 减数分裂Ⅱ中明 甲母相据 3.6 88.2 单信体扩增需单仿休杯者 细监分远。方干加电系 17.(10分)柑橘酸腐病是由白地霉引起的柑橘贮藏期常见的病害之一。抗菌肽是一种抑 (1)方式一成功获得“人造精子”的关键操作是及时去除 的细胞核。 菌活性强、无环境污染的生物多肽，目前已用于多种农业病菌的防治。研究人员研究 (2)方式二中选择卵母细胞作为受体细胞的原因是卵母细胞具有 了抗菌肽对白地霉的抑菌效果，并且对其作用机制进行了探究。回答下列问题： (答出两点即可)的优点，操作中注入完整的精子而非精子的细胞核，原 (1)白地霉从柑橘中获得其生长繁殖所需的水、无机盐、和等营养物质。 因是 单元过关检测（十四）生物学第5页（共8页） 真题密卷 单元过关检测（十四）生物学第6页（共8页） 10 (3)目前，构建成功的该动物单倍体胚胎干细胞系，均为性染色为X染色体的细胞系， 红聚，大 菌种这有、扩大培养 麦等原料 无法获得性染色体为Y的单倍体胚胎干细胞系，这与该生物Y染色体比X染色体短 燕稻壳 珠和震间一怜却接种发副勾免一密置一分为 小有关。据此推测可能的原因是 母槽一 熬射的中药 。若将成功构建的“人造精子”与卵细胞结合 繁殖正常的二倍体动物，该动物的性别是 (1)蒸稻壳的目的除了去除稻壳中残留的农药，霉烂味，还有 作用。蒸 19.(11分)尼帕病毒(NV)是一种新型人畜共患病毒，该病毒的结构蛋白(X蛋白)可诱导 馏后要进行快速冷却，目的是为了防止 动物机体产生中和抗体，从而防御病毒感染。制备单克隆中和抗体的流程如图所示。 (2)菌种选育过程，为了纯化酵母菌，操作如图2所示。该过程的接种方法是 回容下列问题： ,接种工具进行了次灼烧灭菌。扩大培养目的是 骨随馏 ,使用的培养基按物理性质分类，属于培养基。 3细靴 X蛋白 特定培 选 B淋巴 多种杂交 杂交 抗体检 优质革克隆 细胞 细胞 萄细胞 测筛选 中和抗体 (1)制备单克隆抗体过程中涉及的动物细胞工程技术包括 花 多 (3)窑湾绿豆烧的生产流程中，没有严格的灭菌操作，但发酵过程几乎不会受杂菌污染 (2)在特定培养基Y中不能存活的细胞包括下列 影响，这是因为 ①B淋巴细胞：②小鼠的骨髓瘤细胞：③B淋巴细胞自身融合的细胞，④小鼠的骨髓瘤 。主发酵结束后，发酵液还不适合饮用，需要在低温、环境中储存一段 细胞自身融合的细胞：⑤杂交瘤细胞。 时间进行后发酵，这样才能形成醇香柔和的窑湾绿豆烧。 (3)图中符合生产的杂交瘤细胞具有 的特点。最终可从 (4)为了筛选优势酿酒酵母菌，将从发酵罐中分离得到的酵母菌编号为T24和F12,进 或中获得大量的单克隆抗体 行酒精、SO2附受性试验。试验结果如图3所示。 (4)为鉴定单克隆抗体识别抗原的具体区域，可将抗原(X蛋白)进行逐步截短，分别与 纯化的单克降抗体反应，实验结果如图所示(“十”表示有反应，“一”表示无反应，“a”表 -T24 T24 -F12 F12 示氨基酸)。 30 6 12,1518 50100150200250 X白 153 酒精浓度VV,) S0含量mg/L) M aa LI 图3 50m L3 综合耐受性试验的研究结果，确定为优势葡萄酒酵母菌，理由有 RI 153am R2 155 aa 结果证明该单克隆抗体识别抗原(X蛋白)的区域大概为 (填“40~50"“40~55” 或“4060”)位aa。 20.(11分)窑湾绿豆烧酒，香醇甜美，久享盛誉，被列为江苏省新祈市地方特产。它是以优 质白酒为基酒，佐以红参、桂花、砂仁、杜仲等50余味名贵中药材和冰糖勾兑而成，其 色宛如绿豆汤。制作的工艺流程如图1所示。请回答下列问题： 10 单元过关检测（十四）生物学第7页（共8页） 真题密卷 单元过关检测（十四）生物学第8页（共8页）·生物学· 参考答案及解析 (3)本实验的目的是探究不同培肥模式对沙化草 (2)采食粗纤维植物需要较长时间消化，消化系 地土壤改良与植被恢复的影响，本实验的自变量 统需休息以消化吸收已采食食物(2分) 为培肥模式不同，因变量为土壤PH、土壤有机质 (3)气温影响马鹿采食活动率基因 及地上植被盖度和生物量的变化，因此，实验思 (4)采食活动主要集中在早晨和傍晚，中午采食 路为：①设置施用无机肥(N)、有机肥(O)、有机 活动率低(2分)》 肥+无机肥配施(NO),以不施肥为对照(CK), (5)纤维素慢柳枝能量释放缓慢，能使马鹿 分析不同培肥模式下土壤pH、土壤有机质及地 在冬季维持较长时间生存 上植被盖度和生物量的变化特征，以筛选适宜的 【解析】(1)美洲马鹿采食植物，属于初级消费 培肥模式。②实验方法：在每年生长季前期对各 者，在生态系统成分中为消费者；该区域所有生 个实验区进行不同模式的培肥，两年后在每个实 物构成生物群落。 验区随机选取样方，避免人为因素的干扰，齐地 (2)自然状态下，美洲马鹿在饥饿指数达到0.3 面剪取植被地上部分，烘干（或千燥）后称量计算 时停止采食，是因为采食粗纤维植物需要较长时 地上生物量。采集土壤样品进行一定处理后，用 间的消化，消化系统需要休息一段时间来消化和 于测定土壤DH、土壤有机质含量等。③实验结 吸收已经采食的食物，之后才继续采食。 果：不同培肥处理对沙化草地土壤pH、土壤有机 (3)由图1可知，随着温度升高，采食活动率先升 质及植被盖度和地上生物量的影响如图甲、乙、 高后降低，气温影响美洲马鹿的采食活动率；马 丙所示。④实验分析：根据实验结果，施用无机 鹿有白尾和黑尾之分，这是同种生物之间的差 肥能提高土壤有机质的含量、提高植被盖度和地 异，体现了基因多样性。 上生物量，但会导致土壤酸化（或pH下降），进 (4)由图2可知，美洲马鹿在5月份的采食活动 而影响植被的生长；若配施有机肥有减缓作用。 主要集中在早晨和傍晚，中午采食活动率低。 基于以上实验结果可知无机肥和有机肥混合使 (5)柳枝中的纤维素、木质素和单宁含量较高，因 用效果更好，为进一步优化培肥模式，提高沙化 为柳枝中的这些物质难以消化，所以其消化和排 草地生态修复效率，则可进一步研究的方向是无 空速率都较草本食物慢，从能量的角度分析，其 机肥、有机肥的种类或配比对沙化草地生态修复 意义是柳枝能量释放缓慢，可以持续为马鹿提供 的作用。 能量，使马鹿可以在食物缺乏的冬季维持较长时 20.(11分，除标注外，每空1分) 间的生存。 (1)消费者生物群落 2025一2026学年度单元过关检测（十四） 生物学·发酵工程和细胞工程 一、选择题 2.C【解析】生物A为酵母菌，生物C为醋酸菌，前 1.D【解析】颗粒饱满、质地坚实的高粱籽粒淀粉 者无氧呼吸能产生CO2,后者无氧呼吸不能产生 含量高，有利于酵母菌发酵，产生更多的酒精，A CO2,A错误；根据酶的专一性，可以用纤维素酶 正确；蒸煮时温度高可以杀死杂菌，还可使淀粉糊 和果胶酶进行酶解以破坏细胞壁，B错误；由酒精 化，有利于酵母菌中的淀粉酶充分发挥作用，B正 发酵转变为醋酸发酵，需要通入无菌空气、提高发 确；不停地搅拌可以使酵母菌与高粱籽粒充分接 触，增加氧气含量，有利于酵母菌大量繁殖，C正 酵温度，C正确；澄清的石灰水是用来检测CO2 确：酵母菌进行酒精发酵时进行的是无氧呼吸，不 的，检测是否含有乙醇需要用酸性重铬酸钾溶液， 需要通入空气，D错误。 D错误。 ·13· 10 真题密卷 单元过关检测 3.A【解析】发酵期间，乳酸会不断积累，泡菜的酸」6.B【解析】在筛选菌株的时候，常用选择培养基， 味主要来自乳酸。在无氧条件下，乳酸菌将葡萄 以木质素为唯一碳源，用稀释涂布平板法分离木 糖分解成乳酸时不产生CO2,泡莱坛只能装八成 质素分解菌，A正确；木质素降解过程使苯胺蓝培 满是为了防止发酵初期酵母菌细胞呼吸产生气体 养基脱色，脱色圈直径与菌落直径比值越大，说明 使发酵液溢出，A错误；风干晾晒等干制手段能降 菌落周围的木质素被分解得越多，分解效果越好， 低食品的含水量，使微生物不易生长和繁殖，进而 B错误；平板划线法是一种常用的微生物纯化方 延长食品保存时间，B正确；低温或冷冻保存可降 法，通过连续划线的方式，可以逐步稀释并分离出 低微生物的酶活性，进而抑制其生命活动，防止食 单个微生物，最终得到纯种的菌落，因此在选择培 物腐败，C正确；苹果醋是在有氧条件下，经醋酸 养基上挑选出菌落后，再通过平板划线法进一步 菌发酵制成，醋酸菌的代谢类型为异养需氧型，D 纯化，C正确；木质素是植物细胞壁的主要成分之 正确。 一，因此，在植物组织分解的过程中，木质素分解 4.D【解析】细菌中的芽孢杆菌较为耐高温，70~80℃ 菌起着重要的作用，除了白蚁肠道这种特定的环 水浴l0min的目的是杀死非芽孢杆菌，A正确； 境外，腐烂的树皮等植物残骸也是木质素分解菌 为防止杂菌污染，在酒精灯火焰旁将样品用无菌 的重要栖息地，所以，我们可以从这些环境中分离 水稀释并涂布接种，B正确；蛋白酶降解培养基中 出木质素分解菌，D正确。 的蛋白质可在菌落周围形成透明圈，奶粉富含蛋7.B【解析】为了从土壤样品中分离可以利用工业 白质，以奶粉为唯一氨源的培养基能起到选择作 废甲醇作为碳源的酵母，步骤②所用的培养基应 用，C正确；透明圈与菌落直径比值越大芽孢杆菌 以甲醇为唯一碳源，A错误；步骤③中应将温度约 分解蛋白质的能力越强，故透明圈与菌落直径比 50℃的培养基倒入培养皿混匀，冷凝后倒置培养， 值较大的菌株为高产菌株，D错误。 一段时间后，可在培养基的表层和内部出现单菌 5.B【解析】野生型大肠杆菌是原核生物，其遗传 落，B正确；步骤④为利用平板划线法分离纯化的 物质主要位于拟核的DNA上，并没有像真核生物 过程，需从分离平板中挑取一个菌落进行划线，且 那样的染色体结构。因此，野生型大肠杆菌在诱 不需要测定酵母细胞中甲醇的含量，C错误；酵母 变时不可能发生染色体变异，只能发生基因突变， 菌是兼性厌氧型微生物，扩大培养过程中需要酵 A错误：根据题目描述，突变体M和N都是营养 母菌进行有氧呼吸大量繁殖，不能用真空发酵的 缺陷型，且单独培养时均不能在基本培养基上生 方法来提取发酵产物，D错误。 长。但当它们在完全培养基中混合培养一段时间 8.D【解析】提高抗生素的浓度可能增加“超级细 后，再接种到基本培养基上却长出了大肠杆菌菌 菌”的产生概率，A错误；用接种环在培养基上连续 落。这说明在混合培养期间，突变体M和N能够 划线获得单个菌落是平板划线法，图示实验菌落 相互为对方提供所缺失的营养物质，从而使双方 (分布较均匀)不是通过平板划线法获得的，是用稀 都能在基本培养基上生长，B正确；根据题目描 释涂布平板法获得的，B错误；图示在含有青霉素的 述，突变体M和N都是营养缺陷型，且单独培养 培养基中有菌落存活，说明菌体对青霉素具有抗 时均不能在基本培养基上生长，所以在混合培养 性，菌落周围没有抑菌圈，C错误；细菌培养基在使 期间，突变体M和N能够相互为对方提供所缺失 用前灭菌是防止杂菌污染，使用后灭菌是为了防止 的营养物质，并不一定是发生了遗传物质的交流， 污染环境和感染操作人员，D正确。 C错误；虽然混合培养后接种到基本培养基上长9.C【解析】上述实验过程中需要在无菌条件下进 出了大肠杆菌菌落，但这并不意味着混合培养获 行操作，实验器械需要进行灭菌处理，为了提高 得的所有大肠杆菌都能在基本培养基中生长。只 PLBs的诱导率，诱导时应注意对实验器械进行严 有那些通过相互提供缺失营养物质而恢复了生长 格灭菌，实验材料进行消毒，但不一定需要光照，A 能力的突变体或重组体才能在基本培养基上生 错误；题意显示PLBs类似愈伤组织，因此，图中过 长，D错误。 程①为脱分化形成PLBs,过程②为植物细胞培养 10 。14· ·生物学· 参考答案及解析 过程，不属于再分化，B错误；生物碱不是细胞进 素酶去除愈伤组织的细胞壁获得原生质体，B错 行正常生命活动必需的物质，因此为铁皮石斛的 误；胚胎移植前，采集部分滋养层细胞进行遗传学 次生代谢物，其主要在③阶段合成并提取，C正 检测，C正确：传代培养时需要营造无菌、无毒以及 确；若生物碱产量/细胞数量的值越大，则该细胞 95%空气十5%C02的气体环境，D错误。 系为高产细胞系，D错误。 15.A【解析】具有清晰GFP信号的爱胚，说明此 10.D【解析】用促性腺激素对雌性杜泊羊进行处 囊胚被成功导入供体猴ES细胞，才能被转移至 理，可达到超数排卵的目的，A正确；经获能处理 代孕雌猴体内，否则难以获得嵌合猴，A正确；代 的精子和成熟培养的卵子（减数第二次分裂中 孕雌猴在移植嵌合囊胚前，需要饲喂含促孕激素 期)，才能用于体外受精，B正确；采用胚胎分割 的饲料进行同期发情处理，而不是促性腺激素，B 技术产生同卵多胎的可能性是有限的，通常胚胎 错误；据图可知，代孕雌猴分娩的嵌合猴体细胞 分割的次数越多，胚胎成活率越低，C正确；将早 中既有供体猴的细胞，也有受体猴的细胞，故细 期胚胎植入同期发情处理的受体母羊内，一般不 胞中的核遗传物质源于受体猴或供体猴，C错 会发生免疫排斥反应，D错误。 误；据图可知，图示过程没有涉及体外受精技术， 11.D【解析】微型繁殖技术是用于快速繁殖优良 D错误。 品种的植物组织培养技术，植物分生区附近（如 二、非选择题 茎尖)的病毒极少，甚至无病毒，应用微型繁殖技 16.(11分，除标注外，每空2分) 术可获得大量樱桃脱毒苗，A正确；植物细胞具 (1)接种乳酸菌，缩短发酵时间乳酸菌是厌氧 有全能性，因此可以选用樱桃幼嫩的芽原基和叶 菌，加盖并水封能形成无氧环境，有利于乳酸菌 原基作外植体，B正确；外植体形成完整植株需 的繁殖，同时又能抑制好氧菌的生长 经过脱分化形成愈伤组织和再分化形成再生植 (2)灼烧灭菌形状、大小、隆起程度、颜色 株的过程，C正确；槲皮素等酚类化合物属于次 (3)B(1分)在产酸能力差异不大的情况下，B 生代谢产物，不是初生代谢产物，D错误。 菌株的亚硝酸钠降解能力最强 12.D【解析】过程①表示采用酶解法去除植物细 【解析】(1)传统泡菜制作时加入“陈泡菜水”的 胞的细胞壁，获取原生质体，植物细胞细胞壁的 目的是提供乳酸菌菌种，因为“陈泡菜水”中富含 成分是纤维素和果胶，故须利用纤维素酶和果胶 乳酸菌，这些乳酸菌可以促进泡菜的发酵过程。 酶去除细胞壁，但纤维素酶的化学本质为蛋白 发酵过程中泡菜罐要加盖并水封，原因是乳酸菌 质，不能经高压蒸汽灭菌，A错误；②过程须加入 是厌氧生物，在无氧条件下才能正常发酵产生乳 较高浓度的聚乙二醇，目的是改变细胞膜的结 酸，同时水封还可以防止外界杂菌进入泡菜罐保 构，B错误；测定原生质体密度时，可用血细胞计 证泡菜的品质。 数板进行计数，C错误；碘乙酰胺处理能够让细 (2)在筛选分离优质乳酸菌操作过程中，为了保 胞质失活，从而简化筛选程序，D正确。 证无菌操作，接种工具需要进行灼烧灭菌。此 13.B【解析】进行①处理时能用纤维素酶和果胶 外，我们可以通过观察菌落的形状、大小、隆起程 酶，制备原生质体，A正确；需要在等渗（或稍微 度和颜色等特征，初步鉴别出乳酸菌。乳酸菌的 高渗)溶液环境下进行①处理，低渗溶液环境下 菌落通常具有特定的形态和颜色，这些特征可以 可能会导致原生质体吸水破裂，B错误；PEG能 帮助我们初步筛选出优质的乳酸菌。 够诱导原生质体融合，C正确；细胞融合后，显微 (3)为了获得优质乳酸菌，研究人员将从泡菜汁 镜观察选用体积大、含叶绿体的细胞用于继续培 中筛选获得的乳酸菌菌株，接种到液体培养基 养，D正确。 中，并在37℃、72h的条件下进行培养。然后进 14.C【解析】提高生长素和细胞分裂素的比值可促 行产酸、降亚硝酸盐能力测定实验，结果如表所 进愈伤组织形成根而不是芽，A错误；植物细胞壁 示。在该条件下，最理想的菌株是B,因为与表中 的主要成分是纤维素和果胶，故用果胶酶和纤维 其他菌株相比，B菌株的产酸能力与其他菌株相 ·15· 10 真题密卷 单元过关检测 差不大，但亚硝酸钠降解能力也最强。这意味着 【解析】(1)分析题图可知，在方式一中，一般用 B菌株不仅可以快速发酵产生乳酸，还可有效地 显微操作法对MⅡ中期卵母细胞去核，方式一成 降解泡菜中的亚硝酸盐，从而提高泡菜的品质和 功获得“人造精子”的关键操作是及时去除卵母 安全性。 细胞的细胞核。 17.(10分，每空2分) (2)从形态结构方面考虑，卵母细胞作为受体细 (1)碳源氨源 胞具有体积大、易操作、营养物质丰富等优点，故 (2)先接种病原菌孢子悬浮液，2h后再加入抗菌 方式二中选择卵母细胞作为受体细胞；操作中注 肽溶液相比第2组，第5组混合后培养2h,使 入完整的精子而非精子的细胞核，原因是卵母细 抗菌肽与病原菌孢子充分接触，更有效发挥作用 胞需要借助精子中的物质来完成减数分裂等一 (3)抗菌肽破坏病原菌孢子的细胞膜，细胞内容 系列过程，如果只注入精子的细胞核则无法完成 物释放 这些过程。 【解析】(1)微生物生长一般都需要水、无机盐、 (3)该实验无法获得含Y染色体的单倍体胚胎干 氮源、碳源等营养物质。 细胞，其最可能原因可能是Y染色体上的基因无 (2)根据表中接种处理方式可知，1组为对照组只 法支持单倍体胚胎干细胞的存活（或Y染色体上 接种病原菌，2、3、5组均接种了等量且适量的抗 缺少支持单倍体胚胎千细胞存活的基因)。根据 菌肽溶液与病原菌孢子悬浮液，但每组的接种顺 题干信息“构建成功的该动物单倍体胚胎干细胞 序不同，说明自变量为抗菌肽溶液与病原菌孢子 系，均为性染色为X染色体的细胞系，无法获得 悬浮液的接种顺序，2组与5组均为二者先混和， 性染色体为Y的单倍体胚胎干细胞系”，故若将 但2组混合后直接接种，5组混合后先培养2h 成功构建的“人造精子”与卵细胞结合繁殖正常 再接种，结合第3组先加入抗菌肽2h后接种病 的二倍体动物，该动物的性别是雌性。 原菌孢子可分析得出，4组应与3组接种顺序相 19.(11分，除标注外，每空2分) 反，即先接种病原菌孢子2h后再加入抗菌肽溶 (1)动物细胞培养(1分)动物细胞融合(1分) 液；抗菌肽直接作用于病原体，因此先混合培养 (2)①②③④ 2h可使二者充分接触，使抗菌肽充分发挥抑菌 (3)既能无限增殖、又能产生所需抗体小鼠腹 作用，再接种后，病原菌孢子数量大大减少，引起 水培养液(1分) 的病斑直径下降。 (4)40~55 (3)白地霉孢子与抗菌肽在无菌水中混合培养一 【解析】(1)单克隆抗体的制备利用了动物细胞 段时间后，溶液电导率明显上升，说明溶液中离 培养和动物细胞融合技术，让B淋巴细胞和骨髓 子浓度增大，增加的离子只能来源于白地霉孢子 瘤细胞融合。 细胞中，因此推测抗菌肽抑制白地霉孢子的作用 (2)特定培养基培养细胞的目的是筛选出既能大 机制可能是抗菌肽破坏病原菌孢子的细胞膜，使 量增殖、又能产生特异性抗体的杂交瘤细胞，因 细胞内容物释放，杀死细胞。 此其他的细胞都不能在此培养基上生存，在这种 18.(12分，除标注外，每空2分) 培养基上不能存活和繁殖的细胞有未融合的细 (1)卵母细胞 胞和同种融合的细胞，包括①B淋巴细胞、②小 (2)体积大、易操作、营养物质丰富卵母细胞需 鼠的骨髓瘤细胞、③B淋巴细胞自身融合的细 要借助精子中的物质来完成减数分裂等一系列 胞、④小鼠骨髓瘤细胞自身融合的细胞。 过程，如果只注入精子的细胞核则无法完成这些 (3)图中符合生产的杂交瘤细胞具有既能无限增 过程(3分) 殖、又能产生所需抗体的特点；对经选择培养的 (3)Y染色体比X染色体短小，其携带的基因较 杂交瘤细胞进行克隆化培养和抗体检测，多次筛 少，可能缺乏维持单倍体胚胎干细胞系构建和发 选后可获得足够数量的能分泌所需抗体的细胞， 育所必需的基因(3分)雌性 再将其注射到小鼠的腹腔内增殖或在体外培养 10 ·16 ·生物学· 参考答案及解析 合成抗体，故最终能从小鼠腹水或培养液中获得 曲，其目的是防止温度过高杀死酒曲中的微生 大量的单克隆抗体。 物。 (4)根据图可知，1~50aa序列片段与抗体无反应， (2)纯化菌种时，图2的接种方法是平板划线法， 而1~55aa序列片段与抗体有反应，说明该单克隆 在第一次接种和每次接种后都需要灼烧接种环， 抗体识别的区域大概为50~55位aa。50~153aa 图2中一共划线5次，故接种环需要灼烧6次， 序列片段与抗体无反应，而40~153aa序列片段与 此外还可采用稀释涂布平板法接种。两种方法 抗体有反应，说明该单克隆抗体识别的区域大概为 的原理相似，都是使聚集的菌种分散开，最后在 40~50位aa。综上分析可知，该单克隆抗体识别抗 平板上形成单个菌落。挑取单菌落进行扩大培 原(X蛋白)的区域大概为40~55位aa。 养，其目的是增加菌种数量，使其处于对数生长 20.(11分，除标注外，每空1分) 期，即菌体代谢旺盛，增殖速度快，扩大培养使用 (1)消毒（去除杂菌）温度过高杀死酒曲中的微 液体培养基。按物理性质分类，该培养基属于液 生物 体培养基。 (2)平板划线法6增加菌种数量液体 (3)制作窑湾绿豆烧的操作中没有进行严格的灭 (3)缺氧和酸性环境条件下酵母菌可以生长繁 菌处理，但窑湾绿豆烧并没有被杂菌污染而腐 殖，而绝大多数其他微生物因无法适应而受到抑 败，这是因为缺氧和酸性环境条件下酵母菌可以 制密闭 生长繁殖，而绝大多数其他微生物因无法适应而 (4)F12酒精浓度与SO2含量相同的条件下， 受到抑制。主发酵结束后，发酵液还不适合饮 酵母菌编号为F12的发酵速率均高于T24,说明 用，需要在低温、密闭环境中储存一段时间进行 的编号为F12酵母菌的耐受性高于编号为T24 后发酵，这样才能形成澄清、成熟的窑湾绿豆烧。 的酵母菌(2分) (4)据图3分析可知酒精浓度与SO2含量相同的 【解析】(1)蒸稻壳的目的除了去除稻壳中残留 条件下，酵母菌编号为F12的发酵速率均高于 的农药、霉烂味，还有消毒（去除杂菌）的作用，蒸 T24,说明编号为F12酵母菌的耐受性高于编号 馏后，温度较高，通常需要进行冷却，再加入酒 为T24的酵母菌。 2025一2026学年度单元过关检测（十五） 生物学·基因工程（含生物技术安全性和伦理问题） 一、选择题 结合到模板链的3'端，设计的引物应分别结合在 1.C【解析】图中①④是同一种限制酶切割形成 2、3部位，C错误；如图所示： 的，因此以上DNA片段是由4种限制酶切割后产 引物1引物2 生的，切割产生①片段的限制酶，识别的碱基序列 5 为一CTGCAG一，由6个碱基对构成，A错误；限 3 制酶主要是从原核细胞中分离纯化出来的，作用 的化学键为磷酸二酯键，B错误；图中①④具有相 X基因 图1 同的黏性末端，可被DNA连接酶连接形成的 CTGCAG. .5'3' DNA分子是GACGTC,C正确：两个@片段 3 5 属于平末端，只能被T4DNA连接酶催化连接形 成重组DNA,D错误。 2.D【解析】一个基因扩增4次，新合成的DNA数 有24=16个，但新合成的链数为30个，所以共消 耗引物30个，A错误；获取该基因，要破坏4个磷 酸二酯键，B错误；用PCR技术获取该基因，引物 图2 ·17· 10