单元过关(14)发酵工程和细胞工程-【衡水真题密卷】2026年高考生物单元过关检测（辽吉黑蒙）

用信念去坚持你的梦想，让它成为你前进的动力和信念 2025一2026学年度单元过关检测（十四）》 A.70一80℃水浴10min的目的是杀死部分非芽孢杆菌 班级 B.在酒精灯火焰旁将样品用无菌水稀释并涂布接种 卺题 生物学·发酵工程和细胞工程 C.以奶粉为唯一氮源的培养基能起到选择作用 D.透明圈与菌落直径比值较小的菌株为高产菌株 姓名 本试卷总分100分，考试时间75分钟。 5.野生型大肠杆菌能够在基本培养基上生长，经诱变获得了两种营养缺陷型的突变体M、 N,且单独培养时均不能在基本培养基上生长。若将两种突变体在完全培养基（液体）中 一、选择题：本题共15小题，每小题2分，共30分。在每小题给出的四个选项中，只有一项 混合培养一段时间后，再采用稀释涂布平板法接种在基本培养基平板上，培养后长出了 得分 是符合题目要求的。 大肠杆菌菌落。下列叙述正确的是 ( 题号 123456789101112131415 A.野生型大肠杆菌诱变时发生了基因突变或染色体变异 答案 B.突变体M和N能相互为对方提供所缺营养物质 C.在混合培养期间突变体M和N发生了遗传物质的交流 1.青梅果实中含有大量的齐嫩果酸、丙酮酸等活性物质，常制作成具有保健功能的青梅饮 D.混合培养获得的大肠杆菌都能在基本培养基中生长 品，其中青梅酒和青梅醋深受人们喜爱，其制作流程如图。下列叙述正确的是( 6.纤维素、半纤维素，木质素参与构成植物细胞壁。可白蚁的肠道中分离木质素分解菌来 有鲜果一蜂一自的有南装麦德合医团一酒分一后发得一火费装指一青销 降解利用木质素，已知木质素降解过程使苯胺蓝培养基脱色。下列叙述错误的是 反应一→过婆一灭菌装瓶一青梅附 生物C () A,以木质索为唯一碳源，用稀释涂布平板法分离木质素分解菌 A.生物A和生物C都能进行无氧呼吸并产生CO? B.脱色圈直径与菌落直径比值越小，木质素分解菌分解效果越好 B.可以用胰蛋白酶和果胶酶进行酶解以破坏细胞壁 C.在选择培养基上挑选出菌落后，再通过平板划线法进一步纯化 C.由反应①到反应②需要提高温度并改善通气状况 D,除了白蚁肠道，还可从腐烂的树皮表面分离出木质素分解菌 D.可用澄清的石灰水来检测溶液B中是否含有乙醇 7.某些酵母可以利用工业废甲醇作为碳源进行培养，这样既可减少污染又可降低生产成 2.腌制、风干、酱泡、冷冻等是中国历史悠久的食物保存方式。蕴涵了中国人的智慧，呈现 本。研究人员拟从土壤样品中分离该类酵母，并进行大量培养，如图为操作流程。下列 着中国人的生活。下列叙述错误的是 叙述正确的是 () () A.为防止乳酸菌呼吸作用产生的CO2使发酵液溢出，泡菜坛只能装八成满 B.风干晾晒能降低食品的含水量，使微生物不易生长和繁殖，从而延长食品保存时间 C.低温或冷冻保存能降低酶的活性，抑制微生物的生命活动，防止食物腐败 D.用于制作苹果醋的微生物主要是醋酸菌，其代谢类型为异养需氧型 ①称量土样 2梯度稀释 3平板浇筑分离 ④鳞线纯化⑤扩大培养 3.玉林兴业城隍酸料（含泡菜）的独特风味远近闻名，其主要做法是将蔬菜、瓜果等用自己 A.步骤②所用的培养基应以甲醇为碳源 酿造的小米醋浸泡。而同学们课堂制作的传统泡菜是利用植物体表面的乳酸菌来发酵 B.步骤③中应将温度约50℃的培养基倒入培养皿混匀 的。两种方法得到的泡菜各具风味，下列描述正确的是 () C.进行步骤④前需从分离平板中挑取多个菌落，分别测定酵母细胞中甲醇的含量 A,制作传统泡菜和酿造小米醋都需要用水密封坛子 D,步骤⑤可用真空发酵的方法来提取发酵产物 B.制作传统泡菜发酵时相应酶活性不受有机酸含量增加的影响 8.滥用抗生素会导致“超级细菌”（对多种抗生素有高耐药性）的产生，某实验小组研究细 菌产生青霉素抗性与青霉素之间的关系，过程及结果如图。下列叙述正确的是() C.制作传统泡菜发酵时需要保持适宜的温度以维持相应酶的活性 D.酿酒的产物乙醇不能作为酿小米醋的原料，因为乙醇会使相应菌种死亡 同时分别原位接种 4.芽孢杆菌耐高温，是常见的蛋白酶生产菌。培养基中的蛋白质被蛋白酶降解后，会在菌 平行转移全部篱落 落周围形成透明圈。如图是筛选蛋白酶高产菌株的过程。下列叙述错误的是() 普通细菌培养琴 多个含等量青霉素的培养基 70-80℃水溶10mim 稀径涂布法 奶粉培养基 A,可通过提高抗生素浓度避免“超级细菌”的产生 B.用接种环在培养基上连续划线获得实验菌落 C,图中含青霉素的培养基的菌落周围会出现抑菌圈 土壤果样一样品处理分离、镜化一初步施选 D,细菌培养基在使用前、后均需经过灭菌处理 单元过关检测（十四）生物学第1页（共8页） 真题密卷 单元过关检测（十四）生物学第2页（共8页） 2 9.生物碱是一类碱性含氮化合物，它不是植物生长必需的物质，在植物体内含量少，有治 A.①过程为去除细胞壁，需加入经高压蒸汽灭菌的纤维素酶液 疗疾病的作用，可从植物中获取。如图是以铁皮石斛为材料，运用组织培养技术培养拟 B.②过程须加人较高浓度的聚乙二醇，目的是维持一定的渗透压 原球茎（简称PLBs,类似愈伤组织）生产生物碱的实验流程。下列叙述正确的是() C.测定原生质体密度时，可用血细胞计数板或稀释涂布平板法 折生有养牙诱P因香选并寄培参高产细虑系不同何取样。检实铃结闲 D.碘乙酰胺处理目的是让细胞质失活，以简化筛选程序 14.作为野生植物的后代，许多栽培植物与它们的祖先产生了生殖隔离。野生型油菜抗 A.为了提高PLBs的诱导率，诱导时应注意严格灭菌并提供光照 病能力强，但出油率低，栽培油菜品种出油率高，但抗病能力低。科学家利用植物体 B.图中过程①为脱分化形成PLBs,过程②为再分化生产生物碱 细胞杂交技术培有具有较强抗病能力的油菜新品种，培育过程如图所示。下列叙述 C.生物碱为铁皮石斛的次生代谢物，主要在③阶段合成并提取 错误的是 D.若细胞数量/生物碱产量的值越大，则该细胞系为高产细胞系 秦优797”油菜品种胚轴细胞 10.杜泊羊以其生长速度快，肉质好等优点，成为受广大消费者喜欢的绵羊品种。科研工 ⊙→⊙ 作者欲采用胚胎工程快速繁殖杜泊羊。下列叙述错误的是 () A用促性腺激素处理供体杜泊羊可诱导卵巢排出更多的卵子 @"G B.经获能处理的精子和成熟培养的卵子，才能用于体外受精 野生型油菜叶肉细胞 C,对桑葚胚或囊胚进行胚胎分割的次数越多，胚胎成活率越低 A.进行①处理时能用纤维素酶和果胶酶 B.需要在低渗溶液环境下进行①处理 D.将早期胚胎植人同期发情处理的受体母羊内，无免疫排斥反应 C.②过程中经PEG处理可诱导原生质体融合 11.《本草纲目》记载，樱桃具有利脾、止泻的功效。樱桃中的槲皮素等酚类化合物具有抗 D.细胞融合后，显微镜观察选用体积大、含叶绿体的细胞用于继续培养 氧化活性。研究人员利用组织培养技术繁育樱桃优良品种，满足人们食用和药用需 15,植物组织培养和动物细胞培养及胚胎工程相关技术的应用取得了巨大的成就，为人类 要。下列叙述错误的是 () 的生产生活带来了很多积极的意义。下列叙述正确的是 () A.应用微型繁殖技术可获得大量樱桃脱毒苗 A提高生长素和细胞分裂素的比值可促进愈伤组织形成丛生芽 B.可选用樱桃幼嫩的芽原基和叶原基作外植体 B.用果胶酶和胶原蛋白酶去除愈伤组织的细胞壁获得原生质体 C.外植体形成完整植株需经过脱分化和再分化过程 C,胚胎工程中胚胎移植前可采集滋养层细胞进行遗传学检测 D.应用樱桃细胞培养可工厂化生产初生代谢产物槲皮素 D.动物细胞在进行传代培养时需要营造无菌、无毒以及95%空气十5%O2的气体环境 12.利用百合脱毒苗通过组织培养技术能生产出无病毒、健康，高产的百合植株。脱毒苗 二、选择题：本题共5小题，每小题3分，共15分。在每小题给出的四个选项中，有一项或 在商业种植、科研育种和园艺观赏等方面具有广泛应用，为百合产业的发展提供了有 多项是符合题目要求的，全部选对得3分，选对但不全得1分，有选错得0分。 力支持。制备百合脱毒苗的实验操作流程如图所示。下列叙述错误的是 () 题号 16 17 18 19 20 愈伤组织 脱毒苗 转接 性 答案 AN 首合 分生区 16.某研究小组设计了一个利用作物秸秆生产乙醇的小型实验。其主要步骤是：先将粉碎 培养基 培养基 培养基 的作物秸秆堆放在底部有小孔的托盘中，喷水浸润、接种菌T,培养一段时间后，再用 A.取材于百合的分生区，是因为该部位所含的病毒极少，甚至无病毒 清水淋洗秸秆堆（清水淋洗时菌T不会流失），在装有淋洗液的瓶中接种酵母菌，进行 B.过程①需要在培养基中加入细胞分裂素和生长素 乙醇发酵。实验流程如图所示。下列叙述正确的是 () C,过程②不需要更换培养基，但需要增加光照 浸润。接种菌T 清水淋洗 D.培养基中的脱毒苗在移栽前需要去除封口膜，并在培养箱中生长几日 粉辞的 13.疣粒野生稻对水稻白叶枯病具有高度的抗性。科研人员利用疣粒野生稻和栽培稻的 培养 n 原生质体进行体细胞杂交培有抗白叶枯病水稻，主要流程如图所示。下列叙述正确 的是 () 栽培稻伤 栽培箱 灭菌，接种 淋洗液 培养、发能乙酸 组织细胞 原生质体 碗乙酰处到 疆脖持菌 融合的 再生植株 A.菌T能够吸收秸秆中的纤维素，并利用细胞内的纤维素酶将其分解 2 原生质体 B.酵母菌纯培养时，可使用稀释涂布平板法或平板划线法进行接种 光应于生稻 疣粒野生稻 愈伤阻织细血 原生质体 X射线处理使核中 染色质受损 C.可分别使用湿热灭菌法和干热灭菌法对淋洗液和培养瓶进行灭菌 D.本实验与以粮食为原料发酵生产乙醇，所利用的发酵底物均主要为葡萄糖 单元过关检测（十四）生物学第3页（共8页） 真题密卷 单元过关检测（十四）生物学第4页（共8页） 17.沙洲牌黄酒作为苏派黄酒的典型代表，以其清爽的口感和独特的酿造技艺而闻名。该 三，非选择题：本题共5小题，共55分。 黄酒采用的后塍黄酒酿造技艺是江苏省非物质文化遗产，彰显了深厚的历史底蕴。黄 21.(11分)传统的泡菜制作工艺是以新鲜蔬菜为原料，经过择菜、洗菜、切分与晾干，加人 酒酿造主要有以下几个步骤： 煮沸冷却的盐水和一些“陈泡菜水”发酵制作而成。在泡菜腌制过程中会有亚硝酸盐 浸米→器煮·冷却，拌曲→糖化发静→压榨过滤·底酒·包装 产生。筛选分离优质乳酸菌，既可以抑制有害菌生长，又可以快速产酸、降解亚硝酸 下面叙述错误的是 ( 盐，是提升泡菜品质的重要途径。具体筛选流程为：对经多次发酵的泡菜汁进行过滤， A.浸米目的是使淀粉吸水膨胀，有利于后续蒸煮糖化 然后取滤液进行梯度稀释，再用涂布平板法接种到乳酸菌鉴别培养基上进行篇选分 B.冷却时要缓慢地把蒸煮后的米饭温度降至微生物发酵的适宜温度 离，不断重复，直至分离纯化出纯菌落。回答下列问题。 C.糖化发酵中要严格密封，避兔气体进人抑制菌种发酵 (1)传统泡菜制作时加人“陈泡菜水”的目的是 :发酵 D.煎酒又称灭菌，便于对液态发酵酿制得到的黄酒贮存和保管 过程中泡菜罐要加盖并水封，原因是 (2)在筛选、分离优质乳酸菌操作过程中，接种工具需要 灭菌。此外，可通过 18.嵌合体是指在同一个体中，由基因型不同的细胞或组织相互接触且维持各自并存的混 观察菌落的 等特征（至少写出两个），初步鉴别出乳酸菌。 合状态。科研人员利用大鼠的PS细胞与小鼠的囊胚构建嵌合体（大鼠和小鼠体细胞 (3)为获得优质乳酸菌，研究人员将从泡菜汁中筛选获得的3株乳酸菌，接种到液体培 中染色体数目分别为40条和42条)，培养过程如图所示。下列叙述正确的是() 养基中，在37℃条件下培养72，进行产酸、降亚硝酸盐能力测定实验，结果如表所 示。在该条件下，最理想的菌株是 ,理由是 菌株 培养液pH 亚硝酸钠降解能力(%) 了作用 A 3.6 72.5 取精 代学母鼠嵌合体 B 3.7 97.8 A体外培养卵母细胞，为防止污染，应利用培养皿或培养瓶进行密闭培养 C 3.6 88.2 B.过程A前往往需要超数排卵处理，过程B为胚胎移植 22.(10分)橘酸腐病是由白地霉引起的柑橘贮藏期常见的病害之一。抗菌肽是一种抑菌 C.移植后的囊胚进一步扩大，导致磁养层破裂，胚胎从其中伸展出来 活性强、无环境污染的生物多肽，目前已用于多种农业病菌的防治。研究人员研究了 D.嵌合体鼠的体细胞在有丝分裂后期染色体数目为82条 抗菌肽对白地霉的抑菌效果，并且对其作用机制进行了探究。回答下列问题。 19.拟矮牵牛的原生质体在X培养基(A)上只能形成小细胞团，不能形成植株，在含放线 (1)白地霉从柑橘中获得其生长繁殖所需的水、无机盐、 和 等营养物质， 菌素D的X培养基(B)上培养结果相同：矮牵牛的原生质体在A上能分化成植株，但 (2)为研究抗菌肽对白地霉的抑菌效果，现用无打孔器在果实相同部位打孔，每个打 在B上不能生长。在A、B上利用植物体细胞杂交技术均可培养出可育杂种矮牵牛。 孔处接种相同体积的处理液，比较15天后的病斑直径。各组处理及结果见表。 下列叙述正确的是 () 组别 2 A.酶解法制备原生质体时，应在等渗或稍微高渗溶液中进行 先加人抗菌肽溶 B.只有杂种细胞能在B上形成植株 接种一定体积的抗菌肽溶液与病 抗菊肽溶液与病原南 接种处 液，2h后接种 C.获得的杂种矮牵牛可育，说明拟矮牵牛和矮牵牛属于同一物种 病原菌孢子悬原南孢子悬浮液 孢子悬浮液混合，培 理方式 浮液 混合后直接接种 病原菌孢子悬 养2h后接种 D.植物体细胞杂交技术应用的原理是细胞膜的流动性和植物细胞的全能性 浮液 20.细胞融合技术突破了有性杂交的局限，使远缘杂交成为可能。某研究小组以小鼠甲为 15天后 实验材料设计实验，研制抗病毒A的单克隆抗体。下列叙述错误的是 () 病斑直 41.3 13.9 29.3 28.7 11.2 制备单细胞悬液 径/mm 筛选1 筛选2 小鼠甲一B淋巴细胞 表中数据表明抗菌肽对白地霉有一定的抑菌效果，且抑菌效果与抗菌肽、病原菌孢子 磁合细胞杂交瘤胞 能产生抗病毒A的单克隆 抗体的杂交瘤细胞 悬浮液接种顺序有关，表中X为 。与第2组相比， 竹菌瘤细飞 第5组抑菌效果更好的可能原因是 A.实验前必须给小鼠甲注射病毒A是为了得到能产生特定抗体的B淋巴细胞 (3)一般情况下，电导率和离子浓度呈正相关，通过测量溶液电导率可以反映出溶液中 B.将小鼠体内取出的脾脏用剪刀剪碎后加人胃蛋白酶处理，使其分散成单个细胞 离子浓度的大小。研究人员将白地霉孢子与抗菌肽在无菌水中混合，测定电导率，培 C.筛选1需用特定的选择培养基进行筛选才能获得融合的杂交瘤细胞 养一段时间后，再次测定电导率，结果发现电导率明显升高，据此推测抗菌肽抑削白地 D.筛选2利用96孔板经1次筛选获得足够数量的能分泌所需抗体的杂交瘤细胞 霉孢子的作用机制可能是 单元过关检测（十四）生物学第5页（共8页） 真题密卷 单元过关检测（十四）生物学第6页（共8页） 2 23.(11分)“人造精子”是一种可替代精子使卵细胞“受精”的单倍体胚胎干细胞。科学家 将某种动物单倍体胚胎干细胞注射到卵细胞中成功培育出健康的该种动物。该技术 X置白 153 不仅为动物模型的获得提供了新手段，同时也为动物生殖，遗传与发育调控机理研究 提供了新思路。如图是科研人员利用胚胎操作技术，通过两种方式获得重组细胞，进 153 aa 而培育出该种动物“人造精子”的流程。回答下列问题。 成熟情手 方式 结果证明该单克隆抗体识别抗原(X蛋白)的区域大概为 (填“40一50”“40一55” 或“40~60”)位aa. 卵组胞 去修父注人 25.(12分)窑湾绿豆烧酒，香醇甜美，久享盛誉，被列为江苏省新祈市地方特产。它是以优 质白酒为基酒，佐以红参、桂花，砂仁、杜仲等50余味名贵中药材和冰糖勾兑而成，其 方式二 减数分裂Ⅱ中期 色宛如绿豆汤。制作的工艺流程如图1所示。回答下列问题 卵丹细指 红粱，大 南种注育，扩大培养 麦等原料 水 到胞分选。高干瓶胞系 (1)方式一成功获得“人造精子”的关键操作是及时去除 的细胞核 蒸稻壳 非和一藤佩一冷却一接种一发郁十勾阅一密置一分装 (2)方式二中选择卵母细胞作为受体细胞的原因是卵母细胞具有 母相一 愁剂的中药 (答出两点即可)的优点，操作中注入完整的精子而非精子的细胞核，原 图 因是 (1)蒸稻壳的目的除了去除稻壳中残留的农药、霉烂球，还有 作用。蒸 (3)目前，构建成功的该动物单倍体胚胎干细胞系，均为性染色为X染色体的细胞系， 馏后要进行快速冷却，目的是为了防止 无法获得性染色体为Y的单倍体胚胎干细胞系，这与该生物Y染色体比X染色体短 (2)菌种选育过程，为了纯化酵母菌，操作如图2所示。该过程的接种方法是 小有关。据此推测可能的原因是 ,接种工具进行了次灼烧灭菌。扩大培养目的是 。若将成功构建的“人造精子”与卵细胞结合 ,使用的培养基按物理性质分类，属于培养基。 繁殖正常的二倍体动物，该动物的性别是 24.(11分)尼帕病毒(NV)是一种新型人畜共患病毒，该病毒的结构蛋白(X蛋白)可诱导 动物机体产生中和抗体，从而防御病毒感染。制备单克隆中和抗体的流程如图所示。 回答下列问题。 骨菌馏 2 9 (3)窑湾绿豆烧的生产流程中，没有严格的灭菌操作，但发酵过程几乎不会受杂菌污染 影响，这是因为 X蛋白 特定培 主发酵结束后，发酵液还不适合饮用，需要在低温、环境中储存一段 选 时间进行后发酵，这样才能形成醇香柔和的窑湾绿豆烧。 B林日 多种杂交 杂方 抗体检 优质革克降 细胞 细胞 细胞 中和抗体 (4)为了筛选优势酸酒酵母菌，将从发酵罐中分离得到的酵母菌编号为T24和F12,进 (1)制备单克隆抗体过程中涉及的动物细胞工程技术包括 和 行酒精，SO2耐受性试验。试验结果如图3所示 (2)在特定培养基Y中不能存活的细胞包括下列 51 6 -T24 =T24 ①B淋巴细胞：②小鼠的骨髓湘细胞：③B淋巴细胞自身融合的细胞：④小鼠的骨髓湘 -F12 F12 细胞自身融合的细胞：⑤杂交瘤细胞。 (3)图中符合生产的杂交瘤细胞具有 的特点。最终可从 袋0 6 0 50100150200250 或 中获得大量的单克隆抗体。 S0,含量me/L) (4)为鉴定单克隆抗体识别抗原的具体区域，可将抗原(X蛋白)进行逐步截短，分别与 图3 纯化的单克隆抗体反应，实验结果如图所示(“十”表示有反应，“一"表示无反应，“a”表 综合耐受性试验的研究结果，确定 为优势葡萄酒酵母菌，理由有 示氨基酸) 2 单元过关检测（十四）生物学第7页（共8页） 真题密卷 单元过关检测（十四）生物学第8页（共8页）真题密卷 单元过关检测 果：不同培肥处理对沙化草地土壤pH、土壤有机 【解析】(1)美洲马鹿采食植物，属于初级消费 质及植被盖度和地上生物量的影响如图甲、乙、 者，在生态系统成分中为消费者；该区域所有生 丙所示。④实验分析：根据实验结果，施用无机 物构成生物群落。 肥能提高土壤有机质的含量、提高植被盖度和地 (2)自然状态下，美洲马鹿在饥饿指数达到0.3 上生物量，但会导致土壤酸化（或pH下降），进 时停止采食，是因为采食粗纤维植物需要较长时 而影响植被的生长；若配施有机肥有减缓作用。 间的消化，消化系统需要休息一段时间来消化和 基于以上实验结果可知无机肥和有机肥混合使 吸收已经采食的食物，之后才继续采食。 用效果更好，为进一步优化培肥模式，提高沙化 (3)由图1可知，随着温度升高，采食活动率先升 草地生态修复效率，则可进一步研究的方向是无 高后降低，气温影响美洲马鹿的采食活动率；马 机肥、有机肥的种类或配比对沙化草地生态修复 鹿有白尾和黑尾之分，这是同种生物之间的差 的作用。 异，体现了基因多样性。 25.(11分，除标注外，每空1分) (1)消费者生物群落 (4)由图2可知，美洲马鹿在5月份的采食活动 (2)采食粗纤维植物需要较长时间消化，消化系 主要集中在早晨和傍晚，中午采食活动率低。 统需休息以消化吸收已采食食物(2分) (5)柳枝中的纤维素、木质素和单宁含量较高，因 (3)气温影响马鹿采食活动率基因 为柳枝中的这些物质难以消化，所以其消化和排 (4)采食活动主要集中在早晨和傍晚，中午采食 空速率都较草本食物慢，从能量的角度分析，其 活动率低 意义是柳枝能量释放缓慢，可以持续为马鹿提供 (5)纤维素慢柳枝能量释放缓慢，能使马鹿 能量，使马鹿可以在食物缺乏的冬季维持较长时 在冬季维持较长时间生存(2分) 间的生存。 2025一2026学年度单元过关检测（十四）》 生物学·发酵工程和细胞工程 一、选择题 3.C【解析】制作传统泡菜需要的是乳酸菌（厌氧 1.C【解析】生物A为酵母菌，生物C为醋酸菌，前 菌)和酿造小米醋需要的是醋酸菌（好氧菌），前者 者无氧呼吸能产生C02,后者无氧呼吸不能产生 需要密封坛子，后者不需要密封坛子，A错误；发 CO2,A错误；根据酶的专一性，可以用纤维素酶 酵过程实质是酶促反应过程，需要将温度设置在 和果胶酶进行酶解以破坏细胞壁，B错误；由酒精 酶的最适温度下，使发酵效果最好，酶的作用条件 发酵转变为醋酸发酵，需要通入无菌空气、提高发 较温和，乳酸菌在发酵过程中产生乳酸增多，pH 酵温度，C正确；澄清的石灰水是用来检测CO? 降低，导致相应酶活性降低，B错误，C正确；当没 的，检测是否含有乙醇需要用酸性重铬酸钾溶液， 有糖源的时候，醋酸菌可以利用乙醇转化为乙醛， D错误。 再由乙醛转化为乙酸，D错误。 2.A【解析】发酵期间，乳酸会不断积累，泡菜的酸 4.D【解析】细菌中的芽孢杆菌较为耐高温，70~80℃ 味主要来自乳酸。在无氧条件下，乳酸菌将葡萄 水浴l0min的目的是杀死非芽孢杆菌，A正确； 糖分解成乳酸时不产生CO2,泡莱坛只能装八成 为防止杂菌污染，在酒精灯火焰旁将样品用无菌 满是为了防止发酵初期酵母菌细胞呼吸产生气体 水稀释并涂布接种，B正确；蛋白酶降解培养基中 使发酵液溢出，A错误；风干晾晒等干制手段能降 的蛋白质可在菌落周围形成透明圈，奶粉富含蛋 低食品的含水量，使微生物不易生长和繁殖，进而 白质，以奶粉为唯一氯源的培养基能起到选择作 延长食品保存时间，B正确；低温或冷冻保存可降 用，C正确；透明圈与菌落直径比值越大芽孢杆菌 低微生物的酶活性，进而抑制其生命活动，防止食 分解蛋白质的能力越强，故透明圈与菌落直径比 物腐败，C正确；苹果醋是在有氧条件下，经醋酸 值较大的菌株为高产菌株，D错误。 菌发酵制成，酷酸菌的代谢类型为异养需氧型，D5.B【解析】野生型大肠杆菌是原核生物，其遗传 正确。 物质主要位于拟核的DNA上，并没有像真核生物 2 ·14· ·生物学· 参考答案及解析 那样的染色体结构。因此，野生型大肠杆菌在诱 8.D【解析】提高抗生素的浓度可能增加“超级细 变时不可能发生染色体变异，只能发生基因突变， 菌”的产生概率，A错误；用接种环在培养基上连续 A错误；根据题目描述，突变体M和N都是营养 划线获得单个菌落是平板划线法，图示实验菌落 缺陷型，且单独培养时均不能在基本培养基上生 (分布较均匀)不是通过平板划线法获得的，是用稀 长。但当它们在完全培养基中混合培养一段时间 释涂布平板法获得的，B错误；图示在含有青霉素的 后，再接种到基本培养基上却长出了大肠杆菌菌 培养基中有菌落存活，说明菌体对青霉素具有抗 落。这说明在混合培养期间，突变体M和N能够 性，菌落周围没有抑菌圈，C错误；细菌培养基在使 相互为对方提供所缺失的营养物质，从而使双方 用前灭菌是防止杂菌污染，使用后灭菌是为了防止 都能在基本培养基上生长，B正确；根据题目描 污染环境和感染操作人员，D正确。 述，突变体M和N都是营养缺陷型，且单独培养 9.C【解析】上述实验过程中需要在无菌条件下进 时均不能在基本培养基上生长，所以在混合培养 行操作，实验器械需要进行灭菌处理，为了提高 期间，突变体M和N能够相互为对方提供所缺失 PLBs的诱导率，诱导时应注意对实验器械进行严 的营养物质，并不一定是发生了遗传物质的交流， 格灭菌，实验材料进行消毒，但不一定需要光照，A C错误；虽然混合培养后接种到基本培养基上长 错误；题意显示PLBs类似愈伤组织，因此，图中过 出了大肠杆菌菌落，但这并不意味着混合培养获 程①为脱分化形成PLBs,过程②为植物细胞培养 得的所有大肠杆菌都能在基本培养基中生长。只 过程，不属于再分化，B错误；生物碱不是细胞进 有那些通过相互提供缺失营养物质而恢复了生长 行正常生命活动必需的物质，因此为铁皮石斛的 能力的突变体或重组体才能在基本培养基上生 次生代谢物，其主要在③阶段合成并提取，C正 确：若生物碱产量/细胞数量的值越大，则该细胞 长，D错误。 系为高产细胞系，D错误。 6.B【解析】在筛选菌株的时候，常用选择培养基， 10.D【解析】用促性腺激素对雌性杜泊羊进行处 以木质素为唯一碳源，用稀释涂布平板法分离木 理，可达到超数排卵的目的，A正确；经获能处理 质素分解菌，A正确；木质素降解过程使苯胺蓝培 的精子和成熟培养的卵子（减数第二次分裂中 养基脱色，脱色圈直径与菌落直径比值越大，说明 期)，才能用于体外受精，B正确；采用胚胎分割 菌落周围的木质素被分解得越多，分解效果越好， 技术产生同卵多胎的可能性是有限的，通常胚胎 B错误；平板划线法是一种常用的微生物纯化方 分割的次数越多，胚胎成活率越低，C正确；将早 法，通过连续划线的方式，可以逐步稀释并分离出 期胚胎植入同期发情处理的受体母羊内，一般不 单个微生物，最终得到纯种的菌落，因此在选择培 会发生免疫排斥反应，D错误。 养基上挑选出菌落后，再通过平板划线法进一步 11.D【解析】微型繁殖技术是用于快速繁殖优良 纯化，C正确；木质素是植物细胞壁的主要成分之 品种的植物组织培养技术，植物分生区附近（如 一，因此，在植物组织分解的过程中，木质素分解 茎尖)的病毒极少，甚至无病毒，应用微型繁殖技 菌起着重要的作用，除了白蚁肠道这种特定的环 术可获得大量樱桃脱毒苗，A正确；植物细胞具 境外，腐烂的树皮等植物残骸也是木质素分解菌 有全能性，因此可以选用樱桃幼嫩的芽原基和叶 的重要栖息地，所以，我们可以从这些环境中分离 原基作外植体，B正确；外植体形成完整植株需 出木质素分解菌，D正确。 经过脱分化形成愈伤组织和再分化形成再生植 7.B【解析】为了从土壤样品中分离可以利用工业 株的过程，C正确；槲皮素等酚类化合物属于次 废甲醇作为碳源的酵母，步骤②所用的培养基应 生代谢产物，不是初生代谢产物，D错误。 以甲醇为唯一碳源，A错误；步骤③中应将温度约 12.C【解析】用百合的分生区作为外植体培育脱 50℃的培养基倒入培养皿混匀，冷凝后倒置培养， 毒苗，是因为该部位所含的病毒极少，甚至无病 一段时间后，可在培养基的表层和内部出现单菌 毒，A正确；过程①是脱分化形成愈伤组织的过 落，B正确；步骤④为利用平板划线法分离纯化的 程，该过程所用的培养基需要加入细胞分裂素和 过程，需从分离平板中挑取一个菌落进行划线，且 生长素，B正确；过程①②培育过程中，细胞所需 不需要测定酵母细胞中甲醇的含量，C错误；酵母 的激素及其比例等条件不同，因此，过程②需要 菌是兼性厌氧型微生物，扩大培养过程中需要酵 根据细胞的需要更换培养基，C错误：培养基中 母菌进行有氧呼吸大量繁殖，不能用真空发酵的 的脱毒苗在移栽前需要去除封口膜，从而降低湿 方法来提取发酵产物，D错误。 度，然后在培养箱中生长几日，D正确。 ·15· 2 真题密卷 单元过关检测 13.D【解析】过程①表示采用酶解法去除植物细 繁殖，C错误；煎酒又称消毒，煎酒目的是杀死黄 胞的细胞壁，获取原生质体，植物细胞细胞壁的 酒中的大部分微生物，减少有机物的消耗，以延 成分是纤雏素和果胶，故须利用纤维素酶和果胶 长它的保存期，D错误。 酶去除细胞壁，但纤维素酶的化学本质为蛋白 18.B【解析】细胞培养过程中细胞代谢需要氧气， 质，不能经高压蒸汽灭菌，A错误；②过程须加入 因此不能进行密闭培养，A错误；过程A为卵母 较高浓度的聚乙二醇，目的是改变细胞膜的结 细胞的获得，在此之前往往需要超数排卵处理， 构，B错误测定原生质体密度时，可用血细胞计 过程B为胚胎移植，B正确；移植后的囊胚进一 数板进行计数，C错误；碘乙酰胺处理能够让细 步扩大，囊胚内的细胞不断增殖分化，并通过剧 胞质失活，从而简化筛选程序，D正确。 烈有序的运动，使囊胚细胞重新组合，最终形成 14.B【解析】进行①处理时能用纤维素酶和果胶 原肠胚，原肠胚进一步分裂分化形成胚胎，C错 酶，制备原生质体，A正确；需要在等渗（或稍微 误；嵌合体鼠的体细胞中含有大鼠和小鼠的细 高渗)溶液环境下进行①处理，低渗溶液环境下 胞，因此在有丝分裂后期染色体数目为80或84 可能会导致原生质体吸水破裂，B错误；PEG能 条，D错误。 够诱导原生质体融合，C正确；细胞融合后，显微 19.ABD【解析】原生质体是植物细胞去除细胞壁 镜观察选用体积大、含叶绿体的细胞用于继续培 后的结构，为避免原生质体吸水涨破，酶解法制 养，D正确。 备原生质体时，应在等渗或稍微高渗溶液中进 15.C【解析】提高生长素和细胞分裂素的比值可 行，A正确；根据题干信息，“拟矮牵牛的原生质 促进愈伤组织形成根而不是芽，A错误；植物细 体在X培养基(A)上只能形成小细胞团，不能形 胞壁的主要成分是纤维素和果胶，故用果胶酶和 成植株，在含放线菌素D的X培养基(B)上培养 纤维素酶去除愈伤组织的细胞壁获得原生质体， 结果相同；矮牵牛的原生质体在D上能分化成植 B错误；胚胎移植前，采集部分滋养层细胞进行 株，但在B上不能生长”，杂种细胞兼有两者的特 遗传学检测，C正确；传代培养时需要营造无菌、 点，能在B上形成植株，B正确；物种的判断标准 无毒以及95%空气十5%C02的气体环境，D 是指在自然状态下能相互交配并产生可育后代， 错误。 上述过程是植物体细胞杂交技术，是人为状态下 二、选择题 实现的，故杂种矮牵牛可育，不能说明拟矮牵牛 16.BCD【解析】在粉碎的秸秆中接种菌T,培养一 和矮牵牛属于同一物种，C错误；植物体细胞杂 段时间后发现菌T能够将秸秆中的纤维素大量 交首先要使原生质体融合形成杂种细胞，其次要 分解，但菌T自身不能吸收秸杆中的纤维素，而 把杂种细胞经过植物组织培养技术培育成杂种 是菌T能够分泌纤维素酶，纤维素酶能将纤维素 植株。细胞融合的原理是细胞膜具有一定的流 最终分解为葡萄糖，A错误；稀释涂布平板法和 动性，植物组织培养的原理是植物细胞的全能 平板划线法都是酵母菌纯培养时常用的接种方 性，D正确。 法，前者适用于需要计数的实验，后者适用于需 20.BD【解析】该实验前必须给小鼠甲注射病毒 要分离单菌落的实验，B正确；湿热灭菌法适用 A,该处理的目的是诱导小鼠甲产生能够分泌抗 于用具、水及培养基的灭菌，包括玻璃器具、水及 病毒A抗体的B淋巴细胞，A正确；将小鼠体内 培养基等，干热灭菌法则是一种通过干热空气进 取出的脾脏用剪刀剪碎后加入胰蛋白酶处理，使 行灭菌的方法，因此可分别使用湿热灭菌法和干 其分散成单个细胞，B错误；为了得到能产生抗 热灭菌法对淋洗液和培养瓶进行灭菌，C正确； 病毒A单克隆抗体的杂交瘤细胞，需要进行筛 本实验利用的发酵底物主要是秸秆分解产生的 选。筛选1用特定的选择培养基筛选：未融合的 葡萄糖，以粮食为原料发酵生产乙醇，其发酵底 细胞和同种细胞融合后形成的细胞(“B-B”细胞、 物主要是粮食中的淀粉分解产生的葡萄糖，二者 “瘤-瘤”细胞)都会死亡，只有融合的杂交瘤细胞 所利用的发酵底物均主要为葡萄糖，D正确。 (“B-瘤”细胞)才能生长，C正确；筛选2用多孔培 17.CD【解析】浸米目的是使淀粉吸水膨胀，有利 养皿培养，在每个孔只有一个杂交瘤细胞的情况 于后续蒸煮糖化，A正确；冷却时要缓慢地把蒸 下开始克隆化培养和抗体检测，经多次筛选得到 煮后米饭的温度降至微生物发酵的适宜温度，避 能产生特异性抗体的细胞群，该过程用到抗原抗 免因温度过高使发酵菌种死亡，B正确；糖化发 体杂交，获取的杂交瘤细胞通过培养获得大量的 酵前期，应适当让空气进入，以促使酵母菌大量 分泌特异性抗体的杂交瘤细胞，D错误。 2 ·16· ·生物学· 参考答案及解析 三、非选择题 反，即先接种病原菌孢子2h后再加入抗菌肽溶 21.(11分，除标注外，每空2分) 液：抗菌肽直接作用于病原体，因此先混合培养 (1)接种乳酸菌，缩短发酵时间乳酸菌是厌氧 2h可使二者充分接触，使抗菌肽充分发挥抑菌 菌，加盖并水封能形成无氧环境，有利于乳酸菌 作用，再接种后，病原菌孢子数量大大减少，引起 的繁殖，同时又能抑制好氧菌的生长 的病斑直径下降。 (2)灼烧灭菌形状、大小、隆起程度、颜色 (3)白地霉孢子与抗菌肽在无菌水中混合培养一 (3)B(1分)在产酸能力差异不大的情况下，B 段时间后，溶液电导率明显上升，说明溶液中离 菌株的亚硝酸钠降解能力最强 子浓度增大，增加的离子只能来源于白地霉孢子 【解析】(1)传统泡菜制作时加入“陈泡菜水”的 细胞中，因此推测抗菌肽抑制白地霉孢子的作用 目的是提供乳酸菌菌种，因为“陈泡菜水”中富含 机制可能是抗菌肽破坏病原菌孢子的细胞膜，使 乳酸菌，这些乳酸菌可以促进泡菜的发酵过程。 细胞内容物释放，杀死细胞。 发酵过程中泡莱罐要加盖并水封，原因是乳酸菌 23.(11分，除标注外，每空2分) 是厌氧生物，在无氧条件下才能正常发酵产生乳 (1)卵母细胞 酸，同时水封还可以防止外界杂菌进入泡菜罐保 (2)体积大、易操作、营养物质丰富卵母细胞需 证泡菜的品质。 要借助精子中的物质来完成减数分裂等一系列 (2)在筛选分离优质乳酸菌操作过程中，为了保 过程，如果只注入精子的细胞核则无法完成这些 证无菌操作，接种工具需要进行灼烧灭菌。此 过程(3分) 外，我们可以通过观察菌落的形状、大小、隆起程 (3)Y染色体比X染色体短小，其携带的基因较 少，可能缺乏维持单倍体胚胎干细胞系构建和发 度和颜色等特征，初步鉴别出乳酸菌。乳酸菌的 育所必需的基因雌性 菌落通常具有特定的形态和颜色，这些特征可以 【解析】(1)分析题图可知，在方式一中，一般用 帮助我们初步筛选出优质的乳酸菌。 显微操作法对MⅡ中期卵母细胞去核，方式一成 (3)为了获得优质乳酸菌，研究人员将从泡莱汁 功获得“人造精子”的关键操作是及时去除卵母 中筛选获得的乳酸菌菌株，接种到液体培养基 细胞的细胞核。 中，并在37℃、72h的条件下进行培养。然后进 (2)从形态结构方面考虑，卵母细胞作为受体细 行产酸、降亚硝酸盐能力测定实验，结果如表所 胞具有体积大、易操作、营养物质丰富等优点，故 示。在该条件下，最理想的菌株是B,因为与表中 方式二中选择卵母细胞作为受体细胞；操作中注 其他菌株相比，B菌株的产酸能力与其他菌株相 入完整的精子而非精子的细胞核，原因是卵母细 差不大，但亚硝酸钠降解能力也最强。这意味着 胞需要借助精子中的物质来完成减数分裂等一 B菌株不仅可以快速发酵产生乳酸，还可有效地 系列过程，如果只注入精子的细胞核则无法完成 降解泡莱中的亚硝酸盐，从而提高泡菜的品质和 这些过程。 安全性。 (3)该实验无法获得含Y染色体的单倍体胚胎干 22.(10分，每空2分) 细胞，其最可能原因可能是Y染色体上的基因无 (1)碳源氮源 法支持单倍体胚胎干细胞的存活（或Y染色体上 (2)先接种病原菌孢子悬浮液，2h后再加入抗菌 缺少支持单倍体胚胎干细胞存活的基因)。根据 肽溶液相比第2组，第5组混合后培养2h,使 题干信息“构建成功的该动物单倍体胚胎干细胞 抗菌肽与病原菌孢子充分接触，更有效发挥作用 系，均为性染色为X染色体的细胞系，无法获得 (3)抗菌肽破坏病原菌孢子的细胞膜，细胞内容 性染色体为Y的单倍体胚胎干细胞系”，故若将 物释放 成功构建的“人造精子”与卵细胞结合繁殖正常 【解析】(1)微生物生长一般都需要水、无机盐、 的二倍体动物，该动物的性别是雌性。 氨源、碳源等营养物质。 24.(11分，除标注外，每空2分) (2)根据表中接种处理方式可知，1组为对照组只 (1)动物细胞培养(1分)动物细胞融合(1分) 接种病原菌，2、3、5组均接种了等量且适量的抗 (2)①②③④ 菌肽溶液与病原菌孢子悬浮液，但每组的接种顺 (3)既能无限增殖、又能产生所需抗体小鼠腹 序不同，说明自变量为抗菌肽溶液与病原菌孢子 水培养液(1分) 悬浮液的接种顺序，2组与5组均为二者先混和， (4)40~55 但2组混合后直接接种，5组混合后先培养2h 【解析】(1)单克隆抗体的制备利用了动物细胞 再接种，结合第3组先加入抗菌肽2h后接种病 培养和动物细胞融合技术，让B淋巴细胞和骨髓 原菌孢子可分析得出，4组应与3组接种顺序相 瘤细胞融合。 ·17· 2 真题密卷 单元过关检测 (2)特定培养基培养细胞的目的是筛选出既能大 (4)F12酒精浓度与SO2含量相同的条件下， 量增殖、又能产生特异性抗体的杂交瘤细胞，因 酵母菌编号为F12的发酵速率均高于T24,说明 此其他的细胞都不能在此培养基上生存，在这种 的编号为F12酵母菌的耐受性高于编号为T24 培养基上不能存活和繁殖的细胞有未融合的细 的酵母菌(2分) 胞和同种融合的细胞，包括①B淋巴细胞、②小 【解析】(1)蒸稻壳的目的除了去除稻壳中残留的 鼠的骨髓瘤细胞、③B淋巴细胞自身融合的细 农药、霉烂味，还有消毒（去除杂菌）的作用，蒸馏 胞、④小鼠骨髓瘤细胞自身融合的细胞。 后，温度较高，通常需要进行冷却，再加入酒曲，其 (3)图中符合生产的杂交瘤细胞具有既能无限增 目的是防止温度过高杀死酒曲中的微生物。 殖、又能产生所需抗体的特，点；对经选择培养的 (2)纯化菌种时，图2的接种方法是平板划线法， 杂交瘤细胞进行克隆化培养和抗体检测，多次筛 在第一次接种和每次接种后都需要灼烧接种环， 选后可获得足够数量的能分泌所需抗体的细胞， 图2中一共划线5次，故接种环需要灼烧6次， 再将其注射到小鼠的腹腔内增殖或在体外培养 此外还可采用稀释涂布平板法接种。两种方法 的原理相似，都是使聚集的菌种分散开，最后在 合成抗体，故最终能从小鼠腹水或培养液中获得 平板上形成单个菌落。挑取单菌落进行扩大培 大量的单克隆抗体。 养，其目的是增加菌种数量，使其处于对数生长 (4)根据图可知，1~50aa序列片段与抗体无反应， 期，即菌体代谢旺盛，增殖速度快，扩大培养使用 而1~55aa序列片段与抗体有反应，说明该单克隆 液体培养基。按物理性质分类，该培养基属于液 抗体识别的区域大概为50~55位aa。50~153aa 体培养基。 序列片段与抗体无反应，而40~153aa序列片段与 (3)制作窑湾绿豆烧的操作中没有进行严格的灭 抗体有反应，说明该单克隆抗体识别的区域大概为 菌处理，但窑湾绿豆烧并没有被杂菌污染而腐 40~50位aa。综上分析可知，该单克隆抗体识别抗 败，这是因为缺氧和酸性环境条件下酵母菌可以 原(X蛋白)的区域大概为4055位aa。 生长繁殖，而绝大多数其他微生物因无法适应而 25.(12分，除标注外，每空1分) 受到抑制。主发酵结束后，发酵液还不适合饮 (1)消毒（去除杂菌）温度过高杀死酒曲中的微 用，需要在低温、密闭环境中储存一段时间进行 生物 后发酵，这样才能形成澄清、成熟的窑湾绿豆烧。 (2)平板划线法：6增加菌种数量液体 (4)据图3分析可知酒精浓度与SO2含量相同的 (3)缺氧和酸性环境条件下酵母菌可以生长繁 条件下，酵母菌编号为F12的发酵速率均高于 殖，而绝大多数其他微生物因无法适应而受到抑 T24,说明编号为F12酵母菌的耐受性高于编号 制(2分)密闭 为T24的酵母菌。 2025一2026学年度单元过关检测（十五） 生物学·基因工程（含生物技术安全性和伦理问题） 一、选择题 引物1引物2 1.B【解析】限制酶失活会使DNA完全不被酶切， 3' 5' A正确；酶的用量不足，不会导致DNA完全没有 5' 3 被酶切，B错误；酶识别位点突变，造成限制酶无 X基因 法进行切割，C正确；质粒DNA上酶切位，点被甲 图1 基化修饰，会导致对DNA甲基化敏感的限制酶无 法进行酶切，D正确。 3 5′3' -3'5 2.D【解析】一个基因扩增4次，新合成的DNA数 1 有2=16个，但新合成的链数为30个，所以共消 耗引物30个，A错误；获取该基因，要破坏4个磷 酸二酯键，B错误；用PCR技术获取该基因，引物 结合到模板链的3'端，设计的引物应分别结合在 2、3部位，C错误；如图所示： 图2 2 ·18·