第38讲 微生物的培养技术和应用（复习课件）（四川专用）2026年高考生物一轮复习讲练测

第38讲 微生物的培养 技术和应用 四川专用 2026年高考一轮复习 1 01 考情解码·考点定标 智能导览·极速定位 02 体系构建·思维领航 03 考点突破·考向探究 考点一　微生物的基本培养技术 知识点1 培养基的配制 知识点2 无菌技术 知识点3 微生物的纯培养 知识点4 平板划线法操作 考向1 结合培养基的配制和无菌技术，考查科学思维 考向2 围绕微生物的纯培养，考查科学探究 考点二　微生物的选择培养和计数 知识点1 选择培养基 知识点2 稀释涂布平板法操作 知识点3 微生物的数量测定方法 知识点4 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数 知识点5 分解纤维素的微生物的分离 考向1 围绕微生物的选择培育，考查科学探究 考向2 围绕微生物的分离与计数，考查科学探究 05 学以致用·能力提升 04 真题感知·命题洞见 01 考情解码·考点定标 考情解码·考点定标 课标要求 1.阐明在发酵工程中防止杂菌污染是获得纯净的微生物培养物的前提。 2.阐明无菌技术是在操作过程中，保持无菌物品与无菌区域不被微生物污染的技术。 3.举例说明通过调整培养基的配方可有目的地培养某种微生物。 4.概述平板划线法和稀释涂布平板法是实验室中进行微生物分离和纯化的常用方法。 5.概述稀释涂布平板法和显微镜直接计数法是测定微生物数量的常用方法。 考情分析 1.微生物的基本培养技术 2024·湖南卷，6；2024·黑吉辽卷，19；2024·浙江6月选考，10；2023·全国乙卷，37；2023·河北卷，12；2023·重庆卷，9；2022·天津卷，3 2.微生物的选择培养和计数 2025·湖南卷，5；2025·四川卷，8；2024·贵州卷，21；2024·江西卷，17；2024·重庆卷，13；2024·广东卷，21；2024·浙江6月选考，11；2024·浙江6月选考，14；2023·山东卷，15；2023·广东卷，10；2023·北京卷，16；2023·河北卷，3；2023·辽宁卷，9；2022·全国甲卷，37；2022·全国乙卷，37；2022·广东卷，21 4 02 体系构建·思维领航 无菌技术 培养基 体系构建·思维领航 微生物的培养技术和应用 微生物的基本培养技术 概念：人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质 种类 物理性质 用途 固体培养基（含有凝固剂，例如：琼脂） 液体培养基 选择培养基：富集分离出特定的微生物 鉴别培养基：鉴别不同种类的微生物 主要成分：碳源、氮源、水、无机盐 灭菌 消毒 湿热灭菌：高压蒸汽灭菌法 干热灭菌 煮沸消毒 巴氏消毒 灼烧灭菌 紫外线消毒 化学药物消毒 酵母菌纯培养步骤：配置培养基、灭菌、倒平板、接种和分离、培养酵母菌 微生物的选择培养 体系构建·思维领航 微生物的培养技术和应用 微生物的选择培养和计数 微生物的数量测定方法 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数的实验操作 显微镜直接计数法 原理：土壤中分解尿素的细菌能够合成脲酶配制以尿素为唯一氮源的培养基，能够在该培养上生长的细菌就是分解尿素的细菌 稀释涂布平板法 选择培养基：在微生物学中，将允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基 稀释涂布平板法操作：取菌液、涂布器消毒、涂布器灭菌、涂布平板 步骤：土壤取样、样品稀释、培养与观察、计算 分解纤维素的微生物的分离 原理：利用富含纤维素的选择培养基进行选择培养，分解纤维素微生物具有更多的生存机会 鉴定：刚果红与纤维素出现红色复合物 03 考点突破·考向探究 考点一 知识点1  培养基的配制 知识夯基 考向研析 微生物的基本培养技术 1.培养基：人们按照微生物对________的不同需求，配制出供其_________的营养基质。 营养物质 2.培养基的种类 划分依据 名称 用途 物理性质 __________ 工业生产 __________ 微生物的分离、鉴定、活菌计数 用途 __________ 富集、分离出特定的微生物 __________ 鉴别不同种类的微生物 生长繁殖 液体培养基 固体培养基 选择培养基 鉴别培养基 固体培养基需要加入凝固剂，如琼脂。　　　 注意 考点一 知识点1  培养基的配制 知识夯基 考向研析 微生物的基本培养技术 3.培养基的配方 （1）主要营养物质：水、______、氮源、________。 其他条件：pH、______________和氧气。 碳源 无机盐 特殊营养物质 微生物 乳酸杆菌 霉菌 细菌 厌氧微生物 特殊需求 添加________ pH调至______ pH调至 ______________ ______ 维生素 酸性 中性或弱碱性 无氧 考点一 知识点2  无菌技术 知识夯基 考向研析 微生物的基本培养技术 1、获得纯净的微生物培养物的关键是_____________。 防止杂菌污染 2、无菌技术应围绕着如何避免杂菌的污染展开，主要包括_____和______。 消毒 灭菌 3、消毒：是指使用较为温和的物理、化学或生物等方法杀死物体表面或内部_______微生物。 一部分 4、灭菌：是指使用强烈的理化方法杀死物体内外_____的微生物，包括芽孢和孢子。 所有 考点一 知识点2  无菌技术 知识夯基 考向研析 微生物的基本培养技术 5、常见的消毒和灭菌方法： 措施 主要方法 操作对象 消毒 ___________ 牛奶 _____________（例如：酒精） 操作者的双手 ______________ 无菌室 灭菌 ____________ 接种环 干热灭菌 培养皿 __________ 培养皿、培养基 巴氏消毒 化学药物消毒 紫外线消毒 灼烧灭菌 湿热灭菌 干热灭菌箱 高压蒸汽灭菌锅 考点一 知识点2  无菌技术 知识夯基 考向研析 微生物的基本培养技术 6、湿热灭菌和干热灭菌： ①湿热灭菌： 利用沸水、流通蒸汽或高压蒸汽进行灭菌的方法。 高压蒸汽灭菌： （效果最好） 实验室常用高压蒸汽灭菌锅，在压力100kPa、温度121 ℃条件下，维持15-30min 原理： 对象： 优点： 高温蒸汽破坏蛋白质、核酸等结构使其变性 操作简便，效果可靠，可以杀灭所有的生物，包括最耐热的某些微生物的休眠体。基本保持培养基的营养成分不被破坏。 培养基等 考点一 知识点2  无菌技术 知识夯基 考向研析 微生物的基本培养技术 6、湿热灭菌和干热灭菌： ②干热灭菌： 干热灭菌箱内，在160-170 ℃的热空气中维持下2-3h达到灭菌目的 原理： 使微生物细胞膜破坏、蛋白质变性和原生质干燥等 对象： 耐高温，需保持干燥的物品 玻璃器皿 （如试管、培养皿、吸管、注射器） 金属器具 （如针头、 镊子、剪刀等） 1、培养物：将接种于培养基内，在合适条件下形成的含特定种类微生物的群体。 2、纯培养物：由_________繁殖所获得的微生物群体。 3、酵母菌纯培养 (1)实验原理： ①分散的微生物在适宜的____________表面或内部可以繁殖形成 肉眼可见的、有一定__________的子细胞群体。 ②采用平板划线法和稀释涂布平板法能将单个微生物分散在固体培养 基上，之后经培养得到的单菌落一般是由单个微生物繁殖形成的纯培养物。 考点一 知识点3  微生物的纯培养 知识夯基 考向研析 微生物的基本培养技术 固体培养基 形态结构 单一个体 考点一 知识点3  微生物的纯培养 知识夯基 考向研析 微生物的基本培养技术 (2)步骤 配制培养基 灭菌 倒平板 称取去皮的马铃薯200 g，切成小块，加水1 000 mL，加热煮沸至马铃薯软烂，用纱布过滤。向滤液中加入20 g葡萄糖（也可用蔗糖代替）、15〜20 g琼脂，用蒸馏水定容至1 000 mL。 培养基灭菌 培养皿灭菌 干热灭菌 湿热灭菌(高压蒸汽灭菌)法 _________℃倒平板，温度太高______________,温度太低________________。 50 容易烫伤 培养基凝固 平板冷凝后，皿盖上会凝结水珠，凝固后的培养基表面的湿度也比较高；将平板倒置，既可以使培养基表面的水分更好地挥发，又可以防止皿盖上的水珠落入培养基，造成污染。 注意 选择性必修三P12 考点一 知识点3  微生物的纯培养 知识夯基 考向研析 微生物的基本培养技术 (2)步骤 接种和分离 采用___________接种。 平板划线法 选择性必修三P13 原理：通过接种环在固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。经数次划线后培养，可以分离得到单菌落 培养酵母菌 采将接种后的平板和一个未接种的平板倒置，放入28 ℃左右的恒温培养箱中培养24〜48 h。 考点一 知识点3  微生物的纯培养 知识夯基 考向研析 微生物的基本培养技术 4、结果分析与评价 （1）在未接种的培养基表面是否有_________生长。 （2）在接种酵母菌的培养基上，是否有单菌落。这些单菌落的颜色、________和大小是否一致。 （3）如果观察到不同形态的菌落，分析可能的原因。 菌落 形态 考点一 知识点3  微生物的纯培养 知识夯基 考向研析 微生物的基本培养技术 5、倒平板注意问题 （1）培养基要冷却到50℃左右时开始倒平板。温度过高会烫手，过低培养基又会凝固。 （2）要使锥形瓶的瓶口通过酒精灯火焰。通过灼烧灭菌，防止瓶口的微生物污染培养基。 （3）倒平板时，要用左手的拇指和食指将培养皿打开一条稍大于瓶口的缝隙，不要完全打开，以免杂菌污染培养基。 （4）平板冷凝后，要将平板倒置。因为平板冷凝后，皿盖上会凝结水珠，平板倒置后，既可避免培养基表面的水分过快地挥发，又可防止皿盖上的水珠落入培养基，造成污染。　　　　　 原因：__________________________________________________ ____________________________________________。　　　　　 使细菌的数目随着划线次数的增加而逐步减少，最终得到由单个细菌繁殖而来的菌落。　　　　　 考点一 知识点3  微生物的纯培养 知识夯基 考向研析 微生物的基本培养技术 6、平板划线关于划线和灼烧接种环问题 ①第二次及以后每次划线都从_______________开始。　　　　　 （1）划线问题 上次划线的末端 ②划线最后一个区域_______和第一个区域相连。　　　　　 （2）灼烧问题 ①第一次灼烧目的：避免接种环上可能存在的微生物污染培养物。　　　　　 ②每划线前灼烧目的：杀死上次划线残留的菌种，使下次划线的菌种来自于______________。　　　　　 不要 上次划线的末端 考点一 考向1   结合培养基的配制和无菌技术，考查科学思维 知识夯基 考向研析 传统发酵技术的应用 1.微生物平板划线和培养的具体操作如图所示，下列操作正确的是( ) A.①②⑤⑥ B.③④⑥⑦ C.①②⑦⑧ D.①③④⑤ C 由图可知，②中拔出棉塞后应握住棉塞上部；⑥中划线时不能将培养皿的皿盖完全拿开，应只打开一条缝隙；⑦中划线时第5次的划线不能与第1次的划线相连；⑧中平板应倒置培养 考点一 考向1   结合培养基的配制和无菌技术，考查科学思维 知识夯基 考向研析 传统发酵技术的应用 2.灭菌、消毒、无菌操作是生物学实验中常见的操作。下列叙述正确的是( ) A.动、植物细胞DNA的提取必须在无菌条件下进行 B.微生物、动物细胞培养基中需添加一定量的抗生素以防止污染 C.为防止蛋白质变性，不能用湿热灭菌法对牛肉膏蛋白胨培养基进行灭菌 D.可用湿热灭菌法对实验中所使用的微量离心管、细胞培养瓶等进行灭菌 D 动、植物细胞DNA的提取不需要在无菌条件下进行 动物细胞培养基中需添加一定量的抗生素以防止污染，保证无菌环境，而微生物的培养基中一般不能加入抗生素 一般用湿热灭菌法对牛肉膏蛋白胨培养基进行灭菌，以防止杂菌污染 考点一 考向2   围绕微生物的纯培养，考查科学探究 知识夯基 考向研析 传统发酵技术的应用 3.为纯化菌种，在鉴别培养基上划线接种纤维素降解细菌，培养结果如图所示。下列叙述正确的是( ) A.倒平板后需间歇晃动，以保证表面平整 B.图中Ⅰ、Ⅱ区的细菌数量均太多，应从Ⅲ区挑取单菌落 C.该实验结果因单菌落太多，不能达到菌种纯化的目的 D.菌落周围的纤维素被降解后，可被刚果红染成红色 B 倒平板后无需间歇晃动 Ⅲ区中存在单菌落，该实验结果能达到菌种纯化的目的 刚果红能与纤维素形成红色复合物，但不能和纤维素水解后的纤维二糖和葡萄糖等形成红色复合物，因此菌落周围的纤维素被降解后，不能被刚果红染成红色 考点一 考向2   围绕微生物的纯培养，考查科学探究 知识夯基 考向研析 传统发酵技术的应用 4.如图为实验室中酵母菌纯培养过程的部分操作步骤，下列说法正确的是( ) A.微生物的纯培养物就是指不含代谢废物的微生物培养物 B.步骤①中，用手触摸估计培养基冷却至室温后开始倒平板 C.步骤①使用的培养基制备过程是先调pH再灭菌 D.③到④过程中，每次划线后都需要灼烧接种环并蘸取菌液 C 由单一个体繁殖所获得的微生物群体称为纯培养物 步骤①中，用手触摸估计培养基冷却至50 ℃左右时，开始倒平板 ③到④过程中，每次划线后对接种环进行灼烧处理，是为了杀死接种环上残留的菌种，使下次划线时接种环上的菌种直接来源于上次划线的末端，不需要重新蘸取菌液 考点二 知识点1  选择培养基 知识夯基 考向研析 微生物的选择培养和计数 1.选择培养基 将允许特定种类的微生物生长，同时____________其他种类微生物生长的培养基。 2.常见选择培养基 抑制或阻止 目的 培养基特点 筛选分解尿素的细菌 筛选耐高温的微生物 筛选利用大气中N2的微生物 筛选出真菌 筛选出自养微生物 以尿素为唯一氮源的培养基 将培养基放在高温环境中培养 缺少氮源的培养基 含青霉素的培养基 无机碳源的培养基 考点二 知识点2  稀释涂布平板法操作 知识夯基 考向研析 微生物的选择培养和计数 1.系列稀释操作 2.取菌液 取1 mL上清液加入盛有9 mL无菌水的试管中，依次等比稀释。 取0.1 mL菌液，滴加到___________。 培养基表面 3.涂布器消毒 将涂布器浸在盛有______的烧杯中。 酒精 考点二 知识点2  稀释涂布平板法操作 知识夯基 考向研析 微生物的选择培养和计数 4.涂布器灭菌 将涂布器放在火焰上灼烧，待酒精燃尽、涂布器冷却后，再进行涂布。 5.涂布平板 用涂布器将菌液均匀地涂布在培养基表面。涂布时可转动培养皿，使________。 涂布均匀 考点二 知识点2  稀释涂布平板法操作 知识夯基 考向研析 微生物的选择培养和计数 比较 平板划线法 稀释涂布平板法 工具 接种环 涂布器 原理 通过接种环在琼脂固体培养基的表面_________操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基表面。（不能计数） 将菌液进行一系列的_________，稀释度足够高时，聚集在一起的微生物将被分散成单个细胞。（可计数） 特点 方法简单，但不适宜计数 单菌落更易分开，可以计数，但操作复杂 平板 示图 共同点 使培养基上形成由单个细菌细胞繁殖而来的子细胞群体——菌落 连续划线 梯度稀释 考点二 知识点3  稀微生物的数量测定方法 知识夯基 考向研析 微生物的选择培养和计数 1、显微镜直接计数法 显微镜直接计数法本身不能区分细菌的死活，可以计数前用台盼蓝染液进行染色，可以通过统计无色细胞的个数来对活菌进行计数。　　　 注意 考点二 知识点3  稀微生物的数量测定方法 知识夯基 考向研析 微生物的选择培养和计数 2、间接计数法——活菌计数法(即稀释涂布平板法) ①原理：当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个________，来源于样品稀释液中的__________。通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少活菌。 ②计数原则：为了保证结果准确，一般选择菌落数为_________的平板进行计数。 ③误差分析：用此种方法统计的菌落数目往往比活菌的实际数目____ (填“高”或“低”)，因为______________________________________________________。 单菌落 一个活菌 30～300 低 当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落 易错辨析 稀释涂布平板法和平板划线法均能得到单菌落，都可用于细菌计数。( ) × 提示 平板划线法只能用于细菌分离，不能用于细菌计数。 考点二 知识点4  土壤中分解尿素的细菌的分离与计数的实验操作 知识夯基 考向研析 微生物的选择培养和计数 1、实验原理： ①分离原理：利用以__________________的选择培养基，可以从土壤中分离出分解尿素的细菌。 ②计数原理：当样品的稀释度足够高时，通过统计平板上的_____数，能推测出样品中的活菌数目。 尿素作为唯一氮源 菌落 2、培养基成分： 尿素作为唯一氮源 考点二 知识点4  土壤中分解尿素的细菌的分离与计数的实验操作 知识夯基 考向研析 微生物的选择培养和计数 3、实验步骤： ①土壤取样 距离地表3-8cm土层取样 ②样品稀释 选用一定范围的稀释液进行培养，保证获得的菌落数目在________的平板进行计数 标准 30～300 ③观察与培养 不同种类的微生物，需要不同的______和______ 温度 时间 每隔24小时统计一次菌落数，选取_______________的记录作为结果 菌落数目稳定时 ④计算 计算单位体积中的菌体数 考点二 知识点4  土壤中分解尿素的细菌的分离与计数的实验操作 知识夯基 考向研析 微生物的选择培养和计数 4、实验结果分析与评价： 有无杂菌污染的判断 不接种空白培养基无菌落生长，未被杂菌污染；反之则被污染 判断培养基是否具有选择作用 选择培养基上的菌落数目______牛肉膏蛋白胨培养基上的菌落数目，则说明具有筛选作用 少于 判断稀释倍数是否合理 得到3个或3个以上的菌落数在________的平板，稀释倍数合理 30-300 某同学欲分离产脲酶菌，可在选择培养基中添加尿素作为唯一氮源。( ) √ 易错辨析 纤维素分解菌 分解纤维素 纤维素 + 刚果红 ___________ 考点二 知识点5  分解纤维素的微生物的分离 知识夯基 考向研析 微生物的选择培养和计数 1、实验原理： 培养基种富含纤维素，能够分解_______的微生物具有更多的生存机会，大量繁殖。 2、纤维素分解菌的培养基成分及鉴定原理： 纤维素 （1）培养基的成分：以_________为唯一碳源，加入_______染料。 纤维素 刚果红 （2）鉴定原理： 红色复合物 纤维素酶 红色消失，出现________ 透明圈 A.A点时取样、尿素氮源培养基 B.B点时取样、角蛋白氮源培养基 C.B点时取样、蛋白胨氮源培养基 D.C点时取样、角蛋白氮源培养基 考点二 考向1   围绕微生物的选择培育，考查科学探究 知识夯基 考向研析 1.研究者拟从堆肥中取样并筛选能高效降解羽毛、蹄角等废弃物中角蛋白的嗜热菌。根据堆肥温度变化曲线(如图)和选择培养基筛选原理来判断，下列最可能筛选到目标菌的条件组合是(　　) D 微生物的选择培养和计数 研究目的是筛选能高效降解羽毛、蹄角等废弃物中角蛋白的嗜热菌，因此目标菌具有既耐高温，又能够高效降解角蛋白的功能，所以在C点时取样，并且用角蛋白氮源培养基进行选择培养 A.纤维素的基本单位是葡萄糖 B.透明圈的形成是由于纤维素被分解后刚果红不能与 纤维素结合形成红色复合物 C.透明圈可能是分解刚果红的菌种形成的，为确定得到的是纤维素分解菌还需进行发酵产纤维素酶实验 D.菌落②的中心区域最大，纤维素分解菌含量多，是需要筛选和分离的目标菌株 考点二 考向1   围绕微生物的选择培育，考查科学探究 知识夯基 考向研析 2.研究人员筛选和分离纤维素分解菌，在刚果红培养基平板上，筛选到有透明降解圈的菌落，所形成的菌落如图所示。相关说法错误的是(　　) D 微生物的选择培养和计数 菌落①的透明圈范围大，而且菌落小，说明菌落①降解纤维素的能力强，因此菌落①是需要筛选和分离的目标菌株 A.①通常在等比稀释后用平板划线 法获取单个菌落 B.②挑取在2种培养基上均能生长的 用于后续的实验 C.③可通过添加脲酶并检测活性，筛选得到甲、乙 D.粪便中添加菌株甲比乙更有利于NH3的减少 考点二 考向2   围绕微生物的分离与计数，考查科学探究 知识夯基 考向研析 3.养殖场粪便是农家肥的重要来源，其中某些微生物可使氨氮化合物转化为尿素进而产生NH3，影响畜禽健康。为筛选粪便中能利用氨氮化合物且减少NH3产生的微生物。兴趣小组按图进行实验获得目的菌株，正确的是(　　) C 微生物的选择培养和计数 平板划线法无需稀释 ②筛选不能在尿素唯一氮源培养基上生长，而能在牛肉膏蛋白胨培养基上生长的菌株用于后续的实验 甲不产生脲酶而乙可以产生脲酶，且乙同时分泌脲酶抑制剂，粪便中可能还含有其他能产生脲酶的菌株，所以粪便中添加菌株乙比甲更有利于NH3的减少 A.镍是组成脲酶的重要元素 B.镍能提高尿素水解反应的活化能 C.产脲酶细菌可在以NH4Cl为唯一氮源的培养基生长繁殖 D.以尿素为唯一氮源的培养基可用于筛选产脲酶细菌 考点二 考向2   围绕微生物的分离与计数，考查科学探究 知识夯基 考向研析 4.脲酶催化尿素水解，产生的氨可作为细菌的氮源。脲酶被去除镍后失去活性。下列叙述错误的是(　　) B 微生物的选择培养和计数 脲酶催化尿素水解的机理为降低化学反应所需的活化能，镍作为脲酶的重要组成元素，应该与降低尿素水解反应的活化能有关 04 真题感知·命题洞见 1.（2025·四川卷·8）微塑料由塑料废弃物风化形成，难以降解，会危害生态环境和人体健康。有人分离到X和Y两种微塑料降解菌，将总菌量相同的X、Y、X+Y（X:Y=1:1）分别接种于含有等量微塑料的蛋白胨液体培养基中，培养一段时间后测定微塑料的残留率（残留率=剩余量/添加量×100%），结果如下图。下列叙述正确的是（　　） A．用平板划线法能测定X菌组中的活菌数 B．Y菌组微塑料残留率较高，故菌浓度也高 C．混合菌种对微塑料的降解能力高于单一菌种 D．能在该培养基中生长繁殖的微生物都能降解微塑料 真题溯源·考向感知 C 平板划线法主要用于微生物的分离和纯化，不能用于测定活菌数，测定活菌数常用稀释涂布平板法 Y菌组微塑料残留率较高，说明Y菌对微塑料的降解能力相对较弱，而不是菌浓度高，微塑料残留率与菌对微塑料的降解能力有关，而非直接与菌浓度相关 该培养基中含有蛋白胨，能在该培养基中生长繁殖的微生物可能利用蛋白胨作为碳源和氮源等，但不一定都能降解微塑料 40 2.（2025·湖南卷·5）采集果园土壤进行微生物分离或计数。下列叙述正确是（　　） A．稀释涂布平板法和平板划线法都能用于尿素分解菌的分离和计数 B．完成平板划线后，培养时需增加一个未接种的平板作为对照 C．土壤中分离得到的醋酸菌能在无氧条件下将葡萄糖分离成乙酸 D．用于筛选尿素分解菌的培养基含有蛋白胨、尿素和无机盐等营养物质 真题溯源·考向感知 B 稀释涂布平板法可通过菌落数进行计数，而平板划线法仅用于分离纯化菌种，无法计数 醋酸菌为严格好氧菌，其代谢需氧气，无氧条件下无法将葡萄糖转化为乙酸 筛选尿素分解菌的培养基应以尿素为唯一氮源，若含蛋白胨（含其他氮源），则无法筛选目标菌 41 3.(2024·江苏卷，9)酵母菌是基因工程中常用的表达系统。下列叙述正确的是(　　) A.酵母菌培养液使用前要灭活所有细菌，但不能灭活真菌 B.酵母菌是真核细胞，需放置在CO2培养箱中进行培养 C.可用稀释涂布平板法对酵母菌计数 D.该表达系统不能对合成的蛋白质进行加工和修饰 真题溯源·考向感知 C 酵母菌培养液使用前要灭活所有细菌和真菌 将含有酵母菌的培养基放置在28 ℃左右恒温培养箱中进行培养 酵母菌是真核细胞，具有内质网和高尔基体，可以对合成的蛋白质进行加工和修饰 42 4.(2024·江西卷，17)聚对苯二甲酸乙二醇酯(PET)是一种聚酯塑料，会造成环境污染。磷脂酶可催化PET降解。为获得高产磷脂酶的微生物，研究人员试验了2种方法。回答下列问题： (1)方法1从土壤等环境样品中筛选高产磷脂酶的微生物。以磷脂酰乙醇胺(一种磷脂类物质)为唯一碳源制备________培养基，可提高该方法的筛选效率。除碳源外，该培养基中至少还应该有________、________、________等营养物质。 (2)方法2采用________________________________技术定向改造现有微生物，以获得高产磷脂酶的微生物。除了编码磷脂酶的基因外，该技术还需要________、____________、________等“分子工具”。 (3)除了上述2种方法之外，还可以通过________技术非定向改造现有微生物，筛选获得能够高产磷脂酶的微生物。 真题溯源·考向感知 选择 氮源 水 无机盐 转基因(或重组DNA或基因工程) 限制酶 DNA连接酶 载体 诱变育种 43 (4)将以上获得的微生物接种到鉴别培养基(在牛肉膏蛋白胨液体培养基中添加2%的琼脂粉和适量的卵黄磷脂)平板上培养，可以通过观察卵黄磷脂水解圈的大小，初步判断微生物产磷脂酶的能力，但不能以水解圈大小作为判断微生物产磷脂酶能力的唯一依据。从平板制作的角度分析，其原因可能是____________________________________________________________________。 真题溯源·考向感知 培养基的卵黄磷脂的含量、pH和灭菌是否彻底等都会影响水解圈的大小 44 5.(2023·辽宁卷，9)细菌气溶胶是由悬浮于大气或附着于颗粒物表面的细菌形成的。利用空气微生物采样器对某市人员密集型公共场所采样并检测细菌气溶胶的浓度(菌落数/m3)。下列叙述错误的是(　　) A.采样前需对空气微生物采样器进行无菌处理 B.细菌气溶胶样品恒温培养时需将平板倒置 C.同一稀释度下至少对3个平板计数并取平均值 D.稀释涂布平板法检测的细菌气溶胶浓度比实际值高 真题溯源·考向感知 D 使用稀释涂布平板法对微生物进行计数时，统计的数值往往比实际值低，原因是当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落 45 05 学以致用·能力提升 学以致用·能力提升 长句作答类 随着经济时代的发展，方便快捷的各种外卖越来越受年轻人的青睐，但是随之而来，“外卖是否卫生、是否环保”成了人们讨论的焦点话题。 外卖餐盒常用材料淀粉填充聚乙烯类塑料(淀粉—PE)是一种聚乙烯类塑料替代材料，科研人员开展相关研究，从垃圾堆埋场中筛选到能够更高效降解淀粉—PE的菌株，试图解决外卖餐盒的环境污染问题。 47 学以致用·能力提升 长句作答类 (1)在进行该菌株的分离筛选时，需要将一定量的适宜稀释倍数的土壤悬液接种在以_______________________________为唯一碳源的液体培养基上，重复多次进行富集培养，然后将富集培养的菌液接种到固体培养基上。此种分离纯化微生物的接种方法称为________________。 研究未知的微生物一定要注意进行规范的无菌操作，以防___________________，实验后，一定要洗手。 淀粉填充聚乙烯类塑料(淀粉—PE) 稀释涂布平板法 被致病的微生物感染 48 学以致用·能力提升 长句作答类 (2)科研人员将富集得到的菌株分别接入以聚乙烯蜡(PE－WAX，一种低分子聚乙烯)为唯一碳源的基本培养基中，挑选能在该培养基中生长的菌株，结果如图1所示。同时，将富集得到的菌株转接至淀粉固体培养基，观察透明圈(出现透明部分说明该菌株能分泌胞外________酶)，结果如图2所示。综上分析，菌株______(从图1、图2中选择序号)为所选菌株，原因是_________________________________________ _________________________________________________________________。 淀粉 11 既能利用聚乙烯作为碳源生长，又能利用淀粉 生长，因此能够更高效降解淀粉填充聚乙烯类 塑料(淀粉—PE) 49 讲师：xxx 感谢观看 THANK YOU 50 $