第40讲 动物细胞工程（专项训练）（广东专用）2026年高考生物一轮复习讲练测

第40讲 动物细胞工程 目录 01 课标达标练 【题型一】动物细胞培养 【题型二】动物细胞融合技术与单克隆抗体 【题型三】动物体细胞核移植技术与克隆动物 02 能力突破练（新角度+新考法+新思维+新情境） 03 高考溯源练（含2025年高考真题） 题型一 动物细胞培养 1．动物细胞培养液一般呈淡红色。某次动物细胞培养实验中，发生了CO2异常减少，培养液转为黄色。由此推断培养液中呈淡红色的物质是（　　） A．抗生素 B．酸碱指示剂 C．维生素 D．胎牛血清 【答案】B 【详解】A、抗生素用于抑制细菌污染，通常无色，与颜色变化无关，A不符合题意； B、酸碱指示剂会随着pH变化而发生颜色变化，符合题意，B符合题意； C、维生素是培养液成分，但无色，与颜色无关，C不符合题意； D、胎牛血清为淡黄色或红色，但颜色较浅，无法单独导致淡红色，且其颜色不会因pH变化而改变，D不符合题意。 故选B。 2．动物细胞培养是动物细胞工程的基础，培养过程中，动物组织经处理后的初次培养称为原代培养，分瓶之后的培养称为传代培养。下列关于动物细胞培养的叙述，错误的是（　　） A．无论原代培养还是传代培养，大多数细胞是悬浮在培养液中生长增殖的 B．进行分瓶培养的原因之一是贴壁细胞发生接触抑制 C．动物细胞培养液中可添加抗生素防止杂菌生长 D．进行动物细胞培养需将培养液的pH调至7.2-7.4 【答案】A 【详解】A、原代培养过程中，多数种类的动物细胞需要贴附于某些基质表面才能生长增殖，A错误； B、正常分裂的细胞在培养瓶中会出现接触抑制现象，当贴壁细胞分裂生长到表面相互抑制时，细胞就会停止分裂增殖。当要获得大量细胞时，就要对原代培养的细胞分瓶，进行传代培养，B正确； C、动物细胞进行体外培养时，无法从内环境中吸收营养物质，所需营养物质要从培养液中获取，培养液中需要加入糖类、氨基酸、无机盐等营养物质，同时还需要加入动物血清，以保证动物细胞的正常增殖过程，C正确； D、血浆的pH中性偏碱，进行动物细胞培养需将培养液的pH调至7.2-7.4，以便于动物细胞更好地生长，D正确。 故选A。 3．诱导多能干细胞（iPS细胞）是类似胚胎干细胞的一类细胞。科研人员把四种转录因子基因转入人体（供体）的体细胞中，诱导获得iPS细胞后再应用于供体本身。这一研究成果为某些疾病的基础研究及其临床应用提供了一种新的思路。下列叙述错误的是（　　） A．培养iPS细胞时要保证无菌无毒环境，并定期更换培养液 B．体细胞经诱导成为iPS细胞后细胞中的RNA发生改变 C．经诱导获得的iPS细胞移植回患者体内一般不发生免疫排斥反应 D．供体的iPS细胞通常可以用于治疗供体自身红绿色盲等基因突变导致的病症 【答案】D 【详解】A、在培养iPS细胞过程中要保证无菌无毒环境，以免影响细胞的增殖，并要定期更换培养液，以便清除代谢废物，A正确； B、科研人员把四种转录因子基因转入人体（供体）的体细胞中，诱导获得iPS细胞。iPS细胞中基因发生改变，且存在基因选择性表达，所以细胞中的RNA会发生改变，B正确； C、iPS细胞可以来源于病人自身的体细胞，经诱导获得的iPS细胞进行自体移植后可避免免疫排斥反应，C正确； D、因为iPS细胞是由供体自身的体细胞诱导而来，红绿色盲等基因突变导致的致病基因也存在于供体的体细胞中，所以供体的iPS细胞通常不能用于治疗供体自身红绿色盲等基因突变导致的病症，D错误。 故选D。 4．CO2参与生物体内的很多代谢过程，并在生物体稳态的维持中有重要作用。下列叙述正确的是（　　） A．动物细胞培养在含有95%O2和5%CO2的CO2培养箱中 B．愈伤组织细胞不能利用CO2作碳源 C．给患者输氧时，需要含有5%左右CO2以维持机体的酸碱平衡 D．醋酸菌以葡萄糖作为反应物，在有氧和无氧条件下均会生成CO2 【答案】B 【详解】A、动物细胞培养所需的气体主要有O2和CO2，通常将细胞置于含有95%空气和5%CO2的CO2培养箱中进行培养，A错误； B、愈伤组织细胞通过异养方式获取碳源，依赖培养基中的有机物（如蔗糖），无法进行光合作用，故不能利用CO2作为碳源，B正确； C、输氧时加入少量CO2是为了刺激呼吸中枢，维持呼吸速率，而非直接调节酸碱平衡。酸碱平衡主要依赖血液中的缓冲系统（如HCO₃⁻/H2CO3），C错误； D、醋酸菌为严格需氧型生物，仅在氧气存在时将葡萄糖分解为醋酸和CO₂；无氧条件下其代谢活动停止，无法生成CO₂，D错误。 故选B。 5．动物细胞培养是动物细胞工程的基础。下列关于动物细胞培养的叙述，正确的是（    ） A．动物细胞培养的原理是细胞的全能性 B．正常细胞体外培养都具有贴壁生长的特点 C．动物细胞培养基中添加的动物血清需过滤除菌 D．传代培养的动物细胞都会获得不死性，可无限增殖 【答案】C 【详解】A、动物细胞培养的原理是细胞增殖，而细胞全能性是指细胞发育成完整个体的能力，与植物组织培养相关，A错误； B、并非所有正常细胞都贴壁生长，如某些血细胞可悬浮生长，B错误； C、动物血清含多种成分，高温灭菌会破坏其活性，需用过滤除菌法处理，C正确； D、正常传代细胞分裂次数有限，仅癌变细胞可无限增殖，D错误。 故选C。 题型二 动物细胞融合技术与单克隆抗体 6．诺如病毒（NV）是引发非细菌性胃肠炎的主要病原体。NV的P2蛋白主要负责识别和结合宿主细胞表面受体。抗P2蛋白单克隆抗体（简称单抗）可用于NV的快速检测及特异性治疗，其制备流程如图（甲、乙、丙、丁为特定细胞）。下列叙述不正确的是（    ） A．甲与骨髓瘤细胞融合的原理为细胞膜的流动性 B．乙需在特定的选择培养基上进行筛选培养 C．丙为杂交瘤细胞，既能大量增殖又能分泌抗体 D．丁注射入小鼠体内，可从血浆中获得大量单抗 【答案】D 【详解】A、甲为活化的B细胞，与骨髓瘤细胞融合形成杂交瘤细胞，其原理为细胞膜具有流动性，A正确； B、乙需在特定的选择培养基上进行筛选培养，具有同种核的细胞融合后的细胞和未融合细胞均不能生长，只有融合的杂种细胞才能生长，B正确； C、乙在特定的选择培养基上筛选培养出的丙为杂交瘤细胞，杂交瘤细胞（活化的B细胞与骨髓瘤细胞融合形成）既能大量增殖又能分泌抗体，C正确； D、丁注射入小鼠体内，可从小鼠腹水中提取大量单抗，D错误。 故选D。 7．科研人员在单克隆抗体技术的基础上，构建抗体药物偶联物（ADC），从而降低治疗药物的副作用，过程如图所示。下列叙述错误的是（　　） A．步骤①可用灭活的病毒诱导两种细胞融合 B．步骤②的细胞必须经过步骤③克隆化培养和抗体检测才能筛选得到符合要求的杂交瘤细胞 C．步骤④是将获得的a药物和b单克隆抗体通过接头结合在一起，从而获得ADC D．ADC可降低药物副作用的原理是单克隆抗体具有特异性 【答案】C 【详解】A、步骤①为B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合，可用灭活的病毒诱导细胞融合，是动物细胞特有的方法，A正确； B、步骤②表示筛选杂交瘤细胞，杂交瘤细胞产生的抗体不一定是需要的，故需要进行③克隆化培养和抗体检测，B正确； C、由图可知，步骤④表示构建抗体药物偶联物时，将单克隆抗体a和药物b结合形成ADC，C错误； D、ADC通过单克隆抗体的特异性将药物精准地递送到靶细胞，从而减少对正常细胞的损伤，降低药物的副作用，D正确。 故选C。 8．肿瘤坏死因子α（TNF-α）是一种细胞因子，浓度高时可以引发疾病。研究者利用细胞工程制备了TNF-α的单克隆抗体，用于治疗由TNF-α引发的疾病，制备流程如图所示。下列叙述正确的是（    ） A．①具有无限增殖的能力，体外培养①时一般用固体培养基 B．体外单独培养图示B淋巴细胞也可以获得TNF-α的单克隆抗体 C．④需要用TNF-α来检测和筛选目标杂交瘤细胞 D．体外大规模培养杂交瘤细胞时，需要对杂交瘤细胞进行灭菌 【答案】C 【详解】A、①骨髓瘤细胞具有无限增殖的能力，体外培养时一般用液体培养基，A错误； B、体外单独培养B细胞，因为B淋巴细胞不具有无限增殖的能力，所以无法体外培养获得TNF-α的单克隆抗体，B错误； C、④需要用TNF-α来检测和筛选能产生抗TNF-α抗体的目标杂交瘤细胞，C正确； D、体外大规模培养杂交瘤细胞时，需要对培养环境进行灭菌，而非对杂交瘤细胞灭菌，D错误。 故选C。 9．尼帕病毒是一种新型人兽共患病病毒，该病毒的结构蛋白（X蛋白）可诱导动物机体产生中和抗体，从而防御病毒感染。制备单克隆中和抗体的流程如图所示。下列叙述错误的是（    ） A．给小鼠注射X蛋白可诱导其产生能分泌中和抗体的B淋巴细胞 B．特定培养基Y为选择培养基，可筛选得到杂交瘤细胞 C．杂交瘤细胞在体外培养时，需先用胃蛋白酶处理，再用离心法收集 D．克隆化培养和抗体检测后的杂交瘤细胞产生的均为中和抗体 【答案】C 【详解】A、 在制备单克隆抗体的过程中，首先给小鼠注射X蛋白的目的是诱导小鼠产生能够分泌中和抗体的B淋巴细胞，A正确； B、将鼠的骨髓瘤细胞与脾细胞中形成的B淋巴细胞融合后，用特定的选择培养基筛选出杂交瘤细胞，筛选出的细胞具有的特点是既能无限增殖，又能产生特异性的抗体，所以特定培养基Y为选择培养基，B正确； C、动物细胞培养过程中，需要用胰蛋白酶处理，C错误； D、克隆化培养之前先进行筛选，筛选出特定的杂交瘤细胞，该细胞既能无限增殖，又能产生特定的抗体，所以，克隆化培养和抗体检测后的杂交瘤细胞产生的均为中和抗体，D正确。 故选C。 10．甲状旁腺激素（PTH）是调节钙、磷代谢的主要激素之一，临床上PTH含量是低钙血症等疾病的重要诊断指标。现有两种抗PTH单克隆抗体A1、B1，科研人员将B1固定在固相载体上作为捕获抗体，用辣根过氧化物酶标记A1，建立定量检测PTH的方法，如图所示。下列有关叙述错误的是（　　） A．筛选杂交瘤细胞的特定选择培养基中，只有融合的杂交瘤细胞才能生长 B．据图可知，PTH可使底物发生显色反应，从而通过棕色深浅来测定PTH的含量 C．B1和A1均可与待测样本中的PTH特异性结合，但二者与PTH结合的位点不同 D．单克隆抗体不仅可用于诊断疾病，还可形成运载药物的抗体—药物偶联物以治疗疾病 【答案】B 【详解】A、筛选杂交瘤细胞的特定选择培养基中，未融合的亲本细胞、融合的具有同种核的细胞都会死亡，只有融合的杂交瘤细胞才能生长，A正确； B、PTH是调节钙、磷代谢的激素，不能起到催化作用，据图可知，可使底物发生显色反应的是辣根过氧化物酶，棕色越深，说明PTH的含量越高，B错误； C、据图可知，B1和A1均可与待测样本中的PTH特异性结合，但二者与PTH结合的位点不同，C正确； D、单克隆抗体灵敏度高，特异性强，可以大量制备；单克隆抗体不仅可用于诊断疾病，还可形成运载药物的抗体—药物偶联物以治疗疾病，D正确。 故选B。 题型三 动物体细胞核移植技术与克隆动物 11．科学家通过转基因技术获得了含有人生长激素基因的奶牛，利用其乳腺生产人生长激素，为加速转基因奶牛的繁育，对此转基因奶牛进行克隆，过程如图所示。下列有关叙述错误的是（　　） A．重组胚胎移植到代孕母牛之前需进行性别鉴定 B．可采用电融合法使供体细胞和去核卵母细胞融合 C．细胞培养前，可采用酶解法将动物组织分散成单个细胞 D．将重组胚胎移到雌性奶牛体内，通常会发生免疫排斥 【答案】D 【详解】A、在进行细胞培养时，取材的动物组织可以用机械法或胰蛋白酶、胶原蛋白酶处理一段时间，将组织分散成单个细胞，A正确； B、对转基因奶牛进行克隆，供核奶牛细胞来自雌性奶牛，所以重组胚胎是雌性，不需要进行性别鉴定，B正确； C、可采用电融合法使供体细胞和去核卵母细胞融合，供体核进入卵母细胞形成重构胚，C正确； D、在胚胎移植过程中，供体牛的早期胚胎被植入代孕牛体内，代孕牛通常不会对移植的胚胎产生免疫排斥反应，因此一般不需要对代孕牛注射免疫抑制剂，D错误。 故选D。 12．由于大熊猫的繁殖能力及幼仔成活率均较低，故其数量非常少。有科学家尝试采用体细胞核移植技术来克隆大熊猫。下列叙述正确的是（　　） A．在体细胞核移植过程中，普遍使用的去核方法是显微操作法 B．与体细胞核移植技术相比，胚胎细胞核移植技术的难度更大 C．体细胞核移植需直接将取自新鲜卵巢的卵母细胞用作受体细胞 D．体细胞核移植技术成功克隆大熊猫，体现了动物细胞的全能性 【答案】A 【详解】A、在体细胞核移植过程中，去除卵母细胞细胞核的常用方法是显微操作法，该方法能精准去除细胞核，保证核移植的效率，A正确； B、体细胞的分化程度高于胚胎细胞，其细胞核的全能性表达更困难，因此体细胞核移植的技术难度更大，而非胚胎细胞核移植，B错误； C、体细胞核移植中，卵母细胞需培养至减数第二次分裂中期（MⅡ 期）才具备作为受体细胞的条件（能支持细胞核全能性的表达），不能直接用 “取自新鲜卵巢的卵母细胞”，C错误； D、体细胞核移植技术克隆大熊猫，体现的是动物细胞核的全能性（细胞核包含发育成个体的全套遗传信息），而非 “动物细胞的全能性”（动物细胞整体的全能性难以体现），D错误。 故选A。 13．利用体细胞核移植技术克隆优质奶牛的流程如下图。下列叙述错误的是（　　） A．过程①定期更换培养液能保证营养供应和清除代谢物 B．过程②可用紫外线短时间照射使卵母细胞的DNA变性 C．过程③将激活后的重构胚培养至桑葚胚或囊胚后移植 D．丁牛的遗传物质全部来自甲牛，其性状与乙牛、丙牛无关 【答案】D 【详解】A、在动物细胞培养过程中（过程①），细胞会不断进行代谢，产生代谢废物，同时营养物质会被消耗。定期更换培养液能够为细胞提供新鲜的营养物质，还可以及时清除代谢废物，从而营造适宜细胞生长和增殖的环境，保证供体细胞培养的顺利进行，A正确； B、过程②是去除卵母细胞的细胞核，常用的方法有显微操作去核法等。也有人采用梯度离心、紫外线短时间照射和化学物质处理等方法，在没有穿透卵母细胞透明带的情况下去核或使其中的DNA变性，B正确； C、在体细胞核移植中，过程③为胚胎培养和移植环节。通常会将激活后的重构胚培养至桑葚胚或囊胚阶段再进行移植，因为这两个阶段的胚胎在移植后更容易着床和发育，能够提高胚胎移植的成功率，C正确； D、丁牛是通过体细胞核移植技术获得的克隆牛，其细胞核遗传物质来自甲牛（提供体细胞核 ），但细胞质遗传物质来自乙牛（提供去核卵母细胞，卵母细胞细胞质中含有少量DNA）。同时，代孕丙牛为胚胎发育提供了孕育环境，不过不影响丁牛的遗传物质。所以丁牛的性状主要由甲牛的细胞核遗传物质决定，但也会受到乙牛细胞质遗传物质的影响，并非完全与乙牛、丙牛无关，D错误。 故选D。 14．利用动物体细胞核移植技术培育克隆牛的过程如图。下列叙述错误的是（　　） A．对乙牛注射促性腺激素可使其超数排卵 B．将重组细胞培养成囊胚需配制一系列不同成分的培养液 C．在低于大气CO2浓度的有氧环境中进行重组细胞的培养 D．丁牛的性状主要由甲决定，与乙牛、丙牛也有关 【答案】C 【详解】A、对乙牛注射促性腺激素可使其超数排卵，A正确； BC、将重组细胞培养成囊胚为早期胚胎培养，需提供95%空气和5%CO2 的混合气体及一系列营养成分不同的液体培养基，B正确，C错误； D、甲牛提供细胞核，乙牛的细胞质基因会影响丁牛的性状，丙牛的生理环境也会影响其性状，丁牛的性状主要由甲决定，与乙牛、丙牛也有关，D正确。 故选C。 15．科研团队采集遗传性视网膜色素变性患者的皮肤细胞并用基因编辑技术修正其致病基因，再通过动物细胞核移植技术培育出了基因矫正的视网膜类器官，基本流程如图所示。下列叙述正确的是（　　）    A．选用猪去核卵母细胞构建跨物种重构胚比同种核移植更易发育成视网膜类器官 B．重构胚需低氧培养以模拟体内胚胎发育的生理环境 C．多能干细胞经定向诱导分化为视网膜类器官体现了动物细胞核的全能性 D．视网膜类器官中不同细胞的基因表达差异主要取决于培养液中营养物质的种类 【答案】B 【详解】A、卵母细胞的细胞质中含有丰富的营养物质和促进细胞核全能性表达的因子，这些因子有助于激活供体细胞核，使其恢复到全能性状态，从而支持胚胎的发育，这些因子具有物种特异性，跨物种核移植会因物种不匹配导致重构胚发育效率低，远不如同种核移植，A错误； B、体内早期胚胎发育的环境属于低氧环境，为了提高胚胎发育的成功率，重构胚需低氧培养以模拟体内胚胎发育的生理环境，B正确； C、动物细胞核的全能性是指已分化的动物体细胞的细胞核在一定条件下仍具有发育成完整个体的潜能或发育成各种类型的细胞，多能干细胞经定向诱导分化为视网膜类器官不能体现动物细胞核的全能性，C错误； D、视网膜类器官中不同细胞的基因表达差异，本质是细胞分化的结果，是基因的选择性表达，D错误。 故选B。 1．（2025·广东汕头·二模）阿尔茨海默病的病理特征常见淀粉样蛋白β（Aβ）斑块沉积。针对Aβ的单克隆抗体可能对该病有疗效。下列关于制备抗Aβ的单克隆抗体的叙述，错误的是（　　） A．小鼠多次注射Aβ并分离B淋巴细胞 B．用灭活病毒诱导B淋巴细胞相互融合 C．杂交瘤细胞进行抗Aβ抗体阳性检测 D．从细胞培养液或小鼠腹水中收集抗体 【答案】B 【详解】A、将特定的抗原蛋白（Aβ）注射到小鼠体内，目的是从小鼠体内获得已经免疫的B淋巴细胞，A正确； B、用灭活病毒诱导B淋巴细胞与骨髓瘤细胞的融合，B错误； C、经选择培养基筛选出的杂交瘤细胞有多种，并不是所有杂交瘤细胞都能产生抗Aβ单克隆抗体，因此杂交瘤细胞进行抗Aβ抗体阳性检测，C正确； D、杂交瘤细胞可以在小鼠腹腔中或外界培养液中培养，因此可以从细胞培养液或小鼠腹水中收集抗体，D正确。 故选B。 2．FGF20是在肺癌、胃癌和结肠癌细胞中过量表达的肿瘤标记物，某实验小组制备了抗FGF20单克隆抗体，制备流程如图所示。下列叙述正确的是（　　） A．①过程在细胞培养前应用胃蛋白酶分散组织细胞 B．②过程只有不同类型的细胞才能发生融合 C．③过程应多次用专一抗体检测和克隆化培养进行筛选 D．制备抗FGF20单克隆抗体主要用途是治疗癌症疾病 【答案】C 【详解】A、①过程在细胞培养前应用胰蛋白酶分散组织细胞，A错误； B、②过程有不同类型的细胞和相同类型的细胞融合，如B细胞+B细胞、B细胞+骨髓瘤细胞、骨髓瘤细胞+骨髓瘤细胞，B错误； C、单克隆抗体制备过程中至少涉及两次筛选，第一次是利用选择性培养基进行初步筛选出杂交瘤细胞，第二次是利用克隆化培养和抗体检测，③过程应多次用专一抗体检测和克隆化培养进行筛选，C正确； D、FGF20是在肺癌、胃癌和结肠癌细胞中过量表达的肿瘤标记物，制备抗FGF20单克隆抗体主要用途是筛查癌症疾病，D错误。 故选C。 3．通过多种方法获得的早期胚胎，均需经胚胎移植获得后代。下列相关叙述正确的是（　　）    A．胚胎移植前可取内细胞团的细胞进行性别鉴定 B．①试管动物的性状几乎与供体母本性状相同 C．获得动物②的过程属于无性繁殖 D．③过程获得的干扰素常用于治疗细菌感染性疾病 【答案】C 【详解】A、胚胎移植前可取滋养层的细胞鉴定性别，避免对内细胞团的发育造成影响，A错误； B、①过程得到的试管动物性状是由提供卵子的供体母本和提供精子的父本共同决定的，B错误； C、过程②是克隆技术，将牛的体细胞核移植到去核卵母细胞中，培育获得克隆动物遗传物质基本与供体牛基本相同，属于无性繁殖，C正确； D、③过程培育转基因动物，从转基因动物的乳汁中可获得干扰素，干扰素常用于治疗病毒感染性疾病，D错误。 故选C。 4．（2024·广东·三模）利用细胞核移植技术培育克隆牛的过程中，不涉及的操作是（　　） A．卵母细胞的培养 B．重构胚的激活 C．动物细胞融合 D．体外受精 【答案】D 【详解】A、在该过程中需要采集卵母细胞并在体外培养到MⅡ期，A错误； B、在细胞核移植过程中需要用物理或化学方法激活重构胚，使其完成细胞分裂和发育进程，B错误； C、通过电融合法使两细胞融合，供体细胞与去核的卵母细胞融合，形成重构细胞，涉及动物细胞融合，C错误； D、在细胞核移植技术中没有涉及体外受精，D正确。 故选D。 5．（2024·广东·二模）我国科学家利用动物培育可用于移植的人源器官，如图为相关过程。相关分析正确的是（　　） A．去核卵母细胞需在体外培养到MI期 B．可用PEG激活重构胚，并培育至桑葚胚阶段才能移植 C．代孕母猪对外来的早期胚胎不会产生免疫排斥 D．人源肾脏用于器官移植，不会引起免疫排斥 【答案】C 【详解】A、卵母细胞需在体外培养到MⅡ期后进行去核操作，此时的细胞中有促进细胞核全能性发挥的物质，A错误； B、可用物理或化学方法激活重构胚，如可采用电刺激、钙离子载体、乙醇或蛋白酶合成抑制剂等方法进行激活并培育至桑葚胚或囊胚阶段才能移植，B错误； C、代孕母猪对植入的胚胎几乎不发生免疫排斥反应，因而可以保证移植的成功率，这是胚胎移植的基础，C正确； D、人源肾脏属于外来器官，用于器官移植，会引起免疫排斥，D错误。 故选C。 6．（2025·广东阳江·三模）EV71是引发手足口病的一种人肠道病毒。为制备抗EV71的单克隆抗体，科研人员用小鼠进行实验。抗原的选择和制备过程为：将EV71灭活病毒、EV71外壳蛋白VP1、EV71外壳蛋白VP2和非EV71蛋白分别注射到4组小鼠体内，多次免疫后，取上述各组小鼠的血清和未免疫小鼠血清，测定抗体与抗原的结合强度，结果如下图所示。 (1)EV71免疫的小鼠血清抗体 （填“是”或“不是”）单一抗体，据图分析判断依据是 。 (2)制备抗EV71单克隆抗体时，选用 免疫的小鼠的B细胞效果最佳。单克隆抗体的制备流程图如下： (3)相比较植物细胞，诱导动物细胞融合特有的方法是 。用选择性培养基对融合后的细胞进行筛选的目的是获得杂交瘤细胞，将其接种到96孔板，进行 培养和 ，目的是获得 。 (4)图中体外的扩大培养，是从 中获取大量的单克隆抗体。除此之外还可以注入小鼠腹腔培养，该单克隆抗体具有特异性强、灵敏度高、可大量制备得优点。 【答案】(1) 不是 用EV71免疫的小鼠血清的抗体与VP1和VP2抗原的结合强度都较高 (2)VP1 (3) 灭活病毒诱导法 克隆化 抗体检测 既能大量增殖又能产生大量特异性抗体的杂交瘤细胞 (4)细胞培养液 【详解】（1）该实验的自变量血清中抗原和抗体的种类，因变量是抗原与抗体结合程度。以抗原为自变量，看第1组血清与其结合情况，第1组血清能结合多种抗原，因此EV71免疫的小鼠血清抗体不是单一抗体，依据是，用 EV71免疫的小鼠血清的抗体与 VP1和 VP2抗原的结合强度都较高。 （2）观察实验结果，第1、2组血清能结合EV71和VP1且强度接近，而第3组血清仅能结合VP2，对EV71没有作用。根据第一小问推测EV71刺激小鼠产生的抗体种类更多，为了减轻单克隆杂交瘤细胞筛选的工作量，选用VP1免疫小鼠效果最佳。 （3）相比较植物细胞，诱导融合动物细胞特有的方法是灭活病毒诱导法。用选择性培养基对融合后的细胞进行筛选目的是获得杂交瘤细胞，在该种培养基上未融合、同种融合的细胞均不能存活。将其接种到96孔板，进行克隆化培养和抗体检测，目的是为了获得能产生特异性抗体的杂交瘤细胞。 （4）图中体外的扩大培养，是从细胞培养液中获取大量的单克隆抗体。除此之外还可以使用的方法是注入小鼠腹腔培养（体内培养）。单克隆抗体的优点是特异性强、灵敏度高、可大量制备，所以该单克隆抗体具有的优点是：能准确识别抗原的细微差异，与特定抗原发生特异性识别，并且可大量制备。 1．（2025·广东·高考真题）将人眼睑成纤维细胞传代培养后，再培养形成支架，在该支架上接种人口腔黏膜上皮细胞，培养一段时间后分离获得上皮细胞片层，可用于人工角膜的研究。上述过程不涉及（    ） A．制备细胞悬液 B．置于等适宜条件下培养 C．离心收集细胞 D．用胰蛋白酶消化支架后分离片层 【答案】D 【详解】A、动物细胞培养时，为增大细胞与培养液的接触面积，需要制备细胞悬液，A正确； B、置于等适宜条件下培养，其中5%的CO2可维持培养液的pH，B正确； C、在成纤维细胞传代培养过程中需要通过离心收集细胞，C正确； D、不用胰蛋白酶消化支架，避免将上皮细胞片层分离成单独细胞，D错误。 故选D。 2．（2025·重庆·高考真题）为保护濒危哺乳动物甲，科研工作者将甲的近亲物种乙（种群数量多）进行了如图所示的研究，下列叙述正确的是（    ） A．克隆动物的核基因组来源于甲、乙 B．体外受精需用获能的精子与MI期的卵母细胞受精 C．囊胚①的内细胞团可发育为胎盘、个体 D．滋养层可影响内细胞团的发育 【答案】D 【详解】A、克隆动物的核基因组来源于甲，细胞质中的基因来源于乙，A错误； B、体外受精需用获能的精子与MⅡ期的卵母细胞受精，而不是MI期，B错误； C、囊胚①的内细胞团可发育为个体，滋养层细胞发育为胎膜和胎盘，C错误； D、滋养层可影响内细胞团的发育，如滋养层细胞分泌的某些物质可能会影响内细胞团细胞的分化等，D正确。 故选D。 3．（2025·湖北·高考真题）利用犬肾细胞MDCK扩增流感病毒，生产流感疫苗，具有标准化、产量高等优点。但MDCK细胞贴壁生长的特性不利于生产规模的扩大，严重制约疫苗的生产效率。研究人员通过筛选，成功获得一种无成瘤性的（多代培养不会癌变）、可悬浮培养的MDCK细胞——XF06.下列叙述错误的是（　　） A．XF06悬浮培养可提高细胞密度，进而提升生产效率 B．细胞贴壁生长特性的改变是由于流感病毒感染所导致 C．可采用离心技术从感染病毒的细胞裂解液中分离出流感病毒 D．采用无成瘤性细胞生产疫苗，是为了避免疫苗中有致瘤DNA的污染 【答案】B 【详解】A、悬浮培养的XF06细胞无需贴壁，可在培养液中自由增殖，从而提高细胞密度，扩大病毒产量，提升生产效率，A正确； B、XF06细胞的贴壁特性改变是通过筛选获得的遗传特性，而非流感病毒感染所致（病毒感染仅用于扩增病毒，不改变宿主细胞生长方式），B错误； C、流感病毒释放到细胞裂解液后，离心可分离细胞碎片（沉淀）与病毒（上清液），C正确； D、无成瘤性细胞不含癌基因，可避免疫苗中混入致瘤性DNA片段，确保疫苗安全性，D正确； 故选B。 4．（2025·北京·高考真题）动物细胞培养基一般呈淡红色。某次实验时，调控pH的CO2耗尽，培养基转为黄色。由此推断使培养基呈淡红色的是（    ） A．必需氨基酸 B．抗生素 C．酸碱指示剂 D．血清 【答案】C 【详解】A、必需氨基酸是细胞生长的营养成分，不参与指示pH变化，A错误； B、抗生素用于抑制微生物污染，与培养基颜色无关，B错误； C、酸碱指示剂（如酚红）在培养基中用于显示pH变化，在低pH值时酚红使培养液呈黄色，而较高的pH值时使培养液呈紫色，pH值7.2-7.4时为红色，C正确； D、血清提供生长因子，不直接导致颜色变化，D错误。 故选C。 5．（2025·黑吉辽蒙卷·高考真题）下图是制备抗白细胞介素-6（IL-6）单克隆抗体的示意图。下列叙述错误的是（    ） A．步骤①给小鼠注射IL-6后，应从脾中分离筛选T淋巴细胞 B．步骤②在脾组织中加入胃蛋白酶，制成单细胞悬液 C．步骤③加入灭活病毒或PEG诱导细胞融合，体现了细胞膜的流动性 D．步骤④经过克隆化培养和抗体检测筛选出了杂交瘤细胞 【答案】ABD 【详解】A、步骤①给小鼠注射IL-6后，应从小鼠的脾中获取B淋巴细胞，A错误； B、步骤②需要在组织中加入胰蛋白酶或胶原蛋白酶，使其成为单细胞，进而制成悬液，B错误； C、步骤③是诱导细胞融合过程，该过程可加入灭活病毒或PEG诱导，细胞融合的过程体现了细胞膜的流动性，C正确； D、步骤④是在选择培养基上筛选得到的杂交瘤细胞，该过程得到的杂交瘤细胞不一定能产生所需抗体，步骤⑤经过克隆化培养和抗体检测筛选出了分泌所需抗体的杂交瘤细胞，D错误。 故选ABD。 6．（2024·广东·高考真题）某些肿瘤细胞表面的PD-L1与细胞毒性T细胞（CTL）表面的PD-1结合能抑制CTL的免疫活性，导致肿瘤免疫逃逸。免疫检查点疗法使用单克隆抗体阻断PD-Ll和PD-1的结合，可恢复CTL的活性，用于肿瘤治疗。为进一步提高疗效，研究者以黑色素瘤模型小鼠为材料，开展该疗法与化疗的联合治疗研究。部分结果见图。    回答下列问题： (1)据图分析， 疗法的治疗效果最佳，推测其原因是 。 (2)黑色素瘤细胞能分泌吸引某类细胞靠近的细胞因子CXCL1.为使CTL响应此信号，可在CTL中导入 基因后再将其回输小鼠体内，从而进一步提高治疗效果。该基因的表达产物应定位于CTL的 （答位置）且基因导入后不影响CTL 的能力。 (3)某兴趣小组基于现有抗体—药物偶联物的思路提出了两种药物设计方案。方案一：将化疗药物与PD-L1 单克隆抗体结合在一起。方案二：将化疗药物与PD-1单克隆抗体结合在一起。你认为方案 （填“一”或“二”）可行，理由是 。 【答案】(1) 联合 该疗法既发挥了化疗药物的作用，也增加了活化的CTL数量 (2) CXCL1受体 (细胞膜)表面 杀伤肿瘤细胞 (3) 一 方案一的偶联物既可阻断PD-1与PD-L1 结合，恢复CTL的活性，又使化疗药物靶向肿瘤细胞 【详解】（1）由图a可知，联合疗法肿瘤体积最小，再根据图b可知，采用联合疗法时活化的CTL的数目明显高于免疫检查点疗法和化疗等，原因是该疗法既发挥了化疗药物的作用，也增加了活化的CTL数量。 （2）由于黑色素瘤细胞能分泌吸引某类细胞靠近的细胞因子CXCL1，故要进一步提高治疗效果，可以在CTL中导入细胞因子CXCL1受体基因，使CTL表达出细胞因子CXCL1受体，达到治疗的效果。由于细胞因子是一类肽类化合物，故该基因的表达产物应定位于CTL的细胞膜上，且基因导入后不影响CTL杀伤肿瘤细胞的能力。 （3）某肿瘤细胞表面的PD-L1与细胞毒性T细胞（CTL）表面的PD-1结合能抑制CTL的免疫活性，故应该将化疗药物与PD-L1 单克隆抗体结合在一起，即方案一的偶联物既可阻断PD-1与PD-L1 结合，恢复CTL的活性，又使化疗药物靶向肿瘤细胞。 学科网（北京）股份有限公司1 学科网（北京）股份有限公司 学科网（北京）股份有限公司 $ 第40讲 动物细胞工程 目录 01 课标达标练 【题型一】动物细胞培养 【题型二】动物细胞融合技术与单克隆抗体 【题型三】动物体细胞核移植技术与克隆动物 02 能力突破练（新角度+新考法+新思维+新情境） 03 高考溯源练（含2025年高考真题） 题型一 动物细胞培养 1．动物细胞培养液一般呈淡红色。某次动物细胞培养实验中，发生了CO2异常减少，培养液转为黄色。由此推断培养液中呈淡红色的物质是（　　） A．抗生素 B．酸碱指示剂 C．维生素 D．胎牛血清 2．动物细胞培养是动物细胞工程的基础，培养过程中，动物组织经处理后的初次培养称为原代培养，分瓶之后的培养称为传代培养。下列关于动物细胞培养的叙述，错误的是（　　） A．无论原代培养还是传代培养，大多数细胞是悬浮在培养液中生长增殖的 B．进行分瓶培养的原因之一是贴壁细胞发生接触抑制 C．动物细胞培养液中可添加抗生素防止杂菌生长 D．进行动物细胞培养需将培养液的pH调至7.2-7.4 3．诱导多能干细胞（iPS细胞）是类似胚胎干细胞的一类细胞。科研人员把四种转录因子基因转入人体（供体）的体细胞中，诱导获得iPS细胞后再应用于供体本身。这一研究成果为某些疾病的基础研究及其临床应用提供了一种新的思路。下列叙述错误的是（　　） A．培养iPS细胞时要保证无菌无毒环境，并定期更换培养液 B．体细胞经诱导成为iPS细胞后细胞中的RNA发生改变 C．经诱导获得的iPS细胞移植回患者体内一般不发生免疫排斥反应 D．供体的iPS细胞通常可以用于治疗供体自身红绿色盲等基因突变导致的病症 4．CO2参与生物体内的很多代谢过程，并在生物体稳态的维持中有重要作用。下列叙述正确的是（　　） A．动物细胞培养在含有95%O2和5%CO2的CO2培养箱中 B．愈伤组织细胞不能利用CO2作碳源 C．给患者输氧时，需要含有5%左右CO2以维持机体的酸碱平衡 D．醋酸菌以葡萄糖作为反应物，在有氧和无氧条件下均会生成CO2 5．动物细胞培养是动物细胞工程的基础。下列关于动物细胞培养的叙述，正确的是（    ） A．动物细胞培养的原理是细胞的全能性 B．正常细胞体外培养都具有贴壁生长的特点 C．动物细胞培养基中添加的动物血清需过滤除菌 D．传代培养的动物细胞都会获得不死性，可无限增殖 题型二 动物细胞融合技术与单克隆抗体 6．诺如病毒（NV）是引发非细菌性胃肠炎的主要病原体。NV的P2蛋白主要负责识别和结合宿主细胞表面受体。抗P2蛋白单克隆抗体（简称单抗）可用于NV的快速检测及特异性治疗，其制备流程如图（甲、乙、丙、丁为特定细胞）。下列叙述不正确的是（    ） A．甲与骨髓瘤细胞融合的原理为细胞膜的流动性 B．乙需在特定的选择培养基上进行筛选培养 C．丙为杂交瘤细胞，既能大量增殖又能分泌抗体 D．丁注射入小鼠体内，可从血浆中获得大量单抗 7．科研人员在单克隆抗体技术的基础上，构建抗体药物偶联物（ADC），从而降低治疗药物的副作用，过程如图所示。下列叙述错误的是（　　） A．步骤①可用灭活的病毒诱导两种细胞融合 B．步骤②的细胞必须经过步骤③克隆化培养和抗体检测才能筛选得到符合要求的杂交瘤细胞 C．步骤④是将获得的a药物和b单克隆抗体通过接头结合在一起，从而获得ADC D．ADC可降低药物副作用的原理是单克隆抗体具有特异性 8．肿瘤坏死因子α（TNF-α）是一种细胞因子，浓度高时可以引发疾病。研究者利用细胞工程制备了TNF-α的单克隆抗体，用于治疗由TNF-α引发的疾病，制备流程如图所示。下列叙述正确的是（    ） A．①具有无限增殖的能力，体外培养①时一般用固体培养基 B．体外单独培养图示B淋巴细胞也可以获得TNF-α的单克隆抗体 C．④需要用TNF-α来检测和筛选目标杂交瘤细胞 D．体外大规模培养杂交瘤细胞时，需要对杂交瘤细胞进行灭菌 9．尼帕病毒是一种新型人兽共患病病毒，该病毒的结构蛋白（X蛋白）可诱导动物机体产生中和抗体，从而防御病毒感染。制备单克隆中和抗体的流程如图所示。下列叙述错误的是（    ） A．给小鼠注射X蛋白可诱导其产生能分泌中和抗体的B淋巴细胞 B．特定培养基Y为选择培养基，可筛选得到杂交瘤细胞 C．杂交瘤细胞在体外培养时，需先用胃蛋白酶处理，再用离心法收集 D．克隆化培养和抗体检测后的杂交瘤细胞产生的均为中和抗体 10．甲状旁腺激素（PTH）是调节钙、磷代谢的主要激素之一，临床上PTH含量是低钙血症等疾病的重要诊断指标。现有两种抗PTH单克隆抗体A1、B1，科研人员将B1固定在固相载体上作为捕获抗体，用辣根过氧化物酶标记A1，建立定量检测PTH的方法，如图所示。下列有关叙述错误的是（　　） A．筛选杂交瘤细胞的特定选择培养基中，只有融合的杂交瘤细胞才能生长 B．据图可知，PTH可使底物发生显色反应，从而通过棕色深浅来测定PTH的含量 C．B1和A1均可与待测样本中的PTH特异性结合，但二者与PTH结合的位点不同 D．单克隆抗体不仅可用于诊断疾病，还可形成运载药物的抗体—药物偶联物以治疗疾病 题型三 动物体细胞核移植技术与克隆动物 11．科学家通过转基因技术获得了含有人生长激素基因的奶牛，利用其乳腺生产人生长激素，为加速转基因奶牛的繁育，对此转基因奶牛进行克隆，过程如图所示。下列有关叙述错误的是（　　） A．重组胚胎移植到代孕母牛之前需进行性别鉴定 B．可采用电融合法使供体细胞和去核卵母细胞融合 C．细胞培养前，可采用酶解法将动物组织分散成单个细胞 D．将重组胚胎移到雌性奶牛体内，通常会发生免疫排斥 12．由于大熊猫的繁殖能力及幼仔成活率均较低，故其数量非常少。有科学家尝试采用体细胞核移植技术来克隆大熊猫。下列叙述正确的是（　　） A．在体细胞核移植过程中，普遍使用的去核方法是显微操作法 B．与体细胞核移植技术相比，胚胎细胞核移植技术的难度更大 C．体细胞核移植需直接将取自新鲜卵巢的卵母细胞用作受体细胞 D．体细胞核移植技术成功克隆大熊猫，体现了动物细胞的全能性 13．利用体细胞核移植技术克隆优质奶牛的流程如下图。下列叙述错误的是（　　） A．过程①定期更换培养液能保证营养供应和清除代谢物 B．过程②可用紫外线短时间照射使卵母细胞的DNA变性 C．过程③将激活后的重构胚培养至桑葚胚或囊胚后移植 D．丁牛的遗传物质全部来自甲牛，其性状与乙牛、丙牛无关 14．利用动物体细胞核移植技术培育克隆牛的过程如图。下列叙述错误的是（　　） A．对乙牛注射促性腺激素可使其超数排卵 B．将重组细胞培养成囊胚需配制一系列不同成分的培养液 C．在低于大气CO2浓度的有氧环境中进行重组细胞的培养 D．丁牛的性状主要由甲决定，与乙牛、丙牛也有关 15．科研团队采集遗传性视网膜色素变性患者的皮肤细胞并用基因编辑技术修正其致病基因，再通过动物细胞核移植技术培育出了基因矫正的视网膜类器官，基本流程如图所示。下列叙述正确的是（　　）    A．选用猪去核卵母细胞构建跨物种重构胚比同种核移植更易发育成视网膜类器官 B．重构胚需低氧培养以模拟体内胚胎发育的生理环境 C．多能干细胞经定向诱导分化为视网膜类器官体现了动物细胞核的全能性 D．视网膜类器官中不同细胞的基因表达差异主要取决于培养液中营养物质的种类 1．（2025·广东汕头·二模）阿尔茨海默病的病理特征常见淀粉样蛋白β（Aβ）斑块沉积。针对Aβ的单克隆抗体可能对该病有疗效。下列关于制备抗Aβ的单克隆抗体的叙述，错误的是（　　） A．小鼠多次注射Aβ并分离B淋巴细胞 B．用灭活病毒诱导B淋巴细胞相互融合 C．杂交瘤细胞进行抗Aβ抗体阳性检测 D．从细胞培养液或小鼠腹水中收集抗体 2．FGF20是在肺癌、胃癌和结肠癌细胞中过量表达的肿瘤标记物，某实验小组制备了抗FGF20单克隆抗体，制备流程如图所示。下列叙述正确的是（　　） A．①过程在细胞培养前应用胃蛋白酶分散组织细胞 B．②过程只有不同类型的细胞才能发生融合 C．③过程应多次用专一抗体检测和克隆化培养进行筛选 D．制备抗FGF20单克隆抗体主要用途是治疗癌症疾病 3．通过多种方法获得的早期胚胎，均需经胚胎移植获得后代。下列相关叙述正确的是（　　）    A．胚胎移植前可取内细胞团的细胞进行性别鉴定 B．①试管动物的性状几乎与供体母本性状相同 C．获得动物②的过程属于无性繁殖 D．③过程获得的干扰素常用于治疗细菌感染性疾病 4．（2024·广东·三模）利用细胞核移植技术培育克隆牛的过程中，不涉及的操作是（　　） A．卵母细胞的培养 B．重构胚的激活 C．动物细胞融合 D．体外受精 5．（2024·广东·二模）我国科学家利用动物培育可用于移植的人源器官，如图为相关过程。相关分析正确的是（　　） A．去核卵母细胞需在体外培养到MI期 B．可用PEG激活重构胚，并培育至桑葚胚阶段才能移植 C．代孕母猪对外来的早期胚胎不会产生免疫排斥 D．人源肾脏用于器官移植，不会引起免疫排斥 6．（2025·广东阳江·三模）EV71是引发手足口病的一种人肠道病毒。为制备抗EV71的单克隆抗体，科研人员用小鼠进行实验。抗原的选择和制备过程为：将EV71灭活病毒、EV71外壳蛋白VP1、EV71外壳蛋白VP2和非EV71蛋白分别注射到4组小鼠体内，多次免疫后，取上述各组小鼠的血清和未免疫小鼠血清，测定抗体与抗原的结合强度，结果如下图所示。 (1)EV71免疫的小鼠血清抗体 （填“是”或“不是”）单一抗体，据图分析判断依据是 。 (2)制备抗EV71单克隆抗体时，选用 免疫的小鼠的B细胞效果最佳。单克隆抗体的制备流程图如下： (3)相比较植物细胞，诱导动物细胞融合特有的方法是 。用选择性培养基对融合后的细胞进行筛选的目的是获得杂交瘤细胞，将其接种到96孔板，进行 培养和 ，目的是获得 。 (4)图中体外的扩大培养，是从 中获取大量的单克隆抗体。除此之外还可以注入小鼠腹腔培养，该单克隆抗体具有特异性强、灵敏度高、可大量制备得优点。 1．（2025·广东·高考真题）将人眼睑成纤维细胞传代培养后，再培养形成支架，在该支架上接种人口腔黏膜上皮细胞，培养一段时间后分离获得上皮细胞片层，可用于人工角膜的研究。上述过程不涉及（    ） A．制备细胞悬液 B．置于等适宜条件下培养 C．离心收集细胞 D．用胰蛋白酶消化支架后分离片层 2．（2025·重庆·高考真题）为保护濒危哺乳动物甲，科研工作者将甲的近亲物种乙（种群数量多）进行了如图所示的研究，下列叙述正确的是（    ） A．克隆动物的核基因组来源于甲、乙 B．体外受精需用获能的精子与MI期的卵母细胞受精 C．囊胚①的内细胞团可发育为胎盘、个体 D．滋养层可影响内细胞团的发育 3．（2025·湖北·高考真题）利用犬肾细胞MDCK扩增流感病毒，生产流感疫苗，具有标准化、产量高等优点。但MDCK细胞贴壁生长的特性不利于生产规模的扩大，严重制约疫苗的生产效率。研究人员通过筛选，成功获得一种无成瘤性的（多代培养不会癌变）、可悬浮培养的MDCK细胞——XF06.下列叙述错误的是（　　） A．XF06悬浮培养可提高细胞密度，进而提升生产效率 B．细胞贴壁生长特性的改变是由于流感病毒感染所导致 C．可采用离心技术从感染病毒的细胞裂解液中分离出流感病毒 D．采用无成瘤性细胞生产疫苗，是为了避免疫苗中有致瘤DNA的污染 4．（2025·北京·高考真题）动物细胞培养基一般呈淡红色。某次实验时，调控pH的CO2耗尽，培养基转为黄色。由此推断使培养基呈淡红色的是（    ） A．必需氨基酸 B．抗生素 C．酸碱指示剂 D．血清 5．（2025·黑吉辽蒙卷·高考真题）下图是制备抗白细胞介素-6（IL-6）单克隆抗体的示意图。下列叙述错误的是（    ） A．步骤①给小鼠注射IL-6后，应从脾中分离筛选T淋巴细胞 B．步骤②在脾组织中加入胃蛋白酶，制成单细胞悬液 C．步骤③加入灭活病毒或PEG诱导细胞融合，体现了细胞膜的流动性 D．步骤④经过克隆化培养和抗体检测筛选出了杂交瘤细胞 6．（2024·广东·高考真题）某些肿瘤细胞表面的PD-L1与细胞毒性T细胞（CTL）表面的PD-1结合能抑制CTL的免疫活性，导致肿瘤免疫逃逸。免疫检查点疗法使用单克隆抗体阻断PD-Ll和PD-1的结合，可恢复CTL的活性，用于肿瘤治疗。为进一步提高疗效，研究者以黑色素瘤模型小鼠为材料，开展该疗法与化疗的联合治疗研究。部分结果见图。    回答下列问题： (1)据图分析， 疗法的治疗效果最佳，推测其原因是 。 (2)黑色素瘤细胞能分泌吸引某类细胞靠近的细胞因子CXCL1.为使CTL响应此信号，可在CTL中导入 基因后再将其回输小鼠体内，从而进一步提高治疗效果。该基因的表达产物应定位于CTL的 （答位置）且基因导入后不影响CTL 的能力。 (3)某兴趣小组基于现有抗体—药物偶联物的思路提出了两种药物设计方案。方案一：将化疗药物与PD-L1 单克隆抗体结合在一起。方案二：将化疗药物与PD-1单克隆抗体结合在一起。你认为方案 （填“一”或“二”）可行，理由是 。 学科网（北京）股份有限公司1 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