任务2 猪精液的处理（课件）-《畜禽繁殖技术》中国农业科学技术出版社 同步精品课堂

中国农业科学技术出版社 《畜禽繁殖技术》 项目二 猪的人工授精 任务二 猪精液的处理 1 CONTENTS 目 录 01 学习目标 02 教学重难点 03 新课导入 04 知识讲授 05 师生互动 06 课内小结 07 课内练习 一、学习目标 知识目标 1、掌握猪精液合格指标（外观、活力、密度、畸形率等）。 2、理解精液稀释的目的、原理及稀释倍数计算方法。 3、熟悉精液常温/低温保存的温度控制要点及运输规范。 一、学习目标 技能目标 1、能独立完成精液品质检查（活力评估、密度测定、畸形率统计）。 2、能按标准流程配制稀释液并完成精液稀释与分装。 3、能根据保存条件选择合适的精液保存与运输方案。 二、教学重难点 教学重点 1、精液品质六大指标的判定标准与检测方法。 2、精液稀释倍数的六步计算法及同温操作要点。 3、常温保存（17℃恒温箱）的维护与精液摇匀规范。 教学难点 1、稀释倍数计算中有效精子数与份数的逻辑关系。 2、高倍稀释时先低倍后高倍的分步操作原理。 3、运输过程中温度波动的应急处理方案设计。 三、新课导入 典型案例： 三、新课导入 案例问题： 1、为什么说精液处理是人工授精技术链中的“生命线”？ 2、如果采得的精液在显微镜下发现大量精子原地打转，可能忽略了哪个关键操作步骤？ 四、知识讲授 猪精液的处理 一、精液稀释的目的和意义 1.扩大精液量，增加一次采集量的可配母畜数。 2.可以补充精子代谢所需要的营养物质。 3.可以消除副性腺分泌物的有害影响。 4.可以缓冲精子的酸碱度，调节渗透压，给精子创造适宜的环境。 5.可延长精子在体外存活的时间。 6.便于精液的保存和运输。 因此，精液稀释是充分体现和发挥人工授精优越性的重要技术环节。 四、知识讲授 猪精液的处理 二、精液保存原理 主要利用稀释液的酸性环境来抑制精子的活动，减少其能量的消耗，在稀释液中加入弱酸性物质，创造酸性环境，同时利用抗生素抑制精液中微生物的生长，加适量的糖类，隔绝空气或注入二氧化碳，对精液的保存都有良好的效果。在低温下，可以抑制微生物的生长，延长精子存活时间。 四、知识讲授 猪精液的品质检查 一、检查项目 1.外观 检查方法：目测。 2.气味 检查方法：鼻嗅。 3.采精量 检查方法：采用称量法计算采精量，1g相当于1mL。 4.精子活力 检查方法：取中层精液10~15μL，在200~400倍显微镜下检查。每份精液取样2次，每个样观察3个视野，计算平均值。使用自动分析仪器应按其检测方法操作。 四、知识讲授 猪精液的品质检查 5.精子密度 检查方法：采用精子密度仪测定。应定期用血细胞计数板法校正。 6. 精子畸形率 检查方法：采用伊红或吉姆萨染色法检查时，在200~400倍显微镜下观察左、中、右三个视野中不少于200个精子(表2-2-2)。 四、知识讲授 猪精液的品质检查 提示： 1.精液的品质鉴定需要注意取样要有代表性，应从采得的全部并经搅拌均匀的精液中取样，力求结果客观准确。 2. 精子活力检查必须在每次采精后、精液稀释后和输精前进行3次。精子活力受温度影响很大，温度过高时，精子活动激烈，会很快死亡； 温度过低时，则精子活动表现不充分，影响评定结果，检查时的温度以37℃为宜。 四、知识讲授 猪精液的品质检查 二、精液品质判定 应符合表2-2-3的规定，其中任何一项不符合要求的则废弃。 四、知识讲授 猪精液的稀释 一、稀释液的配制 1.先将蒸馏水在水浴锅中预热，可加速稀释粉①的溶解。 2.在容器中加入部分蒸馏水，再加入商品稀释粉，最后再加蒸馏水定容。 3.使用磁力搅拌器进行搅拌，有利于加速稀释粉向蒸馏水中溶解与扩散，并用滤纸过滤除去稀释液中的杂质。 4.将配制好的稀释液放到37℃的水浴锅中预热，一般在采精前1h将稀释液配好，保证有足够的时间使稀释粉与水充分混匀。 四、知识讲授 猪精液的稀释 二、精液稀释的操作过程 (一) 稀释倍数的计算 1.第一步：计算原精液有效精子数 原精液有效精子数(10⁸个) =原精液量(mL) ×精子密度(10⁸个/mL) ×精子活力 2.第二步：计算稀释的份数 稀释份数=原精液有效精子数(10⁸个) ÷每份要求有效精子数(10⁸个) 四、知识讲授 猪精液的稀释 3.第三步：计算稀释后的精液总量 稀释后的精液总量(mL) =稀释份数×每份要求精液的量(mL) 4.第四步：计算需加入稀释液的量 稀释液量(mL) =稀释后的精液总量(mL) -原精液量(mL) 5.第五步：计算精液稀释倍数 精液稀释倍数=稀释液量(mL) ÷原精液量(mL) 四、知识讲授 猪精液的稀释 6.示例: 原精液量250mL, 精子密度2×10⁸个/mL, 精子活力0.8。要求稀释后每份精液80mL,每份精液中有效精子数不少于20×10⁸个。 (1) 原精液有效精子数(10⁸个 ) : 250×2×0.8=400 (2)稀释份数: 400÷20=20 (3) 稀释后的精液总量(mL) : 20×80=1600 (4) 需加入稀释液的量(mL): 1600-250=1350 (5) 精液稀释倍数: 1350÷250=5.4 四、知识讲授 猪精液的稀释 (二) 同温处理 精液采集后应尽快稀释，放置时间不宜超过15min。稀释液的温度与精液温度一致，两者相差不超过1℃，必须以精液的温度来调节稀释液的温度。 (三) 稀释 1.将稀释液沿烧杯壁缓慢加入或用玻璃棒引流加入精液中，轻轻摇动或用玻璃棒沿一个方向缓慢搅拌，混合均匀。 提示： 稀释时应避免精子受到很大动力冲击。 2.高倍稀释时, 先低倍稀释(1:1)~(1:2) ,30s后加入余下的稀释液。 四、知识讲授 猪精液的稀释 三、静置、分装 1.精液稀释后应静置5min，检测精液活力，达到质量要求后进行分装保存，质量要求见表2-2-4。 2.检查精液瓶②外包装是否完好，打开包装取出精液瓶，将稀释好的精液倒入精液瓶，精液瓶略倾斜，使其流速缓慢平稳，避免对精子造成冲击。 注解： ①使用商品化的稀释粉配置稀释液操作比较简单，剂量按产品说明书使用。 ②精液可袋装或瓶装，应使用对精子无毒害作用且灭菌的一次性塑料或硅胶制品。 四、知识讲授 猪精液的稀释 四、知识讲授 精液的保存与运输 一、精液保存 (一) 常温保存(15~25℃) 1.恒温保存箱保存( 最佳17℃) (1) 精液稀释好后不能立即放入17℃左右的恒温保存箱内，应先在 左右室温下放置1~2h让其温度下降，或用几层干毛巾包好直接放在 恒温箱中，精液放入恒温箱时应平放或叠放，不同品种精液应分开放置，以免拿错精液。 四、知识讲授 精液的保存与运输 (2)保存时，恒温箱应一直处于通电状态，尽量减少恒温箱门的开关次数，防止频繁升降温对精子的打击。恒温箱中放置温度计，保存过程中，一定要随时观察恒温箱内温度的变化，出现温度异常或停电，必须检查贮存精液的品质，避免因温度下降过快而刺激精子，造成死精子增多。 (3)从放入恒温箱开始，每隔12h，要小心摇匀精液1次，摇晃时要上下颠倒。对于一般猪场来说，可在早上上班，下午下班时各摇匀1次，防止精子沉淀聚集造成精子死亡。 四、知识讲授 精液的保存与运输 2.冷水保存 (1)保温瓶保存法是将新鲜的井水装入广口保温瓶(冰瓶)内，精液瓶装在塑料袋里，将塑料袋浸在冷水中，每天换水1~2次。井水要保证新鲜(凉爽) ，精液瓶不要有裂缝以免精液稀释影响精液品质，保证每天的换水次数，并准确换水间隔时间，做到冷水保存。 (2)水井保存法是将精液瓶用塑料袋装好，放在竹篮等容器内，再把竹篮连同精液瓶一起放到井底保存，用时从井下取出。 四、知识讲授 精液的保存与运输 (二) 低温保存( 最佳温度0~5℃) 1.把装有稀释精液的小瓶包以数层纱布或棉花，再装入塑料袋内，直接放入冰箱(0~5℃) 或装有冰块的广口保温瓶中进行储存。 2.也可将精液瓶放入30℃温水杯中，再将精液瓶和温水杯一起直接放入0~5℃的环境中。 3.经1~2h后, 观察精液温度降至0~5℃。 四、知识讲授 精液的保存与运输 二、精液运输 (一) 运输筹划 1.安排好合适的运输季节，最好选择不炎热、不寒冷的春秋季节，便于在运输途中把精液控制在适当温度。 2.根据自己猪场种猪实际，确定需要引进种猪品种和可提供该品种精液的场家。根据预计精液到达时间，筹备发情母猪来源，以便在精液到达时，有足够数量母猪发情配种。 3.做好运输途中需要紧急处理的物品准备，精液装箱时应携带冰块、冰冻疫苗保温袋以及温度计、密封胶带等物品，保证运输途中安全。 4.根据可提供精液场家的地理位置，确定拟采用的运输方式及起运时间。 四、知识讲授 精液的保存与运输 (二) 双层泡沫保温箱运输 可以利用泡沫保温箱制作双层猪精液泡沫保温运输箱，利用废旧疫苗专用冰袋作保温剂，在双层保温层之间装配普通温度计，在不打开保温内箱情况下，可观测保温箱内箱温度变化。 1.购买5kg泡沫保温箱作为外层大保温箱，再根据大保温箱的内部尺寸，选择和改装一个能够装入箱内且一端留有一定空间的小保温箱，形成双层泡沫保温结构。 2.为了能够方便检测和观察保温箱内箱的温度变化，在内箱侧壁切开一个小洞，插入温度计，在内外箱一端的空隙之间，可以放置些冰袋或冰块。 四、知识讲授 精液的保存与运输 3.家用普通温度计的温度球插入内保温箱，温度0℃以上的区间露出在外箱内，打开外箱时可观察到内箱温度，又不影响内箱温度变化。 4. 双层保温箱的内箱装入2个疫苗专用冰袋，一般控制为半冰冻状态而没有硬块，在保温箱内外箱之间，放入大冰袋2个后，即可运输使用。 提示： 1.泡沫箱、盖精液用的毛巾等，应当定时清洗消毒，暴晒太阳，减少病原微生物的含量，避免对生产造成的不良影响。 2.保存精液时，应避免日光照射，防止精液温度骤然变化，导致精子温度性休克。 3.精液运输过程中，注意保持输精瓶或输精袋的密封性，防止精液外流与产生振荡。 五、师生互动 课堂讨论 1、精液稀释时为何必须坚持“同温处理”原则？若精液与稀释液温差超过1℃，会对精子造成哪些不可逆损伤？ 2、常温保存（17℃）与低温保存（0~5℃）的适用场景有何本质区别？地方品种猪精液为何不宜采用低温保存？ 3、双层泡沫箱运输中，为何要将冰袋控制在“半冰冻状态”？若完全冻结或融化，会对精液存活率产生什么影响？ 六、课内小结 七、课内练习 单项选择题 1、精液稀释的主要目的不包括（ ） A. 扩大精液量 B. 补充精子代谢所需营养 C. 提高精子畸形率 D. 延长精子体外存活时间 2、猪精液品质检查中，精子活力的检查温度应控制在（ ） A. 25℃ B. 37℃ C. 42℃ D. 4℃ 【答案】C 【解析】精液稀释旨在扩大精液量、补充营养、缓冲环境并延长保存时间，而非提高畸形率，畸形率是需控制的指标。 【答案】B 【解析】37℃是评估精子活力的适宜温度，过高或过低均会影响精子活动表现的准确性。 七、课内练习 判断题 1、精液稀释后可立即放入17℃恒温箱保存。（ ） 2、精子活力检查需在采精后、稀释后和输精前进行三次。（ ） 3、稀释液配制时，可直接将稀释粉倒入满杯蒸馏水中。（ ） 【答案】错误。稀释后精液需在22~25℃室温下放置1~2小时缓慢降温，避免直接放入保存箱引起温度打击。 【答案】正确。三次检查可全程监控精子活力变化，确保每次操作后精液质量仍符合输精要求。 【答案】错误。应先在容器中加入部分蒸馏水，再加入稀释粉，最后定容，便于充分溶解混合。 七、课内练习 简答题 1、简述精液稀释倍数的计算步骤。 【答案】 计算原精液有效精子数：原精液量(mL) × 精子密度(10⁸个/mL) × 精子活力； 计算稀释份数：原精液有效精子数 ÷ 每份要求有效精子数； 计算稀释后总体积：稀释份数 × 每份精液量(mL)； 计算需加稀释液量：稀释后总体积 - 原精液量； 计算稀释倍数：稀释液量 ÷ 原精液量。 感谢您的耐心观看 33 $