安徽省重点中学2025年9月奥赛培训第2次检测

奥赛培训第2次检测答案

一、单选题

1．下列实验方法中能直接鉴定蛋白质磷酸化位点的有（　　）

A．蛋白质免疫印迹法 B．酶联免疫吸附

C．酵母双杂交系统 D．质谱分析

【答案】D

【分析】 蛋白质磷酸 化：指由蛋白质 激酶 催化的把 ATP 的磷酸基转移到底物蛋白质              氨基酸残基              （              丝氨酸、苏氨酸              、酪氨酸）上的过程，或者在              信号作用              下结合              GTP              ，是生物体内一种普通的调节方式，在              细胞信号转导              的过程中起重要作用。蛋白质磷酸化是调节和控制蛋白质活力和功能的最基本、最普遍，也是最重要的机制。

【详解】A、蛋白质免疫印迹法又称蛋白质印迹，是根据抗原抗体的特异性结合检测复杂样品中的某种蛋白的方法，免疫印迹常用于鉴定某种蛋白，并能对蛋白进行定性和半定量分析，但不能直接鉴定蛋白质磷酸化位点，A错误；

B、 酶联免疫吸附试验是一种酶联免疫技术，用于检测包被于固相板孔中的待测抗原(或抗体)。即用酶标记抗体，并将已知的抗原或抗体吸附在固相载体表面，使抗原抗体反应在固相载体表面进行              ，用洗涤法将液相中的游离成分洗除，最后通过酶作用于底物后显色来判断结果，不能直接鉴定蛋白质磷酸化位点，B错误；

C、酵母双杂交系统是将待研究的两种蛋白质分别克隆（融合）到酵母表达质粒的转录激活因子（如GAL4等）的DNA结合结构域（DNA-BD）和转录激活域（AD）上，构建成融合表达载体，从表达产物分析两种蛋白质相互作用的系统，不能直接鉴定蛋白质磷酸化位点，C错误；

D、 质谱法即用电场和磁场将运动的离子（带 电荷 的原子、分子或分子碎片，有分子离子、同位素离子、碎片离子、重排离子、多电荷离子、亚稳离子、负离子和离子－分子相互作用产生的离子）按它们的质荷比分离后进行检测的方法。测出离子准确质量即可确定离子的化合物组成，能直接鉴定蛋白质磷酸化位点，D正确。

故选D。

2．溶菌酶是一个碱性蛋白质，其相对分子质量约为14kDa，用以下方法从蛋清中得到溶菌酶，纯度最高的方法是（　　）

A．硫酸铵沉淀，然后有机溶剂沉淀

B．硫酸铵沉淀，然后离子交换层析

C．等电点沉淀，然后离子交换层析

D．有机溶剂沉淀，然后凝胶过滤层析

【答案】B

【分析】离子交换法是利用离子交换剂与溶液中的离子之间所生的交换反应来进行分离的，分离的效果较好，广泛用于微量组分的富集。一般流程为：鲜蛋一预处理一搅拌吸附一上柱洗脱一等电点沉淀一透析一喷雾干燥一成品。溶菌酶在等电点以下较广泛的pH值范围内，分子带正电荷，可吸附于弱酸性阳离子交换树脂上，洗脱后盐析，可得溶菌酶沉淀，再进行精制可得成品。

【详解】溶菌酶具有耐热性，在酸性条件下经受长时间高温处理而不丧失活性；而且溶菌酶又具有特别高的等电点，因此采用热变性与等电点沉淀相结合的方法可除去大部分的杂蛋白。聚丙烯酸是一种多聚蛋白质，在酸性条件下可以与溶菌酶结合形成凝聚物；当有钙离子存在时溶菌酶又能从这种凝聚物中分离出来，同时生成丙烯酸钙沉淀，后者经过硫酸的酸化又重新形成聚丙烯酸。在实验中，一旦提取液中溶菌酶与聚丙烯酸结合，所形成的凝聚物会立即粘附于试管的底部，倾去上层液体可使溶菌酶既得到纯化，又得到浓缩。最后再用葡聚糖凝胶柱层析，使杂蛋白、溶菌酶和钙离子分开。因此从蛋清中得到溶菌酶，纯度最高的方法是硫酸铵沉淀+离子交换层析的方法更合理有效，ACD错误、B正确。

故选B。

3．糖原磷酸化酶a 和磷酸化酶b 是一种酶的两种不同存在形式，下列说法正确的是（　　）

A．磷酸化酶b发生二聚化即可转变为磷酸化酶a

B．磷酸化酶b上的一个丝氨酸被磷酸化即可转变为磷酸化酶a

C．磷酸化酶b作为酶原，可以被蛋白酶切割从而转变为有活性的磷酸化酶a

D．葡萄糖分子可以结合磷酸化酶b，通过变构调节的方式将其转变为磷酸化酶a

【答案】B

【分析】①糖原磷酸化酶具有磷酸化酶a和磷酸化酶 b两种形式。磷酸化酶a有催化活性，磷酸化酶b几乎无活性，它们可以相互转变；

②糖原磷酸化酶受AMP（活化），葡萄糖-6-磷酸（抑制）的别构调节；

③磷酸吡哆醛（PLP）是磷酸化酶、氨基转移作用的必需辅助因子。

【详解】糖原磷酸化酶以a、b两种形式存在。在糖原磷酸化酶激酶及ATP存在下，在糖原磷酸化酶b的丝氨酸残基进行磷酸化修饰，使无活性的糖原磷酸化酶b转变成有活性的糖原磷酸化酶a。糖原磷酸化酶a可经磷蛋白磷酸酶作用使其丝氨酸残基脱去磷酸，成为无活性的糖原磷酸化酶b，B正确，ACD错误。

故选B。

4．在真核生物中，通常比较有利于转录的基因位置是（　　）

A．靠近端粒区

B．异染色质区

C．常染色质区

D．在组蛋白被高度去乙酰化的区域

【答案】C

【分析】转录是指以DNA的一条链为模板，合成RNA的过程。

【详解】转录是指以DNA的一条链为模板，合成RNA的过程。靠近端粒区为长的序列重复；异染色质被定义为具有不同密度的染色体材料，在异染色质中，基因要么被抑制，要么被修饰，异染色质是基因组的非活性部分。与常染色质相比，异染色质染色更深。异染色质的主要功能之一是避免遗传不稳定性。常染色质被定义为不易接受细胞分裂的染色体物质。 常染色质有助于代表主要基因并包括转录。组蛋白高度去乙酰化会影响转录，从而导致表观遗传现象，ABD错误，C正确。

故选C。

5．下列微生物的生活史最接近病毒的是（　　）

A．衣原体 B．支原体 C．立克次氏体 D．螺旋体

【答案】A

【分析】病毒是非细胞生物，营寄生生活。病毒侵入寄主后，第一步是表达与复制相关的蛋白，称为潜伏期。第二步是表达结构蛋白，如外壳蛋白，并利用复制酶对核酸进行大量的复制，为增长期。第三步是进行装配，将核酸和结构蛋白组装形成病毒粒体，转运到其它未侵染的细胞中。病毒的生活史简单概括为：吸附、注入、脱壳、生物合成、组装、成熟与释放。

【详解】A、衣原体是一类在真核细胞内专营性能量寄生的小型革兰氏阴性原核生物。衣原体为革兰阴性病原体，是一类能通过细菌滤器、在细胞内寄生、有独特发育周期的原核细胞性微生物。衣原体是一种比细菌小但比病毒大的生物，是专性细胞内寄生的、近似细菌与病毒的病原体，具有两相生活环。它没有合成高能化合物ATP、GTP的能力，必须由宿主细胞提供，因而成为能量寄生物，多呈球状、堆状，有细胞壁，有细胞膜，属原核细胞，一般寄生在动物细胞内。其生活史与病毒最为接近，A正确；

B、支原体是一种类似细菌但不具有细胞壁的原核微生物，能在无生命的人工培养基上生长繁殖，直径50-300nm，能通过细菌滤器，B 错误；

C、立克次氏体为革兰氏阴性菌，是一类专性寄生于真核细胞内的原核生物。是介于细菌与病毒之间，而接近于细菌的一类原核生物，没有核仁及核膜。一般呈球状或杆状，主要寄生于节肢动物，有的会通过蚤、虱、蜱、螨传入人体、引起斑疹伤寒、战壕热等疾病，C错误；

D、螺旋体是一类细长、柔软、弯曲呈螺旋状、运动活泼的原核细胞型微生物，其在生物学位置上介于