单元检测(十五) 基因工程(含生物技术安全性和伦理问题)-【衡水真题密卷】2025年高考生物单元过关检测（广东广西专版）

2024一2025学年度单元过关检测（十五） 生物学·基因工程 (含生物技术安全性和伦理问题】 (考试时间75分钟，蕊分100分) 一、选择题：本题共16小题，共0分。第1一12小题，每小题2分：第13一16小题，每小题 4分。在每小题给出的四个装喷中，只有一喷是符合赠日要术的。 题号12345678910111213141516 答案 L.图为DNA分子在不同，的作用下所发生的变化，图中依次表示限制路，DNA聚合 酶，NA连接酶解能降作用的正峰顺序是 +三 A①②①① 五①2②④0 C,①D④② D.①①② 2.髋相围一巨荣细型集落料数因子(GM-C5F)可以增加白相鞋的数量，某科研团队将人 的GM-CSF甚因导人大新杆南可大最生产GM-CSF,井用于隋床上化放疗之后的种 治疗。下列数述正确的是 A.可通过R的方法获取人的GM-CSF基围 &构建GM-CSF表达载体需要限制南和DNA聚合情 C基四表达载体上的复刺原点可割控GM-CSP基因的表达 几.可通过显微注射的方法将GMSF基因导人大弱杆商 玉或火虫的荧光素南能智亿ATP衡活的变充素氧化发光，这一现象在生物枪测和成像方 面有重要的应用价值。为了解决天然黄光素韵不能高效催化人工合成的黄光素T☑ 发光的问圆，研究人员采用蛋白质工程（又称为第二代基因工程）对它进行了改造。下 列氢述正确的是 A通过化学诱变剂可定向改意天然荧光素酶的基因序列 我改迹天然荧光素陶所用的基因表达镜依不需要启站子和终止子 心可用求方法检渴突变的荧光家隔基因是香解译成蛋白质 D改益后的免光素衡在一定条件下霍化TZ发光是将化学能转化为光能 4.“DNA粗提取与鉴定”的实稳步覆是，研磨*去杂质*析出·鉴定。下列说法情满 的是 单元过关检测十五}生物学第1面共1？面} 衡水真 A洋墓，菜花，香蕉，被菜和塔肝均可作为是取DNA的材料 B对研牌液透行离心是为了加速DNA的淀 C,过滤液沉淀过程在4℃冰箱中进行是为了脚止DNA序解 口新出时的离心转建明显高于去杂质时的离转速 5,科学家将甚润干早静珀反应中具有阀控作用的ACM0某因转人棉花细跑中，培育出 了转基因抗早绵花。下列叙述精误的是 《》 A.将ACMO基因导入棉花细宽可用农杆菌转化法 B构健基因表达线体是塔脊转基因杭氧棉花的核心工作 C,ACMO基因成功插入棉花细盥染色体上也未必能正霜表达 DPCR扩增AhCO基因时需警设计两种碱基互补的物 :,NA琼脂梅餐敢电球的分了第效应是指作为支持介质的琼槽，具有网塔结构，使大分了物 质在通过时受到较大阻力.借觉分离不同大小的[NA片段。下列说法蜡视的是《》 ADNA片段相对分子质量越大，迁移就越慢 且凝胶制备中加人腹能染料能与DNA分子结合，用于分离后DNA片段的检测 C,将电袜暖中液加入电泳浩中，电豫缓冲液不能没过凝教 D琅暂辅凝收电袜可用于分离、整定DNA分子的混合物 7.某因工程中食采用农杆菌转北法将目的基因导入植物细喜。某科研小组欲将某抗虫基 因导人某植物，下列分析错误的是 A,应该将抗虫基因辅入农杆葡T质粒的TDNA片段内 乱可以用农杆菌侵染水稻，玉米等单子叶植物 C.目的基因与T行质粒的结合未污及碱基互补配对原则 D转基因是香成功，最箭便的方法是观察该植物有没有枕虫生状 8,则奥科学家斯万特·帕博凭借对已灭地古人类基因组和人类进化的发现荣疾922年 诺贝尔凳生理学或医学奖。他在研究过程中使用了大引物R构建定点炙变，其过程 如图。下列复迷正确的是 同梦动德风 诗安列物行 列物2 蹈密在 单元过关检测（十五】生物学第2页（共12页1 3 A进行代R扩增需要的常有解旋衡和闲高袒的DNA聚合倒 B利用该技术将某功能蛋白的结构政变国于蛋白质工程 C在PR1中获得的大引物是指以可引物1延神得到的NA健为模板 D代CR子链的延伸过程器是从引物的5瑞开始的 9.昭港苹果智满全国，苹果切开后不久膜色便会加保，这种说象称为“揭变”。褐变是由使于 相电的多雨氧化酶(PP)能化位于液泡中的多肠类物质生成棕色色素所致。据氏，科研 人员培脊出了抗褐变的转基因苹果，其工作流程如固。下列叙述正确的是 止人✉发丰常海末钱性基国 A.如若想状得抗将变的基因草果，即日的蒸因可这卡那霉素抗生基因就物利P中)表 达的林因 B过程①是基因工程的核心步骤，至少需要限制酶和D公NA聚合南的参与 C,在露②之前，需要用次氧酸闲溶藏对苹果嫩叶碎片进行灭黄处理 几.为了甲估目的林因对钟制草果蝎变的效果，可与导人不含目的某因质粒的植株作对题 1心.干找素是一种具有干找转球复制作用的糖蛋白，在在床上被广泛用于油疗药毒感染性疾病。 如果将干扰素分子上的一个半就氯骏（密丹子：UGU、C)变成丝氨酸（密码子：U. U、CAG),健可以延长干扰素的体外保存阳时间。下列述量误的是 A对干扰素的设计和改登，以基因的结构和功能的关系为基出 B对干扰素基因进行定点奖变(CG)来实观碱基的替换 C该蛋白质工醒的技术思路与中心法期相反 D.改造后的干找累的功能与天然干扰素不是完全不问 11,反向汽求是一种通过己知序列设计引物对未知序列盖行扩增的技术，其过程如周 下列叙述正确的是 ( 右到引自 序列 到网售 车自序列 CH 本知序 RI剩如hA年.P 乐NA孕子 进：1物计网省道的0内程直在幼 单元过关检测（十五}生物学第3页共12面） 衡水真见 A.应选拜物2和物3选行CR扩增 B设计的引物中GC碱基名量越高，退火的西度悠高 C.℃R产物是包含所有已知序列和末知序列的环状DNA分子 口整个过程需用到限制酶、DNA连接降，耐高祖DNA聚合酶及逆辣录动 12,在DNA分子杂交的过程中，两种生物DNA单链的互补碱基会结合在一忌，形成杂合 双时区：在没有直补碱基序列的部位，仿然是两条醇离的单鼓，如图所示。下列叙述正 跳的是 N09 图肉的单其 8 教种绮NA 静升现鲜× A.在DNA分子象交之前，可在50℃的条件下使DNA变性解聚为单链 A两个近缘物种生物的DNN分子之间进行杂交，形成的杂合双硅区较少 C、港过设计两种DNA引物分辉与DNA的两条鼓结合，经R找术可大械扩增目的本国 D象合双链区一条链的序列是5 GCATCT3',另一条益的序列是3'GUAGA5 13,基因工程中需使用特定的限精麝切制基因程体，以便其与日的基因连接形成基因表达 载体。研究人妫将相同的基因载体分组并进行相应精切处理（如表），其中限制南日山 和H2积判序列不可。各组基因我体经青切处理后，进行琼糖凝胶电汰检测，实验结 果如图所示。下列说法正镜的是 分组相应切处 M 甲 限制制H打 乙 限M南2 两限制南十H程 021 A,该基因藏体为4,8k的环状NA分子 且限制腐H1与2在该载体上都有识别和切期位点 C、限剂偏H门与H2在该缓体上的骑切位点最短相距0.4kb D限制南作用于该载体时会直接导致氢堡和降酸二密健的新裂 密在 单元过关检测（十五）生物学第4页（共12页] 14.知图是利用某因工程技术培育新品种水稻的部分花程，序号代表操作过程，下列叙述 销误的是 A.利用PR载术扩增日的基因需依次经 过变性、延种、复性阶段 防ONA川复 R为脚止日的基因白身环化，过程①量好 1和 使月两种限村停 含看初 的喜轩请 C常用农杆菌作为受体细图，际因是紧殖速度快，某因组结构简单 D,重组T万质粒上的TDNA能将日的基因整合到宿主润图染色体上 15.神经科学家设计了一种合成蛋白置L1K1(结合ATP并磷酸化其起标的蛋白及)，德 改答老年认如思化人样的记忆功能。下列叙述错误的是 A设计蛋自质LK灯时，先设计其基因的碱基序列再推测其功能 我通过基因定点突变技术可对K1蛋白基因进行碱基的替换 C设计蛋白质1K]科用的技术是蛋白级工程，其可相迹新的蛋白质 D蛋白质的高圾结构十分复杂，载蛋白质工程是一项难度很大的工程 16.下列不属于对转基因生物废余性评价的是 A转基因生物的硕色、大小，形态的评价 玉对转人基因量是香会污荣本土生物透行评价 C,转基因食品的毒理学，玫敏性和营养学评价 D对特基同生物的天敌，馆食对象等的影响 二，非选择题：共和分。考生根据要求作答。 17.(12分)重叠延钟℃R定点突变过程分为两宠，如图1，内皮种素能通域抑制血管内皮 附图的增殖和直管的生成限制种情淘鬼的生长。研究人员利用重叠延神R定点突 变技术将内皮抑素基国d山改造为能进人亮细韵并有较强韩癌作用的突变基因 mo(m》,并再与抗H2(人表皮生长因子受体2)的射米抗体基因D四形成型合基因 Dimendo(m》,导人大肠杆满并表达，主要过程如图2，其中Kw表示卡率霉素抗橙 基因，程节基因LacI的表达产物能和操纵基因La0结合拍制基因的表达，PTG能 与【的表达产物结合，诱导日的基因的表达。同答下列何题 单元过关检测（十五}生物学第5页！共12页 衡水真显 4代发3引身为1K妇 突空F 矣里 “美变R 华2网 舞安位过 -(a A R动子a 同梦从因年上 (1)图1中代R和风R2配制反应体系时需加人不同的一·图2中构建重组 质粒时使用的限制酶是 (2)下列①-是相关引特，其中突变1F为引物①，则突变1R,突变F,突变2R分别 为 D5-GCGGCATGOGGGOCGATOGOGTGACTGOCAGTGCTGTOC-3 -CGGAATTOCATATGOGOOGOOGOCGOCGOCGCCGCCGCCGC3 S5-GGACAGCACIGGCAGTCAOGOGATOGOOOCGCATGOOGC-3 -GTGGCATGGCTCGGACGCAAACGGGOGCAGGCTG3 O5'-ATTTCTCGAGTTACTTGGAGGCAGTCATGAAGCTG-3 O5-CAGCCTGCGCCOGTTTGCGTCCGAGCCATGOCAC-3' (3)导人重组质粒的大肠杆图由于周节基因L斯】的表达产物能和操枫蒸因0结 合，阻止爵的移动，抑Dmmd如(m》的转录。当菌株扩大培养到一定数 量后在培养基中加入 ,使Dimr endo(m》持镂表达. 密在 单元过关检测（十五】生物学第6页（共12页」 3 (4)研究表麦明，乳肆癌霜出现H2某因的高表达（不同乳粮瘤维监的表达有染界），因觉 H2被认为是乳粮墙检测和治疗的重要花点。研究人易用不同凌度Dmb(m】 触合蛋白处梨乳像篇细限5K求3，DA231,MC下7和正常乳藤细腹日固100作为 实验组，选取正常培养的乳跟魔组能和正常乳黎细购作为对照组，一段时间后分判 测定对器组和实晚组的组胞数并计算裤制率，结果如图所示，抑制率的计算公式是 Dmm山(m)照合蛋白对不同乳暴毫细胞的抑制率不问，其 可能原因是 (5)纳米抗体是传统抗体的重佳可变区片段，只有传统抗体的1/门0，阻内部存在更多的 二疏健，结构更段定。与传统抗体相比，钠米抗体的优点是 1812分)人乳铁蛋白LF)具有多种生理功能，被认为是一种极具开发潜力的食品添加 剂。如图为某食品公可利用乳集生物反应器生产L下的过程。画答以下间愿： (时线子（同腔 4表日物可草来石香 m 他收之“大新干母口，空国整前移想，花的 I。加I,加1，I限制带，Aw为眼H代班风.@为官精长件转丙时得用国 1)要从1F乳腹表达载体中我取日的琴因并使之或功表达生产F,使用的限有專 最住是 老日的基因导人成纤修翎图中一眼应用的技术是 (2)成奸维潮园培养液中澤知H:PO,HPO1和CO的作用是 在导人日的基因之前，成纤峰淘胞需用 处理使之分散成单个相型。 (3)在核移植过程中，先将采集到的卵母狂脑体外培养到 期后去核，再将成纤健 用围从切口注射到卵周朦内，使用电激建化学方法促送 ,形成重构旺。 单元过关检测（十五}生物学第7页{共12面} 衡水真见 《4)在获取形导钮监和胚哈移植前要注射促廊泡生成微素或刻前列经醇等性蛋素。对 供明母羊注射促耶泡生成激素等激素，其日的是 :对受体督羊 (代华单)生射氯前列烯醇，其目的是 (5)为检验乳解生物反皮器是否成历，研究人员进行了物菌实验。其结果知下： 细用 2 3 4 血，4对可有莲素 人乳清 转基问乳睿 纸上意题 ”《浦缩》倍 0,5万U链嘴素（浓笔的倍） (快缩)倍) 郑离图直径(cm) 名1 1.9 17 无 ①组别4速纸上的物质是 ②与人的F相比，乳藤生物反应善生产的山F抑离效果 (6》为确保转基因产品的发全性，该食品公司后前段应进行的工作是 A实底转本因产品标识 B进行食月安全性评估 C检测转基因单乳成分 D整定基因是否稳定遗传 19,(12分)植物在高于监内N+装度的环境下，S0S3和S0仪激活位于霞覆上的运蛋 白S0S1,S01通过S05信号通路与鞋质内岛结合并将其持出推粒外，峰持其正宿 生衡活动。问答下列同题： 《1D植物利用S信号通路将N:”排出钲数外，这种运输方式的特点是 (?)通过基因工程在水稻中过量表达551蛋白，以期增强水稻抗盐能力 ①为恢得编码S1蛋白的基因，可提取野生里水稻总RNA,夏过 获得模 板DNA,再经PCR获得SOS1基因片段。 ②测序表明，5】基因编码序列含有3444个核普酸，其中A十T含量古53%，枫 板链中C含量为26%，那么S51基同双雄序列中G十C韵含量为%. ③构建表达较体时，在下图所示载体含有的队材降识位点插人S7基因.。序列分析 爱现5某因内部有加1的识即学列，为桂线体中S5基因绿色变完蛋白某因 正确表达，应在丙丙端分别柔知 两种限制碍的肌料序列， 将S基因插人镜体前，应选用 两种限制南对载体南切。 Alti Sv IG ITGA GkC--G LLk只 -JCTAGA GGATOC CCGGOT GAAITCATG....ONN …修电S和吗wM一E雅 密程 单元过关检测（十五）生物学第8页（共12页引 1恋 梦y lI TCETAC SCCCGG6 1K40 i 《3)重组质粒转亿水稻后，这取可发绿色荧亮的植株，鉴定其抗盐能力是否增强，采取 的操作是 (4)若发现水稻中过量表达S1基因并不能明暴提高其抗盐能力，从信号通路角度 分析，可能的原因是 20.(12分)荧光素南1度蛋白)由50个氢基酸组战，分为N骑和C端2个功能片段，即 1ue蛋白(2-416氮非酸)稚CLe蛋白(398一60氨基酸)，两部分不能白动重组并发 挥作用：将目标蛋自OBK1蛋白和OXG2蛋自分别与NL度蛋白和CLC蛋自胜 合，若2个口标蛋白相互作用，期Nc蛋白和C蛋白能成功阻装为卖光素酶并分 解黄光素发出荧光。科哥人员构建了可表达O因K们HAN融合蛋白的表达载体 1和可表达☐oe-OsXLG2融合蛋白的表达载体2并进行了检测，如图1新示，图中 HA为标答蛋白《用于目的蛋白的检测示察等)的编码序列 表达A蜂日一 LoK I Apl A:Id司 条 3 盏智 闲2 (1)质乾载体有一至多个 ,供外源DNA片爱扬A其中：已知 表达载体1和2上均含有卡部霉家抗性基因，目的是 :烟草 是双子叶植物，将重组质粒导人烟草叶片常用的方法是农杆需兼化法，侵臻烟草好 单元过关检测（十五}生物学第9页！共12页} 衡水真见 片纽鼠后的农杆菌在转化过程中表现出的特点是 (2)物建重组质粒1时，雷要肥O到K1某因的对成终止密到子的3个碱基去除，原因 ,图中HA编骨序列插入到OBK1某因 编刊链的 (填5'馏”或“3璃”)，编码链为转录时所用模板链的互补链。 (3)如果用抗L蛋白抗体分别格测表达载体1和2融合蛋白表达情况，结果如图2析 示，可优先选用抗蛋白抗体进一步区分，条带1为 融合蛋白。 (4)将分划含有表达霞体1和2的农杆圆圆液共同注射到含有卖光素的烟草叶片后可 检测到荧光，说明 2L(12分)拟南芥体内的基因X具有多个启动子，通过一种光敏色素作为受体，对光刺徽 进行应答，由此选择不同的启动子并转浸出长度不司的mRNA,从面表达出存在于细 限内不同位置的不同蛋白质，由此使担南齐丛戏出不司的生长状畜。其相关蛋白的合 成过程如医所示。 子 ● ■ X 5一● MKXAX.D 老始青号子面于垂 ■ RRNAX2 4体药移信■ ■术瑞的质关D 末暗 )术神新白质X之 (1)两种蛋白质 《填，”或“”)末端的氨基限序列相同，该术南对道的是蛋白 置的 一NH”或“一COOH”)末端，a末端是引导蛋白质枚运输进人叶 绿体的信号肽段 (2)研究人员通过特定技术，将绿色荧光蛋白《GP)的基因片段插人到基因X的特定 位置，使表达出的蛋白质X①，X②能猫有绿色现光蛋白，以实现它们在细依内的可 棍化，由此得到A系植蛛。(GFP某因不含启动子和终止子) ①根蒸图1，GFP基因片段应插人到基圆X内字母表示的特定位置 ②GFP基因来白于水母等动将的相密中，需先选择合适的限利麻将其从染色体 DNA上蚜构下案。GF甲基因两侧的碱基序列如图2所示，根据碱基序列应这择下 表中的进行初根。 密西 单无过关检测{十五」生物学第10页（共12页】 限制雨 到别序列 Bnw HI G+GATOC CCTAGG tind目 A￥AGCTT TT0GA↑A Nor I G￥CGGOCGC CGOCGGCG EcoRI G+AATTC CTTAA↑G ①酶切陶需对GFP基因进行米扩增，b侧厮用引物已经确定，n侧引物若在以 下4种中进行选择。根禁：撕序列应选择 ,不选其地3种的理由是 在PCR仪中完成4个福环后 含有度引物的DNA片段数为 个 引物1,6'ATCCTGCTA3 引物2：5 TATGGATCC3 引物3,5 GGATCCATA ☑引物4：5'GGAAGGATA3 (3)研究人员在A系植株的邓码上，去除产生光敏色素的基因后得到B系精候，菌后， 分别在黑暗条件和虹光条件下培养A,B两系植棕，培养条作及观测到荧光的部位 如表斯示。 GFP菱光的居得得位 发育条件 用啼条件红光条件 A系植物 妇随质基淡 叶赵落 B植物威质幕质辣出质某质 根据以上研究结果，A系植快对红光刺懂作出应答被蕾活的原国是 3 单元过关检湖1十五}生物学第11页（共12页} 衡水真题密在 单无过关检测{十五」生物学第12页（共12页】·生物学· 参考答案及解析 左右，而两者应用于粮食醋发酵时，发酵液总酸 测每种菌种的发酵液中“纤维素”含量的变化比 含量一般可以达到50g·L1左右，由于醋酸 较准确，因为纤维素分解过程中会产生很多中 发酵需要酶的催化，且酶的催化需要温和的条 间产物，未必都是终产物葡萄糖，因此检测纤维 件，易受pH的影响，所以推测原因可能是青梅 素含量较准确，且葡萄糖会被纤雏素分解菌利 果醋发酵时DH较低，抑制了菌种活性。 用，进而影响检测效果。 ③果醋的形成是以乙醇为底物，在酶的催化下， (4)筛选出的菌株用于堆肥后，肥料可用于还 田，其意义是增加土壤肥力，提高了肥效，减少 通过醋酸发酵形成的。依据图3可知，当乙醇 了环境污柒。 含量较低时(5%)，总酸含量较低，此时是由于 21.(1)获得能产生特定（治疗乳腺癌的）抗体的B 乙醇作为底物不足所导致：当乙醇含量过高时 淋巴细胞 (9%),总酸含量更低，推测原因可能是乙醇含 (2)动物细胞的融合一定的流动性 量过高则会抑制醋酸菌的生长和代谢，导致青 (3)筛选杂交瘤细胞能大量增殖，又能产生特 梅果醋中总酸含量较低。 定抗体 20.(1)C1酶、Cx酶和葡萄糖苷酶刚果红染色法 (4)单克隆抗体能使药物精准地作用于乳腺癌 (2)选择培养（增加纤维素分解菌的数量）能 (靶)细胞，避免其他细胞受损 利用刚果红的微生物也能出现透明圈（能利用 (5)由单一B淋巴（或杂交瘤）细胞克隆产生的、 淀粉的微生物也能出现透明圈，因为淀粉也能 只识别某一特定抗原的特异性抗体（或由一种B 与刚果红形成红色复合物) 淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合得到的单一杂交瘤 (3)纤维素葡萄糖能被细菌利用，影响实验 细胞产生的特异性抗体) 结果 【解析】(1)向小鼠注射特定的抗杭原应取自人的 (4)增加土壤肥力，提高肥效，减少环境污染 乳腺癌细胞，目的是使小鼠体内能产生获得能 【解析】(1)纤维素分解菌可以合成和分泌纤维 产生特定（治疗乳腺癌的）抗体的B淋巴细胞。 素酶，纤维素酶是一种复合酶，其组分至少有C1 (2)步骤①是指动物细胞的融合，实现该过程依 酶、CX酶和葡萄糖苷酶。对纤维素分解菌进行 赖于细胞膜具有一定的流动性的结构特点。 初步筛选后，可通过刚果红染色法进行进一步 (3)步骤②是指筛选杂交瘤细胞，经步骤③筛选 鉴定，菌落周固出现透明图的即为纤维素分 得到的杂交瘤细胞具有的特点是能大量增殖， 解菌。 又能产生特定抗体。 (2)培养基A中含有的滤纸作为唯一碳源，滤纸 (4)ADC能降低乳腺癌治疗药物的副作用，原因 的主要成分是纤雏素，用该培养基培养的目的 是单克隆抗体能使药物精准地作用于乳腺癌 是增加纤维素分解前的数量，相当于选择培养。 (靶)细胞，避免其他细胞受损。 培养基C中长出的菌落不一定都能分解纤维 (5)单克隆抗体是指由单一B淋巴（或杂交瘤） 素，能利用刚果红的微生物也能出现透明圈（能 细胞克隆产生的、只识别某一特定抗原的特异 利用淀粉的微生物也能出现透明圈，因为淀粉 性抗体（或由一种B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融 也能与刚果红形成红色复合物)。 合得到的单一杂交癞细胞产生的特异性抗体。 (3)为了比较几种纤维素分解菌的分解能力，检 2024一2025学年度单元过关检测（十五）生物学·基因工程 (含生物技术安全性和伦理问题) 一、选择题 酸连接起来，形成脱氧核糖核苷酸链，故④用的 1.C【解析】限制性核酸内切酶用于切割DNA片 是DNA聚合酶：DNA连接酶用于连接DNA片 段，故①用的是限制性核酸内切酶；DNA聚合酶 段，故②用的是DNA连接酶；解旋酶会使DNA 用于DNA的复制过程，将单个的就氧核糖核苷 双链解旋而分开，故③用的是解旋酶。 ·15 3 衡水真题密卷 单元过关检测 2.A【解析】PCR是一项体外扩增DNA分子的技 冲液加入电泳槽中，电泳缓冲液没过凝胶1mm 术，可用于目的基因的获取及扩增，故可通过 为宜；琼脂糖凝胶电泳可根据DNA分子大小、电 PCR的方法获取GM-CSF基因：构建GM-CSF 荷等对DNA混合物进行分离、鉴定。 基因表达载体是基因工程的核心，该过程需要限 7.C【解析】农杆菌中的Ti质粒上的TDNA可 制酶和DNA连接酶：基因表达载体上的复制原 转移至受体细胞，并且整合到受体细胞染色体的 点可以启动复制过程，启动子和终止子可以调控 DNA上，因此应该将抗虫基因插入农杆菌Ti质 GM-CSF基因的表达；大肠杆菌属于原核生物， 粒的T-DNA片段内；若在单子叶植物的伤口处 将目的基因导入原核生物的方法是Ca+处理法 涂抹酚类化合物，则可以用农杆菌侵染水稻、五 (感受态细胞法)，将目的基因导入动物细胞最有 米等单子叶植物：目的基因的黏性末端与质粒的 效的方法是显微注射法。 黏性末端依赖碱基互补配对原则连接在一起：转 3.D【解析】通过化学诱变剂可以让天然荧光素 基因是否成功，最简便的方法是从个体水平上观 酶的基因序列进行随机突变，但化学诱变通常是 察该植物有没有抗虫性状。 不定向的：改造天然荧光素酶所用的基因袁达载 8.B【解析】进行PCR扩增需要的酶是耐高温的 体必须包含启动子和终止子，启动子是驱动基因 DNA聚合酶，不需要解旋酶：欲将某功能蛋白的 转录的元件，而终止子是指示转录终止的元件： 结构改变，应设计诱变引物，该过程属于蛋白质 PCR方法主要用于检测DNA的存在或者染色 工程；在PCR1中获得的大引物是指以诱变引物 体DNA上是否插入目的基因，检测日的基因是 延伸得到的DNA链为模板：PCR子链的延仲过 否翻译为蛋白质的方法为抗原一抗体杂交：改造 程都是从5'开始的，引物与产物互补配对，因此 后的荧光素酶在一定条件下催化DTZ发光是将 都从引物的3端开蛤的。 化学能转化为光能。 4.B【解析】DNA粗提取与鉴定的实验中，应选择 9.D【解析】要想获得抗褐变的转基因苹果，可选 富含DNA的材料，洋葱、莱花、香蕉、菠莱和猪肝 抑制PPO表达的基因作为目的基因，而卡那霉 均可作为提取DNA的材料；离心研磨液的目的是 素抗性基因为标记基因：过程①是目的基因表达 加速沉淀，离心能够加速细胞膜、细胞器、一些较大 载体的构建，是基因工程的核心步骤，该过程中 至少需要限制性内切核酸酶和DNA连接酶的参 杂质的沉淀，离心法可以获得更高纯度的DNA:过 与：在步骤②之前，需要用次氯酸钠溶液对苹果 滤液沉淀过程在4℃冰箱中进行是为了防止DNA 城叶碎片进行消毒处理，从而保证脱分化过程正 降解：去杂质时离心转速为1500r/min析出时离 常进行：为了评估目的基因对抑制草果褐变的效 心转速为100000r/min,故析出时的离心转速明 果，可与导入不含目的基因质粒的植株作对照， 显高于去杂质时。 本实验设计的目的是排除质粒导入本身对实验 5.D【解析】将AhCMO基因导入棉花细胞可用 结果的影响，同时也能检测导入目的基因的 农杆菌转化法，因为农杆菌中的T质粒能将目 效果。 的基因整合到受体细胞的染色体DNA上：基因 10.A【解析】蛋白质工程的目的是根据人们对蛋 表达载体的构建是基因工程的核心，即构建基因 白质的功能需求改造或制造蛋白质，理论基础 表达载体是培育转基因抗旱棉花的核心工作； 是蛋白质的结构与功能相适应：比较半胱氨酸 AhCMO基因成功插入棉花细胞染色体上也未 和丝氨酸的密码子，若第二个碱基由G替换为 必能正常表达，因为基因的表达包括转录和翻译 C,就可引起氧基酸的替换，所以基因上发生定 两个步骤，因此还需要对转基因棉花进行进一步 点突变(CG),可实现基因的改造：该蛋白质工 的检测和鉴定：PCR扩增AhCMO基因时需要设 程的技术思路与中心法则相反；改造后的干扰 计两种引物，这两种引物之间不能发生碱基互补 素由于氨基酸序列改变，导致结构改变，从而延 配对，否则无法实现DNA体外扩增。 长体外保存时间，但其仍具有干扰病毒复制的 6.C【解析】相对分子质量大小会影响物质在电泳 功能，即改造后的干扰素与天然干扰素的功能 时的迁移速率，DNA片段相对分子质量越大，迁 不是完全不同。 移就越慢，分子量越小，迁移速度越快；为了便于 11.B【解析】DNA子链合成的方向为5'端到3 对分离后的DNA片段进行检测，在凝胶制备中 端，因此要通过已知序列设计引物对未知序列 加入核酸染料，能够与DNA分子结合；将电泳缓 进行扩增应选择引物1和引物4进行PCR扩 ·16 ·生物学· 参考答案及解析 增：GC碱基含量越高，碱基对间氢健的含量越 LIMK1利用的技术是蛋白质工程，其可制造新 多，退火的温度越高：PCR产物是包含所有已知 的蛋白质；蛋白质的高级结构十分复杂，故蛋白 序列和未知序列的链状DNA分子；整个过程需 质工程是一项难度很大的工程。 用到限制酶、DNA连接酶和耐高温DNA聚合 16.A【解析】转基因生物的颜色、大小、形态与转 酶，不需要逆转录醇。 基因生物的安全性无关，故对转基因生物的颜 12.C【解析】当温度超过90℃时，DNA分子发生 色、大小、形态的评价不属于对转基因生物安全 变性，双链DNA解聚为单链，PCR时，一般热 性评价；污染本土生物会对生物多样性造成威 变性温度设置在94℃；在分子杂交时，形成杂 胁，因此对转入基因是否会污染本土生物进行 合双链区的部位越多，DNA碱基序列的一致性 评价属于对转基因生物安全性评价；对转基因 越高，说明在生物进化过程中，DNA碱基序列 食品的毒理学、致敏性和营养学评价属于对转 发生的变化越小，因此亲缘关系越近。所以两 基因生物食物安全的评价：转基因生物的天敌 个近缘物种生物的DNA分子之间进行杂交，形 捕食对象与生物多样性和生态系统稳定性有 成的杂合双链区较多：要扩增出目的基因，需要 关，因此对转基因生物的天敌、捕食对象等的彩 根据DNA的两条链分别设计引物，所以设计两 响属于对转基因生物安全性评价。 种DNA引物分别与DNA的两条链结合，经 二、非选择题 PCR技术可大量扩增目的基因：DNA分子杂交 17.(1)引物EcoR I、HindⅢ 后，杂合双链区（碱基互补配对）一条链的序列 (2)③④⑥ 是5'GCATCT-3',另一条链的序列是3'- (3)RNA聚合 IPTG CGTAGA-5' (4)(1一实验组细胞数/对照组细胞数)×100% 13.B【解析】由图可知，当仅用一种限制酶切割载 不同乳腺癌细胞Her2基因的表达水平不同，进 体时，仅产生一种长度的DNA片段，因此该载 入癌细胞的Dim-endo(m)融合蛋白的数量有差 体最有可能为0.8kb或0.8kb倍数的环状 异：Dim-endo(m)融合蛋白中的emdo(m)对不 DNA分子；当用一种限制酶切割载体时，产生 同乳腺癌细胞的杀伤力不同) 的DNA片段等长，而用两种限制酶同时切割 (5)穿透力强，作用持久，免疫原性弱 时，产生两种长度的DNA片段，所以两种限制 【解析】(I)DNA聚合酶要延伸DNA链，必须 酶在该载体上都有酶切位点：用两种限制酶同 要有一个3'端的羟基，没有这个结构，DNA聚 时切割载体时，产生0.6kb和0.2kb两种长度 合酶无法合成DNA。引物为DNA聚合酶提供 的DNA片段，所以两种限制酶的酶切位，点最短 3'端羟基，使得PCR继续，因此必须选用不同的 相距0.2kb:限制酶切割载体时直接破坏的是 引物，保证它们能够复制；要从含有endo(m)基 作用位点上两个脱氧核糖核苷酸之间的磷酸二 因的DNA分子中获得edo(m)基因并保留突 酯健。 变位点，只能选用EcoRI、HindⅢ来切割，同 14.A【解析】利用PCR技术扩增目的基因需依 时将endo(m)基因插入质粒时需要保留KanR、 次经过高温变性，低温复性、中温延伸阶段：构 LacI等，所以选用EcoR I、HindⅢ这两种限 建重组质粒时用两种限制性核酸内切酶进行酶 制酶来处理DNA分子和质粒： 切，可以防止目的基因的反向连接和质粒的自 (2)根据引物的作用及特点，如果突变1F为引 身环化：常用农杆菌作为受体细胞，原因是繁殖 物①，则突变1R、突变2F、突变2R的引物分别 速度快、基因组结构简单；农杆菌中T质粒上 为③、④、⑤： 的T-DNA能转移到植物细胞，并将目的基因整 (3)由题千可知，当调节基因LacI的表达产物 合到宿主细胞染色体的DNA上，所以农杆菌中 能和操纵基因Lac0结合抑制Dim-endo(m)的 的Ti质粒可作为基因工程的载体。 转录，而转录过程需要RNA聚合酶来催化，因 15.A【解析】蛋白质工程的基本途径是：从预期 此LacI的表达产物能和操纵基因Lac0结合， 的蛋白质功能出发·设计预期的蛋白质结构 阻止RNA聚合酶的移动而阻止转录过程：由题 推测应有的氨基酸序列·找到相对应的脱氧核 千可知，PTG能与LacI的表达产物结合，诱 苷酸序列（基因）：通过基因定，点突变技术可对 导目的基因的袁达，因此当菌株扩大培养到一 LMK1蛋白基因进行碱基的替换：设计蛋白质 定数量后在培养基中加入PTG能促进Dim ·17 衡水真题密卷 单元过关检测 endo(m)持续表达； 注射氯前列烯醇，其日的是同期发情，使得受供 (4)抑制率=（对照组平均细胞数一实验组平 体处于相同的生理状态。 均细胞数)/对照组平均细胞数×100%，即抑 (5)①为检验乳腺生物反应器是否成功，组别4 制率一(1一实验组平均细胞数/对照组平均细 滤纸上的物质是正常羊乳清（浓缩20倍）。 胞数)×100%： ②从表格数据可知，与人的hLF相比，转基因羊 由题意可知，不同乳腺癌细胞的Her2基因表达 乳清（浓缩20倍）实验组的抑菌图直径更小，说 有差异，因此用不同浓度的Dim-endo(m)融合 明乳腺生物反应器生产的LF抑菌效果差 蛋白处理乳腺癌细胞后融合的细胞数量不相 (弱)。 同，从而对不同乳腺癌细胞的抑制奉不同： (6)为确保转基因产品的安全性，该食品公司后 (5)纳米抗体内部存在更多的二硫键，其结构更 阶段应进行的工作是实施转基因产品标识、进 稳定，作用的时间更长；纳米抗体是传统抗体的 行食用安全性评估以及检测转基因羊乳成分， 重链可变区片段，意味着纳米抗体与传统抗体 由于羊乳为外分泌液，鉴定基因是否稳定遗传 同源性比较近，它的免疫原性比较低：纳米抗体 不影响其产品，ABC正确，D错误 只有传统抗体的1/10，分子更小，具有较强的穿 19.(1)需要能量、需要载体 透力：纳米抗体可以在微生物系统（如细菌、酵 (2)①逆转录②47③SpeI、EcoR I 母菌、真菌)中大量表达，并且可以通过展示文 XbaI、EcoR I 库中快速筛选，使得纳米抗体具备更低的生产 (3)将转基因水稻和普通水稻种植于高于胞内 成本优势。 Na浓度的环境下，观察两种水稻的生长状况。 18.(1)SalI和NotI显微注射法 (4)过量表达SOS1基因使转运蛋白SOS1含量 (2)维持pH值胰蛋白酶 增多，SOS1通过SOS信号通路将胞质内的 (3)MⅡ/减数第二次分裂中 细胞融合 Na过多地排出细胞外，影响细胞本身对Na+ (4)超数排卵同期发情 的利用 (5)①正常羊乳清②差/弱 【解析】(1)由题千信息“在高于胞内Na浓度 (6)ABC 的环境下，SOS1通过SOS信号通路与胞质内 【解析】(1)对日的基因进行切割时，通常选用 Na+结合并将其排出细胞外”可知，植物利用 两种不同的限制酶，分析题图所给的LF乳腺 SOS信号通路将Na排出细胞外是逆浓度拂度 表达载体，从中获取目的基因并使之成功表达 的运输，因此运输方式为主动运输，特点是需要 生产hLF,使用的限制酶最佳是SalI和 转运蛋白，需要能量。 NotI,XhoI和NheI这两种限制酶具有两处 (2)①为获得编码S0S1蛋白的基因，可提取野 可以作用的切割住点，不宜选用。将目的基因 生型水稻总RNA,通过逆转录获得模板DNA, 导入成纤雏细胞（动物细胞中一般应用的技术 再经PCR获得SOS1基因片段。 是显微注射法。 ②SOS1基因编码序列中A十T含量占53%，则 (2)成纤雏细胞培养液中添加HPO,、HPO G十C含量为47%. 和HCO万的作用是维持pH值。在导入目的基 ③由图可知，荧光蛋白基因内部存在SeI和 因之前，成纤雏细胞需用胰蛋白酶（或胶原蛋白 BamH I两种限制酶切序列，因此对载体酶切 酶)处理使之分散成单个细胞。 时不能选择这两种酶，并且不能选择限制酶 (3)在核移植过程中，先将采集到的卵母细胞体 SmaI,否则会导致载体中SOSl基因和绿色 外培养到MⅡ（减数第二次分裂中）期后去核， 荧光蛋白基因不能正确表达，故选择Xb加I和 再将成纤维细胞从切口注射到卵周隙内，使用 EcoR I两种限制酶对载体酶切，由于SOS1基 电刺激或化学方法促进细胞融合，形成重构胚。 因内部有XbaI的识别序列，故不能选择限制 (4)在获取卵母细胞和胚胎移植前要注射促卵 酶XbaI对目的基因酶切，但需要目的基因有 泡生成激素或氯前列烯醇等性激素。对供卵母 与载体相同的黏性末端，故可在SOS1基因两 羊注射促卵泡生成激素等激素，其目的是超数 端分别添加SpeI和EcoR I两种限制酶的识 排卵，获得更多的卵细胞；对受体母羊（代孕羊） 别序列。 ·18 ·生物学· 参考答案及解析 (3)鉴定水稻抗盐能力是否增强，采取的操作是 HA蛋白抗体进一步区分条带1为OsBIK1十 将转基因水稻和普通水稻种植于高于胞内Na HA+NIuc融合蛋白。 浓度的环境下，观察两种水稻的生长状况。 (4)将分别含有表达载体1和2的农杆菌菌液共 (4)过量表达SOS1基因使转运蛋白SOS1含量 同注射到含有荧光素的烟草叶片后可检测到荧 增多，SOS1通过SOS信号通路与胞质内的 光，说明OsBIK1蛋白和OsXLG2蛋白有相互 Na+过多地排出细胞外，影响细胞本身对Na+ 作用，使其组装形成了荧光素酶并分解荧光素 的利用。 发出荧光。 20.(1)限制酶切割位点便于重组DNA分子的 21.(1)b-C00H 筛选（重组质粒、重组载体、目的基因都对）能 (2)①C②Bam HI、NotI③引物2引物 将Ti质粒上的TDNA转移到被侵染的细胞， 1不含有Bam H I酶切位点、引物3方向错误 并且将其整合到该细胞的染色体DNA上 无法扩增、引物4后面6个碱基无法与模板 (2)保证OsBIK1基因编码的蛋白和NLuc基因 链配对15 片段编码的蛋白形成融合蛋白3端 (3)在光敏色素作用下A系植株选择启动子1 (3)HA OsBIK1+HA+NLuc 表达出蛋白质X① (4)OsBIK1蛋白和OsXLG2蛋白有相互作用 【解析】(1)分析题图可知，X①和X②蛋白质b 【解析】(1)质粒载体有一至多个限制酶切割位 末端的氨基酸序列是相同，由于肽链的合成方 点，供外源DNA片段插入其中；表达载体1和2 向为氯基端到羧基端，故b末端对应的是蛋白 上含有的卡那霉素杭性基因是标记基因，可便 质的-COOH末端。 于重组DNA分子的筛选。农杆菌侵染烟草后， (2)①分析题图1可知，GFP基因片段应插入到 其Ti质粒上的T-DNA能转移到被侵染的细 基因X内启动子②的下游，即字母C表示的特 胞，并且将其整合到该细胞的染色体DNA上， 定位置，从而经过转录、翻译得到目的产物。 使其随着染色体的复制而复制。 ②限制酶能识别DNA分子中特定核苷酸序列， (2)构建表达载体1的目的是将OsBK1-HA 并使每一条链中特定部位的磷酸二酯健断开， NLuC三个基因连在一起共同表达，因此需要使 分析题图2可知，应选择表中的BamH I和 其共同受到相同的启动子和终止子的调控，所 NotI将GFP基因从柒色体上切割下来。 以构建重组质粒1时，需要把OsBK1基因的对 ③引物是一小段能与DNA母链的一段碱基序 应终止密码子的3个碱基去除，以保证OsBIK1 列互补配对的短单链核酸。由于引物1不含有 基因编码的蛋白和NLuC基因片段编码的蛋白 BamHI酶切位，点、引物3方向错误无法扩增、 形成融合蛋白。已知编码链为转录时所用模板 引物4后面6个碱基无法与模板链配对，故应选 链的互补链，编码链和模板链反向螺旋在一起， 择引物2用于a侧进行PCR扩增：每次PCR循 而转录时RNA聚合酶是从DNA模板链的3'端 环后，目的基因的量可以增加一倍，故在PCR仪 向5'端移动，因此图中HA编码序列插入到 中完成4个循环后，含有该引物的DNA片段数 OsBK1基因编码链的3'瑞，才能使转录时 为15。 OsB1K1-HA两个基因同时转录。 (3)分析表中数据可知，与去除产生光敏色素的 (3)根据图2可知，用抗LuC蛋白抗体分别检测 基因后得到B系植株相比，A系植物能对红光 表达载体1和2融合蛋白表达情况，会出现条带 刺澈作出应答被激活，原因为在光敏色素作用 1和条带2，图2中最后一幅图出现的是条带1， 下A系植株选择启动子1表达出蛋白质X①。 且已知图中HA为标签蛋白的编码序列，可用 于目的蛋白的检测、示踪等，因此可优先选用抗 ·19. 3