河南省天立教育2025-2026学年高三上学期开学生物试题

天立教育2025－2026学年秋期入学联合考试 高三年级生物学参考答案及评分细则 第Ⅰ卷　选择题 题号 1 2 3 4 5 6 7 8 答案 B A B B C C A B 题号 9 10 11 12 13 14 15 16 答案 C B C A C B C C 第Ⅱ卷　非选择题 17．(1) 尿素 为细菌的生长代谢提供氮源，同时可筛选出能降解尿素的细菌 (2)ABD (3)C (4)①②③ 【分析】培养基一般含有碳源、氮源、水和无机盐。根据物理状态可分为固体培养基、液体培养基、半固体培养基；根据培养功能可分为基础培养基、选择培养基、加富培养基、鉴别培养基等；根据使用范围可分为细菌培养基、放线菌培养基、酵母菌培养基、真菌培养基等。 【详解】（1）该实验的目的是筛选到能高效降解尿素的细菌，因此培养基中需要加入尿素作为唯一的氮源，目的是为细菌的生长代谢提供氮源，同时可筛选出能降解尿素的细菌。 （2）为了保证无菌操作，实验过程中使用的培养基、玻璃器皿、接种工具等均需要灭菌，实验操作者的双手需要进行酒精消毒，故选ABD。 （3）从物理状态角度分析，培养基可分为固体培养基、液体培养基、半固体培养基，图中接种时所用的培养基属于固体培养基，故选C。 （4）在进行分离分解尿素的细菌实验时，A同学从培养基上筛选出大约150个菌落，而其他同学只选择出大约50个菌落。A同学的实验结果产生的原因可能有：A与B同学采集的土壤样品不同或是A同学操作失误，灭菌不彻底，使培养基污染了，故选①②③。 18．(1) 表层 使土壤中的微生物充分释放到无菌水中 (2) 涂布器 3.8×106 (3)选择培养基 (4)两种菌混合接种时处理厨余垃圾废液的效果均大于单独接种时的，且两种菌种接种量比例为1:1时，效果最好 【分析】稀释涂布平板法除可以用于分离微生物外，也常用来统计样品中活菌的数目。当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个单菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌。通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少活菌。为了保证结果准确，一般选择菌落数为30～300 的平板进行计数。样品的稀释度将直接影响平板上的菌落数目。在实际操作中，通常选用一定稀释范围的样品液进行培养，以保证获得菌落数为30～300、适于计数的平板。在同一稀释度下，应至少对3个平板进行重复计数，然后求出平均值。 【详解】（1）自生固氮菌能固定空气中的氮气，深层土壤中氮气含量低，故步骤①土样最好取自表层土壤。步骤②须充分振荡使土壤中的微生物充分释放到无菌水中。 （2）该实验利用稀释涂布平板法进行接种，步骤④所用的接种工具为涂布器。测定活菌数时一般选择菌落数在30～300的平板进行计数，每克土壤中的菌落数=（41+39+40+32）÷4÷0.1×104=3.8×106个。 （3）Ashby无氮培养基能够筛选固氮微生物，从功能角度分析，是一种选择培养基。 （4）两种菌混合接种时处理厨余垃圾废液的效果均大于单独接种时的，且两种菌种接种量比例为1∶1时，效果最好，废液中两种菌种的有效活菌数能够实现同步最大化。 19．(1) 选择 筛选出可以降解化合物A的微生物 (2) 显著降低 提高培养液溶氧量，同时使菌体与培养液充分接触 (3) 限制性核酸内切/限制 磷酸二酯键    【分析】分析题干信息，该实验的目的是筛选出高效降解化合物A的细菌，在以化合物A为唯一碳源的培养基中只有能降解化合物A的微生物才能以化合物A为碳源和氮源生长繁殖，不能利用化合物A的微生物因缺乏碳源和氮源，无法生长繁殖。 【详解】（1）由题意可知，本实验是分离出能高效降解有机化合物A的菌种，所以培养基中加入化合物A的目的是筛选降解的有机化合物A的菌种，这种培养基属于选择培养基。 （2）由于“目的菌”能高效降解有机化合物A，所以培养若干天后，应选择培养瓶中化合物A含量显著降低的培养基，接入新的培养液中连续培养，使“目的菌”的数量进一步增加。振荡培养的目的是提高培养液溶氧量，同时使菌体与培养液充分接触。 （3）①构建带有目的基因的单链载体，需要限制性核酸内切酶（简称限制酶）和DNA连接酶，DNA连接酶催化目的基因片段和载体片段之间形成的化学键是磷酸二酯键。 ②根据碱基互补配对原则，C和G配对，A和T配对。 20．(1) 细胞膜具有一定的流动性 高Ca2+-高pH融合法 (2) PEG浓度过高导致原生质体失水皱缩 25%-35% (3) 叶绿体 生长素和细胞分裂素的浓度和比例 【分析】植物体细胞杂交是指将植物不同种、属，甚至科间的原生质体通过人工方法诱导融合，然后进行离体培养，使其再生杂种植株的技术。植物细胞具有细胞壁，未脱壁的两个细胞是很难融合的，植物细胞只有在脱去细胞壁成为原生质体后才能融合，所以植物的细胞融合也称为原生质体融合。 【详解】（1）由于细胞膜具有一定的流动性，因此可以用一定的促融合剂促进其融合；图中所示的诱导融合的化学方法是用PEG诱导，除此之外还可用高Ca2+-高pH融合法诱导原生质体融合； （2）原生质层具有选择透性，PEG浓度过高导致原生质体失水皱缩，因此当PEG质量分数为35%和40%时原生质体出现缩小现象；30%时形态正常，说明原生质体既不吸水也不失水，有助于维持其正常形态，该浓度诱导原生质体融合效果最好；25%时有破碎现象，说明25%浓度较小，原生质体有的吸水涨破，35%时原生质体出现缩小现象，说明35%浓度较大，原生质体失水皱缩，因此需要在质量分数为25%-35%之间的PEG溶液重复上述实验； （3） 叶肉细胞原生质体含有叶绿体，光学显微镜下可见，可挑选出含叶绿体且形态为哑铃型（融合较好的原生质体呈哑铃型）的原生质体即为融合的原生质体；愈伤组织是脱分化形成的一群未分化的细胞，获得愈伤组织的过程中需要黑暗条件，愈伤组织先诱导生芽还是生根取决于生长素与细胞分裂素的浓度配比。 21．(1) 定点突变 (2)ad (3) 18℃组雄性个体所占比例小于29℃组 18 【分析】基因工程是指按照人们的愿望，进行严格的设计，通过体外DNA重组和转基因技术，赋予生物以新的遗传特性，创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品；基因工程是在DNA分子水平上进行设计和施工的，又叫做DNA重组技术。 【详解】（1）欲得到具有cs效应的RTAcs蛋白，推测对应的基因碱基序列，对融合基因1进行定点突变获得融合基因2。图2虚线方框中的两条链在延伸过程中，既可作为模板又可以起到相当于引物的作用，使耐高温的DNA聚合酶能够从两条链的3’端开始连接脱氧核苷酸，继续延伸的复性结果如下： （2）据题图分析可知，若框内的序列延伸完成之后，后续对突变基因进行扩增，应选择的引物为图中的引物a和引物d。 （3）由题意可知：RTA蛋白第212位甘氨酸替换为精氨酸会出现冷敏感效应（cs），即当温度由29℃变为18℃时，可抑制RTA蛋白对细胞的致死作用。对转入融合基因2的果蝇进行以下操作： ⅰ：在29℃收集雄性果蝇（G0）（全为转基因雄性果蝇）。 ⅱ：G0与野生型果蝇杂交，筛选出转基因受精卵（G1）。 ⅲ：将每对亲本的受精卵（G1）均分为两组，分别在18℃和29℃孵化培养，统计两组中雄性个体所占比例，若G1具有cs效应，则18℃组雄性个体所占比例小于29℃组。 ⅳ：在18℃时可抑制RTA蛋白对细胞的致死作用，为通过多代自交得到转基因纯合子，应在18℃继续培养具有cs效应的G1果蝇。 高三年级生物学 参考答案及评分细则第 1 页（共 4 页） 学科网（北京）股份有限公司 $$高三年级生物学 试题卷第 1 页（共 4 页） 机密★启用前 天立教育 2025－2026学年秋期入学联合考试 高三年级生物学试题卷 本试题卷共 8页，两大题，21小题，满分 100分。考试时间 75分钟。 注意事项： 1．答卷前，考生务必将自己的姓名、班级、考场号、座位号、考生号填写在答题卡上。 2．回答选择题时，选出每小题答案后，用铅笔把答题卡上对应题目的答案标号涂黑。如需改动，用橡皮擦干 净后，再选涂其他答案标号。回答非选择题时，将答案写在答题卡上。写在本试卷上无效。 3．考试结束后，将本试卷和答题卡一并交回。 一、选择题：本题共 16小题，每小题 3分，共 48分。在每小题给出的四个选项中，只有一项是符合题目要求的。 1． 采用干热灭菌、灼烧灭菌、高压蒸汽灭菌、紫外线照射等几种方法，可分别杀死哪些部位的杂菌（ ） A．接种环、吸管、培养基、接种室 B．吸管、接种环、培养基、接种箱 C．培养基、吸管、接种环、接种箱 D．培养皿、吸管、培养基、双手 2． 景德镇的辣椒炒肉被黄渤称为“这辈子吃到过最好吃的辣椒炒肉”。辣椒中的辣椒素是这道菜中的重要成分之一， 辣椒素可通过下图途径获得，下列说法正确的是（ ） A．细胞分离获得单细胞及其后续过程对社会、经济和环境保护具有重要意义 B．步骤②促进生根过程中，细胞分裂素用量与生长素用量的比值应大于 1 C．植物组织培养的培养基中不需要加入有机营养物质 D．外植体消毒时，先用次氯酸钠溶液处理后再用酒精消毒 3． 下列关于发酵工程的应用，叙述正确的是（ ） A．谷氨酸是味精的原料，可以通过黑曲霉发酵制得 B．使用基因工程改造的啤酒酵母，可以提高啤酒的质量和产量 C．利用发酵工程生产的白僵菌特异性强，只能用来防治一种农林害虫 D．一种真菌通过发酵工程产生的井冈霉素可以用来防治水稻枯纹病 4． 下列关于植物体细胞杂交技术的叙述，正确的是（ ） A．制备原生质体需要使用胰蛋白酶或者胶原蛋白酶来处理细胞 B．原生质体融合可用电融合法或聚乙二醇法进行诱导 C．对杂种细胞进行组织培养时，需要全程避光 D．植物组织可以进行光合作用，组织培养的培养基中不需要添加有机碳源 5． 科学家成功地把外源的致病基因利用“基因敲除”技术整合到小鼠胚胎干细胞的 DNA同源序列中，使正常基因 被取代或破坏而失活，然后将得到的胚胎干细胞植入小鼠的早期胚胎中，培育出患病的嵌合体小鼠。下列有关 叙述错误的是（ ） A．在“基因敲除”中需要用到限制性核酸内切酶、DNA连接酶等 B．通过上述“基因敲除”技术可以定向改变生物体的某一基因 C．这种嵌合体小鼠长大后，体内存在外源基因，但不会遗传给后代 D．“基因敲除”技术有利于人类对某些遗传因素引发的疾病进行研究 6． 近年来，有科学家把来自动物体的精子注入去核的卵细胞中，获得重组细胞，进一步培育出“孤雄单倍体胚胎”。 下列说法错误的是（ ） A．该过程用到的技术手段主要有核移植和早期胚胎培养 B．单倍体胚胎干细胞类似于正常胚胎干细胞，可诱导分化成各种功能的组织和器官 C．“孤雄单倍体胚胎”细胞由重组细胞减数分裂而来，其核遗传物质由精子提供 D．“孤雄单倍体胚胎”细胞，可当作精子使用，使卵细胞受精，并生下正常小鼠 7． 我国科学家使用小分子化合物处理小鼠体细胞，成功获得诱导多能干细胞(iPS细胞)，降低了通过导入原癌基因 c-Myc 等基因制备 iPS 细胞的潜在成瘤风险。下列叙述错误的是（ ） A．iPS 细胞的潜在成瘤风险来自于 c-Myc 基因抑制了细胞的分裂分化 B．单基因遗传病患者使用 iPS 细胞治疗后，体内仍可能携带致病基因 C．人工制备的 iPS 细胞同时具备多方向分化的潜能和自我更新的能力 D．使用非亲缘 iPS 细胞不能解决干细胞移植中 HLA 造成的免疫排斥 8． 某农田中偶然出现了一株抗虫、耐盐碱的小麦，若要利用该突变植株快速培育能稳定遗传的抗虫、耐盐减小麦 新品种，则需要用到单倍体育种技术。下列相关叙述错误的是（ ） A．该过程运用了染色体变异的原理 B．该过程证明了植物细胞核的全能性 C．该过程需要用植物激素处理 D．该过程需要抑制纺锤体的形成 9． 新冠病毒主要通过其表面的棘突蛋白(S 蛋白)与人体细胞膜上的 ACE2 蛋白结合实现侵染，目前研制新冠疫苗 根据采用的主要技术路径不同分为核酸疫苗、灭活疫苗、腺病毒载体疫苗、重组蛋白疫苗等，下列有关说法错 误的是（ ） A．通过基因工程在体外大量生产并提纯新冠病毒的 S蛋白可制成重组蛋白疫苗 B．mRNA疫苗在人体细胞内可直接作为模板合成病毒 S蛋白，刺激人体产生抗体 C．新冠病毒在琼脂培养基上大量培养，然后通过灭活和纯化，可制成灭活疫苗 D．将改造后无害的腺病毒和新冠病毒 S蛋白基因重组，可制成腺病毒载体疫苗 高三年级生物学 试题卷第 2 页（共 4 页） 10．植物体细胞杂交需要分离出有活力的原生质体，研究者通过实验研究了酶解时间对原生质体产量和活力的影响， 结果如图。相关叙述错误的是（ ） A．随酶解时间延长两种原生质体产量均先增加后减少 B．该实验中有 1个自变量，2个因变量 C．适宜两植物细胞的最佳酶解时间分别为 10h和 12h D．原生质体活力不可以通过质壁分离与复原实验进行验证 11．通常选取皮肤烧伤患者的自身细胞，经体外培养获得自体健康皮肤，再通过皮肤移植术对患者进行治疗。下列 说法错误的是（ ） A．通常选取皮肤中分裂能力强、易培养的成纤维细胞或皮肤干细胞进行体外培养 B．在体外培养细胞时，需要对培养液和用具进行灭菌处理，并且定期更换培养液 C．细胞培养过程需要提供含有 95%的 O2和 5%的 CO2的混合气体，以维持培养液的 pH D．进行传代培养时，悬浮培养的细胞可直接用离心法收集后制成细胞悬液，分瓶培养 12．单克隆抗体的制备过程通常涉及免疫动物、细胞融合、选择培养、单克隆抗体的大量制备等步骤。下列关于利 用小鼠制备抗人绒毛膜促性腺激素单克隆抗体（用于制作“早早孕诊断试剂”）的叙述，正确的是（ ） A．免疫动物阶段，给小鼠注射人绒毛膜促性腺激素，致使小鼠发生体液免疫 B．细胞融合阶段，可以采用的诱导融合方法与诱导原生质体融合的方法完全相同 C．选择培养阶段，淘汰掉未融合的骨髓瘤细胞和 B细胞即可得到所需杂交瘤细胞 D．第二次筛选出的杂交瘤细胞只能注射到小鼠腹腔内大规模培养 13．某同学经过分离纯化获得了一种微生物，用Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ三种培养基来培养该微生物（见下表）。通过观察该微生物的菌 落形态和生长繁殖情况，来确定其生物类型。下列相关叙述正确的是（根瘤菌是共生固氮菌，只有共生才能固氮） 粉状硫 10g K2HPO4 4g FeSO4 0.5g 蔗糖 10g （NH4）2SO4 0.4g H2O 100mL MgSO4 9.25g CaCl2 0.5g Ⅰ ＋ ＋ ＋ ＋ － ＋ ＋ ＋ Ⅱ ＋ ＋ ＋ － ＋ ＋ ＋ ＋ Ⅲ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ 注：“＋”表示加入该物质，“－”表示不加入该物质。 A．若该微生物为根瘤菌，则其在Ⅰ和Ⅱ中均能正常生长 B．若该微生物为根瘤菌，则其在Ⅲ中的固氮量与菌落比在Ⅰ中多且大 C．若该微生物为硝化细菌，则其在Ⅱ和Ⅲ中能正常生长，不能在Ⅰ中生长 D．若该微生物为酵母菌，则其在Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ中均能正常生长 14．基因定点突变的目的是通过定向地改变基因内一个或少数几个碱基来改变多肽链上一个或几个氨基酸。该技术 是蛋白质工程的重要技术，图示为利用 PCR技术进行定点突变的流程，相关叙述错误的是（ ） 注：引物 1和引物 3的突起处代表与模板不能互补的突变位点，而这两条引物有部分碱基（包括突变位点）是 可以互补的。 A．第一阶段 PCR过程中需要进行两次循环才会出现所需的 DNA 片段 B．要完成两处位点的定点突变，共需要设计 8种引物 C．酶①应为耐高温 DNA 聚合酶，引物 X和 Y分别为引物 2和 4 D．通过该技术获得的突变基因可以表达出原来自然界不存在的蛋白质 15．下图表示甲、乙两种单基因遗传病的家系图和各家庭成员基因检测的结果。检测过程中用限制酶处理相关基因 得到大小不同的片段后进行电泳，电泳结果中的条带表示检出的特定长度的酶切片段，数字表示碱基对的数目。 下列说法正确的是（ ） A．甲病的致病基因位于常染色体上，乙病的致病基因位于 X 染色体上 B．甲病可能由正常基因发生碱基对的替换导致，替换后的序列可被 Mst II 识别 C．乙病可能由正常基因上的两个 BamHI 识别序列之间发生碱基对的缺失导致 D．II4带致病基因、II8不携带致病基因，两者均不患待测遗传病 高三年级生物学 试题卷第 3 页（共 4 页） 16．2017年中国科学家利用“聪明的化学方法和操作技巧（10s内去核，15s内核移植）”成功培育了体细胞克隆猴， 流程如下，下列叙述错误的是（ ） A．科学家多年的反复实验带来的娴熟技术使卵细胞受损减少 B．核移植前用“灭活病毒短暂处理”主要目的是诱导细胞融合 C．“聪明的化学方法”主要指图中①②，通过调节组蛋白修饰而抑制基因表达 D．上述技术有助于加速针对阿尔茨海默病、免疫缺陷、肿瘤等的新药研发进程 二、非选择题：本题共 5小题，共 52分。 17．尿素是一种重要的农业肥料，但若不经细菌的分解，就不能更好地被植物利用。生活在土壤中的微生物种类和 数量繁多，同学们试图探究土壤中微生物对尿素是否有分解作用，设计了以下实验，并成功筛选到能高效降解 尿素的细菌（目的菌）。培养基成分如表所示，实验步骤如图所示。 KH2PO4 1.4g Na2HPO4 2.1g MgSO4·7H2O 0.2g 葡萄糖 10g 物质 A 1g 琼脂 15g 将上述物质溶解后，用蒸馏水定容到 100mL （1）表 1所示培养基成分中物质 A是＿＿＿＿，本实验中加入它的作用是＿＿＿＿。 （2）为了保证无菌操作，在实验中需要灭菌的是＿＿＿＿。 A．培养细菌用的培养基与培养皿 B．玻璃棒、试管、锥形瓶和吸管 C．实验操作者的双手 D．接种所需的涂布器 （3）从物理状态角度分析，图中接种时所用的培养基属于＿＿＿＿培养基。 A．选择培养基 B．通用培养基 C．固体培养基 D．液体培养基 （4）在进行分离分解尿素的细菌实验时，A同学从培养基上筛选出大约 150个菌落，而其他同学只选择出大约 50个菌落。A同学的实验结果产生的原因可能有＿＿＿＿（填序号）。 ①土样不同 ②培养基污染 ③操作失误 ④没有设置对照 18．自生固氮菌是土壤中能固定空气中氮气的细菌，将玉米种子用自生固氮菌拌种后播种，可显著提高产量并降低 化肥的使用量。科研人员进行了土壤中自生固氮菌的分离和固氮能力测定的研究，部分实验流程如图 1所示。 回答下列问题： （1）步骤①土样最好取自＿＿（填“表层”或“深层”）土壤。步骤②须充分振荡 20min，充分振荡的好处是＿＿。 （2）步骤④所用的接种工具主要是＿＿＿＿。若在④的平板上统计的菌落数分别为 28、41、39、40、32个， 则每克土壤中含有的固氮菌为＿＿＿＿个。 （3）Ashby培养基（也称阿须贝氏无氮培养基）具有从混合菌中富集分离固氮优势菌的作用，可有效从土壤中 分离自生固氮菌，从功能角度分析，该培养基属于＿＿＿＿。 （4）研究发现圆褐固氮菌和巨大芽孢杆菌处理厨余垃圾废液的效果较好。为研究这两种菌种分别及混合处理某 厨余垃圾废液的效果，科研人员将两种菌液进行不同配比，分别接种于等量的相同厨余垃圾废液中，培养 3天后测定有效菌落数，结果如图 2所示。由该实验结果可得到的结论是＿＿＿＿＿＿＿＿。 19．某化工厂为了处理排出污水中的一种有害的、难以降解的有机化合物 A， 研究人员欲通过筛选，并利用基因工程技术，培养高效降解该有害物质 的“超级菌”。研究团队用化合物 A、磷酸盐、镁盐和微量元素等配置了 培养基，成功地筛选出能降解化合物 A的细菌（目的菌）。实验的主要 步骤如图 1所示，请分析回答问题。 （1）加化合物 A的培养基从目的和功能来看属于＿＿＿＿培养基，其目 的是＿＿＿＿＿＿＿＿。 （2）培养若干天后，应选择培养瓶中化合物 A含量＿＿＿＿的培养液， 接入新的培养液中连续振荡培养，使目的菌数量扩增。振荡培养的 目的是＿＿＿＿＿＿＿＿。 高三年级生物学 试题卷第 4 页（共 4 页） （3）研究团队发现了一种脱氢酶基因 X，有高效降解有害化合物 A的功能，对 X基因测序得知：编码区的一个 碱基对 A/T替换成 C/G，可大大增强其降解能力。为改造 X基因（图 2），将人工合成的一段含有特定突 变位点的单链寡核苷酸片段与带有目的基因的单链环状载体进行杂交；在相关酶的作用下进行 DNA 链的 合成和连接反应，得到含有突变位点的双链载体。 ①构建带有目的基因的单链载体，需要＿＿＿＿酶和 DNA 连接酶，DNA连接酶催化目的基因片段和载体 片段之间形成的化学键是＿＿＿＿。 ②请在图 2的◯中标出碱基。 20．花椰菜常因感染真菌而患黑腐病，导致产量和品质受到严重影响。为解决菜农困扰，研究人员用一定剂量紫外 线照射含黑腐病抗性基因的某植物叶肉细胞，使其染色体片段化从而失去细胞分裂能力，再与花椰菜幼根细胞 进行体细胞杂交，进而培育抗黑腐病杂种花椰菜。操作过程如图所示。回答下列问题： （1）图中叶肉细胞原生质体与根细胞原生质体融合的原理是＿＿＿＿。除图中②所示的方法外，通常诱导原生 质体融合的化学方法是＿＿＿＿。 （2）融合较好的原生质体呈哑铃型。研究人员用不同浓度 PEG诱导，然后用光学显微镜观察融合原生质体，获 得结果如表。 PEG质量分数 原生质体状态 25% 有破碎现象，哑铃型原生质体比例<0.01% 30% 形态正常，哑铃型原生质体比例 0.03% 35% 原生质体出现缩小现象，哑铃型原生质体比例 0.01~0.02% 40% 原生质体出现缩小现象，哑铃型原生质体比例 0.01~0.02% 当 PEG质量分数为 35%和 40%时原生质体出现缩小现象，原因是＿＿＿＿。若想确定 PEG溶液诱导原生 质体融合的最适浓度，需在＿＿＿＿范围内缩小浓度梯度继续实验。 （3）PEG诱导后需要筛选。筛选时用光学显微镜挑选出含＿＿＿＿（填细胞器）且形态为哑铃型的原生质体， 在黑暗的环境中进一步培养获得愈伤组织。愈伤组织先诱导生芽还是生根取决于＿＿＿＿。 21．研究发现，RTA 蛋白第 212位甘氨酸替换为精氨酸会出现冷敏感效应（cs），即当温度由 29℃变为 18℃时， 可抑制 RTA蛋白对细胞的致死作用。利用此特性培育纯合转基因果蝇。 （1）欲得到具有 cs效应的 RTAcs蛋白，推测对应的基因碱基序列，对 融合基因 1进行＿＿＿＿获得融合基因 2（如图）。请在方框中画 出可继续延伸的复性结果，并标明每条链的 5'端和 3'端。 （2）上方框内的序列延伸完成之后，后续对突变基因进行扩增，应选 择的引物为图中的＿＿＿＿。 （3）对转入融合基因 2的果蝇进行以下操作： ⅰ 在 29℃收集雄性果蝇（G0）。 ⅱ G0与野生型果蝇杂交，筛选出转基因受精卵（G1） ⅲ 将每对亲本的受精卵（G1）均分为两组，分别在 18℃和 29℃孵化培养，统计两组中雄性个体所占比 例，若＿＿＿＿，则说明 G1具有 cs效应。 ⅳ 在＿＿＿＿℃继续培养具有 cs效应的 G1果蝇，使之连续多代相互交配，得到转基因纯合子。 高三年级生物学 试题卷第 1 页（共 8 页） 机密★启用前 天立教育 2025－2026学年秋期入学联合考试 高三年级生物学试题卷 本试题卷共 8页，两大题，21小题，满分 100分。考试时间 75分钟。 注意事项： 1．答卷前，考生务必将自己的姓名、班级、考场号、座位号、考生号填写在答题卡上。 2．回答选择题时，选出每小题答案后，用铅笔把答题卡上对应题目的答案标号涂黑。如需改动，用橡皮擦干 净后，再选涂其他答案标号。回答非选择题时，将答案写在答题卡上。写在本试卷上无效。 3．考试结束后，将本试卷和答题卡一并交回。 一、选择题：本题共 16小题，每小题 3分，共 48分。在每小题给出的四个选项中，只有一项是符合题目要求的。 1． 采用干热灭菌、灼烧灭菌、高压蒸汽灭菌、紫外线照射等几种方法，可分别杀死哪些部位的杂菌（ ） A．接种环、吸管、培养基、接种室 B．吸管、接种环、培养基、接种箱 C．培养基、吸管、接种环、接种箱 D．培养皿、吸管、培养基、双手 2． 景德镇的辣椒炒肉被黄渤称为“这辈子吃到过最好吃的辣椒炒肉”。辣椒中的辣椒素是这道菜中的重要成分之一， 辣椒素可通过下图途径获得，下列说法正确的是（ ） A．细胞分离获得单细胞及其后续过程对社会、经济和环境保护具有重要意义 B．步骤②促进生根过程中，细胞分裂素用量与生长素用量的比值应大于 1 C．植物组织培养的培养基中不需要加入有机营养物质 D．外植体消毒时，先用次氯酸钠溶液处理后再用酒精消毒 3． 下列关于发酵工程的应用，叙述正确的是（ ） A．谷氨酸是味精的原料，可以通过黑曲霉发酵制得 B．使用基因工程改造的啤酒酵母，可以提高啤酒的质量和产量 C．利用发酵工程生产的白僵菌特异性强，只能用来防治一种农林害虫 D．一种真菌通过发酵工程产生的井冈霉素可以用来防治水稻枯纹病 4． 下列关于植物体细胞杂交技术的叙述，正确的是（ ） A．制备原生质体需要使用胰蛋白酶或者胶原蛋白酶来处理细胞 B．原生质体融合可用电融合法或聚乙二醇法进行诱导 C．对杂种细胞进行组织培养时，需要全程避光 高三年级生物学 试题卷第 2 页（共 8 页） D．植物组织可以进行光合作用，组织培养的培养基中不需要添加有机碳源 5． 科学家成功地把外源的致病基因利用“基因敲除”技术整合到小鼠胚胎干细胞的 DNA 同源序列中，使正常基因 被取代或破坏而失活，然后将得到的胚胎干细胞植入小鼠的早期胚胎中，培育出患病的嵌合体小鼠。下列有关 叙述错误的是（ ） A．在“基因敲除”中需要用到限制性核酸内切酶、DNA连接酶等 B．通过上述“基因敲除”技术可以定向改变生物体的某一基因 C．这种嵌合体小鼠长大后，体内存在外源基因，但不会遗传给后代 D．“基因敲除”技术有利于人类对某些遗传因素引发的疾病进行研究 6． 近年来，有科学家把来自动物体的精子注入去核的卵细胞中，获得重组细胞，进一步培育出“孤雄单倍体胚胎”。 下列说法错误的是（ ） A．该过程用到的技术手段主要有核移植和早期胚胎培养 B．单倍体胚胎干细胞类似于正常胚胎干细胞，可诱导分化成各种功能的组织和器官 C．“孤雄单倍体胚胎”细胞由重组细胞减数分裂而来，其核遗传物质由精子提供 D．“孤雄单倍体胚胎”细胞，可当作精子使用，使卵细胞受精，并生下正常小鼠 7． 我国科学家使用小分子化合物处理小鼠体细胞，成功获得诱导多能干细胞(iPS细胞)，降低了通过导入原癌基因 c-Myc 等基因制备 iPS 细胞的潜在成瘤风险。下列叙述错误的是（ ） A．iPS 细胞的潜在成瘤风险来自于 c-Myc 基因抑制了细胞的分裂分化 B．单基因遗传病患者使用 iPS 细胞治疗后，体内仍可能携带致病基因 C．人工制备的 iPS 细胞同时具备多方向分化的潜能和自我更新的能力 D．使用非亲缘 iPS 细胞不能解决干细胞移植中 HLA 造成的免疫排斥 8． 某农田中偶然出现了一株抗虫、耐盐碱的小麦，若要利用该突变植株快速培育能稳定遗传的抗虫、耐盐减小麦 新品种，则需要用到单倍体育种技术。下列相关叙述错误的是（ ） A．该过程运用了染色体变异的原理 B．该过程证明了植物细胞核的全能性 C．该过程需要用植物激素处理 D．该过程需要抑制纺锤体的形成 9． 新冠病毒主要通过其表面的棘突蛋白(S蛋白)与人体细胞膜上的 ACE2 蛋白结合实现侵染，目前研制新冠疫苗 根据采用的主要技术路径不同分为核酸疫苗、灭活疫苗、腺病毒载体疫苗、重组蛋白疫苗等，下列有关说法错 误的是（ ） A．通过基因工程在体外大量生产并提纯新冠病毒的 S蛋白可制成重组蛋白疫苗 B．mRNA疫苗在人体细胞内可直接作为模板合成病毒 S蛋白，刺激人体产生抗体 C．新冠病毒在琼脂培养基上大量培养，然后通过灭活和纯化，可制成灭活疫苗 D．将改造后无害的腺病毒和新冠病毒 S蛋白基因重组，可制成腺病毒载体疫苗 高三年级生物学 试题卷第 3 页（共 8 页） 10．植物体细胞杂交需要分离出有活力的原生质体，研究者通过实验研究了酶解时间对原生质体产量和活力的影响， 结果如图。相关叙述错误的是（ ） A．随酶解时间延长两种原生质体产量均先增加后减少 B．该实验中有 1个自变量，2个因变量 C．适宜两植物细胞的最佳酶解时间分别为 10h和 12h D．原生质体活力不可以通过质壁分离与复原实验进行验证 11．通常选取皮肤烧伤患者的自身细胞，经体外培养获得自体健康皮肤，再通过皮肤移植术对患者进行治疗。下列 说法错误的是（ ） A．通常选取皮肤中分裂能力强、易培养的成纤维细胞或皮肤干细胞进行体外培养 B．在体外培养细胞时，需要对培养液和用具进行灭菌处理，并且定期更换培养液 C．细胞培养过程需要提供含有 95%的 O2和 5%的 CO2的混合气体，以维持培养液的 pH D．进行传代培养时，悬浮培养的细胞可直接用离心法收集后制成细胞悬液，分瓶培养 12．单克隆抗体的制备过程通常涉及免疫动物、细胞融合、选择培养、单克隆抗体的大量制备等步骤。下列关于利 用小鼠制备抗人绒毛膜促性腺激素单克隆抗体（用于制作“早早孕诊断试剂”）的叙述，正确的是（ ） A．免疫动物阶段，给小鼠注射人绒毛膜促性腺激素，致使小鼠发生体液免疫 B．细胞融合阶段，可以采用的诱导融合方法与诱导原生质体融合的方法完全相同 C．选择培养阶段，淘汰掉未融合的骨髓瘤细胞和 B细胞即可得到所需杂交瘤细胞 D．第二次筛选出的杂交瘤细胞只能注射到小鼠腹腔内大规模培养 13．某同学经过分离纯化获得了一种微生物，用Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ三种培养基来培养该微生物（见下表）。通过观察该微生物的菌 落形态和生长繁殖情况，来确定其生物类型。下列相关叙述正确的是（根瘤菌是共生固氮菌，只有共生才能固氮） 粉状硫 10g K2HPO4 4g FeSO4 0.5g 蔗糖 10g （NH4）2SO4 0.4g H2O 100mL MgSO4 9.25g CaCl2 0.5g Ⅰ ＋ ＋ ＋ ＋ － ＋ ＋ ＋ Ⅱ ＋ ＋ ＋ － ＋ ＋ ＋ ＋ Ⅲ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ 高三年级生物学 试题卷第 4 页（共 8 页） 注：“＋”表示加入该物质，“－”表示不加入该物质。 A．若该微生物为根瘤菌，则其在Ⅰ和Ⅱ中均能正常生长 B．若该微生物为根瘤菌，则其在Ⅲ中的固氮量与菌落比在Ⅰ中多且大 C．若该微生物为硝化细菌，则其在Ⅱ和Ⅲ中能正常生长，不能在Ⅰ中生长 D．若该微生物为酵母菌，则其在Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ中均能正常生长 14．基因定点突变的目的是通过定向地改变基因内一个或少数几个碱基来改变多肽链上一个或几个氨基酸。该技术 是蛋白质工程的重要技术，图示为利用 PCR技术进行定点突变的流程，相关叙述错误的是（ ） 注：引物 1和引物 3的突起处代表与模板不能互补的突变位点，而这两条引物有部分碱基（包括突变位点）是 可以互补的。 A．第一阶段 PCR过程中需要进行两次循环才会出现所需的 DNA 片段 B．要完成两处位点的定点突变，共需要设计 8种引物 C．酶①应为耐高温 DNA 聚合酶，引物 X和 Y分别为引物 2和 4 D．通过该技术获得的突变基因可以表达出原来自然界不存在的蛋白质 15．下图表示甲、乙两种单基因遗传病的家系图和各家庭成员基因检测的结果。检测过程中用限制酶处理相关基因 得到大小不同的片段后进行电泳，电泳结果中的条带表示检出的特定长度的酶切片段，数字表示碱基对的数目。 下列说法正确的是（ ） A．甲病的致病基因位于常染色体上，乙病的致病基因位于 X 染色体上 B．甲病可能由正常基因发生碱基对的替换导致，替换后的序列可被 Mst II 识别 C．乙病可能由正常基因上的两个 BamHI 识别序列之间发生碱基对的缺失导致 D．II4带致病基因、II8不携带致病基因，两者均不患待测遗传病 高三年级生物学 试题卷第 5 页（共 8 页） 16．2017年中国科学家利用“聪明的化学方法和操作技巧（10s内去核，15s内核移植）”成功培育了体细胞克隆猴， 流程如下，下列叙述错误的是（ ） A．科学家多年的反复实验带来的娴熟技术使卵细胞受损减少 B．核移植前用“灭活病毒短暂处理”主要目的是诱导细胞融合 C．“聪明的化学方法”主要指图中①②，通过调节组蛋白修饰而抑制基因表达 D．上述技术有助于加速针对阿尔茨海默病、免疫缺陷、肿瘤等的新药研发进程 二、非选择题：本题共 5小题，共 52分。 17．尿素是一种重要的农业肥料，但若不经细菌的分解，就不能更好地被植物利用。生活在土壤中的微生物种类和 数量繁多，同学们试图探究土壤中微生物对尿素是否有分解作用，设计了以下实验，并成功筛选到能高效降解 尿素的细菌（目的菌）。培养基成分如表所示，实验步骤如图所示。 KH2PO4 1.4g Na2HPO4 2.1g MgSO4·7H2O 0.2g 葡萄糖 10g 物质 A 1g 琼脂 15g 将上述物质溶解后，用蒸馏水定容到 100mL （1）表 1所示培养基成分中物质 A是＿＿＿＿，本实验中加入它的作用是＿＿＿＿。 （2）为了保证无菌操作，在实验中需要灭菌的是＿＿＿＿。 A．培养细菌用的培养基与培养皿 B．玻璃棒、试管、锥形瓶和吸管 C．实验操作者的双手 D．接种所需的涂布器 （3）从物理状态角度分析，图中接种时所用的培养基属于＿＿＿＿培养基。 A．选择培养基 B．通用培养基 C．固体培养基 D．液体培养基 （4）在进行分离分解尿素的细菌实验时，A同学从培养基上筛选出大约 150个菌落，而其他同学只选择出大约 50个菌落。A同学的实验结果产生的原因可能有＿＿＿＿（填序号）。 ①土样不同 ②培养基污染 ③操作失误 ④没有设置对照 高三年级生物学 试题卷第 6 页（共 8 页） 18．自生固氮菌是土壤中能固定空气中氮气的细菌，将玉米种子用自生固氮菌拌种后播种，可显著提高产量并降低 化肥的使用量。科研人员进行了土壤中自生固氮菌的分离和固氮能力测定的研究，部分实验流程如图 1所示。 回答下列问题： （1）步骤①土样最好取自＿＿（填“表层”或“深层”）土壤。步骤②须充分振荡 20min，充分振荡的好处是＿＿。 （2）步骤④所用的接种工具主要是＿＿＿＿。若在④的平板上统计的菌落数分别为 28、41、39、40、32 个， 则每克土壤中含有的固氮菌为＿＿＿＿个。 （3）Ashby培养基（也称阿须贝氏无氮培养基）具有从混合菌中富集分离固氮优势菌的作用，可有效从土壤中 分离自生固氮菌，从功能角度分析，该培养基属于＿＿＿＿。 （4）研究发现圆褐固氮菌和巨大芽孢杆菌处理厨余垃圾废液的效果较好。为研究这两种菌种分别及混合处理某 厨余垃圾废液的效果，科研人员将两种菌液进行不同配比，分别接种于等量的相同厨余垃圾废液中，培养 3天后测定有效菌落数，结果如图 2所示。由该实验结果可得到的结论是＿＿＿＿＿＿＿＿。 19．某化工厂为了处理排出污水中的一种有害的、难以降解的有机化合物 A， 研究人员欲通过筛选，并利用基因工程技术，培养高效降解该有害物质 的“超级菌”。研究团队用化合物 A、磷酸盐、镁盐和微量元素等配置了 培养基，成功地筛选出能降解化合物 A的细菌（目的菌）。实验的主要 步骤如图 1所示，请分析回答问题。 （1）加化合物 A的培养基从目的和功能来看属于＿＿＿＿培养基，其目 的是＿＿＿＿＿＿＿＿。 （2）培养若干天后，应选择培养瓶中化合物 A含量＿＿＿＿的培养液， 接入新的培养液中连续振荡培养，使目的菌数量扩增。振荡培养的 目的是＿＿＿＿＿＿＿＿。 高三年级生物学 试题卷第 7 页（共 8 页） （3）研究团队发现了一种脱氢酶基因 X，有高效降解有害化合物 A的功能，对 X基因测序得知：编码区的一个 碱基对 A/T替换成 C/G，可大大增强其降解能力。为改造 X基因（图 2），将人工合成的一段含有特定突 变位点的单链寡核苷酸片段与带有目的基因的单链环状载体进行杂交；在相关酶的作用下进行 DNA 链的 合成和连接反应，得到含有突变位点的双链载体。 ①构建带有目的基因的单链载体，需要＿＿＿＿酶和 DNA 连接酶，DNA连接酶催化目的基因片段和载体 片段之间形成的化学键是＿＿＿＿。 ②请在图 2的◯中标出碱基。 20．花椰菜常因感染真菌而患黑腐病，导致产量和品质受到严重影响。为解决菜农困扰，研究人员用一定剂量紫外 线照射含黑腐病抗性基因的某植物叶肉细胞，使其染色体片段化从而失去细胞分裂能力，再与花椰菜幼根细胞 进行体细胞杂交，进而培育抗黑腐病杂种花椰菜。操作过程如图所示。回答下列问题： （1）图中叶肉细胞原生质体与根细胞原生质体融合的原理是＿＿＿＿。除图中②所示的方法外，通常诱导原生 质体融合的化学方法是＿＿＿＿。 （2）融合较好的原生质体呈哑铃型。研究人员用不同浓度 PEG诱导，然后用光学显微镜观察融合原生质体，获 得结果如表。 PEG质量分数 原生质体状态 25% 有破碎现象，哑铃型原生质体比例<0.01% 30% 形态正常，哑铃型原生质体比例 0.03% 35% 原生质体出现缩小现象，哑铃型原生质体比例 0.01~0.02% 40% 原生质体出现缩小现象，哑铃型原生质体比例 0.01~0.02% 当 PEG质量分数为 35%和 40%时原生质体出现缩小现象，原因是＿＿＿＿。若想确定 PEG溶液诱导原生 质体融合的最适浓度，需在＿＿＿＿范围内缩小浓度梯度继续实验。 高三年级生物学 试题卷第 8 页（共 8 页） （3）PEG诱导后需要筛选。筛选时用光学显微镜挑选出含＿＿＿＿（填细胞器）且形态为哑铃型的原生质体， 在黑暗的环境中进一步培养获得愈伤组织。愈伤组织先诱导生芽还是生根取决于＿＿＿＿。 21．研究发现，RTA 蛋白第 212位甘氨酸替换为精氨酸会出现冷敏感效应（cs），即当温度由 29℃变为 18℃时， 可抑制 RTA蛋白对细胞的致死作用。利用此特性培育纯合转基因果蝇。 （1）欲得到具有 cs效应的 RTAcs蛋白，推测对应的基因碱基序列，对 融合基因 1进行＿＿＿＿获得融合基因 2（如图）。请在方框中画 出可继续延伸的复性结果，并标明每条链的 5'端和 3'端。 （2）上方框内的序列延伸完成之后，后续对突变基因进行扩增，应选 择的引物为图中的＿＿＿＿。 （3）对转入融合基因 2的果蝇进行以下操作： ⅰ 在 29℃收集雄性果蝇（G0）。 ⅱ G0与野生型果蝇杂交，筛选出转基因受精卵（G1） ⅲ 将每对亲本的受精卵（G1）均分为两组，分别在 18℃和 29℃孵化培养，统计两组中雄性个体所占比 例，若＿＿＿＿，则说明 G1具有 cs效应。 ⅳ 在＿＿＿＿℃继续培养具有 cs效应的 G1果蝇，使之连续多代相互交配，得到转基因纯合子。 机密★启用前 天立教育2025－2026学年秋期入学联合考试 高三年级生物学试题卷 本试题卷共8页，两大题，21小题，满分100分。考试时间75分钟。 注意事项： 1．答卷前，考生务必将自己的姓名、班级、考场号、座位号、考生号填写在答题卡上。 2．回答选择题时，选出每小题答案后，用铅笔把答题卡上对应题目的答案标号涂黑。如需改动，用橡皮擦干净后，再选涂其他答案标号。回答非选择题时，将答案写在答题卡上。写在本试卷上无效。 3．考试结束后，将本试卷和答题卡一并交回。 一、选择题：本题共16小题，每小题3分，共48分。在每小题给出的四个选项中，只有一项是符合题目要求的。 1． 采用干热灭菌、灼烧灭菌、高压蒸汽灭菌、紫外线照射等几种方法，可分别杀死哪些部位的杂菌（　　） A．接种环、吸管、培养基、接种室 B．吸管、接种环、培养基、接种箱 C．培养基、吸管、接种环、接种箱 D．培养皿、吸管、培养基、双手 2． 景德镇的辣椒炒肉被黄渤称为“这辈子吃到过最好吃的辣椒炒肉”。辣椒中的辣椒素是这道菜中的重要成分之一，辣椒素可通过下图途径获得，下列说法正确的是（　　） A．细胞分离获得单细胞及其后续过程对社会、经济和环境保护具有重要意义 B．步骤②促进生根过程中，细胞分裂素用量与生长素用量的比值应大于1 C．植物组织培养的培养基中不需要加入有机营养物质 D．外植体消毒时，先用次氯酸钠溶液处理后再用酒精消毒 3． 下列关于发酵工程的应用，叙述正确的是（    ） A．谷氨酸是味精的原料，可以通过黑曲霉发酵制得 B．使用基因工程改造的啤酒酵母，可以提高啤酒的质量和产量 C．利用发酵工程生产的白僵菌特异性强，只能用来防治一种农林害虫 D．一种真菌通过发酵工程产生的井冈霉素可以用来防治水稻枯纹病 4． 下列关于植物体细胞杂交技术的叙述，正确的是（    ） A．制备原生质体需要使用胰蛋白酶或者胶原蛋白酶来处理细胞 B．原生质体融合可用电融合法或聚乙二醇法进行诱导 C．对杂种细胞进行组织培养时，需要全程避光 D．植物组织可以进行光合作用，组织培养的培养基中不需要添加有机碳源 5． 科学家成功地把外源的致病基因利用“基因敲除”技术整合到小鼠胚胎干细胞的DNA同源序列中，使正常基因被取代或破坏而失活，然后将得到的胚胎干细胞植入小鼠的早期胚胎中，培育出患病的嵌合体小鼠。下列有关叙述错误的是（　　） A．在“基因敲除”中需要用到限制性核酸内切酶、DNA连接酶等 B．通过上述“基因敲除”技术可以定向改变生物体的某一基因 C．这种嵌合体小鼠长大后，体内存在外源基因，但不会遗传给后代 D．“基因敲除”技术有利于人类对某些遗传因素引发的疾病进行研究 6． 近年来，有科学家把来自动物体的精子注入去核的卵细胞中，获得重组细胞，进一步培育出“孤雄单倍体胚胎”。下列说法错误的是（    ） A．该过程用到的技术手段主要有核移植和早期胚胎培养 B．单倍体胚胎干细胞类似于正常胚胎干细胞，可诱导分化成各种功能的组织和器官 C．“孤雄单倍体胚胎”细胞由重组细胞减数分裂而来，其核遗传物质由精子提供 D．“孤雄单倍体胚胎”细胞，可当作精子使用，使卵细胞受精，并生下正常小鼠 7． 我国科学家使用小分子化合物处理小鼠体细胞，成功获得诱导多能干细胞(iPS细胞)，降低了通过导入原癌基因c-Myc等基因制备iPS 细胞的潜在成瘤风险。下列叙述错误的是（　　） A．iPS 细胞的潜在成瘤风险来自于 c-Myc基因抑制了细胞的分裂分化 B．单基因遗传病患者使用iPS 细胞治疗后，体内仍可能携带致病基因 C．人工制备的iPS 细胞同时具备多方向分化的潜能和自我更新的能力 D．使用非亲缘iPS 细胞不能解决干细胞移植中 HLA 造成的免疫排斥 8． 某农田中偶然出现了一株抗虫、耐盐碱的小麦，若要利用该突变植株快速培育能稳定遗传的抗虫、耐盐减小麦新品种，则需要用到单倍体育种技术。下列相关叙述错误的是（    ） A．该过程运用了染色体变异的原理 B．该过程证明了植物细胞核的全能性 C．该过程需要用植物激素处理 D．该过程需要抑制纺锤体的形成 9． 新冠病毒主要通过其表面的棘突蛋白(S蛋白)与人体细胞膜上的ACE2蛋白结合实现侵染，目前研制新冠疫苗根据采用的主要技术路径不同分为核酸疫苗、灭活疫苗、腺病毒载体疫苗、重组蛋白疫苗等，下列有关说法错误的是（    ） A．通过基因工程在体外大量生产并提纯新冠病毒的S蛋白可制成重组蛋白疫苗 B．mRNA疫苗在人体细胞内可直接作为模板合成病毒S蛋白，刺激人体产生抗体 C．新冠病毒在琼脂培养基上大量培养，然后通过灭活和纯化，可制成灭活疫苗 D．将改造后无害的腺病毒和新冠病毒S蛋白基因重组，可制成腺病毒载体疫苗 10．植物体细胞杂交需要分离出有活力的原生质体，研究者通过实验研究了酶解时间对原生质体产量和活力的影响，结果如图。相关叙述错误的是（　　） A．随酶解时间延长两种原生质体产量均先增加后减少 B．该实验中有1个自变量，2个因变量 C．适宜两植物细胞的最佳酶解时间分别为10h和12h D．原生质体活力不可以通过质壁分离与复原实验进行验证 11．通常选取皮肤烧伤患者的自身细胞，经体外培养获得自体健康皮肤，再通过皮肤移植术对患者进行治疗。下列说法错误的是（    ） A．通常选取皮肤中分裂能力强、易培养的成纤维细胞或皮肤干细胞进行体外培养 B．在体外培养细胞时，需要对培养液和用具进行灭菌处理，并且定期更换培养液 C．细胞培养过程需要提供含有95%的O2和5%的CO2的混合气体，以维持培养液的pH D．进行传代培养时，悬浮培养的细胞可直接用离心法收集后制成细胞悬液，分瓶培养 12．单克隆抗体的制备过程通常涉及免疫动物、细胞融合、选择培养、单克隆抗体的大量制备等步骤。下列关于利用小鼠制备抗人绒毛膜促性腺激素单克隆抗体（用于制作“早早孕诊断试剂”）的叙述，正确的是（    ） A．免疫动物阶段，给小鼠注射人绒毛膜促性腺激素，致使小鼠发生体液免疫 B．细胞融合阶段，可以采用的诱导融合方法与诱导原生质体融合的方法完全相同 C．选择培养阶段，淘汰掉未融合的骨髓瘤细胞和B细胞即可得到所需杂交瘤细胞 D．第二次筛选出的杂交瘤细胞只能注射到小鼠腹腔内大规模培养 13．某同学经过分离纯化获得了一种微生物，用Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ三种培养基来培养该微生物（见下表）。通过观察该微生物的菌落形态和生长繁殖情况，来确定其生物类型。下列相关叙述正确的是（根瘤菌是共生固氮菌，只有共生才能固氮） 粉状硫 10g K2HPO4 4g FeSO4 0.5g 蔗糖 10g （NH4）2SO4 0.4g H2O 100mL MgSO4 9.25g CaCl2 0.5g Ⅰ ＋ ＋ ＋ ＋ － ＋ ＋ ＋ Ⅱ ＋ ＋ ＋ － ＋ ＋ ＋ ＋ Ⅲ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ 注：“＋”表示加入该物质，“－”表示不加入该物质。 A．若该微生物为根瘤菌，则其在Ⅰ和Ⅱ中均能正常生长 B．若该微生物为根瘤菌，则其在Ⅲ中的固氮量与菌落比在Ⅰ中多且大 C．若该微生物为硝化细菌，则其在Ⅱ和Ⅲ中能正常生长，不能在Ⅰ中生长 D．若该微生物为酵母菌，则其在Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ中均能正常生长 14．基因定点突变的目的是通过定向地改变基因内一个或少数几个碱基来改变多肽链上一个或几个氨基酸。该技术是蛋白质工程的重要技术，图示为利用PCR技术进行定点突变的流程，相关叙述错误的是（    ） 注：引物1和引物3的突起处代表与模板不能互补的突变位点，而这两条引物有部分碱基（包括突变位点）是可以互补的。 A．第一阶段PCR过程中需要进行两次循环才会出现所需的DNA 片段 B．要完成两处位点的定点突变，共需要设计8种引物 C．酶①应为耐高温DNA 聚合酶，引物X和Y分别为引物2和4 D．通过该技术获得的突变基因可以表达出原来自然界不存在的蛋白质 15．下图表示甲、乙两种单基因遗传病的家系图和各家庭成员基因检测的结果。检测过程中用限制酶处理相关基因得到大小不同的片段后进行电泳，电泳结果中的条带表示检出的特定长度的酶切片段，数字表示碱基对的数目。下列说法正确的是（    ）    A．甲病的致病基因位于常染色体上，乙病的致病基因位于 X 染色体上 B．甲病可能由正常基因发生碱基对的替换导致，替换后的序列可被 Mst II 识别 C．乙病可能由正常基因上的两个 BamHI 识别序列之间发生碱基对的缺失导致 D．II4带致病基因、II8不携带致病基因，两者均不患待测遗传病 16．2017年中国科学家利用“聪明的化学方法和操作技巧（10s内去核，15s内核移植）”成功培育了体细胞克隆猴，流程如下，下列叙述错误的是（    ） A．科学家多年的反复实验带来的娴熟技术使卵细胞受损减少 B．核移植前用“灭活病毒短暂处理”主要目的是诱导细胞融合 C．“聪明的化学方法”主要指图中①②，通过调节组蛋白修饰而抑制基因表达 D．上述技术有助于加速针对阿尔茨海默病、免疫缺陷、肿瘤等的新药研发进程 二、非选择题：本题共5小题，共52分。 17．尿素是一种重要的农业肥料，但若不经细菌的分解，就不能更好地被植物利用。生活在土壤中的微生物种类和数量繁多，同学们试图探究土壤中微生物对尿素是否有分解作用，设计了以下实验，并成功筛选到能高效降解尿素的细菌（目的菌）。培养基成分如表所示，实验步骤如图所示。 KH2PO4 1.4g Na2HPO4 2.1g MgSO4·7H2O 0.2g 葡萄糖 10g 物质A 1g 琼脂 15g 将上述物质溶解后，用蒸馏水定容到100mL （1）表1所示培养基成分中物质A是＿＿＿＿，本实验中加入它的作用是＿＿＿＿。 （2）为了保证无菌操作，在实验中需要灭菌的是＿＿＿＿。 A．培养细菌用的培养基与培养皿 B．玻璃棒、试管、锥形瓶和吸管 C．实验操作者的双手 D．接种所需的涂布器 （3）从物理状态角度分析，图中接种时所用的培养基属于＿＿＿＿培养基。 A．选择培养基 B．通用培养基 C．固体培养基 D．液体培养基 （4）在进行分离分解尿素的细菌实验时，A同学从培养基上筛选出大约150个菌落，而其他同学只选择出大约50个菌落。A同学的实验结果产生的原因可能有＿＿＿＿（填序号）。 ①土样不同 ②培养基污染 ③操作失误 ④没有设置对照 18．自生固氮菌是土壤中能固定空气中氮气的细菌，将玉米种子用自生固氮菌拌种后播种，可显著提高产量并降低化肥的使用量。科研人员进行了土壤中自生固氮菌的分离和固氮能力测定的研究，部分实验流程如图1所示。回答下列问题：    （1）步骤①土样最好取自＿＿（填“表层”或“深层”）土壤。步骤②须充分振荡20min，充分振荡的好处是＿＿。 （2）步骤④所用的接种工具主要是＿＿＿＿。若在④的平板上统计的菌落数分别为28、41、39、40、32个，则每克土壤中含有的固氮菌为＿＿＿＿个。 （3）Ashby培养基（也称阿须贝氏无氮培养基）具有从混合菌中富集分离固氮优势菌的作用，可有效从土壤中分离自生固氮菌，从功能角度分析，该培养基属于＿＿＿＿。 （4）研究发现圆褐固氮菌和巨大芽孢杆菌处理厨余垃圾废液的效果较好。为研究这两种菌种分别及混合处理某厨余垃圾废液的效果，科研人员将两种菌液进行不同配比，分别接种于等量的相同厨余垃圾废液中，培养3天后测定有效菌落数，结果如图2所示。由该实验结果可得到的结论是＿＿＿＿＿＿＿＿。 19．某化工厂为了处理排出污水中的一种有害的、难以降解的有机化合物A，研究人员欲通过筛选，并利用基因工程技术，培养高效降解该有害物质的“超级菌”。研究团队用化合物A、磷酸盐、镁盐和微量元素等配置了培养基，成功地筛选出能降解化合物A的细菌（目的菌）。实验的主要步骤如图1所示，请分析回答问题。 （1）加化合物A的培养基从目的和功能来看属于＿＿＿＿培养基，其目的是＿＿＿＿＿＿＿＿。 （2）培养若干天后，应选择培养瓶中化合物A含量＿＿＿＿的培养液，接入新的培养液中连续振荡培养，使目的菌数量扩增。振荡培养的目的是＿＿＿＿＿＿＿＿。 （3）研究团队发现了一种脱氢酶基因X，有高效降解有害化合物A的功能，对X基因测序得知：编码区的一个碱基对A/T替换成C/G，可大大增强其降解能力。为改造X基因（图2），将人工合成的一段含有特定突变位点的单链寡核苷酸片段与带有目的基因的单链环状载体进行杂交；在相关酶的作用下进行DNA链的合成和连接反应，得到含有突变位点的双链载体。 ①构建带有目的基因的单链载体，需要＿＿＿＿酶和DNA连接酶，DNA连接酶催化目的基因片段和载体片段之间形成的化学键是＿＿＿＿。 ②请在图2的◯中标出碱基。    20．花椰菜常因感染真菌而患黑腐病，导致产量和品质受到严重影响。为解决菜农困扰，研究人员用一定剂量紫外线照射含黑腐病抗性基因的某植物叶肉细胞，使其染色体片段化从而失去细胞分裂能力，再与花椰菜幼根细胞进行体细胞杂交，进而培育抗黑腐病杂种花椰菜。操作过程如图所示。回答下列问题： （1）图中叶肉细胞原生质体与根细胞原生质体融合的原理是＿＿＿＿。除图中②所示的方法外，通常诱导原生质体融合的化学方法是＿＿＿＿。 （2）融合较好的原生质体呈哑铃型。研究人员用不同浓度PEG诱导，然后用光学显微镜观察融合原生质体，获得结果如表。 PEG质量分数 原生质体状态 25% 有破碎现象，哑铃型原生质体比例<0.01% 30% 形态正常，哑铃型原生质体比例0.03% 35% 原生质体出现缩小现象，哑铃型原生质体比例0.01~0.02% 40% 原生质体出现缩小现象，哑铃型原生质体比例0.01~0.02% 当PEG质量分数为35%和40%时原生质体出现缩小现象，原因是＿＿＿＿。若想确定PEG溶液诱导原生质体融合的最适浓度，需在＿＿＿＿范围内缩小浓度梯度继续实验。 （3）PEG诱导后需要筛选。筛选时用光学显微镜挑选出含＿＿＿＿（填细胞器）且形态为哑铃型的原生质体，在黑暗的环境中进一步培养获得愈伤组织。愈伤组织先诱导生芽还是生根取决于＿＿＿＿。 21．研究发现，RTA蛋白第212位甘氨酸替换为精氨酸会出现冷敏感效应（cs），即当温度由29℃变为18℃时，可抑制RTA蛋白对细胞的致死作用。利用此特性培育纯合转基因果蝇。 （1）欲得到具有cs效应的RTAcs蛋白，推测对应的基因碱基序列，对融合基因1进行＿＿＿＿获得融合基因2（如图）。请在方框中画出可继续延伸的复性结果，并标明每条链的5'端和3'端。 （2）上方框内的序列延伸完成之后，后续对突变基因进行扩增，应选择的引物为图中的＿＿＿＿。 （3）对转入融合基因2的果蝇进行以下操作： ⅰ　在29℃收集雄性果蝇（G0）。 ⅱ　G0与野生型果蝇杂交，筛选出转基因受精卵（G1） ⅲ　将每对亲本的受精卵（G1）均分为两组，分别在18℃和29℃孵化培养，统计两组中雄性个体所占比例，若＿＿＿＿，则说明G1具有cs效应。 ⅳ　在＿＿＿＿℃继续培养具有cs效应的G1果蝇，使之连续多代相互交配，得到转基因纯合子。 高三年级生物学 试题卷第 1 页（共 4 页） 学科网（北京）股份有限公司 $$ 机密★启用前 天立教育2025－2026学年秋期入学联合考试 高三年级生物学试题卷 本试题卷共8页，两大题，21小题，满分100分。考试时间75分钟。 注意事项： 1．答卷前，考生务必将自己的姓名、班级、考场号、座位号、考生号填写在答题卡上。 2．回答选择题时，选出每小题答案后，用铅笔把答题卡上对应题目的答案标号涂黑。如需改动，用橡皮擦干净后，再选涂其他答案标号。回答非选择题时，将答案写在答题卡上。写在本试卷上无效。 3．考试结束后，将本试卷和答题卡一并交回。 一、选择题：本题共16小题，每小题3分，共48分。在每小题给出的四个选项中，只有一项是符合题目要求的。 1． 采用干热灭菌、灼烧灭菌、高压蒸汽灭菌、紫外线照射等几种方法，可分别杀死哪些部位的杂菌（　　） A．接种环、吸管、培养基、接种室 B．吸管、接种环、培养基、接种箱 C．培养基、吸管、接种环、接种箱 D．培养皿、吸管、培养基、双手 2． 景德镇的辣椒炒肉被黄渤称为“这辈子吃到过最好吃的辣椒炒肉”。辣椒中的辣椒素是这道菜中的重要成分之一，辣椒素可通过下图途径获得，下列说法正确的是（　　） A．细胞分离获得单细胞及其后续过程对社会、经济和环境保护具有重要意义 B．步骤②促进生根过程中，细胞分裂素用量与生长素用量的比值应大于1 C．植物组织培养的培养基中不需要加入有机营养物质 D．外植体消毒时，先用次氯酸钠溶液处理后再用酒精消毒 3． 下列关于发酵工程的应用，叙述正确的是（    ） A．谷氨酸是味精的原料，可以通过黑曲霉发酵制得 B．使用基因工程改造的啤酒酵母，可以提高啤酒的质量和产量 C．利用发酵工程生产的白僵菌特异性强，只能用来防治一种农林害虫 D．一种真菌通过发酵工程产生的井冈霉素可以用来防治水稻枯纹病 4． 下列关于植物体细胞杂交技术的叙述，正确的是（    ） A．制备原生质体需要使用胰蛋白酶或者胶原蛋白酶来处理细胞 B．原生质体融合可用电融合法或聚乙二醇法进行诱导 C．对杂种细胞进行组织培养时，需要全程避光 D．植物组织可以进行光合作用，组织培养的培养基中不需要添加有机碳源 5． 科学家成功地把外源的致病基因利用“基因敲除”技术整合到小鼠胚胎干细胞的DNA同源序列中，使正常基因被取代或破坏而失活，然后将得到的胚胎干细胞植入小鼠的早期胚胎中，培育出患病的嵌合体小鼠。下列有关叙述错误的是（　　） A．在“基因敲除”中需要用到限制性核酸内切酶、DNA连接酶等 B．通过上述“基因敲除”技术可以定向改变生物体的某一基因 C．这种嵌合体小鼠长大后，体内存在外源基因，但不会遗传给后代 D．“基因敲除”技术有利于人类对某些遗传因素引发的疾病进行研究 6． 近年来，有科学家把来自动物体的精子注入去核的卵细胞中，获得重组细胞，进一步培育出“孤雄单倍体胚胎”。下列说法错误的是（    ） A．该过程用到的技术手段主要有核移植和早期胚胎培养 B．单倍体胚胎干细胞类似于正常胚胎干细胞，可诱导分化成各种功能的组织和器官 C．“孤雄单倍体胚胎”细胞由重组细胞减数分裂而来，其核遗传物质由精子提供 D．“孤雄单倍体胚胎”细胞，可当作精子使用，使卵细胞受精，并生下正常小鼠 7． 我国科学家使用小分子化合物处理小鼠体细胞，成功获得诱导多能干细胞(iPS细胞)，降低了通过导入原癌基因c-Myc等基因制备iPS 细胞的潜在成瘤风险。下列叙述错误的是（　　） A．iPS 细胞的潜在成瘤风险来自于 c-Myc基因抑制了细胞的分裂分化 B．单基因遗传病患者使用iPS 细胞治疗后，体内仍可能携带致病基因 C．人工制备的iPS 细胞同时具备多方向分化的潜能和自我更新的能力 D．使用非亲缘iPS 细胞不能解决干细胞移植中 HLA 造成的免疫排斥 8． 某农田中偶然出现了一株抗虫、耐盐碱的小麦，若要利用该突变植株快速培育能稳定遗传的抗虫、耐盐减小麦新品种，则需要用到单倍体育种技术。下列相关叙述错误的是（    ） A．该过程运用了染色体变异的原理 B．该过程证明了植物细胞核的全能性 C．该过程需要用植物激素处理 D．该过程需要抑制纺锤体的形成 9． 新冠病毒主要通过其表面的棘突蛋白(S蛋白)与人体细胞膜上的ACE2蛋白结合实现侵染，目前研制新冠疫苗根据采用的主要技术路径不同分为核酸疫苗、灭活疫苗、腺病毒载体疫苗、重组蛋白疫苗等，下列有关说法错误的是（    ） A．通过基因工程在体外大量生产并提纯新冠病毒的S蛋白可制成重组蛋白疫苗 B．mRNA疫苗在人体细胞内可直接作为模板合成病毒S蛋白，刺激人体产生抗体 C．新冠病毒在琼脂培养基上大量培养，然后通过灭活和纯化，可制成灭活疫苗 D．将改造后无害的腺病毒和新冠病毒S蛋白基因重组，可制成腺病毒载体疫苗 10．植物体细胞杂交需要分离出有活力的原生质体，研究者通过实验研究了酶解时间对原生质体产量和活力的影响，结果如图。相关叙述错误的是（　　） A．随酶解时间延长两种原生质体产量均先增加后减少 B．该实验中有1个自变量，2个因变量 C．适宜两植物细胞的最佳酶解时间分别为10h和12h D．原生质体活力不可以通过质壁分离与复原实验进行验证 11．通常选取皮肤烧伤患者的自身细胞，经体外培养获得自体健康皮肤，再通过皮肤移植术对患者进行治疗。下列说法错误的是（    ） A．通常选取皮肤中分裂能力强、易培养的成纤维细胞或皮肤干细胞进行体外培养 B．在体外培养细胞时，需要对培养液和用具进行灭菌处理，并且定期更换培养液 C．细胞培养过程需要提供含有95%的O2和5%的CO2的混合气体，以维持培养液的pH D．进行传代培养时，悬浮培养的细胞可直接用离心法收集后制成细胞悬液，分瓶培养 12．单克隆抗体的制备过程通常涉及免疫动物、细胞融合、选择培养、单克隆抗体的大量制备等步骤。下列关于利用小鼠制备抗人绒毛膜促性腺激素单克隆抗体（用于制作“早早孕诊断试剂”）的叙述，正确的是（    ） A．免疫动物阶段，给小鼠注射人绒毛膜促性腺激素，致使小鼠发生体液免疫 B．细胞融合阶段，可以采用的诱导融合方法与诱导原生质体融合的方法完全相同 C．选择培养阶段，淘汰掉未融合的骨髓瘤细胞和B细胞即可得到所需杂交瘤细胞 D．第二次筛选出的杂交瘤细胞只能注射到小鼠腹腔内大规模培养 13．某同学经过分离纯化获得了一种微生物，用Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ三种培养基来培养该微生物（见下表）。通过观察该微生物的菌落形态和生长繁殖情况，来确定其生物类型。下列相关叙述正确的是（根瘤菌是共生固氮菌，只有共生才能固氮） 粉状硫 10g K2HPO4 4g FeSO4 0.5g 蔗糖 10g （NH4）2SO4 0.4g H2O 100mL MgSO4 9.25g CaCl2 0.5g Ⅰ ＋ ＋ ＋ ＋ － ＋ ＋ ＋ Ⅱ ＋ ＋ ＋ － ＋ ＋ ＋ ＋ Ⅲ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ 注：“＋”表示加入该物质，“－”表示不加入该物质。 A．若该微生物为根瘤菌，则其在Ⅰ和Ⅱ中均能正常生长 B．若该微生物为根瘤菌，则其在Ⅲ中的固氮量与菌落比在Ⅰ中多且大 C．若该微生物为硝化细菌，则其在Ⅱ和Ⅲ中能正常生长，不能在Ⅰ中生长 D．若该微生物为酵母菌，则其在Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ中均能正常生长 14．基因定点突变的目的是通过定向地改变基因内一个或少数几个碱基来改变多肽链上一个或几个氨基酸。该技术是蛋白质工程的重要技术，图示为利用PCR技术进行定点突变的流程，相关叙述错误的是（    ） 注：引物1和引物3的突起处代表与模板不能互补的突变位点，而这两条引物有部分碱基（包括突变位点）是可以互补的。 A．第一阶段PCR过程中需要进行两次循环才会出现所需的DNA 片段 B．要完成两处位点的定点突变，共需要设计8种引物 C．酶①应为耐高温DNA 聚合酶，引物X和Y分别为引物2和4 D．通过该技术获得的突变基因可以表达出原来自然界不存在的蛋白质 15．下图表示甲、乙两种单基因遗传病的家系图和各家庭成员基因检测的结果。检测过程中用限制酶处理相关基因得到大小不同的片段后进行电泳，电泳结果中的条带表示检出的特定长度的酶切片段，数字表示碱基对的数目。下列说法正确的是（    ）    A．甲病的致病基因位于常染色体上，乙病的致病基因位于 X 染色体上 B．甲病可能由正常基因发生碱基对的替换导致，替换后的序列可被 Mst II 识别 C．乙病可能由正常基因上的两个 BamHI 识别序列之间发生碱基对的缺失导致 D．II4带致病基因、II8不携带致病基因，两者均不患待测遗传病 16．2017年中国科学家利用“聪明的化学方法和操作技巧（10s内去核，15s内核移植）”成功培育了体细胞克隆猴，流程如下，下列叙述错误的是（    ） A．科学家多年的反复实验带来的娴熟技术使卵细胞受损减少 B．核移植前用“灭活病毒短暂处理”主要目的是诱导细胞融合 C．“聪明的化学方法”主要指图中①②，通过调节组蛋白修饰而抑制基因表达 D．上述技术有助于加速针对阿尔茨海默病、免疫缺陷、肿瘤等的新药研发进程 二、非选择题：本题共5小题，共52分。 17．尿素是一种重要的农业肥料，但若不经细菌的分解，就不能更好地被植物利用。生活在土壤中的微生物种类和数量繁多，同学们试图探究土壤中微生物对尿素是否有分解作用，设计了以下实验，并成功筛选到能高效降解尿素的细菌（目的菌）。培养基成分如表所示，实验步骤如图所示。 KH2PO4 1.4g Na2HPO4 2.1g MgSO4·7H2O 0.2g 葡萄糖 10g 物质A 1g 琼脂 15g 将上述物质溶解后，用蒸馏水定容到100mL （1）表1所示培养基成分中物质A是＿＿＿＿，本实验中加入它的作用是＿＿＿＿。 （2）为了保证无菌操作，在实验中需要灭菌的是＿＿＿＿。 A．培养细菌用的培养基与培养皿 B．玻璃棒、试管、锥形瓶和吸管 C．实验操作者的双手 D．接种所需的涂布器 （3）从物理状态角度分析，图中接种时所用的培养基属于＿＿＿＿培养基。 A．选择培养基 B．通用培养基 C．固体培养基 D．液体培养基 （4）在进行分离分解尿素的细菌实验时，A同学从培养基上筛选出大约150个菌落，而其他同学只选择出大约50个菌落。A同学的实验结果产生的原因可能有＿＿＿＿（填序号）。 ①土样不同 ②培养基污染 ③操作失误 ④没有设置对照 18．自生固氮菌是土壤中能固定空气中氮气的细菌，将玉米种子用自生固氮菌拌种后播种，可显著提高产量并降低化肥的使用量。科研人员进行了土壤中自生固氮菌的分离和固氮能力测定的研究，部分实验流程如图1所示。回答下列问题：    （1）步骤①土样最好取自＿＿（填“表层”或“深层”）土壤。步骤②须充分振荡20min，充分振荡的好处是＿＿。 （2）步骤④所用的接种工具主要是＿＿＿＿。若在④的平板上统计的菌落数分别为28、41、39、40、32个，则每克土壤中含有的固氮菌为＿＿＿＿个。 （3）Ashby培养基（也称阿须贝氏无氮培养基）具有从混合菌中富集分离固氮优势菌的作用，可有效从土壤中分离自生固氮菌，从功能角度分析，该培养基属于＿＿＿＿。 （4）研究发现圆褐固氮菌和巨大芽孢杆菌处理厨余垃圾废液的效果较好。为研究这两种菌种分别及混合处理某厨余垃圾废液的效果，科研人员将两种菌液进行不同配比，分别接种于等量的相同厨余垃圾废液中，培养3天后测定有效菌落数，结果如图2所示。由该实验结果可得到的结论是＿＿＿＿＿＿＿＿。 19．某化工厂为了处理排出污水中的一种有害的、难以降解的有机化合物A，研究人员欲通过筛选，并利用基因工程技术，培养高效降解该有害物质的“超级菌”。研究团队用化合物A、磷酸盐、镁盐和微量元素等配置了培养基，成功地筛选出能降解化合物A的细菌（目的菌）。实验的主要步骤如图1所示，请分析回答问题。 （1）加化合物A的培养基从目的和功能来看属于＿＿＿＿培养基，其目的是＿＿＿＿＿＿＿＿。 （2）培养若干天后，应选择培养瓶中化合物A含量＿＿＿＿的培养液，接入新的培养液中连续振荡培养，使目的菌数量扩增。振荡培养的目的是＿＿＿＿＿＿＿＿。 （3）研究团队发现了一种脱氢酶基因X，有高效降解有害化合物A的功能，对X基因测序得知：编码区的一个碱基对A/T替换成C/G，可大大增强其降解能力。为改造X基因（图2），将人工合成的一段含有特定突变位点的单链寡核苷酸片段与带有目的基因的单链环状载体进行杂交；在相关酶的作用下进行DNA链的合成和连接反应，得到含有突变位点的双链载体。 ①构建带有目的基因的单链载体，需要＿＿＿＿酶和DNA连接酶，DNA连接酶催化目的基因片段和载体片段之间形成的化学键是＿＿＿＿。 ②请在图2的◯中标出碱基。    20．花椰菜常因感染真菌而患黑腐病，导致产量和品质受到严重影响。为解决菜农困扰，研究人员用一定剂量紫外线照射含黑腐病抗性基因的某植物叶肉细胞，使其染色体片段化从而失去细胞分裂能力，再与花椰菜幼根细胞进行体细胞杂交，进而培育抗黑腐病杂种花椰菜。操作过程如图所示。回答下列问题： （1）图中叶肉细胞原生质体与根细胞原生质体融合的原理是＿＿＿＿。除图中②所示的方法外，通常诱导原生质体融合的化学方法是＿＿＿＿。 （2）融合较好的原生质体呈哑铃型。研究人员用不同浓度PEG诱导，然后用光学显微镜观察融合原生质体，获得结果如表。 PEG质量分数 原生质体状态 25% 有破碎现象，哑铃型原生质体比例<0.01% 30% 形态正常，哑铃型原生质体比例0.03% 35% 原生质体出现缩小现象，哑铃型原生质体比例0.01~0.02% 40% 原生质体出现缩小现象，哑铃型原生质体比例0.01~0.02% 当PEG质量分数为35%和40%时原生质体出现缩小现象，原因是＿＿＿＿。若想确定PEG溶液诱导原生质体融合的最适浓度，需在＿＿＿＿范围内缩小浓度梯度继续实验。 （3）PEG诱导后需要筛选。筛选时用光学显微镜挑选出含＿＿＿＿（填细胞器）且形态为哑铃型的原生质体，在黑暗的环境中进一步培养获得愈伤组织。愈伤组织先诱导生芽还是生根取决于＿＿＿＿。 21．研究发现，RTA蛋白第212位甘氨酸替换为精氨酸会出现冷敏感效应（cs），即当温度由29℃变为18℃时，可抑制RTA蛋白对细胞的致死作用。利用此特性培育纯合转基因果蝇。 （1）欲得到具有cs效应的RTAcs蛋白，推测对应的基因碱基序列，对融合基因1进行＿＿＿＿获得融合基因2（如图）。请在方框中画出可继续延伸的复性结果，并标明每条链的5'端和3'端。 （2）上方框内的序列延伸完成之后，后续对突变基因进行扩增，应选择的引物为图中的＿＿＿＿。 （3）对转入融合基因2的果蝇进行以下操作： ⅰ　在29℃收集雄性果蝇（G0）。 ⅱ　G0与野生型果蝇杂交，筛选出转基因受精卵（G1） ⅲ　将每对亲本的受精卵（G1）均分为两组，分别在18℃和29℃孵化培养，统计两组中雄性个体所占比例，若＿＿＿＿，则说明G1具有cs效应。 ⅳ　在＿＿＿＿℃继续培养具有cs效应的G1果蝇，使之连续多代相互交配，得到转基因纯合子。 高三年级生物学 试题卷第 1 页（共 4 页） 学科网（北京）股份有限公司 $$高三年级生物学 参考答案及评分细则第 1 页（共 3 页） 天立教育 2025－2026学年秋期入学联合考试 高三年级生物学参考答案及评分细则 第Ⅰ卷 选择题 题号 1 2 3 4 5 6 7 8 答案 B A B B C C A B 题号 9 10 11 12 13 14 15 16 答案 C B C A C B C C 第Ⅱ卷 非选择题 17．(1) 尿素 为细菌的生长代谢提供氮源，同时可筛选出能降解尿素的细菌 (2)ABD (3)C (4)①②③ 【分析】培养基一般含有碳源、氮源、水和无机盐。根据物理状态可分为固体培养基、液体培养基、半固体培养基； 根据培养功能可分为基础培养基、选择培养基、加富培养基、鉴别培养基等；根据使用范围可分为细菌培养基、放 线菌培养基、酵母菌培养基、真菌培养基等。 【详解】（1）该实验的目的是筛选到能高效降解尿素的细菌，因此培养基中需要加入尿素作为唯一的氮源，目的 是为细菌的生长代谢提供氮源，同时可筛选出能降解尿素的细菌。 （2）为了保证无菌操作，实验过程中使用的培养基、玻璃器皿、接种工具等均需要灭菌，实验操作者的双手需要 进行酒精消毒，故选 ABD。 （3）从物理状态角度分析，培养基可分为固体培养基、液体培养基、半固体培养基，图中接种时所用的培养基属 于固体培养基，故选 C。 （4）在进行分离分解尿素的细菌实验时，A同学从培养基上筛选出大约 150个菌落，而其他同学只选择出大约 50 个菌落。A同学的实验结果产生的原因可能有：A与 B同学采集的土壤样品不同或是 A同学操作失误，灭菌不彻底， 使培养基污染了，故选①②③。 18．(1) 表层 使土壤中的微生物充分释放到无菌水中 (2) 涂布器 3.8×106 (3)选择培养基 (4)两种菌混合接种时处理厨余垃圾废液的效果均大于单独接种时的，且两种菌种接种量比例为 1:1时，效果最好 【分析】稀释涂布平板法除可以用于分离微生物外，也常用来统计样品中活菌的数目。当样品的稀释度足够高时， 培养基表面生长的一个单菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌。通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大 约含有多少活菌。为了保证结果准确，一般选择菌落数为 30～300 的平板进行计数。样品的稀释度将直接影响平板 高三年级生物学 参考答案及评分细则第 2 页（共 3 页） 上的菌落数目。在实际操作中，通常选用一定稀释范围的样品液进行培养，以保证获得菌落数为 30～300、适于计 数的平板。在同一稀释度下，应至少对 3个平板进行重复计数，然后求出平均值。 【详解】（1）自生固氮菌能固定空气中的氮气，深层土壤中氮气含量低，故步骤①土样最好取自表层土壤。步骤 ②须充分振荡使土壤中的微生物充分释放到无菌水中。 （2）该实验利用稀释涂布平板法进行接种，步骤④所用的接种工具为涂布器。测定活菌数时一般选择菌落数在 30～ 300的平板进行计数，每克土壤中的菌落数=（41+39+40+32）÷4÷0.1×104=3.8×106个。 （3）Ashby无氮培养基能够筛选固氮微生物，从功能角度分析，是一种选择培养基。 （4）两种菌混合接种时处理厨余垃圾废液的效果均大于单独接种时的，且两种菌种接种量比例为 1∶1时，效果最 好，废液中两种菌种的有效活菌数能够实现同步最大化。 19．(1) 选择 筛选出可以降解化合物 A的微生物 (2) 显著降低 提高培养液溶氧量，同时使菌体与培养液充分接触 (3) 限制性核酸内切/限制 磷酸二酯键 【分析】分析题干信息，该实验的目的是筛选出高效降解化合物 A的细菌，在以化合物 A为唯一碳源的培养基中只 有能降解化合物 A的微生物才能以化合物 A为碳源和氮源生长繁殖，不能利用化合物 A的微生物因缺乏碳源和氮 源，无法生长繁殖。 【详解】（1）由题意可知，本实验是分离出能高效降解有机化合物 A的菌种，所以培养基中加入化合物 A的目的 是筛选降解的有机化合物 A的菌种，这种培养基属于选择培养基。 （2）由于“目的菌”能高效降解有机化合物 A，所以培养若干天后，应选择培养瓶中化合物 A含量显著降低的培养 基，接入新的培养液中连续培养，使“目的菌”的数量进一步增加。振荡培养的目的是提高培养液溶氧量，同时使菌 体与培养液充分接触。 （3）①构建带有目的基因的单链载体，需要限制性核酸内切酶（简称限制酶）和 DNA 连接酶，DNA连接酶催化 目的基因片段和载体片段之间形成的化学键是磷酸二酯键。 ②根据碱基互补配对原则，C和 G配对，A和 T配对。 20．(1) 细胞膜具有一定的流动性 高 Ca2+-高 pH融合法 (2) PEG浓度过高导致原生质体失水皱缩 25%-35% (3) 叶绿体 生长素和细胞分裂素的浓度和比例 【分析】植物体细胞杂交是指将植物不同种、属，甚至科间的原生质体通过人工方法诱导融合，然后进行离体培养， 使其再生杂种植株的技术。植物细胞具有细胞壁，未脱壁的两个细胞是很难融合的，植物细胞只有在脱去细胞壁成 为原生质体后才能融合，所以植物的细胞融合也称为原生质体融合。 高三年级生物学 参考答案及评分细则第 3 页（共 3 页） 【详解】（1）由于细胞膜具有一定的流动性，因此可以用一定的促融合剂促进其融合；图中所示的诱导融合的化 学方法是用 PEG诱导，除此之外还可用高 Ca2+-高 pH融合法诱导原生质体融合； （2）原生质层具有选择透性，PEG浓度过高导致原生质体失水皱缩，因此当 PEG质量分数为 35%和 40%时原生质 体出现缩小现象；30%时形态正常，说明原生质体既不吸水也不失水，有助于维持其正常形态，该浓度诱导原生质 体融合效果最好；25%时有破碎现象，说明 25%浓度较小，原生质体有的吸水涨破，35%时原生质体出现缩小现象， 说明 35%浓度较大，原生质体失水皱缩，因此需要在质量分数为 25%-35%之间的 PEG溶液重复上述实验； （3） 叶肉细胞原生质体含有叶绿体，光学显微镜下可见，可挑选出含叶绿体且形态为哑铃型（融合较好的原生质 体呈哑铃型）的原生质体即为融合的原生质体；愈伤组织是脱分化形成的一群未分化的细胞，获得愈伤组织的过程 中需要黑暗条件，愈伤组织先诱导生芽还是生根取决于生长素与细胞分裂素的浓度配比。 21．(1) 定点突变 (2)ad (3) 18℃组雄性个体所占比例小于 29℃组 18 【分析】基因工程是指按照人们的愿望，进行严格的设计，通过体外 DNA重组和转基因技术，赋予生物以新的遗 传特性，创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品；基因工程是在 DNA分子水平上进行设计和施工的， 又叫做 DNA重组技术。 【详解】（1）欲得到具有 cs效应的 RTAcs蛋白，推测对应的基因碱基序列，对融合基因 1进行定点突变获得融合 基因 2。图 2虚线方框中的两条链在延伸过程中，既可作为模板又可以起到相当于引物的作用，使耐高温的 DNA聚 合酶能够从两条链的 3’端开始连接脱氧核苷酸，继续延伸的复性结果如下： （2）据题图分析可知，若框内的 序列延伸完成之后，后续对突变基因进行扩 增，应选择的引物为图中的引物 a和引物 d。 （3）由题意可知：RTA蛋白第 212位甘氨酸替换为精氨酸会出现冷敏感效应（cs），即当温度由 29℃变为 18℃时， 可抑制 RTA蛋白对细胞的致死作用。对转入融合基因 2的果蝇进行以下操作： ⅰ：在 29℃收集雄性果蝇（G0）（全为转基因雄性果蝇）。 ⅱ：G0与野生型果蝇杂交，筛选出转基因受精卵（G1）。 ⅲ：将每对亲本的受精卵（G1）均分为两组，分别在 18℃和 29℃孵化培养，统计两组中雄性个体所占比例，若 G1 具有 cs效应，则 18℃组雄性个体所占比例小于 29℃组。 ⅳ：在 18℃时可抑制 RTA蛋白对细胞的致死作用，为通过多代自交得到转基因纯合子，应在 18℃继续培养具有 cs 效应的 G1果蝇。