内容正文:
编写说明:福建省中等职业学校学业水平考试《生物基础考试复习卷》,是依据福建省教育厅颁发的《生物基础》科目考试说明编写,本套试卷共68份,由三个部分组成。第一部分是根据考纲编写的知识点训练卷,共52份;第二部分是专题训练卷,共11份;第三部分是专业综合训练卷,参考历年来《生物基础》科目考试真题试卷,编写的5份专业综合训练卷。
本试卷是《生物基础考试复习卷》第42卷,是知识点训练卷,按(九)微生物的培养与保藏要求编写。其内容包括:
1.熟悉微生物细胞的化学组成和微生物生长所需的六大类营养要素,了解细菌的营养类型。
2.掌握培养基的概念、类型和配制流程,会按配方和步骤,配制细菌培养基,如牛肉膏蛋白胨培养基、LB培养基等,并制备成斜面和平板。
3.掌握微生物接种方法和分离纯化方法,会使用接种环将微生物接入斜面和使用涂布棒将菌液涂布平板,并置于培养箱内培养,不污染杂菌。
4.熟悉微生物生长的影响因素和培养条件,细菌的生长曲线特点,细菌、放线菌、酵母和霉菌的菌落特征。
5.熟悉微生物数量的测定方法。
6.掌握菌种选育和保藏的概念,了解菌种选育和保藏的方法,微生物衰退的原因及防止其衰退的措施。
福建省 中等职业学校学业水平考试《生物基础考试复习卷》 第42卷
微生物的培养与保藏 知识点训练卷
时间:60 分钟 总分:100分
班级 姓名 学号 成绩
一、单项选择题(本大题共20小题,每题3分,共60分)
1.下列是一些关于微生物的培养和应用的基本理论和基础知识,不正确的一组是( )
A.接种环、玻璃器皿(如培养皿等)都可以通过高压蒸汽灭菌锅灭菌
B.人工配制的培养基常需要调 pH,其应在分装灭菌前进行
C.超净工作台、接种室、空气可以通过紫外线消毒
D.用稀释涂布平板法统计菌落数的缺点是不能观察到微生物的形态、大小、结构
2.尿素[CO(NH2)2]含氮量高,化学性质相对稳定,是现代农业生产中一种重要的氮肥。尿素施入土壤后,会被土壤中的某些好氧微生物分解。为分离土壤中能分解尿素的细菌,操作过程如图,并成功筛选到能高效降解尿素的细菌(目的菌),培养基成分如下表所示。下列叙述错误的是( )
KH2PO4
Na2HPO4
MgSO4·7H2O
葡萄糖
尿素
琼脂
1.4g
2.1g
0.2g
10g
1g
15g
将上述物质溶解后,用蒸馏水定容到1000mL,调pH为7.2
A.目的菌生长所需的氮源和碳源分别来自培养基中的葡萄糖和尿素
B.若接种菌种的培养基pH升高,则说明该菌种能够分解尿素
C.将细菌转到固体培养基上时,应采用稀释涂布平板法接种获得单个菌落
D.为满足目的菌对氧气的需求,应对锥形瓶进行振荡或搅拌
3.下表为牛肉膏蛋白胨培养基的成分列表,据此回答:其中的牛肉膏和蛋白胨能够提供( )
成分
牛肉膏
蛋白胨
NaCl
H2O
含量
0.5g
1g
0.5g
100mL
A.碳源 B.氮源
C.维生素 D.包括 A 、B 、C 三项
4.在鉴别纤维素分解菌的培养基中,常常加入水溶性的羧甲基纤维素钠(CMC-Na)。下列叙述错误的( )
A.羧甲基纤维素钠(CMC-Na)主要为细菌提供碳源
B.刚果红染液能与培养基中的纤维素形成红色复合物
C.刚果红可以在倒平板时加入,加入前不需要将刚果红溶液灭菌
D.在鉴别培养基上出现透明圈的菌落还需要进一步发酵产纤维素酶实验
5.某高校学生利用所学的知识调查流经学校的河水中大肠杆菌的状况,测定了该河流水样中的大肠杆菌含量,并进行了大肠杆菌的分离等工作,图1和图2分别是同学甲和乙得到的结果。下列相关叙述错误的是( )
A.图1中Ⅲ区是观察细菌菌落形态的最佳区域
B.同学甲所用接种工具总共灼烧灭菌了5次
C.图1中I、Ⅱ区的细菌数量均大于Ⅲ区
D.同学乙在进行接种时可能涂布不均匀
6.图是采用平板划线法的划线后的示意图。下列有关说法错误的是( )
A.划线前,应在培养皿的皿底外侧用记号笔画出直线进行分区、标号
B.在培养基表面连续划线,除第一次划线外,每一次划线都从上一次划线的末端开始
C.接种和划线都要在酒精灯火焰旁进行
D.该实验中,接种环的灼烧次数有3次
7.将微生物接入培养基的操作过程称为接种。下列是关于接种方法的叙述,错误的是( )
A.用玻璃涂布器可进行平板稀释涂布接种 B.用接种针可进行穿刺接种
C.用接种环在平板培养基上划线接种 D.用接种针在试管里做斜面接种
8.下列有关培养基的叙述中错误的是( )
A.配制的培养基中都含有水、无机盐、碳源、氮源等最基本的物质
B.天然培养基取材便利、营养丰富、配制简便,比较适用于工业化生产
C.根据培养的微生物种类和目的的不同,可在培养基中添加维生素等物质
D.在液体培养基中,添加适量琼脂等凝固剂可制成固体培养基
9.下列有关细菌纯培养的说法,错误的是( )
A.实验操作者接种前要用70%的酒精棉球擦手消毒
B.每次划线后接种环要在酒精灯火焰上灼烧灭菌
C.培养基上的单个菌落都是一个细菌细胞繁殖而来的
D.菌液梯度稀释后用涂布平板法接种,得到的单菌落便于计数
10.将土壤稀释液涂布于选择培养基上,若要判断选择培养基是否起到了选择作用,还需要设置的对照是( )
A.未接种的选择培养基
B.未接种的牛肉膏蛋白胨培养基
C.相同条件下接种了的牛肉膏蛋白胨培养基
D.相同条件下接种了的选择培养基
11.在鉴别纤维素分解菌的培养基中,常常加入水溶性的羧甲基纤维素钠(CMC-Na)。下列叙述错误的是( )
A.鉴别培养基中的酵母膏和土豆汁含有微生物所需要的特殊营养物质
B.刚果红染液能与培养基中的纤维素形成红色复合物
C.刚果红可在倒平板时加入,加入前需要将刚果红溶液灭菌
D.羧甲基纤维素钠(CMC-Na)主要为细菌提供氮源
12.塑料制品具有质轻、防水、耐用、生产技术成熟、成本低的优点,应用广泛,但很难在自然界中被自然分解掉,会对生态平衡产生巨大的破坏。某同学拟分离得到能够分解塑料的细菌,下述做法错误的是( )
A.从垃圾场含有塑料的土壤中更容易筛选出目标细菌
B.在配制选择培养基的时候,需要以塑料作为唯一碳源,其他成分不变
C.培养基倒平板后需高压蒸汽灭菌,培养时需将培养皿倒置放于恒温培养箱内
D.对长出的菌落进行紫外线照射一段时间后,可能会得到分解塑料效率更高的细菌
13.如图表示培养和纯化X 细菌的部分操作步骤,下列相关叙述正确的是( )
A.步骤①倒平板操作时,倒好后应立即将其倒过来放置
B.步骤②接种环在火焰上灼烧后迅速沾取菌液进行平板划线,以免空气中的杂菌污染
C.步骤③多个方向划线,使接种物逐渐稀释,培养后出现单个菌落
D.利用步骤④所采用的方法培养和纯化X细菌的同时可对其进行计数
14.小明做“微生物的分离与培养”实验时得出如下结论,相关叙述正确的是( )
A.高压蒸汽灭菌加热结束时,立即开启锅盖,拿出培养基和工具待用
B.倒平板时,应将打开的皿盖放到一边,以免培养基溅到皿盖上
C.为了防止污染,接种环经火焰灭菌后应趁热快速挑取菌落
D.用记号笔标记培养皿中菌落时,应标记在皿底上
15.关于菌种保藏叙述不正确的是( )
A.对于频繁使用的菌种,可以采用临时保藏的方法
B.长期保存的菌种,可以采用甘油管藏的方法
C.临时保藏的菌种容易被污染或产生变异,因此保存时间不长
D.临时保藏的菌种,可以将菌落长成后的试管放入-4℃的冰箱中保藏
16.防止杂菌入侵,获得纯净的培养物,是研究和应用微生物的前提。下列叙述错误的是( )
A.实验室里可以用紫外线或化学药物进行消毒
B.在实验室中,切记不可吃东西、喝水,离开实验室时一定要洗手,以防被微生物感染
C.接种环、接种针等金属用具,直接在酒精灯火焰的不充分燃烧层灼烧
D.使用后的培养基丢弃前一定要进行灭菌处理,以免污染环境
17.生菜是我国消费最多的一类即食蔬菜,极易受到食源性金黄色葡萄球菌污染,现对生菜中金黄色葡萄球菌进行取样、分离、培养和计数,结果如下图。相关说法正确的是( )
A.使用从生菜表面取样后的无菌棉拭子在固体培养基上涂布
B.15℃可有效抑制金黄色葡萄球菌的繁殖,建议生菜在该温度及以下贮藏运输
C.在培养基中加入刚果红,以便于快速筛选出金黄色葡萄球菌进行培养
D.生活中可用高压蒸汽对生菜灭菌以避免金黄色葡萄球菌感染
18.如表为某培养基的配方,下列叙述错误的是( )
成分
尿素
葡萄糖
K2HPO4
Na2HPO4
MgSO4·7H2O
琼脂
H2O
含量
1.0g
10.0g
1.4g
2.1g
0.2g
15.0g
定容至1000mL
A.从物理性质看,该培养基属于固体培养基
B.该培养基含有水、碳源、氮源和无机盐等营养物质
C.培养基中的营养物质浓度越高,对微生物生长越有利
D.配制好培养基后,应使用湿热灭菌法进行灭菌
19.下图为血细胞计数板正面示意图,相关叙述正确的是( )
A.酵母菌和某些蓝细菌可用血细胞计数板计数
B.该血细胞计数板有两个计数室和25个小方格
C.该计数板厚0.1mm,小方格体积为1/4000mm3
D.应先滴加样液再放盖玻片,防止计数结果偏小
20.某海洋科考队从深海沉积物样品中提取出的新型微生物菌株X可产生物质P,该物质可广泛用于化工生产。下表表示不同碳源对菌株X生长和P产量的影响,由表可知,菌株X生长的最适碳源和用菌株X生产P的最适碳源分别是( )
碳源
细胞干重/(g·L-1)
P产量/(g·L-1)
葡萄糖
3.12
0.15
淀粉
0.01
0
制糖废液
2.30
0.18
A.葡萄糖、葡萄糖 B.制糖废液、制糖废液
C.葡萄糖、制糖废液 D.制糖废液、葡萄糖
二、填空题(本大题共5小题,每题2分,共10分)
21.C代表某一稀释度下平板上生长菌落数的平均值;V代表涂布平板时吸取的稀释液体积数值(mL);M代表稀释倍数;则每g样品中的细菌数= 。
22.方法:对样品进行 ,然后将 涂布到制备好的 培养基上。
23.根据培养基的物理特征可以把培养基分成 培养基和 培养基等。
24.“细菌喜荤”是说细菌培养基中要含有较高的 ,因此常用 和 等来配制;
25.培养基的 影响微生物的生长。不同的微生物 需求不同,只有满足目标微生物的代谢需求,才能使其快速生长。
三、判断题(本大题共5小题,每题2分,共10分)
26.培养基的分装、微生物的接种均须在超净工作台内的酒精灯的火焰旁进行( )
27.可利用培养基积累微生物的代谢产物( )
28.培养微生物的培养基都含有水、无机盐、碳源和氮源( )
29.LB固体培养基可用于酵母菌的分离、纯化和计数( )
30.当牛肉膏蛋白胨培养基上的菌落数目明显小于选择培养基上的菌落数目时,说明选择培养基已筛选出一些细菌菌落( )
四、简答题(本大题共2小题,每小题5分,共10分)
31.按物理状态划分,培养基可分为哪几类?各适用于什么场景?
32.测定微生物数量的常用方法有哪些?请简述平板计数法的原理。
五、综合题(本大题10分)
33.某工厂生产青霉素时,发现发酵罐中青霉素产量下降,疑似菌种衰退。请分析可能的衰退原因,并提出复壮和防止衰退的措施。
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编写说明:福建省中等职业学校学业水平考试《生物基础考试复习卷》,是依据福建省教育厅颁发的《生物基础》科目考试说明编写,本套试卷共68份,由三个部分组成。第一部分是根据考纲编写的知识点训练卷,共52份;第二部分是专题训练卷,共11份;第三部分是专业综合训练卷,参考历年来《生物基础》科目考试真题试卷,编写的5份专业综合训练卷。
本试卷是《生物基础考试复习卷》第42卷,是知识点训练卷,按(九)微生物的培养与保藏要求编写。其内容包括:
1.熟悉微生物细胞的化学组成和微生物生长所需的六大类营养要素,了解细菌的营养类型。
2.掌握培养基的概念、类型和配制流程,会按配方和步骤,配制细菌培养基,如牛肉膏蛋白胨培养基、LB培养基等,并制备成斜面和平板。
3.掌握微生物接种方法和分离纯化方法,会使用接种环将微生物接入斜面和使用涂布棒将菌液涂布平板,并置于培养箱内培养,不污染杂菌。
4.熟悉微生物生长的影响因素和培养条件,细菌的生长曲线特点,细菌、放线菌、酵母和霉菌的菌落特征。
5.熟悉微生物数量的测定方法。
6.掌握菌种选育和保藏的概念,了解菌种选育和保藏的方法,微生物衰退的原因及防止其衰退的措施。
福建省 中等职业学校学业水平考试《生物基础考试复习卷》 第42卷
微生物的培养与保藏 知识点训练卷
时间:60 分钟 总分:100分
班级 姓名 学号 成绩
一、单项选择题(本大题共20小题,每题3分,共60分)
1.下列是一些关于微生物的培养和应用的基本理论和基础知识,不正确的一组是( )
A.接种环、玻璃器皿(如培养皿等)都可以通过高压蒸汽灭菌锅灭菌
B.人工配制的培养基常需要调 pH,其应在分装灭菌前进行
C.超净工作台、接种室、空气可以通过紫外线消毒
D.用稀释涂布平板法统计菌落数的缺点是不能观察到微生物的形态、大小、结构
【答案】A
2.尿素[CO(NH2)2]含氮量高,化学性质相对稳定,是现代农业生产中一种重要的氮肥。尿素施入土壤后,会被土壤中的某些好氧微生物分解。为分离土壤中能分解尿素的细菌,操作过程如图,并成功筛选到能高效降解尿素的细菌(目的菌),培养基成分如下表所示。下列叙述错误的是( )
KH2PO4
Na2HPO4
MgSO4·7H2O
葡萄糖
尿素
琼脂
1.4g
2.1g
0.2g
10g
1g
15g
将上述物质溶解后,用蒸馏水定容到1000mL,调pH为7.2
A.目的菌生长所需的氮源和碳源分别来自培养基中的葡萄糖和尿素
B.若接种菌种的培养基pH升高,则说明该菌种能够分解尿素
C.将细菌转到固体培养基上时,应采用稀释涂布平板法接种获得单个菌落
D.为满足目的菌对氧气的需求,应对锥形瓶进行振荡或搅拌
【答案】A
3.下表为牛肉膏蛋白胨培养基的成分列表,据此回答:其中的牛肉膏和蛋白胨能够提供( )
成分
牛肉膏
蛋白胨
NaCl
H2O
含量
0.5g
1g
0.5g
100mL
A.碳源 B.氮源
C.维生素 D.包括 A 、B 、C 三项
【答案】D
4.在鉴别纤维素分解菌的培养基中,常常加入水溶性的羧甲基纤维素钠(CMC-Na)。下列叙述错误的( )
A.羧甲基纤维素钠(CMC-Na)主要为细菌提供碳源
B.刚果红染液能与培养基中的纤维素形成红色复合物
C.刚果红可以在倒平板时加入,加入前不需要将刚果红溶液灭菌
D.在鉴别培养基上出现透明圈的菌落还需要进一步发酵产纤维素酶实验
【答案】C
5.某高校学生利用所学的知识调查流经学校的河水中大肠杆菌的状况,测定了该河流水样中的大肠杆菌含量,并进行了大肠杆菌的分离等工作,图1和图2分别是同学甲和乙得到的结果。下列相关叙述错误的是( )
A.图1中Ⅲ区是观察细菌菌落形态的最佳区域
B.同学甲所用接种工具总共灼烧灭菌了5次
C.图1中I、Ⅱ区的细菌数量均大于Ⅲ区
D.同学乙在进行接种时可能涂布不均匀
【答案】B
6.图是采用平板划线法的划线后的示意图。下列有关说法错误的是( )
A.划线前,应在培养皿的皿底外侧用记号笔画出直线进行分区、标号
B.在培养基表面连续划线,除第一次划线外,每一次划线都从上一次划线的末端开始
C.接种和划线都要在酒精灯火焰旁进行
D.该实验中,接种环的灼烧次数有3次
【答案】D
7.将微生物接入培养基的操作过程称为接种。下列是关于接种方法的叙述,错误的是( )
A.用玻璃涂布器可进行平板稀释涂布接种 B.用接种针可进行穿刺接种
C.用接种环在平板培养基上划线接种 D.用接种针在试管里做斜面接种
【答案】D
8.下列有关培养基的叙述中错误的是( )
A.配制的培养基中都含有水、无机盐、碳源、氮源等最基本的物质
B.天然培养基取材便利、营养丰富、配制简便,比较适用于工业化生产
C.根据培养的微生物种类和目的的不同,可在培养基中添加维生素等物质
D.在液体培养基中,添加适量琼脂等凝固剂可制成固体培养基
【答案】A
9.下列有关细菌纯培养的说法,错误的是( )
A.实验操作者接种前要用70%的酒精棉球擦手消毒
B.每次划线后接种环要在酒精灯火焰上灼烧灭菌
C.培养基上的单个菌落都是一个细菌细胞繁殖而来的
D.菌液梯度稀释后用涂布平板法接种,得到的单菌落便于计数
【答案】C
10.将土壤稀释液涂布于选择培养基上,若要判断选择培养基是否起到了选择作用,还需要设置的对照是( )
A.未接种的选择培养基
B.未接种的牛肉膏蛋白胨培养基
C.相同条件下接种了的牛肉膏蛋白胨培养基
D.相同条件下接种了的选择培养基
【答案】C
11.在鉴别纤维素分解菌的培养基中,常常加入水溶性的羧甲基纤维素钠(CMC-Na)。下列叙述错误的是( )
A.鉴别培养基中的酵母膏和土豆汁含有微生物所需要的特殊营养物质
B.刚果红染液能与培养基中的纤维素形成红色复合物
C.刚果红可在倒平板时加入,加入前需要将刚果红溶液灭菌
D.羧甲基纤维素钠(CMC-Na)主要为细菌提供氮源
【答案】D
12.塑料制品具有质轻、防水、耐用、生产技术成熟、成本低的优点,应用广泛,但很难在自然界中被自然分解掉,会对生态平衡产生巨大的破坏。某同学拟分离得到能够分解塑料的细菌,下述做法错误的是( )
A.从垃圾场含有塑料的土壤中更容易筛选出目标细菌
B.在配制选择培养基的时候,需要以塑料作为唯一碳源,其他成分不变
C.培养基倒平板后需高压蒸汽灭菌,培养时需将培养皿倒置放于恒温培养箱内
D.对长出的菌落进行紫外线照射一段时间后,可能会得到分解塑料效率更高的细菌
【答案】C
13.如图表示培养和纯化X 细菌的部分操作步骤,下列相关叙述正确的是( )
A.步骤①倒平板操作时,倒好后应立即将其倒过来放置
B.步骤②接种环在火焰上灼烧后迅速沾取菌液进行平板划线,以免空气中的杂菌污染
C.步骤③多个方向划线,使接种物逐渐稀释,培养后出现单个菌落
D.利用步骤④所采用的方法培养和纯化X细菌的同时可对其进行计数
【答案】C
14.小明做“微生物的分离与培养”实验时得出如下结论,相关叙述正确的是( )
A.高压蒸汽灭菌加热结束时,立即开启锅盖,拿出培养基和工具待用
B.倒平板时,应将打开的皿盖放到一边,以免培养基溅到皿盖上
C.为了防止污染,接种环经火焰灭菌后应趁热快速挑取菌落
D.用记号笔标记培养皿中菌落时,应标记在皿底上
【答案】D
15.关于菌种保藏叙述不正确的是( )
A.对于频繁使用的菌种,可以采用临时保藏的方法
B.长期保存的菌种,可以采用甘油管藏的方法
C.临时保藏的菌种容易被污染或产生变异,因此保存时间不长
D.临时保藏的菌种,可以将菌落长成后的试管放入-4℃的冰箱中保藏
【答案】D
16.防止杂菌入侵,获得纯净的培养物,是研究和应用微生物的前提。下列叙述错误的是( )
A.实验室里可以用紫外线或化学药物进行消毒
B.在实验室中,切记不可吃东西、喝水,离开实验室时一定要洗手,以防被微生物感染
C.接种环、接种针等金属用具,直接在酒精灯火焰的不充分燃烧层灼烧
D.使用后的培养基丢弃前一定要进行灭菌处理,以免污染环境
【答案】C
17.生菜是我国消费最多的一类即食蔬菜,极易受到食源性金黄色葡萄球菌污染,现对生菜中金黄色葡萄球菌进行取样、分离、培养和计数,结果如下图。相关说法正确的是( )
A.使用从生菜表面取样后的无菌棉拭子在固体培养基上涂布
B.15℃可有效抑制金黄色葡萄球菌的繁殖,建议生菜在该温度及以下贮藏运输
C.在培养基中加入刚果红,以便于快速筛选出金黄色葡萄球菌进行培养
D.生活中可用高压蒸汽对生菜灭菌以避免金黄色葡萄球菌感染
【答案】B
18.如表为某培养基的配方,下列叙述错误的是( )
成分
尿素
葡萄糖
K2HPO4
Na2HPO4
MgSO4·7H2O
琼脂
H2O
含量
1.0g
10.0g
1.4g
2.1g
0.2g
15.0g
定容至1000mL
A.从物理性质看,该培养基属于固体培养基
B.该培养基含有水、碳源、氮源和无机盐等营养物质
C.培养基中的营养物质浓度越高,对微生物生长越有利
D.配制好培养基后,应使用湿热灭菌法进行灭菌
【答案】C
19.下图为血细胞计数板正面示意图,相关叙述正确的是( )
A.酵母菌和某些蓝细菌可用血细胞计数板计数
B.该血细胞计数板有两个计数室和25个小方格
C.该计数板厚0.1mm,小方格体积为1/4000mm3
D.应先滴加样液再放盖玻片,防止计数结果偏小
【答案】A
20.某海洋科考队从深海沉积物样品中提取出的新型微生物菌株X可产生物质P,该物质可广泛用于化工生产。下表表示不同碳源对菌株X生长和P产量的影响,由表可知,菌株X生长的最适碳源和用菌株X生产P的最适碳源分别是( )
碳源
细胞干重/(g·L-1)
P产量/(g·L-1)
葡萄糖
3.12
0.15
淀粉
0.01
0
制糖废液
2.30
0.18
A.葡萄糖、葡萄糖 B.制糖废液、制糖废液
C.葡萄糖、制糖废液 D.制糖废液、葡萄糖
【答案】C
二、填空题(本大题共5小题,每题2分,共10分)
21.C代表某一稀释度下平板上生长菌落数的平均值;V代表涂布平板时吸取的稀释液体积数值(mL);M代表稀释倍数;则每g样品中的细菌数= 。
【答案】(C÷V)×M
22.方法:对样品进行 ,然后将 涂布到制备好的 培养基上。
【答案】 充分稀释 菌液 选择
23.根据培养基的物理特征可以把培养基分成 培养基和 培养基等。
【答案】 液体 固体
24.“细菌喜荤”是说细菌培养基中要含有较高的 ,因此常用 和 等来配制;
【答案】 有机氮 蛋白胨 酵母提取物
25.培养基的 影响微生物的生长。不同的微生物 需求不同,只有满足目标微生物的代谢需求,才能使其快速生长。
【答案】 理化特性 代谢
三、判断题(本大题共5小题,每题2分,共10分)
26.培养基的分装、微生物的接种均须在超净工作台内的酒精灯的火焰旁进行( )
【答案】错误
27.可利用培养基积累微生物的代谢产物( )
【答案】正确
28.培养微生物的培养基都含有水、无机盐、碳源和氮源( )
【答案】错误
29.LB固体培养基可用于酵母菌的分离、纯化和计数( )
【答案】错误
30.当牛肉膏蛋白胨培养基上的菌落数目明显小于选择培养基上的菌落数目时,说明选择培养基已筛选出一些细菌菌落( )
【答案】错误
四、简答题(本大题共2小题,每小题5分,共10分)
31.按物理状态划分,培养基可分为哪几类?各适用于什么场景?
【答案】液体培养基:无凝固剂,呈液态,适用于大规模培养(如工业发酵)、菌种扩繁。
固体培养基:添加凝固剂(如琼脂 1.5%~2%),呈固态,适用于菌种分离、鉴定、保藏(如平板、斜面)。
半固体培养基:凝固剂含量低(琼脂 0.2%~0.5%),呈半固态,适用于观察细菌运动、测定噬菌体效价。
32.测定微生物数量的常用方法有哪些?请简述平板计数法的原理。
【答案】常用方法:平板计数法(活菌计数)、比浊法(总菌数估算)、血球计数板计数法(总菌数,包括活菌和死菌)、滤膜计数法等。
平板计数法原理:将菌液稀释后涂布平板,培养后计数菌落数,根据稀释倍数计算每毫升菌液中的活菌数( colony-forming unit, CFU)。
五、综合题(本大题10分)
33.某工厂生产青霉素时,发现发酵罐中青霉素产量下降,疑似菌种衰退。请分析可能的衰退原因,并提出复壮和防止衰退的措施。
【答案】可能的衰退原因:① 连续传代导致高产基因自发突变(回复为低产);② 发酵条件不适(如碳氮比失衡、温度过高),低产突变株优势生长;③ 菌种保藏不当(如斜面传代频繁)。
复壮措施:① 单菌落筛选:将发酵液稀释后涂布平板,挑取青霉素产量高的单菌落(通过抑菌圈大小鉴定);② 诱变育种:对衰退株进行紫外线或化学诱变,筛选高产突变株。
防止措施:① 采用冻干保藏或液氮保藏法长期保存原始菌种,减少传代;② 发酵时严格控制条件(如优化培养基配方、稳定温度);③ 定期对生产菌种进行筛选,淘汰低产株。
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