内容正文:
第2节 微生物的培养技术及应用
一 微生物的基本培养技术
必备知识基础练
进阶训练第一层
知识点1
培养基的配制
1.对微生物所需营养物质的描述,正确的是( )
A.氮源只作为合成蛋白质的原料
B.碳源只作为能源物质
C.无机盐可有可无
D.水是重要的营养要素之一
2.下面是牛肉膏蛋白胨培养基的成分表,其中的牛肉膏和蛋白胨能够提供( )
成分
牛肉膏
蛋白胨
NaCl
H2O
含量
0.5g
1g
0.5g
100mL
A.碳源 B.氮源
C.维生素 D.包括A、B、C三项
3.对微生物所需营养物质的描述,正确的是( )
A.蛋白质通常是作为碳源
B.葡萄糖可作为氮源
C.维生素可通过组织提取液提供
D.必须添加琼脂后营养物质才能被利用
4.关于培养基的配制,下列叙述错误的是( )
A.在配制培养乳酸菌的培养基时,需加入维生素
B.微生物的适应性强,配制培养基时可以不考虑pH
C.在液体培养基中加入琼脂可以制成固体培养基
D.配制培养基时要注意各种养分的浓度和比例
5.凡是微生物生长、繁殖等各种生理活动所需的物质统称为微生物营养物质。下列叙述正确的是( )
A.所有的碳源都能提供能量
B.无机物不能作为碳源或氮源
C.同一物质可能既作为碳源又作为氮源
D.任何培养基都必须含有水、无机盐、碳源和氮源
6.人们按照微生物对营养物质的不同需求,配制出供其生长繁殖的营养物质——培养基,下列有关培养基的叙述,错误的是( )
A.液体培养基要制成固体培养基,可在培养基中加入琼脂
B.细菌在固体培养基上生长,可以形成肉眼可见的菌落
C.每种培养基都含有水、碳源、氮源、无机盐等营养物质
D.培养基还需满足微生物对pH、特殊营养物质及O2的需求
知识点2
无菌技术
7.无菌技术是发酵工程的重要技术。使用的接种针、接种环,最好采用的灭菌方法是( )
A.紫外线等射线灭菌法
B.干热空气灭菌法
C.湿热灭菌法
D.火焰灼烧灭菌法
8.高压蒸汽灭菌锅是一种常用的灭菌设备,其灭菌原理是利用高温高压条件导致( )
A.菌体和芽孢都存活
B.菌体死亡但芽孢存活
C.菌体和芽孢都死亡
D.菌体存活但芽孢死亡
9.微生物培养过程中,要十分重视无菌操作,现代生物学实验中的许多方面也要进行无菌操作,防止杂菌污染。请分析下列操作中错误的有几项( )
①煮沸消毒可以杀死微生物的营养细胞和一部分芽孢 ②接种操作要在酒精灯火焰附近进行 ③家庭制作葡萄酒时要将容器和葡萄进行灭菌 ④培养基要进行湿热灭菌 ⑤加入培养基中的指示剂或染色剂不需要灭菌
A.一项 B.二项
C.三项 D.四项
知识点3
微生物的纯培养
10.将微生物接入培养基的操作过程称为接种。下列是关于接种方法的叙述,错误的是( )
A.用涂布器可进行平板稀释涂布接种
B.用接种针可进行穿刺接种
C.用接种环在平板培养基上划线接种
D.用接种针在试管里做斜面接种
11.下列有关平板划线法操作的叙述,错误的是( )
A.将接种环放在酒精灯火焰上灼烧
B.将已冷却的接种环伸入菌液中蘸取一环菌液
C.蘸取菌液和划线均要在酒精灯火焰旁进行
D.接种环划线时要将最后一次的划线与第一次的划线相连
12.下图是采用平板划线法划线后的示意图。下列有关说法错误的是( )
A.划线前,应在培养皿的皿底外侧用记号笔画出直线进行分区、标号
B.在培养基表面连续划线,除第一次划线外,每一次划线都从上一次划线的末端开始
C.接种和划线都要在酒精灯火焰旁进行
D.该实验中,接种环的灼烧次数有3次
13.酵母菌品质的好坏是影响葡萄酒产量和质量的重要因素。某酒业集团针对山葡萄酸高、糖低、浸出物高等特点,分离出了适合山葡萄发酵的最佳酵母菌种——长白山1号酵母。下列有关酵母菌发酵与培养的说法错误的是( )
A.长白山1号酵母相较于其他酵母品种更适应酸性环境
B.为增加葡萄酒的甜度与酒精度,可适当补加一定量糖源
C.山葡萄汁中的糖分为酵母菌生长繁殖提供了碳源和氮源
D.实验室培养酵母菌时可加入适量抗生素以防杂菌污染
14.如图为实验室培养和纯化酵母菌过程中的部分操作步骤。下列叙述错误的是( )
A.①倒平板时,培养皿倒入培养基后要立即倒放于超净实验台上
B.②步骤接种环经灼烧灭菌冷却后蘸取菌液
C.③步骤应多个方向划线,使接种物逐渐稀释,培养后出现单个菌落
D.接种结束待菌液被培养基吸收后,将④倒置培养,皿底上标注菌种及接种日期等信息
15.(不定项)酵母菌的纯化培养过程中,完成稀释涂布平板后,将接种后的平板和一个未接种的平板倒置,放入28℃左右的恒温箱中培养。下列叙述正确的是( )
A.用未接种的平板共同培养,其目的是检验培养过程中是否有杂菌污染
B.完成稀释涂布平板接种后,需立即将平板倒置,以免表面干燥,影响菌的生长
C.倒置培养有利于减少水分蒸发,减少杂菌污染,方便观察计数
D.上述培养结束后,若出现了不同形态、大小的菌落,可能的原因是接种环未灼烧
能力素养综合练
进阶训练第二层
1.培养基需要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及O2的需求。下列叙述错误的是( )
A.培养霉菌时,培养液调至酸性
B.培养细菌时,培养基调至强碱性
C.培养厌氧微生物时,提供无氧的条件
D.培养乳酸菌时,培养基中添加维生素
2.下列有关微生物培养基及其配制的叙述,正确的是( )
A.对培养基常用的灭菌方法有干热灭菌、灼烧灭菌和煮沸灭菌等
B.若需要调节pH,则应该在对培养基进行湿热灭菌后进行调节
C.家庭制作腐乳时,豆腐块就是毛霉、曲霉、酵母菌等的培养基
D.实验用过的带菌培养基必须经消毒后才能倒掉
3.下列与微生物实验室培养有关的描述,正确的是( )
A.培养霉菌和细菌时需将pH调至中性或弱碱性
B.平板划线法可以对微生物进行分离和纯化
C.干热灭菌应在160~170℃的热空气中维持1~2h,培养基可采用这种方法进行灭菌
D.接种环、接种针、涂布器等用具,可以在酒精灯火焰的内焰部分灼烧灭菌
4.消毒和灭菌是微生物培养中常用的操作方法。下列说法正确的是( )
A.微生物接种技术的方法不同,但核心都是要防止杂菌污染,保证培养物的纯度
B.在100℃条件下煮沸5~6min属于灭菌方法,可杀死微生物的营养细胞和一部分芽孢
C.无菌技术中,若处理对象为液体,则只能消毒,不能灭菌
D.高压蒸汽灭菌锅只有当压力表的压力降到一个标准大气压时,才能打开盖子
5.如图是微生物纯培养中平板划线分散单个微生物示意图。下列有关叙述正确的是( )
A.划线前培养基都必须使用湿热灭菌法灭菌
B.划线前后都要将接种环放在酒精灯的火焰旁灭菌
C.划线区都有菌落,但一般在5区域得到纯培养物
D.划线时要注意将第5次的末端与第1次的划线相连
6.微生物培养时常用到无菌技术避免杂菌污染,相关叙述正确的是( )
A.无菌技术包括对操作者的衣着和手进行灭菌
B.倒平板时应该把培养皿盖完全打开,以免培养基溅到培养皿盖上
C.配制好的培养基应放入干热灭菌箱中进行灭菌
D.接种前后接种环都必须灼烧灭菌
7.关于实验室培养和纯化酵母菌过程中的部分操作,下列说法正确的是( )
A.培养酵母菌的试剂和器具都要进行湿热灭菌
B.配制培养基、倒平板、接种均需要在酒精灯火焰旁进行
C.倒好的平板要立即使用,以免表面干燥,影响酵母菌生长
D.转换划线角度后需灼烧接种环再进行划线
8. (不定项)下列是关于“酵母菌的纯培养”实验操作的叙述,正确的是( )
A.将接种环的环端和可能伸入试管的部分在火焰上来回灼烧多次,以达到彻底灭菌的目的
B.灼烧的接种环在酒精灯火焰旁冷却后,伸入菌种管轻挑少许菌体
C.从菌种管抽出接种环时,不能让其带菌部位触及管壁
D.接种环在斜面接种后,需多次灼烧以保证无菌,冷却后放回原处
9.微生物的实验室培养,既需要为微生物提供适宜的生存条件,还要防止其他微生物的混入。回答下列有关问题:
(1)配制培养基是培养微生物的第一步。各种培养基的具体配方不同,但一般都含有水、无机盐、________、N源;而培养基的种类也各不相同,如果按物理性质分,包括固体培养基和________。
(2)实验室常使用牛肉膏蛋白胨培养基,其在加入琼脂后,呈现的物理状态为________,若用该培养基来培养细菌,还需要将培养基的pH调至________________。
(3)培养微生物时应做好消毒和灭菌工作。倒平板的整个过程都需要在酒精灯火焰附近操作,以防杂菌污染,这一操作属于________(填“消毒”或“灭菌”)手段。
(4)平板划线时要连续划线操作,其目的是将菌种不断稀释,直至成为由一个细胞繁殖而来的群体,称为________。划线时应注意,第一区的划线与最后一区的划线______(填“应该”或“不应”)相连。
10.下表是某微生物培养基的配方。请分析回答下列问题:
编号
①
②
③
④
⑤
⑥
成分
(NH4)2SO4
KH2PO4
FeSO4
Na2HPO4
CaCl2
H2O
含量
0.4g
4.0g
0.5g
1.2g
0.5g
100mL
(1)为防止杂菌污染,常用________________法对培养基灭菌。
(2)培养基的配方是根据微生物的营养需求而设定的,从培养基的营养成分看,此培养基可用来培养的微生物同化作用类型是________(填“自养型”或“异养型”)。利用该培养基培养微生物时,微生物所需要的碳源来自________(填“培养基”或“空气”)。
(3)微生物从培养基中以________(填“分子”“原子”或“离子”)形式吸收物质①。物质①吸收后可用来合成______________等生物大分子。
(4)若要观察培养基表面菌落的特点,培养基中还应添加的成分是________。鉴定菌种时,可根据菌落的__________________________(至少答两点)等方面的特征进行鉴定。
(5)培养基中添加一定量物质②和④,请分析所起的作用__________________________________________________________________(至少说出两点)。
11.琼脂是一种多糖类物质,由于很少有微生物能将其降解而成为配制固体培养基时常用的凝固剂之一。某实验室在处理一批已进行过微生物培养的废弃固体培养基时发现,几乎全部培养基上的微生物都已死亡,但在其中一个培养基上存在一个正常生长的菌落。对此,研究人员做出了以下假说:①此培养基内的营养未被消耗殆尽;②形成此菌落的为自养型微生物;③形成此菌落的微生物能利用琼脂。
(1)从研究人员所作的假说可以推测①所说的“营养”指的最可能是________________(填“碳源”“氮源”或“无机盐”)。
(2)制备牛肉膏蛋白胨培养基的步骤包括:________、灭菌、倒平板。倒平板所用的培养皿和培养基所用的灭菌方法依次是________________和________________。
(3)为了检验上述假说①是否正确,研究人员分别使用两种培养基对上述微生物进行培养,其中一种为牛肉膏蛋白胨培养基a,则另一培养基b中不能加入下列的________。
A.牛肉膏 B.蛋白胨
C.氯化钠 D.琼脂
(4)若上述a、b培养足够长时间,菌落生长情况为____________________________________时,则排除了假说②③,证明假说①正确。
(5)若上述实验否定了假说①,为进一步检验假说②和③,研究人员想要配制一种新的培养基c,并通过b与c上是否出现菌落作为观察指标,则与b相比,c的成分需要做出的变化是________________________________________________________________________。
一 微生物的基本培养技术
必备知识基础练
1.答案:D
解析:氮源除了用于合成蛋白质以外,还要参与合成核酸、ATP等物质,A错误;碳源主要用于构成微生物体细胞的物质和一些代谢物,B错误;无机盐对微生物的生长是必需的,C错误;水是微生物生命活动必需的一种重要物质,D正确。
2.答案:D
解析:牛肉膏和蛋白胨含有蛋白质、脂质等有机物,还含有维生素,D正确。
3.答案:C
解析:蛋白质通常是作为氮源,用于合成蛋白质和参与合成核酸、ATP等物质,A错误;葡萄糖作为碳源,可以给微生物的生长提供能源,B错误;维生素可通过组织提取液提供,C正确;培养基有固体培养基和液体培养基,其中液体培养基不需要添加琼脂,D错误。
4.答案:B
解析:乳酸菌自身不能合成维生素,而维生素又是维持其生命活动不可缺少的,故需在培养基中添加,A正确;pH影响微生物的生长和代谢,配制培养基时pH一定要适宜,B错误;琼脂在44℃以下凝固,在常规培养条件下呈固态,在液体培养基中加入琼脂可以制成固体培养基,C正确;微生物也是由C、H、O、N、P、S等元素组成,这些元素最终来自外界环境中的各种无机化合物和有机化合物,可归纳为碳源、氮源、水、无机盐等,但配制时要注意各种养分的浓度和比例,D正确。
5.答案:C
解析:无机碳源如CO2不能提供能量,A错误;无机物能作为碳源或氮源,如CO2或N2,B错误;同一物质可能既作为碳源又作为氮源,如牛肉膏、蛋白胨,C正确;自养型微生物培养基中可不加入碳源,固氮微生物培养基中可不加入氮源,D错误。
6.答案:C
解析:琼脂是凝固剂,所以液体培养基要制成固体培养基,可在培养基中加入琼脂,A正确;细菌在固体培养基上生长,可以形成肉眼可见的菌落,B正确;不同微生物生长习性不同,所以不是每种微生物的培养基都含有水、碳源、氮源、无机盐等营养物质,例如培养硝化细菌的培养基不需要加入碳源,C错误;培养基还需满足微生物对pH、特殊营养物质及O2的需求,D正确。
7.答案:D
解析:紫外线等射线灭菌法适用于接种室、接种箱或超净工作台,A项不符合题意;干热空气灭菌法适用于耐高温的和需要保持干燥的物品,如玻璃器皿(吸管、培养皿等)、金属用具等,B项不符合题意;湿热灭菌法是一种利用沸水、流通蒸汽或高压蒸汽灭菌的方法,一般培养基的灭菌常用该方法,C项不符合题意;灼烧灭菌法是指将微生物的接种工具,如涂布器、接种环、接种针或其他金属用具,直接在酒精灯火焰的充分燃烧层灼烧,可以迅速彻底的灭菌,D项符合题意。
8.答案:C
解析:湿热灭菌可以杀死包括芽孢在内的所有微生物,因此利用高温高压条件导致菌体和芽孢都死亡。
9.答案:B
解析:煮沸消毒法,即利用煮沸100℃经5~6min,可杀死微生物的营养细胞和一部分芽孢,①正确;酒精灯火焰附近存在一个无菌区,为了无菌操作,接种操作要在酒精灯火焰附近进行,②正确;家庭制作葡萄酒时所利用的微生物是葡萄表面的野生型酵母菌,故不能对葡萄进行灭菌,③错误;培养基灭菌常用湿热灭菌法,④正确;需进行灭菌的有器皿、培养基、添加剂(指示剂或染色剂)等,⑤错误。综上所述,B正确。
10.答案:D
解析:涂布器是常用的接种工具,平板稀释涂布接种采用的是玻璃涂布器,A正确;穿刺接种采用的是接种针,B正确;平板划线法用接种环在平板培养基上划线接种,C正确;斜面接种采用的是接种环,D错误。
11.答案:D
解析:接种环应该采用灼烧灭菌法进行灭菌,即将接种环放在火焰上灼烧,A正确;将已冷却的接种环伸入菌液中蘸取一环菌液,防止高温杀死菌种,B正确;为防止杂菌污染,蘸取菌液和划线都要在酒精灯火焰旁进行,C正确;划线时,在进行第二次以及其后的划线操作时要从上一次划线的末端开始划线,且不能将最后一次的划线与第一次的划线相连,D错误。
12.答案:D
解析:实验过程中使用的平板较多,为避免混淆,使用前做好标记,应在划线前,在培养皿的皿底外侧用记号笔画出直线进行分区、标号,A正确;在培养基表面连续划线,除第一次划线外,每一次划线都从上一次划线的末端开始,目的是使微生物数目随划线次数的增加而逐渐减少,最终分散成单个细胞,B正确;微生物实验操作要防止杂菌污染,因此接种和划线都要在酒精灯火焰旁进行,C正确;每次划线前后都要对接种环进行灼烧灭菌,该实验划线3次,因此灼烧次数为4次,D错误。
13.答案:C
解析:根据题意可知,长白山1号酵母是针对山葡萄酸高、糖低、浸出物高等特点而分离出的酵母菌种,故其耐酸性更好,A正确;山葡萄中糖低,可适当补加一定量糖源来增加葡萄酒的甜度与酒精度,B正确;山葡萄汁中的糖分只能为酵母菌生长繁殖提供碳源,C错误;抗生素可抑制细菌的生长、繁殖,真菌则不受影响,因此培养酵母菌时加入适量抗生素可防止杂菌污染,D正确。
14.答案:A
解析:①将锥形瓶中的培养基倒入培养皿,冷却后,倒放于超净实验台上,如果不冷却就倒置会使培养基流到皿盖皿底之间,造成污染,A错误;②中接种环经灼烧灭菌后应冷却后再挑取菌液,以防高温杀死酵母菌,B正确;③步骤应多个方向划线,可使接种物逐渐稀释,得到单个酵母菌培养后出现的单个菌落,C正确;图中操作结束后,为了防止培养皿盖上的水珠滴落到培养基造成污染,需要将培养皿倒置培养,且同时在皿底标注菌种及接种日期等信息,D正确。
15.答案:AC
解析:用未接种的平板共同培养,可以检验培养过程中是否有杂菌污染,若有污染,则未接种的平板上会有微生物生长,A正确;完成稀释涂布平板接种后,需静置后再将平板倒置,否则菌液滑落,导致接种失败,B错误;将培养皿倒置培养有利于减少水分蒸发,防止冷凝水滴落冲散单菌落,减少杂菌污染,方便观察计数,C正确;上述培养结束后若出现了不同形态、大小的菌落可能的原因是酵母菌的种类不同,D错误。
能力素养综合练
1.答案:B
解析:培养霉菌时需将培养基的pH调至酸性,A正确;培养细菌时,需要将培养基调至中性或弱碱性,B错误;培养厌氧微生物时,提供无氧的条件,C正确;培养乳酸杆菌时,培养基中添加维生素,D正确。
2.答案:C
解析:对培养基常用的灭菌方法是湿热灭菌,A错误;若需要调节pH,则应该在对培养基灭菌前进行调节,B错误;家庭制作腐乳时,毛霉、曲霉、酵母菌等所需营养物质均来自豆腐块,因此豆腐块就是它们的培养基,C正确;实验用过的带菌培养基必须经灭菌后才能倒掉,D错误。
3.答案:B
解析:用于培养细菌的培养基应将pH调至中性或弱碱性,而用于培养真菌的培养基应将pH调至酸性,A错误;平板划线法可以对微生物进行分离和纯化,B正确;培养基常用湿热灭菌法进行灭菌,C错误;接种环、接种针、涂布器等用具,可以在酒精灯火焰的外焰部分灼烧灭菌,外焰的温度最高,D错误。
4.答案:A
解析:微生物接种技术包括稀释涂布平板法和平板划线法等,虽然接种方法各不相同,但核心都是要防止杂菌污染,保证获得纯净的培养物,A正确;在100℃条件下煮沸5~6min属于煮沸消毒法,可杀死微生物的营养细胞和一部分芽孢,但不属于灭菌方法,B错误;无菌技术中,若处理对象为液体,则可以采用灭菌的方法,如培养液可以利用高压蒸汽灭菌锅进行灭菌,C错误;使用高压蒸汽灭菌锅进行灭菌时,只有当压力表的压力降到零时,才能打开排气阀,拧松螺栓,打开盖子,D错误。
5.答案:C
解析:培养基灭菌一般采用湿热灭菌法,但是对于含有遇高温易分解的营养物质的培养基,不能采用湿热灭菌法进行灭菌,A错误;划线前后要将接种环放在酒精灯的火焰上灼烧灭菌,B错误;所有的划线区都有可能得到菌落,只是5区域中菌落相对较纯,易分离得到纯培养物,C正确;在平板划线时不要将最后一次的划线与第一次的划线相连,避免已分离开的菌种再次聚集,最终无法获得单菌落,D错误。
6.答案:D
解析:对实验操作的空间、操作者的衣着和手,进行清洁和消毒,A错误;为防止空气中的杂菌落入培养皿中,倒平板时不能把培养皿盖完全打开,正确的操作是将培养皿打开一条稍大于锥形瓶瓶口的缝隙,B错误;配制好的培养基应放入高压蒸汽灭菌锅内进行灭菌,C错误;接种前灼烧是为了保证接种时不会污染培养物,接种后再灼烧是防止菌种污染接种室或者超净台,D正确。
7.答案:D
解析:接种室、接种箱等常用紫外线消毒法处理,接种环等常用灼烧灭菌法处理,吸管、培养皿等常用干热灭菌法处理,培养基及多种器材用湿热灭菌法处理,A错误;倒平板、接种需要在酒精灯火焰旁进行,而配制培养基不需要在酒精灯的火焰旁进行,因为培养基最后还需要灭菌,B错误;倒好的平板需要冷却后使用,且不宜久存,以免表面干燥,影响接种后微生物的生长,C错误;平板划线转换划线角度后需灼烧接种环再进行划线,主要目的是杀死上次划线结束后,接种环上残留的菌种,D正确。
8.答案:ACD
解析:为避免杂菌污染,可将接种环的环端和可能伸入试管的部分在火焰上来回灼烧多次,A正确;将灭过菌的接种环伸入菌种管,先将环部接触培养基斜面顶端或其他无菌体的培养基部位使其冷却,再轻轻挑取少许菌体,在抽出接种环时,注意其带菌部位不要触及管壁或通过火焰,B错误,C正确;接种后灼烧是为了杀死残留的菌体,接种环在斜面接种后,需多次灼烧以保证无菌,冷却后放回原处,D正确。
9.答案:(1)碳源(或C源) 液体培养基
(2)固态 中性或弱碱性
(3)灭菌
(4)菌落 不应
解析:(1)培养基的主要成分有:水、碳源、氮源、无机盐,培养基按其物理性质可分为固体培养基和液体培养基。(2)固体培养基通常加入琼脂作为凝固剂,培养霉菌时,需要将培养基调至酸性;培养细菌时,需要将培养基调至中性或弱碱性。(3)在酒精灯火焰附近进行倒平板,这一操作属于灭菌手段。(4)菌落是指由一个细胞繁殖而来的肉眼可见的子细胞群体,平板划线法接种微生物时,第二次划线后每次划线的菌种都来自于上次划线的末端,故注意不要将最后一区的划线与第一区相连。
10.答案:(1)湿热灭菌
(2)自养型 空气
(3)离子 蛋白质、核酸
(4)琼脂(或凝固剂) 形状、大小、颜色、隆起程度
(5)为微生物提供无机盐,维持培养基的pH稳定(酸碱平衡)
解析:(1)对培养基进行灭菌的方法是湿热灭菌法。(2)培养基的成分都是无机物,因此培养的微生物的同化类型是自养型;微生物所需的碳源由空气中的CO2提供。(3)微生物吸收无机盐以离子的形式进行;含N无机物吸收后用于形成含N有机物,其中含N的生物大分子是蛋白质和核酸。(4)菌落需要在固体培养基的表面生长,因此培养基中需要添加琼脂,使液体培养基凝固成固体培养基。依据菌落特征鉴定,菌落特征有形状、大小、颜色、隆起程度等。(5)②④既是无机盐又是缓冲物质,作用是为微生物提供无机盐,维持培养基的pH稳定(酸碱平衡)。
11.答案:(1)碳源 (2)配制培养基 干热灭菌 湿热灭菌 (3)AB (4)a培养基上长出菌落,b培养基上不长菌落 (5)将琼脂换用其他凝固剂
解析:(1)从三个假说所指向的微生物来看,其差别主要在于所需碳源不同。(2)制备培养基的基本步骤是配制培养基→灭菌→倒平板。培养皿等玻璃器皿一般采用干热灭菌,而培养基往往采用湿热灭菌。(3)A、B可以为绝大多数微生物提供碳源,而从实验目的分析,b培养基应该要排除依靠此类碳源生活的微生物,故选AB。(4)a培养基上长出菌落,b培养基上不长菌落说明该微生物只能利用常规碳源生活,也就说明假说①更可靠。(5)要出现菌落,需要用固体培养基,题干提示,琼脂是配制固体培养基常用的凝固剂之一,因此将琼脂换用其它凝固剂,这样就可以通过b和c的对比来确定该微生物能否利用琼脂作为碳源。
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